JPS58146591A - 新規含リン化合物及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規室リン化合物及びその製造法に関し、更
に詳しくは、新規室リン化合物及び該化合物生産菌を好
気的条件下において培養することによシ得られる培養物
よシ、該化合−を採取することを特徴とする新規室リン
化合物の製造法に関する。

本尭明者ら扛、除草剤として有用な５Ｆ−１２９３物質
（特公昭５１−６３９号公報）の製造法の改良研究中、
８Ｆ−１２９３物質生産曹ストレプトミセス０ハイグロ
スゴビク−’（５Ｆ−１２９３株（Ｉ［！工研蒙寄第９
９６号：　ＡＴＣＣ寄託番号２１７０５　号）の−変異
株が新規含すン化合物ＭＰ−１０３物質及びＭＰ−１０
４物質を多量ＫｊＩ生することを見い出し、下記に示す
理化学的性状によシ、それぞれ２−アミノ−３−（ハイ
ドロキシ）フォスフイノイルプロピオン酸及び２−ハイ
ドロキシ−３−（ハイドロキシ）７オスフイノイルプロ
ビオン酸と同定゛し、またそれらの物質は、５Ｆ−１２
９３株を用いた５Ｆ−１２９３物質の生童培賽時に添加
すると５Ｆ−１２９３物質の増収がはかられることを発
見し、本発明を完成するに至った。

即ち、本発明は、２−アミノ−３−（ハイドロキシ）フ
ォスフイノイルプロピオン酸（以下、ｒＭＰ−１０３物
質」という。）及び２−ハイドロキシ−３−（ハイドロ
キシ）フォスフイノイルプロピオン酸（以下、ｒＭＰ−
１０４物質」という。）並びにストレプトミセス属に属
し、ＭＰ−１０３物質及びＭＰ−１０４物質生童薗を好
気的条件下において培養することによシ得られる培養物
よシ、ＭＰ−１０３物質及び／又はＭＰ−１０４物質を
採取することを特徴とするＭＰ−１０３物質及びＭＰ−
１０４物質の製造法である。

本発明に使用されるストレプトミセス属の菌株は、その
培養物中に採取するに充分な量のＭＰ−１０３物質及び
ＭＰ−１０４物質の生産能を有するものであれば、どの
ようなものでもよい。このようなストレプトミセス属の
菌株の例としては、本発明者らによって、ストレグ）ｆ
セス・ハイグロスコピクス５Ｆ−１，２９３株のニトロ
ソグア＝ジン処理によシ得られた変異株（菌株番号ＭＰ
−１０３株）が挙げられる。ストレプトミセス・ハイグ
四スコビクスＭＰ−１０３株は黴工研に寄託され（微工
研薗寄第６３２８号）、その菌学的性状は、胞子形成が
少ないことをのぞいて、％公昭５１−６３９号−公報記
載のストレプトミセス・ハイグロスコビクメ５Ｆ−１２
９３株と同一である。

ＭＰ−１０３株は他のストレグ）　ミセス属の菌株の場
合に見られるように、その性状が変化しやすく、例えば
紫外線、エックス線、薬品等を用いる人工的変異手段で
変異しうるものであり、この上うな変異株であってもＭ
Ｐ−１０３物質及びＭＰ−１０４物質の生産能を有する
ストレプトミセス属の菌株はすべて、本発明に使用する
ことができる。

本発明の製造法においては、ＭＰ−１０３株を、通常の
微生物が利用しうる栄讐物を含有する培地で培養する。

栄養源としては、従来、ストレプトミセス属の菌の培養
に利用されている公知のものが使用される。例えば、炭
素源として蝶、グルコース、澱粉、／！ｊセリン、シュ
ークロース（ショ糖）、水あめ、精密等が挙げられ、こ
れらは、単独又は組合わせて用いられる。また、窒素源
としては、大豆粉、小麦胚芽、肉エキス、ペプトン、乾
・燥酵母、：′Ｊ−ンステイ２．−プリカー、硫酸アン
モニウム、硝酸ナトリウム等が、単独又は組合わせて用
いられる。その他必要に応じて炭酸カルシウム。

食塩、塩化カリウム、燐酸塩等の無機塩類を添加するほ
か、菌の発育を助け、ＭＰ−１０３物質及びＭＰ１０４
物質の生産を促進するごとき有機物、及び無機物を適当
に添加することができる。培養法としては液捧培養法、
特に深部培養法が最も適している。培養は好気的条件下
で行なわれ、培養に適した温［は２５〜３５Ｃであるが
多くの場合、２８Ｃ付近で培養する。

培養日数は３〜７日が適当であり、４〜６日が更に好ま
しい。

培養Ｆ液より本発明の化合物であるＭＰ−１０３物質及
びＭＰ−１０４物質を精製単離するには、骨生物代謝産
物をその培養液から単離するために通常用−られる分離
、精製の方法が利用できる具体的には本発明の化合物Ｍ
Ｐ−１０３物質及びＭＰ−１０４物質がそれぞれ水溶性
の両性及び酸性物質であることから、その精ｌｌＫあた
っては、アンバーライトＩＲ−１２０、ダウエックス５
０Ｗ等の陽イオン交換樹脂、着しくは、アンバーライト
ＩＲＡ−４００、ダウエックスＩＸ２等の陰イオン交換
樹脂を用いる方法及びセファデックス、セルロース、シ
リカゲル、歳末等を使用するクロマトグラフィーを適当
に組合せて行なうことが好ましい。例えば、ダウエック
ス５０Ｗ（Ｈ＋型）の樹脂塔を通過させ、塩基性の不純
物を除去する方法は、ＭＰ−１０３物質及びＭＰ−１０
４物質の精製法として有効な手段である。

本発明の方法で得られたＭＰ−１０３物質及びＭＰ−１
０４物質の理化学的性状は次の通りである。

ＭＰ−１０３物質 外　観　　白色結晶 融　　点　　　１９６−１９７０（分解）溶解性　　水
に溶けやすいが、エタノール、アセトン、酢酸エチル、
エチルエーテ ル等の有機溶媒には溶けにくい。

赤外吸収 （ＩＲ）２−＜／）ヤＫＢｒ錠中で測定したものを第１
図に示す。

元素分析　　Ｃ２１，１２、Ｈ５，９２、Ｎ８．３０　
。

０４６．２７　、　ＰＩ３．９２％ ＦＤ−ｆススベクトル　　ｗｒ／＠：　１５４　％％”
＋　１　）以上の元素分析及びＦＤ−マススペクトルの
データより、分子式はＣＩＨＩＮＯ４Ｐｅ＆Ｏであると
考えられた。また、展開溶媒ｎ−ブタノール−酢酸−水
一でＲｆ　値ｏ、２ｚ、セルロース薄層クロマトグラフ
ィーでＲｆ値０．４３　　にそれぞれ単一のスポットを
与えた。

以上の理化学的性状及び別途研究の結果から、ＭＰ−１
０３物質は、次式中 嘱 ＨＮ迅 で示される２−アミノ−３−（ハイドロキシ）フォスフ
イノイルプロピオン酸であることが判明した。

ＭＰ−１０４智質 外観及び性状　無定形の吸湿性粉末 溶解性　　　　水に溶けやすいが、エタノール、アセト
ン、クロロホルム、エチ ルエーテル等の有機溶媒Ｋｔ−１溶 けにくい。

〔αＪ−−６，５°（Ｃ−１，０，ＩＮ塩酸）ＩＪ７ス
ペクトル　　末端吸収を示すのみである。

ＩＲススベクトルヌジョール中で測定したものを第２図
に示す。

元素分析　　Ｃ２０，９４、Ｈ４，８９、０５５，７３
。

ＰＩ３．８’３％ ｐｉ）−−ｒススベクトル　　ｍ／ｅ　：　１５４　（
Ｍ”）以上の元素分析及びＦＤ−マススペクトルのデー
タより、分子式はＣｓ　Ｍｙ　Ｏｓ　Ｐ・ＨｓＯである
と考えられた。オた、展開溶媒ｎ−ブタノール−酢酸−
ビリジン−水（４：１：１：１）のセルロース薄層クロ
マトグラフィーでＲｆ値０．３　　に単一のスポットを
与えた。

以上の理化学的性状及び別途研究の結果から、ＭＰ−１
０４物質は、次式ＩＩ＋ 　　　ＯＨ で示される２−ハイドロキシ−３−（）１イド四キシ）
フォスフイノイルプロピオン酸であることが判明した。

さらに、ＭＰ−１０３物質及び／又はＭＰ−１０４物質
を、前述の５Ｆ−１２９３物質を生産する放Ｓ薗を用い
た８Ｆ−１２９３物質の生産培讐時に添加することによ
シ、５Ｆ−１２９３物質の生産が飛躍的に高められ、Ｍ
Ｐ−１０３物質及びＭＰ−１０４物質は除草剤として有
用な８Ｆ−１２９３智質の前駆体として、極めて重要な
化合物であることが判明した。

また、ＭＰ−１０３物質ａ　ＤＮＡウィルスであるワク
シニアウィルス及び単純性庖疹ウィルス（Ｈ８ＶＩＩ型
）に対して活性、を示した。ＭＰ−１０３物質の抗ウィ
ルス活性についての細胞変性抑制試験の齢果を第１表に
示す。

第１表 【単位：　ＬｏＰ　（ＴＣＩ　ＵｓｃＶ／＋ｍ　）　Ｊ
以下、実施例及び試験例によシ、本発明を更に詳しく説
明する。

実施例１ ストレプト之セス・ハイグロスコピクスＭＰ−１０３株
（微工研菌寄第６３２８号）を前培養培地（可溶性澱粉
２．０％、ポリペプトン１．０％、崗エキスＱ、３　％
、燐酸水素二カリウＡ　０．０５％；ｐ）１７．０）１
０−に接種した。これを２８Ｃで２４時間振盪培養し、
さらに同培地８０−に継代して２８℃で２４時間振盪培
養し喪ものをジャー７アーメンターの種母とした。ジャ
ー７アーメンターでは、グルコース４．０％、をングレ
イン２．２５％、Ｊｌ胚芽３．５％、燐酸二水素カリウ
ム０．１％、塩化コバル）　０．０００１％の組成の生
産培地４．０１に前記種母を植菌し、２８Ｃで通気攪拌
培養を行なった。

１４４時間培養した培養液をｐＦ（２，０ＫＩＩ整し、
遠心分＃九より菌体を除去し、２．０！の培警−液を得
た。この培養Ｆ液中のＭＰ−１０３物質の生産量をアミ
ノ酸アナライザー（アトー社製ＭＬＣ−７０３型、保持
時間１１分）で測定したところ、１７０ダウエツクス５
０ＷＸ２　＜　ａ”ｉｉｉ　）を充填したカラムを用い
て、ＭＰ−１０３物質が溶出しおわるま、で水で展開し
た。溶出液の約１．８１を６００−のダウエックスＩ　
Ｘ　２　（ＣＨｓＣＯＯ−ｓ！　）　　を充填したカラ
ムを用いて水洗後、０．５Ｎ塩酸で溶離した。溶離液の
うち、ＭＰ−１０３物質及びＭＰ−１０４物質を含む両
分を濃縮して塩化水素を除去し、水を加え約３０−にし
て、さ、らにダウエックス５０ＷＸ２（Ｈ”型）７００
ｄを充填したカラムを用いて、水で展開し２０−ずつ分
取した。次に、セルロース薄着クロマトグラフィー〔展
開溶媒ｎ−ブタノール−酢酸−水（２：１：１）Ｊにお
いて、ニンヒドリンによシ単一のスポットを与えるクラ
クションを濃縮させて、白色結晶のＭＰ−１０３物質１
８０”Ｐを得た。

実施例２ 実施例１のダウｘ　ツｌ　ス５０Ｗｘ２　（Ｈ”ｍ）　
７００−を用いたカラムクロマトグラフィーにおける素
通シ画分１２０−を約１０−に濃縮し、セファデックス
Ｇ−１０９５０−を充填し九カラムを用いて、水で展開
し、ｌＯ−ずつ分取した。ＭＰ−１０４物質を含むクラ
クションを濃縮し、ｎ−ブタノール−酢酸−水一ビリジ
ン（４：１：１：１）を用いてセルロース１３０−を充
填したカラム上圧、前記濃縮物をセルロ゛−スでペース
ト状にして重層し、前記混合溶媒で溶出して７．５−ず
つ分取した。ＭＰ−１０４物質を含む７ラクシヨンを濃
縮し、ダウエックス５０ＷＸ２（Ｈ”１ｌ）５−を充填
したカラムを一過後、再び濃縮して、薄黄色の吸湿性粉
末のＭＰ−１０４物質１１０”ｌＦを得た。

試験例 ストレプトミセス・／１イグロスコビクス８Ｆ−１２９
３株（微工研菌寄第９９６号）を前培養培地（可溶性澱
粉２．０％、ポリペプトン１．０％、肉エキス０．３％
、燐酸水素二カリウム０．０５％；−７，０）１０−に
接種し、２８Ｃで２４時間振盪培養した。

この種培養を２％の割合で、グリセリン３．９％、小麦
胚芽３．１１サングレイン０．５％、燐酸二水素カリウ
ム０．１％、塩化コノくルトｏ、ｏｏｏｔ％の組成の生
産培地に植菌し、２８Ｃで７日間培養した。

ＭＰ−１０３物質及びＭＰ−１０４物質は第２表に示し
た濃度と時期で添加した。培養液を酸性にした後、遠心
分離（３０００ｒｐｍ１１５分）して上澄を得。

アミノ酸アナライザー（アト−社製ＭＬＣ−７０３型、
保持時間１４分）で５Ｆ−１２９３物質の生産量を測定
した。その結果を第２表に示す。

添加により、５Ｆ−１２９３物質の生産量が高まること
がわかる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、ＭＰ−１０３物質のＩＲスペクトル図であり
、第２図は、ＭＰ−１０４物質のＩＲスペクトル図であ
る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１１次式 （式中、Ｂはアミノ基又は水酸基を表わす。）で示され
   る化合物。 （２）２−アミノ−３−（ハイドロキシ）フォスフイノ
   イルプロピオン酸である特許請求の範囲第１項記載の化
   合物。 （３（２−ハイドロキシ−３−（ハイドロキシ）フォス
   フイノイルプロピオン酸である特許請求の範囲第１項記
   載の化合物。 （４）ストレプトミセス属に属する、２−アミノ−３−
   （ハイドロキシ）フォスフイノイルプロピオン酸及び２
   −ハイド口中シー３−（ハイドロキシ）フォスフイノイ
   ルプロピオン酸生産菌を培養することによシ得られる培
   養物より、２−アミノ−３−（ハイドロキシ）フォスフ
   イノイルプロピオン酸及び／又は２−ハイドロキシ−３
   −（ハイドロキシ）フォスフイノイルプロピオン酸を採
   取することを特徴とする２−アミノ−３−（ハイドロキ
   シ）フォスフイノイルプロピオン酸及び２−ハイドロキ
   シ−３−（ハイドロキシ）７オスフイノイルプ筒ピオン
   酸の製造法。