JPS60155968A - クロマトグラフ充填剤およびそれを用いる鏡像体混合物の分析法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は光学活性オルガノシランをグラフトシタクロマ
トグラフ充填剤およびそれを用いて不斉炭素に結合した
−ＯＨ基、−Ｎ−００−基、−〇〇Ｎ■−基、−０ＣＯ
−基、−００ＯＮＨ−基、−ＮＨＯＯＮＨ−基または−
Ｎ−ＣＯＮＨ−基を有する化合物の鏡像体混合物を液体
クロマトグラフ′″　イーにより分離し、分析する方法
に関するものである。

液体クロマトグラフィーにより不斉炭素を有する化合物
の鏡像体混合物を直接分離、分析するための光学活性な
化合物をグラフトした充填剤としてはこれまでに例えば
、Ｄａｖａｎｋｏｖ等による光学活性なプロリンをグラ
フトした充填剤を用いる配位子交換による方法、Ｇ１１
−Ａｖ等によるπ電子不足の光学活性化合物をグラフト
した充填剤を用いる電荷移動錯体による方法、原等によ
る光学活性なＮ−アシル化アミノ酸をグラフトした充填
剤を用いるＮ−アシル化アミノ酸エステルやＮ−アシル
化ジペプチドエステルの分離あるいはＰｉｒｋｌｅ等に
よる光学活性な１−（９−アンスリル）トリフルオロエ
タノールをグラフトした充填剤を用いる８、５−ジニト
ロベンゾイル化したアミノ酸、アミン、オキシ酸、スル
ホキシド等の分離および８．５−ジニトロベンゾイル化
した光学活性なフェニルグリシンをグラフトした充填剤
を用いる芳香族アルコールの分離などが報告されている
。しかし、これらの方法は分離し得る化合物が狭範囲の
ものに限定されたり、また、分離の程度が小さかったり
さらにはグラフトした充填剤の製造が困難で、再現性の
ある性能を持つ充填剤が得にくかったりして、いずれも
実用的な充填剤とは言い難い。

本発明者らはかかる状況のもとで分析し得る化合物の適
用範囲が広く、製造が比較的容易でしかも化学的に安定
で実用的なグラフトした充填剤の開発を目標に鋭意検討
を続けて来た結果、一般式（’Ｉ） Ｒ１ 占Ｈ３ 〔式中、Ｒ１＊　Ｒ１およびＲ３は同一または相異なり
、アルキル基、アルコキシル基、ヒドロキシル基または
ハロゲン原子を表わし、少なくともその１つはアルコキ
シル基またはハロゲン原子である。Ｘは−ＮＨＣ！Ｏ−
基またはチル基または光学活性な１−（α−ナフチル）
エチル基を表わす。ｎは２，８または４を表わし、＊は
不斉炭素を表わす。〕 で示されるオルガノシランがヒドロキシル基をその表面
に持つ無機担体にグラフトされているクロマトグラフ充
填剤が不斉炭素に結合した　−ＯＨ基、−Ｎ−ＣＯ−基
、−０ＯＮＨ−基、−０ＣＯ−基、−００ＯＮＨ−４、
−ＮＨＯＯＮＩＩ−基マタハ−Ｎ−０ＯＮＨ−基を有す
る化合物の鏡像体混合物の分離に優れた効果を示すのみ
ならず、通常の化学反応で容易に製造し得るうえ化学的
にも安定であるなど極めて有用な充填剤であることを見
出し、末完、明に至ったものである。

上記一般式（１）において、Ｘの部分は差支えなく、目
的と用途により選択することができる。

また、アミノアルキルシラン成分としてはω−アミノア
ルキルアルコキシシランまたはω−アミノアルキルハロ
ゲノシランが好まり、、＜、例えばω−アミノプロピル
トリエトキシシラン、ω−アミノプロピルトリクロロシ
ランなどを挙げることができる。

本発明において、ヒドロキシル基をそ”の表面に持つ無
機担体としては例えばシリカゲルなどのシリカ含有担体
が好ましく、担体の形状は球状、破砕状などいずれの形
状でも差支えないが、高効率のクロマトグラフ用カラム
を得るために、できるだけ粒径の揃った微細な粒子が好
ましい。

本発明のクロマトグラフ充填剤を調製するに際しては種
々のグラフト方法が採用でき、例えば以下のような方法
が挙げられる。

■　その表面にヒドロキシル基を有する無機担体に、ア
ミノアルキルシランを反応させ、無機担体の表面にアミ
ノアルキルシリル残基を導入し、これにイソシアネート
を用いてカルバモイル化した光学活性なｔｅｒｔ−ロイ
シンを反応させ、脱水縮合させるか、またはイオン結合
させる方法。

具体的には、その表面にヒドロキシル基を有する無機担
体に一般式（１） ％式％（１） 〔式中、”１　＊　Ｒ１ｍ　”８およびｎは前述と同じ
意味を有する。〕 で示されるアミノアルキルシランを既知の方法により反
応させ、無機担体の表面にアミノアルキルシリル残基を
導入し、次いでこれに一般式（１） ％式％ 〔式中、Ｒ４および＊は前述と同じ意味を有する。〕 テ示すしる不斉炭素を持つＮ−カルバモイル−ｔｅｒｔ
−ロイシン、例えばＮ　−ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイ
ル−Ｉ、−ｔｅｒｔ−ロイシンあるい′はＮ−１−（α
−ナフチル）エチルカルバモイルー：Ｌ−ｔｅｒｔ−ロ
イシン等を反応させ、脱水縮合またはイオン結合させる
ことにより目的の充填剤が得られる。　′ なお、一般式（１）に示す不斉炭素を持つＮ−カルバモ
イル−ｔａｒｔ−ロイシンは一般によく用いられる方法
で合成でき、市販されているイソシアネートまたは当該
アミンをホスゲンと反応させて得られるイソシアネート
等、例えばｔｅｒｔ−ブチルイソシアネートまたは光学
活性な１−（α−ナフチル）エチルイソシアネートを、
例えハＬ　−ｔｅｒｔ−ロイシン等のナトリウム塩と水
溶液中で反応させることにより得られる。

■　イソシアネートを用いてカルバモイル化した光学活
性なｔ’ｅ　ｒ　を−ロイシンに、アミノアルキルシラ
ンを反応させて得られるオルガノシランを、その表面に
ヒドロキシル基を有する無機担体にグラフトする方法。

具体的には前記一般式〔冒〕で示されるＮ−カルバモイ
ル−ｔｅｒｔ−ロイシンに、一般式〔厘〕で示されるア
ミノアルキルシランを反応させて得られる一般式（１）
で示されるオルガノシランをシリカゲル等の無機担体に
グラフトすることにより目的の充填剤が得られる。

本発明によって得られた光学活性なＮ−カルバモイル−
ｔｅｒｔ−ロイシン残基を持つ充填剤は常法に従ってク
ロマトグラフ用のカラムに充填され、液体クロマトグラ
フィーの固定相として使用される。なお、前述■のグラ
フト法の場合は、シリカゲル等の無機担体に一般式（１
）で示されるアミノアルキルシランを反応させ、無機担
体の表面にアミノアルキルシリル残基を導入した充填剤
を予め、常法に従ってクロマトグラフ用のカラムに充填
し、このカラム内で、前述一般式（ＩＮ）で示されるＮ
−カルバモイル−ｔｅｒ　ｔ−ロイシンをグラフトさせ
ることにより、同様の液体クロマトグラフィー用固定相
を作製することもできる。本固定相を用いる液体クロマ
トグラフィーにおいて適当な溶離条件、特に通常よく用
いられる順相分配または逆相分配の条件を選ぶことによ
り、不斉炭素に結合した一〇Ｈ基、−Ｎ−Ｃ！０−基、
−０ＯＮＨ−基、−０ＣＯ−基、−ＱＣ！０ＮＨ−基、
−ＮＥＩＣＯＮＨ−基または−Ｎ−ＣＯ−ＮＨ−基を有
する化合物の鏡像体混合物の分離、分析が分離能良く、
かつ短時間で行なうことができる。

実施例１ シリカゲル（平均粒径１０μｍ１　平均孔径６０Ａ１表
面積５００ゴ／９　）　１０ｇを減圧、１８０°Ｃで４
時間乾燥したのち、８−アミノプロピルトリエトキシシ
ラン２０９を２００ｇ／！の脱水トルエンに溶かした液
に加え、６０°Ｃにて６時間撹拌する。反応物をろ過し
、残留物をアセトン１００　ｗｒｌで洗い、乾燥して３
−アミノプロピルシリル化シリカゲル（以下 ＡＰＳと略す）を得た。　このものの元素分析値はＮ：
１．２０％、Ｃ：８．４０％であり、すれはこのものの
１Ｆに対し、３−アミノプロピル基が約Ｑ、　９　Ｑ　
ｍｍｏｌ　グラフトされたことに相当する。

別に、Ｌ　−ｔｅｒｔ−ｏイシ：／８．２８ｆをＩＮ水
酸化ナトリウム水溶液２５ｇ／に溶かし、テトラヒドロ
フラン８　ａｔを加えたのち、攪拌しながら、ｔｅｒｔ
−ブチル・ｆソシアネー）　２．９７１１を加え、室温
で５時間攪拌を続ける。反応液にＩＮ水酸化ナトリウム
水溶液１０＋ｔを加えてから、酢酸エチル５０　ｍｌで
２回洗い、６Ｎ塩酸テ酸性とし、酢酸エチル１００　ｇ
／　テ２　回抽出する。抽出液を飽和食塩水５０ｔｎｌ
で２回洗い、無水硫酸ナトリウムで脱水後、減圧下で濃
縮したのち、酢酸エチル−ｎ　−ヘキサン混液から再結
晶し、Ｎ　−ｔｅｒｔ　−ブチルカルバモイル−Ｌ−ｔ
ｅｒｔ−ロイシン６、Ｏｙを白色結晶として得た。

融　点：１７５〜１７６℃ 旋光度：〔α）ｊ’＝＋６．０°（Ｃ＝０．８７％、メ
タノール） 元素分析値炭素（％）水素（％）窒素（％）計算値　５
７．８７　９．６８　１２．１６実測値　５７．７２　
１０．１ｆ３１１．８８（Ｃ１，汀、□Ｎ２Ｏ３として
） 次に、この化合物１゜７８ＩＩをとり、脱水テトラヒド
ロフラン２０ｍ／に溶かす。これに、Ｎ−エトキシカル
ボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキノリン２．
１Ｆを加えて溶かし、水冷下８０分間攪拌する。これに
、前記ＡＰＳ２．５Ｆを加えて懸濁させ、減圧下で十分
脱気したのち、室温で緩やかに一昼夜攪拌する。反応物
を内径８ＭＭのカラムに移し、テトラヒドロフラン１０
０＋＋＋／。

メタノール２００　ｙｓｌおよびクロロホルム１００　
ｍｌをカラム内に流して充填剤を洗ったのち、カラムか
ら充填剤を取り出し、エチルエーテル８（１＋／で２回
洗い、乾燥してＮ　−（ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル
）−り−ｔｅｒｔ−ロイシンをグラフトした目的の充填
剤（以下ＴＢＯ−ＴＬＥ−８ｉと略す）を得た。

このものの元素分析はＮ：２．８０％、Ｃ：８．４８％
であり、これはこのもの１ｙに対し、Ｎ　−（ｔｅｒｔ
−ブチルカルバモイル）−Ｌ　−ｔｅｒｔ　−ロイシン
が約Ｑ、　５９　ｍｍｏ　ｌグラフトされたことを示す
。このようにして得られた充填剤を内径４ｍｍ、長さ２
５菌のステンレス製カラムにスラリー充填し、次の条件
でＮ−アセチル−ＤＬ−ロイシンイソプロピルエステル
を分析し、図−１のクロマトグラムを得た。

温度：室温 移動相：ヘキサン／イソプロパツール （２４：１） 流量：　１．　Ｏｗｅ　／　ｍｉｎ 検出器：紫外線吸収計（波長２８０ｎｍ）図−１中、ピ
ーク番号（１）は溶媒のクロロホルムであ’）、（２）
はＮ−ア老チルーＤ−ロイシンイソプロピルエステル、
（８）はＮ−アセチル−Ｌ−ロイシンイソプロピルエス
テルの各ピークである。（８）のピークが溶出するまで
に要する時間は約１４分、分離係数は２．８２　、（２
）と（８）のピークの面積比は５０：５０であった。

実施例２〜１８ 実施例１で得られたＴＢＯ−ＴＬＥ−８ｉの充填剤を内
径４ｍｍ、長さ２５ｃＩＩのステンレスカラムにスラリ
ー充填したカラムを用いて、次の条件で種々の化合物の
鏡像体混合物を分離し１、分離係数をめた。

温度：室温 移動相流量：１＊ｌ／ｍｉｎ 検出器：紫外線吸収計（波長２５４０ｍまたは２８０　
ｎｍ　） 結果を第１表に示す。

【図面の簡単な説明】

図−１は実施例１において得られたクロマトグラムであ
り、縦軸は強度を横軸は保持時間を表わす。 図−１ ０１０２０（ｍｉｎ）

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 〔式中、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３は同一または相′異なす
   、アルキル基、アルコキシル基、ヒドロキシル基または
   ハロゲン原子を表わし、少なぐともその１つはアルコキ
   シル基またはハロゲン原子である。Ｘは−ＮＨＣ！０−
   基ｔｅｒｔ−ブチル基または光学活性な１−（α−ナフ
   チル）エチル基を表わす。ｎは２゜８または４を表わし
   、＊は不斉炭素を表わす。〕 で示されるオルガノシランがヒドロキシル基をその表面
   に持つ無機担体にグラフトされているクロマトグラフ充
   填剤。
2. （２）一般式 ％式％ 〔式中、Ｒ１ｐ　Ｒ２およびＲ３は同一または相異なり
   、アルキル基、アルコキシル基、ヒドロキシル基または
   ハロゲン原子を表わし、少なくともその１つはアルコキ
   シル基またはハロゲン原子である。Ｘは−ＮｕＣＯ−基
   ｔｅｒｔ−ブチル基または光学活性な１−（α−ナフチ
   ル）エチル基を表わす。ｎは２゜８または４を表わし、
   ＊は不斉炭素を表わす。〕 で示されるオルガノシランがヒドロキシル基をその表面
   に持つ無機担体にグラフトされているクロマトグラフ充
   填剤を用いて、不斉炭素に結合した一〇Ｈ基、−Ｎ−０
   ０−基、−０ＯＮＨ−基、−０ＣＯ−基、−００ＯＮＨ
   −基、−ＮＨＯＯＮＨ−基または−Ｎ−Ｃ！０ＮＨ−基
   を有する化合物の鏡像体混合物を分離し、分析する仁と
   を特徴トスる液体クロマトグラフィー分析法。