JPS5849317A - 抗悪性新生物剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １０発明の背景 技術分野 本発明は、センダン樹皮の熱水抽出物を有効成分とする
新規な抗悪性新生物剤に関する。

本剤は、特に悪性腫瘍の治療に有用である。

先行技術 センダン樹皮は漢方で苦欅皮（クレンビ）と称し、煎じ
て回虫、鉤虫、条虫の駆除あるいは、マラリア熱の治療
に使用されている。しかしセンダン樹皮に抗悪性新生物
作用を有する成分が含まれていることは従来知られてい
ない。

■１発明の目・的 本発明者等はセンダン樹皮に含まれている成分の薬理作
用について鋭意研究を重ねた結果、センダン樹皮の熱水
抽出物が優れた抗悪性新生物作用を有することを知った
。

従って本発明の目的は、センダン樹皮の熱水抽出物を有
効成分とする抗悪性新生物剤を提供することにある。

■０発明の詳細な説明 本発明の抗悪性新生物剤において有効成分として使用す
不センダン樹皮抽出物は、センダン樹皮を熱水で抽出処
理することによって得られる。

本発明において、センダン樹皮とは、センダン（Ｍｅｌ
ｉａ　ａｚｅｄａｒａｃｈ　Ｌ＝　ｖａｒ−ｊａｐｏｎ
ｉｃａ　Ｍａｋｉｎｏ　）　％タイワンセンダン（Ｍｅ
ｌｉａ　ａｚｅｄａｒａｃｈ　Ｌ、　）またはトウセン
ダン（Ｍｅｌｉａ　ａｚｅｄａｒａｃｈ　ｖａｒ−ｔｏ
ｏｓｅｎｄａｎ　Ｍａｋｉｎｏ）の樹皮を意味する。

樹皮は乾燥細断したものが望ましく、市販の苦譚皮が好
適に使用される。

本発明の抽出物は、上記樹皮に熱水を加えるか、あるい
は上記樹皮に水を加えその混合物を加熱沸騰させ、ｐ過
後、Ｆ液から水を除去することにより得られる。加熱は
沸騰水浴中または直火で行うことができる。抽出時間は
原料の種類、品質等に従って適宜決定されるが通常数時
間乃至２日間程度である。抽出処理終了後、抽出混合物
を沖過することにより抽出液を得る。かくして得られた
抽出液を濃縮乾固、凍結乾燥あるいはスプレードライ処
理することにより目的の抽出物が得られる。

本発明においては、センダン樹皮を室温（０〜４０℃）
の水または極性有機溶媒で抽出前処理し、あるいは極性
有機溶媒と室温の水で順次抽出前処理し、得られた抽出
残渣を熱水で抽出処理すると不純物がよシ少ない抽出物
が得られる。前処理に使用される極性有機溶媒の例とし
ては、メタノール、エタノール、ｎ−、Ｏロバノール、
イングロパノール、ｎ−ブタノールのようなアルコール
、ピリジン、アセトン等が挙げられる。

本発明においてはさらに、上記室温の水または極性有機
溶媒の前処理に先立って、さらに非極性有機溶媒、例エ
バ、ベンゼン、トルエン、キシレン、ｎ−へキサン、ク
ロロホルム、四塩化炭素、酢酸エチル等によって抽出前
処理をすることもできる。

上記の各前処理工程は、原料に適当量の溶媒を加え、室
温で常法に従って不要な成分を抽出除去することによっ
て行なわれる。

本発明においては、上記の如くして得られた熱水抽出液
をアルコール沈澱処理または透析膜処理して得られる抽
出精製物を有効成分とすることもできる。

アルコール沈澱処理を行う場合には、上記抽出液にアル
コール例えばメタノール、エタノール等を加え、生成し
た沈澱を採取する。アルコールは抽出液中のアルコール
濃度が５０〜９５％、特に８０％前後となるような量加
えるのが望ましい。

抽出液中に生成した沈澱は常法によシ、例えばｐ過また
゛は遠心分離によシ採取し、凍結乾燥、通風乾燥または
真空乾燥等により乾燥する。透析膜処理を行う場合には
、上記抽出液を透析膜内に入れ水に対して透析し、透析
内液を濃縮乾固、凍結乾′燥等により乾燥して目的の抽
出精製物を得る。透析膜としては、分画分子量６，００
０〜１０，０００のもの、例えばスペクトラ−，２ア１
または６　（Ｓｐｅｃｔｒａ　Ｐｏｒｌまたは６）〔ス
ペクトラム・メディカル・インダストリーズ社（Ｓｐｅ
ｃｔｒｕｍＭｅｄｉｃａｌ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ　Ｃ
ｏ、）製品〕または、ビスキングチューブ（Ｖｉｓｋｉ
ｎｇｔｕｂｅ）（ユニオンカーバイト社（Ｕｎｉｏｎ　
ＣａｒｂｉｄｅＣａｒｐ、　　）製品〕が使用される。

上記アルコール沈澱処理または透析膜処理においては、
センダン樹皮の熱水抽出液を蒸発乾固、凍結乾燥あるい
はスプレードライヤー処理して抽出物を得、これを再び
水に溶解したものに上記精製処理を施してもよい。

本発明におけるセンダン樹皮抽出物の特性は次の通りで
ある。

１）色と形状 淡黄褐色粉末 ２）紫外線吸収スペクトル 第１図に示す通りである（実施例４抽出物）。

ＵＶλｍａｘ２７７ｎｍ ３）赤外線吸収スペクトル 第２図に示す通りである（実施例４抽出物）。

ＩＲｙ、、、””　ｃｒｒｔ−’　：３３５０　、１６
１０’、　１０２０４）溶解性 水Ｋ　ＥＴ　溶。ベンゼン、エタノール、酢酸エチルに
不溶。

５）分子量 スきクトラポア透析の結果から１００００以上６）急性
毒性 ＩＣＲ雄性雄性４マ令マウス腔内投与で８００ηＡｇ（
ＬＤ５ｏ） 本発明の抗悪性新生物剤は、種々の悪性新生物、特に悪
性腫瘍に対して抑制効果を有する。例えば、後述する如
く、ザルコーマ１８０腹水ガンおよび固形ガン、Ｐ３８
８マウス白血病等に対して優れた抑制効果を有する。

本発明の抗悪性新生物剤を投ムするに際しては、例えば
、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射にょ′る非経口投
与、または錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ
剤等による経口投与をあげることができる。本抽出物の
投与量は投与経路、患者の年令、体重、症状によって異
なるが成人男子に対して１日約１〜５ｆである。

本発明の抽出物は、常法に従って製剤化され投与される
。例えば、本抽出物の乾燥粉末をバイアル等の容器にい
れ、別にアンプル等の容器に生理食塩水、ブドウ糖液あ
るいはカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、懸濁液
を用意し、用時粉末を懸濁溶解して注射する。その他、
エマルジョンにして注射してもよい。例えば油中水（Ｗ
ｌｏ）型エマルゾョンの場合は流動ツクラフイン等の鉱
物油、ゴマ油、ビーナツツ油等の植物油にンルビタン脂
肪酸エステル等の界面活性剤を組み合せて用いる。

次に実施例および製剤例をあげて本発明をさらに具体的
に説明する。

実施例１゜ 市販の苦舛皮３０．０７に熱水３００−を加え３時間抽
出処理を行なった。抽出混合物を沖過して熱水抽出液を
得た。抽出残渣に再び熱水３０ｏｒｎ１．を加え、上記
と同様に抽出処理を行った。この操作を計３回行ない、
熱水抽出液３回分を集め、ロータリーエバポレーターを
用いて濃縮乾固し、粉末化した。熱水抽出物２５０９．
８７Ｑが得られた。

実施例２゜ 市販の苦株皮３０．０！ｉ＋−にメタノール３００　ｍ
７！を加え８時間抽出前処理を行ない、抽出混合物を濾
過した。抽出残渣にメタノール３００−を加えて上記と
同様に抽出前処理を行なった。この抽出前処理操作を計
３回行なった。得られた抽出残渣に水３００１１１１を
加え、沸騰水浴中で約３時間熱水抽出を行なった。この
熱水抽出操作を計３回行ない、得られた熱水抽出液を集
め、ロータリーエバポレーターを用いて濃縮乾固し、熱
水抽出物２’３７１．７■を得た。

実施例３゜ メタノールの代シに室温の水で抽出前処理する以外は実
施例２と同様に抽出処理操作を行ない熱水抽出物６０２
．４ｍＩｊを得た。

実施例４゜ 市販の苦棟皮３０．０７にメタノール３００−を加え、
室温で約８時間抽出前処理を行ない、抽出混合物を濾過
した。抽出残渣にメタノール３００ｍを加え、上記と同
様に抽出前処理を行なった。この抽出前処理操作を計３
回行なった。得られた抽出残渣を実施例３と同様に室温
の水で抽出前処理し、得られた抽出残渣を熱水抽出して
熱水抽出物５７７．８１ｎ９を得た。

実施例５゜ 市販の苦律皮の代シにセンダンの乾燥樹皮を使用する以
外は、実施例４と同様に抽出前処理操作および抽出処理
操作を行ない、熱水抽出物３０９．１■を得た。

実施例６゜ 市販の苦櫟皮３０．Ｏｆ！−にベンゼン３００ｍｇを加
え、室温で８時間抽出前処理を行なった。抽出混合物を
沖過し、残渣に再びベンゼン３００　ｍｊ；、を加え、
上記と同様に抽出前処理を行なった。この操作を計３回
行なった。かくして得られた抽出残渣について、実施例
４と同様にしてメタノール次いで室温の水で抽出前処理
を行ない、得られた抽出残渣を熱水で抽出して熱水抽出
物５９８．４〜を得た。

実施例７゜ 市販の苦神皮の代シにセンダンの乾燥樹皮を使用する以
外は実施例６と同様に抽出前処理および抽出処理を行な
い、熱水抽出物３１３．２ｍｇを得た。

実施例８゜ 実施例６と同様に操作して得られたセンダン樹皮熱水抽
出物１．００７を水５０ｍｅに溶かし、この水溶液に９
９チエタノールをゆっくシと加え、該水溶液中のエタノ
ール濃度が５０係になったときに添加をやめ、しばらく
攪拌した。生成した沈澱を遠ｊ６分離によシ集め、５０
％エタノール、９９俤エタノールおよびエフチルで順次
洗浄し、真空下で乾燥してセンダン樹皮熱水抽出精製物
２７７．１〜を得た。

実施例９ 実施例８においてセンダン樹皮抽出物の水溶液中のエタ
ノール濃度を８０係とする以外は実施例８と全く同様に
操作してセンダン樹皮熱水抽出精製物４２５．３ｍ９を
得た。

実施例１０゜ 実施例６と同様に操作して得られたセンダン樹皮熱水抽
出ｖ！１１．００ｇ−を微粉末とし、これに８０係エタ
ノールを加え、十分に攪拌懸濁させた。遠心分離によっ
て不溶部分を集め、８０％エタノール、９９係エタノー
ルおよびエーテルで洗浄し、真空下で乾燥してセンダン
樹皮熱水抽出精製物６２６．４ｍ９を得た。

実施例１１゜ 実施例６と同様に操作して得られたセンダン樹皮熱水抽
出物１．００７を水２００−に溶かし、得られた水溶液
をスペクトラＩアロ（分画分子量１ｏ、ｏｏＯ）に入れ
水に対して透析した。透析内液を濃縮乾固してセンダン
樹皮熱水抽出精製物２９８．７ｍ９を得た。

製剤例１゜ 実施例１で得られたセンダン樹皮熱水抽出物１０００ダ
を無菌５チ注射用ブドウ糖溶液５００　ｍｌに溶解し、
この溶液を５ゴずつバイアルに無菌的に分注し、凍結乾
燥した。このようにして１バイアル中１０■のセンダン
樹皮抽出物を含む製剤を得た。用時、注射用蒸留水に溶
解して使用する。

製剤例２゜ 上記製剤例１と同様にしてバイアル製剤をつくった。た
だし、無菌５％注射用ブドウ糖溶液５０〇−の代りに生
理食塩水５００−を使用した。用時、注射用蒸留水に溶
解して使用する。

■０発明の具体的作用効果 上記実施例で得られたセンダン樹皮熱水抽出物について
抗悪性新生物作用の効果を測定した。

試験例１゜ （試料調製） リン酸緩衝食塩水（ギプコ社製、リン酸９．５ｍＭヲ含
む；　ＰＢＳ　）に０．５チカルポキシメチルセルロー
ス（ＣＭＣ）を懸濁させた溶液に所定濃度になるように
各画分試料を溶解させた・ （ザルコーマ１８０ガン細胞移植） ＩＣＲマウス腹腔中で継代培養しにザルコーマ１８０ガ
ン細胞を腹水とともにとり出し、生理食塩水で適当に希
釈して細胞数がＬＯＸＩＯ個／ｍｌとなるように調製し
た。この細胞懸濁液の０．１　ｍｌを４週令雄ＩＣＲマ
ウス腹腔へ注射器を用いて移植した。従って１匹あたり
の移植細胞数は１．０Ｘ１０’個である。

（試料投与） ザルコーマ１８０ガン細胞を移植した次の日よシ１日１
回連続４日間、上に調製した試料を注射器を用いて腹腔
に０．１ｍｌ投与した。１試料１濃度につき６匹のマウ
スを使用した。対照は試料の溶剤として用いた上記ＣＭ
Ｃ人、９　ＰＢＳを同様に投与したものとした。投与量
の表示はマウス体重１に９ｈたυのダ数とした。

（効果の判定法） ガン細胞移植後７臼目にそれぞれのマウスの体重を測定
した。次に腹腔に貯まった腹水を全量とシ出した後のマ
ウスの体重を測定した。腹水採取前後の体重の差を腹水
量とする。採取した腹水をヘマトクリット管に吸い込ま
せ、ヘマトクリ、ト測定用ローターを用いて、低温で遠
心分離し、血液のへマドクリット値に相当するアサイド
クリット値を得た（腹水中に占めるガン細胞の割合）。

腹水量にこの値を乗ずれば全腹水中の細胞の容量が得ら
れる。これを全細胞容量（トータル・・ぞラクト・セル
・ボリュウム；　ＴＰＣＶ　）とする。対照では、全腹
水量は６〜１０ｔｎ１％ＴＰＣｖは、１６〜２５−とな
った。

試料投与マウスのＴＰＣＶと対照投与マウスのＴＰＣＶ
の比ＣＴ／Ｃ）をと−）　テ１００〜６６％（７）もの
をガンに対する効果なしく−）、６５〜４１チのものを
やや有効（＋）、４０〜１１％のものを有効（＋＋）、
１０〜Ｏｔｓのものを著効（＋ｌ＋）とする。結果を表
１に示す。

試験例２゜ ザルコーマ１８０固型ガンに対する効果（ザルコーマ１
８０ガン細胞移植） 試験例１と同様虹して１．０×１０８個／づの細胞懸濁
液を調製した。この懸濁液の０．１　ｍ６を４週令、雄
ＩＣＲマウス背部皮下に注射器を用いて細胞を移植した
。

（効果判定法） ガン細胞移植後２１日日に成長したガン組織を摘出し、
その重量を測定した（１群６匹の平均値）。

この重量と対照のものとの比（Ｔ／Ｃ）をとって効果判
定を行った。対照のガン組織重量は１．５〜３５１であ
った。比の値が１００〜７１％のものを無効（−）、７
０〜５１％のものをやや有効（＋）、５０〜２１チのも
のを有効（−Ｉｆ）、２０〜０チのものを著効（侑）と
した。結果を表１に示す。

表１から明らかなように、本発明の熱水抽出物は、ザル
コーマ１８０移植がんのうち、特に固形がんに対して強
い抑制効果を有している。

表　　　１ ザルコーマ１８０移植ガンに対する効果（マウス） センダン樹皮熱水抽出物（実施例４抽出物）の最小有効
投与量は次の通りである。

ザルコーマ１８０腹水ガン　　　５ｏ　ηＡ９ザルコー
マ１８０固形ガン　　　８０　　ｍμｇ試験例３゜ ４〜５週令雄のＣＤＦ　、マウスの腹腔にＰ３８８細胞
懸濁液０．１　ｍＪ　（細胞数１×１０６個）を接種し
た。２４時間後から１日１回計５日間、所定量の試料を
含ｔｒ　０．５％カルがキシメチルセルロースナトリウ
ム塩懸濁液０．１−を腹腔内に投与した。平均生存日数
を求め、処置群（Ｔ）と対照群（Ｃ）との比率（Ｔ／Ｃ
％　）を求めた。対照群の平均生存日数は７〜１２日で
、あった。Ｔ／Ｃ≧１２５チで活性があるといえる。結
果を表２に示す。

表　　　２ Ｐ３８８マウス白血病に対する効果 試験例４゜ 定着固形ガンに対する効果 ザルコーマ１８０細胞ｌ×１０７個をＪＲＣマウス（５
匹）背部皮下に移植し、そのまま２週間飼育した。皮下
に移植したデルコーマ１８０がｉ　ｏｏ。

〜１５００ｍ＋ｍ　（１２Ｘ１５ｍｍ程度）に成長して
いるのを確認した後、移植後１４日日日ら、実施例９で
得られたセンダン樹皮熱水抽出精製物を腹腔内に１日１
回１５０　ｍ？ＡＦｌを５日間投与した。腫瘍部分の短
径（−ｍｉ）と長径（ｂｍｍ）とをノギスで測定し、’
Ａ　ａ２ｂ　（ｍｍ３）を腫瘍容積とした。結果を第３
図に示す。さらに、移植後２８日日日腫瘍部を切りとシ
その重量を測定した。無処置マウス腫瘍部７、３９　ｉ
に対して処置マウス腫瘍部は０．２５７（Ｔ／Ｃ＝５．
に％）であった。またマウス５菌中３匹の腫瘍が消失し
た。

第３図のグラフおよび上記の結果から本発明のセンダ／
樹皮熱水抽出物が定着固形ガンに対して顕著な効果を有
することが明らかである。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例４で得られたセンダン樹皮抽出物の紫外
線吸収スペクトルを示し、第２図は同物質の赤外線吸収
スペクトルを示す。第３図は試験例４の結果を示すグラ
フである。 特許出願人　テルモ株式会社

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　センダン樹皮の熱水抽出物を有効成分とする
   抗悪性新生物剤。
2. （２）抗悪性腫瘍剤である特許請求の範囲第１項記載の
   抗悪性新生物剤。
3. （３）　　センダン樹皮の熱水抽出物が下記の紫外線吸
   収スペクトルおよび赤外線吸収ス（クトルを有する特許
   請求の範囲第１項または第２項記載の抗悪性新生物剤。 ＵＶλｍａｘ　　２７７　ｎｍ ＩＲνｍａｘ　ｃｍ−’：３３５０，１６１０＊１０２
   ０