JPS58129993A - コリスチンの製造法 - Google Patents
コリスチンの製造法Info
- Publication number
- JPS58129993A JPS58129993A JP1246482A JP1246482A JPS58129993A JP S58129993 A JPS58129993 A JP S58129993A JP 1246482 A JP1246482 A JP 1246482A JP 1246482 A JP1246482 A JP 1246482A JP S58129993 A JPS58129993 A JP S58129993A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- colistin
- aspartic acid
- culture
- producing
- inorganic phosphate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108010078777 Colistin Proteins 0.000 title claims abstract description 38
- 229960003346 colistin Drugs 0.000 title claims abstract description 38
- JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N n-[(2s)-4-amino-1-[[(2s,3r)-1-[[(2s)-4-amino-1-oxo-1-[[(3s,6s,9s,12s,15r,18s,21s)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-3-[(1r)-1-hydroxyethyl]-12,15-bis(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-h Chemical compound CC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O.CCC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N 0.000 title claims abstract description 38
- XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N polymyxin E1 Natural products CCC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 38
- KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N polymyxin E2 Natural products CC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 38
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 11
- 229940085991 phosphate ion Drugs 0.000 claims abstract description 9
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 7
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 4
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 abstract description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 abstract description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 241000194105 Paenibacillus polymyxa Species 0.000 abstract 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 abstract 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 abstract 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 abstract 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 16
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 9
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 7
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 7
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 241000209149 Zea Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- RPAJSBKBKSSMLJ-DFWYDOINSA-N (2s)-2-aminopentanedioic acid;hydrochloride Chemical class Cl.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O RPAJSBKBKSSMLJ-DFWYDOINSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100499944 Arabidopsis thaliana POL2A gene Proteins 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N L-Aspartic acid Natural products OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- BXSBGUZTAOTBBS-UHFFFAOYSA-N O.O.O.O.O.O.O.[Mg] Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg] BXSBGUZTAOTBBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100028962 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) PDR1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はコリスチンの製造法に関する。さらに峰しくは
、コリスチン生産能を有する微生物をアスパラギン酸ま
たはその塩をαＯ２５ｆ／ｄ４以上、および無機リン酸
イオンを１０ −１ｉＸｘｏ−”ｔ／ｄｌ、および／ま
九はアンモニア態窒素をｈａｓ−ｏ、５ｔ７ａ會有する
培地に培養し、培養物中にコリスチンを生成蓄積させ、
諌培養物よ）コリスチンを採取することを４１値とする
コリスチンの製造法に関する。
、コリスチン生産能を有する微生物をアスパラギン酸ま
たはその塩をαＯ２５ｆ／ｄ４以上、および無機リン酸
イオンを１０ −１ｉＸｘｏ−”ｔ／ｄｌ、および／ま
九はアンモニア態窒素をｈａｓ−ｏ、５ｔ７ａ會有する
培地に培養し、培養物中にコリスチンを生成蓄積させ、
諌培養物よ）コリスチンを採取することを４１値とする
コリスチンの製造法に関する。
コリスチンは、広汎なダラム隘性細曹に抗菌作用を有す
るポリペブタイド系抗生物質であり、飼料添加用抗生物
質として特に活用されている。
るポリペブタイド系抗生物質であり、飼料添加用抗生物
質として特に活用されている。
従来、コリスチンの一構成成分であるＬ−α。
ｒ−ジアミノ酪酸がＬ−アスパラギン酸から生成される
ことが証明されている（Ａｐｒ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈ＠
脆・Ｊ１３＄ ９４９頁（１９８９））が、アスパラ
ギン酸の添加がコリスチンの生１４に効果を示すことは
見い出されていない。コリスチン醗酵においては、培地
中の電素源としては主として硫酸アンモニウムが、無機
塩の−っとしては、リン酸箒−カリウムが使用されでお
りそれらの濃度としては、硫酸アンモニウムで１−Ｒｆ
／ｄｉ（アンモニア態窒素換算で張２ｌ−（Ｌ６４ｆ／
ｄｊ）、リン酸第−カリウムでα１−Ｃ１，２ｔ／ｄｉ
（無機リン酸イオン換算でα０７−（１１４ｆ／ａ）の
範囲が使用されている〔日本農英化学会誌３６巻 ２４
真（１９ｇ２）、特公昭５５−１３７１８号公報〕。
ことが証明されている（Ａｐｒ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈ＠
脆・Ｊ１３＄ ９４９頁（１９８９））が、アスパラ
ギン酸の添加がコリスチンの生１４に効果を示すことは
見い出されていない。コリスチン醗酵においては、培地
中の電素源としては主として硫酸アンモニウムが、無機
塩の−っとしては、リン酸箒−カリウムが使用されでお
りそれらの濃度としては、硫酸アンモニウムで１−Ｒｆ
／ｄｉ（アンモニア態窒素換算で張２ｌ−（Ｌ６４ｆ／
ｄｊ）、リン酸第−カリウムでα１−Ｃ１，２ｔ／ｄｉ
（無機リン酸イオン換算でα０７−（１１４ｆ／ａ）の
範囲が使用されている〔日本農英化学会誌３６巻 ２４
真（１９ｇ２）、特公昭５５−１３７１８号公報〕。
本発明者らはコリスチン醗酵について種々検討し九結乗
、培地中のアスパラギン酸オたはその塩をα０１８ｆ／
ｄＪ以上、および無機リン酸イオンをｔｏ−’−５ｘｘ
ｏ−”ｒ／ｃｔｔ、 および／を九はアンモニア態窒嵩
をα０５−Ｑ、５ｆ／ｄ７にして、コリスチン生産能を
有する微生物を培養すると、培養物中にコリスチンが為
単位に生成蓄積することを見い出し本発明を完成した。
、培地中のアスパラギン酸オたはその塩をα０１８ｆ／
ｄＪ以上、および無機リン酸イオンをｔｏ−’−５ｘｘ
ｏ−”ｒ／ｃｔｔ、 および／を九はアンモニア態窒嵩
をα０５−Ｑ、５ｆ／ｄ７にして、コリスチン生産能を
有する微生物を培養すると、培養物中にコリスチンが為
単位に生成蓄積することを見い出し本発明を完成した。
以下に本発明の詳細な説明する。
本発明で使用する微生物としては、バチルスＪＩｉＫ属
する微生物であれば、いずれも使用可能であるが、具体
的な例としては、バチルス・ボリミキナ拳パツエテイー
（Ｂａｏｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａｗａｒ、 ）
Ｈ−３１２３（黴工研曹寄第６１４０号）があげられる
。
する微生物であれば、いずれも使用可能であるが、具体
的な例としては、バチルス・ボリミキナ拳パツエテイー
（Ｂａｏｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａｗａｒ、 ）
Ｈ−３１２３（黴工研曹寄第６１４０号）があげられる
。
主醗酵培地の糖源としては、例えば、ｌＲ粉、マルトー
ス、サッカｐ−ス、クルコーＸ蝉、窒素源としては硫酸
アンモニウム、塩化アンモニウム等、無機塩類としては
リン酸第−カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウ
ム等の微量金属類、およびコーンミール等の天然有機物
を含む培地が用いられる。
ス、サッカｐ−ス、クルコーＸ蝉、窒素源としては硫酸
アンモニウム、塩化アンモニウム等、無機塩類としては
リン酸第−カリウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウ
ム等の微量金属類、およびコーンミール等の天然有機物
を含む培地が用いられる。
本発明に使用するアスパラギン酸の塩としては、ナトリ
ウム塩、アンモニウム塩などがあげられる◎アスパラギ
ン酸ｉ九はその塩の 添加方法、時期などは任意であり、たとえば、培養初め
、あるいは、培養途中に一度に添加するか、醗酵状態に
志して分割に添加する。添加され九アスパラギン酸を九
はその塩の最Ｊｌ！ａｌ１度として、通常ａ０２Ｂｆ／
ｅｔ１以上になるように添加する。
ウム塩、アンモニウム塩などがあげられる◎アスパラギ
ン酸ｉ九はその塩の 添加方法、時期などは任意であり、たとえば、培養初め
、あるいは、培養途中に一度に添加するか、醗酵状態に
志して分割に添加する。添加され九アスパラギン酸を九
はその塩の最Ｊｌ！ａｌ１度として、通常ａ０２Ｂｆ／
ｅｔ１以上になるように添加する。
本発明に使用する無機リン酸塩としては、リン酸第−カ
リウムが好ましく、アンモニア練窒素源としては硫酸ア
ンモ主ラム、塩化アンモニウムなどが好ましい。
リウムが好ましく、アンモニア練窒素源としては硫酸ア
ンモ主ラム、塩化アンモニウムなどが好ましい。
無機り／酸塩とアンモニア態窒索の一度調整は通常初醗
培地で調整され、それらの濃度は、無機！ｊ ７酸イオ
ン（ＰＯ４−） Ｋ シテ１０−’ −Ｂ Ｘ １０
−”ｆ／ｄ１１好適には１０−’−１０−”ｆ／ｄｊ、
アンモニアｍ＊素にしてαＯ５−α５ｆ／ｄ４、好適に
は０．１−０．３ｆ／ｄＪｆ６る。
培地で調整され、それらの濃度は、無機！ｊ ７酸イオ
ン（ＰＯ４−） Ｋ シテ１０−’ −Ｂ Ｘ １０
−”ｆ／ｄ１１好適には１０−’−１０−”ｆ／ｄｊ、
アンモニアｍ＊素にしてαＯ５−α５ｆ／ｄ４、好適に
は０．１−０．３ｆ／ｄＪｆ６る。
培養条件としては、２０−４０℃で２−３日間好気的に
培養すれば培養液中にコリスチンが生成蓄積する。培養
物からのコリスチンの採取は、培養液を１過処理して除
菌したｆ液につき、イオン交換樹脂処理法、その他の公
知の操作によって行うことができる。
培養すれば培養液中にコリスチンが生成蓄積する。培養
物からのコリスチンの採取は、培養液を１過処理して除
菌したｆ液につき、イオン交換樹脂処理法、その他の公
知の操作によって行うことができる。
以下、実施例を説明する。
実施例１゜
コリスチン生産菌であるバチルス・ポリｚキサ・バラエ
ティー−Ｈ−ａｌｓｓ （微工研曹寄第ｅ １４ ｏ号
）ｔ１１１１１蜜（ＩＩｉｌ［換算）３ｆ／ｄｉ、コー
ンスチープリカーｘｔ／ｄｉ、 リン酸第−カリウム０
．０１ＳＦ／ｄｌ、硫酸マグネシウムα０５ｆ／ｄｉ、
塩化＋）！ｊｒ）ムａＯ１ｆ／ｄｊ、炭酸カルシウム１
ｆ／ｄｉの組成からなる種培地３０Ｗ１１の入った２
３０ｗＪ容三角フラスコに移植し、２８℃で２４時間振
盪培養する。仁の種培養液ｌｌｌ７を下記組成の醗酵培
地ｌａｍの入ったＺＳＯｄ容三角フラスコに移植し、２
８℃で３０時間培養する。第１．２および３表は、下記
醗酵培地組成のリン酸第−カリウムおよび硫酸アンモニ
ウム各々の一度を変え九場合のアスパラギン酸添加一度
と生成コリスチン一度との関係を示す。
ティー−Ｈ−ａｌｓｓ （微工研曹寄第ｅ １４ ｏ号
）ｔ１１１１１蜜（ＩＩｉｌ［換算）３ｆ／ｄｉ、コー
ンスチープリカーｘｔ／ｄｉ、 リン酸第−カリウム０
．０１ＳＦ／ｄｌ、硫酸マグネシウムα０５ｆ／ｄｉ、
塩化＋）！ｊｒ）ムａＯ１ｆ／ｄｊ、炭酸カルシウム１
ｆ／ｄｉの組成からなる種培地３０Ｗ１１の入った２
３０ｗＪ容三角フラスコに移植し、２８℃で２４時間振
盪培養する。仁の種培養液ｌｌｌ７を下記組成の醗酵培
地ｌａｍの入ったＺＳＯｄ容三角フラスコに移植し、２
８℃で３０時間培養する。第１．２および３表は、下記
醗酵培地組成のリン酸第−カリウムおよび硫酸アンモニ
ウム各々の一度を変え九場合のアスパラギン酸添加一度
と生成コリスチン一度との関係を示す。
醗酵培地組成：殿粉３ｆ／ｄｉ、コーンミール２ｔ７ｔ
ｕ、硫酸アンモニウムｘｔ／ｄｉ、リン酸第−カリウム
α２１／ｃｔｌ、＠酸マグネシウム・７水塩０．０ＩＩ
ｆ／＃、炭酸カルシラＪ、 １ ｆ／ｄｌ培養液中に生
成蓄積したコリスチンは、エセリヒア９コリ（Ｅａｃｈ
＠ｒｉａｈｉａ ａｏｌｉ） ＮＩＨＪを検定菌とし、
市販コリスチン標品を標準として生物学的定量を行なう
。
ｕ、硫酸アンモニウムｘｔ／ｄｉ、リン酸第−カリウム
α２１／ｃｔｌ、＠酸マグネシウム・７水塩０．０ＩＩ
ｆ／＃、炭酸カルシラＪ、 １ ｆ／ｄｌ培養液中に生
成蓄積したコリスチンは、エセリヒア９コリ（Ｅａｃｈ
＠ｒｉａｈｉａ ａｏｌｉ） ＮＩＨＪを検定菌とし、
市販コリスチン標品を標準として生物学的定量を行なう
。
第１表
アスパラギン酸 無機リン酸イオン濃度 （ｆＡ
ｌ）Ｏｆ／ｄｉ ３１１００Ｕ／Ｗ １８３０
０Ｕ／ｄＯ，０２５３９３００− α０５ ４０２００ −α
１ ４３７００ １８７００
α１５ ４８Ｉｓ００ ｔｓ
ｏＯ。
ｌ）Ｏｆ／ｄｉ ３１１００Ｕ／Ｗ １８３０
０Ｕ／ｄＯ，０２５３９３００− α０５ ４０２００ −α
１ ４３７００ １８７００
α１５ ４８Ｉｓ００ ｔｓ
ｏＯ。
α２ ５０２００ １９１０
０α５ ５１０００ １７９
００１．０ ５００００
−第２表 αｏｏｔｆ／″ ３８４００Ｕ鷹 ５０４００Ｕ鷹α
０１ ８８１００ ４９１５００ ０．０２ ３５６００ ４４９００ αＯ５２４７００２７１１００ α０７ ２１５００ ２２０００ Ｑ、１４ １９０００ １８８００ ０．２ １８６００ １９１００ （アンモニア態窒素濃度：αｚｔｒ／ｄｌ）第３９ Ｑ、ＯＩｆ趣 ２１３００Ｕ鷹 ２７９００Ｕ鷹α１
１ ８３１００ ４０９００α１
７ ３８０００ ５１９００α１１
１ ３７６００ ５０７００α３２
３０１００ ４０００Ｇα４！
２１９００ ３１１００α６４
８７００ ２１８００第１ＩＩか
ら明らかな様に、無機リン酸イオン纜度ａ、ｘａｔ／ｄ
ｉ条件下で、アスパラギン酸無添加でコリスチンは１８
ｍ００’Ｕ／ａｊ、添加一度Ｑ、 １ ｆ／ｄｌテ１９
１００ Ｕ／ＩＬｌｆ６ルノに対し、無機リン酸イオン
纜度ａｏｏｔｒ／＃条件下では、アスパラギン酸添加酸
度α０２Ｉｆ／＃以上で効果を認め、無添加で８１１０
０Ｕ／ＴＩＬｌに対し、添加一度ａ、ｓｔ／ｄ４以上で
５ｏｏｏＯＵ／ＩＬ１以上のコリスチンが生成蓄積する
。 １第２表から明らかな
様に、アスパラギン酸の添加効果は、無機リン酸イオン
酸度５×１Ｏ−１ｆ／ｄ４以下で効果が關められ１０−
″ｆ／ｄｌ以下で顕著となる。
０α５ ５１０００ １７９
００１．０ ５００００
−第２表 αｏｏｔｆ／″ ３８４００Ｕ鷹 ５０４００Ｕ鷹α
０１ ８８１００ ４９１５００ ０．０２ ３５６００ ４４９００ αＯ５２４７００２７１１００ α０７ ２１５００ ２２０００ Ｑ、１４ １９０００ １８８００ ０．２ １８６００ １９１００ （アンモニア態窒素濃度：αｚｔｒ／ｄｌ）第３９ Ｑ、ＯＩｆ趣 ２１３００Ｕ鷹 ２７９００Ｕ鷹α１
１ ８３１００ ４０９００α１
７ ３８０００ ５１９００α１１
１ ３７６００ ５０７００α３２
３０１００ ４０００Ｇα４！
２１９００ ３１１００α６４
８７００ ２１８００第１ＩＩか
ら明らかな様に、無機リン酸イオン纜度ａ、ｘａｔ／ｄ
ｉ条件下で、アスパラギン酸無添加でコリスチンは１８
ｍ００’Ｕ／ａｊ、添加一度Ｑ、 １ ｆ／ｄｌテ１９
１００ Ｕ／ＩＬｌｆ６ルノに対し、無機リン酸イオン
纜度ａｏｏｔｒ／＃条件下では、アスパラギン酸添加酸
度α０２Ｉｆ／＃以上で効果を認め、無添加で８１１０
０Ｕ／ＴＩＬｌに対し、添加一度ａ、ｓｔ／ｄ４以上で
５ｏｏｏＯＵ／ＩＬ１以上のコリスチンが生成蓄積する
。 １第２表から明らかな
様に、アスパラギン酸の添加効果は、無機リン酸イオン
酸度５×１Ｏ−１ｆ／ｄ４以下で効果が關められ１０−
″ｆ／ｄｌ以下で顕著となる。
第３表から明らかな様に、無機リン酸イオン磯度Ｑ、０
Ｏ１ｆ／ｄｊ条件下で、アスパラギン酸無添加の場合、
アンモニア態窒素濃度０．１−α３ｆ／ｄｌでコリスチ
ンは３００００Ｕ／＋ａ／以上を示すのに対し、アスパ
ラギン酸の添加濃度α２６ｆ／ｄｉの場合、アンモニア
態窒素幽度α１−α３Ｆ／ｄＪで４００００Ｕ／ｊ以上
を示し、特に、アンモニア態窒素濃度０．１７ｆ／ｄｌ
で最高５１９０００／ｄのコリスチンが生成蓄積する。
Ｏ１ｆ／ｄｊ条件下で、アスパラギン酸無添加の場合、
アンモニア態窒素濃度０．１−α３ｆ／ｄｌでコリスチ
ンは３００００Ｕ／＋ａ／以上を示すのに対し、アスパ
ラギン酸の添加濃度α２６ｆ／ｄｉの場合、アンモニア
態窒素幽度α１−α３Ｆ／ｄＪで４００００Ｕ／ｊ以上
を示し、特に、アンモニア態窒素濃度０．１７ｆ／ｄｌ
で最高５１９０００／ｄのコリスチンが生成蓄積する。
実施例２
実施例１で用いたものと同じコリスチン生産菌を実施例
１で用い九種培地３００ｗｌの入つ九２Ｉ容三角フラス
コに接種し、３０１４４時間振盪培養する。この種培養
液１００ＩＩＩｊを下記組成の醗酵培地３Ｉの入った５
１容ジヤー醗酵槽に移植し、温度２８℃、通気３！／分
、攪拌７００回転／分の条件下で４０時間培養する。
１で用い九種培地３００ｗｌの入つ九２Ｉ容三角フラス
コに接種し、３０１４４時間振盪培養する。この種培養
液１００ＩＩＩｊを下記組成の醗酵培地３Ｉの入った５
１容ジヤー醗酵槽に移植し、温度２８℃、通気３！／分
、攪拌７００回転／分の条件下で４０時間培養する。
醗酵培地組成：殿粉３１／ｄｉ、コーンミールｚｔ／ｄ
ｉ、硫酸アンモニウムαｍｙ／ｄｉ、硫酸マグネシウム
・７水塩αｏ ｓ ｖ ／ｄｉ、炭酸カルシウム１ｔ／
ｄｉ、アスパラギン酸ｓｔ／ｄｉアスパラギン酸を添加
し九場合、培養３！１時間で培養液中のコリスチン蓄積
量は最高に達し、５５１００Ｕ／ａ＃生成している。同
時に、アスノ（ラギン酸無添加で培養し九場合、３９３
００Ｕ／ｄである。
ｉ、硫酸アンモニウムαｍｙ／ｄｉ、硫酸マグネシウム
・７水塩αｏ ｓ ｖ ／ｄｉ、炭酸カルシウム１ｔ／
ｄｉ、アスパラギン酸ｓｔ／ｄｉアスパラギン酸を添加
し九場合、培養３！１時間で培養液中のコリスチン蓄積
量は最高に達し、５５１００Ｕ／ａ＃生成している。同
時に、アスノ（ラギン酸無添加で培養し九場合、３９３
００Ｕ／ｄである。
培養終了後の培養液ｉＳｌを塩酸でｐＨ１Ｇとし、８０
℃でＳＯ分間加熱後、菌体および残査會濾過して除き、
ｆ液のｐＨを苛性ソーダを加えて亀０とし、活性炭４−
を加えてコリスチンを吸着させ丸後にｆ別する。この活
性炭に塩酸酸性メタノールを加えてコリスチンを溶離さ
せ、活性炭を除いた溶離液を績縮後、５倍容のアセトン
を添加して沈殿物を得る。この沈殿物を再び酸性メタノ
ールに溶かし、纜縮後に弗びアセトンを加える操作を反
復して得られ九沈殿物を乾燥し、製品とする。その結果
、アスノ（ラギン酸添加培地からは、１４４００ Ｕ／
岬の製品７．１ｆを得る。を九、無添加培地からは、１
３７００υ／Ｉｆ）ＩｉｌＩＩＩｈ＆ ３ Ｆを得る。
℃でＳＯ分間加熱後、菌体および残査會濾過して除き、
ｆ液のｐＨを苛性ソーダを加えて亀０とし、活性炭４−
を加えてコリスチンを吸着させ丸後にｆ別する。この活
性炭に塩酸酸性メタノールを加えてコリスチンを溶離さ
せ、活性炭を除いた溶離液を績縮後、５倍容のアセトン
を添加して沈殿物を得る。この沈殿物を再び酸性メタノ
ールに溶かし、纜縮後に弗びアセトンを加える操作を反
復して得られ九沈殿物を乾燥し、製品とする。その結果
、アスノ（ラギン酸添加培地からは、１４４００ Ｕ／
岬の製品７．１ｆを得る。を九、無添加培地からは、１
３７００υ／Ｉｆ）ＩｉｌＩＩＩｈ＆ ３ Ｆを得る。
特許出願人（１０ｆｆ）協和醗酵工業株式会社手続補正
書 昭和５７年ｑ月７４／′日 特許庁畏官殿 ０．□。１１１７７Ｃ’ａ” 昭和８７年特許願第１１４４１４号 ２発明の名称 コリスチンの製造法 象補正をする者 事件との関係 特許出願人 郵便番号 Ｚｏ。
書 昭和５７年ｑ月７４／′日 特許庁畏官殿 ０．□。１１１７７Ｃ’ａ” 昭和８７年特許願第１１４４１４号 ２発明の名称 コリスチンの製造法 象補正をする者 事件との関係 特許出願人 郵便番号 Ｚｏ。
住 所 東京都千代田区大手町−丁目６番１号名称
（ＸＯＺ）協和醗簿工業株式会社（Ｔ１１：Ｌ：０３−
２０１−７２１１内線２７５１）「殿粉 ｓｒ／ｄｉ、
コーンミール ２ ｖ／ｄｉ ｊを「殿粉 １ ｙ／ｄ
ｉ 、 −ｚ −ｙ ミールａｔ／ｃａｌ に訂正す
る。
（ＸＯＺ）協和醗簿工業株式会社（Ｔ１１：Ｌ：０３−
２０１−７２１１内線２７５１）「殿粉 ｓｒ／ｄｉ、
コーンミール ２ ｖ／ｄｉ ｊを「殿粉 １ ｙ／ｄ
ｉ 、 −ｚ −ｙ ミールａｔ／ｃａｌ に訂正す
る。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ｌ）コリスチン生産能を有する微生物をアスパラギン酸
ま九はその塩をαｏｘｓｙ７ａｔ以上。 および無機リン酸イオンを１０ −５Ｘ１０−”ｆ／ｄ
ｉ、および／ｌたはアンモニア態窒素をｏ、ｏａ−ａｓ
ｐ／ｄｊ含有する培地に培養し、培養物中にコリスチン
を生成蓄積させ、該培養物よりコリスチンを採取するこ
とを＊＊とするコリスチンの製造法。 ２）コリスチン生産能を有する微生物がバチルス属に属
する微生物であることを特徴とする特許請求の範囲第１
項記載の製造法。 ３）アスパラギン酸の塩がアスパラギン酸のナトリウム
塩ま九はアンモニウム塩であることを特徴とする特許請
求の範囲第１項記載の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1246482A JPS58129993A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | コリスチンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1246482A JPS58129993A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | コリスチンの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58129993A true JPS58129993A (ja) | 1983-08-03 |
Family
ID=11806075
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1246482A Pending JPS58129993A (ja) | 1982-01-28 | 1982-01-28 | コリスチンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58129993A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5767068A (en) * | 1997-02-13 | 1998-06-16 | Pathogenesis Corporation | Pure biologically active colistin, its components and a colistin formulation for treatment of pulmonary infections |
| CN103073623A (zh) * | 2012-12-28 | 2013-05-01 | 三达膜科技（厦门）有限公司 | 硫酸粘菌素的分离提纯方法 |
| CN103509839A (zh) * | 2013-10-12 | 2014-01-15 | 河北圣雪大成制药有限责任公司 | 一种降低多粘菌素e发酵液中氨氮含量的方法 |
-
1982
- 1982-01-28 JP JP1246482A patent/JPS58129993A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5767068A (en) * | 1997-02-13 | 1998-06-16 | Pathogenesis Corporation | Pure biologically active colistin, its components and a colistin formulation for treatment of pulmonary infections |
| CN103073623A (zh) * | 2012-12-28 | 2013-05-01 | 三达膜科技（厦门）有限公司 | 硫酸粘菌素的分离提纯方法 |
| CN103073623B (zh) * | 2012-12-28 | 2014-10-15 | 三达膜科技（厦门）有限公司 | 硫酸粘菌素的分离提纯方法 |
| CN103509839A (zh) * | 2013-10-12 | 2014-01-15 | 河北圣雪大成制药有限责任公司 | 一种降低多粘菌素e发酵液中氨氮含量的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3960660A (en) | Method of producing guanosine by fermentation | |
| US3214345A (en) | Process for producing l-aspartic acid | |
| JPS58129993A (ja) | コリスチンの製造法 | |
| JPS61135597A (ja) | シチジンおよびデオキシシチジンの製造法 | |
| US3232844A (en) | Method for manufacturing inosinic acid by fermentation | |
| US3282794A (en) | Method of producing citrulline by bacterial fermentation | |
| US3716455A (en) | Method for producing isoamylase by fermentation | |
| US3262861A (en) | Method for producing l-isoleucine by fermentation process | |
| JPS5838153B2 (ja) | ハツコウホウニヨルアミノサンノセイゾウホウ | |
| US3102079A (en) | Method for manufacturing xanthosine by fermentation | |
| US3258408A (en) | Method of producing xanthosine | |
| US3296089A (en) | Process for the production of ribosylphosphates of 8-azapurine derivatives by fermentation | |
| US3222257A (en) | Process for producing nucleosides by microorganisms | |
| US3238110A (en) | Method for producing 5-amino-4-imidazolecarboxamide riboside | |
| DE2461188C2 (de) | Verfahren zur Herstellung von L-Tryptophan oder 5-Hydroxy-L-tryptophan | |
| JP2833084B2 (ja) | 発酵法によるｌ―プロリンの製造法 | |
| JP2626993B2 (ja) | Ｌ−スレオニンの新規製造法 | |
| US2937121A (en) | Production of l-threonine | |
| JPH0129555B2 (ja) | ||
| JPH04330291A (ja) | 発酵法によるｌ−アラニンの製造法 | |
| JPS5817592B2 (ja) | ハツコウホウニヨルグアノシンノ セイゾウホウ | |
| JPS58111695A (ja) | 発酵法による５′−イノシン酸の製造法 | |
| JPS63219389A (ja) | ジ−ｄ−フラクトシルフラノ−ス１，２′：２，３′ジアンハイドライドの製造法 | |
| JPS5847493A (ja) | コリスチンの製造法 | |
| JP3065172B2 (ja) | 発酵法によるアデノシンの製造法 |