JPS5833880B2 - ダウノマイシンルイノセイホウ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はダウノマイシンおよびそのβ−アノマー、α−
およびβ−アノマーの４′−エピ−ダウノマイシン混合
物およびそれぞれの単一アノマーの新規な化学合成法お
よびそれにより得られる新規生成物に関する。

ダウノマイシンおよびダウノマイシノンは本発明者等の
英国特許第１０３３３８３号明細書に記載されている。

４′−エピ−ダウノマイシンα−アノマーの化学名は７
−０−（３’−アミノ−／・３′・６′−トリデオキシ
−α−Ｌ−アラビノへキンピラノシル）−ダウノマイシ
ノンである。

４′−エピ−ダウノマイシンβ−アノマーの化学名は７
−０−（３’−アミノ−／・３′・６′−トリデオキシ
−β−Ｌ−アラビノへキンピラノシル）−ダウツマシン
である。

本発明方法はダウノマイシノン（■）（これモ英国特許
第１００３３８３号明細書に記載されている）をダウノ
サミン（３−アミノ−２・３・６−ドリデオキシーＬ−
リキソヘキソース、ｎ）あるいは４′−エピダウノサミ
ン（３−アミノ−２・３・６トリデオキシーＬ−アラビ
ノへキンース、■）の誘導体と縮合させて薬理学的に活
性なグリコシド■（ダウノマイシン）、Ｖ１■および■
を得ることからなる。

実際にはヘキソース■あるいは■は保護されそしてダウ
ノマイシノンとの縮合に適当なたとえばハライドのよう
な１−誘導体に変換されなげればならない。

縮合後保護基は除去される。

本明細書中に記載の化合物の式は次のとおりである。

ヘキソース■および■における３−アミノ基は、種々の
化学的に反応しやすい基を含有する生成物をさらに分解
することなしに除去し得る基で保護されなげればならな
い。

Ｎ−）ＩＪフルオロアセチル基は穏和なアルカリ処理に
より十分に除去され得る。

ヘキソース■および■は、合成に使用するに十分な安定
性を有する誘導体に変換されなげればならない。

２−デオキシ糖類の１−ハロゲノ誘導体の不安定性は文
献上周知である（ Ａｄｖａｎｃｅｓ １ｎＣａｒｂｏ
ｈｙｄｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ （１９６６）第
２１巻第２７３頁参照）。

ヘキソース■および■のトリートリフルオロアセチル誘
導体を本発明にしたがって無水塩化水素と反応させると
対応する１−クロロ−ヘキソースが得られた。

これらは無水条件下で数日間貯蔵することのできる固体
化合物である。

グリコシド結合の合成に適した反応条件に関しテ、周知
のケー二ツヒスークノル反応 （Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９５７）第１２巻第１５７頁
参照）はたとえば溶媒、温度、触媒および塩化水素ある
いは臭化水素受容体の変更を包含する種々の範囲の条件
を与えている。

上記変更の重要性は通常諸条件の最適な組合わせが顕著
な反応速度には必要であるということにある。

２−デオキシ糖の１−ハロゲノ誘導体に対して標準条件
を使用すると対応するグリカール類になる（前記文献参
照）。

本発明方法はハロゲン化第２水銀（たとえば臭化第２水
銀）からなる触媒および塩化水素受容体（たとえば酸化
第２水銀）の存在下でたとえばクロロホルムあるいはメ
チレンジクロライドのような有機溶媒中においてダウノ
マイジノン（Ｉ）をヘキソース■あるいは■のｌ−クロ
ロ−Ｎ−０−ジ−トリフルオロアセチル誘導体と共に穏
和に処理することからなる。

Ｎ−）リフルオロアセチルを希アルカリで除去すること
により最終生成物を得ることができる。

次に本発明を実施例により説明する。

温度は摂氏で表わされている。

実施例 １ ダウノサミン（ＩＩ）塩酸塩１グを無水ジエチルエーテ
ル中に懸濁し、これを００においてトリフルオロ酢酸無
水物８ｒｎｌで処理する。

０°で２時間ついで室温で１時間放置後溶媒を減圧下で
除去し、残留物をジクロロメタンから晶出させて１．１
ｆｔのトリートリフルオロアセチルダウノサミンを得る
。

融点１３２−１３４°、質量スペクトルｍ ／ ｅ３９
１（Ｍ−４４）、３２２（Ｍ−１１３）。

０．５Ｐのこのものを００で無水ジエチルエーテル中に
おいて無水の気体塩化水素で処理する。

＋５゜で１夜放置後溶媒を真空中で除去して１−クロロ
Ｎ−０−ジ−トリフルオロアセチルダウノサミン（これ
はまた１−クロロ−２・３・６−ドリデオキシー３−ト
リフルオロアセトアミド−４−トリフルオロアセトキシ
−Ｌ−リキソヘキソピラノースとも称される）を油状生
成物として得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣＩ ３）：１．２２δ（ｄ、Ｊ＝６．５
Ｈｚ 。

３Ｈ，ＣＨ３）、２．０５−２．７０δ（ｍ、２Ｈ１Ｃ
（２） Ｈ２） 、４．４６δ（ｄｑ 、Ｊ ＝ ６．
５ ＨｚおよびＪ ＜ Ｉ Ｈｚ、ＩＨ，Ｃ（５）Ｈ）
、４．６０−５．１０δ（ｍ、ＩＨ，Ｃ（３）Ｈ）、５
．３７δ（ｃ、ＷＨ＝６．０Ｈｚ、ＬＨ，Ｃ（４）Ｈ）
、６．２９δ（ｍ、 ＷＨ＝ ６．５ Ｈｚ 、 Ｉ
ＨＳＣ（１）Ｈ）および６．３７δ（広いｓ、ＩＨ，Ｎ
Ｈ）。

微粉末化したダウノマイシノン（■、３００ｍＩ？、０
．７５ｍＭ）を無水りｏｏホルム（７５ｍｌ）中に溶解
し、これを酸化第２水銀（６００■）、臭化第２水銀（
１，５０■）そしてモレキュラーシープ（３Ａ、メルク
）で処理する。

この懸濁液を１時間攪拌し、ついで６００■の１−クロ
ロ−Ｎ−０−）リフルオロアセチルダウノサミンを加え
る。

混合物を室温で６４時間攪拌しついで２過する。

溶液を真空中で蒸発させる。残留物をメタノール２０Ｏ
ｒｆＬｌ中にとりそして１５分間還流する。

溶媒を除去後残留する残留物を溶離剤としてクロロホル
ム−ベンゼン−メタノール（１００：２０：３（容量）
〕の混合物を使用して珪酸のカラム上でクロマトグラフ
ィーにかげる。

未反応のダウノマイシノンの外に２２０■のＮ−トリフ
ルオロアセチルダウノマイシン融点１６９〜１７１°（
テトラヒドロフランおよびヘキサンからの再結晶後）お
よび２０■のＮ−）リフルオロアセチルダウノマイシン
（β−異性体）融点１３８〜１４００、〔α）’ｄ０＋
４４００（Ｃはクロロホルム中０．１である）が得られ
た。

Ｎ−）リフルオロアセチルダウノマイシン０．２゜ｒを
０． Ｉ Ｎ水酸化ナトリウム水溶液２Ｏｒｎｌ中に溶
解させる。

得られる溶液を室温で３０分放置後０、ＩＮ塩酸水溶液
で処理してｐＨ８，６にし、ついでクロロホルムで繰り
返し抽出する。

抽出液を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮して小
容量にしそして０． Ｉ Ｎメタノール性塩化水素でｐ
Ｈ４，５の酸性にしてダウノマイシン塩酸塩を晶出させ
る。

これはすべての点で醗酵により得られた生成物（Ｇａｚ
ｚｅｔｔａ ＣｈｉｍｉｃａＩｔａｌｉａｒｍ （１９
７０）第１００巻第９４９頁参照）と一致する。

収量は実際上定量的である。実施例 ２ ２・３、−６−） ’）チオキシ−３−トリフルオロア
セトアミド−Ｌ−アラビノへキンース１１を無水ジエチ
ルエーテル２０ｒｒＬｌ中に懸濁し、これを００におい
てトリフルオロ酢酸無水物で処理する。

混合物をさらに実施例１のように操作して定量的収率の
２・３・６−ドリデオキシーＮ−０−ジ−トリフルオロ
アセチル−Ｌ−アラビノへキンピラノシルクロライドを
得る。

ＮＭＲ（ＣＤＣＩ ３）： １．３０δ（ｄ、Ｊ＝６．
０Ｈｚ、３Ｈ，ＣＨ３）、２．２５−２．８０δ（ｍ、
２Ｈ１Ｃ（２）Ｈ２）、４．２０−４．６５δ（ｒｌＬ
ＩＨ。

Ｃ（５）Ｈ）、４．６５−５．１５δ（ｍ、２Ｈ。

Ｃ（３）ＨおよびＣ（４）Ｈ）、６．２５δ（ｍ。

ＷＨ＝ ６．０ Ｈｚ、ＩＨ，Ｃ（１）Ｈ）および６．
４５δ（広いｓ、ＩＨ，ＮＨ）。

無水クロロホルム中におけるダウノマイシノン０．５ｆ
？の溶液を酸化第２水銀１．０１、臭化第２水銀０．２
５ ｆ、モレキュラーシープ（３人、メルク）１０２お
よび２・３・６−トリデオキシ−Ｎ−０ジ−トリフルオ
ロアセチル−Ｌ−アラビノへキンピラノシルクロライド
０．５１で処理する。

混合物を２４時間攪拌し、ｒ過により固体を除きそして
真空下で蒸発させる。

残留物をメタノール中に入れ、１５分間還流し、蒸発乾
固させついで溶離剤としてクロロホルム−ベンゼン−メ
タノール（１０：２０：３）の混合物を使用して珪酸カ
ラム上でクロマトグラフィーにかける。

得られる主要生成物は７０：３０の割合におけるα−お
よびβ７−Ｏ−（Ｎ−）リフルオロアセチル−４′−エ
ピーダウノスアミニル）−ダウノマイシノンの混合物（
クロロホルムから晶出後の収量、０．３ｆ）である。

この物質は前述のように０． Ｉ Ｎ水酸化ナトリウム
で処理すると遊離塩基として対応するα−およびβ−グ
リコシド混合物に定量的に変換される。

この生成物は溶離剤としてクロロホルム−メタノール−
水の溶媒系［１３５：２０：２（容量）〕を使用するシ
リカゲルクロマトグラフィーによりα−およびβ−アノ
マーに分離される。

α−アノマー（４′−エピダウノマイシン、■）の〔α
〕２Ｄ１０＋３２００（ｃ−０，０４５、メタノール）
、融点１９９〜２０１°、収量０．１６１であり、そし
てβ−アノマー（イ）の融点１８２〜１８４゜収量０．
０６１である。

次に化合物■（４′−エピダウノマイシン）および化合
物％’１Ｉ（４’−エピダウノマイシン、β−アノマー
）の生物学的活性について説明する。

溶化合物の■および■は試験管内の培養細胞に
おける細胞有糸分裂および増殖活性の強力な抑制剤とし
て顕著な生物学的性質を示す。

またこれらは腫瘍形成性ビールスにより生ずる細胞変能
にも実質的作用を示した。

これらは多数の実験腫瘍を有する動物に無毒性投与量を
投与した際の平均生存時間の増加により示されるように
（表１〜表４）ノソカネズミにおいて抗腫瘍活性を有す
る。

化合物■の試験管内における心臓毒作用は以下の実験か
られかるように非常に低い（ダウノマイシンよりも低い
）。

方法は新生ハツカネズミの心臓からのトリプシン処理に
より単離された単一の心臓細胞の培養にある。

３〜４日後日動脈動細胞を示す培養は頻度および律動の
両見地から研究され得る（ＩＲＣ８第２巻第１２９３頁
（１９７４）参照〕。

表１のデータは異なる露出時間における培養されたＨｅ
Ｌａ細胞の有糸分裂指数および増殖作用に関する化合物
■および■の作用を示す。

結果は未処置対照のパーセントとして表わされている。

表１中のｒ ＩＤ５０ Ｊは被処理細胞のうち５０％の
生長を抑制することのできる使用薬剤の最低量を意味す
る。

表２のデータは、モロネイ肉腫ビールスで感染された培
養されたハツカネズミの繊維芽細胞における病巣形成お
よび細胞増殖に及ぼす化合物■お※※よび■の効果（３
日間の処置）を示す。

表２中の■Ｄ５ｏは増養されたＨｅＬａ細胞の増殖作用
の５０％を抑制する薬剤の最低量を意味する。

表３のデータは、肉腫１８０腹水症（ＩＸ１０６細胞／
・・ツカネズミ）を腹腔内に接種された雌・・ツカネズ
ミ（スイスＣＤＩ）における平均生存時間および残存数
に及ぼす化合物■および■の作用を示す。

化合物は腫瘍の移殖の翌日に投与されｔう６／１０の動
物は薬剤毒性の結果として死亡した。

表４のデータでは、 クロス転移性白血病におけ ろ化合物■および■の作用が白血病のリンパ腺および牌
の懸濁液（２，５×１０６細胞／ハツカネズミ）を静脈
内に接種された０３Ｈ雌ノソカネズミの平均生存時間と
して示されている。

化合物は腫瘍の移殖の翌日から始めて５日間にわたり１
日に１度投与された。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 触媒としての第２水銀塩および塩化水素受容体の存
   在下に有機溶媒中においてダウノマイシノンをＬ−１，
   ＪキンあるいはＬ−アラビノ構造を有する１−クロロ−
   ２・３・６−ドリデオキシ〜３トリフルオロアセトアミ
   ド−４−トリフルオロアセトキシ−ヘキソースと反応さ
   せそして引き続いて生成されたグリコシド化合物中のト
   リフルオロアセチル保護基を除去しそしてそのα−およ
   びβアノマーを分離することを特徴とする、ダウノマイ
   シンおよび４′−エピダウノマイシンならびに対応する
   β−アノマーの製法。