JPH1171288A - 異種完全二重特異性及び／または三重特異性抗体を用いたｅｘ ｖｉｖｏ免疫化の方法 - Google Patents
異種完全二重特異性及び／または三重特異性抗体を用いたｅｘ ｖｉｖｏ免疫化の方法Info
- Publication number
- JPH1171288A JPH1171288A JP10170389A JP17038998A JPH1171288A JP H1171288 A JPH1171288 A JP H1171288A JP 10170389 A JP10170389 A JP 10170389A JP 17038998 A JP17038998 A JP 17038998A JP H1171288 A JPH1171288 A JP H1171288A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- human
- antibody
- tumor
- igg3
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000002649 immunization Methods 0.000 title claims description 11
- 230000003053 immunization Effects 0.000 title claims description 11
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims abstract description 86
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 75
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 64
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 46
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 30
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 30
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 claims abstract description 23
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 15
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 10
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 75
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 35
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 26
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 20
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 14
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 14
- 230000007774 longterm Effects 0.000 claims description 14
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 claims description 14
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 14
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 14
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 11
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims description 8
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 claims description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 7
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 claims description 6
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 6
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 5
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims description 4
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 claims description 4
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 claims description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 4
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 4
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 claims description 3
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 claims description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 claims description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 3
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 claims description 2
- 108010084313 CD58 Antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 claims description 2
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 claims description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 claims description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 claims description 2
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 claims description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 2
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 6
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 claims 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 abstract description 14
- 230000005855 radiation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 11
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 10
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 10
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 10
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 7
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 7
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 5
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 101150084967 EPCAM gene Proteins 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 208000007660 Residual Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 3
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- -1 CD86 Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000004970 cd4 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000004940 costimulation Effects 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 2
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 230000009107 upstream regulation Effects 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000251204 Chimaeridae Species 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010011968 Decreased immune responsiveness Diseases 0.000 description 1
- 208000009129 Ear Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 206010019695 Hepatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N Levamisole Chemical compound C1([C@H]2CN3CCSC3=N2)=CC=CC=C1 HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 208000010505 Nose Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 102000004245 Proteasome Endopeptidase Complex Human genes 0.000 description 1
- 108090000708 Proteasome Endopeptidase Complex Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000017274 T cell anergy Effects 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 206010043515 Throat cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 231100000384 autocytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001368 autocytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008614 cellular interaction Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 208000031083 ear cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 208000013010 hypopharyngeal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 229960001614 levamisole Drugs 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000010949 lymph node disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003810 lymphokine-activated killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000022924 malignant ear neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000007500 overflow downdraw method Methods 0.000 description 1
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N thioacetazone Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(\C=N\NC(N)=S)C=C1 SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/13—Tumour cells, irrespective of tissue of origin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/10—Inactivation or decontamination of a medicinal preparation prior to administration to an animal or a person
- A61K41/17—Inactivation or decontamination of a medicinal preparation prior to administration to an animal or a person by ultraviolet [UV] or infrared [IR] light, X-rays or gamma rays
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 新たなヒトにおける悪性疾患の治療法、特に
抗腫瘍免疫系を成し遂げることを目標としたものを提供
することが本発明の課題である。 【解決手段】 本発明は、異種で完全な二重特異性抗体
及び/または三重特異性抗体を用いたex vivo免疫化の方
法に関し、同様に腫瘍性疾患の予防及び治療における、
そして特に抗腫瘍免疫の誘導における上記方法の使用に
関する。
抗腫瘍免疫系を成し遂げることを目標としたものを提供
することが本発明の課題である。 【解決手段】 本発明は、異種で完全な二重特異性抗体
及び/または三重特異性抗体を用いたex vivo免疫化の方
法に関し、同様に腫瘍性疾患の予防及び治療における、
そして特に抗腫瘍免疫の誘導における上記方法の使用に
関する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、異種で完全な二重
特異性抗体及び/または三重特異性抗体を用いたex vivo
免疫化の方法に関し、同様に腫瘍性疾患の予防及び治療
における、そして特に抗腫瘍免疫の誘導における上記方
法の産物の使用に関する。
特異性抗体及び/または三重特異性抗体を用いたex vivo
免疫化の方法に関し、同様に腫瘍性疾患の予防及び治療
における、そして特に抗腫瘍免疫の誘導における上記方
法の産物の使用に関する。
【０００２】ここ数年間に成し遂げられた化学療法及び
放射線療法における進歩にもかかわらず、例えば進んだ
乳ガンといったヒトにおける悪性の疾患は未だ非常に好
ましくない予測しか可能でない。一般的に該疾患は治癒
することは不可能である。それゆえ新たな治療ストラテ
ジーを開発する必要がある。この観点においては、腫瘍
を拒絶する患者の免疫系を誘導するために用いられる免
疫治療アプローチに大きな期待が置かれている。腫瘍関
連性抗原が腫瘍細胞上に存在し、特に免疫系がこれらの
抗原をよく認識でき悪性細胞を攻撃できることはよく知
られている。しかしながら腫瘍はそれらが免疫応答を避
けることを可能にする様々なストラテジーを発展させて
いる。該細胞は例えば腫瘍関連性抗原の不十分な提示に
よって、及び/または一般的に存在する腫瘍特異的T細胞
の不十分な活性化によってこれを成し遂げている。
放射線療法における進歩にもかかわらず、例えば進んだ
乳ガンといったヒトにおける悪性の疾患は未だ非常に好
ましくない予測しか可能でない。一般的に該疾患は治癒
することは不可能である。それゆえ新たな治療ストラテ
ジーを開発する必要がある。この観点においては、腫瘍
を拒絶する患者の免疫系を誘導するために用いられる免
疫治療アプローチに大きな期待が置かれている。腫瘍関
連性抗原が腫瘍細胞上に存在し、特に免疫系がこれらの
抗原をよく認識でき悪性細胞を攻撃できることはよく知
られている。しかしながら腫瘍はそれらが免疫応答を避
けることを可能にする様々なストラテジーを発展させて
いる。該細胞は例えば腫瘍関連性抗原の不十分な提示に
よって、及び/または一般的に存在する腫瘍特異的T細胞
の不十分な活性化によってこれを成し遂げている。
【０００３】年当たり約43,000の新たなケースと共に、
乳ガンはドイツにおける女性のガンの統計の最大の位置
を占めている。診断時にリンパ節障害に苦しんでいる女
性の3分の1より小さい数のみが、再発なく10年間生存す
る。
乳ガンはドイツにおける女性のガンの統計の最大の位置
を占めている。診断時にリンパ節障害に苦しんでいる女
性の3分の1より小さい数のみが、再発なく10年間生存す
る。
【０００４】
【従来の技術】現在までのところ、乳ガンに向けられた
免疫治療的アプローチは、BCGまたはレバミソールによ
る治療のような非特異的刺激に対する方法に制限されて
おり、そしてIL-2を用いたLAK細胞及びNK細胞の使用に
制限されている（3,4）。しかしながら用いられる免疫
治療のタイプは生命の延長に対していかなる証拠も提供
していない;BCGによる治療はかえって不都合であるとす
る証明さえ存在する（3）。細胞の非特異的活性化は他
のタイプの腫瘍においても大変効果的であるため、特異
的免疫応答の誘導に向けた試みが為されている。
免疫治療的アプローチは、BCGまたはレバミソールによ
る治療のような非特異的刺激に対する方法に制限されて
おり、そしてIL-2を用いたLAK細胞及びNK細胞の使用に
制限されている（3,4）。しかしながら用いられる免疫
治療のタイプは生命の延長に対していかなる証拠も提供
していない;BCGによる治療はかえって不都合であるとす
る証明さえ存在する（3）。細胞の非特異的活性化は他
のタイプの腫瘍においても大変効果的であるため、特異
的免疫応答の誘導に向けた試みが為されている。
【０００５】例えばT細胞再偏向性二重特異性抗体が腫
瘍の治療において用いられた。これらの抗体はその結合
腕の一つでT細胞受容体複合体を結合し、他の腕で腫瘍
細胞上の腫瘍関連性抗原を結合する。結果として生じた
T細胞の活性化及び腫瘍細胞の場所的近接化は、それぞ
れアポトーシスの誘導によってまたはTNF-αあるいはパ
ーフォリンのようなサイトカインによって腫瘍細胞の破
壊を導く。
瘍の治療において用いられた。これらの抗体はその結合
腕の一つでT細胞受容体複合体を結合し、他の腕で腫瘍
細胞上の腫瘍関連性抗原を結合する。結果として生じた
T細胞の活性化及び腫瘍細胞の場所的近接化は、それぞ
れアポトーシスの誘導によってまたはTNF-αあるいはパ
ーフォリンのようなサイトカインによって腫瘍細胞の破
壊を導く。
【０００６】公知の技術において腫瘍治療で用いられる
抗体は、直接的に患者内に注入されていた。このタイプ
の方法はいくつかの以下の欠点を示す: −それは高投与量の抗体を必要とする; −ひどい副作用が生じる可能性がある; −その腫瘍結合腕によって、抗体はin vivoでの適用の
間通常組織にも結合する可能性がある。
抗体は、直接的に患者内に注入されていた。このタイプ
の方法はいくつかの以下の欠点を示す: −それは高投与量の抗体を必要とする; −ひどい副作用が生じる可能性がある; −その腫瘍結合腕によって、抗体はin vivoでの適用の
間通常組織にも結合する可能性がある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】新たなヒトにおける悪
性疾患の治療法、特に抗腫瘍免疫系を成し遂げることを
目標としたものを提供することが本発明の目的である。
性疾患の治療法、特に抗腫瘍免疫系を成し遂げることを
目標としたものを提供することが本発明の目的である。
【０００８】本発明にしたがってこの目的は請求項1に
より詳細に特性指摘されている方法によって成し遂げら
れる。本方法の好ましい実施態様は従属請求項から明白
になる。
より詳細に特性指摘されている方法によって成し遂げら
れる。本方法の好ましい実施態様は従属請求項から明白
になる。
【０００９】本発明の方法の最終産物は抗体を含む腫瘍
細胞調製物である。この腫瘍細胞調製物を抗腫瘍免疫性
を誘導することによって腫瘍性疾患の予防及び治療にお
いて用いる。
細胞調製物である。この腫瘍細胞調製物を抗腫瘍免疫性
を誘導することによって腫瘍性疾患の予防及び治療にお
いて用いる。
【００１０】本発明の方法を用いることによって、自己
腫瘍細胞が異種二重特異性及び/または三重特異性抗体
を用いて治療され、本方法によって得られた腫瘍細胞調
製物はその自己腫瘍細胞が得られている患者または動物
内に再注入されるために用いられる。
腫瘍細胞が異種二重特異性及び/または三重特異性抗体
を用いて治療され、本方法によって得られた腫瘍細胞調
製物はその自己腫瘍細胞が得られている患者または動物
内に再注入されるために用いられる。
【００１１】さらに本発明は腫瘍性疾患の予防及び治療
における、特に抗腫瘍免疫系および特に好ましくは長期
的免疫系の達成における本発明にしたがって提供される
方法及び腫瘍細胞調製物の使用に関する。
における、特に抗腫瘍免疫系および特に好ましくは長期
的免疫系の達成における本発明にしたがって提供される
方法及び腫瘍細胞調製物の使用に関する。
【００１２】本発明、特に実施例2において提供される
実験により、長期継続腫瘍免疫性が提供されることが示
される。マウスにおいて実施された実験の結果は、ヒト
にも移し替えることが可能である。数年という長期的免
疫性が本発明を用いることによって提供され得ることが
期待される。本発明に記述されているような腫瘍細胞
は、一つ以上のミューテーションによってその通常機能
を欠失し、またはその通常機能が変化している全ての細
胞である。これらのミューテーションのため、腫瘍細胞
は非コントロール方式で増殖可能である。
実験により、長期継続腫瘍免疫性が提供されることが示
される。マウスにおいて実施された実験の結果は、ヒト
にも移し替えることが可能である。数年という長期的免
疫性が本発明を用いることによって提供され得ることが
期待される。本発明に記述されているような腫瘍細胞
は、一つ以上のミューテーションによってその通常機能
を欠失し、またはその通常機能が変化している全ての細
胞である。これらのミューテーションのため、腫瘍細胞
は非コントロール方式で増殖可能である。
【００１３】本発明にしたがった腫瘍免疫性は、自己腫
瘍の長期的または永続的でさえある破壊及び/またはコ
ントロールが達成される方法のような、自己腫瘍に対す
る生物の体の免疫系を活性化することによって定義され
る。
瘍の長期的または永続的でさえある破壊及び/またはコ
ントロールが達成される方法のような、自己腫瘍に対す
る生物の体の免疫系を活性化することによって定義され
る。
【００１４】本発明にしたがって、上記与えられた定義
の下にある全ての種類の腫瘍は、本方法によって治療さ
れ得る。特に上皮腫瘍、腺ガン、結腸ガン、乳ガン、卵
巣ガン、肺、喉、鼻及び耳の各ガンが治療され得る。さ
らに好ましくは白血病及びリンパ球のような非上皮腫
瘍、及び肝腫瘍のようなウイルス誘発性の腫瘍が治療さ
れ得る。
の下にある全ての種類の腫瘍は、本方法によって治療さ
れ得る。特に上皮腫瘍、腺ガン、結腸ガン、乳ガン、卵
巣ガン、肺、喉、鼻及び耳の各ガンが治療され得る。さ
らに好ましくは白血病及びリンパ球のような非上皮腫
瘍、及び肝腫瘍のようなウイルス誘発性の腫瘍が治療さ
れ得る。
【００１５】本発明にしたがって、異種完全二重特異性
抗体及び/または三重特異性抗体が用いられる。これら
の抗体は患者から前もって得られる腫瘍細胞（自己腫瘍
細胞）を用いてex vivoで接触される。引き続く再注入
において腫瘍細胞の生存を防止するため、腫瘍細胞は抗
体と接触する前に放射線照射のような本質的に既知であ
る方法において処理される。放射線照射に引き続いて腫
瘍細胞は完全異種二重特異性抗体及び/または三重特異
性抗体と共にインキュベートされる。本発明にしたがっ
て、全ての抗体が用いられるわけではなく、完全であ
る、すなわち機能的Fc部分を持つ抗体のみが使用され、
それらは天然において異種である、すなわち異なるクラ
ス(サブクラスコンビネーション、断片もまた)及び/ま
たは起源(種)の免疫グロブリンH鎖より成るような抗体
でなければならない。
抗体及び/または三重特異性抗体が用いられる。これら
の抗体は患者から前もって得られる腫瘍細胞（自己腫瘍
細胞）を用いてex vivoで接触される。引き続く再注入
において腫瘍細胞の生存を防止するため、腫瘍細胞は抗
体と接触する前に放射線照射のような本質的に既知であ
る方法において処理される。放射線照射に引き続いて腫
瘍細胞は完全異種二重特異性抗体及び/または三重特異
性抗体と共にインキュベートされる。本発明にしたがっ
て、全ての抗体が用いられるわけではなく、完全であ
る、すなわち機能的Fc部分を持つ抗体のみが使用され、
それらは天然において異種である、すなわち異なるクラ
ス(サブクラスコンビネーション、断片もまた)及び/ま
たは起源(種)の免疫グロブリンH鎖より成るような抗体
でなければならない。
【００１６】これらの完全異種二重特異性及び/または
三重特異性抗体は、以下の性質をさらに持つように選択
されるであろう: α−T細胞に結合すること; β−少なくとも一つの腫瘍細胞上の抗原に結合するこ
と; γ−そのFc部分(二重特異性抗体の場合)によって、また
は第三の特異性(三重特異性抗体の場合)によって、Fc受
容体ポジティブ細胞に結合すること;
三重特異性抗体は、以下の性質をさらに持つように選択
されるであろう: α−T細胞に結合すること; β−少なくとも一つの腫瘍細胞上の抗原に結合するこ
と; γ−そのFc部分(二重特異性抗体の場合)によって、また
は第三の特異性(三重特異性抗体の場合)によって、Fc受
容体ポジティブ細胞に結合すること;
【００１７】本発明の特に好ましい実施態様としては、
完全異種二重特異性及び/または三重特異性抗体をFc受
容体ポジティブ細胞を活性化し、それによってサイトカ
イン及び/または共刺激抗原の発現を誘導または増大す
ることができるように選択する。上記抗体を含むように
得られた腫瘍細胞調製物はさらなる再注入のために調製
されたものである。それは例えば再注入に適した装置に
移される。
完全異種二重特異性及び/または三重特異性抗体をFc受
容体ポジティブ細胞を活性化し、それによってサイトカ
イン及び/または共刺激抗原の発現を誘導または増大す
ることができるように選択する。上記抗体を含むように
得られた腫瘍細胞調製物はさらなる再注入のために調製
されたものである。それは例えば再注入に適した装置に
移される。
【００１８】三重特異性抗体の場合、Fc受容体ポジティ
ブ細胞への結合は好ましくはFc受容体ポジティブ細胞の
Fc受容体を介して、またはFc受容体ポジティブ細胞(抗
原提示細胞)上のマンノース受容体のような他の抗原を
介しても生じる。
ブ細胞への結合は好ましくはFc受容体ポジティブ細胞の
Fc受容体を介して、またはFc受容体ポジティブ細胞(抗
原提示細胞)上のマンノース受容体のような他の抗原を
介しても生じる。
【００１９】本発明の方法及びここで記述されている抗
体の使用だけが、腫瘍細胞が以前に得られている患者内
への抗体の再注入後に抗腫瘍免疫系の発展を確実にす
る。好ましくは再注入は原始的腫瘍の治療の後の患者
で、好ましくは最小の残余の疾患(MRD)の場合の患者で
実施される。ほとんど残余の腫瘍細胞を持たないが再発
の高い危険をもつ患者においては、本発明にしたがって
提供される方法の使用は特に効果的であろう。
体の使用だけが、腫瘍細胞が以前に得られている患者内
への抗体の再注入後に抗腫瘍免疫系の発展を確実にす
る。好ましくは再注入は原始的腫瘍の治療の後の患者
で、好ましくは最小の残余の疾患(MRD)の場合の患者で
実施される。ほとんど残余の腫瘍細胞を持たないが再発
の高い危険をもつ患者においては、本発明にしたがって
提供される方法の使用は特に効果的であろう。
【００２０】本発明の方法を用いることによって、公知
の技術から知られており以下により詳細に記述されてい
る欠点を避けることが可能である。
の技術から知られており以下により詳細に記述されてい
る欠点を避けることが可能である。
【００２１】本発明にしたがって有用な異種二重特異性
抗体及び／または三重特異性抗体はある意味では本質的
に既知のものであるが、別の意味ではそれらは本出願に
おいて初めて記述されるものである。bsabに対する例と
しては、乳ガンのような上皮腫瘍で用いられる抗CD3 x
抗epcam抗体が存在する。
抗体及び／または三重特異性抗体はある意味では本質的
に既知のものであるが、別の意味ではそれらは本出願に
おいて初めて記述されるものである。bsabに対する例と
しては、乳ガンのような上皮腫瘍で用いられる抗CD3 x
抗epcam抗体が存在する。
【００２２】本発明にしたがって、2の方法のバリエー
ションが区別可能である: 1. 短期的インキュベーション、及び 2. 長期的インキュベーション。
ションが区別可能である: 1. 短期的インキュベーション、及び 2. 長期的インキュベーション。
【００２３】短期的インキュベーションは自己腫瘍を完
全な異種二重特異性及び／または三重特異性抗体に10分
から5時間の期間、または10分から3時間、またはさらに
好ましくは15分から2時間の期間、さらに好ましくは15
分から1時間の期間インキュベーションすることをい
う。そしてこの方法で抗体とチャージされた腫瘍細胞を
再注入のため調製する。
全な異種二重特異性及び／または三重特異性抗体に10分
から5時間の期間、または10分から3時間、またはさらに
好ましくは15分から2時間の期間、さらに好ましくは15
分から1時間の期間インキュベーションすることをい
う。そしてこの方法で抗体とチャージされた腫瘍細胞を
再注入のため調製する。
【００２４】長期的インキュベーションは自己腫瘍細胞
を抗体とチャージするために、約10分から5時間、好ま
しくは15分から2時間、そしてさらに好ましくは15分か
ら1時間インキュベーションすることをいう。続いて患
者の血液細胞、好ましくは末梢血液の単核細胞(PBMC＝p
eripheral blood mononucleated cell)を加え、そして
それからこの混合物を1から14日、好ましくは3から10日
そしてより好ましくは6から10日といった長期的な期間
インキュベートする。代わりに処置のもう一つの方法は
自己腫瘍細胞を直接的に二重特異性抗体及び／または三
重特異性抗体と、そして患者の血液細胞と接触させるこ
とである。この方法では、腫瘍に対するたくさんの免疫
細胞を「入れ知恵する」("priming")することがex vivoで
成し遂げられる。その後これらの細胞を患者内に再注入
する。長期的インキュベーションはまた抗体の内面化と
分解を導く。
を抗体とチャージするために、約10分から5時間、好ま
しくは15分から2時間、そしてさらに好ましくは15分か
ら1時間インキュベーションすることをいう。続いて患
者の血液細胞、好ましくは末梢血液の単核細胞(PBMC＝p
eripheral blood mononucleated cell)を加え、そして
それからこの混合物を1から14日、好ましくは3から10日
そしてより好ましくは6から10日といった長期的な期間
インキュベートする。代わりに処置のもう一つの方法は
自己腫瘍細胞を直接的に二重特異性抗体及び／または三
重特異性抗体と、そして患者の血液細胞と接触させるこ
とである。この方法では、腫瘍に対するたくさんの免疫
細胞を「入れ知恵する」("priming")することがex vivoで
成し遂げられる。その後これらの細胞を患者内に再注入
する。長期的インキュベーションはまた抗体の内面化と
分解を導く。
【００２５】予備的なin vitroでの結果は、記述された
方法で前処理された免疫細胞はさらに二重特異性及び/
または三重特異性抗体の添加なく腫瘍細胞を破壊できる
(実施例1参照)。
方法で前処理された免疫細胞はさらに二重特異性及び/
または三重特異性抗体の添加なく腫瘍細胞を破壊できる
(実施例1参照)。
【００２６】長期的インキュベーションと同様に短期的
インキュベーションでは、T細胞は腫瘍細胞上に固定化
された二重特異性及び/または三重特異性抗体によって
腫瘍細胞へ再偏向される;同時に二重特異性及び/または
三重特異性抗体のFc部分に対するFc受容体ポジティブ細
胞の結合が再注入後生じる。これは(それぞれT細胞また
は腫瘍細胞上に)固定化された完全な二重特異性抗体のF
c部分に対する結合によって、Fc受容体ポジティブ細胞
の活性化を導く。
インキュベーションでは、T細胞は腫瘍細胞上に固定化
された二重特異性及び/または三重特異性抗体によって
腫瘍細胞へ再偏向される;同時に二重特異性及び/または
三重特異性抗体のFc部分に対するFc受容体ポジティブ細
胞の結合が再注入後生じる。これは(それぞれT細胞また
は腫瘍細胞上に)固定化された完全な二重特異性抗体のF
c部分に対する結合によって、Fc受容体ポジティブ細胞
の活性化を導く。
【００２７】免疫化の成功を増大するために、短期的イ
ンキュベーション法または長期的インキュベーション法
のそれぞれにしたがった抗体を用いて処理された腫瘍細
胞を、一度だけでなく適宜に数度患者に投与することが
可能である。
ンキュベーション法または長期的インキュベーション法
のそれぞれにしたがった抗体を用いて処理された腫瘍細
胞を、一度だけでなく適宜に数度患者に投与することが
可能である。
【００２８】腫瘍細胞上では細胞内プロセッシングマシ
ネリー(プロテアソーム複合体)と同様にMHC1の上流調節
が、腫瘍細胞にすぐ近接したサイトカイン(INF-γ及びT
NF-αのような)の放出のため生じる。T細胞の二重特異
性抗体介在性活性化及びアクセサリー細胞のため、サイ
トカインが放出される(図1及び3参照)。すなわち完全な
bsabによって腫瘍細胞が破壊され食作用を受けるだけで
はなく、その抗腫瘍免疫系もまた増大される。
ネリー(プロテアソーム複合体)と同様にMHC1の上流調節
が、腫瘍細胞にすぐ近接したサイトカイン(INF-γ及びT
NF-αのような)の放出のため生じる。T細胞の二重特異
性抗体介在性活性化及びアクセサリー細胞のため、サイ
トカインが放出される(図1及び3参照)。すなわち完全な
bsabによって腫瘍細胞が破壊され食作用を受けるだけで
はなく、その抗腫瘍免疫系もまた増大される。
【００２９】bsabによるFc受容体ポジティブ細胞の活性
化は、それぞれbasbのサブクラスまたはサブクラスコン
ビネーションに依存する。in vitroでの実験に示される
ように、例えばマウスIgG2a/ラットIgG2bのサブクラス
コンビネーションのbsabは、Fc受容体ポジティブ細胞に
結合できるが(1)、これらの細胞を比較可能に活性化す
ることは明らかにできない(2)。
化は、それぞれbasbのサブクラスまたはサブクラスコン
ビネーションに依存する。in vitroでの実験に示される
ように、例えばマウスIgG2a/ラットIgG2bのサブクラス
コンビネーションのbsabは、Fc受容体ポジティブ細胞に
結合できるが(1)、これらの細胞を比較可能に活性化す
ることは明らかにできない(2)。
【００３０】完全なbsabは結合腕の一つ(例えばCD3また
はCD2に対する)を介してT細胞に結合し活性化すること
が同時にできるが、bsabのFc部分に結合したFc受容体ポ
ジティブ細胞由来の共刺激シグナルは、T細胞に伝達さ
れるであろう。すなわちbsabの一つの結合腕を介したT
細胞活性化と、T細胞へのFc受容体ポジティブ細胞由来
の共刺激シグナルの同時に生じる伝達の組み合わせだけ
が、効果的なT細胞活性化を引き起こす(図1A)。腫瘍細
胞で不十分に活性化されアネルギー性である腫瘍特異的
T細胞は、本発明のex vivoでの前処理にしたがって再活
性化もされるであろう(図1B)。
はCD2に対する)を介してT細胞に結合し活性化すること
が同時にできるが、bsabのFc部分に結合したFc受容体ポ
ジティブ細胞由来の共刺激シグナルは、T細胞に伝達さ
れるであろう。すなわちbsabの一つの結合腕を介したT
細胞活性化と、T細胞へのFc受容体ポジティブ細胞由来
の共刺激シグナルの同時に生じる伝達の組み合わせだけ
が、効果的なT細胞活性化を引き起こす(図1A)。腫瘍細
胞で不十分に活性化されアネルギー性である腫瘍特異的
T細胞は、本発明のex vivoでの前処理にしたがって再活
性化もされるであろう(図1B)。
【００３１】抗腫瘍免疫系の誘導におけるさらなる重要
な面は、食作用、プロセッシング及びbsabにより向けら
れ活性化されるアクセサリー細胞(単球/マクロファー
ジ、樹状細胞、及びNK-「ナチュラルキラー」-細胞)によ
る腫瘍構成成分の提示の可能性である。この抗原提示の
古典的なメカニズムにより、CD8ポジティブ細胞と同様
に腫瘍特異的CD4細胞が生産され得る。さらに腫瘍特異
的CD4細胞は、T-B細胞共作用の流れにおいて体液性の免
疫応答の誘導で重要な役割を演じる。
な面は、食作用、プロセッシング及びbsabにより向けら
れ活性化されるアクセサリー細胞(単球/マクロファー
ジ、樹状細胞、及びNK-「ナチュラルキラー」-細胞)によ
る腫瘍構成成分の提示の可能性である。この抗原提示の
古典的なメカニズムにより、CD8ポジティブ細胞と同様
に腫瘍特異的CD4細胞が生産され得る。さらに腫瘍特異
的CD4細胞は、T-B細胞共作用の流れにおいて体液性の免
疫応答の誘導で重要な役割を演じる。
【００３２】二重特異性及び三重特異性抗体は、一つの
結合腕によってT細胞のT細胞受容体複合体と結合でき、
第二の結合腕によって腫瘍細胞上の腫瘍関連性抗原と結
合できる。それによってそれらはサイトカインを放出す
ることによってまたはアポトーシス介在性メカニズムに
よって腫瘍細胞を破壊するT細胞を活性化する。さらに
二重特異性抗体によるその活性化の流れの中で、それは
T細胞がその受容体を介して腫瘍特異的抗原を認識する
ことを明らかに可能にし、それによって長期継続免疫化
が始まる(図1B)。この点では二重特異性または三重特異
性抗体の完全なFc部分は、単球/マクロファージ及び樹
状細胞のようなアクセサリー細胞への結合を介在し、こ
れらの細胞がそれら自身細胞毒性になり及び/または同
時にT細胞に対する重要な共刺激シグナルを伝達するこ
とを誘導するという点で特に重要である(図1B)。この方
法でT細胞応答が、ある程度は未知の腫瘍特異的ペプチ
ドに対しても誘導されることが可能なように思われる。
結合腕によってT細胞のT細胞受容体複合体と結合でき、
第二の結合腕によって腫瘍細胞上の腫瘍関連性抗原と結
合できる。それによってそれらはサイトカインを放出す
ることによってまたはアポトーシス介在性メカニズムに
よって腫瘍細胞を破壊するT細胞を活性化する。さらに
二重特異性抗体によるその活性化の流れの中で、それは
T細胞がその受容体を介して腫瘍特異的抗原を認識する
ことを明らかに可能にし、それによって長期継続免疫化
が始まる(図1B)。この点では二重特異性または三重特異
性抗体の完全なFc部分は、単球/マクロファージ及び樹
状細胞のようなアクセサリー細胞への結合を介在し、こ
れらの細胞がそれら自身細胞毒性になり及び/または同
時にT細胞に対する重要な共刺激シグナルを伝達するこ
とを誘導するという点で特に重要である(図1B)。この方
法でT細胞応答が、ある程度は未知の腫瘍特異的ペプチ
ドに対しても誘導されることが可能なように思われる。
【００３３】二重特異性及び/または三重特異性抗体に
よって腫瘍細胞に対してアネルギー化し得る腫瘍特異的
T細胞の再偏向、及び二重特異性または三重特異性抗体
のFc部分に結合したアクセサリー細胞による該T細胞の
同時に起きる共刺激化は、細胞毒性T細胞(CTL)のアネル
ギーを逆転するように機能するであろう。すなわち完全
な異種二重特異性及び/または三重特異性抗体を用い
て、腫瘍に対して患者内に存在するT細胞寛容が中和さ
れ得、それによって長期継続腫瘍免疫系が誘導され得
る。
よって腫瘍細胞に対してアネルギー化し得る腫瘍特異的
T細胞の再偏向、及び二重特異性または三重特異性抗体
のFc部分に結合したアクセサリー細胞による該T細胞の
同時に起きる共刺激化は、細胞毒性T細胞(CTL)のアネル
ギーを逆転するように機能するであろう。すなわち完全
な異種二重特異性及び/または三重特異性抗体を用い
て、腫瘍に対して患者内に存在するT細胞寛容が中和さ
れ得、それによって長期継続腫瘍免疫系が誘導され得
る。
【００３４】最後の面は、同系の腫瘍及び完全なbsabを
用いた処理に引き続いて長期継続抗腫瘍免疫系を誘導し
たマウスを用いた実験からの予備的なin vivoでのデー
タによって支持される。これらの実験において、第一の
腫瘍注射の後bsabを用いて成功して処理され得た14の動
物のうち全部の14が、第一の注射の後144日でのもう一
回の腫瘍注射をbsabのさらなる投与なしで生き残った
(実施例2参照)。
用いた処理に引き続いて長期継続抗腫瘍免疫系を誘導し
たマウスを用いた実験からの予備的なin vivoでのデー
タによって支持される。これらの実験において、第一の
腫瘍注射の後bsabを用いて成功して処理され得た14の動
物のうち全部の14が、第一の注射の後144日でのもう一
回の腫瘍注射をbsabのさらなる投与なしで生き残った
(実施例2参照)。
【００３５】二重特異性及び/または三重特異性抗体に
よるex vivoでの免疫化におけるもう一つの利点は、(i)
起こり得る副作用を最小化すること、(ii) 体の外で腫
瘍細胞に対する腫瘍結合腕の結合をコントロールするこ
と、そして(iii) できるだけ二重特異性及び三重特異性
抗体を少なく使用することである。主として以下に詳細
が記述されているであろう方法には2の異なる方法が存
在する。長期的インキュベーションに関する重要な点
は、用いられる二重特異性または三重特異性抗体は計画
されたインキュベーション期間の間消失し分解されるこ
とである。この方法ではこの免疫化は、冗長な薬剤改善
工程を避けるであろう。
よるex vivoでの免疫化におけるもう一つの利点は、(i)
起こり得る副作用を最小化すること、(ii) 体の外で腫
瘍細胞に対する腫瘍結合腕の結合をコントロールするこ
と、そして(iii) できるだけ二重特異性及び三重特異性
抗体を少なく使用することである。主として以下に詳細
が記述されているであろう方法には2の異なる方法が存
在する。長期的インキュベーションに関する重要な点
は、用いられる二重特異性または三重特異性抗体は計画
されたインキュベーション期間の間消失し分解されるこ
とである。この方法ではこの免疫化は、冗長な薬剤改善
工程を避けるであろう。
【００３６】
【課題を解決するための手段】短期的及び長期的インキ
ュベーション法において、腫瘍細胞は抗体と10分から5
時間の期間以上、好ましくは3時間まで、さらに好まし
くは2時間まで、またさらに好ましくは15分から1時間イ
ンキュベートされる。好ましくは該インキュベーション
は4℃から25℃の温度で、特に好ましくは4℃から10℃で
実施される。該インキュベーションは好ましくは中性の
pHを持つバッファー生理食塩水の滅菌環境で実施され
る。短期的インキュベーションの場合では、患者内への
再注入はその後すぐに実施される。長期的インキュベー
ション法においては、このプレインキュベーションに引
き続いて単核末梢血液細胞を加え、さらに1から14日の
期間、より好ましくは3から10日、さらに好ましくは6か
ら10日間プレインキュベートされた腫瘍細胞/抗体と共
にインキュベートする。好ましくはこのインキュベーシ
ョンはインキュベーターにおいてGMPコンディション(適
切に製造された生産物(Good Manufacturing Production
=GMP))の下と同様に滅菌コンディションの下で37℃で実
施される。上記記述したように長期的インキュベーショ
ンの下では、血液細胞は代わりに適したコンディション
の下で腫瘍細胞及び抗体と共にインキュベートされても
よい。
ュベーション法において、腫瘍細胞は抗体と10分から5
時間の期間以上、好ましくは3時間まで、さらに好まし
くは2時間まで、またさらに好ましくは15分から1時間イ
ンキュベートされる。好ましくは該インキュベーション
は4℃から25℃の温度で、特に好ましくは4℃から10℃で
実施される。該インキュベーションは好ましくは中性の
pHを持つバッファー生理食塩水の滅菌環境で実施され
る。短期的インキュベーションの場合では、患者内への
再注入はその後すぐに実施される。長期的インキュベー
ション法においては、このプレインキュベーションに引
き続いて単核末梢血液細胞を加え、さらに1から14日の
期間、より好ましくは3から10日、さらに好ましくは6か
ら10日間プレインキュベートされた腫瘍細胞/抗体と共
にインキュベートする。好ましくはこのインキュベーシ
ョンはインキュベーターにおいてGMPコンディション(適
切に製造された生産物(Good Manufacturing Production
=GMP))の下と同様に滅菌コンディションの下で37℃で実
施される。上記記述したように長期的インキュベーショ
ンの下では、血液細胞は代わりに適したコンディション
の下で腫瘍細胞及び抗体と共にインキュベートされても
よい。
【００３７】上述したインキュベーションコンディショ
ンは例示としてのみ意図されている。用いられる腫瘍細
胞及び抗体に依存して、他の期間、温度、コンディショ
ン等、及び一般的に異なるインキュベーションコンディ
ションもまた用いられ得る。簡単な実験によって、当業
者は該コンディションを確立することが可能であろう。
ンは例示としてのみ意図されている。用いられる腫瘍細
胞及び抗体に依存して、他の期間、温度、コンディショ
ン等、及び一般的に異なるインキュベーションコンディ
ションもまた用いられ得る。簡単な実験によって、当業
者は該コンディションを確立することが可能であろう。
【００３８】プレインキュベーションの間腫瘍細胞は好
ましくは107から109細胞の量で、さらに好ましくは約10
8細胞の量で用いられる。当然当業者は研究室の実験に
よって測定され得る異なるインキュベーションコンディ
ションを選択できる(例えば細胞数およびインキュベー
ション期間の変化)。本発明の方法において用いられる
二重特異性及び/または三重特異性抗体は、2から100μg
の量で、さらに好ましくは5から70μgの量で、特に好ま
しくは5から50μgの量で加えられる。
ましくは107から109細胞の量で、さらに好ましくは約10
8細胞の量で用いられる。当然当業者は研究室の実験に
よって測定され得る異なるインキュベーションコンディ
ションを選択できる(例えば細胞数およびインキュベー
ション期間の変化)。本発明の方法において用いられる
二重特異性及び/または三重特異性抗体は、2から100μg
の量で、さらに好ましくは5から70μgの量で、特に好ま
しくは5から50μgの量で加えられる。
【００３９】用いられる自己腫瘍細胞は例えば、腫瘍細
胞のさらなる生存を避けるために放射線照射される。例
えばガンマ放射線が用いられ、例えば50から100Gyの放
射量で用いられる。本発明のもう一つの実施態様では、
自己腫瘍細胞は化学的物質によって、例えばそのさらな
る生存を避けるためマイトマイシンCによって処理され
る。
胞のさらなる生存を避けるために放射線照射される。例
えばガンマ放射線が用いられ、例えば50から100Gyの放
射量で用いられる。本発明のもう一つの実施態様では、
自己腫瘍細胞は化学的物質によって、例えばそのさらな
る生存を避けるためマイトマイシンCによって処理され
る。
【００４０】本発明にしたがって用いられる抗体は、好
ましくはアネルギー状態である腫瘍特異的T細胞を再活
性化し得る。さらにそれらは腫瘍反応性相補的結合抗体
を誘導でき、それによって体液性免疫応答を誘導でき
る。
ましくはアネルギー状態である腫瘍特異的T細胞を再活
性化し得る。さらにそれらは腫瘍反応性相補的結合抗体
を誘導でき、それによって体液性免疫応答を誘導でき
る。
【００４１】結合は好ましくは、CD3,CD2,CD4,CD5,CD6,
CD8,CD28,及び/またはCD44を介してT細胞と生じる。Fc
受容体ポジティブ細胞は少なくともFcγ受容体I,II,ま
たはIIIを持っている。
CD8,CD28,及び/またはCD44を介してT細胞と生じる。Fc
受容体ポジティブ細胞は少なくともFcγ受容体I,II,ま
たはIIIを持っている。
【００４２】本発明にしたがって用いられ得る抗体は、
単球、マクロファージ、樹状細胞、「ナチュラルキラ−」
細胞(NK細胞)及び/またはFcγ受容体1-ポジティブ細胞
である活性化好中球に結合できる。
単球、マクロファージ、樹状細胞、「ナチュラルキラ−」
細胞(NK細胞)及び/またはFcγ受容体1-ポジティブ細胞
である活性化好中球に結合できる。
【００４３】本発明にしたがって用いられ得る抗体は、
共刺激抗原のようにCD40,CD80,CD86,ICAM-1,及び/また
はLFA-3の発現における誘導または増大を導き、及び/ま
たはFc受容体ポジティブ細胞によるサイトカイン分泌を
導く。該サイトカインは好ましくはIL-1,IL-2,IL-4,IL-
6,IL-8,IL-12,及び/またはTNF-αである。
共刺激抗原のようにCD40,CD80,CD86,ICAM-1,及び/また
はLFA-3の発現における誘導または増大を導き、及び/ま
たはFc受容体ポジティブ細胞によるサイトカイン分泌を
導く。該サイトカインは好ましくはIL-1,IL-2,IL-4,IL-
6,IL-8,IL-12,及び/またはTNF-αである。
【００４４】T細胞への結合は好ましくはT細胞のT細胞
受容体複合体を介して行われる。
受容体複合体を介して行われる。
【００４５】本発明にしたがって用いられ得る二重特異
性抗体好ましくは:抗CD3 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/
または抗CD4 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD5
x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD6 x 抗腫瘍関
連性抗原抗体及び/または抗CD8 x 抗腫瘍関連性抗原抗
体及び/または抗CD2 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/また
は抗CD28 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD44 x
抗腫瘍関連性抗原抗体である。
性抗体好ましくは:抗CD3 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/
または抗CD4 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD5
x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD6 x 抗腫瘍関
連性抗原抗体及び/または抗CD8 x 抗腫瘍関連性抗原抗
体及び/または抗CD2 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/また
は抗CD28 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD44 x
抗腫瘍関連性抗原抗体である。
【００４６】本発明にしたがって用いられ得る三重特異
性抗体好ましくは:抗CD3 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/
または抗CD4 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD5
x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD6 x 抗腫瘍関
連性抗原抗体及び/または抗CD8 x 抗腫瘍関連性抗原抗
体及び/または抗CD2 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/また
は抗CD28 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD44 x
抗腫瘍関連性抗原抗体である。
性抗体好ましくは:抗CD3 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/
または抗CD4 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD5
x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD6 x 抗腫瘍関
連性抗原抗体及び/または抗CD8 x 抗腫瘍関連性抗原抗
体及び/または抗CD2 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/また
は抗CD28 x 抗腫瘍関連性抗原抗体及び/または抗CD44 x
抗腫瘍関連性抗原抗体である。
【００４７】本発明にしたがって有用な三重特異性抗体
は少なくとも、T細胞結合腕、腫瘍細胞結合腕及びFc受
容体ポジティブ細胞に結合する結合腕を持つ。言及され
た結合腕の最後のものは、抗Fc受容体結合腕またはマン
ノース受容体結合腕であろう。
は少なくとも、T細胞結合腕、腫瘍細胞結合腕及びFc受
容体ポジティブ細胞に結合する結合腕を持つ。言及され
た結合腕の最後のものは、抗Fc受容体結合腕またはマン
ノース受容体結合腕であろう。
【００４８】二重特異性抗体は好ましくは異種完全ラッ
ト/マウス二重特異性抗体である。
ト/マウス二重特異性抗体である。
【００４９】本発明にしたがって有用な二重特異性及び
三重特異性抗体によって、T細胞は活性化され腫瘍細胞
に対して再偏向される。好ましくは用いられるであろう
異種完全二重特異性抗体は、一つ以上の以下のイソタイ
プのコンビネーションから選択される:ラット-IgG2b/マ
ウス-IgG2a,ラット-IgG2b/マウス-IgG2b,ラット-IgG2b/
マウス-IgG3;ラット-IgG2b/ヒト-IgG1,ラット-IgG2b/ヒ
ト-IgG2,ラット-IgG2b/ヒト-IgG3[東洋のアロタイプ G3
m(st)=プロテインAに結合],ラット-IgG2b/ヒト-IgG4;ラ
ット-IgG2b/ラット-IgG2c; マウス-IgG2a/ヒト-IgG3[白色人種のアロタイプ G3m(b+
g)=プロテインAに結合しない、以下では*として示され
る] マウス-IgG2a/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2a/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2a/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-
ヒト-IgG3*[CH2のC末端領域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG
3*-[CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG2-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG3-[ヒン
ジ-CH2-CH3、東洋のアロタイプ] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ヒト-IgG1/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG2[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG2[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG2/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG2-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] マウス-IgG2b/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2b/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-
[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3]
三重特異性抗体によって、T細胞は活性化され腫瘍細胞
に対して再偏向される。好ましくは用いられるであろう
異種完全二重特異性抗体は、一つ以上の以下のイソタイ
プのコンビネーションから選択される:ラット-IgG2b/マ
ウス-IgG2a,ラット-IgG2b/マウス-IgG2b,ラット-IgG2b/
マウス-IgG3;ラット-IgG2b/ヒト-IgG1,ラット-IgG2b/ヒ
ト-IgG2,ラット-IgG2b/ヒト-IgG3[東洋のアロタイプ G3
m(st)=プロテインAに結合],ラット-IgG2b/ヒト-IgG4;ラ
ット-IgG2b/ラット-IgG2c; マウス-IgG2a/ヒト-IgG3[白色人種のアロタイプ G3m(b+
g)=プロテインAに結合しない、以下では*として示され
る] マウス-IgG2a/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2a/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2a/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-
ヒト-IgG3*[CH2のC末端領域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG
3*-[CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG2-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG3-[ヒン
ジ-CH2-CH3、東洋のアロタイプ] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ヒト-IgG1/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG2[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG2[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG2/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG2-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] マウス-IgG2b/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2b/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-
[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3]
【００５０】本発明にしたがって有用な抗体は好ましく
は、モノクローナル、キメラ、組換え、合成、半合成ま
たは化学的に修飾された、例えばFv,Fab,scFvまたはF(a
b)2断片を持つ完全な抗体である。
は、モノクローナル、キメラ、組換え、合成、半合成ま
たは化学的に修飾された、例えばFv,Fab,scFvまたはF(a
b)2断片を持つ完全な抗体である。
【００５１】好ましくはヒト起源の抗体または誘導体ま
たは断片、あるいはそれらをヒトへの応用のために適す
るような方法で改変した抗体(「ヒト化抗体」と呼ばれる)
が用いられる(例えばShalaby等,J.Exp.Med.175(1992),2
17;Mocikat等,Transplantation 57(1994),405)。
たは断片、あるいはそれらをヒトへの応用のために適す
るような方法で改変した抗体(「ヒト化抗体」と呼ばれる)
が用いられる(例えばShalaby等,J.Exp.Med.175(1992),2
17;Mocikat等,Transplantation 57(1994),405)。
【００５２】上記した様々なタイプの抗体及び断片の調
製は当業者に明白である。例えば好ましくヒト、ラッ
ト、マウス、ウサギまたはヤギといった哺乳動物由来の
モノクローナル抗体の調製は、例えばKohler及びMilste
in(Nature 256(1975),495)そしてHarlow及びLane(Antib
odies,A Laboratory Manual(1988),Cold Spring Harbo
r)またはGalfe(Meth.Enzymol.73(1981),3)に記述されて
いるようなありきたりの方法を用いて実施され得る。
製は当業者に明白である。例えば好ましくヒト、ラッ
ト、マウス、ウサギまたはヤギといった哺乳動物由来の
モノクローナル抗体の調製は、例えばKohler及びMilste
in(Nature 256(1975),495)そしてHarlow及びLane(Antib
odies,A Laboratory Manual(1988),Cold Spring Harbo
r)またはGalfe(Meth.Enzymol.73(1981),3)に記述されて
いるようなありきたりの方法を用いて実施され得る。
【００５３】さらに当業者に明白な技術にしたがった組
換えDNA法によって、記述されている抗体を調製するこ
とが可能である(Kurucz等,J.Immunol.154(1995),4576;H
ollinger等,Proc.Natl.Acad.Sc.USA 90(1993),6444)。
換えDNA法によって、記述されている抗体を調製するこ
とが可能である(Kurucz等,J.Immunol.154(1995),4576;H
ollinger等,Proc.Natl.Acad.Sc.USA 90(1993),6444)。
【００５４】本方法で用いられる抗体は過度の負担なく
当業者によってデザインされ生産され得る。開示された
リファレンスのリスト、特にリファレンス(7)から(11)
は、本発明に用いられる二重特異性及び三重特異性抗体
を得るための方法を記述する。
当業者によってデザインされ生産され得る。開示された
リファレンスのリスト、特にリファレンス(7)から(11)
は、本発明に用いられる二重特異性及び三重特異性抗体
を得るための方法を記述する。
【００５５】特にGreenwood等の書類(9)は、適したクロ
ーニング法による単一免疫グロブリンドメイン(例えばC
H2)の交換を開示する。これらのクローニング法を用い
ることによって例えば請求項9に記述されている新たな
抗体のコンビネーションが提供され得る。例としては以
下のものがある:ヒト-(VH-CH1,VL-CL)-ヒトIgG4-(ヒン
ジ)-ヒトIgG4(CH2のN末端領域)-ヒトIgG3*(CH2のC末端
領域:>アミノ酸251位)-ヒトIgG3*(CH3)。
ーニング法による単一免疫グロブリンドメイン(例えばC
H2)の交換を開示する。これらのクローニング法を用い
ることによって例えば請求項9に記述されている新たな
抗体のコンビネーションが提供され得る。例としては以
下のものがある:ヒト-(VH-CH1,VL-CL)-ヒトIgG4-(ヒン
ジ)-ヒトIgG4(CH2のN末端領域)-ヒトIgG3*(CH2のC末端
領域:>アミノ酸251位)-ヒトIgG3*(CH3)。
【００５６】二重特異性抗体:ヒトIgG4/ヒト-(VH-CH1,V
L-CL)-ヒトIgG4-(ヒンジ)-ヒトIgG4(CH2のN末端領域)-
ヒトIgG3*(CH2のC末端領域:>アミノ酸251位)-ヒトIgG3*
(CH3)の調製のための抗体:ヒトIgG4を用いたコンビネー
ションは、例えば書類(6)に記述されているような単一
細胞融合によって調製される。
L-CL)-ヒトIgG4-(ヒンジ)-ヒトIgG4(CH2のN末端領域)-
ヒトIgG3*(CH2のC末端領域:>アミノ酸251位)-ヒトIgG3*
(CH3)の調製のための抗体:ヒトIgG4を用いたコンビネー
ションは、例えば書類(6)に記述されているような単一
細胞融合によって調製される。
【００５７】一方で、二重特異性抗体と呼ばれる2の異
なる特異性を持つ抗体の調製は、組換えDNA法を用いて
実施され得るが、もう一方ではハイブリッドハイブリド
ーマ融合法と呼ばれるものによっても実施され得る(例
えばMilstein等,Nature 305(1993),537参照)。この方法
によって、それぞれ一つの望ましい特異性を持つ抗体を
生産するハイブリドーマ細胞系を融合させ、両者の特異
性を持つ抗体を生産する組換え細胞系を同定し単離す
る。
なる特異性を持つ抗体の調製は、組換えDNA法を用いて
実施され得るが、もう一方ではハイブリッドハイブリド
ーマ融合法と呼ばれるものによっても実施され得る(例
えばMilstein等,Nature 305(1993),537参照)。この方法
によって、それぞれ一つの望ましい特異性を持つ抗体を
生産するハイブリドーマ細胞系を融合させ、両者の特異
性を持つ抗体を生産する組換え細胞系を同定し単離す
る。
【００５８】本発明に存在する問題は、請求項1に特性
指摘される性質と活性を示す限りにおいて、二重特異性
及び三重特異性抗体によって解決され得る。以下に示す
ように2及び3の特異性を持つ抗体の調製は、詳細に記述
されている。該二重特異性及び三重特異性抗体を提供す
ることは本分野の範疇に属しており、該調製法を記述し
ている文献は全体として参考としてここで取り込まれ
る。
指摘される性質と活性を示す限りにおいて、二重特異性
及び三重特異性抗体によって解決され得る。以下に示す
ように2及び3の特異性を持つ抗体の調製は、詳細に記述
されている。該二重特異性及び三重特異性抗体を提供す
ることは本分野の範疇に属しており、該調製法を記述し
ている文献は全体として参考としてここで取り込まれ
る。
【００５９】本発明の基本的な問題に答えるのに適した
三重特異性抗体と呼ばれる3の特異性を持つ抗体の調製
は、例えば二重特異性抗体のIgGのH鎖の一つにもう一つ
の特異性を持つ第三の抗原結合部位を接合することによ
って、例えば「単一鎖可変断片」(scFv)の形態で実施され
得る。scFvは例えばH鎖の一つに以下のリンカーを介し
て結合される: -S-S(G4S)nD-I リンカー (S=セリン、G=グリシン、D=アスパラギン酸、I=イソロ
イシン)。
三重特異性抗体と呼ばれる3の特異性を持つ抗体の調製
は、例えば二重特異性抗体のIgGのH鎖の一つにもう一つ
の特異性を持つ第三の抗原結合部位を接合することによ
って、例えば「単一鎖可変断片」(scFv)の形態で実施され
得る。scFvは例えばH鎖の一つに以下のリンカーを介し
て結合される: -S-S(G4S)nD-I リンカー (S=セリン、G=グリシン、D=アスパラギン酸、I=イソロ
イシン)。
【００６０】類似して、三重特異性F(ab)2構築物は二重
特異性抗体の一つの特異性のH鎖のCH2-CH3領域を、第三
の特異性のscFvによって置換することによって調製さ
れ、一方で例えば同種組換え等によってコード遺伝子内
へのストップコドンの導入によって(「ヒンジ」領域の末
端に)、他の特異性のH鎖のCH2-CH3領域は除去される。
(図5参照)
特異性抗体の一つの特異性のH鎖のCH2-CH3領域を、第三
の特異性のscFvによって置換することによって調製さ
れ、一方で例えば同種組換え等によってコード遺伝子内
へのストップコドンの導入によって(「ヒンジ」領域の末
端に)、他の特異性のH鎖のCH2-CH3領域は除去される。
(図5参照)
【００６１】三重特異性scFv構築物を調製することも可
能である。この場合3の異なる特異性を表す3のVH-VL領
域を連ねて並べる(図6)。
能である。この場合3の異なる特異性を表す3のVH-VL領
域を連ねて並べる(図6)。
【００６２】本発明にしたがって、例えば完全な二重特
異性抗体が用いられる場合がある。完全な二重特異性抗
体は、通常の抗体のように一つの特異性をそれぞれ表す
2の抗体半分子(一つの免疫グロブリンH鎖およびL鎖のそ
れぞれ)の組み合わせで、付加的によく知られたエフェ
クター機能を示すFc部分を持つものである。好ましくは
それらはクァッドローマ法によって調製される。この調
製法は代表的にDE-A-44 19 399に記述されている。この
書類は二重特異性抗体の完全な開示の目的で、及び該抗
体の定義の観点でも参考として全体として取り込まれ
る。当然他の調製法もまた、それらが本発明にしたがっ
て必要とされる上述の完全な二重特異性抗体をもたらす
範囲で用いられ得る。
異性抗体が用いられる場合がある。完全な二重特異性抗
体は、通常の抗体のように一つの特異性をそれぞれ表す
2の抗体半分子(一つの免疫グロブリンH鎖およびL鎖のそ
れぞれ)の組み合わせで、付加的によく知られたエフェ
クター機能を示すFc部分を持つものである。好ましくは
それらはクァッドローマ法によって調製される。この調
製法は代表的にDE-A-44 19 399に記述されている。この
書類は二重特異性抗体の完全な開示の目的で、及び該抗
体の定義の観点でも参考として全体として取り込まれ
る。当然他の調製法もまた、それらが本発明にしたがっ
て必要とされる上述の完全な二重特異性抗体をもたらす
範囲で用いられ得る。
【００６３】例えば新しく開発された生産法(6)によっ
て、完全な二重特異性抗体は十分な量で調製され得る。
乳ガン細胞上で2の異なる腫瘍関連性抗原(例えばGA-733
-2=C215のようなc-erb-B2、ep-cam)に対して2の二重特
異性抗体の組み合わせは、たった一つの抗原を発現して
いる腫瘍細胞が認識されないという危険性を最小化す
る。
て、完全な二重特異性抗体は十分な量で調製され得る。
乳ガン細胞上で2の異なる腫瘍関連性抗原(例えばGA-733
-2=C215のようなc-erb-B2、ep-cam)に対して2の二重特
異性抗体の組み合わせは、たった一つの抗原を発現して
いる腫瘍細胞が認識されないという危険性を最小化す
る。
【００６４】抗c-erb-B2 x 抗CD64の特異性を持つ二重
特異性F(ab')2断片を用いて処理することによって抗腫
瘍免疫性を達成することも試みられている。bsF(ab')2
断片の主な利点は、用いられる特異性のためにFcγRI+
細胞だけが腫瘍に対して再偏向されることである。bsF
(ab')2断片は腫瘍を直接的に破壊する能力を持つ一方
で、それらはそれら自身では抗腫瘍免疫性を確立するこ
とはできない。特異的なT細胞受容体を持つT細胞だけが
この能力を持つ。FcγRI+細胞は、例えば腫瘍構成成分
の食作用に引き続く腫瘍特異的ペプチドの提示によって
(それぞれMHCIまたはMHCIIを介して)、間接的に腫瘍特
異的T細胞を活性化できる一方で、抗腫瘍免疫系の誘導
の効力はこの場合それほど高くはない(患者の30%におい
てのみである)。
特異性F(ab')2断片を用いて処理することによって抗腫
瘍免疫性を達成することも試みられている。bsF(ab')2
断片の主な利点は、用いられる特異性のためにFcγRI+
細胞だけが腫瘍に対して再偏向されることである。bsF
(ab')2断片は腫瘍を直接的に破壊する能力を持つ一方
で、それらはそれら自身では抗腫瘍免疫性を確立するこ
とはできない。特異的なT細胞受容体を持つT細胞だけが
この能力を持つ。FcγRI+細胞は、例えば腫瘍構成成分
の食作用に引き続く腫瘍特異的ペプチドの提示によって
(それぞれMHCIまたはMHCIIを介して)、間接的に腫瘍特
異的T細胞を活性化できる一方で、抗腫瘍免疫系の誘導
の効力はこの場合それほど高くはない(患者の30%におい
てのみである)。
【００６５】上述のbsF(ab')2断片と比較してT細胞を再
偏向できる完全なbsabのさらなる利点は、以下に記述さ
れている: 1. 完全なbsabでは、Fc受容体ポジティブ細胞に結合で
き、ADCC(抗体依存性細胞介在性細胞毒性(antibody-dep
endent cell-mediated cytotoxicity))によって、一方
で腫瘍の破壊に直接的に寄与し得、他方で上述したよう
にT細胞活性化に直接的に寄与し得る。 2. 完全なT細胞再偏向bsabによって、アネルギー性腫瘍
特異的T細胞を、本発明にしたがって直接的に腫瘍で再
活性化され得る腫瘍細胞に向ける。これは抗CD64x 抗腫
瘍関連性抗原の特異性を持つbsF(ab')2断片を用いて成
し遂げられ得ない。3. 抗CD64 x 抗腫瘍関連性抗原の特
異性を持つbsF(ab')2断片は、単に患者の30%で抗腫瘍免
疫性を成し遂げることができるのみである一方で、本発
明にしたがってT細胞再偏向の完全なbsabを用いたマウ
スによる実験において、動物の100%における予防が成し
遂げられ得た。
偏向できる完全なbsabのさらなる利点は、以下に記述さ
れている: 1. 完全なbsabでは、Fc受容体ポジティブ細胞に結合で
き、ADCC(抗体依存性細胞介在性細胞毒性(antibody-dep
endent cell-mediated cytotoxicity))によって、一方
で腫瘍の破壊に直接的に寄与し得、他方で上述したよう
にT細胞活性化に直接的に寄与し得る。 2. 完全なT細胞再偏向bsabによって、アネルギー性腫瘍
特異的T細胞を、本発明にしたがって直接的に腫瘍で再
活性化され得る腫瘍細胞に向ける。これは抗CD64x 抗腫
瘍関連性抗原の特異性を持つbsF(ab')2断片を用いて成
し遂げられ得ない。3. 抗CD64 x 抗腫瘍関連性抗原の特
異性を持つbsF(ab')2断片は、単に患者の30%で抗腫瘍免
疫性を成し遂げることができるのみである一方で、本発
明にしたがってT細胞再偏向の完全なbsabを用いたマウ
スによる実験において、動物の100%における予防が成し
遂げられ得た。
【００６６】Fcγ-RIに対するbsabの結合は、最適の抗
腫瘍有効性の観点で2の重要な利点を持つ: (1) Fcγ-ポジティブ細胞は、ADCCを用いて腫瘍細胞を
除去することができ（１１）、この点ではｂｓａｂによ
って腫瘍細胞に向けられている細胞毒性T細胞の抗腫瘍
効果に相互依存的に寄与しているであろう(13)。 (2) Fcγ-RI-ポジティブ細胞(単球/マクロファージ/樹
状細胞のような)は、T細胞に対し抗原提示と同様な重要
な共刺激シグナルを提供でき、それによってT細胞のア
ネルギー化を防ぐことができる。さらに図1に示されて
いるように、T細胞のアクセサリー細胞及び腫瘍細胞と
の完全なbsab介在性相互作用のための望ましい副産物と
して、腫瘍特異的ペプチド(MHC抗原を介して腫瘍細胞上
に提示される)を認識するT細胞受容体を持つ刺激された
T細胞が存在し得る。この場合T細胞の正しい活性化に必
要とされる共刺激は、アクセサリー細胞(例えば単球)に
よって提供されるであろう。この点では直接的T細胞受
容体非依存性bsab介在性腫瘍破壊(図1A)を除いた本発明
の抗体は、bsabの分解後患者内でパトロールを継続する
腫瘍特異的T細胞(図1B)をも活性化し生産するに違いな
い。すなわち遺伝子治療的アプローチと同様に完全なbs
abによって(例えば腫瘍細胞内にB-7のような共刺激抗原
の取り込みによって)、患者における腫瘍寛容に打ち勝
つことができる。
腫瘍有効性の観点で2の重要な利点を持つ: (1) Fcγ-ポジティブ細胞は、ADCCを用いて腫瘍細胞を
除去することができ（１１）、この点ではｂｓａｂによ
って腫瘍細胞に向けられている細胞毒性T細胞の抗腫瘍
効果に相互依存的に寄与しているであろう(13)。 (2) Fcγ-RI-ポジティブ細胞(単球/マクロファージ/樹
状細胞のような)は、T細胞に対し抗原提示と同様な重要
な共刺激シグナルを提供でき、それによってT細胞のア
ネルギー化を防ぐことができる。さらに図1に示されて
いるように、T細胞のアクセサリー細胞及び腫瘍細胞と
の完全なbsab介在性相互作用のための望ましい副産物と
して、腫瘍特異的ペプチド(MHC抗原を介して腫瘍細胞上
に提示される)を認識するT細胞受容体を持つ刺激された
T細胞が存在し得る。この場合T細胞の正しい活性化に必
要とされる共刺激は、アクセサリー細胞(例えば単球)に
よって提供されるであろう。この点では直接的T細胞受
容体非依存性bsab介在性腫瘍破壊(図1A)を除いた本発明
の抗体は、bsabの分解後患者内でパトロールを継続する
腫瘍特異的T細胞(図1B)をも活性化し生産するに違いな
い。すなわち遺伝子治療的アプローチと同様に完全なbs
abによって(例えば腫瘍細胞内にB-7のような共刺激抗原
の取り込みによって)、患者における腫瘍寛容に打ち勝
つことができる。
【００６７】この点ではFcγ-RIの発現は、G-CSF治療に
引き続いて各自の細胞で上流調節される。
引き続いて各自の細胞で上流調節される。
【００６８】本発明は上記記述され、特に二重特異性抗
体の点では以下に記述されるであろう。二重特異性抗体
の代わりにもちろん三重特異性抗体も、それらがなされ
た準備を備える範囲で用いられ得る。
体の点では以下に記述されるであろう。二重特異性抗体
の代わりにもちろん三重特異性抗体も、それらがなされ
た準備を備える範囲で用いられ得る。
【００６９】
免疫化プロトコール ex vivoでの免疫化(短期的インキュベーション) 1. 自己腫瘍物質(または同じ腫瘍タイプの自己腫瘍細
胞)由来の単一細胞懸濁液(107-109細胞)の調製、及び引
き続いてガンマ線照射(50-100Gy)。 2. bsab(5-50μg)の添加、及び4℃で45分のインキュベ
ーション。その後非結合抗体の洗い流し。 3. 細胞混合物の再注入(i.v.)。
胞)由来の単一細胞懸濁液(107-109細胞)の調製、及び引
き続いてガンマ線照射(50-100Gy)。 2. bsab(5-50μg)の添加、及び4℃で45分のインキュベ
ーション。その後非結合抗体の洗い流し。 3. 細胞混合物の再注入(i.v.)。
【００７０】ex vivoでの免疫化(長期的インキュベーシ
ョン) 1.自己腫瘍物質(または同じ腫瘍タイプの自己腫瘍細胞)
由来の単一細胞懸濁液(107-109細胞)の調製、及び引き
続いてガンマ線照射(50-100Gy)。 2. bsab(5-50μg)の添加、45分のインキュベーション。 3. PBMC(108-1010)の添加、[代わりに:T細胞アフェレシ
ス(aphaeresis)から得た1×109細胞]。 4. 5から7日後、例えば自己乳ガン細胞系(MCF-7,MX-1)
に対する等量のトランスファーによってT細胞反応性を
モニターする。 5. 患者内で4日目から14日目で培養したPBMCの再注入
(i.v.)(T細胞アフェレシスの場合:冷凍保存) 省略:PBMC、末梢血液単核細胞;i.v.、静脈内
ョン) 1.自己腫瘍物質(または同じ腫瘍タイプの自己腫瘍細胞)
由来の単一細胞懸濁液(107-109細胞)の調製、及び引き
続いてガンマ線照射(50-100Gy)。 2. bsab(5-50μg)の添加、45分のインキュベーション。 3. PBMC(108-1010)の添加、[代わりに:T細胞アフェレシ
ス(aphaeresis)から得た1×109細胞]。 4. 5から7日後、例えば自己乳ガン細胞系(MCF-7,MX-1)
に対する等量のトランスファーによってT細胞反応性を
モニターする。 5. 患者内で4日目から14日目で培養したPBMCの再注入
(i.v.)(T細胞アフェレシスの場合:冷凍保存) 省略:PBMC、末梢血液単核細胞;i.v.、静脈内
【００７１】同様のアッセイだが代わりにサイトカイン
の添加に依存し、ありきたりのbsab(ラットIgG2B x ラ
ットIgG1のサブクラスコンビネーションのbsabによるア
クセサリー細胞の活性化のない)を用いて実施されるア
ッセイにより、動物モデルにおける該ex vivoでの免疫
化の主要な有効性が示されている(5)。
の添加に依存し、ありきたりのbsab(ラットIgG2B x ラ
ットIgG1のサブクラスコンビネーションのbsabによるア
クセサリー細胞の活性化のない)を用いて実施されるア
ッセイにより、動物モデルにおける該ex vivoでの免疫
化の主要な有効性が示されている(5)。
【００７２】これと対照的に、ここで開示される方法の
利点は、腫瘍細胞に対するT細胞及びアクセサリー細胞
(単球/マクロファージ、図)の同時の活性化によって、
例えば腫瘍細胞上のMHC1の上流調節に必要とされるサイ
トカイン(INF-αまたはTNF-αのような)についての「自
己満足」("self-sufficiency")に存する。これはここで
用いられる完全なbsabの初めで言及された特定のサブク
ラスコンビネーションによって成し遂げられる。短期的
インキュベーションの場合では、これらの工程は患者内
で生じる。短期的インキュベーションのさらなる利点は
以下の点にある。(i) 別な方法では必要とされる血清含
有培地を用いて細胞懸濁液を培養することを避けるこ
と。(ii) このためGMP調節にしたがって値段のかかる培
養を避けることもできること。(iii) さらに重要な面は
適用される抗体の量が有意に少ないため、bsabによる起
こり得る副作用をそれぞれ避けるまたは減少することが
できること。
利点は、腫瘍細胞に対するT細胞及びアクセサリー細胞
(単球/マクロファージ、図)の同時の活性化によって、
例えば腫瘍細胞上のMHC1の上流調節に必要とされるサイ
トカイン(INF-αまたはTNF-αのような)についての「自
己満足」("self-sufficiency")に存する。これはここで
用いられる完全なbsabの初めで言及された特定のサブク
ラスコンビネーションによって成し遂げられる。短期的
インキュベーションの場合では、これらの工程は患者内
で生じる。短期的インキュベーションのさらなる利点は
以下の点にある。(i) 別な方法では必要とされる血清含
有培地を用いて細胞懸濁液を培養することを避けるこ
と。(ii) このためGMP調節にしたがって値段のかかる培
養を避けることもできること。(iii) さらに重要な面は
適用される抗体の量が有意に少ないため、bsabによる起
こり得る副作用をそれぞれ避けるまたは減少することが
できること。
【００７３】長期的インキュベーションにおける利点
は、in vitroでのbsabは数期間後それ自身が消失するこ
とである(そしてそれゆえ、この方法は「医薬」としては
確立されないが、「医療用具」として確立され得る)。
は、in vitroでのbsabは数期間後それ自身が消失するこ
とである(そしてそれゆえ、この方法は「医薬」としては
確立されないが、「医療用具」として確立され得る)。
【００７４】
実施例1 自己T細胞による二重特異性抗体介在性の腫瘍細胞の溶
解 H-Lac78は下咽頭ガンから確立され、高レベルでepcamを
発現している(それ自体FACSデータ)細胞系である。H-La
c78及びボランティアから得た末梢単核細胞(PBMC)を用
いて、自己細胞毒性Tリンパ球の生産が検出可能であっ
た。この目的のため、一定量のH-Lac78(2×104)をbsab
(抗Epcam × 抗CD3)の存在下(10ng)または不存在下で様
々な量のPBMCと共にインキュベートした。7日間後PBMC
を除去し、フローサイトメトリーで分析した。同時にH-
Lac78腫瘍細胞の数を検出した。T細胞の活性化はクラス
ターの形成により顕微鏡下で観察可能である;増殖はラ
ジオラベルチミジンの取り込みにより証明されるであろ
う。残りの腫瘍細胞の検出は、末梢血液細胞では発現さ
れない上皮マーカーepcamによるものと同様に顕微鏡下
で実施する。図2に示されるように、H-Lac78細胞はbsab
の存在下で完全に溶解された、すなわちepcamポジティ
ブ細胞は7日後のフローサイトメトリーでは検出されな
かった。これらのデータは顕微鏡観察によって確認され
た。対照的にbsabの不存在下ではH-Lac78細胞の融合性
の層がウェル内に観察され、epcamポジティブ細胞はFAC
Sにより検出可能であった。
解 H-Lac78は下咽頭ガンから確立され、高レベルでepcamを
発現している(それ自体FACSデータ)細胞系である。H-La
c78及びボランティアから得た末梢単核細胞(PBMC)を用
いて、自己細胞毒性Tリンパ球の生産が検出可能であっ
た。この目的のため、一定量のH-Lac78(2×104)をbsab
(抗Epcam × 抗CD3)の存在下(10ng)または不存在下で様
々な量のPBMCと共にインキュベートした。7日間後PBMC
を除去し、フローサイトメトリーで分析した。同時にH-
Lac78腫瘍細胞の数を検出した。T細胞の活性化はクラス
ターの形成により顕微鏡下で観察可能である;増殖はラ
ジオラベルチミジンの取り込みにより証明されるであろ
う。残りの腫瘍細胞の検出は、末梢血液細胞では発現さ
れない上皮マーカーepcamによるものと同様に顕微鏡下
で実施する。図2に示されるように、H-Lac78細胞はbsab
の存在下で完全に溶解された、すなわちepcamポジティ
ブ細胞は7日後のフローサイトメトリーでは検出されな
かった。これらのデータは顕微鏡観察によって確認され
た。対照的にbsabの不存在下ではH-Lac78細胞の融合性
の層がウェル内に観察され、epcamポジティブ細胞はFAC
Sにより検出可能であった。
【００７５】トランスファー実験による活性化自己CTL
の検出 引き続くトランスファー実験において、それぞれbsabの
存在下または不存在下でインキュベートされたPBMCを、
bsabの再添加なしで新しいH-Lac78細胞上にトランスフ
ァーした。この場合でも腫瘍細胞は溶解したが、以前に
bsabにより活性化されているPBMCによってそれは極端で
あった。H-Lac78の溶解は1のH-Lac78細胞に対して2のPB
MCの割合まで24時間以内に完全であった。この結果はイ
ンターロイキン-2(IL-2)の外的な添加なく自己CTLが生
産されることを示す。IL-2はTリンパ球の活性化に必須
であるので、ここで得られたデータはbsab介在性活性化
によりIL-2がT細胞自身によって生産されることを示唆
する。bsabの添加によるIL-2mRNAの誘導は、その後のRT
-PCRにより確認でき、そこではbsabは元のスタート抗体
より明らかに優れていた(図3)。IL-2は抗腫瘍有効サイ
トカインとして記述されているので、この観察はその限
りにおいては重要である;しかし適切な濃度におけるIL-
2の全身の投与はその毒性のため限界がある。対照的
に、IL-2は例えば完全なbsabにより誘導されるので、細
胞毒性の危険はIL-2の局所的生産では現れない。またIL
-2(及びIL-12)の効果的な誘導はT細胞受容体及びCD28を
介してT細胞の刺激を必要とするので、これは完全なbsa
bによるT細胞活性化におけるFc受容体ポジティブ細胞(C
D28,CD80,及びCD86のリガンドという条件で)の重要性を
示す。
の検出 引き続くトランスファー実験において、それぞれbsabの
存在下または不存在下でインキュベートされたPBMCを、
bsabの再添加なしで新しいH-Lac78細胞上にトランスフ
ァーした。この場合でも腫瘍細胞は溶解したが、以前に
bsabにより活性化されているPBMCによってそれは極端で
あった。H-Lac78の溶解は1のH-Lac78細胞に対して2のPB
MCの割合まで24時間以内に完全であった。この結果はイ
ンターロイキン-2(IL-2)の外的な添加なく自己CTLが生
産されることを示す。IL-2はTリンパ球の活性化に必須
であるので、ここで得られたデータはbsab介在性活性化
によりIL-2がT細胞自身によって生産されることを示唆
する。bsabの添加によるIL-2mRNAの誘導は、その後のRT
-PCRにより確認でき、そこではbsabは元のスタート抗体
より明らかに優れていた(図3)。IL-2は抗腫瘍有効サイ
トカインとして記述されているので、この観察はその限
りにおいては重要である;しかし適切な濃度におけるIL-
2の全身の投与はその毒性のため限界がある。対照的
に、IL-2は例えば完全なbsabにより誘導されるので、細
胞毒性の危険はIL-2の局所的生産では現れない。またIL
-2(及びIL-12)の効果的な誘導はT細胞受容体及びCD28を
介してT細胞の刺激を必要とするので、これは完全なbsa
bによるT細胞活性化におけるFc受容体ポジティブ細胞(C
D28,CD80,及びCD86のリガンドという条件で)の重要性を
示す。
【００７６】実施例2 二重特異性抗体が長期継続抗腫瘍免疫性を誘導できるか
という問題に答えるために、C57BL/6マウスを5×103の
同系B16腫瘍細胞を用いて初めに注射した。2日後一群の
マウス(18匹)を、クァッドローマ法により調製しT細胞
上のCD3と同様に腫瘍細胞上のターゲット構造(ep-cam/C
215=腫瘍関連性抗原)を認識する完全bsabを用いて処理
した。第二の群(6匹)はbsabのみに含まれる両方の特異
性を持つ等モルのFab断片を受け取った。Fabコントロー
ル群の動物の全てが56日以内で死んだまたは犠牲にされ
ねばならなかった一方で、bsabを用いて処理された18の
動物のうち14が生き残った。腫瘍細胞の第一の注射の14
4日後、生き残った14の動物は750 b16腫瘍細胞のもう一
つの投与量で注射されたが、この時はbsabの投与はなか
った。コントロールとして同数の腫瘍細胞を5の非処理
動物に投与した。非処理コントロールグループの最後の
動物が腫瘍注射の66日後犠牲にされねばならなかった一
方で、bsabで処理された動物の全てが生き残った(モニ
ター期間:第二の腫瘍細胞注射に引き続く120日)。図4A
及びBも参照:上述された2の引き続く実験の生存グラ
フ。
という問題に答えるために、C57BL/6マウスを5×103の
同系B16腫瘍細胞を用いて初めに注射した。2日後一群の
マウス(18匹)を、クァッドローマ法により調製しT細胞
上のCD3と同様に腫瘍細胞上のターゲット構造(ep-cam/C
215=腫瘍関連性抗原)を認識する完全bsabを用いて処理
した。第二の群(6匹)はbsabのみに含まれる両方の特異
性を持つ等モルのFab断片を受け取った。Fabコントロー
ル群の動物の全てが56日以内で死んだまたは犠牲にされ
ねばならなかった一方で、bsabを用いて処理された18の
動物のうち14が生き残った。腫瘍細胞の第一の注射の14
4日後、生き残った14の動物は750 b16腫瘍細胞のもう一
つの投与量で注射されたが、この時はbsabの投与はなか
った。コントロールとして同数の腫瘍細胞を5の非処理
動物に投与した。非処理コントロールグループの最後の
動物が腫瘍注射の66日後犠牲にされねばならなかった一
方で、bsabで処理された動物の全てが生き残った(モニ
ター期間:第二の腫瘍細胞注射に引き続く120日)。図4A
及びBも参照:上述された2の引き続く実験の生存グラ
フ。
【００７７】参考文献 1. Haagen等, Interaction of human monocyte Fcγ re
ceptors with rat IgG2b, J.Immunolog., 1995, 154: 1
852-1860 2. Gast G.C.,Haagen I.-A.,van Houten A.A.,Klein
S.,Duits A.J.,de Wager R.A.,Vroom T.M.,Clark M.R.,
J.Phillips,van Dijk A.J.G.,de Lau W.B.M.,BastB.J.
E.G. CD8 T-cell activation after intravenous admin
istration of CE3 XCD19 bispecific antibody in pati
ents with non-Hodgkin lymphoma. CancerImmunol.,Imm
unother. 40: 390, 1995 3. Tenny,C.,Jacobs,S.,Stoller,R.,Earle,M.,及びKirk
wood,J. Adoptive cellular immunotherapy with high-
dose chemotherapy and autologous bone marrowrescue
(ABMR) for recurrent breast cancer (meeting abstr
act). Proc Annu.Meet.Am.Soc.Clin.Oncol; 11: A88, 1
992 ISSN: 0736-7589. CO: PKAODO-7589CO, 1993. 4. Early Breast Cancer Trialists' Collaborative Gr
oup, Systemic treatment of early breast cancer by
hormonal, cytotoxic or immune therapy - 133randomi
sed trials involving 31 000 recurrences and 24 000
deaths among 75 000 women. Part II Lancet 339: 71
-85, 1992 5. Guo等, Effective tumor vaccines generated by in
vitro modification oftumor cells with cytokins an
d bispecific monoclonal antibodies. NatureMedicine
3: 451, 1997 6. Lindhofer等, Preferential species-restricted he
avy-light chain pairing in rat-mouse quadromas: Im
plications for a single step purification ofbispec
ific antibodies, J.Immunology 1995, 155:219 7. Bruggemann等, A MATCHED SET OF RAT/MOUSE CHIMER
IC ANTIBODIES: Identification and Biological Prope
rties of RAT H CHAIN CONSTANT REGIONS μ,γ1,γ2a,
γ2b,ε,andα1, J. Immunology 1989, 142:3145 8. Routledge等, A humanized monovalent CD3 antibod
y which can activate homologous complement, Eur.
J. Immunology 1991, 21:2717 9. Greenwood等, Structural motifs involved in hume
n IgG antibody effector functions, Eur. J. Immunol
ogy 1993, 23:1098 10. Kardinal等, Genetic atability of gene targeted
immunoglobolin loci.I. Heavy chain isotype exchan
ge induced by a universal gene replacementvector,
J. Immunology 1996, 89:309 11. Kardinal等, Integration vectors for antibody c
himerization by homologous recombination in hybrid
oma cells, Eur. J. Immunology 1995, 25:792
ceptors with rat IgG2b, J.Immunolog., 1995, 154: 1
852-1860 2. Gast G.C.,Haagen I.-A.,van Houten A.A.,Klein
S.,Duits A.J.,de Wager R.A.,Vroom T.M.,Clark M.R.,
J.Phillips,van Dijk A.J.G.,de Lau W.B.M.,BastB.J.
E.G. CD8 T-cell activation after intravenous admin
istration of CE3 XCD19 bispecific antibody in pati
ents with non-Hodgkin lymphoma. CancerImmunol.,Imm
unother. 40: 390, 1995 3. Tenny,C.,Jacobs,S.,Stoller,R.,Earle,M.,及びKirk
wood,J. Adoptive cellular immunotherapy with high-
dose chemotherapy and autologous bone marrowrescue
(ABMR) for recurrent breast cancer (meeting abstr
act). Proc Annu.Meet.Am.Soc.Clin.Oncol; 11: A88, 1
992 ISSN: 0736-7589. CO: PKAODO-7589CO, 1993. 4. Early Breast Cancer Trialists' Collaborative Gr
oup, Systemic treatment of early breast cancer by
hormonal, cytotoxic or immune therapy - 133randomi
sed trials involving 31 000 recurrences and 24 000
deaths among 75 000 women. Part II Lancet 339: 71
-85, 1992 5. Guo等, Effective tumor vaccines generated by in
vitro modification oftumor cells with cytokins an
d bispecific monoclonal antibodies. NatureMedicine
3: 451, 1997 6. Lindhofer等, Preferential species-restricted he
avy-light chain pairing in rat-mouse quadromas: Im
plications for a single step purification ofbispec
ific antibodies, J.Immunology 1995, 155:219 7. Bruggemann等, A MATCHED SET OF RAT/MOUSE CHIMER
IC ANTIBODIES: Identification and Biological Prope
rties of RAT H CHAIN CONSTANT REGIONS μ,γ1,γ2a,
γ2b,ε,andα1, J. Immunology 1989, 142:3145 8. Routledge等, A humanized monovalent CD3 antibod
y which can activate homologous complement, Eur.
J. Immunology 1991, 21:2717 9. Greenwood等, Structural motifs involved in hume
n IgG antibody effector functions, Eur. J. Immunol
ogy 1993, 23:1098 10. Kardinal等, Genetic atability of gene targeted
immunoglobolin loci.I. Heavy chain isotype exchan
ge induced by a universal gene replacementvector,
J. Immunology 1996, 89:309 11. Kardinal等, Integration vectors for antibody c
himerization by homologous recombination in hybrid
oma cells, Eur. J. Immunology 1995, 25:792
【図１】 二重特異性抗体を用いた腫瘍免疫治療におけ
るアクセサリー細胞の役割を示す図である。
るアクセサリー細胞の役割を示す図である。
【図２】 フローサイトメトリーによって証明された二
重特異性抗体の投与に引き続く腫瘍細胞の破壊を示すグ
ラフである。
重特異性抗体の投与に引き続く腫瘍細胞の破壊を示すグ
ラフである。
【図３】 完全な二重特異性抗体で可能だが、部分的抗
体では不可能なサイトカイン誘導を示す図である。
体では不可能なサイトカイン誘導を示す図である。
【図４】 in vivoでの本発明にしたがった方法の効力
を示すグラフである
を示すグラフである
【図５】 三重特異性F(ab)2抗体を示す図である。
【図６】 三重特異性scFv抗体を示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ハンス−ヨアヒム・コルプ ドイツ・Ｄ−80804・ミュンヘン・レルヒ ェナウアーシュトラーセ・39 (72)発明者 ラインハルト・ツァイドラー ドイツ・Ｄ−81249・ミュンヘン・ライザ ウシュトラーセ・12 (72)発明者 ゲオルク・ボルンカム ドイツ・Ｄ−81243・ミュンヘン・オティ ロシュトラーセ・６ａ
Claims (26)
- 【請求項１】 以下の工程: a) 自己腫瘍細胞を単離すること; b) 再注入に引き続くそれの生存を避けるために、該腫
瘍細胞を処理すること; c) 該処理された腫瘍細胞を、以下の性質を示す完全な
異種の二重特異性及び/三重特異性抗体とインキュベー
トすること: α-T細胞に結合する; β-腫瘍細胞上の少なくとも一つの抗原と結合する; γ-Fc受容体ポジティブ細胞と(二重特異性抗体の場合に
は)そのFc部分で、または(三重特異性抗体の場合には)
第三の特異性で結合すること;を含むヒト及び動物のex
vivoでの免疫化法。 - 【請求項２】 上記抗体が、Fcγ受容体I,II,またはIII
を持つFc受容体ポジティブ細胞に結合できるように選択
されることを特徴とする請求項1記載の方法。 - 【請求項３】 上記抗体が、単球、マクロファージ、樹
状細胞、「ナチュラルキラー」細胞(NK細胞)及び/またはF
cγ受容体Iポジティブ細胞である活性化された好中球に
結合できることを特徴とする請求項2記載の方法。 - 【請求項４】 上記抗体が腫瘍反応性相補的結合抗体を
誘導でき、そのため体液性免疫応答を誘導できることを
特徴とする請求項1記載の方法。 - 【請求項５】 上記抗体がCD2,CD3,CD4,CD5,CD6,CD8,CD
28及び/またはCD44を介してT細胞と結合するように選択
されることを特徴とする請求項1記載の方法。 - 【請求項６】 上記抗体が、そのFc受容体ポジティブ細
胞への結合に引き続いて、共刺激抗原としてCD40,CD80,
CD86,ICAM-1及び/またはLFA-3の発現、及び/またはFc受
容体ポジティブ細胞によるサイトカインの分泌を始める
または増大するように選択されることを特徴とする請求
項1記載の方法。 - 【請求項７】 上記抗体がサイトカインであるIL-1,IL-
2,IL-4,IL-6,IL-8,IL-12の分泌を、及び/またはTNF-α
の分泌を増大するように選択されることを特徴とする請
求項6記載の方法。 - 【請求項８】 上記二重特異性抗体が抗CD3 x 抗腫瘍関
連性抗原抗体、及び/または抗CD4 x 抗腫瘍関連性抗原
抗体、及び/または抗CD5 x 抗腫瘍関連性抗原抗体、及
び/または抗CD6 x 抗腫瘍関連性抗原抗体、及び/または
抗CD8 x 抗腫瘍関連性抗原抗体、及び/または抗CD2 x
抗腫瘍関連性抗原抗体、及び/または抗CD28 x 抗腫瘍関
連性抗原抗体、及び/または抗CD44 x 抗腫瘍関連性抗原
抗体であるように選択されることを特徴とする請求項1
記載の方法。 - 【請求項９】 上記二重特異性抗体が以下のイソタイプ
のコンビネーション:ラット-IgG2b/マウス-IgG2a,ラッ
ト-IgG2b/マウス-IgG2b,ラット-IgG2b/マウス-IgG3;ラ
ット-IgG2b/ヒト-IgG1,ラット-IgG2b/ヒト-IgG2,ラット
-IgG2b/ヒト-IgG3[東洋のアロタイプ G3m(st)=プロテイ
ンAに結合],ラット-IgG2b/ヒト-IgG4;ラット-IgG2b/ラ
ット-IgG2c;マウス-IgG2a/ヒト-IgG3[白色人種のアロタ
イプ G3m(b+g)=プロテインAに結合しない、以下では*と
して示される] マウス-IgG2a/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2a/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2a/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG4-[ヒンシ゛]-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト
-IgG3*[CH2のC末端領域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-
[CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG2-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG3-[ヒン
ジ-CH2-CH3、東洋のアロタイプ] ラット-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒン
ジ-CH2-CH3] ヒト-IgG1/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG2[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG2[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG2/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG2-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG4[CH2のN末端領域]-ヒト-IgG3*[CH2のC末端領
域:>アミノ酸251位]-ヒト-IgG3*-[CH3] マウス-IgG2b/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2b/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-IgG2b/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒン
ジ]-ヒト-IgG3*-[CH2-CH3] マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4/ラット-[VH-CH1,VL-
CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-
[CH3] ヒト-IgG1/ラット-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG1/マウス-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG1-[ヒンジ]
-ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3] ヒト-IgG4/ヒト-[VH-CH1,VL-CL]-ヒト-IgG4-[ヒンジ]-
ヒト-IgG4-[CH2]-ヒト-IgG3*-[CH3] の一つ以上から選択されることを特徴とする請求項1か
ら8項のいずれか一項記載の方法。 - 【請求項１０】 上記二重特異性抗体が異種ラット/マ
ウス二重特異性抗体から選択されることを特徴とする請
求項1記載の方法。 - 【請求項１１】 上記三重特異性抗体がT細胞結合腕、
腫瘍細胞結合腕及びFc受容体ポジティブ細胞に対する結
合のための第三の特異性をもつことを特徴とする請求項
1記載の方法。 - 【請求項１２】 上記三重特異性抗体が抗CD3 x 抗腫瘍
関連性抗原抗体、及び/または抗CD4 x 抗腫瘍関連性抗
原抗体、及び/または抗CD5 x 抗腫瘍関連性抗原抗体、
及び/または抗CD6 x 抗腫瘍関連性抗原抗体、及び/また
は抗CD8 x 抗腫瘍関連性抗原抗体、及び/または抗CD2 x
抗腫瘍関連性抗原抗体、及び/または抗CD28 x 抗腫瘍
関連性抗原抗体、及び/または抗CD44 x 抗腫瘍関連性抗
原抗体であるように選択されることを特徴とする請求項
11記載の方法。 - 【請求項１３】 上記工程c)において、腫瘍細胞を完全
な異種二重特異性及び/または三重特異性抗体とインキ
ュベーションした後に、抗体でチャージされた腫瘍細胞
を再注入のために調製する(短期的インキュベーション)
ことを特徴とする請求項1記載の方法。 - 【請求項１４】 上記工程c)において、抗体との腫瘍細
胞のインキュベーションを末梢血液の単核細胞(PBMC=末
梢血液単核細胞)と共に実施する、または抗体との腫瘍
細胞のインキュベーションの後単核細胞を加え、そして
インキュベーションを継続する(長期的インキュベーシ
ョン)ことを特徴とする請求項1記載の方法。 - 【請求項１５】 上記腫瘍細胞が10分から5時間の期間
抗体とインキュベートされることを特徴とする請求項13
または14項記載の方法。 - 【請求項１６】 上記腫瘍細胞が15分から120分の期間
抗体とインキュベートされることを特徴とする請求項13
または14項記載の方法。 - 【請求項１７】 上記単核末梢血液細胞が、腫瘍細胞及
び抗体と1から14日間の期間インキュベートされること
を特徴とする請求項14記載の方法。 - 【請求項１８】 上記単核末梢血液細胞が約108から10
10細胞の量で加えられることを特徴とする請求項14記載
の方法。 - 【請求項１９】 上記腫瘍細胞が107から109細胞の量で
加えられることを特徴とする請求項1記載の方法。 - 【請求項２０】 上記二重特異性及び/または三重特異
性抗体が2から100μgの量で加えられることを特徴とす
る請求項1記載の方法。 - 【請求項２１】 上記工程bにおける腫瘍細胞の処理
が、放射線照射によって実施されることを特徴とする請
求項1記載の方法。 - 【請求項２２】 上記二重特異性及び/または三重特異
性抗体がFc受容体ポジティブ細胞を活性化することがで
き、それによってサイトカインの発現及び/または共刺
激抗原が誘導または増大されることを特徴とする請求項
1記載の方法。 - 【請求項２３】 腫瘍性疾患の予防及び治療における請
求項1または14記載の調製物を含む腫瘍細胞の使用。 - 【請求項２４】 抗腫瘍免疫性を誘導するための請求項
23記載の使用。 - 【請求項２５】 その自己腫瘍細胞が得られている患者
または動物内に再注入するための異種二重特異性及び/
または三重特異性抗体を用いて治療された自己腫瘍細胞
の調製における請求項1記載の方法。 - 【請求項２６】 請求項1または14の方法によって得ら
れた腫瘍細胞調製物を含む製薬学的組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19725586A DE19725586C2 (de) | 1997-06-17 | 1997-06-17 | Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper |
| DE19725586.8 | 1997-06-17 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2008064726A Division JP2008189678A (ja) | 1997-06-17 | 2008-03-13 | 異種完全二重特異性及び／または三重特異性抗体を用いたｅｘｖｉｖｏ免疫化の方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1171288A true JPH1171288A (ja) | 1999-03-16 |
| JP4145995B2 JP4145995B2 (ja) | 2008-09-03 |
Family
ID=7832736
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17038998A Expired - Fee Related JP4145995B2 (ja) | 1997-06-17 | 1998-06-17 | 異種完全二重特異性及び／または三重特異性抗体を用いたｅｘ ｖｉｖｏ免疫化の方法 |
| JP2008064726A Pending JP2008189678A (ja) | 1997-06-17 | 2008-03-13 | 異種完全二重特異性及び／または三重特異性抗体を用いたｅｘｖｉｖｏ免疫化の方法 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2008064726A Pending JP2008189678A (ja) | 1997-06-17 | 2008-03-13 | 異種完全二重特異性及び／または三重特異性抗体を用いたｅｘｖｉｖｏ免疫化の方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7018632B2 (ja) |
| EP (1) | EP0885614B1 (ja) |
| JP (2) | JP4145995B2 (ja) |
| AT (1) | ATE196607T1 (ja) |
| DE (2) | DE19725586C2 (ja) |
| DK (1) | DK0885614T3 (ja) |
| HK (1) | HK1017270A1 (ja) |
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2289944A2 (en) | 2003-10-10 | 2011-03-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Bispecific antibody substituting for functional proteins |
| US9334331B2 (en) | 2010-11-17 | 2016-05-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Bispecific antibodies |
| JP2016519135A (ja) * | 2013-05-10 | 2016-06-30 | ヌマブ アクチェンゲゼルシャフト | 二重特異性構築物及びその様々な疾患の治療における使用 |
| US9670269B2 (en) | 2006-03-31 | 2017-06-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of modifying antibodies for purification of bispecific antibodies |
| US9828429B2 (en) | 2007-09-26 | 2017-11-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in CDR |
| US9975966B2 (en) | 2014-09-26 | 2018-05-22 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cytotoxicity-inducing theraputic agent |
| US10011858B2 (en) | 2005-03-31 | 2018-07-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association |
| US10759870B2 (en) | 2017-09-29 | 2020-09-01 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Multispecific antigen-binding molecules having blood coagulation factor VIII (FVIII) cofactor function-substituting activity and pharmaceutical formulations containing such a molecule as an active ingredient |
| US11046784B2 (en) | 2006-03-31 | 2021-06-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
| JP2021523128A (ja) * | 2018-05-18 | 2021-09-02 | トリオン リサーチ ゲーエムベーハーＴｒｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｇｍｂｈ | 再活性化現象に関連する疾患を伴うＥｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒウイルス陽性患者の治療に使用するための医薬製剤 |
| US11124576B2 (en) | 2013-09-27 | 2021-09-21 | Chungai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing polypeptide heteromultimer |
| US11142587B2 (en) | 2015-04-01 | 2021-10-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing polypeptide hetero-oligomer |
| US11150254B2 (en) | 2014-09-26 | 2021-10-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for measuring reactivity of FVIII |
| US11214623B2 (en) | 2014-09-26 | 2022-01-04 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody capable of neutralizing substance having activity alternative to function of coagulation factor VIII (FVIII) |
| US11352438B2 (en) | 2016-09-06 | 2022-06-07 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor IX and/or activated coagulation factor IX and coagulation factor X and/or activated coagulation factor X |
| US11649262B2 (en) | 2015-12-28 | 2023-05-16 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for promoting efficiency of purification of Fc region-containing polypeptide |
Families Citing this family (43)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6805869B2 (en) | 1996-06-12 | 2004-10-19 | Shanghai Cp Guojian Pharmaceutical Co., Ltd. | Cellular vaccines and immunotherapeutics and methods for their preparation |
| DE19725586C2 (de) * | 1997-06-17 | 1999-06-24 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper |
| ATE255420T1 (de) | 1998-09-25 | 2003-12-15 | Horst Lindhofer | Verwendung von tumorzellen zeitversetzt in kombination mit intakten antikörpern zur immunisierung |
| DE10043437A1 (de) * | 2000-09-04 | 2002-03-28 | Horst Lindhofer | Verwendung von trifunktionellen bispezifischen und trispezifischen Antikörpern zur Behandlung von malignem Aszites |
| CN1294148C (zh) * | 2001-04-11 | 2007-01-10 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 环状单链三特异抗体 |
| US8372409B2 (en) * | 2003-04-09 | 2013-02-12 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Dendritic cell binding proteins and uses thereof |
| EP1693448A4 (en) * | 2003-10-14 | 2008-03-05 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | DOUBLE SPECIFICITY ANTIBODY FOR FUNCTIONAL PROTEIN SUBSTITUTION |
| KR101229731B1 (ko) | 2003-10-16 | 2013-03-07 | 암젠 리서치 (뮌헨) 게엠베하 | 다중특이적 탈면역화된 ｃｄ3-바인더 |
| US8066989B2 (en) * | 2004-11-30 | 2011-11-29 | Trion Pharma Gmbh | Method of treating tumor growth and metastasis by using trifunctional antibodies to reduce the risk for GvHD in allogeneic antitumor cell therapy |
| ATE525400T1 (de) * | 2004-12-01 | 2011-10-15 | Trion Pharma Gmbh | Verwendung trifunktionaler antikörper zur risikoreduzierung von gvhd in einer allogenetischen anti-tumor zelltherapie |
| EP1876236B9 (en) * | 2005-04-08 | 2015-02-25 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody substituting for function of blood coagulation factor viii |
| PL1874821T3 (pl) | 2005-04-26 | 2013-09-30 | Trion Pharma Gmbh | Kombinacja przeciwciał i glikokortykoidów do leczenia raka |
| ES2532124T3 (es) * | 2005-12-16 | 2015-03-24 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Medios y procedimientos para el tratamiento de enfermedades tumorales |
| EP1820513A1 (en) * | 2006-02-15 | 2007-08-22 | Trion Pharma Gmbh | Destruction of tumor cells expressing low to medium levels of tumor associated target antigens by trifunctional bispecific antibodies |
| US8404235B2 (en) | 2007-05-21 | 2013-03-26 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP |
| US7906117B2 (en) | 2007-05-21 | 2011-03-15 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to prevent or treat cachexia, weakness, fatigue, and/or fever |
| SG183742A1 (en) | 2007-05-21 | 2012-09-27 | Alderbio Holdings Llc | Antibodies to il-6 and use thereof |
| US20090238825A1 (en) * | 2007-05-21 | 2009-09-24 | Kovacevich Brian R | Novel rabbit antibody humanization methods and humanized rabbit antibodies |
| US8252286B2 (en) | 2007-05-21 | 2012-08-28 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis |
| MX2009012493A (es) * | 2007-05-21 | 2010-01-20 | Alder Biopharmaceuticals Inc | Metodos de humanizacion de anticuerpo de conejo novedosos y anticuerpos de conejo humanizados. |
| US9701747B2 (en) | 2007-05-21 | 2017-07-11 | Alderbio Holdings Llc | Method of improving patient survivability and quality of life by anti-IL-6 antibody administration |
| US8062864B2 (en) | 2007-05-21 | 2011-11-22 | Alderbio Holdings Llc | Nucleic acids encoding antibodies to IL-6, and recombinant production of anti-IL-6 antibodies |
| US8178101B2 (en) | 2007-05-21 | 2012-05-15 | Alderbio Holdings Inc. | Use of anti-IL-6 antibodies having specific binding properties to treat cachexia |
| EP2033657A1 (de) * | 2007-09-04 | 2009-03-11 | Trion Pharma Gmbh | Intraoperative trifunktionale Antikörper-Applikation zur Prophylaxe intraperitonealer Tumorzelldissemination |
| US8337847B2 (en) | 2008-11-25 | 2012-12-25 | Alderbio Holdings Llc | Methods of treating anemia using anti-IL-6 antibodies |
| US8420089B2 (en) | 2008-11-25 | 2013-04-16 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP |
| US8992920B2 (en) | 2008-11-25 | 2015-03-31 | Alderbio Holdings Llc | Anti-IL-6 antibodies for the treatment of arthritis |
| US8323649B2 (en) * | 2008-11-25 | 2012-12-04 | Alderbio Holdings Llc | Antibodies to IL-6 and use thereof |
| US9452227B2 (en) * | 2008-11-25 | 2016-09-27 | Alderbio Holdings Llc | Methods of treating or diagnosing conditions associated with elevated IL-6 using anti-IL-6 antibodies or fragments |
| US9212223B2 (en) | 2008-11-25 | 2015-12-15 | Alderbio Holdings Llc | Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis |
| EP2241576A1 (en) | 2009-04-17 | 2010-10-20 | Trion Pharma Gmbh | Use of trifunctional bispecific antibodies for the treatment of tumors associated with CD133+/EpCAM+ cancer stem cells |
| MX342623B (es) | 2009-06-26 | 2016-10-06 | Regeneron Pharma | Anticuerpos biespecificos facilmente aislados con formato de inmunoglobulina original. |
| MX2012005927A (es) | 2009-11-24 | 2012-11-23 | Alder Biopharmaceuticals Inc | Anticuerpos para il-6 uso de los mismos. |
| US9775921B2 (en) | 2009-11-24 | 2017-10-03 | Alderbio Holdings Llc | Subcutaneously administrable composition containing anti-IL-6 antibody |
| JP2012025694A (ja) * | 2010-07-23 | 2012-02-09 | Asahi Kasei Kuraray Medical Co Ltd | 癌治療剤 |
| WO2012071561A2 (en) | 2010-11-23 | 2012-05-31 | Alder Biopharmaceuticals, Inc. | Anti-il-6 antibodies for the treatment of anemia |
| WO2012156430A1 (en) | 2011-05-17 | 2012-11-22 | Trion Research Gmbh | Vaccine preparation containing trifunctional antibodies with antigen immunogenicity enhancer properties |
| EP2524699A1 (en) | 2011-05-17 | 2012-11-21 | Trion Research GmbH | Vaccine preparation containing trifunctional antibodies with antigen immunogenicity enhancer properties |
| EP2754458B1 (en) * | 2011-07-12 | 2017-02-01 | Sorin Group Italia S.r.l. | Dual chamber blood reservoir |
| RU2718692C2 (ru) * | 2014-05-29 | 2020-04-13 | Мэкроудженикс, Инк. | Триспецифичные связывающие молекулы, которые специфически связывают антигены множества злокачественных опухолей, и способы их применения |
| AR101262A1 (es) | 2014-07-26 | 2016-12-07 | Regeneron Pharma | Plataforma de purificación para anticuerpos biespecíficos |
| KR20200088440A (ko) * | 2017-11-21 | 2020-07-22 | 노파르티스 아게 | 종양-연관 항원에 대한 삼중특이성 결합 분자 및 이의 용도 |
| US20230043806A1 (en) * | 2019-02-28 | 2023-02-09 | University Of Virginia Patent Foundation | Induction of highly efficacious anti-tumor and immune modulating activity: cell-free off the shelf therapeutic modality |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4828991A (en) * | 1984-01-31 | 1989-05-09 | Akzo N.V. | Tumor specific monoclonal antibodies |
| US6071517A (en) * | 1986-07-07 | 2000-06-06 | Medarex, Inc. | Bispecific heteroantibodies with dual effector functions |
| US4844893A (en) * | 1986-10-07 | 1989-07-04 | Scripps Clinic And Research Foundation | EX vivo effector cell activation for target cell killing |
| DE4407538C1 (de) * | 1994-03-07 | 1995-02-23 | Deutsches Krebsforsch | Bindungsreagens für Zell-Oberflächenprotein und Effektorzelle |
| US6410690B1 (en) * | 1995-06-07 | 2002-06-25 | Medarex, Inc. | Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies |
| EP0826695B1 (de) | 1996-09-03 | 2001-12-12 | GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit GmbH | Zerstörung von kontaminierenden Tumorzellen in Stammzelltransplantaten mit bispezifischen Antikörpern |
| DE19649223C2 (de) * | 1996-09-03 | 1998-07-30 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Zerstörung von kontaminierenden Tumorzellen in Stammzelltransplantaten mit bispezifischen Antikörpern |
| DE19725586C2 (de) * | 1997-06-17 | 1999-06-24 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper |
-
1997
- 1997-06-17 DE DE19725586A patent/DE19725586C2/de not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-06-15 US US09/094,921 patent/US7018632B2/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-06-16 AT AT98110972T patent/ATE196607T1/de active
- 1998-06-16 EP EP98110972A patent/EP0885614B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-16 DE DE59800285T patent/DE59800285D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-16 DK DK98110972T patent/DK0885614T3/da active
- 1998-06-17 JP JP17038998A patent/JP4145995B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1999
- 1999-06-11 HK HK99102534A patent/HK1017270A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-07-20 US US11/186,136 patent/US8012470B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-03-13 JP JP2008064726A patent/JP2008189678A/ja active Pending
Cited By (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8062635B2 (en) | 2003-10-10 | 2011-11-22 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Bispecific antibody substituting for functional proteins |
| EP2289944A2 (en) | 2003-10-10 | 2011-03-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Bispecific antibody substituting for functional proteins |
| EP3085783A1 (en) | 2003-10-10 | 2016-10-26 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Bispecific antibody substituting for functional proteins |
| US11168344B2 (en) | 2005-03-31 | 2021-11-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association |
| US10011858B2 (en) | 2005-03-31 | 2018-07-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association |
| US10934344B2 (en) | 2006-03-31 | 2021-03-02 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of modifying antibodies for purification of bispecific antibodies |
| US9670269B2 (en) | 2006-03-31 | 2017-06-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of modifying antibodies for purification of bispecific antibodies |
| US11046784B2 (en) | 2006-03-31 | 2021-06-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
| US9828429B2 (en) | 2007-09-26 | 2017-11-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in CDR |
| US11248053B2 (en) | 2007-09-26 | 2022-02-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in CDR |
| US10450381B2 (en) | 2010-11-17 | 2019-10-22 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of treatment that include the administration of bispecific antibodies |
| US9334331B2 (en) | 2010-11-17 | 2016-05-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Bispecific antibodies |
| JP2016519135A (ja) * | 2013-05-10 | 2016-06-30 | ヌマブ アクチェンゲゼルシャフト | 二重特異性構築物及びその様々な疾患の治療における使用 |
| US11124576B2 (en) | 2013-09-27 | 2021-09-21 | Chungai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing polypeptide heteromultimer |
| US11001643B2 (en) | 2014-09-26 | 2021-05-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cytotoxicity-inducing therapeutic agent |
| US11150254B2 (en) | 2014-09-26 | 2021-10-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for measuring reactivity of FVIII |
| US11214623B2 (en) | 2014-09-26 | 2022-01-04 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody capable of neutralizing substance having activity alternative to function of coagulation factor VIII (FVIII) |
| US9975966B2 (en) | 2014-09-26 | 2018-05-22 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cytotoxicity-inducing theraputic agent |
| US11142587B2 (en) | 2015-04-01 | 2021-10-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing polypeptide hetero-oligomer |
| US11649262B2 (en) | 2015-12-28 | 2023-05-16 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for promoting efficiency of purification of Fc region-containing polypeptide |
| US11352438B2 (en) | 2016-09-06 | 2022-06-07 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor IX and/or activated coagulation factor IX and coagulation factor X and/or activated coagulation factor X |
| US10759870B2 (en) | 2017-09-29 | 2020-09-01 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Multispecific antigen-binding molecules having blood coagulation factor VIII (FVIII) cofactor function-substituting activity and pharmaceutical formulations containing such a molecule as an active ingredient |
| JP2021523128A (ja) * | 2018-05-18 | 2021-09-02 | トリオン リサーチ ゲーエムベーハーＴｒｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｇｍｂｈ | 再活性化現象に関連する疾患を伴うＥｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒウイルス陽性患者の治療に使用するための医薬製剤 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HK1017270A1 (en) | 1999-11-19 |
| US20020009430A1 (en) | 2002-01-24 |
| JP2008189678A (ja) | 2008-08-21 |
| US20050255110A1 (en) | 2005-11-17 |
| EP0885614A3 (de) | 1999-01-13 |
| US7018632B2 (en) | 2006-03-28 |
| EP0885614B1 (de) | 2000-09-27 |
| DE59800285D1 (de) | 2000-11-02 |
| ATE196607T1 (de) | 2000-10-15 |
| JP4145995B2 (ja) | 2008-09-03 |
| DK0885614T3 (da) | 2000-12-04 |
| US8012470B2 (en) | 2011-09-06 |
| DE19725586C2 (de) | 1999-06-24 |
| DE19725586A1 (de) | 1998-12-24 |
| EP0885614A2 (de) | 1998-12-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4145995B2 (ja) | 異種完全二重特異性及び／または三重特異性抗体を用いたｅｘ ｖｉｖｏ免疫化の方法 | |
| US6551592B2 (en) | Bi-and trispecific antibodies for the induction of anti-tumor immunity | |
| US8277806B2 (en) | Use of trifunctional bispecific and trispecific antibodies for the treatment of malignant ascites | |
| US6994853B1 (en) | Time-staggered utilization of tumor cells in combination with intact antibodies for immunization | |
| US8663638B2 (en) | Intraoperative trifunctional antibody application for prophylaxis of intraperitoneal tumor cell dissemination | |
| US7794710B2 (en) | Methods of enhancing T cell responsiveness | |
| Abken et al. | Tuning tumor-specific T-cell activation: a matter of costimulation? | |
| US6210668B1 (en) | Destruction of contaminating tumor cells in stem cell transplants using bispecific antibodies | |
| US8058399B2 (en) | Multispecific reagent for selectively stimulating cell surface receptors | |
| US20120095192A1 (en) | Use of trifunctional bispecific antibodies for the treatment of tumors associated with the cd133+/epcam+ cancer stem cells | |
| CA3094996A1 (en) | Guidance and navigation control proteins and method of making and using thereof | |
| HRP20000714A2 (en) | NOVEL CD19xCD3 SPECIFIC POLYPEPTIDES AND USES THEREOF | |
| JPH09501824A (ja) | モノクローナル抗体の免疫抑制活性および毒性のモジュレーションのための方法ならびに物質 | |
| KR20060101485A (ko) | 다중특이적 탈면역화된 ｃｄ3-바인더 | |
| CN110312525A (zh) | T细胞重定向多功能抗体与免疫检查点调节剂的组合及其用途 | |
| Baeuerle et al. | BiTE: a new class of antibodies that recruit T-cells | |
| CN112638428A (zh) | 嵌合抗原受体肿瘤浸润淋巴细胞 | |
| JP2000503003A (ja) | 多段階カスケード増強ワクチンの効果を高めるための免疫接合体の使用 | |
| US7118924B2 (en) | Method for producing human antibodies in SCID mice which uses dendritic cells pulsed with antigen-antibody complexes and antigen-antibody complexes as immunizing agents | |
| Eissler et al. | Potential of the trifunctional bispecific antibody surek depends on dendritic cells: rationale for a new approach of tumor immunotherapy | |
| Hartmann et al. | Treatment of Hodgkin's disease with bispecific antibodies | |
| Blanco et al. | Autocrine costimulation: Tumor-specific CD28-mediated costimulation of T cells by in situ production of a bifunctional B7–anti-CEA diabody fusion protein | |
| Kudo et al. | Specific targeting immunotherapy of cancer with bispecific antibodies | |
| Zhang | Cancer Immunotherapy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050517 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20050815 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20050818 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20051107 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20071113 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080313 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20080319 |
|
| A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20080421 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20080520 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20080619 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110627 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120627 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130627 Year of fee payment: 5 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |