JPS59166862A - ビリルビン検出用試験片およびその製造方法 - Google Patents
ビリルビン検出用試験片およびその製造方法Info
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- JPS59166862A JPS59166862A JP3009584A JP3009584A JPS59166862A JP S59166862 A JPS59166862 A JP S59166862A JP 3009584 A JP3009584 A JP 3009584A JP 3009584 A JP3009584 A JP 3009584A JP S59166862 A JPS59166862 A JP S59166862A
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- Japan
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- bilirubin
- test piece
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- soluble amino
- amino acid
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N31/00—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods
- G01N31/22—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
１ 発明の背景
技術分野
本発明は、血液及び尿等の体液中ビリルビンを定量的に
検出し、正常者と肝臓病患者を識別する、つｔ、ｂビリ
ルビン検出用試験片およびそ、の製造方法に関する。
検出し、正常者と肝臓病患者を識別する、つｔ、ｂビリ
ルビン検出用試験片およびそ、の製造方法に関する。
先行技術
肝機能の障害によって血液及び尿等の体液中に増加して
くるビリルビンを定量的に検出することは、臨床上極め
て重要なことである。すなわち、慢性及び急性肝疾患の
発見、先天性及び後天性そして、妊娠による黄痘の診断
、かつ、これら疾病の管理において体液中のどリルビン
を検出することは、早期発見、早期治療上欠かせないも
のである。
くるビリルビンを定量的に検出することは、臨床上極め
て重要なことである。すなわち、慢性及び急性肝疾患の
発見、先天性及び後天性そして、妊娠による黄痘の診断
、かつ、これら疾病の管理において体液中のどリルビン
を検出することは、早期発見、早期治療上欠かせないも
のである。
ビリルビンの定量方法は公知であシ、これ捷で一般的に
は、ジアゾカップリング反応を応用したビリルビン検出
方法が用いられていて、ビリルビンがジアゾニウム塩と
反応して呈色を示すことが知られている。この際、ジア
ゾニウム塩は各種のアニリン類に亜硝酸を反応させジア
ゾ化してつくられる。例えはアニリン類をジアゾ化して
、各種の塩で安定化したものを試験片に含有させる方法
がある。
は、ジアゾカップリング反応を応用したビリルビン検出
方法が用いられていて、ビリルビンがジアゾニウム塩と
反応して呈色を示すことが知られている。この際、ジア
ゾニウム塩は各種のアニリン類に亜硝酸を反応させジア
ゾ化してつくられる。例えはアニリン類をジアゾ化して
、各種の塩で安定化したものを試験片に含有させる方法
がある。
この際、ジアゾ化した物質を安定にする塩として弗化硼
素酸塩、硫酸塩、メタ燐酸塩、アリールスルホネート等
が使用される。また、ジアゾ化した物質を安定にする必
要上、上記溶液を含有した試験片のｐＨを４以下に保持
する為にスルホサリチル酸、メタ燐酸、クエン酸、フタ
ル酸等が緩衝剤として使用される。
素酸塩、硫酸塩、メタ燐酸塩、アリールスルホネート等
が使用される。また、ジアゾ化した物質を安定にする必
要上、上記溶液を含有した試験片のｐＨを４以下に保持
する為にスルホサリチル酸、メタ燐酸、クエン酸、フタ
ル酸等が緩衝剤として使用される。
さらに、試験片に対して試料の吸収性を高め、ビリルビ
ンとの反応性を均一にする為に湿潤剤を含有することが
できる。湿潤剤としては、陽イオン界面活性剤（例えば
、アルキルピリジニウムクロライド）、非イオン界面活
性剤（ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル）
、陰イオン界面活ｉ剤（ドデシルベンゼンスルホン酸）
が挙ケられる。
ンとの反応性を均一にする為に湿潤剤を含有することが
できる。湿潤剤としては、陽イオン界面活性剤（例えば
、アルキルピリジニウムクロライド）、非イオン界面活
性剤（ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル）
、陰イオン界面活ｉ剤（ドデシルベンゼンスルホン酸）
が挙ケられる。
従来技術の問題点
ビリルビンを検出する為の試験片には基本的に、上記に
掲げたようなジアゾニウム化合物、緩衝剤。
掲げたようなジアゾニウム化合物、緩衝剤。
界面活性剤が含有されている。しかし、体液中ビリルビ
ンを測定する際、これら３つの基本物質だけでは、呈色
感度及び体液中の他の物質からの阻害作用による影響の
而でビリルビン濃度を半定し難いばかりでなく、判定不
可能々場合もあるので充分な試験片とは言えない。これ
ら諸問題を検討する為に、反応促進剤として尿素誘導体
又はジフェニル燐酸２反応阻害による影響を除く方法と
して２，６−シクロルベンゼンジアゾニウム塩が使用さ
れているが、ビリルビン検出の為の試験片として検出感
度は良くない。
ンを測定する際、これら３つの基本物質だけでは、呈色
感度及び体液中の他の物質からの阻害作用による影響の
而でビリルビン濃度を半定し難いばかりでなく、判定不
可能々場合もあるので充分な試験片とは言えない。これ
ら諸問題を検討する為に、反応促進剤として尿素誘導体
又はジフェニル燐酸２反応阻害による影響を除く方法と
して２，６−シクロルベンゼンジアゾニウム塩が使用さ
れているが、ビリルビン検出の為の試験片として検出感
度は良くない。
■ 発明の目的
本発明はかかる事情に鑑みて従来の欠点を除去した新規
なビリルビン検出用試験片およびその製造方法を提供す
るものである。
なビリルビン検出用試験片およびその製造方法を提供す
るものである。
本発明のビリルビン検出用試験片は、吸水性担持体に
一般式Ｉ：
ＨＥＮ Ａｒ ５ＯｓＨ（１）
〔式中Ａｒは芳香族炭化水素を表わし、置換基としてア
ミン基が存在することができる〕からなる物質と亜硝酸
塩と水溶性アミノ酸との混合物の層を担持させ、さらに
その層の上に界面活性剤とｐＨ安定剤との混合物の層を
担持させたものである。
ミン基が存在することができる〕からなる物質と亜硝酸
塩と水溶性アミノ酸との混合物の層を担持させ、さらに
その層の上に界面活性剤とｐＨ安定剤との混合物の層を
担持させたものである。
さらに、好ましくは前記水溶性アミノ酸はグリシン、ア
ラニン、バリンの群から選ばれた水溶性アミノ酸である
。また、本発明のビリルビン検出用試験片の製造方法は
、吸収性担持体に 一般式■： Ｈ２Ｎ−Ａｒ ５Ｏ３Ｈ（１） 〔式中、Ａｒは芳香族炭化水素を表わし、置換基として
アミン基が存在することができる〕からなる物質と亜硝
酸塩と水溶性アミノ酸との水溶液を含浸させ、乾燥させ
た後に界面活性剤とｐＨ安定剤との有機溶媒溶液を含浸
させさらに乾燥させるものである。
ラニン、バリンの群から選ばれた水溶性アミノ酸である
。また、本発明のビリルビン検出用試験片の製造方法は
、吸収性担持体に 一般式■： Ｈ２Ｎ−Ａｒ ５Ｏ３Ｈ（１） 〔式中、Ａｒは芳香族炭化水素を表わし、置換基として
アミン基が存在することができる〕からなる物質と亜硝
酸塩と水溶性アミノ酸との水溶液を含浸させ、乾燥させ
た後に界面活性剤とｐＨ安定剤との有機溶媒溶液を含浸
させさらに乾燥させるものである。
さらに好ましくは、前記水溶性アミノ酸はグリシン、ア
ラニン及びバリンの群から選ばれた少なくとも一つを含
むものである。
ラニン及びバリンの群から選ばれた少なくとも一つを含
むものである。
■発明の詳細な説明
本発明において有利に使用し得る一般式Ｉは、スルファ
ニル酸、４−アミノ−１−ナフタリンスルホン酸、５−
アミノー１−ナフタリンスルホン酸である。
ニル酸、４−アミノ−１−ナフタリンスルホン酸、５−
アミノー１−ナフタリンスルホン酸である。
一方、試験片として好適な吸収性担持体としては濾紙、
ガラス＃′！約、プラスティック素材から成る不織布等
であり、含浸液と反応したり含浸液に溶解したシせず、
吸収性を有しているものであれば良い。また、溶剤につ
いては混合物が容易に溶けるものであれば良く、有利に
は水、エタノール。
ガラス＃′！約、プラスティック素材から成る不織布等
であり、含浸液と反応したり含浸液に溶解したシせず、
吸収性を有しているものであれば良い。また、溶剤につ
いては混合物が容易に溶けるものであれば良く、有利に
は水、エタノール。
メタノール、アセトン、酢酸エチル、ジメチルスルホキ
シド等が挙げられる。
シド等が挙げられる。
■本発明の具体的作用
次に本発明を更にいくつかの実施例で、詳細に説明する
が、それによって本発明は制限されるものではない。
が、それによって本発明は制限されるものではない。
実施例１
溶液！
スルファニル酸
（一般式１） １２
亜硝酸ナトリウム ０．５２
アミノ酢酸（グリシン） ８？
蒸留水 １００ゴ
溶液■
スルホサリチル酸 １０１トヅシル
ベンゼノスルホン酸ナトリウム ２２エタ
ノール １００ ｍｅ試験片を溶液Ｉ
に含浸して４０℃の乾燥器の中で乾燥する。次に溶液１
で処理した試験片を溶液■に含浸して４０℃の乾燥器の
中で乾燥する。上記のように行なって処理した試験片を
実施例１の試験片とする。
ベンゼノスルホン酸ナトリウム ２２エタ
ノール １００ ｍｅ試験片を溶液Ｉ
に含浸して４０℃の乾燥器の中で乾燥する。次に溶液１
で処理した試験片を溶液■に含浸して４０℃の乾燥器の
中で乾燥する。上記のように行なって処理した試験片を
実施例１の試験片とする。
実施例２
溶液！
亜硝酸ナトリウム ０，５？アラニン
８？ 蒸留水 １００＋＋＋ｅ溶液■ スルホサリチル酸 １０２ツイーン８０
３ｆ エタノール １００ｍｅ ”試験片
を溶液Ｉに含浸して４０℃の乾燥器の中で乾燥する。次
に溶液■で処理した試験片を溶液Ｈに含浸して４０℃の
乾燥器の中で乾燥する。上記のように行なって処理した
試験片を実施例２の試験片とする。
８？ 蒸留水 １００＋＋＋ｅ溶液■ スルホサリチル酸 １０２ツイーン８０
３ｆ エタノール １００ｍｅ ”試験片
を溶液Ｉに含浸して４０℃の乾燥器の中で乾燥する。次
に溶液■で処理した試験片を溶液Ｈに含浸して４０℃の
乾燥器の中で乾燥する。上記のように行なって処理した
試験片を実施例２の試験片とする。
実施例３
溶液Ｉ
５−アミノ−１−ナフタリン刃叶ン酸 １ｆ
亜硝酸ナトリウム ０．５ｆバリン
３７ 水 １００ゴ溶液
■ スルホサリチル酸 １０９ドテシルベン
ゼンスルホン酸３２ エタノール １００ｒｎｌ試験片を溶液
Ｉに含浸して４０℃の乾燥器の中で乾燥する。次に溶液
Ｉで処理した試験片を溶液Ｈに含浸して４０℃の乾燥器
の中で乾燥する。上記のように行なって処理した試験片
を実施例３の試験片とする。
亜硝酸ナトリウム ０．５ｆバリン
３７ 水 １００ゴ溶液
■ スルホサリチル酸 １０９ドテシルベン
ゼンスルホン酸３２ エタノール １００ｒｎｌ試験片を溶液
Ｉに含浸して４０℃の乾燥器の中で乾燥する。次に溶液
Ｉで処理した試験片を溶液Ｈに含浸して４０℃の乾燥器
の中で乾燥する。上記のように行なって処理した試験片
を実施例３の試験片とする。
上記実施例で用いた一般式■の芳香族炭化水素中ＫＢ、
アルキル基、アルコキシ基、ハロケン基。
アルキル基、アルコキシ基、ハロケン基。
アミン基、アリール基、ヒドロキシル基、スルホン酸基
等の置換基が存在し得る。
等の置換基が存在し得る。
また、試験片上のジアゾニウム塩を安定にしておく為に
実施例では、溶液のｐＨを４以下に保持するようなスル
ホサリチル酸を使用したが、これら以外にクエン酸、マ
レイン酸、メタリン酸等のｐＨ安定剤を使用することが
できる。
実施例では、溶液のｐＨを４以下に保持するようなスル
ホサリチル酸を使用したが、これら以外にクエン酸、マ
レイン酸、メタリン酸等のｐＨ安定剤を使用することが
できる。
■発明の具体的効果
以上のように本発明による実施例を掲げたが、本発明に
よる効果を従来使用されている方法、例えば、以下の通
シ示した参考例１及び参考例２と対比しつつ説明する。
よる効果を従来使用されている方法、例えば、以下の通
シ示した参考例１及び参考例２と対比しつつ説明する。
参考例１
２．４−ジクロルアニリン ０
．１？１．５−ナフタレンジスルホン酸ナトリウム
０．６２スルホサリチル酸
７１亜硝酸ナトリウム ０．０５５’メチル
ピニル工寸ト無水マレイン酸共重合体 １？水
５〇−エタノー
ル ５０ノ＋４参考例２ 溶液Ｉ ２．６−シクロルベンゼンジアソーイムフノにオレート
０．１２メタ燐酸 １０９々
エン酸 ３７水
１００ｍ／溶液■ リン酸ジフェニルエステル ５ｆ酢酸エステ
ル １００ゴ溶液含没後の試験片は前記
実施例１乃至実施例３と同様な方法で乾燥処理をする。
．１？１．５−ナフタレンジスルホン酸ナトリウム
０．６２スルホサリチル酸
７１亜硝酸ナトリウム ０．０５５’メチル
ピニル工寸ト無水マレイン酸共重合体 １？水
５〇−エタノー
ル ５０ノ＋４参考例２ 溶液Ｉ ２．６−シクロルベンゼンジアソーイムフノにオレート
０．１２メタ燐酸 １０９々
エン酸 ３７水
１００ｍ／溶液■ リン酸ジフェニルエステル ５ｆ酢酸エステ
ル １００ゴ溶液含没後の試験片は前記
実施例１乃至実施例３と同様な方法で乾燥処理をする。
まず、ビリルビン標準液作成にあたって１．牛結晶ビリ
ルビン５０ｍ９を０．ＩＮ水酸化ナトリウム液１００−
に溶解し、ビリルビン５０■７’ｄｔ溶液とする。次に
この溶液を体液で希釈して、各々０．５ｍｇ／ｄｚ 、
２．５〜／ｄｔ、５■／ｄｔの標準液とする。これら
の標準液に対して、前記実施例１乃至実施例３と参考例
１及び参考例２から得られた各試験片のビリルビン検出
感度を調べた結果を表に示す〇 表 ビリルビンの検出感度 表よシ、本発明による実施例１乃至実施例３に於ては、
各ビリルビン標準液に対して試験片の呈色が鮮明で感度
は良好であった。しかし、従来の方法によると、ビリル
ビン濃度Ｑ、５ｍｇ／ ｄｔの標準液に対しては、参考
例１に於て呈色感度が悪く、参考例２に於ては呈色が不
鮮明で、かつ判定が不可能であった。
ルビン５０ｍ９を０．ＩＮ水酸化ナトリウム液１００−
に溶解し、ビリルビン５０■７’ｄｔ溶液とする。次に
この溶液を体液で希釈して、各々０．５ｍｇ／ｄｚ 、
２．５〜／ｄｔ、５■／ｄｔの標準液とする。これら
の標準液に対して、前記実施例１乃至実施例３と参考例
１及び参考例２から得られた各試験片のビリルビン検出
感度を調べた結果を表に示す〇 表 ビリルビンの検出感度 表よシ、本発明による実施例１乃至実施例３に於ては、
各ビリルビン標準液に対して試験片の呈色が鮮明で感度
は良好であった。しかし、従来の方法によると、ビリル
ビン濃度Ｑ、５ｍｇ／ ｄｔの標準液に対しては、参考
例１に於て呈色感度が悪く、参考例２に於ては呈色が不
鮮明で、かつ判定が不可能であった。
一方、試験液が尿である場合について注目すると、早朝
尿、昼尿、ブドウ糖尿、ウロビリノーゲン尿等に牛結晶
ビリルビンを添加して上記実施例について比較してみる
と、本発明による実施例では感度の低下及び反応阻害は
まったく認められなかった。
尿、昼尿、ブドウ糖尿、ウロビリノーゲン尿等に牛結晶
ビリルビンを添加して上記実施例について比較してみる
と、本発明による実施例では感度の低下及び反応阻害は
まったく認められなかった。
また、本実施例では、一般式Ｉ中の芳香族炭化水素の置
換基としてアミノ基を使用したが、他のハロゲン基、ア
ルキル基、アルコキシ基、ヒドロキシル基及びアリール
基を有した一般式Ｉについても本実施例における同様の
処理をして、試験片を作成してとりルピン検出を行なっ
た結果、実施例１乃至実施例３と同様の効果がみられた
。
換基としてアミノ基を使用したが、他のハロゲン基、ア
ルキル基、アルコキシ基、ヒドロキシル基及びアリール
基を有した一般式Ｉについても本実施例における同様の
処理をして、試験片を作成してとりルピン検出を行なっ
た結果、実施例１乃至実施例３と同様の効果がみられた
。
しかして、本発明は体液中のビリルビンを正確に、しか
も迅速に検出し、その濃度を判定することができる。す
なわち、本発明によればビリルビン検出の為の試験片の
呈色感度を高め、体液中の他の物質による反応阻害をな
くし、これにより体液中のビリルビンを精確かつ容易に
検出することができる。
も迅速に検出し、その濃度を判定することができる。す
なわち、本発明によればビリルビン検出の為の試験片の
呈色感度を高め、体液中の他の物質による反応阻害をな
くし、これにより体液中のビリルビンを精確かつ容易に
検出することができる。
従って、本発明によるビリルビン検出用試験片を使用す
ることによって、肝疾患から誘起された体液中ビリルビ
ン増加を伴った肝臓病患者の識別を精確かつ容易にそし
て即座に行なうことができる。
ることによって、肝疾患から誘起された体液中ビリルビ
ン増加を伴った肝臓病患者の識別を精確かつ容易にそし
て即座に行なうことができる。
また、本願発明の方法に゛よれは、上記のような効果を
有するビリルビン検出用試験片を容易に製造することが
できる。
有するビリルビン検出用試験片を容易に製造することが
できる。
特許出願人 チル七株式会社
情人昶士 志木 浩
Claims (4)
- （１）吸水性担持体に 一般式ｌ： Ｈ２Ｎ−Ａｒ −８Ｏｓ Ｈ（１） 〔式中、Ａｒは芳香族炭化水素を表わし、置換基として
アミン基が存在することができる〕からなる物質と亜硝
酸塩と水溶性アミノ酸との混合物の層を担持させ、さら
にその層の上に界面活性剤とｐＨ安定剤との混合物の層
を担持させたことを特徴とするビリルビン検出用試験片
。 - （２）前記水溶性アミノ酸がグリシン、アラニン。 バリンの群から選ばれた少なくとも１つの水溶性アミノ
酸である特許請求の範囲第１項記載のビリルビン検出用
試験片。 （以下余白） - （３）吸収性担持体に 一般式ｌ： Ｈ２Ｎ Ａｒ−８ＯｓＨ（Ｉ） 〔式中Ａｒは芳香族炭化水素を表わし、置換基としてア
ミン基が存在することができる〕からなる物質と亜硝酸
塩と水溶性アミノ酸との水溶液を含浸させ、乾燥させた
後に界面活性剤とｐＨ安定剤との有機溶媒溶液を含浸さ
せ、さらに乾燥させることを特徴とするビリルビン検出
用試験片の製造方法。 - （４）前記水溶性アミノ酸がグリシン、アラニン。 バリンの群から選ばれた少なくとも１つの水溶性アミノ
酸である特許請求の範囲第３項記載のビリルビン検出用
試験片の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3009584A JPS59166862A (ja) | 1984-02-20 | 1984-02-20 | ビリルビン検出用試験片およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3009584A JPS59166862A (ja) | 1984-02-20 | 1984-02-20 | ビリルビン検出用試験片およびその製造方法 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8443379A Division JPS5610255A (en) | 1979-07-05 | 1979-07-05 | Bilirubin detecting test piece |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59166862A true JPS59166862A (ja) | 1984-09-20 |
Family
ID=12294221
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3009584A Pending JPS59166862A (ja) | 1984-02-20 | 1984-02-20 | ビリルビン検出用試験片およびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59166862A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996017251A1 (fr) * | 1994-12-02 | 1996-06-06 | Nitto Boseki Co., Ltd. | Procede de determination quantitative de bilirubine |
| CN105628634A (zh) * | 2016-03-02 | 2016-06-01 | 山东安博仪器股份有限公司 | 一种食品中亚硝酸盐的检测试剂及亚硝酸盐的检测方法 |
| WO2016201258A1 (en) * | 2015-06-12 | 2016-12-15 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Colorimetric assay for measuring type i pyrethroids on treated objects |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JPS4960591A (ja) * | 1972-08-17 | 1974-06-12 | ||
| JPS5019492A (ja) * | 1973-05-28 | 1975-02-28 | ||
| US4119401A (en) * | 1977-06-07 | 1978-10-10 | Technicon Instruments Corporation | Total bilirubin assay |
| JPS5433094A (en) * | 1977-08-18 | 1979-03-10 | Terumo Corp | Test piece for detecting bilirubin |
-
1984
- 1984-02-20 JP JP3009584A patent/JPS59166862A/ja active Pending
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| US10598643B2 (en) | 2015-06-12 | 2020-03-24 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Colorimetric assay for measuring type I pyrethroids on treated objects |
| CN105628634A (zh) * | 2016-03-02 | 2016-06-01 | 山东安博仪器股份有限公司 | 一种食品中亚硝酸盐的检测试剂及亚硝酸盐的检测方法 |
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