JPS589071A - 抗体検定方法および抗体検定用試薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、水性試料溶液特に血清若しくは血檗等の体液
を試験管中において可溶性抗原に接触せしめることによ
り前記可溶性抗原に反応する前記水性試料溶液に所在の
抗体を検定する抗体検定方法に関する。更に本発明は、
均質の水性試料溶液中に存在し且つ抗原に対し一定の反
応を示す抗体の検定および検出用の試薬即ち抗体検定用
試薬に関する。

医学および獣医学上の診断に際しては、抗原即ち一素、
アレルゲン、血清樽中にある微生物等の病原体等の抗原
に反応結合する抗体を検定することが必要とされている
。前記抗体は、抗免疫グロブリン試薬即ち技工ｇ試薬に
よって判別できる免疫グロブリン（工ｇと称す）を包有
した蛋白質である。

前記抗免疫グロブリン試薬即ち抗ｘｇ試薬は、放射性同
位元素、酵素、螢光染料等と結合するととＫよって即ち
放射性同位元素、酔素、螢光染料等に。よって標識付け
るととＫよって検出できる。

抗免疫グロブリン試薬即ち技工ｇ試薬によっては、適宜
の抗原と結合されて抗原抗体１合体（抗原免疫グロブリ
ン櫂合体）となった抗体即ち結合抗体（結合免疫グロブ
リン）と抗原と結合されていない抗体即ち自由抗体（自
由免疫グロブリン）とを判別できない、従って抗免疫グ
ロブリン試薬即ち抗ｘｇ試薬を用いた抗体検定方法にお
いては結合抗体即ち抗原抗体複合体と自由抗体即ち自由
免疫グロブリンとを物理的°に゛分離する必要がある。

抗原が実質的に抗体即ち免疫グロブリンよりも大きい場
合、結合抗体（結合免疫グロブリン）即ち抗原抗体複合
体（抗原免疫グロブリン１合体）は自由抗体即ち自由免
疫グロブリンよりも明らかに大きい０例えば赤血球抗原
に結合され【いない抗体な検定する場合、自由抗体即ち
自由免疫グロブリンと前記赤血球抗原に結合された抗体
（結合グロブリン）即ち抗原抗体複合体（抗原免疫グロ
ブリン１合体）とを遠心分離によって分離すればよい。

抗原が比較的に小さい場合、前記抗原を人為的に増大せ
しめて抗体の検定を行なっている０通常抗原を重合せし
めるか、不溶性担体即ち固相担体と結合せしめるかによ
って抗原を増大せしめている。特に試験管の内壁固着し
くけプラスチックビーズの表面に抗原を吸着せしめる方
法が好適である。更に、抗原が共有結合される化学反応
性担体例えば臭化シアン′（ＯＮ１３Ｆ）によって活性
化された紙デ１スクも利用されている。

両国特許第１６２Ｊ　０９号には、洗浄によって抗原が
除去されないように不溶性担体重゛合体に前記抗原を結
合せしめる上述の如き抗体検定方法が開示されている。

増大された抗原が水性試料溶液中に好適な状態で配置さ
れている場合、結合抗体即ち結合免疫グロブリンと自由
抗体即ち自由免疫グロブリンとを物理的に分離すること
は極めて容ｉである。自由抗体即ち自由免疫グロブリン
は洗浄によって除去でき、結合抗体即ち結合免疫グロブ
リンは標識抗免疫グロブリン試薬即ち標繊抗Ｘｇ試薬に
よって検出乃至定量できる。

両国特許第１６２，２０９号に開示された上述の抗体検
定方法には、抗体を包有した水性試料溶液の表層に多数
の抗原分子が集合する難点がある。この反応条件は生理
学的条件即ち抗原が抗体と生体中で反応する場合の条件
と全く別異である。

両国特許第１６２Ｊ　Ｏ９号に開示された上述の抗体検
定方法には、多数の抗原に対する抗体反応を調べる必要
がある場合に固相担体に結合された抗原を多数率”備す
ることを必要とする欠点もある。

本発明は、上述の諸欠点を除去できる抗体検定方法およ
び抗体検定“用試薬を提供するにある。

本発明の抗体検定方法は、（１）変性抗原が水性試料溶
液中に溶解された抗原と抗体との反応が均質の前記水性
試料溶液中で実行できるよう識別基によ゛つて抗原を変
性する工程−と、（■）水性試料溶液中に抗体が存在す
る場合抗体と変性抗原との結合抗体即ち抗原抗体反応体
を前記識別基と反応する沈澱試薬即ち不溶性試薬によっ
て水性試料溶液から分離する工程と、（−）水性試料溶
液から分離された結合抗体を周知の方法で検出乃至定量
する工程とを包有している。

本発明の抗体検定法においては、均質な水性試料溶液中
で抗原抗体反応が実行されるように面相担体に結合され
た抗原に代え可溶性の変性抗原が利用されている。抗原
は、水性試料溶液中に自由抗体即ち自由免疫グロブリン
が残留した状態で、前記抗原および結合抗体を前記水性
試料溶液から分離できるよう変性せしめられる。

本発明の抗原の変性は、抗原に識別基知を与えるととＫ
よって行なわれている。水性試料溶液からの変性抗原お
よび前記変性抗原に抗体の結合された結合抗体即ち結合
免疫グロブリンの分離は、識別基町と反応する沈澱試薬
即ち不溶性試薬を用いて行なわれている。前記沈澱試薬
即ち不溶性試薬は抗識別基試薬乃至抗■試薬と称される
。

本発明の抗体検定方法においては、識別基（旬と抗識別
基（抗Ｈ）との反応即ち結合のための４４に件即ち （１）変性抗原と抗体との結合が破壊されない釦自由抗
体即ち自由免疫グロブリンが抗識別基（抗Ｈ）と反応し
ない （−）水性試料溶液中の他の成分が過度に干渉しない ・Ｖ）免疫グロブリン検定試薬が抗免疫グロブリンと反
応するよう水性試料溶液中に残留するが満足されること
が重要である。

本発明の抗体検定方法の特徴は、抗原と抗体との反応即
ち結合が均質の水性試料溶液中で実行されることＫある
。本発明の抗体検定方法の他の特徴は、多数の抗原に対
する抗体を検定する場合にあっても単一の沈澱゛試薬即
ち不溶性試薬を使用すれば十分であることにある。

本発明の抗体検定方法は、識別基環１とし【ハプテンが
使用され、固相担体に結合された抗ハプテ／抗体が抗識
別基試薬（抗Ｈ試薬）として使用されると良好な結果が
得られる。

本発明の抗体検定方法におい【ノ・ブテンとして特に好
ましいのは、トリニトロフェニル（ＴＮＰ）である。

更に１本発明の抗体検定方法においては、ビオチンが瞭
別基卸として使用され、且つ固相担体に連結されたアビ
ジンが沈澱試薬即ち不溶性試薬として使用されても良好
の結果が得られる。

同相担体としてはポリスチレンビーズ等のプラスチック
ビーズが利用されている。黴量摘定に使用される板即ち
黴量摘定板も固相担体として好適である。

更に、化学的に活性化された不溶性重合体特に東北シア
ン（ＯＭＢｒ）によつ【活性化されたアガロースビーズ
な固相担体として利用すれば好適である。

識別基（６）と抗識別基（抗Ｈ）との間の結合は、化学
的共有結合例えばアルデヒド基とヒドラジン基との共有
結合若しくは非共有結合例えばビオチンとアビジンとの
非共有結合・ノ１ブチ／と抗ノ１ブテン抗体との非共有
結合である。

抗体検定方法において不溶性の抗識別基試薬即ち抗■試
−を使用することが欧州特許公開第５２１１号および仏
国特許公開第２４１５３０１号に開示されている。欧州
特許公開第５２１１号および仏国特許公開第２４１５５
０１号に開示の抗体検定方法は競争検定方法であって、
（１）抗体がハプテン、ビオチン等で変性されｓ　（Ｉ
ｌｌ水性試料溶液中の非標識抗原と競争する標識抗原が
利用されている。これに対して、本発明の抗体検定方法
は非競争検定法であって、（１）抗原がハプテン、ビオ
チン等で変性され。

（１水性試料溶液中の抗体と結合される標識抗抗体即ち
標識抗免疫グロブリンが利用されている。

本発明は、均質の水性試料溶液中に存在し成る抗原に反
応する抗体を検定するための抗体検定用試薬を提供する
にあ′る°００本発明抗体検定用試薬は、識別基によっ
て変性された耐水溶性の抗原を包有する第１の試薬と、
前記識別基と反応可能な沈澱試薬即ち不溶性試薬を包有
する第２の試薬と、標識抗抗体即ち標識抗免疫グロブリ
ンを包有する第３の試薬とを包含している。

本発明の抗体検定試薬の好ましい実施例によれば少なく
とも１つの試薬が親液性であることが望ましい。

以下に、本発明の抗体検定方法および抗体検定用試薬を
実験例に沿って説明する。

実験例　工 花粉中の抗原に反応する１ｇｌクラスの抗体について本
発明の抗体検定方法および抗体検定用試薬が試みられた
。前記抗原は％）ＩＪニド０フェニール（ＴＩＰ）基に
よって変性された。固相担体即ちプラスチックビーズに
結合された抗トリニトロフェニール抗体即ち杭ＴＭＰ抗
体を抗識別基試薬即ち抗Ｈ試薬が包有していた。

トリニトロフェニール（ＴＩＰ）基で変性された花粉中
の抗原即ちトリニトロフェニール花粉璽合体即ちＴＩＰ
花粉櫂合体を作成するために、まず最終容積がＯＡ５ｍ
ノとなるようｐＨ９，０の０．２　Ｍ硼酸ナトリウム緩
衝液中で０．１２５ｍｇのトリニトロベンゼンスルホ／
酸と透析された親液性の花粉抽出物５Ｄｍｇとを反応せ
しめて第１の溶液が作成された。

２０乃至２４℃で２時間反応され且つ０乃至４℃で１６
時間反応された後即ち反応時間後に前記第１の溶液は緩
衝剤として燐酸塩の添加された塩水溶液（ＰＢＢ液と称
す）を透析された。

抗トリニトロフェニール抗血清即ち抗ＴＮＰ抗血清は、
トリニトロフェニール（ＴＩＰ　）Ｋよって置換された
牛の血清アルブミンによって羊に免疫をうえるととＫよ
り周知の方法で作成された。トリニトロフェノールセフ
ァローズ（ＴＩＰ−８＠ｐｈａｒｏｓｅ　）上に周知の
方法で吸着せしめることにより前記抗トリニトロフェニ
ール抗血清即ち抗ＴＮＰ抗血清から１ｇｌクラスの抗体
が分離された。トリニトロセファローズに吸着されたｘ
ｇｌＩｉクラスの抗体は、０．１Ｍグリシンと０．１５
　）−１塩化ナトリウムと１０％のジオキサンとを包有
するｐＨ２：５の緩衝液で溶離された。

溶離された工ｇｌｌｉクラスの抗体は、セファデックス
Ｇ　２５　（１３＠ｐｈａｄｅｘ　Ｇ２１５　）の浸透
作用によってＰＨ１＠中に移動されたー １ｇｌクラスの抗体の移動されたＰＩ３１１［の２８〇
−における光学濃度即ち吸光度は０．４００　であった
。

ＰＢＢ液中の抗′トリニトロフェニール抗体即ち杭！Ｍ
Ｐ抗体は、ｐＴＩＱＢの０．ＩＭ　炭酸水素す）　ＩＪ
ウム緩衝液中で前記抗トリニトロフェニール抗体即ち抗
テＭＰ抗体を含むＰＢＢ液を２０倍に稀釈し且つ２０乃
至８４℃の温度に１６時間維持することにより径がｘ／
ｊであるポリスチレンビーズ上に吸着された。

花粉に対する１ｇｌクラスの抗体を検定するために、ト
リニトロフェニール花肴書合体即ち’ｒＮＰ花粉１合体
が４００＃ｆに稀釈され且つ０．５％Ｂｅム　と０．０
２％のトウ１−ン２０　（Ｔｗａｉｎ　−２０）　　と
を包有したＰＢ８液１１００ｓｊ　Ｋ夫々花、粉熱（１
ｌａ７ｆ＠ｖ＠ｒ　）患者Ｐから採取した５０声ノの血
清と対照者Ｃから採取した５０声ノの血清とが添加され
た。血清の添加されたＰＩ３　ｆｌｉは２０乃至２４℃
の温度に６時間にわたり維持された。

抗トリニトロフェニール抗体の吸着されたポリスチレン
ビーズは非吸着の抗トリニトロフェニール抗体を除去す
るよう洗浄され、次いで血清とトリ“ト°△８°−“花
粉１合体反０ち７ゞ１花勅管合体との反応混合物中に移
動された。２ｏ乃至２４℃に１６時間維持した後非結合
抗体がポリスチレンビーズを洗浄するととｋより除去さ
れた。花粉に結合されたｘｇＥり一ラスの結合抗体は１
２′工によって標詭付けた抗１ｇ１ｌ！試薬によって検
出され且つ定量された。その結果は次表の如くであった
。

５０μｍ　　　　ｉ　　　　　　　５０．２５０μｌ　
　　　　　　２５　　　　　　　　　　　３５．１５５
０ｊ１　　　　　　　　５０　　　　　　　　　　　　
　　　　２フ、８５０μｍ　　　　　　　　１００　　
　　　　　　　　　　　　　　　１７．５５０μｌ　　
　　　　２００　　　　　　　　　　　．１１．６５０
μｌ　　　　　　　４００　　　　　　　　　　　　　
　　　　　フ、６１５０４１　　　　　８００　　　　
　　　　　　　　　４．６５０μｍ１・６００　　　　
　　　　　　　　　３．１５０μｍ　　　　　３８００
　　　　　　　　　　　　　２．５６０μｍ　　　　　
６４００　　　　　　　　　　　　　１．９ｓｏ４ｔ　
　　　１２８００　　　　　　　　　　　　　１．５対
照者０ ５０＃１　　　　　　　１　　　　　　　　　　　　　
１．０実験例■ 糖蛋白質のアビジ／はビオチンに対する化学親和力が高
い（Ｋ、−Ｎｏ−”６Ｍ−１）。固相担体にアビジンを
結合し抗原にビオチンを結合したところ抗原の結合され
た免疫グロブリン即ち結合免疫グロブリン（結合抗体）
と抗原の結合されていない免疫グロブリン即ち自由免疫
グロブリン（自由抗体）との分離が可能となる。

アビジンは、毅化シアン（ＯＮＢｒ）　　によって活性
化されたセファロース４Ｂ　（８＠ｐｈａｒｏｓｅ　−
４Ｂ　）Ｋ対し周知の方法により共有結合された。　３
ＢｗｒＨのアビジンがｉｎノのセファロース（８＠ｐｈ
ａｒｏｓ・）と結合すれた。アビジンとセファロース（
８＊ｐｈａｒｏｓｅ　）との反応生成物即ちアビジンセ
ファロース１１合体（ａｖｉｄｉｎ　−１３ｅｐｈａｒ
ｏｓｅ　）は３５０ｍノのＰＢ８液中に分散され、ＰＨ
６液が懸濁されていた。

ビオチンと花粉との結合体即ちビオチン花粉豐合物は、
　　１ｍｇの花粉を含む０．δｔａｊｆ）　ＰＨ６液と
２４０　ｆｉｌｌのビオチ／スクシンイ建ド複合体（ｂ
ｉｏｔｉｎ　−５ｕｃｃ−１１ｈＬ　１１１１（］・）
を含む２０μｍ　のジメチルホルムアミ１ドとを３０乃
至２４℃の温度で４時間反応せしめて生成された。

花粉と結合されず活性化されなかったビオチンスクシン
イミド書合体は、ＰＨ６液に対して１６時間にわたって
透析することにより除去された。

花粉に対する１ｇｌｌクラスの抗体を検定するために、
ビオチン在役複合体が１００！ＩＣ稀釈され且つ０．６
％Ｂ８Ａとｏ、ｏａ％のトウイー７２０　（Ｔｖｓｅｎ
−”）とを包“有したＰＢａ液５０．ｍｌに夫々花粉熱
（Ｈａｙｆａｖｓｒ　）患者Ｐから採取した５０ｊ１　
の血清と対照者。から採取した５０μｍの血清とが添加
された。血清の添加されたＰＨ６液は２ｏ乃至２４℃の
温度に１時間にわたり維持された０次Ｋ　Ｏ，５ｍｌ　
のアビジンセファロース複合体懸濁液が添加され、更に
牛の血清アルジミンとエチレンジアミン四酢酸ナトリウ
ム（ｓｏ　ｄ　ｉｕｍ　ＩＤＴＡ）とを含む１！５０７
１１のＰＨ６液が添加された。混合液は回転器上に１６
乃至１１’４時間載置された。

セファロース蛋白質１合体即ちアビジンセファロース複
合体が懸濁液から遠心分離によって分離された。０．９
％塩水溶液によってセファロースビーズを洗浄すること
により自由免疫グロブリン即ち自由抗体が除去された。

七フ７ｏ−ス蛋白質１１．合体即ちアビジンセファロー
ス書合体の懸濁液にｔｔ５工で標識付けられた技工ｇＩ
ｌｉ試薬を添加することＫより結合ｘｇＩＣの定量が行
なわれた。その結果は次表の如くであった。

花粉熱患者Ｐ ５０声１　　　　　　　　２４　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　３２．１５０μｍ　　　　　５０　
　　　　　　　　２０．６δ０Ｊｌ１１　　　１００　
　　　　　　　　１！５．１５０７１１　　　　捻６Ｑ
　　　　　　　　　　　６４６０μｌ　　　　ｓｏｂ　
　　　　　　　　　　４．９対照者Ｃ ６０μｌ　　　　　ｌ　　　　　　　　　　　Ｏ，＋５
手続補正書 昭和５７年７月２６日 特許庁長官　若　杉　和　夫　殿 １、事件の表示 昭和５７年特許願第７”１５９１号 ２・　発明　の名称 抗体横型方法および抗体検定用試薬 ３、補正をする者 ４、代　理　人 住　所　　　〒１６０東京都新宿区西新宿７丁目５番１
０号第２ミゾタビルディング７階 電話（０３）　３６５−１９８２番 昭和　　年　　月　　日 ６、補正により増加する発明の数　　　ナシ７、補正の
対象 １、％′許請求の範囲を訳文のように訂正する。

「（１）血清血漿等の水性試料溶液を試験管中で可溶性
抗原Ｋｍ触せしめ、前記可溶性抗原に反応する前記水性
試料溶液に所在の抗体を検定する抗体検定方法において
、抗原が識別基によって変性され且つ前記水性試料溶液
中に溶解されて前記抗体と均質な水性試料溶液中で反応
し、前記識別基に結合する沈澱試薬によって前記水性試
料ｌ＃液から変性抗原に結合された抗体が分離され、分
離された抗体が検定されてなることを特徴とする抗体検
定方法。

（２１１ｌＩｌ別基がハプテンであシ、沈澱試薬が固相
担体に結合された抗ハプテン抗体であることを特徴とす
る特許請求の範囲第１項記載の抗体検定方法。

（３）ハプテンがトリニトロフェニールであることを特
徴とする特許請求の範囲第２項記載の抗体検定方法。

（４１識別基がビオチンであシ、沈澱試薬が同相担体に
結合されたアビジンであることを特徴とする特許請求の
範囲第１項記載の抗体検定方法。

（６）固相担体がプラスチックビーズであることを特徴
とする特許請求の範囲第２項乃至第４項のいずれか一項
記載の抗体検定方法。

（６）固相単体が微量摘定板であることを特徴とする特
許請求の範囲第２項乃至第４項のいずれか一項記載の抗
体検定方法。

（７）固相担体が化学的に活性化された不溶性重合体で
あることを特徴とする特許請求の範囲１１１２項乃至第
４項のいずれか一項記載の抗体検定方法。

（８）不溶性重合体が臭化シアンで活性化されたアガ四
−ズビーズであることを特徴とする特許請求の範８１８
７項記載の抗体検定方法。

（９）血清血漿等の拘置な水性試料溶液中に所在し且つ
抗原に対し反応する抗体を検定する抗体検定用試薬にお
いて 識別基によって変性された耐水溶性の抗原を包有する第
１の試薬と、 前記識別基と反応可能な沈澱試薬を包有する第を包含し
てなることを特徴とする抗体検定用試薬。

（Ｉｏ）第１乃至第３の試薬のうち少なくとも１つが親
液性であることを特徴とする特許請求の範囲第９項記載
の抗体検定用試薬。」 Ｌ　明細書第９頁第９行の「徽」を「ポリスチレン等の
プラスチック製の黴」と訂正する。

３、＠細書嬉１１頁第７行の「体」を「体即ち免疫グロ
ブリン１を含む免疫グロブリンの群に属する抗体」と訂
正する。

４、　明細書第１１頁第１８行の「液」を「液即ち、０
．２モル硼酸ナトリウム緩衛液（以下モルをＭと示す）
」と訂正する。

５、°明細書第１２頁第７行の「イン」を「イン（以下
ＢＡＡと示す）」と訂正する。

６　　ｌｉｄ書第１２頁第９行の「Ｔ１１ｒ　−ａすｈ
ａｒｏｓ＠Ｊを「テ３１Ｐ　　８ｓｐｈａｒｏｓｓ　：
ここにセファローズ（８・ｐｂａｒｏ−・）とはスエー
デン国　ウプサラ市所在のファーｉシア（Ｐｈａｒｍａ
ａｉａ　）社製のアガローズビーズであ）以下にセファ
ローズ−４１（ａｅｐｈａｒｏｓｅ−４Ｂ）と示される
こともある」と訂正する。

７．１１細書第１２頁第１４行の「−」を「ｆｉ（Ｚｏ
。

Ｗ１１Ｔｏ＆Ｊｆａｐｒの割合）」と訂正する。

８、　明細書第１２頁第１７行の「）」を「；これはス
エーデン国　ウプサラ市所在の７フーマシア（Ｐｈａｒ
ｍａｏｉａ　）社製の交叉結合されたデキストランであ
る）」と訂正する。

９、　明細書第１３頁第６行の「イ」を「約６．４　ａ
ｍ（ｌ／４インチ）」と訂正する。

１Ｇ、　　明細書第１３頁第１θ行の「０．５　％　Ｂ
ＡＡ」を［ｏ、ｓ　ｍ　ｃｏ　ＢＡＡ　Ｊと訂正する。

１１、明細書第１１頁第１８行の「）」を「；これはべ
一力（Ｂａｋ＠ｒ　）　社−製のポリオキシエチレンソ
ルビクンモノラウレートである）」と訂正する。

１２、　１ｊｉ細書ｊｌ　１５１１１Ｋ　３　行ＯｒＭ
−”　Ｊ　ｔ　ｒＭ−’ｙ−１０−”モル／１゛」と訂
正する。

１３、＠細書第１６頁第８行Ｏｒ０．５１１Ｊを「ｏ、
ｓ　−の」と訂正する。

１４、　　Ｆ！４細書細工第１６頁第８ｎ−２０４と訂
正する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）血清血漿等の水性試料溶液を試験管中で可溶性抗
   原に接触せしめ、前記可溶性抗原に反応する。前記水性
   試料溶液に所在の抗体を検定する抗体検定方法において
   、抗原が識別基によって変性され且つ前記水性試料溶液
   中ＫＪＩＩ解されて前記抗体と均質な水性試料溶液中で
   反応し、前記識別基に結合する沈澱試薬によって前記水
   性試料溶液から変性抗原に結合された抗体が分離され、
   分離された抗体が検定されてなることを特徴とする抗体
   検定方法。 （２）識別基がハプテンであり、沈澱試薬が固相担体に
   結合さ′れた抗ハプテン抗体であることを特徴とする特
   許請求の範囲第１項記載の抗体検定方法。 特徴とする特許請求の範囲第２項記載の抗体検定方法。 （４）識別基がビオチンであり、沈澱試薬が固相担体に
   結合されたアビジンであることを特徴とする特許請求の
   範囲第１項記載の抗体検定方法。 （５）固相担体がプラスチックビーズであることを特徴
   とする特許請求の範囲第２項乃至第４項のいずれか一項
   記載の抗体検定方法。 （６）固相担体が黴量摘定板であることを特徴とする特
   許請求の範囲第２項乃至第１項のいずれか一項記載の抗
   体検定方法。 （７）固相担体が化学的に活性化された不溶性重合体で
   あることを特徴とする特許請求の範囲第２項乃至第４項
   のいずれか一項記載の抗体検定方法。 （８）不溶性重合体が灰化シアンで活性化されたアガロ
   ーズビーズであることを特徴とする特許請求の範囲第７
   項記載の抗体検定方法。 （９）血清血漿等の均質な水性試料溶液中に所在し且つ
   抗原に対し反応する抗体を検定する抗体検定用試薬にお
   いて 識別基によって変性された可水溶性の抗原を包有する第
   １の試薬と、 前記識別基と反応可能な沈澱試薬を包有する第２の試薬
   と、 標織抗抗体を包有する第３の試薬と を包含してなることを特徴とする抗体検定用試薬。 Ｊｌ第１乃至第３の試薬のうち少なくとも１つが親液性
   であることを特徴とする特許請求の範囲第１０項記載の
   抗体検定用試薬。