JPS5961776A - クロマトグラフ充填剤およびそれを用いる鏡像体混合物の分析法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規な光学活性オルガノシランをグラフトした
クロマトグラフ充填剤およびそれを用いて不斉炭素に結
合した一〇〇Ｎｆ（−基、０Ｉ−（基、ｏｃｏ−基、−
〇Ｃ０ＮＨ−基また′は−ん−ＣＯＮＩＩ−基を有する
化合物の鏡像体混合物を液体クロマトグラフィーにより
分離し、分析する方法に関するものである。

液体クロマトグラフィーにより、不斉炭素を有する化合
物の鏡像体混合物を直接分離、分析するための光学活性
な化合物をグラフトした充填剤としてはこれまでに例え
ば、Ｄａｖａｎｋｏｖ　　等による光学活性なプロリン
をグラフトした充填剤を用いる配位子交換による方法、
Ｇ　ｉ　ｌ−Ａｖ等によるπ電子不足の光学活性化合物
をグラフトした充填剤を用いる電荷移動鉛体による方法
、原等による光学活性なＮ−アシル化アミノ酸をグラフ
トした充填剤を用いるＮ−アシル化アミノ酸エステルや
Ｎ−アシル化ジペプチドエステルの分離あるいはＰｉ　
ｒｋｌ　ｅ　　等による光学活性な１−（９−アンスリ
ル）トリフルオロエタノールをグラフｌ−した充填剤を
用いる３、５−ジニトロベンゾイル化したアミノ酸、ア
ミン、オキシ酸、スルホキシド等の分離および３，５−
ジニトロベンゾイル化した光学活性なフェニルグリシン
をグラフトした充填剤を用いる芳香族アルコールの分離
などが報告されている。しかし、これらの方法は分離し
得る化合物が狭範囲のものに限定されたり、また、分離
の程度が小さかったり、さらにはグラフトした充填剤の
製造が困難で、再現性のある性能を持つ充填剤が得にく
かったりして、いずれも実用的な充填剤とは言い難い。

本発明者らはかかる状況のもとで分析し得る化合物の適
用範囲が広く、製造が比較的容易でしかも化学的に安定
で実用的なグラフトした充填剤の開発を目標に鋭意検討
を続けて来た結果、ヒドロキシル基をその表面に持つ無
機担体に光学活性なインシアネートまたはその誘導体と
アミノアルキルシランとが結合して成る化合物がグラフ
トされているクロマトグラフ充填剤が不斉炭素に結合し
た一ＣＯＮＨ−基、　ＯＨ基、ｏｃｏ−基、　０ＣＯＮ
Ｈ−基または一山一〇〇ＮＨ−基を有する化合物の鏡像
体混合物の分離に優れた効果を示すのみならず、通常の
化学反応で容易に製造し得るうえ、化学的にも安定であ
るなど極めて有用な充填剤であることを見出し、本発明
に至ったものである。

即ち本発明はヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体
に、光学活性なインシアネートまたはその誘導体とアミ
ノアルキルシランとが結合して成る化合物がグラフトさ
れているクロマトグラフ充填剤およびそれを液体クロマ
トグラフィーの固定相に用いて不斉炭素に結合した一Ｃ
ＯＮＨ−基、−〇■（基、　０ＣＯ−基、−００ＯＮＨ
−基または−ｋ　Ｃ０ＮＨ−基を有する化合物の鏡像体
混合物を分離し、分析する方法を提供するものである。

本発明において、グラフトされている化合物としては例
えば一般式ＣＩ） １ 〔式中、ｋ□、に２およびＲ３は同一または相異なり、
アルキル基、アルコキシル基、ヒドロキシル基またはハ
ロゲン原子を表わし、Ｒ工。

Ｒ２およびＲ３のうち少なくとも１つはアルコキシル基
またはハロゲン原子である。Ｘは−ＮＨ−、−ＮＨＣＯ
−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ−。

’ｉＨ鳥ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ−。

６Ｒ６ を表わす。ここでｍは１から５までの整数を表わし、Ｒ
６はアリール基、アルキル基またはアラルキル基を表わ
す。Ｒ４はアルキル基またはアラルキル基を表わし、Ａ
ｒ　　は置換基を有していてもよいフェニル基またはナ
フチル基を表わす。ただし、Ａｒ　　がナフチル基を表
わすときはＲ４はメチル基を表わす。ｎは２から４まで
の整数を表わし、※は不整炭素を表わす。〕 で示されるオルガノシランを挙げることができ、さらに
詳しくは上記一般式〔■〕で示される化合物において、
原料である光学活性なインシアネートとしてはα位にア
リール基が置換されている低級のアルキルイソシアネー
トまたはα位にアリール基が置換されているアラルキル
イソシアネートが好ましく、例えば１−フェニルエチル
イソシアネー１−１１−（α−ナフチル）エチルインシ
アネートまたは１−フェニル−２−（４−トリル）エチ
ルイソシアネートなどを挙げることができる。

また、Ｘの部分は例えばインシアネートが直接結合した
一Ｎ１１−鼻、６−アミノカプロン酸とインシアネート
とを反応させて生成した誘導体をアミノアルキルシラン
に結合させた ＮＨＣＯ−（ＣＨ２）　、　ＮＨ−■　または■ −ＮＨ３，ＯＧＯ（Ｃ１１２）６−ＮＨ−依　、フェニ
ルグリシンとインシアネートとを反応させて生成した誘
導体をアミノアルキルシランに結合させたＮＨＣＯＣＨ
（Ｃ６Ｈ６）　ＮＨ一本　または■　ｅ −ＮＨ３，０ＧＯ−ＣＨ（Ｃ６Ｈ，）　ＮＨ−奏あるい
はマンデル酸にインシアネートを反応させて生成した誘
導体をアミノアルキルシランに結合させたＮＨＣＯ−Ｃ
Ｈ（Ｃ６１（６）−０−華または■　　ｅ ＮＨ３，ＯＣＯＣＨ（Ｃ６Ｈ５）−０−などを挙げるこ
とができる。

また、アミノアルキルシラン成分としてはω−アミノア
ルキルアルコキシシランまたはω−アミノアルキルハロ
ゲノシランが好ましく、例えば、ω−アミノプロピルト
リエトキシシラン、ω−アミノプロピルトリクロロシラ
ンなどを挙げることができる。

本発明において、ヒドロキシル基をその表面に持つ無機
担体としては、例えばシリカゲルなどのシリカ含有担体
が好ましく、担体の形状は球状、破砕状などいずれの形
状でも差支えないが、高効率のクロマトグラフ用カラム
を得るために、できるだけ粒径の揃った微細な粒子が好
ましい。

本発明の新規なりロマトグラフ充填剤を調製するに際し
ては種々のグラフト方法が採用でき、例えば以下のよう
な方法が挙げられる。

■　その表面にヒドロキシル基を有する無機担体にアミ
ノアルキルシランを反応させ、無機担体の表面にアミノ
アルキルシリル残基を導入する。次いでこれに光学活性
なイソシアネートを直接反応させるか、光学活性なイソ
シアネートを用いてＮ−カルバモイル化したアミノ酸ま
たは〇−カルバモイル化したオキシ酸を反応させ、脱水
縮合させるかまたはイオン結合させる方法。

具体的には、その表面にヒドロキシル基を有する無機担
体に一般式［ＩＩ） 〔式中、ｋ□、　Ｒ２，Ｒ３およびｎは前述と同じ意味
を有する。〕 で示されるアミノアルキルシランを既知の方法により反
応させ、無機担体の表面にアミノアルキルシリル残基を
導入し、次いでこれに一般式（ＩＩＩ） ０＝Ｃ−ＮＪＨ−Ａｒ　　　　　（］ＩＩ）書 〔式中、Ｒ４，Ａｒおよび※は前述と同じ意味を有する
。〕 で示される光学活性なイソシアネートを直接反応せしめ
ることにより、または、一般式ＣＩＩＩ）に示す光学活
性なイソシアネートをアミノ酸あるいはオキシ酸に反応
せしめ、一般式〔式中　Ｒ４、Ａｒ　および※は前述と
同じ意味を有し、Ｒ６は水素原子、アリール基、アルキ
ル基またはアラルキル基を表わし、Ｙは−ＮＨ−基また
は酸素原子を表わし、Ｐは０から４までの整数を表わす
。ただし、Ｒ６が水素原子のときはＰは１から４までの
整数であり、Ｒ６がアリール基、アルキル基またはアラ
ルキル基のときはＰは０である。〕 で示されるインシアネートの誘導体にしたのち、上述の
アミノアルキル残基を導入させた無機担体と脱水縮合さ
せるか、あるいはイオン結合させることにより目的の充
填剤が得られる。

なお、上記一般式（Ｉ［［）に示す光学活性なインシア
ネートは一般によく用いられる方法、例えは、１−フェ
ニルエチルアミン、ｉ−（α−ナフチル）エチルアミン
または１−フェニル−２−（４−トリル）エチルアミン
ヲホスゲンと反応させることｆこより得られ、また、上
記一般式〔■〕に示すイソシアネートの誘導体も、一般
によく用いられる方法、例えは１−フェニルエチルイソ
シアネート、１−（α−ナフチル）エチルイソシアネー
トまたは１−フェニル−２−（４−１−リル）エチルイ
ソシアネートを６−アミノカプロン酸、Ｄ−フェニルグ
リシン等のアミノ酸のナトリウム塩と水溶中で反応させ
るか、または［５１−マンデル酸等のオキシ酸のトリエ
チルアミン塩と脱水テトラヒドロフラン中で反応させる
ことにより得られる。

■　光学活性なインシアネートにアミノアルキルシラン
を反応させて得られるオルガノシランまたは光学活性な
インシアネートを用いてＮ−カルバモイル化したアミノ
酸またはＯ−力ルバモイル化したオキシ酸にアミノアル
キルシランを反応させて得られるオルガノシランを、そ
の表面にヒドロキシル基を有する無機担体にグラフトす
る方法。

具体的には前記一般式（ＩＩＩ）で示されるインシアネ
ートまたは前記一般式（ｍＶ）で示されるインシアネー
トの誘導体に、一般式（ＩＩ）で示されるアミノアルキ
ルシランを反応させて得られる一般式〔Ｉ〕で示される
オルガノシランをシリカゲル等の無機担体にグラフトす
ることにより目的の充填剤が得られる。

本発明によって得られるクロマトグラフ充填剤は常法に
従ってクロマトグラフ用のカラムに充填され、液体クロ
マトグラフィーの固定相として使用される。なお、前述
■のグラフト法の場合は、シリカゲル等の無機担体に一
般式（ＩＩ）で示されるアミノアルキルシランを反応さ
せ、無機担体の表面にアミノアルキルシリル残基を導入
した充填剤を予め、常法に従ってクロマトグラフ用のカ
ラムに充填し、このカラム内で、前記一般式（ＩＩＩ）
で示されるインシアネートまたは一般式（ＩＶ）で示さ
れるインシアネートの誘導体をグラフトさせることによ
り、同様の液体クロマトグラフィー用の固定相を作製す
ることもできる。

本固定相を用いる液体クロマトグラフィーにおいて適当
な溶離条件、特１こ通常よく用いられる順相分配または
逆相分配の条件を選ぶことにより、不斉炭素に結合した
一〇〇ＮＨ−基、−〇Ｈ基、　０ＣＯ−基、−０ＣＯＮ
Ｈ−基または−＆−ＣＯＮＨ−基　を有する化合物の鏡
像体混合物の分離、分析が分離能良く、かつ短時間で行
なうことができる。

実施例１ シリカゲル（平均粒径１０μｍ、平均孔径６０Ｋ、表面
積５００　ｍ２／Ｐ）　１０９を減圧、１３０℃で４時
間乾燥したのち、３−アミノプロピルトリエトキシシラ
ン２０１を２００４の脱水トルエンに溶かした液に加え
、６０℃にて６時間攪拌する。反応物を沖過し、残留物
をアセトン１００−で洗い、乾燥して３−アミノプロピ
ルシリル化シリカゲル（以下ＡＰＳと略す）を得た。こ
のものの元素分析値はＮ：１．２０％、Ｃ：３．４０％
であり、これはこのもの１２に対し、３−アミノプロピ
ル基が約０゜９Ｑｍｍｏｌグラフトされたことに相当す
る。

別に、トルエン５００−にトリクロロメチルクロロホー
メート１４５２を注加し、静かに振り混ぜ、粒状活性炭
ＩＰを加えて一夜放置しＸ延 て均やかにホスゲンを発生させたのち、活性炭を沖過し
て取り除いた液に、Ｒ（＋）−１−（σ−ナフチル）エ
チルアミン３１　Ｆをトルエン５０−に溶かした液を加
え、攪拌する。

つぎにこの混合液を４時間加熱還流したのち、放冷し、
過剰のホスゲンおよび溶媒のトルエンを減圧留去してに
←）−１−（α−ナフチル）エチルイソシアネート３５
．３Ｆを得た。

このものは室温で粘稠な黄褐色液体である。

旋光度；〔α）、＝−５４，６°（ｃ＝０．８３　’％
、トルエン） 元素分析値　　炭素（チ）　　　水素（チ）　　　窒素
（チ）計算値　　７９．１７５゜６２　　７．１０実測
値　　７８．９８　　５，６７　　６．９７（Ｃ□３１
（０、ＮＯとして） 次いで、この化合物１．５Ｆをとり、前記Ａ、ＰＳ２，
５ｐを脱水トルエン２０−に懸濁させ、減圧下で十分に
脱気した液に加え、攪拌しながら６時間加熱還流する。

室温まで放冷したのちトルエン２０−１ついでアセトン
３０ｔｎｌで３回およびメタノール３０−で２回、さら
にエチルエーテル３０−で２回洗い、乾燥してに←ｌ−
１−（α−ナフチル）エチルインシアネートをグラフト
とした目的の充填剤（以下ＮＥＣ−５ｉと略す）を得た
。このものの元素分析値はＮ　：　１．９４　％１Ｃ：
　１１．９％であり、これは、このもの１ノに対し、Ｒ
Ｈ−１−（ｃｔ−ナフチル）エチルイソシアネートが約
０．６２ｍｍｏｌグラフトされたことを示す。

このようにして得られた充填剤を内径４ｍｍ。

長さ２５０１のステンレス製カラムにスラリー充填し、
次の条件でＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル）　−ｆ
ｆｌ−１−（α−ナフチルエチルアミン）を分析し、図
−１のクロマトグラムを得た。

温　度：室　温 移動相：ヘキサン／ジクロロメタン／エタノール（１５
：４：１） 流量：　１．Ｏｍ／／ｍｉｎ 検出器：紫外線吸収計（波長　２５４０ｍ）図−１中、
ピーク番号（１）はＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル
’）　−Ｈ−１−（α−ナフチル）エチルアミン、（２
）はＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル）　−１）１−
１−　（α−ナフチル）エチルアミンの各ピークである
。（２）のピークが溶出するまでに要する時間は約２０
分、分離係数は２゜７０　、　ｆ１＋と（２）のピーク
の面積比は５０　：　５０であった。

実施例２ Ｄ−フェニルグリシン３゜ＯＦをＩＮ水酸化ナトリウム
水溶液２０Ｔｎｌに溶かし、テトラヒドロフラン４−を
加え、攪拌しながら、実施例１で得られたＲｆ−１−１
−（α−ナフチル）エチルインシアネート４．Ｏｖを加
え、室温で一夜攪拌を続ける。反応液に、ＩＮ水酸化ナ
トリウム水溶液Ｉｏｎ／および水３０ｒｎｌを加えたの
ち、酢酸エチル５０−で２回洗い、６Ｎ塩酸で酸性とし
、生成する白色固体状物質を酢酸エチル１００−で３回
抽出する。抽出液を水１００−で２回洗い、無水硫酸ナ
トリウムで脱水後減圧下で濃縮したのち酢酸エチル−ｎ
−ヘキサン混液から再結晶し、Ｎ−（（Ｒ）−１−（α
−ナフチル）エチルカルバモイル）−Ｄ−フェニルグリ
シン３．１２を白色結晶として得た。

発泡分解点；２０１〜２０２℃ ノール） 元素分析値　　炭素（％）　　水素（％）　窒素（％）
計算値　　　７２．４０　　５．７９　　８゜０４実測
値　　　７２゜２６　　５，７７　　７．９３（Ｃ２１
Ｈ２ＯＮ２０３として） 次にこの化合’１ｆｆｌ　１．７４　Ｆをとり、メタノ
ール−テトラヒドロフラン（１：　１）混液２〇−を加
えて溶かし、これを実施例１で得られたＡＰＳ　２，５
９に加えて懸濁させ、減圧下で十分に脱気したのち、室
温で緩やかに１昼夜攪拌する。反応物をテトラヒドロフ
ラン３０ｍ１で４回、ついでメタノール３０−で２回、
さらにエチルエーテル３０ｍ１で２回洗い、乾燥してＮ
−（（８）−１−（α−ナフチル）エチルカルバモイル
）−Ｄ−フェニルクリシンをグラフトした目的の充填剤
（以下ＮＥＣ−ＰＩＩＧＳｉと略す）を得た。このもの
の元素分析値はＮ：　２．１０％、　Ｃ：　１２゜８チ
であり、これは、このもの１２に対し、Ｎ−Ｉｔ）−１
−（α−ナフチル）エチルカルバモイル）−Ｄ−フェニ
ルグリシンが約Ｑ、４５ｍｍｏｌグラフトされたことを
示す。

このようにして得られた充填剤を内径４ｍｍ。

長さ２５ｎのステンレス製カラムにスラＩＪ−充填し、
次の条件で０−（３，５−ジニトロフェニルカルバモイ
ル）−４Ｂ−１−フェニルエチルアルコールを分析し、
図−２のクロマ（１５：４：１） 流　　量：　　ｌ、Ｑ　ｒｎｔ／ｍｉｎ検出器：紫外線
吸収計（波長　２５４　ｎｍ）図−２中、ピーク番号（
１）は０−（３，５−ジニトロフェニルカルバモイル）
−Ｈ＝１−フェニルエチルアルコール、　（２Ｈ１Ｏ−
（３。

５−ジニトロフェニルカルバモイル）−任）−１−フェ
ニルエチルアルコールの各ピークである。（２）のピー
クが溶出するまでに要する時間は約１５分、分離係数は
１゜４１、（１）と（２）のピークの面積比は５０　：
　５０であった。

実施例３ 実ｍ例１のに←ｌ−１−（α−ナフチル）エチルイソシ
アネートの製法に準じて、Ｓ（ト）−１−フェニル−２
−（４−トリル）エチルアミンにホスゲンを反応させて
、Ｓｆ＋１−１−フェニル−２−（４−トＩＪル）エチ
ルイソシアネートを得た。このものは室温で淡黄色の液
体である。

旋光度；〔α〕。＝１４．０°（Ｃ＝１．７４チ、トル
エン） 元素分析値　　炭素（％）　水素（％）　窒素（％）計
算値　　　８０，９９　　６，３７　　５．９０実測値
　　８０．７２　　６．４３　　５゜７８（Ｃ工。Ｈ□
６ＮＯとして） 別に、Ｄ−フェニルグリシン３．７８　ＰをＩＮ水酸化
ナトリウム水溶液２５ｍ１に溶かし、テトラヒドロフラ
ン５−を加え、攪拌しながら、これに、前述のＳ←）−
１−フェニル−２−（４−トリル）エチルインシアネー
ト５．２２９を加え、室温で一夜攪拌を続ける。反応液
にＩＮ水酸化ナトリウム水溶液１０−を加えたのち、酢
酸エチル４０−で２回洗い、６Ｎ塩酸で酸性とし、生成
する白色固体状物質を酢酸エチル１００−で３回抽出す
る。

抽出液を水１００−で２回洗い、無水硫酸ナトリウムで
脱水後減圧下で濃縮したのち、酢酸エチル−ｎ−ヘキサ
ン混液から再結晶し、Ｎ−（（Ｓ）−１−フェニル−２
−（４−１−リル）エチルカルバモイル）Ｄ−フェニル
クリシン５．７ｙを白色結晶として得た。

発泡分解点；１７３℃〜１７５℃ 旋光度；〔αＥｏ＝−８３°（ｃ＝０．３９％、メタノ
ール〕 元素分析値　　炭素（％）　　水素（％）　窒素（チ）
計算値　　　７４．２０　　６．２３　　７゜２１分析
値　　　７４，２３　　６．２０　　７．１５（Ｃ２４
Ｈ２４Ｎ２０３として） 次に、この化合物２．０２をとり、テトラヒドロフラン
１００ｙｄを加えて溶かし、別に実施例１で得られたＡ
ＰＳを内径、ｉ　ｍｍ　、長さ２５０のスデンレス製カ
ラムにスラリー充填したカラム内を、約２．／／ｍｉｎ
　の流速で２時間循環させてＮ−（［５１−１−フェニ
ル−２−（４−トリル）エチルカルバモイル）Ｄ−フェ
ニルグリシンをグラフトシたのち、テトラヒドロフラン
、メタノールおよびクロロホルムを順次流して、カラム
のコンディシロニングを行なう（以下このカラムをＰＴ
Ｃ−ＰＨＧ−５！と略す）。

零カラムを用いて次の条件でＮ−（３，５−ジニトロベ
ンゾイル）−Ｄ、Ｌ−バリンメチルエステルを分析し、
図−３のクロマトグラムを得た。

温　度：室　温 移動相：ヘキサン／ジクロロメタン／エタノール（１５
：４：１） 流量：　１．Ｏｍ／／ｍｉｎ 検出器：紫外線吸収計（波長　２５４ｎｒｒす図−３中
、ピーク番号（１）はＮ−（３，５−ジニトロベンゾイ
ル）−Ｄ−バリンメチルエステル、（２）はＮ−（３，
５−ジニトロベンゾイル）−Ｌ−バリンメチルエステル
の各ピークである。（２）のピークが溶出するまでに要
する時間は約８分、分離係数は１．９８、（１）と（２
）のピーク面積比は５０　：　５０であった。

実施例４ Ｓ（＋）−マンデル酸３．３５９を脱水テトラヒドロフ
ラン３０−に溶かし、トリエチルアミン３．０ｙを加え
たのち、実施例１で得られたＲＨ−１−（ａ−ナフチル
）エチルイソシアネート４．３３２を加えて、沸騰水浴
上で５時間加熱還流する。冷後、溶媒を減圧下で濃縮し
、酢酸エチル−ヘキサン（１：１）混液１００ｍ１に溶
かしたのち、５チ炭酸水素ナトリウム水溶液１００　ｍ
／で２回抽出を行ない、合わせた抽出液を酢酸エチル−
ヘキサン（１：１）混液５０ｍ１で１回洗い、６Ｎ塩酸
で酸性とし、生成する微黄色油状物質を酢酸エチル１０
０　ｒｎｔで２回抽出する。抽出液を水１００−で２回
洗い、無水硫酸ナトリウムで脱水後、減圧下で濃縮した
のち、酢酸エチル−ｎ−ヘキサン混液から再結晶し、０
−（１”）−１−（α−ナフチル）エチルカルバモイル
）−（Ｓ）−マンデル酸２゜９ｙを白色結晶として得た
。

発泡分解点：　１７８〜１８０℃ 旋光度：〔α）Ｄ＝６７．５°（Ｃ＝０゜９０％、メタ
ノール） 元素分析値　炭素例　　水素（％）　　窒素（チ）計算
値　　７２，１９　　５，４８　　４゜ＯＪ分析値　　
７２゜３１　　５．６７　　３．８９（Ｃ２□Ｈ工。Ｎ
ｏ、として） 次いで、この化合物２゜Ｏｙをとり、脱水テトラヒドロ
フラン２０−に溶かす。これに、Ｎ−エトキシカルボニ
ル−２−工ｆ−ｔ−シー１゜２−ジヒドロキノリン２゜
ＯＰを加えて溶かし、室温で１５分間攪拌する。これに
、実施例１で得られたＡＰＳ　　２．５ｙを加えて懸濁
させ、減圧下で十分に脱気したのち、室温で緩やかに−
昼夜攪拌する。反応物をテトラヒドロフラン３０ｍ１で
４回、ついでメタノール３０１ｎｌでエチルカルバモイ
ル）−（Ｓ）−マンデル酸ヲクラフトした目的の充填剤
（以下ＮＥＣＭＮＣ−８ｉと略す）を得た。　このもの
の元素分析値はＮ：１゜６８チ、Ｃ：１３゜６％であり
、これは、このもの１°１に対し、０−（熟）−ニー（
α−ナフチル）エチルカルバモイル）−（Ｓｌ−マンデ
ル酸が約Ｑ、４７　ｍｍｏｌ　　グラフトされたことを
示す。このようにして得られた充填剤を内径４ｍｍ、長
さ２５１のステンレス製カラムにスラリー充填し、次の
条件でＮ−（３゜５−ジニトロベンゾイル）−（：！：
）−１−フェニル−２−（４−トリル）エチルアミンを
分析し、図−４のクロマトグラムを得た。

温　度：室　温 移動相：”ヘキサン／ジクロロメタン／エタノール（１
５：４：１） 流　　量：　　ｌ、Ｑ　ｒｎｌ／ｍｉｎ検出器：紫外線
吸収針（波長　２５４１ｍ）図−４中、ピーク番号（１
）はＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル）−１ト）−１
−フェニル−２−（４−トリル）エチルアミン、（２）
はＮ−（３，５−ジニトロベンゾイル）−Ｈ−１−フェ
ニル−２−（４−１−ＩＪル）エチルアミンの各ピーク
である。（２）のピークが溶出するまでに要する時間は
約２５分、分離係数は１．６６、（１）と（２）のピー
クの面積比は５０　：　５０であった。

実施例５ 実施例１で得られたＮＥＣ−３ｉ、実施例２で得られた
Ｎ　Ｅ　Ｃ−Ｐ　ＨＧ　−Ｓ　ｉ　　および実施例４で
得られたＮＥＣ−ＭＮＣ−Ｓｉの各充填剤をそれぞれ内
径４　ｍｍ　、長さ２５　ｃｍのステンレスカラムにス
ラリー充填した各カラムおよび実施例３で得られたＰ　
Ｔ　Ｃ−Ｐ　ＨＣ−Ｓ　ｉカラム、さらに実施例２に準
じた方法で調製されたＮ−（（Ｒ）−１−（α−ナフチ
ル）エチルカルバモイル）−６−アミノカプロン酸およ
びＮ　−（Ｆｌ−１−フェニルエチルカルバモイル）−
Ｄ−フェニルグリシンおよび実施例４で得られた０−（
（Ｒ）−１−（α−ナフチル）エチルカルバモイル）−
（５）−マンデル酸をそれぞれ実施例３と同様の方法で
、先に内径４ｍｍ。

長さ２５０のステンレスカラムに充填したＡＰＳに、カ
ラム内でグラフト化し、調製した各カラム（以下それぞ
れをＮＥＣ−ＡＣＡ−Ｓｉ　　ＰＥＧ−ＰＨＧ−８ｉお
よびＮＥＣ−ＭＮＩ　−３ｉと略す）を用いて、次の条
件で以下の化合物の鏡像体混合物を分離し、分離係数を
求めた。

温　度：室　温 流　　量：１ｍ／／ｍｉｎ 検出器：紫外線吸収計（波長　２５４　ｎｍ）結果を第
１表〜第４表に示す。

【図面の簡単な説明】

図−１、図−２、図−３および図−４はそれぞれ実施例
】、実施例２、実施例３および実施例４において得られ
たクロマトグラムであり、縦軸は強度を、横軸は保持時
間を表わす。 図　　−１ ０１０２０３０（ｍｉｎ） 図−２ ０５１０１５（ｍｉｎ） 図−３ ０５１０（ｍｉｎ） Ｌ￥１　−４

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体に
   光学活性なインシアネートまたはその誘導体とアミノア
   ルキルシランとが結合して成る化合物がグラフトされて
   いるクロマトグラフ充填剤。
2. （２）　　ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体に
   グラフトされている化合物が一般式ＣＩ〕１ ヒドロキシル基またはハロゲン原子を表わし、ｋ工、Ｒ
   ２およびＲ３のうち少なくとも１つはアルコキシル基ま
   たはノ１０ゲン原子である。Ｘは−ＮＨ−、ＮＨＣＯ−
   （ＣＩ−１２）ｒｒｌＮｌ（。 こでｍは１から５までの整数を表わし、Ｒ５はアリール
   基、アルキル基またはアラルキル基を表わす。　Ｒ４は
   アルキル基またはアラルキル基を表わし、Ａｒは置換基
   を有していてもよいフェニル基またはナフチル基を表わ
   す。ただし、Ａｒ　がナフチル基を表わすときはＲ４は
   メチル基を表わす。ｎは２から４までの整数を表わし、
   ※は不斉炭素を表わす。〕 で示されるオルガノシランである特許請求の範囲第１項
   に記載のクロマトグラフ充填剤。
3. （３）　　ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体が
   シリカゲルである特許請求の範囲第１項または第２項に
   記載のクロマトグラフ充填剤。
4. （４）上記一般式ＣＩ）においてＡｒがフェニル基であ
   り、Ｒ４がメチル基もしくは４−メチルベンジル基であ
   るか、あるいはＡｒがナフチル基であり、Ｒ４がメチル
   基である特許請求の範囲第２項または第３項に記載のク
   ロマトグラフ充填剤。
5. （５）上記一般式〔■〕においてアミノアルキルシラン
   残基がω−アミノプロピルトリエトキシシラン残基また
   はω−アミ／プロピルトリクロロシラン残基である特許
   請求の範囲第２項、第３項または第４項に記載のクロマ
   トグラフ充填剤。
6. （６）上記一般式（Ｉ）においてＸが−ＮＨ−である特
   許請求の範囲第２項、第３項、第４項または第５項に記
   載のクロマトグラフ充填剤。
7. （７）上記一般式（Ｉ）においてＸが −ＮＨＣＯ−（（Ｉ（２）６−ＮＨ−または−実ｄ３鷹
   ｃｏ−（田２）６−Ｎｉｌ−である特許請求の範囲第２
   項、第３項、第４項または第５項に記載のクロマトグラ
   フ充填剤。
8. （８）　　上記一般式（Ｉ）においてＸがＮＨＣＯ−Ｃ
   Ｈ（Ｃ６Ｈ，）−ＮＨ−または＄１２．・台ＧＯ−ＣＨ
   （Ｃ６）１６）　ＮＨ−である特許請求の範囲第２項、
   第３項、第４項または第５項に記載のクロマトグラフ充
   填剤。
9. （９）上記一般式〔Ｉ〕においてＸが ＮＨＣＯ−ＣＨ（Ｃ６）１．）−０−または−史Ｈ、官
   ＣＯＣＨ（Ｃ６に−１６）　０−　である特許請求の範
   囲第２項、第３項、第４項またはｆｆ１５項に記載のク
   ロマトグラフ充填剤。 ０（１ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体に光学
   活性なインシアネートまたはその誘導体とアミノアルキ
   ルシランとが結合して成る化合物がグラフトされている
   クロマト充填剤を用いて、不斉炭素に結合した一〇〇Ｎ
   Ｈ−基、ＯＨ基、−０ＣＯ−基、−０００ＮＨ−基また
   は１’ｔＪ　Ｃ０ＮＨ−基　を有する化合物の鏡像体混
   合物を分離し、分析することを特徴とする液体クロマト
   グラフィー分析法。 ０１）　　ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体に
   グラフトされている化合物が一般式ＣＩ）〔式中、艮□
   、Ｒ２およびＲ３は同一または相異なり、アルキル基、
   アルコキシル基、ヒドロキシル基または）λロゲン原子
   を表わし、ｋ□、Ｒ２およびＲ３のうち少なくとも１つ
   はアルコキシル基またはノ＼ロゲン原子である。Ｘはｍ
   ＮＨ、ＮＨＣＯ−（ＣＩ−Ｉ２）ｍＮＨ。 Ｒ＋５ ｍは１から５までの整数を表わし、Ｒ６はアリール基、
   アルキル基またはアラルキル基を表わす。Ｒ４はアルキ
   ル基またはアラルキル基を表わし、Ａｒ　は置換基を有
   していてもよいフェニル基またはナフチル基を表わす。 ただし、Ａｒがナフチル基を表わすときはＲ４はメチル
   基を表わす。ｎは２から４までの整数を表わし、※は不
   斉炭素を表わす。〕 で示されるオルガノシランであるクロマトグラフ充填剤
   を用いる特許請求の範囲第１０項に記載の分析法。 ０２）　　ヒドロキシル基をその表面に持つ無機担体が
   、シリカゲルであるクロマトグラフ充填剤を用いる特許
   請求の範囲第１０項または第１１項に記載の分析法。 ０３　　上記一般式（Ｉ）においてＡｒがフェニル基で
   あり、Ｒ４がメチル基もしくは４−メチルベンジル基で
   あるか、あるいはＡｒがナフチル基であり、Ｒ４がメチ
   ル基であるクロマトグラフ充填剤を用いる特許請求の範
   囲第１１項または＊　１’２項に記載の分析法。 ０４）上記一般式ＣＩ）においてアミノアルキルシラン
   残基がω−アミノプロピルトリエトキシシラン残基また
   はω−アミノプロピルトリクロロシラン残基であるクロ
   マトグラフ充填剤を用いる特許請求の範囲第１１項、第
   １２項または第１３項に記載の分析法。 Ｑ５１　　上記一般式ＣＩ）においてＸが−ＮＨ−であ
   るクロマトグラフ充填剤を用いる特許請求の範囲第１１
   項、第１２項、第１３項または第１４項に記載の分析法
   。 ００　　上記一般式（Ｉ）においてＸが−ＮＨＣＯ−（
   Ｃｉ１２）６ＮＨ−または」１贋Ｃｏ−（ＣＨ２）６Ｎ
   Ｈ−であるクロマトグラフ充填剤を用いる特許請求の範
   囲第１１項、第１２項、第１３項または第１４項に記載
   の分析法。 ａη　上記一般式（Ｉ）においてＸが −ＮＨＣＯ−ＣＨ’（Ｃ６１（６）−ＮＨ−マタハトグ
   ラフ充填剤を用いる特許請求の範囲第１１項、第１２項
   、第１３項または第１４項に記載の分析法。 ０１Ｏ上記一般式ＣＩ）においてＸが −ＮＨＣＯＣＨ（Ｃ，ｌｌ６）−０−または−背Ｈ−♀
   Ｃ０−ＣＨ（Ｃ６Ｈ，）　０−であるクロマトグラフ充
   填剤を用いる特許請求の範囲第１１項、第１２項、第１
   ３項または第１４項に記載の分析法。