JPS5926275B2 - 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法Info
- Publication number
- JPS5926275B2 JPS5926275B2 JP15526677A JP15526677A JPS5926275B2 JP S5926275 B2 JPS5926275 B2 JP S5926275B2 JP 15526677 A JP15526677 A JP 15526677A JP 15526677 A JP15526677 A JP 15526677A JP S5926275 B2 JPS5926275 B2 JP S5926275B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- concentration
- culture solution
- ammonium ion
- sucrose
- glutamic acid
- Prior art date
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- Expired
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造法に関
する。
する。
発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造法においては、−
バッチ当り炭素源の使用量を増加して培養液中のし一グ
ルタミン酸の培養液中の蓄積濃度を高めようとする試み
がなされているが、炭素源の使用量を単に炭素源を追補
添加する等によって増加してみてもＬ−グルタミン酸の
収率が低下してしまい、目的は達せられない。
バッチ当り炭素源の使用量を増加して培養液中のし一グ
ルタミン酸の培養液中の蓄積濃度を高めようとする試み
がなされているが、炭素源の使用量を単に炭素源を追補
添加する等によって増加してみてもＬ−グルタミン酸の
収率が低下してしまい、目的は達せられない。
本発明者らはグルコースまたは蔗糖を炭素源とした場合
のＬ−グルタミン酸の製造法における上記のような問題
を解決すべく研究した結果、培養の間グルコースまたは
蔗糖を追補添加しつつ培養液中のグルコースまたは蔗糖
濃度が１０ｆ？／ｄｌ以下に保ち、かつ培養液のｐＨを
一定値に保ちつつアンモニアガスもしくはアンモニア水
または水酸化アルカリ金属を添加して培養液中のアンモ
ニウムイオン濃度を０．３ないし１．２ｆ／ｄｌの範囲
の一定範囲内に保てばＬ−グルタミン酸の収率を低下せ
しめることなく、従来の方法に比べ１．５倍以上もの大
量のグルコースまたは蔗糖が追補添加でき、その結果培
養液中には従来の方法に比べ１，５倍以上ものし一グル
タミン酸が蓄積されることを知った。
のＬ−グルタミン酸の製造法における上記のような問題
を解決すべく研究した結果、培養の間グルコースまたは
蔗糖を追補添加しつつ培養液中のグルコースまたは蔗糖
濃度が１０ｆ？／ｄｌ以下に保ち、かつ培養液のｐＨを
一定値に保ちつつアンモニアガスもしくはアンモニア水
または水酸化アルカリ金属を添加して培養液中のアンモ
ニウムイオン濃度を０．３ないし１．２ｆ／ｄｌの範囲
の一定範囲内に保てばＬ−グルタミン酸の収率を低下せ
しめることなく、従来の方法に比べ１．５倍以上もの大
量のグルコースまたは蔗糖が追補添加でき、その結果培
養液中には従来の方法に比べ１，５倍以上ものし一グル
タミン酸が蓄積されることを知った。
この発明はこの知見に基いて完成されたものである。
本発明において使用されるＬ−グルタミン酸生産能を有
する細菌は例えば以下のものがある。
する細菌は例えば以下のものがある。
ブレビバクテリウム・ ＡＴＣＣ１４０２０デバ
リカタム ブＬｙｅｙゞクテリウ” ＡＴＣＣ１４０６７
フラブム ブレビバクテリウム・ ラクトファーメンタム ＡＴＣＣ１３８６９ブレビ
バクテリウム・ ＡＴＣＣ１３８２５０ゼ゛ウム ブレビバクテリウム・ ＡＴＣＣ１４０６６サツ
カロリチクム コリネバクテリウム・ アセトアシドフィルム ＡＴＣＣ１３８７０コリ
ネバクテリウム グルタミクム（ミクロコツカス・グル
タミクム） ＡＴＣＣ１３０３２ミクロバク
テリウム・ ＡＴＣＣ１，５３５４アンモニアフ
イルム 炭素源であるグルコースまたは蔗糖は精製したものはも
ちろん、粗糖、ケーンまたはビートモラツセス等が用い
られる培養の間培地中のグルコースまたは蔗糖濃度は１
０ ｆ ／ｄｌにグルコースまたは蔗糖を追補添加しつ
つ保つ。
リカタム ブＬｙｅｙゞクテリウ” ＡＴＣＣ１４０６７
フラブム ブレビバクテリウム・ ラクトファーメンタム ＡＴＣＣ１３８６９ブレビ
バクテリウム・ ＡＴＣＣ１３８２５０ゼ゛ウム ブレビバクテリウム・ ＡＴＣＣ１４０６６サツ
カロリチクム コリネバクテリウム・ アセトアシドフィルム ＡＴＣＣ１３８７０コリ
ネバクテリウム グルタミクム（ミクロコツカス・グル
タミクム） ＡＴＣＣ１３０３２ミクロバク
テリウム・ ＡＴＣＣ１，５３５４アンモニアフ
イルム 炭素源であるグルコースまたは蔗糖は精製したものはも
ちろん、粗糖、ケーンまたはビートモラツセス等が用い
られる培養の間培地中のグルコースまたは蔗糖濃度は１
０ ｆ ／ｄｌにグルコースまたは蔗糖を追補添加しつ
つ保つ。
グルコースまたは蔗糖濃度は１０ ？／ｄｌ以下ならば
特に厳密に制限する必要がないので数回に分割して添加
してもよいし、一定量を連続的に添加してもよい。
特に厳密に制限する必要がないので数回に分割して添加
してもよいし、一定量を連続的に添加してもよい。
かくしてグルコースまたは蔗糖の追補添加はその消費速
度が実質的に低下するまで続けられる。
度が実質的に低下するまで続けられる。
培養液のｐＨはｐＨ７，２〜８．１の範囲の予め定めら
れた値にアンモニア水もしくはアンモニアガスまたは水
酸化アルカリ金属により制御される。
れた値にアンモニア水もしくはアンモニアガスまたは水
酸化アルカリ金属により制御される。
アンモニア水またはアンモニアガスは、培養液中のアン
モニウムイオン濃度が０．３Ｌ？／ｄ１以上の予め定め
た下限濃度以下になったときには培養液のｐＨを一定値
に保ちつつアンモニウムイオン濃度が１．２？／ｄｌ以
下の予め定めた上限濃度になるまで添加される。
モニウムイオン濃度が０．３Ｌ？／ｄ１以上の予め定め
た下限濃度以下になったときには培養液のｐＨを一定値
に保ちつつアンモニウムイオン濃度が１．２？／ｄｌ以
下の予め定めた上限濃度になるまで添加される。
ここでいうアンモニウムイオンの上限濃度及び下限濃度
とは０．３ ？ ／ｄｌないし１、２ ｆ ／ｄｌの範
囲から適宜選はれる濃度であり、上限濃度の方が下限濃
度より高い。
とは０．３ ？ ／ｄｌないし１、２ ｆ ／ｄｌの範
囲から適宜選はれる濃度であり、上限濃度の方が下限濃
度より高い。
水酸化アルカリは、望ましくは水溶液として培養液中の
アンモニウムイオン濃度が上記上限濃度以上になったと
きには培養液のｐＨを一定値に保ちつつ上記下限濃度に
なるまで添加される。
アンモニウムイオン濃度が上記上限濃度以上になったと
きには培養液のｐＨを一定値に保ちつつ上記下限濃度に
なるまで添加される。
かくして培養液中のアンモニウムイオンは上記上限濃度
と下限濃度の間に制限される。
と下限濃度の間に制限される。
もちろん培養を終了するに当って一時的にアンモニウム
イオン濃度が上記上限濃度または下限濃度を逸脱する場
合があるが、培養終了時のこのような逸脱は実質的に影
響はなく、従ってこのような場合も本発明の範囲内であ
る。
イオン濃度が上記上限濃度または下限濃度を逸脱する場
合があるが、培養終了時のこのような逸脱は実質的に影
響はなく、従ってこのような場合も本発明の範囲内であ
る。
本発明において使用する培地は１０？／ｄｌ以下のグル
コースまたは蔗糖を含有する以外は特徴はなく通常の培
地である。
コースまたは蔗糖を含有する以外は特徴はなく通常の培
地である。
モラツセスのように大量のビオチンを含有するようなも
のを炭素源として使用する場合にはよく知られているよ
うにペニシリン、非イオン界面活性剤等のビオチンの弊
害を取り除くべき物質が添加される。
のを炭素源として使用する場合にはよく知られているよ
うにペニシリン、非イオン界面活性剤等のビオチンの弊
害を取り除くべき物質が添加される。
培養は温度３０ないし４０℃の範囲で好気的条件下で行
なわれ、グルコースまたは蔗糖の追補添加が停止トされ
てから実質的に培地中のグルコースまたは蔗糖が資化さ
れなくなる才で発酵が継続される。
なわれ、グルコースまたは蔗糖の追補添加が停止トされ
てから実質的に培地中のグルコースまたは蔗糖が資化さ
れなくなる才で発酵が継続される。
参考例 １
ブレビバクテリウム・ラクトファーメンタムＡＴＣＣ１
３８６９を下記の種培地中に１を容ジャーファーメンタ
−を用いて（３００ｒＩｌｌ張込）３１．５℃ｐＨ７，
８にて好気的条件下で１８時間培養した。
３８６９を下記の種培地中に１を容ジャーファーメンタ
−を用いて（３００ｒＩｌｌ張込）３１．５℃ｐＨ７，
８にて好気的条件下で１８時間培養した。
グルコース ５．０ グ／ｄｌＫ
Ｈ２Ｐ ０４ ０． ］、
ｔｔＭｇＳ０４・７Ｈ２００，０４〃 Ｆｅ５０４Ｈ７Ｈ２００，００１ｔｔ ＭｎＳ０４・４Ｈ２００，００１ｌｌ 犬豆蛋白加水分解液 。
Ｈ２Ｐ ０４ ０． ］、
ｔｔＭｇＳ０４・７Ｈ２００，０４〃 Ｆｅ５０４Ｈ７Ｈ２００，００１ｔｔ ＭｎＳ０４・４Ｈ２００，００１ｌｌ 犬豆蛋白加水分解液 。
４ ッ／ッ（Ｔ−Ｎとして）
尿 素 ０．２ ’？／
ｄｌビオチン ３００ γ／Ｌサ
イアミン塩酸塩 ２００ γ／を一方、下記主
発酵培地を調整し、１を容ジャーファメンクーに３００
ｍ１入れ殺菌した。
ｄｌビオチン ３００ γ／Ｌサ
イアミン塩酸塩 ２００ γ／を一方、下記主
発酵培地を調整し、１を容ジャーファメンクーに３００
ｍ１入れ殺菌した。
これに上記種母培養液１５ｍ１を接種し、３１５℃で培
養し、ｐＨヲアンモニアガスで７８に制御した。
養し、ｐＨヲアンモニアガスで７８に制御した。
培養開始後２６倍希釈液の５６２ｍμにおける吸光度が
０．４に達した時点でポリオキシソルビクンモノパルミ
テートを０．４？／ｄｌ添加した。
０．４に達した時点でポリオキシソルビクンモノパルミ
テートを０．４？／ｄｌ添加した。
得られた結果ケーンモラセス（糖として） １９．５
’ｉ／ｄ／２ＫＨ２ＰＯ４０，２／／ ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，０８／／ ＦｅＳＯ４７Ｈ２００，００２〃 大豆蛋白加水分解液 。
’ｉ／ｄ／２ＫＨ２ＰＯ４０，２／／ ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，０８／／ ＦｅＳＯ４７Ｈ２００，００２〃 大豆蛋白加水分解液 。
、ｓ ｙｎｔｉ／ｄ１２（Ｔ−Ｎさして）
サイアミン塩酸塩 ２００ γ／ｌを表１に示
す。
す。
参考例 ２
１を容ジャーファーメンタ−に下記培地３００ケーンモ
ラセス（糖として）６．０ ｆ／ｄｌＫＨ２Ｐ
０４ ０．２ ｉｔＭｇＳ
０４・７Ｈ２００，０８／／ ＦｅＳＯ４・７Ｈ２００，００２〃 大豆蛋白加水分解液 。
ラセス（糖として）６．０ ｆ／ｄｌＫＨ２Ｐ
０４ ０．２ ｉｔＭｇＳ
０４・７Ｈ２００，０８／／ ＦｅＳＯ４・７Ｈ２００，００２〃 大豆蛋白加水分解液 。
、８ ッ／、。（Ｔ−Ｎとして）
サイアミン塩酸塩 ２００ γ／を−を張り込
み、１２０℃にて２０分加熱殺菌した。
み、１２０℃にて２０分加熱殺菌した。
これをあらかじめ参考例に記載した方法に従って種培養
したブレビバクテリウム・ラクトファーメンタムＡＴＣ
Ｃ１３８６９を１５−接種し、３１．５℃で培養し、ｐ
Ｈをアンモニアガスで７８に制御した。
したブレビバクテリウム・ラクトファーメンタムＡＴＣ
Ｃ１３８６９を１５−接種し、３１．５℃で培養し、ｐ
Ｈをアンモニアガスで７８に制御した。
培養開始後２６倍希釈液の５６２ｍμにおける吸光度が
０．４５に達した時点で界面活性剤としてポリオキシソ
ルビクンモノパルミテートを０．４？／ｄｌ添加した。
０．４５に達した時点で界面活性剤としてポリオキシソ
ルビクンモノパルミテートを０．４？／ｄｌ添加した。
さらに糖濃度が３ Ｐ ／ｄｌとなった時点で、糖濃度
を４５ ′？／ｄｌに調整したケーンモラセス液を滴下
しつつ、その後の糖濃度を２〜４１７ｄｌに制御するよ
うに添加を開始した。
を４５ ′？／ｄｌに調整したケーンモラセス液を滴下
しつつ、その後の糖濃度を２〜４１７ｄｌに制御するよ
うに添加を開始した。
滴下は培養３５時間迄行ない、その間の滴下液量は合計
で１７０−で、最終液量当りの添加糖量は２０．１’？
／ｄｌであった。
で１７０−で、最終液量当りの添加糖量は２０．１’？
／ｄｌであった。
得られた結果を表２に示す
又培養液中のアン宅ニウムイオン濃度は時間の経過に従
って漸増し、培養終了時には１．６８Ｓ’／ｄｌとなっ
ていた。
って漸増し、培養終了時には１．６８Ｓ’／ｄｌとなっ
ていた。
実施例 １
一方、上に述べた方法の内、培養液中のアンモニウムイ
オン濃度が表３に示す設定の上限に達した時点で培養液
のｐＨ制御をアンモニアから水酸化ナトリウムの水溶液
に切換え、さらに培養液中のアンモニウムイオンが表３
に示す設定の下限に達した時点で培養液のｐＨ制御をア
ンモニアに再び切換えることにより培養液中のアンモニ
ウムイオン濃度を一定に保ちつつ培養をおこなった。
オン濃度が表３に示す設定の上限に達した時点で培養液
のｐＨ制御をアンモニアから水酸化ナトリウムの水溶液
に切換え、さらに培養液中のアンモニウムイオンが表３
に示す設定の下限に達した時点で培養液のｐＨ制御をア
ンモニアに再び切換えることにより培養液中のアンモニ
ウムイオン濃度を一定に保ちつつ培養をおこなった。
アンモニウムイオン濃度の設定値は、０．３′？／ｄｌ
以下、０．４〜０．６？／ｄｌ、 ０．８〜１−、２
Ｌ？／ｄｌ １．２〜１４グ／ｄｌの範囲で培養した
。
以下、０．４〜０．６？／ｄｌ、 ０．８〜１−、２
Ｌ？／ｄｌ １．２〜１４グ／ｄｌの範囲で培養した
。
得られた結果を表３に示した。
Claims (1)
- １ Ｌ−グルタミン酸生産能を有する細菌をグルコース
または蔗糖を主炭素源とする液体培地中に好気的に培養
し、培養の間培養液中の蔗糖濃度が１０ｆｆ／ｄｉ以下
の予め定めた値以下になったときにはグルコースまたは
蔗糖を追補添加し、培養液中のアンモニウムイオン濃度
が０．３ｆ／ｄｌ以上の予め定めたアンモニウムイオン
の下限濃度以下になったときには培養液のｐＨを一定値
に保ちつつ上記アンモニウムイオン濃度が１．２ ｒ
／ｄｌ以下の予め定めた上限濃度になるまでアンモニア
水またはアンモニアガスを培養液中に人へ更に上記アン
モニウムイオン濃度が上記上限濃度以上になったときに
は培養液中のｐＨを上記一定値に保ちつつ上記アンモニ
ウムイオン濃度が上記下限濃度になるまで水酸化アルカ
リ金属を培養液中に入れて、上記アンモニウムイオン濃
度を上記上限値および下限値の範囲になるように制限す
ることを特徴とする発酵法によるＬ−グルタミン酸の製
造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15526677A JPS5926275B2 (ja) | 1977-12-23 | 1977-12-23 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15526677A JPS5926275B2 (ja) | 1977-12-23 | 1977-12-23 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5486692A JPS5486692A (en) | 1979-07-10 |
| JPS5926275B2 true JPS5926275B2 (ja) | 1984-06-26 |
Family
ID=15602144
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15526677A Expired JPS5926275B2 (ja) | 1977-12-23 | 1977-12-23 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5926275B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02170490A (ja) * | 1988-12-22 | 1990-07-02 | Toshiba Corp | メタルコア型回路基板 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2818556B1 (en) * | 2004-10-07 | 2023-05-10 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing a basic substance |
| KR101433599B1 (ko) * | 2011-11-10 | 2014-08-27 | 씨제이제일제당(주) | Ｌ-글루탐산을 함유하는 조미료 및 그 제조 방법 |
-
1977
- 1977-12-23 JP JP15526677A patent/JPS5926275B2/ja not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02170490A (ja) * | 1988-12-22 | 1990-07-02 | Toshiba Corp | メタルコア型回路基板 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5486692A (en) | 1979-07-10 |
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