JPS599160B2 - 抗生物質ｇ−５２の製造法 - Google Patents
抗生物質ｇ−５２の製造法Info
- Publication number
- JPS599160B2 JPS599160B2 JP4782178A JP4782178A JPS599160B2 JP S599160 B2 JPS599160 B2 JP S599160B2 JP 4782178 A JP4782178 A JP 4782178A JP 4782178 A JP4782178 A JP 4782178A JP S599160 B2 JPS599160 B2 JP S599160B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- acid
- antibiotic
- culture solution
- micromonospora
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法による抗生物質Ｇ−５２の新規な製造法
に関する。
に関する。
さらに詳し《はミクロモノスポラ・サガミエンシスに属
する微生物の培養によってＧ−５２を製造する方法に関
する。
する微生物の培養によってＧ−５２を製造する方法に関
する。
抗生物質Ｇ−５２は次に示す構造を有し、広範囲のダラ
ム陽性菌およびダラム陰性菌に対し強い抗菌活性を有す
ることが知られている。
ム陽性菌およびダラム陰性菌に対し強い抗菌活性を有す
ることが知られている。
従来、発酵法によるＧ−５２の製法としてミクロモノス
ポラ・ジオネンシスに属する微生物を用いる方法（特開
昭４９−５５８９５号公報）が知られている。
ポラ・ジオネンシスに属する微生物を用いる方法（特開
昭４９−５５８９５号公報）が知られている。
該公知方法におけるＧ−５２の生産は菌の培養液中に検
出できる程度であって、実質的に工業的に生産しうる方
法ではない。
出できる程度であって、実質的に工業的に生産しうる方
法ではない。
本発明者らはＧ−５２を工業的に有利に生産する方法に
ついて検討の結果、ミクロモノスポラ・ジオネンシスと
種を異にするミクロモノスポラ・サガミエンシスに属す
る微生物は極めて好収率にＧ−５２を生産することを見
出し、本発明を完成した。
ついて検討の結果、ミクロモノスポラ・ジオネンシスと
種を異にするミクロモノスポラ・サガミエンシスに属す
る微生物は極めて好収率にＧ−５２を生産することを見
出し、本発明を完成した。
本発明によればミクロモノスポラ・サガミエンシスに属
しＧ−５２を生産する能力を有する微生物を、培養液中
にＧ−５２が検出される迄栄養培地に培養し、培養液か
ら生成したＧ−５２を単離・採取することによってＧ−
５２は生産される。
しＧ−５２を生産する能力を有する微生物を、培養液中
にＧ−５２が検出される迄栄養培地に培養し、培養液か
ら生成したＧ−５２を単離・採取することによってＧ−
５２は生産される。
本発明で用いられる微生物としてはミクロモノスポラ・
サガミエンシスに属し、Ｇ−５２を生産する能力を有す
る微生物がいずれも用いうる。
サガミエンシスに属し、Ｇ−５２を生産する能力を有す
る微生物がいずれも用いうる。
好ましい菌の例はミクロモノスポラ・サガミエンシスＫ
Ｇ−５２である。
Ｇ−５２である。
この菌は千葉県稲毛市に所在する工業技術院、微生物工
業技術研究所および−アメリカ合衆国イリノイ州ペオリ
ア、ユー・エスーデパートメント・オブ・アグリ力ルチ
ュア、アグリカルチエア・リサーチ・サービス、ＮＲＲ
Ｌに寄託され微工研菌寄第４４５６号及びＮＲＲＬ１１
２９０として収集されている。
業技術研究所および−アメリカ合衆国イリノイ州ペオリ
ア、ユー・エスーデパートメント・オブ・アグリ力ルチ
ュア、アグリカルチエア・リサーチ・サービス、ＮＲＲ
Ｌに寄託され微工研菌寄第４４５６号及びＮＲＲＬ１１
２９０として収集されている。
微生物の代謝生産物の生産性を向上させしめるために微
生物に種々の変異処理、例えば紫外線照射、Ｘ線照射、
ｃｏ照射、変異誘起薬剤処理等を施すことによって変異
株が得られる。
生物に種々の変異処理、例えば紫外線照射、Ｘ線照射、
ｃｏ照射、変異誘起薬剤処理等を施すことによって変異
株が得られる。
本発明においてはこの変異株もＧ−５２生産性を有する
限り用いうる。
限り用いうる。
ミクロモノスポラ・サガミエンシスに属する菌の菌学的
性質は特公昭５０−３９１５５号公報に記載されている
。
性質は特公昭５０−３９１５５号公報に記載されている
。
微生物の培養に際しては放線菌の培養に用いられる通常
の培養方法が適用される。
の培養方法が適用される。
用いられる培地は菌の資化しうる炭素源、窒素源、無機
物等を程よく含有する培地であればいずれも用いうる。
物等を程よく含有する培地であればいずれも用いうる。
炭素源としてはグルコース、フラクトース、シュークロ
ース、スタビロース、澱粉、デキストリン、マンノース
、糖蜜等の炭水化物、クエン酸、リンゴ酸、酢酸、フマ
ール酸等の有機猷、メタノール、エタノール等のアルコ
ール、メタン、エタン、プロパン、ｎ−パラフィン等の
炭化水素、グルタミン酸等のアミノ酸等が単独もしくは
組合せて用いられる。
ース、スタビロース、澱粉、デキストリン、マンノース
、糖蜜等の炭水化物、クエン酸、リンゴ酸、酢酸、フマ
ール酸等の有機猷、メタノール、エタノール等のアルコ
ール、メタン、エタン、プロパン、ｎ−パラフィン等の
炭化水素、グルタミン酸等のアミノ酸等が単独もしくは
組合せて用いられる。
窒素源としては塩化アンモン、硫酸アンモン、硝酸アン
モン、リン酸アンモン等のアンモニウム塩、アスパラギ
ン酸、グルタミン、シスチン、アラニン等のアミノ酸、
尿素等無機もしくは有機窒素源、ペプトン、肉エキス、
酵母エキス、乾燥酵母、コーンースチープ・リカー、大
豆粉、綿実粕、大豆カゼイン、カザミノ酸等の天然窒素
源が単独または組合せて用いられる。
モン、リン酸アンモン等のアンモニウム塩、アスパラギ
ン酸、グルタミン、シスチン、アラニン等のアミノ酸、
尿素等無機もしくは有機窒素源、ペプトン、肉エキス、
酵母エキス、乾燥酵母、コーンースチープ・リカー、大
豆粉、綿実粕、大豆カゼイン、カザミノ酸等の天然窒素
源が単独または組合せて用いられる。
無機物としては塩類例えば第１リン酸カリウム、第２リ
ン酸カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第１鉄、硫酸マ
ンガン、硫酸コバルト、硫酸亜鉛、パントテン酸カルシ
ウム、モリブデン酸アンモニウム、硫酸アルミニウムカ
リウム、炭酸バリウム、炭酸カルシウム、塩化コバルト
、食塩等が用いられる。
ン酸カリウム、硫酸マグネシウム、硫酸第１鉄、硫酸マ
ンガン、硫酸コバルト、硫酸亜鉛、パントテン酸カルシ
ウム、モリブデン酸アンモニウム、硫酸アルミニウムカ
リウム、炭酸バリウム、炭酸カルシウム、塩化コバルト
、食塩等が用いられる。
その他必要に応じてビタミン、サイアミン等菌体の増殖
あるいはＧ−５２の生産を促進する物質を加えることが
できる。
あるいはＧ−５２の生産を促進する物質を加えることが
できる。
用いられる微生物が特定の物質を要求する場合は勿論生
育に必要な物を加えることが必要である。
育に必要な物を加えることが必要である。
培養は振盪培養法、通気攪拌培養法等により、２０〜４
０℃の温度で中性附近のｐＨで培養液中にＧ−５２が検
出される迄行われる。
０℃の温度で中性附近のｐＨで培養液中にＧ−５２が検
出される迄行われる。
３〜１５日の培婁によってＧ−５２の蓄積が最大に達し
、培養は完了する。
、培養は完了する。
培養物中に蓄積したＧ−５２を培養液から単離採取する
に際しては、通常の抗生物質の培養液から採取方法が適
用される。
に際しては、通常の抗生物質の培養液から採取方法が適
用される。
即ち、ｒ過、遠心分離等による菌体除去、イオン交換樹
脂、シリカゲル、アルミニウム、セルロース、珪藻士、
珪酸マグネシウム等を用いるカラムクロマトグラフイー
もしくは薄層クロマトグラフイーによる活性物質の吸脱
着処理、等によってＧ−５２は単離される。
脂、シリカゲル、アルミニウム、セルロース、珪藻士、
珪酸マグネシウム等を用いるカラムクロマトグラフイー
もしくは薄層クロマトグラフイーによる活性物質の吸脱
着処理、等によってＧ−５２は単離される。
培養液からＧ−５２を単離する１例は次の通りである。
まず培養液を酸で酸性とし、沢過もしくは遠心分離によ
って菌体な除去する。
って菌体な除去する。
沢液もしくは上澄液を中和後カチオン交換樹脂例えばア
ンバーライ｝ＩＲＣ−５０（アンモニア型、ローム・ア
ンド・・・−ス社製）で処理して活性物質を樹脂に吸着
せしめる。
ンバーライ｝ＩＲＣ−５０（アンモニア型、ローム・ア
ンド・・・−ス社製）で処理して活性物質を樹脂に吸着
せしめる。
次い堵アルカリ、好まし《はアンモニア水で溶出し、溶
出液を凍結乾燥せしめて粗なＧ一５２の粉末を得る。
出液を凍結乾燥せしめて粗なＧ一５２の粉末を得る。
この粉末からＧ−５２を単離するには、例えばアンバー
ライトＣＧ−５０ （ＮＨ４＋型、ローム・アンド・ノ
゛−ス社製）を用いるカラムクロマトグラフイーにより
活性物質を吸着せしめ展開剤としてアンモニア水を用い
てＧ−５２を溶出せしめ、Ｇ−５２を含む溶出液を減圧
濃縮し、凍結乾燥して白色のＧ−５２の遊離塩基を得る
。
ライトＣＧ−５０ （ＮＨ４＋型、ローム・アンド・ノ
゛−ス社製）を用いるカラムクロマトグラフイーにより
活性物質を吸着せしめ展開剤としてアンモニア水を用い
てＧ−５２を溶出せしめ、Ｇ−５２を含む溶出液を減圧
濃縮し、凍結乾燥して白色のＧ−５２の遊離塩基を得る
。
本発明の態様を示す実施例が示される。
実施例
ミクロモノスポラ・サガミエンシスＫＧ−５２微工研菌
寄第４４５６号、ＮＲＲＬ１１２９０）が用いられる。
寄第４４５６号、ＮＲＲＬ１１２９０）が用いられる。
この菌の１白金耳がスタピロース２ ０ ｆｌ／ｌ、グ
ルコース５９／ｌ、酵母エキス５？／ｌ、肉エキス３２
／ｌ、コーン・スチーブ・リカ−１９／７３、ＣａＣＯ
３ ２９／ｌ，ｐＨ ８．０の組成を有する試験管中の
４ｒｒｔｌｌの種培地に植菌される。
ルコース５９／ｌ、酵母エキス５？／ｌ、肉エキス３２
／ｌ、コーン・スチーブ・リカ−１９／７３、ＣａＣＯ
３ ２９／ｌ，ｐＨ ８．０の組成を有する試験管中の
４ｒｒｔｌｌの種培地に植菌される。
培養は３０℃で菌が充分増殖する迄振とう培養する。
この種培養１ｍｌを上記と同＝組成の大形試験管中の１
０ｒＩｌｌの種培地に植菌される。
０ｒＩｌｌの種培地に植菌される。
培養は３０゜Ｃで菌が充分増殖する迄振とう培養する。
この種培養５ｍｌが３００ＴＬｌ三角フラスコ中の下記
発酵培地５０ｍｌに植菌される。
発酵培地５０ｍｌに植菌される。
主発酵培地：シュークロース４ ０ ？／ｌ、大豆粕１
ｏ９／ｌ，綿実粕３ ０ ？／ｌ，フイチン酸２ｆ／／
ｌ、大豆カゼイン５グ／ｌ，Ｋ２ＨＰ０，０．２５？／
ｌ，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０ ０．５ｆｌ／ｌ、ＦｅＳ
Ｏ４ −７ｎ２ｏ ｏ．１ ５？／ｌ，Ｌ−グルタミン
１１ｎ９／ｌ， Ｌ−’，’，＜チ７ ５ ０ｍ９／ｌ
、／Ｓ’−７ラ＝ン５０Ｉｎ９／Ｉ！、パントテン酸カ
ルシウム５ｒｖ／ｌ１ニコチン酸５即／ｌ、モリフテン
酸アンモニウム２５０ｍ９／ｌ！、硫酸亜鉛５ ｍ９／
ｌ、硫酸７／１／ミ＝ウムカリウム１０ｙｎ９／ｌ，
炭酸バリウム１０即／ｌ，塩化コバルト１０μク／ｌ，
ｐＨ８．５培養は３０℃で１０日間振とうして行われる
。
ｏ９／ｌ，綿実粕３ ０ ？／ｌ，フイチン酸２ｆ／／
ｌ、大豆カゼイン５グ／ｌ，Ｋ２ＨＰ０，０．２５？／
ｌ，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０ ０．５ｆｌ／ｌ、ＦｅＳ
Ｏ４ −７ｎ２ｏ ｏ．１ ５？／ｌ，Ｌ−グルタミン
１１ｎ９／ｌ， Ｌ−’，’，＜チ７ ５ ０ｍ９／ｌ
、／Ｓ’−７ラ＝ン５０Ｉｎ９／Ｉ！、パントテン酸カ
ルシウム５ｒｖ／ｌ１ニコチン酸５即／ｌ、モリフテン
酸アンモニウム２５０ｍ９／ｌ！、硫酸亜鉛５ ｍ９／
ｌ、硫酸７／１／ミ＝ウムカリウム１０ｙｎ９／ｌ，
炭酸バリウム１０即／ｌ，塩化コバルト１０μク／ｌ，
ｐＨ８．５培養は３０℃で１０日間振とうして行われる
。
培養後の培養液中に３ ０ ５ μＳ’ ／ｍｌのＧ−
５２が蓄積する。
５２が蓄積する。
ミクロモノスポラ・ジオネンシスＮＲＲＬ５４６６を上
記と同様に培養した場合２．５μ９／ｒｒｔｌ生成量で
ある。
記と同様に培養した場合２．５μ９／ｒｒｔｌ生成量で
ある。
培養終了後、１，／ｌ？の培養液は１２Ｎ一硫酸でｐＨ
２．０に調整され、３０分攪拌される。
２．０に調整され、３０分攪拌される。
そののちｆ過助剤としてラジオライト＃６００（昭和化
学工業製）を約３ｋｇ加え、菌体なｒ別する。
学工業製）を約３ｋｇ加え、菌体なｒ別する。
Ｆ液に６Ｎ−水酸化ナトリウムを加えてｐＨｒ．ｓニ調
整する。
整する。
このＰ液をカチオン交換樹脂アンバーライトＩＲＣ−５
０（アンモニア型）１ｌを充填したカラムに通す。
０（アンモニア型）１ｌを充填したカラムに通す。
水で樹脂を洗浄したあと，２Ｎ−アンモニア水で溶出す
る。
る。
この溶出液を減圧濃縮後、６Ｎ一硫酸でｐＨ７．５に調
整したのち、アンバーライトＣＧ−５０タイプＩ（アン
モニア型）２００ｍｌを充填したカラムに通す。
整したのち、アンバーライトＣＧ−５０タイプＩ（アン
モニア型）２００ｍｌを充填したカラムに通す。
水で樹脂を洗浄したあと、０．ＩＮアンモニア水で毎時
１００１ｎｌの流速で溶離を行なう。
１００１ｎｌの流速で溶離を行なう。
溶離液を２０ｒｔｔｌずつの両分に分取する。
Ｇ−５２を含む区分を合わせて減圧濃縮後、凍結乾燥し
七白色粉末（遊離塩基）約１５０ｒＩ１９を得る。
七白色粉末（遊離塩基）約１５０ｒＩ１９を得る。
この粉末の埋化学的性質は次の通りである。
■ マススペクトル
ｍ／ｅ 組成式
Ｍ＋４６１Ｃ２ｏＨ３９Ｎ，０７
？
ｍ／ｅ 組成式
Ｍ＋４ ４ ４ Ｃ２ＧＨ３６Ｎ４０？３ ６
２ Ｃ１５Ｈ３０Ｎ４０６ ３ ５ ０ ． Ｃ１４Ｈ２８Ｎ３０ ３ ３ ２ Ｃ１４Ｈ２６Ｎ３ ０６３ ２ ２
Ｃ１３Ｈ３ｏＮ４０５ ３０４Ｃ３Ｈ２８Ｎ４０５ ２０３Ｃ８Ｈ１７Ｎ３０３ １ ９ １ Ｃ７Ｈ５Ｎ２０４ １ ６ ３ Ｃ６ Ｈ１５Ｎ２０ｓ １６０ Ｃ７Ｈ４Ｎ０３ １ ４ ５ Ｃ６Ｈ，３Ｎ２０２ １ ４ １ Ｃ７Ｈ，３Ｎ２０ ■ 炭素核核磁気共鳴吸収スペクトル（重水中）δ（
ｐｐｍ） １ ４ ６．６、１０１．４、１００．８、
９９．７、８７．８、８５．４、７５．３、７３．２、
７０．２、６８．５、６４．２、５２．４、５１．７、
５０．２、４７．３、３７．８、３６．３、３４．５、
２５，７、２２，５ ■ シリカゲル薄層クロマトグラフイーによるＲｆ値（
サガミシンのＲｆ値を１とした時の相対的位置） ＲｆＯ値 サガミシン １．０ ジエンタミシンＣ２０．８７ ジエンタミシンＣ１ａ ０．７１ Ｇ−５２（標準物質） ０．９０ 実施例で得られｈ粉末 ０，９０ 展開剤としてクロロホルム：メタノール＝２８％アンモ
ニア水＝ｌ：ｉ：ｉ（容量比）の下層部を用いる。
２ Ｃ１５Ｈ３０Ｎ４０６ ３ ５ ０ ． Ｃ１４Ｈ２８Ｎ３０ ３ ３ ２ Ｃ１４Ｈ２６Ｎ３ ０６３ ２ ２
Ｃ１３Ｈ３ｏＮ４０５ ３０４Ｃ３Ｈ２８Ｎ４０５ ２０３Ｃ８Ｈ１７Ｎ３０３ １ ９ １ Ｃ７Ｈ５Ｎ２０４ １ ６ ３ Ｃ６ Ｈ１５Ｎ２０ｓ １６０ Ｃ７Ｈ４Ｎ０３ １ ４ ５ Ｃ６Ｈ，３Ｎ２０２ １ ４ １ Ｃ７Ｈ，３Ｎ２０ ■ 炭素核核磁気共鳴吸収スペクトル（重水中）δ（
ｐｐｍ） １ ４ ６．６、１０１．４、１００．８、
９９．７、８７．８、８５．４、７５．３、７３．２、
７０．２、６８．５、６４．２、５２．４、５１．７、
５０．２、４７．３、３７．８、３６．３、３４．５、
２５，７、２２，５ ■ シリカゲル薄層クロマトグラフイーによるＲｆ値（
サガミシンのＲｆ値を１とした時の相対的位置） ＲｆＯ値 サガミシン １．０ ジエンタミシンＣ２０．８７ ジエンタミシンＣ１ａ ０．７１ Ｇ−５２（標準物質） ０．９０ 実施例で得られｈ粉末 ０，９０ 展開剤としてクロロホルム：メタノール＝２８％アンモ
ニア水＝ｌ：ｉ：ｉ（容量比）の下層部を用いる。
上記■、■、■のデータから、この白色粉末は既知の抗
生物質Ｇ−５２と同定される。
生物質Ｇ−５２と同定される。
Claims (1)
- １ ミクロモノスポラ・サガミエンシスに属スる抗生物
質Ｇ−５２生産菌を栄養培地に培養して、培養液中に抗
生物質Ｇ−５２を生成せしめ、該培養液から該抗生物質
を採取することを特徴とする抗生物質Ｇ−５２の製造法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4782178A JPS599160B2 (ja) | 1978-04-24 | 1978-04-24 | 抗生物質ｇ−５２の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4782178A JPS599160B2 (ja) | 1978-04-24 | 1978-04-24 | 抗生物質ｇ−５２の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS54140794A JPS54140794A (en) | 1979-11-01 |
| JPS599160B2 true JPS599160B2 (ja) | 1984-02-29 |
Family
ID=12786011
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4782178A Expired JPS599160B2 (ja) | 1978-04-24 | 1978-04-24 | 抗生物質ｇ−５２の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS599160B2 (ja) |
-
1978
- 1978-04-24 JP JP4782178A patent/JPS599160B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS54140794A (en) | 1979-11-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU205971B (en) | Process for producing vancomycin | |
| US3641063A (en) | Antibiotic purification process | |
| JPH0226957B2 (ja) | ||
| JPS599160B2 (ja) | 抗生物質ｇ−５２の製造法 | |
| SU1296009A3 (ru) | Штамм @ @ 15118-продуцент антибиотического комплекса и способ получени антибиотического комплекса | |
| JPH022589B2 (ja) | ||
| JPS5934355B2 (ja) | 醗酵方法 | |
| US3926729A (en) | Method for producing deacetylcephalosporin c | |
| PL80573B1 (ja) | ||
| USRE30413E (en) | Bleomycinic acid and process for preparing thereof | |
| JPS5920359B2 (ja) | ポリリジンの製造法 | |
| JPS5813156B2 (ja) | シンコウセイブツシツ ｓｆ−１８５４ ブツシツノセイゾウホウ | |
| JPS6251117B2 (ja) | ||
| JPS5849237B2 (ja) | ジエンタマイシンＣ／ａの製造法 | |
| KR830000618B1 (ko) | 신 항생물질 sf-2050b물질의 제조법 | |
| JPS58162596A (ja) | 抗生物質及びその製造法 | |
| KR830000617B1 (ko) | 신 항생물질 sf-2050 물질의 제조법 | |
| DE2241091B2 (de) | Verfahren zur herstellung von 7- (d-alpha-aminophenylacetoamido)-desace- toxy-cephalosporansaeure | |
| US3657418A (en) | Antibiotic histidomycin | |
| US3689360A (en) | Process for producing delta-(n-acetyl)-l-ornithine | |
| JPS5819679B2 (ja) | 新規抗生物質及びその製法 | |
| JPS6360997B2 (ja) | ||
| JPS5927898A (ja) | 新規抗生物質及びその製造法 | |
| JPS5950320B2 (ja) | サイクリツク−３′，５′−グアニル酸の製造法 | |
| JPS5849238B2 (ja) | ジエンタマイシンｃ類の製造法 |