JPS58113748A - プレラベリング装置 - Google Patents
プレラベリング装置Info
- Publication number
- JPS58113748A JPS58113748A JP21414081A JP21414081A JPS58113748A JP S58113748 A JPS58113748 A JP S58113748A JP 21414081 A JP21414081 A JP 21414081A JP 21414081 A JP21414081 A JP 21414081A JP S58113748 A JPS58113748 A JP S58113748A
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- JP
- Japan
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- column
- labeling
- buffer
- filler
- amino acid
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/38—Flow patterns
- G01N30/46—Flow patterns using more than one column
- G01N30/468—Flow patterns using more than one column involving switching between different column configurations
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は液体クロマトグラフ装置等に適用されるプレ
ラベリング装置に関するものである。
ラベリング装置に関するものである。
従来、生体アミノ酸分析等に適用される液体クロマトグ
ラフ装置で゛は、ニンヒドリンや螢光発色試薬等を用い
てポストラベリングを行っている。
ラフ装置で゛は、ニンヒドリンや螢光発色試薬等を用い
てポストラベリングを行っている。
これらのニンヒドリン等に比べて、フリーラジカル試薬
であるスピンラベル剤やラジオアイソトープ試薬である
ＲＩラベル剤は選択性がよく、分析精度を高めることが
できるが、ポストラベリングを行うわけにはいかない。
であるスピンラベル剤やラジオアイソトープ試薬である
ＲＩラベル剤は選択性がよく、分析精度を高めることが
できるが、ポストラベリングを行うわけにはいかない。
すなわちスピンラベル剤やラジオアイソトープ剤はそれ
自体が安定なフリーラジカルや放射性物であり、ニンヒ
ドリンや螢光試薬のように、反応生成物が初めて発色を
呈するのと異なシ、未反応のラベル剤と反応生成物の区
別がつかなくなるからであ・る。そこでプレラベリング
を行うことになるが、従来はこれを自動的に行う装置が
なく、手操作で行っておシ、分析の能率を上げることが
できなかった。
自体が安定なフリーラジカルや放射性物であり、ニンヒ
ドリンや螢光試薬のように、反応生成物が初めて発色を
呈するのと異なシ、未反応のラベル剤と反応生成物の区
別がつかなくなるからであ・る。そこでプレラベリング
を行うことになるが、従来はこれを自動的に行う装置が
なく、手操作で行っておシ、分析の能率を上げることが
できなかった。
この発明はこのような点に鑑みなされたもので、回転切
換カラムを使用することにより、多検体について高能率
で自動的にプレラベリングすることのできるプレラベリ
ング装置を提供することを目的としている。
換カラムを使用することにより、多検体について高能率
で自動的にプレラベリングすることのできるプレラベリ
ング装置を提供することを目的としている。
この発明は試料中の目的成分を吸着する充填剤を充填し
た多数の回転カラムと、この回転カラムを所定のピッチ
で間欠的に回転させ、吸着工程、カップリング工程、洗
浄工程、脱着工程、再生工程およびコンディショニング
工程を順次行うように切換える回転体とを備えたプレラ
ベリング装置である。
た多数の回転カラムと、この回転カラムを所定のピッチ
で間欠的に回転させ、吸着工程、カップリング工程、洗
浄工程、脱着工程、再生工程およびコンディショニング
工程を順次行うように切換える回転体とを備えたプレラ
ベリング装置である。
以下、図面の実施例によシ、本発明を説明する。
第１図は本発明の一実施例によるプレラベリング装置を
備えた液体クロマトグラフ装置の系統図、第２図は回転
切換カラムを示す垂直断面図、第３図はその平面図によ
る系統図である。
備えた液体クロマトグラフ装置の系統図、第２図は回転
切換カラムを示す垂直断面図、第３図はその平面図によ
る系統図である。
図面において、１は試料供給装置で、ターンテーブル２
と多数の試料管３を有し、試料管６にはンプリングパル
プであり、サンプリング位置において、一端が吸上管５
と接続し、他端がサンプリングポンプ６、切換パルプ７
、逆洗ポンプ８および洗浄水槽９と接続し、＼また送液
位置において、一端が送液ポンプ１０およびバッファー
タンク１１と接続し、他端１が送液管１２に接続するよ
うになっている。
と多数の試料管３を有し、試料管６にはンプリングパル
プであり、サンプリング位置において、一端が吸上管５
と接続し、他端がサンプリングポンプ６、切換パルプ７
、逆洗ポンプ８および洗浄水槽９と接続し、＼また送液
位置において、一端が送液ポンプ１０およびバッファー
タンク１１と接続し、他端１が送液管１２に接続するよ
うになっている。
１Ｓは回転切換カラムで、詳細は第２図および第３図に
示されているように、それぞれ試料中の目的成分を吸着
する吸着剤を充填した多数の回転カラ−ム１５ｍ、１５
ｂ・・・１５ｔが回転体１４の周囲に等間隔で配置され
、この回転体１４社上部固定ブロック１５および下部固
定ブロック１６によってシールされ、かつ回転可能に支
持され、ゼネバ機構等の間欠回転装置１７によって所定
のタイミングとピッチで、矢印Ｒ方向に間欠的に回転す
るようになっている。
示されているように、それぞれ試料中の目的成分を吸着
する吸着剤を充填した多数の回転カラ−ム１５ｍ、１５
ｂ・・・１５ｔが回転体１４の周囲に等間隔で配置され
、この回転体１４社上部固定ブロック１５および下部固
定ブロック１６によってシールされ、かつ回転可能に支
持され、ゼネバ機構等の間欠回転装置１７によって所定
のタイミングとピッチで、矢印Ｒ方向に間欠的に回転す
るようになっている。
上部固定ブロック１６にはＩＩＩカラム１３ａ。
１３ｂ・・・１．６ｆに対応しでζ送液管１２、ラベル
剤供給管１＠、−剤供給管１９、バッファー供給ｔ２０
、再生液供給管２１および／２ツファー供給管２２が接
続し、下部固定ブロック１６には排液管２３，２４，２
５、送液管２３６および排液管２７．２８が接続してい
る。
剤供給管１＠、−剤供給管１９、バッファー供給ｔ２０
、再生液供給管２１および／２ツファー供給管２２が接
続し、下部固定ブロック１６には排液管２３，２４，２
５、送液管２３６および排液管２７．２８が接続してい
る。
送液管２６は切換バルブ２９を介して送液ポンプ６０お
よびバッファータンク３１と接続し、また切換バルブ２
９から他の切換バルブ６２を介して複数の分析カラム５
３ａ、３３ｂの上端に接続している。分析カラム５６ｈ
、３３ｂには液体クロマトグラフ用の充填剤が充填され
ており、その下端は切換バルブ６４を介してｇｓＲ検出
器６５に接続している。６６はマグネット、６７は空洞
共振器、６８はセルである。・２ソファ−供給管２Ｄは
送ｉポンプ６９およびバッファータンク４０に接続して
いる。
よびバッファータンク３１と接続し、また切換バルブ２
９から他の切換バルブ６２を介して複数の分析カラム５
３ａ、３３ｂの上端に接続している。分析カラム５６ｈ
、３３ｂには液体クロマトグラフ用の充填剤が充填され
ており、その下端は切換バルブ６４を介してｇｓＲ検出
器６５に接続している。６６はマグネット、６７は空洞
共振器、６８はセルである。・２ソファ−供給管２Ｄは
送ｉポンプ６９およびバッファータンク４０に接続して
いる。
以上のように構成された液体クロマトグラフ装置におい
て、回転切換カラム１６がブレラ（す／グ装置の主要部
を構成している。回転カラ・ム１３ｇ・・・に充填され
る充填剤としては、アミノ酸分析の場合、イオン交換樹
脂が用いられ、その他非イオン性物の場合シリカ、アル
ミナまたはこれらのオクタデシルシラン処理物力とが使
用される。
て、回転切換カラム１６がブレラ（す／グ装置の主要部
を構成している。回転カラ・ム１３ｇ・・・に充填され
る充填剤としては、アミノ酸分析の場合、イオン交換樹
脂が用いられ、その他非イオン性物の場合シリカ、アル
ミナまたはこれらのオクタデシルシラン処理物力とが使
用される。
以下、アミノ酸のプレラベリングの場合を例にとシ、）
：ｄｙｙＩａｎ 法によシ４−イソチオシアナート−２
，２，６，６，−テ）ラメチルピぼりヂノオキシルをス
ピンラベル剤としてプレラベリングを行う場合について
説明する。
：ｄｙｙＩａｎ 法によシ４−イソチオシアナート−２
，２，６，６，−テ）ラメチルピぼりヂノオキシルをス
ピンラベル剤としてプレラベリングを行う場合について
説明する。
試料供給装置１において、ターンテーブル２が所定のタ
イミングで間欠回転するごとに、試料管３からサンプリ
ングポンプ６によりサンプリングパルプ４に試料がサン
プリングされる。サンプリングパルプ４を切換−えて、
バッファータンク１１から送液ポンプ１０によってバッ
ファーＡを送液すると、サンプリングされた試料が送液
管１２を通μて予め強塩基性陰イオン交換樹脂をつめた
回転カラム１６＆に注入され、試料中の目的成分である
アミノ酸が回転カラム１３ａ中の充填剤に吸着され、吸
着工程が行われる。
イミングで間欠回転するごとに、試料管３からサンプリ
ングポンプ６によりサンプリングパルプ４に試料がサン
プリングされる。サンプリングパルプ４を切換−えて、
バッファータンク１１から送液ポンプ１０によってバッ
ファーＡを送液すると、サンプリングされた試料が送液
管１２を通μて予め強塩基性陰イオン交換樹脂をつめた
回転カラム１６＆に注入され、試料中の目的成分である
アミノ酸が回転カラム１３ａ中の充填剤に吸着され、吸
着工程が行われる。
このとき次の回転カラム１３ｂでは、ラベル剤供給１ｒ
１８からスピ／うにル剤が／２ツファーＢとともに供給
され、充填剤に吸着されたアミノ酸と反応し、カップリ
ング工程が行われる。反応熟成時間を充分にとった後同
転カラム１３ｃでは、溶剤供給管１９からピリジン＋ベ
ンゼン等の溶剤を供給して未反応う（ル剤および副反応
生成物を抽出し、洗浄工程が行われる。抽出されたラベ
ル剤は必要に応じて別途回収される。
１８からスピ／うにル剤が／２ツファーＢとともに供給
され、充填剤に吸着されたアミノ酸と反応し、カップリ
ング工程が行われる。反応熟成時間を充分にとった後同
転カラム１３ｃでは、溶剤供給管１９からピリジン＋ベ
ンゼン等の溶剤を供給して未反応う（ル剤および副反応
生成物を抽出し、洗浄工程が行われる。抽出されたラベ
ル剤は必要に応じて別途回収される。
回転カラム１３ａではバッファータンク４Ｄがら送液ポ
ンプ６９、バッファー供給管２０を通して供給される・
２ソファ−〇により、ラベル剤トカップリングされた目
的成分アミノ酸を脱着させる脱着工程が行われ、脱着し
たアミノ酸は送液管２＆から切換・ぐルプ２９，３２を
通して分析カラム３５ａ、３３ｂのいずれかに注入され
る。また回転カラム１３ｅでは再生液供給管２１から供
給される再生液により充填剤の再生工程が行われ、回転
カラム１６ｆではバッファー供給管２２がら供給される
・２ソファ−Ａによシコンディショニング工程が行われ
る。
ンプ６９、バッファー供給管２０を通して供給される・
２ソファ−〇により、ラベル剤トカップリングされた目
的成分アミノ酸を脱着させる脱着工程が行われ、脱着し
たアミノ酸は送液管２＆から切換・ぐルプ２９，３２を
通して分析カラム３５ａ、３３ｂのいずれかに注入され
る。また回転カラム１３ｅでは再生液供給管２１から供
給される再生液により充填剤の再生工程が行われ、回転
カラム１６ｆではバッファー供給管２２がら供給される
・２ソファ−Ａによシコンディショニング工程が行われ
る。
上記の各工程を一定時間行ったのち、回転体１４を１ス
テップ回転させ、これにより各回転カラムのあった位置
まで回転させ、次の回転カラムについてそれぞれ同様の
操作を行い、これを順次くり返えす。回転体１４の回転
タイミングは各工程が完全に終了するように決定される
。
テップ回転させ、これにより各回転カラムのあった位置
まで回転させ、次の回転カラムについてそれぞれ同様の
操作を行い、これを順次くり返えす。回転体１４の回転
タイミングは各工程が完全に終了するように決定される
。
送液管２６から送液される目的成分アミノ酸を含む試料
が分析力”ラーム６３ｂに注入された場合、注入終了と
同時に切換バルブ２９が切換えられて、バッファータン
ク６１から送液ポンプ６０によりバッファーＤが送液さ
れ、分析カラム３３ｂにおいて展開が行われる。展開し
て流出する目的成分はラベル剤とカップリングした状態
で流出し、ＥＳＲ検出器６５により検出され、目的成分
の分析が行われる。
が分析力”ラーム６３ｂに注入された場合、注入終了と
同時に切換バルブ２９が切換えられて、バッファータン
ク６１から送液ポンプ６０によりバッファーＤが送液さ
れ、分析カラム３３ｂにおいて展開が行われる。展開し
て流出する目的成分はラベル剤とカップリングした状態
で流出し、ＥＳＲ検出器６５により検出され、目的成分
の分析が行われる。
分析カラム３３ｂで展開が行われている間、送液管４１
から再生液およびバッファーＤが分析カラム３３ｍに供
給され、充填剤の再生およびコンディショニングが行わ
れる。分析カラム６６ａ。
から再生液およびバッファーＤが分析カラム３３ｍに供
給され、充填剤の再生およびコンディショニングが行わ
れる。分析カラム６６ａ。
３３ｂの再生、コンディショニングおよび展開が終了し
た時点で、切換パルプ２９．３２を切えると、１ステッ
プ歩進した回転切換カラム１２の回転カラム１３ｃから
、送液管２６を通して試料が分析力ラム６５ｈｔｌＣｆ
１人され、同様に分析が行われ、また分析カラム６６し
の再生、コンディショニングも同様に行われ、以後これ
がくり返えされる。
た時点で、切換パルプ２９．３２を切えると、１ステッ
プ歩進した回転切換カラム１２の回転カラム１３ｃから
、送液管２６を通して試料が分析力ラム６５ｈｔｌＣｆ
１人され、同様に分析が行われ、また分析カラム６６し
の再生、コンディショニングも同様に行われ、以後これ
がくり返えされる。
サンプリング系の洗浄はサンプリングバルブ４のサンプ
リング位置において、洗浄ポンプ８により洗浄水槽９か
ら洗浄水をサンプリングパルプ４を通して試料管３まで
送液することにょシ行われる。
リング位置において、洗浄ポンプ８により洗浄水槽９か
ら洗浄水をサンプリングパルプ４を通して試料管３まで
送液することにょシ行われる。
なお回転カラム１３ｍ・・・の形状、構造、数等は図示
実施例のものに限られず、また配置、接続方法等も任意
に変更可能である。またこれらを支持する回転体１４、
固定ブロック１５．１６等の構造、回転機構等も限定さ
れない。さらに分析カラム６５ ｍ、 ５３ ｂの数
も限定されず、回転カラム１３ｍ・・・および分析カラ
ム５３ｍ・・・の数を任意に選択することにより、両者
の切換タイミングを独立して設定することができ、それ
ぞれの工程に合つたタイミングで切換を行うことができ
る。
実施例のものに限られず、また配置、接続方法等も任意
に変更可能である。またこれらを支持する回転体１４、
固定ブロック１５．１６等の構造、回転機構等も限定さ
れない。さらに分析カラム６５ ｍ、 ５３ ｂの数
も限定されず、回転カラム１３ｍ・・・および分析カラ
ム５３ｍ・・・の数を任意に選択することにより、両者
の切換タイミングを独立して設定することができ、それ
ぞれの工程に合つたタイミングで切換を行うことができ
る。
上記実施例ではスピンラベル剤によるプレラベリングに
ついて説明したが、本発明はスピンラベル剤以外にも適
用でき、例えばニンヒドリ′ン、螢光発色試薬、ＵＶ吸
収ラベル剤、ラジオアイソトープラベル剤などによるプ
レラベリングを行う場合にも適用可能である。また本発
明はアミノ酸以外の液体クロマトグラフ装置および液体
クロマトグラフ装置以外の装置におけるプレラベリング
装置にも同様に適用できる。
ついて説明したが、本発明はスピンラベル剤以外にも適
用でき、例えばニンヒドリ′ン、螢光発色試薬、ＵＶ吸
収ラベル剤、ラジオアイソトープラベル剤などによるプ
レラベリングを行う場合にも適用可能である。また本発
明はアミノ酸以外の液体クロマトグラフ装置および液体
クロマトグラフ装置以外の装置におけるプレラベリング
装置にも同様に適用できる。
以上のとおり、本発明によれば、回転切換カラムを使用
したので、次のよ°うな効果がある。
したので、次のよ°うな効果がある。
■ 各回転カラムは各工程を並列して実施するため、多
検体について、高能率、連続的かつ自動的にプレラベリ
ングを行うことができる。
検体について、高能率、連続的かつ自動的にプレラベリ
ングを行うことができる。
■ 各工程は独立して実施されるため、他の影響を考え
ることなく、それぞれの最適条件をとることができる。
ることなく、それぞれの最適条件をとることができる。
■ 全系がクローズド系で反応するので、酸化等による
副反応生成物が少ない。
副反応生成物が少ない。
■ 高価なスピンラベル剤でも、相対的に微量で高磯度
とすることができるので、高選択性、高感度で分析を行
うことができる。
とすることができるので、高選択性、高感度で分析を行
うことができる。
■ ラ（ル剤の回収が可能である。
第１図は本発明の一実施例によるプレラベリング装置を
備えた液体クロマトグラフ装置の系統図、第２図は回転
切換カラ°ムを示す垂直断面図、第３図はその平面図に
よる系統図である。 各図中、同一符号は同一または相当部分を示し、１は試
料供給装置、４はサンプリングバルブ、１６は回転切換
カラム、１３ａ、１３ｂ・・・は回転カラム、１４は回
転体、１５は上部回転ブロック、１６は下部回転ブロッ
ク、３６ａ、３６ｂは分析カラム、６５はＥＳＲ検出器
である。 代理人 弁理士 柳 原 成
備えた液体クロマトグラフ装置の系統図、第２図は回転
切換カラ°ムを示す垂直断面図、第３図はその平面図に
よる系統図である。 各図中、同一符号は同一または相当部分を示し、１は試
料供給装置、４はサンプリングバルブ、１６は回転切換
カラム、１３ａ、１３ｂ・・・は回転カラム、１４は回
転体、１５は上部回転ブロック、１６は下部回転ブロッ
ク、３６ａ、３６ｂは分析カラム、６５はＥＳＲ検出器
である。 代理人 弁理士 柳 原 成
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１１試料中の目的成分を吸着する充填剤を充填した多
数の回転カラムと、この回転カラムを所定のピッチで間
欠的に回転させ、吸着工程、カップリング工程、洗浄工
程、脱着工程、再生工程およびコンデインヨニング工程
を順次行うように切換える回転体とを備えたプレラベリ
ング装置（２）回転体は上部固定ブロックおよび下部固
定ブロック間で回転可能とされている特許請求の範囲第
１項記載のプレラベリング装置 （３） 上部固定ブロックおよび下部固定ブロックに
は、各回転カラムに切換接続される送排液系が接続して
いる特許請求の範囲第２項記載のプレラベリング装置 （４） カップリング工程はスピンラベル剤、ニンヒ
ドリン、螢光発色試薬、ＵＶ吸収ラベル剤またはラジオ
アイソトープラベル剤によるものである特許請求の範囲
第１項ないし第３項のいずれかに記載のプレラベリング
装置１゜
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21414081A JPS58113748A (ja) | 1981-12-26 | 1981-12-26 | プレラベリング装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21414081A JPS58113748A (ja) | 1981-12-26 | 1981-12-26 | プレラベリング装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58113748A true JPS58113748A (ja) | 1983-07-06 |
| JPS6256460B2 JPS6256460B2 (ja) | 1987-11-26 |
Family
ID=16650885
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21414081A Granted JPS58113748A (ja) | 1981-12-26 | 1981-12-26 | プレラベリング装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58113748A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60142250A (ja) * | 1983-12-28 | 1985-07-27 | Shimadzu Corp | 液体クロマトグラフィによる第１級或いは第２級のアミノ基を有する化合物の分析装置 |
| JPS6197567A (ja) * | 1984-10-18 | 1986-05-16 | Yokogawa Hewlett Packard Ltd | 試料の前処理方法 |
| JPH0197857A (ja) * | 1987-07-14 | 1989-04-17 | Kyoto Daiichi Kagaku:Kk | グリコヘモグロビンの自動測定方法及び試料導入バルブ |
| JPH01126544A (ja) * | 1987-11-11 | 1989-05-18 | Hitachi Ltd | 生化学分析方法及び装置 |
| JPH0269655A (ja) * | 1988-09-05 | 1990-03-08 | Japanese Res & Dev Assoc Bio Reactor Syst Food Ind | バイオリアクターオンライン自動分析装置 |
| JPH049756A (ja) * | 1990-04-27 | 1992-01-14 | Hitachi Ltd | 液体クロマトグラフ分析システム |
-
1981
- 1981-12-26 JP JP21414081A patent/JPS58113748A/ja active Granted
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60142250A (ja) * | 1983-12-28 | 1985-07-27 | Shimadzu Corp | 液体クロマトグラフィによる第１級或いは第２級のアミノ基を有する化合物の分析装置 |
| JPH0552462B2 (ja) * | 1983-12-28 | 1993-08-05 | Shimadzu Corp | |
| JPS6197567A (ja) * | 1984-10-18 | 1986-05-16 | Yokogawa Hewlett Packard Ltd | 試料の前処理方法 |
| JPH0197857A (ja) * | 1987-07-14 | 1989-04-17 | Kyoto Daiichi Kagaku:Kk | グリコヘモグロビンの自動測定方法及び試料導入バルブ |
| JPH01126544A (ja) * | 1987-11-11 | 1989-05-18 | Hitachi Ltd | 生化学分析方法及び装置 |
| JPH0269655A (ja) * | 1988-09-05 | 1990-03-08 | Japanese Res & Dev Assoc Bio Reactor Syst Food Ind | バイオリアクターオンライン自動分析装置 |
| JPH049756A (ja) * | 1990-04-27 | 1992-01-14 | Hitachi Ltd | 液体クロマトグラフ分析システム |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6256460B2 (ja) | 1987-11-26 |
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