JPS6010710B2 - 乾燥状デイステイラ−ズ・ソルブルス有効成分の製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はディスティラーズ・ソルプルスの有効成分を乾
燥し、粉末状とする方法に関するものである。

本発明の目的とするところは、微生物培地等としてきわ
めて有用なデイステイラーズ・ソルブルスの有効成分を
粉末状で提供することにある。

一般に、ディステイラーズ・ソルブルスは、例えばウイ
スキー等の蒸留廃液中に存在する粒子のあらい部分を除
いた水に溶解乃至は懸濁したものを総称していわれてい
るもので、これを乾燥してドライブ・ソリューブルスに
したり、濃縮又は半固体状にして、飼料などに添加され
て、広く使用されている。また、このデイステイラーズ
・ソルブルスは、ストレプトマイシンの製造以来、放線
菌その他多くの微生物の生育源もしくは生産物の生産促
進源としてその効果が知られ、汎用されるに到っている
。

しかし、このように有用なディスティラーズ・ソルブル
スにあっても、使用上大きな欠点を持っている。

例えば、微生物の生育源としてディスティラーズ・ソル
プルスをそのまま、もしくは濃縮して用いる場合、多く
の浮遊爽雑物及び脂肪が菌体乃至は生産物に入り込み、
その除去がきわめて困難であり、そのためパン酵母、酒
母等そのまま食用とされる菌体増殖にはとうてい使用さ
れず、また生産物でも精製の困難なものには使用される
ことがなかった。また、濃縮し、固型状とされたディス
ティラーズ・ソルブルスは溶解性が悪く、使用に際して
便利が悪く、一般的な培養源とはなり難かった。従来、
一般的に市販されているディスティラーズ・ソルブルス
は、ウイスキー等の蒸留廃液から大きな固形物を除去し
、濃縮された程度のもので、このようなデイステイラー
ズ・ソルブルスそのもの自身が全体的に有効成分を形成
しているものである、と信じられていたのである。

本発明者らは、このようなデイスティラーズ・ソルブル
スを改質し、広く微生物培地の有効成分、例えばイース
トエキストラクトに代替できるもの、として使用できる
ように鋭意研究したところ、意外にもディスティラーズ
。

ソルブルスは遠心処理、炉過処理によって急速に清澄化
され、この清澄液に微生物生育有効成分が多量含有され
「かつ、これら清澄液に含有される物質において低分子
範囲及び／又は高分子範囲にその有効成分が多く集中し
ていることを知ったのである。更に研究を行ったところ
、これら液状有効成分Ｊは「各種方法によって容易に乾
燥状態となり、しかも有効成分はそのまま有効であり「
きわめて取扱いに便利なディスティラーズ，ソルブル
ス有効成分を得るに至った。

本発明はディスティラーズ。

ソルブルスもしくＺはその濃縮物を遠心処理もしくは炉
過処理し、必要に応じて得られた清澄炉液を異なる分子
量成分に分画処理し、得られたこれら清澄炉液もしくは
その処理物を魔霧乾燥、凍結乾燥、沈澱処理後乾燥、送
風乾燥等の乾燥手段によって乾燥する乾燥２状ディステ
ィラーズ８ソルブルス有効成分の製造方法である。本発
明において用いられるデイステイラーズ。

ソルブルスはウイスキー蒸留廃液、またはグレインアル
コール蒸留廃液などの蒸留廃液であればし、２ずれでも
よい。そして、それらの未濃縮液「部分濃縮物「１′５
〜１′１０に濃縮した市販品などがそのまま本発明に適
用される。本発明におけるデイステイラーズ・ソルプル
スの清澄炉液を得るには遠心処理もしくは炉過処理３が
採用される。

遠心処理においては脱脂されることがないので、あらか
じめ脱脂しておくと遠心処理によって直接清澄液を得る
ことができる。

あらかじめ脱脂する場合は、これらディスティラーズ。
ソルブル３スまたはその関連物にエーテル等の有機溶媒
を加えて抽出除去される。この脱脂工程は遠心処理前に
おける必須工程ではなく、任意のもので、ここで脱脂処
理しなければ、遠心処理後に溶媒抽出、炉過等によって
脱脂すれば十分である。 ４ここにおけるデイス
テイラーズ・ソルプルスの遠心分離処理は、５００００
×夕×分以上、好ましくは７００００×夕×分以上で行
われる。一般に、 タ様論。

Ｓ；ｒｐｍ ｒ：回転軸から液部端までの距離（弧） の式で多‘ま表わされ、これに時間の因子として分をか
けたもの、即ち、夕×分によって遠心処理の程度が表わ
される。

ここで、ｒ＝９．６肌の遠心分離機を用いて「ディステ
ィラーズ・ソルブルス未濃縮液をエーテルで脱脂し「異
なる夕で遠心処理しその各清澄液を６６仇肌の波長を用
いて濁度を測定したところ、次の表１の結果を得た。

表 １ また「次に、夕を一定（１０７３３夕）とし、同じエー
テル脱脂デイステイラーズ。

ソルブルス未濃縮液を時間を変えて遠心処理し、その上
清液を６６瓜仇の波長を用いて濁度を測定したところ、
次の表２の結果を得た。表 ２ これらの結果によれば５００００×多×分以上でかなり
清澄化され、７００００×夕×分で完全に清澄化される
ことが明らかである。

得られた薄黄褐色の透明液は、遠心分離処理前に脱脂し
ていない場合には、脂肪が懸濁しているので、厚手の炉
紙、例えば東洋炉紙Ｎｏ．に（ワットマン炉紙Ｎｏ．３
２）で炉過すれば、簡単に分離することができる。

また、本発明においてディスティラーズ・ソルブルスを
炉過処理するに際しては、炉過助剤を添Ｚ加して行なわ
れる。

添加される炉過助剤としてはセラィト、タルク、紙パル
プ、オガクズ、短繊維などがあり、これが有効に使用さ
れる。ディスティラーズ・ソルプルスもしくはその濃縮
物に対し、１〜１０％の量で炉過助剤が加えらＺれ、よ
く損拝して、炉過される。

炉週は、連続式またはバッチ式のいずれでも良いが、加
圧下又は減圧下における炉過が効率上好ましく、連続式
ドラム炉過機などが工業上の炉過手段としては最も好ま
しいものである。

２以上、遠心処理もしくは炉過処理によって得
られたものは、薄黄褐色透明液で、従来知られたディス
ティラーズ・ソルブルスの黒褐色泥状の性状とは全く相
違するもので、別異のものとも思えるものである。
２そして、この薄黄褐色透明液
にはデイステイラーズ・ソルプルスの有効成分がほとん
ど含有されていて、各種微生物塔地としてきわめて有効
である。また、この透明液には浮遊爽雑物は含まれてい
ないので、従来使用できなかった食用菌体の塔３養、酒
母製造、パン酵母の製造などに広く利用できることにな
り、きわめて有用なものとなる。ここに得られた清澄炉
液は、このままで有効であるが、含有成分的にみた場合
、低分子範囲及び高分子範囲にかなりの量が含有され、
それらの中に真の有効成分乃至は有効成分群が存在する
ことが考えられる。本発明においては、必要に応じてこ
の清澄炉液を限外炉過等の処理にかけ低分子の物質群及
び高分子の物質群を含む液として分離し、有効成分を顕
著に濃縮することを可能とするものである。低分子物質
及び高分子の物質含有液を得るには分子筋、メンブラン
フイル夕−等を用いるいかなる手段でもよいが、工業的
に有効なのは安価なメンブランフイルタ−を用いる限外
炉過によるものである。

限外炉過には各種メンブランフィルターが使用できるが
、例えばアミコン社製のメンブランフイルターＸＭ−１
００、ＵＭ−１０、ＵＭ一２、ＵＭ−０５などを絹合せ
て異なる分子量の物質の含有液を得ることができる。こ
こではＵＭ−０５を通過する液部を分離すれば低分子物
質含有液を得、またＵＭ−０５を通過しない部分の液部
を分離すれば、高分子物質群を含有する液を得ることが
でき、更にこの高分子物質含有液はＵＭ−２、ＵＭ−ｌ
ｕＸＭ−１００等を用いてお）よその分子量１ぴ〜１ぴ
、１び〜１び、１『以上の各分子量物質群含有液に分画
することができる。次に、ディステイラーズ・ソルブル
ス未濃縮液を脱脂後遠心処理し、得られた清澄液を各メ
ンフランフィルタ−を通過させて得られた液部とその５
倍濃縮物の窒素量を測定したところ、次の表３の結果が
得られた。表 ３ ディスティラーズ・ソルブルス未濃縮液の脱脂液の限外
炉過（乞う三子なこう孝三言こ乙こと客；拳竿亭÷。

０，）Ｎ 量 ５倍膿液Ｎ量 分子量ｌｏ 以上（ＸＭ−１００） ０．０８２雌ノ
の多 ０．４１２雌／ＭＺＩ。

４〜１０５（ＵＭ−ｌｏ） ｏ．３４２ １．７
１２１０３〜１０４（ＵＭ− ２） ｏ．ｏ５６
０．２８４５００〜ｌｏ３（ＵＭ−ｏ５）ｏ．ｏ２０
０．１００５００以下 ０
．１３７ ０．６８５デイスティラーズ・ソル
ブルス未濃縮液 ０．７Ｎ量はキェルダール法によ
って分析。

各分画物はディスティラーズ・ソルプルス禾濃縮液換算
である。例えば、ここに得られたＵＭ−０５通過及びＸ
Ｍ−１０坊函過−ＵＭ−１０下・通過の物質を含有する
液 夕はきわめて薄い黄色を帯びた透明の溶液でディス
ティラーズ・ソルブルスの有効成分が多量含有されてい
て、各種微生物塔地として有効である。

また、ディスティラーズ・ソルブルス清澄液は逆浸透法
によってきわめて単時間に高分子物質群Ｚと低分子物質
群に分画できる。逆浸透法による場合は、ＲＯ逆浸透膜
としてＡＳ−２１５、ＡＳ−２３０、ＡＳ−２９０（い
ずれもＡｂｃｏｒ社製）などを用いて行なわれるが、デ
ィスティラーズ・ソルブルス有効成分をおおよそ分画し
、精製するのに有効であＺる。これら精製法によって得
られる透明液には爽雑物が含まれていないので、従来使
用できなかった食品製造及び生化学的医薬の製造のため
の微生物有効成分としてきわめて有用なものとなる。こ
こに得られる各ディスティラーズ・ソルプル２スの清澄
化物もしくはその処理物は各種乾燥手段によって容易に
乾燥され、粉末状として得ることができる。粉末状とな
れば取扱い、保存、運搬等に便利であり、しかも使用時
には直ちに水に溶解し、透明液状に再現されるので微生
物培地として２も利用性は高められる。乾燥手段として
は、頃霧乾燥、凍結乾燥、沈澱乾燥、送風乾燥等あらゆ
る乾燥方法が有効に使用される。

一般に、ディステイラーズ・ソルブルス有効成３分は有
機溶媒の濃度を高めて行くと、順次沈澱するので、それ
を炉過分離すれば、これをそのまままたは適宜粉末化し
て使用できる。

例えばエタノールであれば、エタノール最終濃度で７０
〜８０％まで添加したときに、有効成分のほとんどが沈
澱す３るので、これを炉過または遠心分離によって分離
し、これを凍結乾燥すれば成分の有効性を何ら損うこと
なく、容易に粉末化することができる。また、清澄化物
はアルカリを加え、ｐＨ＝１の茎度とすると有効成分は
容易に沈澱するので、これを遠心４分離もしくは炉取し
、次いで乾燥化し、粉末とすることができる。次に本発
明の試験例、実施例を示す。

試験例 １ 実施例１で得られたディスティラーズ・ソルブルス有効
成分とその時分離された沈澱物を用い、微生物としてし
いたけ（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓ）び０４９０
２を用いて、市販のディスティラーズ・ソルブルス（ウ
イスキー蒸留廃液１′５濃縮物）と実施例１の方法で得
たその有効成分液の菌体増殖に及ぼす影響を試験した。

基本塔地として、次の組成の培地を用いた。グルコース
…………………………… １０タイーストエキスト
ラクト…………… ２．４タベプトン……………
………………… ２．４タＫＨ２Ｐ０４．．・・
・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・
・ １タＭｇＳ０４・７日２０・・・・・
・・・・・・・・・・… ０．５タＣａ
Ｃ１２１２ＬＯ……………… ０．５タ
ＦｅＣ１３・母ＬＯ……………… １
０の９ＭｍＣ１２・４日２０………………
７．２の２ＺｎＣ１２．．．．．．．．，．……
，．．．．，．．．…．．，．． ４．０
雌ＣｕＳ。４・３Ｌ〇．．…．．，．…．．．．，．
１．０の９水・・・・・・・・・・．・・
・…．・・．・・・…．・…．・・．・・．・・．・（
ｐＨ＝５．０）この基本培地を用いて、 １ 基本塔地ｌｏｏの‘のみ、 ２ 基本培地１００の‘にディスティラーズ・ソルブル
スを１．５汐添加したもの、３ 基本塔地１００のＺに
ディスティラーズ・ソルフルスを７００００×夕×分の
遠心処理した上燈液を１．Ｍ（デイステイラーズ・ソル
ブルス１．５のこ相当する量）添加したもの、４ 基本
培地にディスティラーズ・ソルブルスを７００００×夕
×分の遠心処理して生じた沈澱物を０．５夕（デイステ
イラーズ・ソルブルス１．５のこ相当する量）を添加し
たもの、５ 基本塔地からイーストエキストラクトとべ
プトンを除いて、これに、ディステイラーズ・ソルブル
スを１．５タ添加したもの、６ 基本塔地からイースト
エキストラクトとべプトンを除いて、これにデイスティ
ラーズ１ソルブルスを７００００×夕×分の遠心処理し
た上蒲液を１．０夕（デイステイラーズ・ソルブルス１
．５夕に相当する量）添加したもの、７ 基本培地から
イーストエキストラクトとべプトンを除いて、これにデ
イスティラーズ−ソルブルスを７００００×夕×分の遠
心処理して生じた沈澱物を０．５夕（ディスティラーズ
・ソルフルス１．５のこ相当する量）を添加したもの、
のそれぞれを作り、これら各１００私を５００叫客坂口
フラスコに入れ、しいたけ（Ｌｅｎｔｉｎ船ｅｄのｅｓ
）ｍ０４９０２を接種し２５℃、１０びｐｍ（ストロー
ク７伽）で振函培養した。

７日間培養後、生成した菌体を炉過して採取し、乾燥し
、乾物として各培地における叢体量を調査した。

その結果は次の表に示されるが、この表からディステイ
ラーズ・ソルブルスの有効成分はその多くが液部にあり
、沈澱物にはごくわずかに残っているだけであることが
明らかである。

表 ※ この場合は、菌体べレツト中に沈澱固形物がとりこ
まれ、そのまま残留しているのが観察されるので、真の
菌体重量はこの数値よりかなり少ないものとみられる。

試験例 ２ 実施例２で得られたディスティラーズ・ソルブルス有効
成分液を用い、微生物としてしいたけ（じｎｔｉｎｕｓ
ｅｄｏｄｅｓ）軒０４９０２を用いて、市販のディステ
ィラーズ・ソルブルス（ウイスキー蒸留廃液１／茂濃縮
物）と実施例２の方法で得たその有効成分液の菌体増殖
に及ぼす影響をイーストエキストラクト及びべプトンと
比較試験した。

基本培地として、次の組成の培地を用いた。

グルコース…………………………… １０タイース
トエキストラクト…………… ２．４タベプトン
……………………………… ２．４タＫＨ２Ｐ０
４・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・
・・・・・・ １汐ＭｇＳ０４・７日２０
・・・・・・・・・・・・・・・・・・
０．５タＣａＣ１２・２ＬＯ………………
０．５２ＦｅＣ１３・母ＬＯ………………
１０雌ＭｍＣ１２・山日２〇……・・・………
７‐２のＯＺｎＣ１２．．．．．．．
．．．．．，．．．．，．．．．．．．．．．．．．．
． ４．０の夕Ｃ止Ｓ。４・８Ｌ〇，．．
，．．，．．，．．，．．，．． １．０
磯水・・・・・…・・．・・．・・．・・．・・．・・
．・・．・・．・・．・・．・・．・・（斑＝５．０）
この基本培地を用いて、 １ 基本培地１００叫のみ、 ２ 基本塔地１００机にディスティラーズ・ソルブルス
１．５夕を添加したもの、３ 基本培地１００舷にディ
スティラーズ・ソルフルス炉過有効成分液１．０夕（デ
ィスティラーズ・ソルブルス１．５夕に相当する量）を
添加したもの、４ 基本培地からイーストエキストラク
トとべブトンを除いて、これに、ディスティラーズ・ソ
ルブルスを１．５タ添加したもの、５ 基本塔地からイ
ーストエキストラクトとべプトンを除いて、これにデイ
ステイラーズ・ソルプルス炉過有効成分液１．０夕（デ
ィスティラーズ・ソルブルス１．５のこ相当する量）を
添加したもの、のそれぞれを作り、これら各１００の‘
を５００Ｍ容坂口フラスコに入れ、しいたけ（Ｌｅｎｔ
ｉｎ船ｅｄｏｄｅｓ）『０４９０２を接種し、２５ｑｏ
、１０仇ｐｍ（ストローク７の）で振糧培養した。

７日間培養後、生成した菌体を炉過して採取し、乾燥し
、乾物として各培地における菌体量を調査した。

その結果は次の表に示されるが、この表からデイスティ
ラーズ・ソルブルスの有効成分のほとんどが炉液部にあ
ることが明らかである。

表 ※ この場合は、菌体べレット中に沈澱固形物がとりこ
まれ、そのまま残留しているのが観察されるのが、真の
菌体重量はこの数値よりかなり少ないものとみられる。

試験例 ３ 実施例３で得られたデイスティラーズ・ソルブルス有効
成分分子炉過液及びその時同時に分離さ１−れた各分子
量の炉過液を用い、微生物としてしいたけ（じｎｔｉｎ
ｕｓｅｄｏｄｅｓ）ＩＦ０４９０２を用いて、デイステ
ィラーズ・ソルプルス未濃縮液及び基本培地を対照とし
、すべて窒素量を同一に調整した後、各塔地における菌
体増殖に及ぼす影響を試験した。

基本培地として、次の組成の堵地を用いた。

グルコース…………………………… １０タイース
トエキストラクト…………… ２．４タベプトン
……………………………… ２．４多ＫＨ２Ｐ０
４・・・・…・・・・・・・・・・・・・・・…・・・
・・ １タＭｇＳ０４・７日２０…・・・
・・・・・・・・・・・・ ０．５タＣ
ａＣ１２・２ＬＯ……………… ０．５
タＦｅＣ１３，母Ｌ〇……・・・………
１０雌ＭｎＣ１２・４日２０．．．．．．．…．．
，．．… ７．２雌ＺｎＣ１２．．．
．．．．．，．．，．．，．．．…，．．，．．…，．
． ４．０の２ＣｕＳ０４・８Ｌ０・・
・・・・・・・・・・・・・・・・ １
．０の９水・・・・・・・・・・・・・・．・・．・・
．・・・…．・・．・・．・・．・・．・・・（ｐＨ＝
５．０）この基本培地を用いて、 １ 基本培地１００の‘のみ、 ２ 基本培地からイーストエキストラクトを除き、これ
にディスティラーズ・ソルブルス未濃縮液を同じ窒素量
加えたもの、３ 基本培地からイーストエキストラクト
を除き、これにＵＭ−ＯＳ函過液を同じ窒素量加えたも
の、４ 基本塔地からイーストエキストラクトを除き、
これにＵＭ−２通過−ＵＭ−０５不通過液を同じ窒素量
加えたもの、５ 基本塔地からイーストエキストラクト
を除き、これにＵＭ−１坊通過−ＵＭ−２不通過液を同
じ窒素量加えたもの、６ 基本培地からイーストエキス
トラクトを除き、これにＸＭ−ｌｏＧ軍過−ＵＭ−１０
不通過液を同じ窒素量加えたもの、７ 基本塔地からイ
ーストエキストラクトを除き、これにＸＭ−１００不通
通液を同じ窒素量加えたもの、のそれぞれを作り、これ
ら各１００叫を５００肌容坂口フラスコに入れ、しいた
け（ＬｅＭｎ船ｅｄｏｄｅｓ）ｍ０４９０２を接種し、
２５℃、１０比ｐｍ（ストローク７肋）で振顔培養した
。

７日間培養後、生成した菌体を炉過して採取し、乾燥し
、乾物として各塔地における菌体量を調査した。

その結果は次の表に示されるが、この表からディスティ
ラーズ・ソルプルスの有効成分や広い分子量分布をもつ
ようにみえるが、特にＸＭ−１０００通過−ＵＭ−１０
下通過成分（分子量約１ぴ〜１び）に有効成分の多くが
存在するのが明らかである。

表試験例 ４ 実施例６において粉末化する際に、入口温度及び出口温
度を各段階で行い、粉末の状態を試験したところ次の結
果を得た。

ここに得られたＮｏ．１、２、３の粉末を用い、試験例
６に用いた培地でサッカロミセス・セレビシェ（Ｓａｃ
ｃＭｒｏｍｙｃｅｓｃｅてｅｖｉｓｉａｅ）『００２０
３をｐＨ夕こ５．５で、２８午○、４畑時間、振とう培
養し、また、試験例６用いた培地でバチルス・ズブチリ
ス（母ｃｉｌｌｕｓｓ地ｔｉｌｉｓ）ＩＦ０３００７を
２がｏ、３９時間、振とう培養して、次の表の結果を得
たが、これによると粉末化による活性の低下はきわめて
わずかで０あることが明らかである。

試験例 ５ 実施例１で得られた薄黄褐色透明液にエタノールを、最
終濃度で０％から９５％になるまで順次添＊加し、ゆっ
くり燈拝し、各濃度で生じた沈澱を炉過分離し、それぞ
れの固形分及び糠舎量を測定した。

その結果は次の表に示される。ここに得られた各不溶区
分及び可溶区分をそれぞれ凍結乾燥して粉末とした。

上記、粉末をグルコース５夕、ＫはＰ０４０．５夕、Ｍ
蜂Ｓ０４・７弦００．２夕、ボリベプトン０．４２夕を
水で１００の‘とした塔地４の‘に薄黄褐色透明液２５
％相当※量添加し、餌７．０に調整した。

この各塔地にバチルス・ズブチリス（Ｂａｄｌｌｕｓｓ
地ｔｉｌｉｓ）を接種し、３ぴ０、４独特間培養し、増
殖試験を行った。

その結果は次の表に示されるが、８０％不溶区分に活性
が高いことがわかる。試験例 ６実施例１で得られた薄
黄褐色透明液をアブコール（Ａはｏｒ）社製のＲＯ逆浸
透膜ＡＳ一２１５ ＡＳ−２３０、ＡＳ−２９０を用い
て逆浸透膜分離を行った。

ここで用いる各ＲＯ逆浸透膜の性質は次の通りである。
１０％ Ｓｕｃｒｏｓｅ 溶液使用 これら逆浸透膜を用い、操作圧力２０〜２１ｋ９／幼、
水温２５〜２７０で処理し、それぞれ透過液及び残存液
を得た。

それぞれの残存率は次の表に示される。上記表の各培地
Ｎｏ．の液を用いて培養試験を行つた。

（培養試験方法）供試菌株：母ｃｉｌｌｕｓｓ伽ｔｉｌ
ｉｓＩＦ０３００７Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒ
ｅｖｉｓｉａｅ『００２０３偽ｐｅｒｇｌｌｕｓｏひＺ
ａｅＡＴＣＣＩ２８基本塔地：Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ
用 培 地： ｇＩＭｏｓｅ５．０ ％ 、ｐｏｌｙｐ
ｅｐｔｏｎｅｏ．５％、ＫＨ２Ｐ０４０．５％、ＭｇＳ
０４・７日２００．２％ ｐＨ７．０Ｓ．ｃｅｒｅｖｉ
ｓｉａｅ用塔地：ｇｕｃｏｓｅ５．０％、（Ｎは）２Ｓ
０４０．５％、Ｋ広Ｐ０４０．１％、ＭｇＳ０４１７日
２００．０５％、ＣａＣ１２・２ｔｏｏ．０１％、Ｎａ
ＣＩＯ．０１％、ＶＭｍｉｎ液ｐＨ５．５Ａｏひｚａｅ
用塔地：ｇｕｃｏｓｅ３．０％、Ｋ２ＨＰ０４０．１％
、ＫＣＩＯ．０５％、ＭｇＳ０４１７日２００．０５＊
％ 、 ＦｅＳ０４ ・ ７日２００．００１ 夕 、
ＮａＮ０３０．０７％ ｐＨ５．５培地調整、培養条件
：Ｂ．ｓ血ｔｉｌｉｓ、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅのい
ずれも基本培地の窒素源を堵地Ｎｏ．１〜７のＳａｍｐ
ｌｅ３０％（Ｖ／Ｖ）で置換し「総窒素童を等しくして
培養試験した。

２洋０、Ｓｈａｋｉｎｇｃ山ｔｕｒｅ、培養２小て、繁
軌て後に、ＯＤ黍○を測定し生育を調べた。

Ａ．ｏびｚａｅについては同様条件で４日間培養し、乾
燥菌体 （ｄｃｗ）の重量で、生育を調べた。

この培養試験の結果は次の表に示される。

試験例 ７ 実施例８で得られた粉末を希酢酸溶液で溶解（最終ｐＨ
：４．０）し、薄黄褐色透明液３０の【相当量を下記の
培地に加えた。

培地組成 肉エキス １％ ポリベプトン １％ ＮａＣＩ Ｏ．５％ｐＨ７．０ この培地を用いて、バチルス・ズブチリス及び一１ェシ
ェリヒァ・コリを各別に３０℃、Ｓｈａｋｉ増ｃ山ｔｍ
ｅし、２蝿時間後のＯＤ側ｎ肌を測定し、基本塔地に対
する比活性で求め、次の表の通りの結果を得た。

実施例 １ デイスティラーズ・ソルブルス未濃縮液１００の‘その
ままをＫＲ‐２０船型遠０分離機（クボタ製作所製）を
用いて１３００仇ｐｍで１０分間遠心分離処理した。

得られた液部は薄黄褐色で、微細油薄で混濁していた。

この液部をワットマンＮＯ．３２炉紙（東洋炉紙Ｎｏ．
＄）によって炉遇し、薄黄褐色の透明液増加‘を得た。
窒素含量は０．７の３／心であった。実施例 ２ディス
ティラーズ・ソルプルス未濃縮液１００私にセラィト（
商品名：スーパーセル）を４タ添加し、よく混合し、こ
れを吸引炉過磯（ヌッチェ）で炉遇し、薄菱褐色透明液
９４の‘を得た。

実施例 ３ディスティラーズ・ソルブルス未濃縮液１０
０の‘そのままをＫＲ−２００Ａ型遠心分離機（クポタ
製作所製）を用いて９００仇ｐｍ（１００００夕）で８
分間（８００００×夕×分）遠心分離処理した。

得られた液部は薄黄褐色で、微細油滴で混濁していた。
この液部をワットマンＮｏ．３２戸紙によって炉過し、
薄黄褐色の透明液９４の‘を得た。

得られた薄黄褐色透明液をアミコン社製メンブレンフィ
ルターＸＭ−１００及びＵＭ−１０をセットした分子炉
過機にかけＸＭ−１００を通過し、ＵＭ−１０を通過し
ないで残留した液部を採取し、９．４の‘の希薄黄色透
明液を得た。

窒素含量は３．４の９／の【であつた。実施例 ４ ディスティラーズ・ソルブルス未濃縮液１００の【その
ままをＫＲ−２００Ａ型遠心分離機（クボタ製作所製）
を用いて９００仇ｐｍ（１００００夕）で８分間（８０
０００×夕×分）遠心分離処理した。

得られた液部は薄黄褐色で、微細油適で混濁していた。
この液部をワットマンＮｏ．３２戸紙によって炉遇し、
薄黄褐色の透明液９４叫を得た。

得られた薄黄褐色透明液２００Ｍ（全窒素０．７４の９
′私）をアミコン社製メンブランフィルターＵＭ−０５
セットした分子炉過機にかけ、これを通過した液部を採
取し、１６０凧【（全窒素０．１４の９／の【）の希薄
黄色透明液を得た。

実施例 ５ ディスティラーズ・ソルブルス未濃縮液１００泌にセラ
イト（商品名：スーパーセル）を４タ添加し、よく混合
し、これを吸引炉過機（ヌッチェ）で炉過し、薄黄褐色
透明液９４Ｍを得た。

得られた薄黄褐色透明液２００の‘（全窒素０．７４雌
／泌）をアミコン社製メンブランフィルターＵＭ−０５
をセットした分子炉過機にかけ、これを通過した液部を
採取し、１６０Ｍ（全窒素０．１５の９／の【）の希薄
黄色透明液を得た。

実施例 ６ 実施例１で得られた薄黄褐色透明液をそのままスプレー
・ドライヤーにかけて、入口温度１５０〜３０び０、出
口温度８５〜１３００○で粉末化した。

実施例 ７実施例１で得られた薄黄褐色透明液５０私に
約１１７の‘のエタノールを添加し、ゆっくり縄拝し、
生成した沈澱を炉過して除き、炉液に更に約８３の‘の
エタノールを添加し、ゆっくり澄拝し、生じた沈澱を炉
遇して分離し、得られた沈澱物を凍結乾燥した。

実施例 ８ 実施例１で得られた薄黄褐色透明液１夕にｐＨ＝１０に
なるまで３０％ＮａＯＨを加え、ゆるやかに蝿拝しつつ
沈澱を生成させた。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ デイステイラーズ・ソルブルスもしくはその濃縮物
   を遠心処理もしくは濾過処理し、清澄化物を得、必要に
   応じて得られた清澄化物を分子篩処理、限外濾過処理、
   逆浸透処理のいずれかにより精製し、得られた清澄化物
   を噴霧乾燥、凍結乾燥、沈澱乾燥、送風乾燥等の乾燥手
   段によつて乾燥することを特徴とする乾燥状デイステイ
   ラーズ・ソルブルス有効成分を製造方法。