JP2000503003A

JP2000503003A - 多段階カスケード増強ワクチンの効果を高めるための免疫接合体の使用

Info

Publication number: JP2000503003A
Application number: JP09523703A
Authority: JP
Inventors: ハンセン，ハンス・ジェイ
Original assignee: イムノメディクス，インコーポレイテッド
Priority date: 1995-12-22
Filing date: 1996-12-20
Publication date: 2000-03-14
Also published as: AU1287197A; CA2240834A1; WO1997023237A1; EP0881910A4; CA2240834C; EP2057999A2; AU721927B2; EP2057999A3; JP2008115196A; EP0881910A1

Abstract

(57)【要約】抗体と、腫瘍または感染性物質に関連する抗原のエピト−プを擬態する抗イディオタイプ抗体とを含む、免疫接合体からなるワクチンを用いて、腫瘍細胞や感染性物質に対する啼乳動物の体液性および細胞性免疫応答を誘導する。この免疫接合体はさらに、腫瘍関連抗原や感染性物質のエピト−プを含むペプチド、抗イディオタイプ抗体の最小認識単位を含有するペプチド、あるいは強い主要組織適合遺伝子複合体−制限免疫応答を誘導するペプチドを包含させてもよい。また、抗体とサイトカインを用いて、免疫応答を増幅することもできる。

Description

【発明の詳細な説明】多段階カスケ−ド増強ワクチンの効果を高めるための免疫接合体の使用１．技術分野本発明は悪性細胞と感染性物質に対する体液性および細胞性免疫応答反応を誘導する方法に関する。特に本発明は、腫瘍または感染性物質に関連する抗原のエピト−プを擬態する抗イディオタイプ抗体と、抗体とからなる免疫接合体（immu noconjugate)を使用して腫瘍細胞および感染性物質に対する総合的な免疫応答を生じさせる方法に関する。本発明はさらに、免疫接合体、抗体、抗イディオタイプ抗体およびサイトカインを用いて上記の一体となった反応を増強する方法に関する。２．背景技術免疫療法の主要目的の一つは、腫瘍細胞または感染性生物に対抗して患者の免疫系を活用することにある。癌療法は、腫瘍細胞に関連している抗原を標的として、患者の免疫系を腫瘍細胞に指向させるが、正常細胞には働きかけないようにすることを目的としている。これらの腫瘍関連抗原（tumor associated antigen s: TAA）は同定することは難しいが、ある腫瘍細胞においては、通常、成人期では発現されないか、あるいは発現してもそのレベルが低いけれども、胎児の成長期には存在している抗原が発現される。このような腫瘍胎児TAAの一例としては、肝臓癌細胞によって発現されるα−フェトプロテインが挙げられる。この他の腫瘍胎児TAAとしては、内胚葉によって誘導されるほどんとの消化系上皮腺癌、ならびに非小細胞肺癌細胞（non-small-cell lung cancer cells）で発現される癌胎児抗原（carcinoembryonic antigen）（CEA）がある。Thomas et al.，Bioc him. Biophys．Acta 1032:177（1990）. TAAを擬態する抗イディオタイプ抗体（Ab2）の投与は、癌免疫療法の最も有望なアプロ−チの一つである。Goldenberg，Amer．J．Med．94: 297（1993)．Ab2 抗体は、従来からある抗体（Ａｂ１）の可変部に対する抗体である。Ab2と抗原とはAb1結合部位の同一領域に結合することができるので、特定のAb2（「Ab2β 」または「内部像（internal image）」抗体と称する）は、基準抗原（nominal antigen）の三次元構造を擬態することができる。Jerne et al.,EMBO J．1:243 （1982); Losman et al.，Int．J.Cancer 46:310（1990); Losman et al.，Pro c.Natl Acad．Sci．USA 88: 3421（1991); Losmanet al.，Int．J．Cancer 56: 580（1994)．Ab2βで免疫されている個体は、抗-抗-抗体（Ａｂ３）を発生させることができ、その一部は（Ab1）は基準抗原に結合することができる。抗イディオタイプ抗体は抗原擬態特性を持っているので、基準抗原が容易に利用できない場合、あるいは宿主が基準抗原に対して耐性を有する場合に、Ab2β を代替抗原（またはイディオタイプワクチン）として使用する。実験系において、特定のTAAを擬態するAb2βで免疫させると、TAAに対して特異的な免疫性が創出されて、その後の腫瘍の増殖から保護されるようになる。例えば、Nepom et a l.,Proc．Natl．Acad．Sci．USA 81:2864（1984); Raychauhuri et al.，J．Im munol．139:271（1987)を参照されたい。同様にして、Streptococcus pneumonia e（ストレプトコッカス・ニューモニアエ）〔McNamara et al.，Science 226: 1 325（1984)〕、肝炎Ｂ型ウイルス〔Kennedy et al.，Science 223: 930（1984) 〕、Escherichia coli（大腸菌） K13〔Stein et al.，J．Exp．Med．160: 1001 （1984)〕、Schistosomiasis mansoni（シストソミアシス・マンソーニ）〔Kres ina et al.，J．Clin．Invest．83: 912（1989)〕、およびMolonyネズミ肉腫ウイルス〔Powell et al.，J．Immunol．142: 1318（1989)〕などの感染性生物にたいする抗イディオタイプ・ワクチン類も開発されるようになった。動物由来の抗TAAを投与されている癌患者は、通常、Ab1に対する抗体類を産生するが、これらの抗免疫グロブリン抗体類にはAb2が含まれる。Herlyn et al.,J ．Immunol．Methods 85: 27（1985); Traub et al.，Cancer Res．48: 4002（19 88). 抗イディオタイプ反応の際には、T細胞（T2）が発生する場合がある。Fagerbe rg et al.，Cancer Immunol．Immunother．37: 264（1993)．さらに、Ab2はその後体液性および細胞性の抗-抗-イディオタイプ反応、即ち各々Ab3およびT3、を誘導し、これらによってAb1と同じエピト−プが認識される場合がある。同上。このように、体液性と細胞性免疫系の両方を利用した免疫療法へのアプロ−チの可能性が存在する。本出願人は腫瘍細胞ならびに感染性物質に対する統合された反応を刺激し生じさせる方法を開発した。さらに、免疫カスケードの増幅方法も開発した。発明の概要従って、本発明の目的は、HLA-DR-複合体に結合する抗体およびTAAまたは感染性物質に関連する抗原のエピト−プの少なくとも一種を含む抗原性ペプチドからなるワクチンを用いて、腫瘍細胞と感染性物質に対する体液性および細胞性免疫応答を誘導する方法を提供することにある。本発明はさらに、抗体類およびサイトカイン類を用いて、上記の統合された反応を増強する方法を提供することを目的とする。本発明の他の目的は、HLA-DR複合体に結合する抗体成分および主要組織適合性（major histocompatibility: MHC）制限免疫応答を誘導する抗原性ペプチドを含有するワクチンを投与することからなる、腫瘍関連抗原を発現する哺乳動物の腫瘍に対して、体液性および細胞性の免疫応答を誘導する方法を提供することにある。本発明の一態様によれば、（a）（i）HLA-DR複合体に結合する抗体成分と、（ii）TAAまたは感染性物質に関連する抗原のエピト−プの少なくとも一種を含む抗原性ペプチドとを含む免疫接合体を含有する第一ワクチンを哺乳動物に皮内投与することと、（b）哺乳動物にこのワクチンを静脈内投与することとを含んでなる、哺乳動物の腫瘍関連抗原を発現する腫瘍に対する、あるいは感染性物質に起因する疾患に対する体液性および細胞性の免疫応答反応を誘導する方法を提供することにより、上記その他の目的を達成することができる。第一ワクチンの抗体成分は、（a）ネズミ・モノクロナ−ル抗体と、（b）ネズミ・モノクロナ−ル抗体から誘導されたヒト化（humanized）抗体と、（c）ヒト・モノクロナ−ル抗体と、（d）（a）、（b）または（c）から誘導され、且つ、 F（ab)2、F（ab)2、Fab、Fab、Fv、sFVおよび最小認識単位とからなる群から選ばれる抗体フラグメントからなる群から選ばれる。本発明はさらに、哺乳動物に対するワクチンのを静脈内投与前および投与中に、インタ−フェロン−γ、インタ−ロイキン−2またはインタ−ロイキン−12のうち少なくとも一種を投与することからなる方法に関する。本発明はさらに、（a）（i）HLA-DR複合体に結合する抗体成分と、（ii）主要組識適合性（MHC）制限免疫応答を誘導する抗原性ペプチドとを含む免疫接合体からなる第一ワクチンを哺乳動物に皮内投与することと、（b）このワクチンを哺乳動物に静脈内投与することを含んでなる、哺乳動物の腫瘍関連抗原（TAA）を発現する腫瘍に対する体液性および細胞性免疫応答を誘導する方法に関する。第一ワクチンの抗体成分は、（a）ネズミ・モノクロナ−ル抗体と、（b）ネズミ・モノクロナ−ル抗体から誘導されたヒト化抗体と、（c）ヒト・モノクロナ − ル抗体と、（d）（a）または（b）または（c）から誘導され、且つ、F（ab)₂、F （ab)₂、Fab、Fv、sFvおよび最小認識単位からなる群から選ばれる抗体フラグメントとからなる群から選ばれる。好適な抗原性ペプチドとしては、たとえば、テタナス毒素Ｐ２ペプチドが挙げられる。本発明はさらに、哺乳動物に対するワクチンのを静脈内投与前および投与中に、インタ−フェロン−γとインタ−ロイキン２とインタ−ロイキン１２とから選ばれた少なくとも一種を投与することからなる方法に関する。本発明はさらに、（i）TAAに結合する抗体成分と、（ii）MHC制限免疫応答を誘導する抗原性ペプチドとを含有する免疫接合体からなる第二ワクチンを哺乳動物に静脈内投与することからなる方法に関する。第二ワクチンの好適抗原性ペプチドの例としては、テタナス毒素Ｐ２ペプチドが挙げられる。本発明はさらに、哺乳動物に対するワクチンのを静脈内投与前および投与中に、インタ−ロイキン２とインタ−ロイキン１２とインタ−フェロン γとからなる群から選ばれるサイトカインの少なくとも一種を投与することからなる方法に関する。本発明はさらに、（a）CEAに結合し、且つ可溶の免疫原性担体タンパクと接合する抗体成分からなる第一ワクチンを哺乳動物に投与し、（b）CEAのエピト−プを擬態し、且つ可溶の免疫原性担体タンパクと接合する抗体成分からなる第二ワクチンを哺乳動物に投与し、（c）CEAのエピト−プを擬態し、且つHLA-DR-複合体に結合する抗原性ペプチドを含有する免疫接合体からなる第三ワクチンを哺乳動物に投与することからなる、癌胎児性抗原（CEA）を発現する哺乳動物の腫瘍に対して体液性および細胞性の免疫応答を誘導する方法に関する。第三ワクチンの好適抗原性ペプチドは、CEAのA3B3領域からなる。さらに、第三ワクチンの抗原性ペプチドは、CEAのエピト−プを擬態する抗イディオタイプ抗体の最小認識単位から構成することもできる。これらの方法においては、第一ワクチンの抗体成分は、（a）第三種（Class III）抗CEAネズミ・モノクロナ−ル抗体と、（b）第三種（Class III）抗CEAネズミ・モノクロナ−ル抗体から誘導されたヒト化抗体と、（c）抗CEAヒト・モノクロナ−ル抗体と、（d）（a）、（b）または（c）から誘導され、且つ、F（ab)₂、F（ab)₂ 、Fab、Fv、sFvおよび最小認識単位からなる群から選ばれる抗体フラグメンントとからなる群から選ばれる。さらに、抗イディオタイプ抗体成分は、（a）第三種抗CEA抗体の可変部に結合するポリクロナ−ル抗体と、（b）第三種抗CEA抗体の可変部に結合するネズミ・モノクロナ−ル抗体と、（c）（b）から誘導されたヒト化抗体と、（d）第三種抗CEA抗体の可変部に結合するヒト・モノクロナ−ル抗体と、（e）第三種抗CEA抗体の可変部に結合する類人霊長類抗体と（f）（a）、（b）、（c）、（d）または（e）から誘導され、且つ、 F（ab)₂、F（ab)₂、Fab、Fv、sFvおよび最小認識単位からなる群から選ばれる抗体フラグメントとからなる群から選ばれる。本発明はさらに、第二ワクチンの静脈内投与前および投与中に、インタ−フェロン−γ、インタ−ロイキン−2またはインタ−ロイキン−12のうち少なくとも一種を投与することからなる方法に関する。発明の詳細な説明１．定義以下の説明において数多くの術語が広範に使用されている。発明の理解を容易にするため、次のように定義する。構造遺伝子とは、メッセンジャ−RNA（mRNA）中に転写された後、特定のポリペプチドを特徴づけるアミノ酸配列に翻訳されるDNA配列を指す。プロモ−タ−とは、構造遺伝子の転写を指示するDNA配列である。典型的には、プロモ−タ−は、構造遺伝子転写開始点の基部である遺伝子の５’領域に位置している。プロモ−タ−が誘導性プロモ−タ−である場合には、転写速度は誘導物質に反応して上昇する。これとは対照的に、プロモ−タ−が構成プロモ−タ− である場合には、転写速度は誘導物質によって制御されない。分離DNA分子とは、生物のゲノムDNA中に組み込まれていないDNAフラグメントである。例えば、T細胞レセプタ−遺伝子のクロ−ンは、哺乳動物の細胞のゲノムDNAから分離されたDNAフラグメントである。分離DNA分子の他の例としては、生物のゲノムDNAに組み込まれていない、化学合成のDNA分子が挙げられる。エンハンサ−とは、転写開始点からのエンハンサ−の距離あるいは方位如何に拘わらず、転写効率を上昇させることができるDNA調節要素である。相補DNA（cDNA）は、酵素の逆転写によってmRNAの鋳型から形成される一重鎖D NA分子である。典型的には、mRNAの部分を相補するプライマ−は、逆転写の開始に用いられる。当業者は「cDNA」なる語を、上記の一重鎖DNAとこれを相補するD NA鎖とからなる二重鎖DNAを指すのに用いている。発現なる語は、遺伝子産物の生合成を指す。例えば、構造遺伝子の場合、発現は構造遺伝子をmRNA中に転写し、このmRNAを一以上のポリペプチドに翻訳することを意味している。クロ−ニング・ベクタ−は、宿主細胞中で自律的に複製することができる、プラスミド、コスミドまたはバクテリオファ−ジなどのDNA分子である。クロ−ニング・ベクタ−は、典型的に一個または少数の制限エンドヌクレア−ゼ認識部位を持ち、この部位から外因性（foreign）のDNA配列、並びにクロ−ニング・ベクタ−によって変性された細胞の同定と選択に使用するのに好適な標識遺伝子を、ベクタ−の必須生物機能を失わせることなく、決定可能なやり方で挿入することができる。標識遺伝子には、典型的に、テトラサイクリン耐性またはアンピシリン耐性を付与する遺伝子が含まれる。発現ベクタ−は、宿主細胞中で発現される遺伝子からなるDNA分子である。典型的には、遺伝子の発現は構成または誘導プロモ−タ−を含むある種の調節要素によって制御されている。このような遺伝子は、調節要素と「操作上リンク（op eratively linked)」されていると言われる。組換え宿主は、クロ−ニング・ベクタ−または発現ベクタ−のどちらかを含有する原核細胞または真核細胞の何れかである。この語には、さらに、遺伝子工学によって宿主細胞のクロモソ−ムまたはゲノム中に遺伝子クロ−ンを含有させている原核または真核細胞も含めるものとする。腫瘍関連抗原は、正常細胞よっては発現されないか、あるいは発現されてもその発現のレベルが低いタンパクを指す。腫瘍関連抗原の例としては、α−フェトプロテインおよび癌胎児性抗原（carcinoembryonic antigen: CEA）が挙げられる。本明細書に言う、感染性物質（infectious agent)とは微生物および寄生動物の両方を指す。「微生物」にはウイルス、細菌、リケッチア、マイコプラズマ、原虫、真菌およびその他の微生物が含まれている。「寄生動物」は、抗生物質が誘導するクリアランス、もしくは溶解または食細胞による破壊を受け易い、マラリヤ性寄生動物、スピロヘ−タなど、顕微鏡サイズあるいは極微少の多細胞無脊椎動物または卵子またはこれらの幼生を指す。本書の文脈において、抗CEA・MabとはPrimus et al.，Cancer Research 43: 6 86（1983)および Primus et al.，U.S．patent No.4,818,709が説明している第３種（class III)Mabを指す。これら二つの文献は引用する事により本明細書の一部とする。本明細書に言う、Ab1とは腫瘍関連抗原または抗原関連感染性物質に結合する抗体である。本明細書に言う、抗イディオタイプ抗体（Ab2)とは、Ab1に結合する抗体を指す。Ab2はAb1に結合するため、したがってAb2は腫瘍関連抗原のエピト−プや感染性物質関連抗原のエピト−プを擬態する。本明細書に言う、抗体フラグメントとは、F（ab)2、F（ab)₂、Fab、Fabなどの抗体の一部分を指す。構造如何に関わらず、抗体フラグメントは無傷の抗体が認識するのと同じ抗原に結合する。例えば、抗CEA Mab（Ab1)フラグメントはCEAに結合する反面、Ab2フラグメントはAb1の可変部に結びついて、CEAのエピト−プを擬態する。抗体フラグメントなる語には、何らかの合成または遺伝子工学によるタンパクであって、抗体の如く作用して特定の抗原に結びついて複合体を形成するものも含めるものとする。例えば、抗体フラグメントには、Ｌ鎖可変部からなる分離フラグメント、ＨおよびＬ鎖の可変部からなる「Fv」フラグメント、ＬとＨの可変部がペプチド・リンカ−によって結ばれている組換え一重鎖ポリペプチド分子や、超可変部を擬態するアミノ酸残滓からなる最小認識単位が含まれる。ヒト化抗体は、ネズミ免疫グロブリンのＨおよびＬ可変鎖からＭＡｂのネズミ相補性決定域をヒト可変部に移動させた組換えタンパクである。本明細書に言う、抗体成分とは、抗体全体と抗体フラグメントの両方を指す。２．モノクロナ−ル抗体、ヒト化抗体、霊長類抗体およびヒト抗体の産生特定の抗原に対する齧歯類のモノクロナ−ル抗体は、当業者に公知の方法により得ることができる。例えば、Kohler and Milstein; Nature 256: 495（1975), and Coligan et al.，（eds.）CURRENT PROTOCOLS IN IMMUNOLOGY，VOL．1，pag es 2.5.1-2.6.7（John Wi1ey & Sons 1991）〔以下「Coligan」称す〕簡単に述べがると、マウスに抗原からなる組成物を注射し、血清サンプルを採取して抗体産生が行われていることを確認し、牌臓を摘出してＢリンパ球を得、Ｂリンパ球と骨髄種細胞とを融合させてハイブリド−マを産生、ハイブリド−マのクロ−ニングを行い、抗原に対する抗体を産生する正のクロ−ンを選択し、抗原に対する抗体を産生するクロ−ンを培養した後、ハイブリド−マ培養物から抗体を単離することによりモノクロナ−ル抗体を得ることができる。腫瘍関連抗原あるいは感染性物質に対するモノクロナ−ル抗体は、非常に多くの種類が開発されるようになった。例えば、Goldenberg et al.，International Application Publication No．WO 91/11465（1991）and Goldenberg，Internati onal Application Publication No．WO 94/04702（1994)を参照されたい。これらの特許各々を引用する事により本明細書の一部とする。好適Mabの例として、第三種抗CEA Mabが挙げられる。CEAに対する従来からの抗血清には、通常、CEAと密接な関連を有する一群の物質と反応する抗体が含有されている。この科のCEA関連抗原のうち、主要な抗原としては、（１）組識分布がCEAに近似している通常の、交差反応性抗原（NCA）と、（２）物理化学特性がCEAとほどんと同一であるmeconium 抗原（MA)とがある。CEA分子に対する、NC A交差反応性、MA交差反応性およびCEA特異性エピト−プを初めて分類することができた一団のモノクロナ−ル抗体（MAb）が、Primus et al.,Cancer Research， 43: 686（1983)によって説明された。特に、三つのクラスの抗CEA抗体が同定された。（１）CEA，NCAおよびMAと反応する第一種（class I)抗体、（２）CEAとNCAには反応するが、MAとは反応しない第二種（class II)抗体、および（３）CEAに特異的で、NCAやMAとは結合しない第三種抗体がそれである。第三種抗CEA Mabsを得る方法は、Primus et al.,US Patent No．4,818,709によって開示されている。さらに、第二世代第三種抗CEA Mabsの産生が、Hansen et al.，Cancer 71:3478 （1993)によって開示されている。Hansenの文献を引用することにより本明細書の一部とする。良好に確立されている各種の方法により、Mabsをハイブリド−マから単離精製することができる。この単離方法としては、タンパク−A・セファロ−ズによるアフィニテイ・クロマトグラフィ、サイズ排除クロマトグラフィや、イオン交換クロマトグラフィが挙げられる。例えば、Coligan at pages 2.7.1-2.7.12およびpages 2.9.1-2.9.3を参照されたい。さらにまた、Baines et al.，Purificati on of Immunoglobulin G（IgG)，in METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY,VOL．10,pa ges 79-104（The Humana Press，Inc．1992)も参照されたい。他の態様において、本発明の抗体は類人霊長類の抗体である。ヒヒを用いて治療に有用な抗体を作る一般方法は、例えば、Goldenberg et al.，international patent publication No.WO 91/121465（1991)およびLosman et al.，Int．J．C ancer，46: 310（1990)中で見出すことができる。このLosman et al.,の文献を引用することにより本明細書の一部とする。さらに他の態様において、本発明の抗体は「ヒト化」モノクロナ−ル抗体である。即ち、マウス・免疫グロブリンのＨおよびＬ可変鎖からマウスの相補性決定域をヒト可変部に移した後、ネズミ可変部のフレ−ムワ−ク域（framework regi ons）で一部のヒト残滓を置換する。本発明によるヒト化モノクロナ−ル抗体は、療法中で使用するのに好適である。ネズミ免疫グロブリン可変部をクロ−ニングする一般方法は、例えば、publication of Orlandi et al.，Proc．NatI Acad ．Sci USA 86: 3833（1989)で説明されている。この文献は引用することにより本明細書の一部とする。ヒト化Mabsを産生する方法は、例えば、Jones et al.， Na ture 321: 522（1986),Riechmann et al.，Nature 332: 323（1988),Verhoeyen et al.，Science 239: 1534（1988)，Carter at al.，Proc．Natl Acad．Sci.US A 89: 4285（1992),Sandhu,Crit.Rev.Biotech．12: 437（1992)およびSinger et al.，J．Immun．150: 2844（1993)で説明されている。これらの文献各々は引用することにより本明細書の一部とする。さらに他の態様において、本発明の抗体はヒト・モノクロナ−ル抗体である。この抗体は、抗原性攻撃に反応して特定のヒト抗体を産生するように、「操作」された遺伝子導入ネズミから得ることができる。この方法においては、標的とした通りに内因性Ｈ鎖およびＬ鎖座が分裂している（that contain targeted disr uptions of endogenous heavy chain and light chain loci）胚幹細胞系から誘導されるマウスの細胞株中に、ヒトＨおよびＬ鎖座の要素を導入する。遺伝子導入マウスはヒト抗原に特異的なヒト抗体を合成できるので、マウスを使ってヒト抗体分泌ハイブリド−マを産生することができる。遺伝子導入マウスからヒト抗体を得る方法は、Green et al.，Nature Genet．7: 13（1994)，Lonberg et al. ，Nature 368: 856（1994)およびTaylor et al.，Int．Immun．6: 576（1994)によって説明されている。これらの文献は、引用することにより本明細書の一部とする。３．抗体フラグメントの産生本発明は、Ab1およびAb2のフラグメントを使用することを考慮している。抗体フラグメントは、抗体を加水分解によりタンパク分解したり、あるいはフラグメントをコ−デングするDNAをE．coli中で発現することにより調製することができる。また、抗体フラグメントは、従来法により全抗体をペプシンやパパヤで消化することにより得ることができる。例えば、抗体をペプシンにより酵素分割を行ってF（ab')₂と言う名称の5Sフラグメント得ることにより抗体フラフメントを産生する。チオ−ル還元剤、さらに任意で、スルフィド結合の分割によるスルフィヒドリル基に対する阻止基（blocking group）を用いて、このフラグメントをさらに分割して、一価の3.5S Fab'フラグメントを産生する。この他でも、ペプシンを用いる酵素分割によって、一価のFabフラグメント二個とFcフラグメント一個を直接産生することができる。これらの方法は、例えば、Goldenberg，US patent Nos.4,036,945 and 4,331,647およびこれらの特許に含まれている引用文献により説明されている。これら二つの特許は、引用することにより本明細書の一部とする。さらに、Nisonoff et al.，Arch.Biochem.Biophys.89: 230（1960); Port er,Biochem．J．73:119（1959)，Edelman et al.，in METHODS IN ENZYMOLOGY V OL.1,page 422（Academic Press 1967)，and Coligan at pages 2.8.1-2.8.10 a nd 2.10.-2.10.4を参照されたい。この他にも、フラグメントが無傷の抗体により認識される抗原に結合することができる限り、Ｈ鎖を分離して一価のＬ−Ｈ鎖フラグメントを形成したり、フラグメントをさらに分割する酵素法、化学法あるいは遺伝法を用いることができる。例えば、FvフラグメントはVHおよびVL鎖の繋がりからなっている。この繋がりは、Inbar et al.，Proc．Natl Acad.Sci．USA 69:2659（1972)が述べているように、非共有であっても良い。さらに、可変鎖が分子間ジスフィド結合によって結合されていても良いし、グルタルアルデヒドなどの化学薬品によって交差結合されていても良い。例えば、Sandhu、前掲、を参照されたい。 Fvフラグメントはペプチド・リンカ−によって連結されたVHおよびVL 鎖からなることが好ましい。これらの一重鎖抗原結合タンパク（sFV）は、オリゴヌクレオチドによって連結されているVHおよびVL領域をコ−ドするDNA配列からなる構造遺伝子を構成することにより調製される。構造遺伝子は表現ベクタ−中に挿入した後、E．coliなどの宿主細胞に導入される。組換え宿主細胞は、二つのV領域を架橋するリンカ−・ペプチドにより一重鎖ポリペプチドを合成する。sFVの産生方法は、例えば、Whitlow et al.，Methods: A Companion to Methods in Enzymolog y 2: 97（1991)によって説明されている。さらにまた、Bird et al.，Science 2 42: 423-426（1998)，Lander at al.，US Patent No.4,946,778，Pack et al.， Bio/Technology 11: 1271-1277（1993)およびSandhu,前掲も参照されたい。抗体フラグメントのこの他の品種として、単相補性決定域（a single complem entaritry-determining region）（CDR）をコ−ドするペプチドがある。CDRペプチド（「最小認識単位」）は、興味をそそる抗体のCDRをコ−ドする遺伝子を構成することにより得ることができる。この遺伝子は、例えば、ＰＣＲを用いて抗体産生細胞のRNAから可変部を合成して調製する。例えば、Larrick et al.，Met hods: A Companion to Methods in Enzymology 2: 106（1991); Courtenay-Luc k,Genetic Manipulation of Monoclonal Antibodies，in MONOCLONAL ANTIBODIE S: PRODUCTION，ENGINEERING AND CLINICAL APPLICATION，Ritteret al．（eds. ),pages 166-179（Cambridge University Press 1995); そして Ward et al.，G enetic Manipulation and Expression of Antibodies．in MONOCLONAL ANTIBODI ES: PRINCIPLES AND APPLICATIONS，Birch et al.，（eds.)，pages 137-185（W iley-Liss，Inc．1995)を参照されたい。４．抗イディオタイプ抗体（Ab2）の産生ポリクロナ−ルAb2は、常法により動物をAb1またはフラグメントで免疫して調製する。例えば、Green et al.，Production of Polyclonal Antisera，in METH ODS IN MOLECULAR BIOLOGY: IMMUNOCHEMICAL PROTOCOLS，Manson（ed.)，pages1 -12（Humana Press 1992)を参照されたい。さらに、Coligan at pages 2.4.1-2. 4.7も参照されたい。この他に、モノクロナ−ルAb2を、上記の方法によりAb1またはフラグメントを免疫原として用いて調製することができる。ラット・モノクロナ−ルAb2の調製を実施例３で行っている。また、ヒト化Ab2または類人霊長類Ab2を、上記の方法を用いて調製することができる。５．二重特異性抗体の産生二重特異性抗体を使って、Ｔ細胞の標的を腫瘍細胞に設定するように誘導することができる。二重特異性抗体は、同一ではないＬおよびＨ鎖の対合（pair）からなり、二つの異なる抗体特性を提供する。例えば、二重特異性抗体は、Ｔ細胞上のタンパクに形質導入するＣＤ３シグナルを認識する結合部位一個と、腫瘍関連抗原に結合する第二の部位とを持って産生される。例えば、Canevari et al. ，Int．J．Cancer 42: 18（1988); Lanzaveccia et al.，Eur．J．Immunol．17 :105（1988); Van Dijk et al.，Int.J.Cancer 43: 344（1989) and Renner et al.，Science 264: 833（1994)を参照されたい。二重特異性抗体は各種の従来法、例えば、全抗体または好ましくはF（ab)2フラグメントの混合物のジスルフィド分割改質法、一以上の特異性を持つ抗体を産生するポリオ−マ形成を目的とする一以上のハイブリド−マの融合法や遺伝子工学による方法などによって製造することができる。これまで、異なる抗体を還元で分割してＦａｂ’フラグメントを得、これを酸化で分割して二重特異性抗体を調製してきた。例えば、Winter et al.，Nature 349: 293（1991)を参照されたい。二つの異なる抗体をペプシン消化して産生した二つの異なるF（ab')₂フラグメントを混合し、還元分割してFabフラグメントの混合物を形成した後、ジスルフィド結合を酸化改質して、元のエピト−プに特異的なFab部分を含有する二重特異性抗体を含むF（ab')₂フラグメントの混合物産生することにより、有利に製造することができる。このような抗体複合材料の調整方法は、例えば、Nisonhof f et al.，Arch．Biochem．Biophys．93: 470（1961)，Hammerling et al.，J． Exp．Med．128: 1461（1968) and U.S．Patent No．4,331,647で見出すことができる。マレイミド・ヒドロキシスクシンイミドなどの異種二官能価のリンカ−を用いることにより、より選択的な結合を達成することができる。エステルと抗体とを反応させると、抗体上あるいはフラグメント上のアミン基から誘導体が作られ、その後この誘導体は、例えば、遊離スルフィヒドリル基を持つ抗体Fabフラグメント（または、例えば、トラウト（Traut）試薬によって付与されたスルフィヒドリル基を持つより大型のフラグメントまたは無傷の抗体）と反応させることができる。このようなリンカ−は同一抗体内の基と交差反応する可能性が少ないので、結合の選択性が向上する。抗体やフラグメントの結合は、抗原結合部位から離れた部位で行うと有利である。これは、例えば、上記のように分割された鎖間スルフィヒドリル基に結合させることによって達成することができる。もう一つの方法では、酸化された炭水化物部分を持つ抗体を、遊離アミン機能少なくとも一種を持つ別の抗体と反応させる。こうすることによって、まず、シフ塩基（イミン）結合が形成される。続いて、好ましくは還元によって安定させて第二級アミンとする、例えば、ホウ化水素で還元して、最終複合材料を形成している。このような部位に特異的な結合方法は、小分子の場合は米国特許第４，６７１，９５８号、大分子の場合は米国特許第４，６９９，７８４号で開示されている。本明細書によれば、二重特異性抗体はＴ細胞結合部分と、腫瘍細胞や感染性物質と関連している抗原とからなっている。例えば、CEA結合部分はクラスIIIのMa bから誘導することができ、またT細胞結合部分は抗CD3Mabから誘導することができる。抗CD3抗体の調製方法は当業者に公知である。例えば、Canevari et al.，前掲，Van Dijk et al,，前掲，Hansen et al.，Human T Lymphocyte Cell Surf ace Molecules Defined by the Workshop Monoclonal Antibodies（T Cell Prot ocol)，in LEUKOCYTE TYPING: HUMAN LEUKOCYTE MARKERS DETECTED BY MONOCLON AL ANTIBODIES，Bernard et al.，（eds) pages 195-212（Springer-Verlag 198 4); and U.S．Patent No．4,361,549を参照されたい。さらに、抗CD3抗体をBo ehringer Mannheim Corp.（Indianapolis，IN; Cat No．1273 485）やAmerican Type Culture Collection（Rockville，MD; ATCC CRL 8001 〔OKT-3〕)などから商業的に入手することも可能である。例えば、二重特異性抗体は、上記のように抗CEA第三種MabからF（ab)2フラグメントを得ることにより調製することができる。Ｌ−Ｈ鎖結合ができないように注意しながら、抗CEA第三種Mabフラグメントの鎖間ジスルフィド架橋をゆっくりと還元して、Fab−SHフラグメントを形成する。SH基を過剰のビス−マレイミド・リンカ−（1、１−（メチレンジ−４、１−フェニレン）ビス−マレイミド）で活性化する。抗CEA第三種MabをまずFab−SHに転換した後に、活性化した抗CEA 第三種Fab−SHフラグメントと反応させて、二重特異性抗体を得る。二重特異性抗体は、抗CD3Mabと抗CEA第三種Mabを産生する二つのハイブリド− マ細胞系を融合させることによって産生することができる。tetradomaの産生方法は、例えば、Milstein et al.，Nature 305: 537（1983) and Pohl et al.， Int．J．Cancer 54: 418（1993)で説明されている。最後に、二重特異性抗体は遺伝子工学によっても産生することができる。例えば、抗CEA第三種Mabの可変部をコ−デングしているDNAを含有するプラスミドを、抗CD3抗体を分泌するハイブリド−マに導入することができる。これによって形成される「tansfectoma」は、CEAとCD3を結合する二重特異性抗体を産生する。代わりに、キメラ遺伝子が、抗CD3と抗CEA両方の結合領域をコ−デングするように、設計することもできる。遺伝子工学による二重特異性抗体の一般製造方法は、例えば、Songsivilai et al.，Biochem.Biophys．Res．Commun．164: 271（ 1989); Traunecker et al.，EMBOJ．10: 3655（1991); and Weineret al.，J ．Immunol．147: 4035（1991)で説明されている。６．免疫接合体の調製本発明は、免疫接合体（immunoconjugate)を用いて、免疫応答を増強することを考慮している。本明細書に言う「免疫接合体」とは、抗体成分と抗原性ペプチドからなる分子を指す。免疫接合体は抗体成分の免疫活性を保持している、つまり抗体部分が同系の抗原と結び付く能力は、接合の前後を通じてまったく変わらないか、あるいは僅かに低減するだけである。好適な抗原性ペプチドは、腫瘍関連抗原のエピト−プの少なくとも一種、または抗原関連感染性物質のエピト−プの少なくとも一種の何れかからなる。有用な腫瘍関連抗原と抗原関連感染性物質について、上記でその全体像を説明した。 CEAのA3B3エピト−プは、好ましい腫瘍関連抗原性ペプチドの一例である。Jes sup et al.，Int．J．Cancer 55: 262（1993); Zhou et al.，Cancer Res．53: 3817（1993); Hefta et al.，Cancer Res．52: 5647（1992)．CEAエピト−プを含有するペプチドは組換えDNA法によって産生することができる。代わりに、下記で説明する一般方法により合成ペプチドを産生することもできる。有用な抗原性ペプチドには、また、E．coli内毒素コア・ポリサッカライドなどの感染性物質に由来する抗原のエピト−プも含まれている。例えば、Greenman et al.，J．Am．Med．Assoc．266: 1097（1991)を参照されたい。本明細書においては、特に有用な免疫接合体は、細胞に抗原性ペプチドを送達して抗原を出現させる。例えば、Wyss-Coray et al.，Cell Immunol．139: 268 （1992)では、抗体−ペプチド構成物を用いて抗原性ペプチドをＴ細胞に送達することを説明している。このような抗原性ペプチドの例としては、Ｎ末端にシステインCQYIKANSKAFIGITEL（C+tt830-844; C-tt2; SEQ ID NO:1)を持つテタナス・トキソイド・ペプチドＰ２、およびＣ−末端にシステインFNNFTVSFWLRVPKVS ASHLEC（tt947-967+C; SEQ ID NO:1)を持つテタナス・トキソイド・ペプチドＰ３０が挙げられる。抗イディオタイプ抗体の単相補性決定域（single complementarity-determini ng regions）（CDRs)から、さらに他の抗原性ペプチドを誘導することができる。このペプチド、即ち、「最小認識単位」は、例えば、ＰＣＲを用いて、抗体産生細胞のRNAから可変部を合成することにより、得ることができる。例えば、Larri ck et al.，Methods: A Companion to Methods in Enzymology 2: 106（1991);C ourtenay-Luck，Genetic Manipu1ation of Monoclonal Antibodies，in MONOCLO NAL ANTIBODIES: PRODUCTION，ENGINEERING AND CLINICAL APPLICATION，Ritter et al.，（eds.），pages 166-179（Cambridge University Press 1995); and Ward et al.，Genetic Manipulation and Expression of Antibodies，in MONOC LONAL ANTIBODIES: PRINCIPLES AND APPLICATIONS，Birch et al.，（eds.)，pa ges 137-185（Wiley-Liss，Inc．1995)を参照されたい。最小認識単位は、公知の抗体のアミノ酸配列を持つペプチドを合成しても得ることができる。例えば、 Kabat et al.，SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST,U.S.Depart ment of Health and Services（1983)を参照されたい。一般的なペプチド合成方法は、例えば、Bodansky et al.，THE PRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS（Spring er-Verlag 1984); Bodansky，PRINCIPLES OF PEPTIDE SYNTHESIS（Springer-Ver lag 1984); Hancock et al.，Synthesis of Peptides for Use as Immunogens,i n METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY，VOL．10: IMMUNOCHEMICAL PROTOCOLS，Manso n（ed.）pages 23-32（The Humana Press，Inc．1992)で見出すことができる。抗原性ペプチドは、ジスルフィド結合を形成することによって、還元された抗体成分のヒンジ部に結合することができる。例えば、ペプチドを抗体成分に結合する際に用いられる単一のシステイン残基によって、テタナス・トキソイド・ペプチドが構成された。この代わりに、Ｎ−スクシニル−３−（２−ピリジルジチオ）プロプリオネ−ト（SPDP)などのヘテロ二官能架橋剤を用いてこのペプチドを抗体成分に結合することもできる。Yu et al.，Int．J.Cancer 56: 244（1994 ). このような接合の一般的な方法は当業者に公知である。例えば、Wong，CHEMIS TRY OF PROTEIN CONJUGATION AND CROSS-LINKING（CRC Press 1991); Upeslaci s et al.，Modification of Antibodies by Chemical Methods，in MONOCLONAL ANTIBODIES: PRINCIPLES AND APPLICATIONS，Birch et al．（eds.)，pages 187 -230（Wiley-Liss，Inc．1995); Price，Production and Characterization of Synthetic Peptide-Derived Antibodies，in MONOCLONAL ANTIBODIES: PRODUCT ION，ENGINEERING AND CLINICAL APPLICATION，Ritter et al．（eds.)，pages 60-84（Cambridge University Press 1995)を参照されたい。上記で論じた如く、抗原性ペプチドは抗体成分ヒンジ部の還元されたチオ−ル基に結合させることができる。また、抗原性ペプチドを抗体Ｆｃ領域の炭水化物部分を介して接合させることもできる。炭水化物基を使ってチオ−ル基に結合させるペプチドの配合量（loading）を増すことができるし、炭水化物基を使って別のペプチドを結合することもできる。抗体の炭水化物部分を介してペプチドと抗体成分とを接合させる方法は、当業者に周知されている。例えば、Shih et al.，Int．J.Cancer 41: 1101（1990); and Shih et al.，U.S.Patent No．5,057,313を参照されたい。一般的な方法では、酸化された炭水化物部分を持つ抗体成分を、遊離アミン機能を少なくとも一種持ち、且つ複数のペプチドが配合されている担体ポリマ−と反応させる。この反応により、まず、シフ塩基（イミン）形成され、還元すると安定して第二級アミンに転換して、最後に接合体が形成される。抗体フラグメントを免疫接合体の抗体成分として使用すると、Fc領域が不存在となる。しかしながら、抗体や抗体フラグメントのＬ鎖可変部に炭水化物部分を導入することは可能である。例えば、Leung et al.，J．Immunol．154: 5919（1 995); Hansen et al.，U.S.Patent No．5,443,953（1995)を参照されたい。炭水化物部分は、操作されたものであっても抗原性ペプチドの結合に用いることができる。７．腫瘍細胞および感染性物質に対する体液性および細胞性の免疫応答を増幅することを目的とする免疫接合体、抗体およびサイトカインの使用本発明は免疫接合体、Ab1や、Ab1に対して発生するAb2、Ab1またはAb2の何れか一つのフラグメントの使用を考慮している。これらの免疫接合体、抗体や抗体フラグメントをワクチンとして使用することにより、服用哺乳動物の体液性および細胞性免疫応答を誘導することができる。また、免疫接合体、Ab1および／または二重特異性抗体を使って、この総合的な免疫応答を増幅することができる。本発明の一方法によれば、Ab1またはそのフラグメントからなるワクチンで哺乳動物を免疫して、Ab2とＴ細胞（Ｔ２細胞）の産生を誘導することができる。哺乳動物がＴ２細胞を産生し初めたら、この哺乳動物にAb1またはそのフラグメントを静脈内投与して、Ｔ２細胞の産生量（T2 cell mass）を増加させることができる。第二回投与を行うと、抗体やフラグメントが癌細胞上や感染性生物上の同系の抗原と結びつくので、Ｔ２細胞の標的としての役割を果たすと言う利点もある。特定の抗体と反応するＴ細胞の産生を検出する方法は、当業者に周知されている。例えば、Fagerberg at al.，Cancer Immunol．Immunother． 37: 264 （1993)を参照されたい。この文献は引用することにより本明細書の一部とする。好ましい方法として、哺乳動物の第二回免疫の際、Ab2またはそのフラグメントからなるワクチンを投与して、Ab2（Ｔ３細胞）を認識するAb3とＴ細胞の形成を誘導する。第二回免疫をAb2ワクチンで行うと、腫瘍関連抗原や感染性物質抗原が、抗原に向かうT3細胞や、抗原に結合されているAb3に向かうT2細胞によって破壊されると言う利点もある。実施例４でAb1ワクチン、Ab1（または、フラグメント）およびAb2ワクチンを投与することからなる治療方法を説明する。この方法の好ましい態様において、Ab1の接種後、サイトカインまたはリンホカインとMAbとの接合体を静脈内に注射する。これによって、Ab1の皮内接種によって誘導され、標的細胞内で共生している細胞毒性リンパ球のクロ−ンが増幅される。接合体のMAb部分は接種されたAb1と同じ抗原を指向することができるし、また異なる抗原に指向することもできる。MAbが接種されたAb1と同じ抗原のエピト −プや抗原決定基に向かったとしても、接種されたAb1のエピト−プと接合体のM Abのエピトープとの間で交差反応が起こることはない。例えば、MN-14とNP-4は共にCEAの同じエピトープに反応する第三種抗CEA MAbであるが、これら二つのイディオタイプが互いに異なっている。 MAbが接合しているサイトカインやリンホカインが免疫細胞毒性リンパ球の誘導を推進する。代表的なMAb−サイトカイン／リンホカイン接合体には、IL−1、 IL-2、IL-12、IL−15、CSFおよびGM-CSFが含まれているが、この中でIL−2とIL −15が特に好ましい。さらに、Ab2接種後、Ab1抗体を静脈内投与すると、T2反応がさらに増幅される。静脈内投与されたAb1抗体成分が循環していて、この存在のためAb2ワクチンの効果が低下する可能性がある。このため、Ab2ワクチンの投与前に循環しているA bl成分を取除いておくことが好適である。Ab1除去法の一つにAb1抗体とビオチンの接合体を使う方法がある。この方法では、アビジンを静脈内に投与することによって、Ab2の接種前にビオチン化したを除去することができる。好ましくは、A bl（または、フラグメント）の静脈内投与後１ないし２日以内でアビジンによる除去を行う。この抗体除去法は、Goldenbergの国際公開No．WO94／04702（1994) で説明されている。この他の免疫療法として、哺乳動物にAb1ワクチンを接種、さらに腫瘍や感染性物質の抗原部位のうち高割合の部位をAb1（または、フラグメント）で飽和するように治療した後、Ab1ワクチンによる高度免疫法を実施して多数の細胞毒性リンパ球を発生させ、これをAb1（または、フラグメント）で被覆されている細胞に向かわせる方法がある。本発明の免疫接合体は、抗体ワクチン投与の効果をさらに増進するために用いられる。一方法によれば、抗体または抗体フラグメントを、強力な主要組織適合性（MHC）制限免疫応答を誘導できるペプチドと接合させている。好適な抗原性ペプチドの例としては、上述したテタナス毒素Ｐ２ペプチドが挙げられる。この種のペプチドは、例えば、マクロファ−ジ、単球やＢ−リンパ球のプラズマ膜上のHLA−DR−複合体と結合するIMMU−LL1（EPB−1）抗体と接合させることができる。Palak-Byczkowska et al.，Cancer Res.49:4568（1989). まず、IMMU-LL1ワクチンを皮内注射して一次感作を確立した後、ワクチンの静脈内投与により免疫応答を増進する。 IMMU-LL1−Ｐ２ワクチンなどの免疫接合体による治療によって哺乳動物が感作されたならば、免疫接合体で治療して免疫応答が腫瘍細胞に指向するようにすることができる。例えば、ヒト化LL２とＰ２からなる免疫接合体の標的を、CD22を保持する腫瘍細胞に設定するように使用することができる。LL２はbyGo1denberg et al.，J．Clin.Oncol．9: 548（1991); 及びby Murthy et al.，Eur．J．Nuc 1．Med．19:394（1992)が説明している。この方法では、感作ペプチド（例えば、Ｐ２）は、内在化（internalization）して第二級ＭＨＣヘテロダイマ−に結合した後、抗体成分から分割して、細胞表面に輸送される。その後LLI−Ｐ２ワクチンによって発生した細胞毒性Ｔ細胞が、細胞膜上のHLA−DR複合体錯体を認識して腫瘍細胞を破壊する。この一般的な方法は、HLA−DR複合体を表発する他の腫瘍を治療したり、HLA−DR複合体を発現する細胞に起因する自己免疫疾患をしたりするのに用いることができる。免疫接合体はまた、好適エピト−プを含有するペプチドを用いて、腫瘍細胞や感染性物質に対する免疫応答を誘導したり、増進するように使用することができる。これを補足すると、CEAのA3B3領域を含有するペプチドと、IMMU−LL1抗体（または、フラグメント）との接合体を形成した後、これを皮下注射してCEAに対する一次感作を確立したり、あるいは静脈内投与してCEAに対する免疫応答を増進するのに用いることができる。同様に、抗イディオタイプ抗体のＣＤＲｓからなる免疫接合体を使って、免疫応答を誘導したり、増進することができる。この方法では、ＣＤＲのアミノ酸配列を含有するペプチドを、抗体または抗体フラグメントと接合させる。例えば、 IMMU−14 Ab2抗体の最小認識単位は、IMMU−LL1抗体または抗体フラグメントと接合体することができる。IMMU−14抗イディオタイプ抗体の調製は実施例２で説明する。免疫療法の好ましい方法では、サイトカインの投与によって免疫応答をさらに増幅している。サイトカインの例としては、インタ−フェロン（INFs）、インタ −ロイキン類（IL）および腫瘍壊死因子が挙げられる。INF-γは、リンパ球や単球の細胞表面第二級組識適合抗原、ならびにマクロファ−ジを誘発する。例えば、Klegerman et al.，Lymphokines and Momokines，in BIOTECHNOLOGY AND PHAR MACY，Pezzuto et al．（eds.)，pages 53-70（Chapman&Hall 1993),and Roitt et al.，IMMUNOLOGY，3rd Edition，pages 7.8-7.14（Mosby 1993)を参照されたい。ＩＬ−２はＴ細胞の成長因子、天然キラ一細胞の刺激因子、さらに腫瘍反応性のＴ細胞でもある。したがって、ＩＮＦ−γおよびＩＬ−２は、免疫応答を増進するために好ましい。ＩＬ−１２もまた、本発明の免疫接合体に対する免疫応答を増進する上で、好ましいサイトカインである。このサイトカインは細菌、細菌産物や細胞間寄生動物に反応して、食細胞から産生される。例えば、Trinchieri，Annu．Rev．Immun ol．13:251（1995)を参照されたい。ＩＬ−１２はナチュラルキラ−細胞やＴ細胞によるサイトカイン、主としてＩＮＦ−γの産生を誘導し、さらにＩＬ−１２は活性化されたナチュラルキラ−細胞とＴ細胞に対しては成長因子として行動し、ナチュラルキラ−細胞の細胞毒性活性を増進し、細胞毒性T細胞の発生を刺激する。同上（Ｉｄ）。実験動物モデル系においてＩＬ−１２は、肉腫や肺転移ならびにマンソン住血吸虫症、鳥型結核菌、ヒストプラズマ・カプラス−ツムの治療に用いられていた。Wynn et al.，Nature 376: 594（1995); Castro et al.，J ．Immunol．155: 2013（1995); Zhou et al.，J．Immunol.，155: 785（1995); Zitvogel et al.，J．Immunol．155: 1393（1995). 本発明の抗体およびフラグメントは、抗体またはフラグメントを可溶の免疫原担体タンパクと接合させることにより、ワクチンとして使用できる。好適担体タンパクとしては、keyhole limpet hemocyaninが挙げられるが、これは好ましい担体タンパクである。抗体およびフラグメントと担体タンパクとの接合体の形成は、常法によって行う。例えば、Hancock et al.，Synthesis of Peptides for Use as Immunogens，inMETH0DS INM0LECULARBI0L0GY: IIviMUN0CHEMICALPR0T0C0 LS,Manson（ed.)，pages 23-32（Humana Press 1992)を参照されたい。免疫接合体が上記した抗原性ペプチドの一つからなる場合、その上に免疫原担体タンパクを添加する必要はない。好ましいワクチン組成は、抗体接合体またはフラグメント接合体とアジュバントからなっている。好適アジュバントとしては、水酸化アルミニウムと脂質が挙げられる。ワクチン組成の製剤方法は、当業者に周知されている。例えば、Rola ，Immunizing Agents and Diagnostic Skin Agents，in REMINGTONS PHARMACEUT ICAL SCIENCES，18 Edition，Gennaro（ed.)，pages 1389-1404（Mack Publishi ng Company 1990)を参照されたい。治療用途においては、製薬方法を用いることによって、ワクチンの作用時間を制御することができる。ポリマ−を使用することにより、免疫接合体、抗体やフラグメントから複合体を形成することによる、あるいはこれらを吸収することによる徐放性製剤（control release preparations）を調製しても良い。例えば、生物相容性のポリマ−に、ポリ（エチレン−コ−ビニ−ルアセテ−ト）のマトリックスと、ステアリン酸二量体およびセバシン酸のポリ無水コポリマ−（polyan hydride copolymer）からなるマトリックスを含ませておく。Sherwood et al.， Bio／Technology 10: 1446（1992)．この種マトリックスから免疫接合体、抗体や抗体フラグメントを放出する速度は、免疫接合体、抗体や抗体フラグメントの分子量、マトリックス内での免疫接合体、抗体や抗体フラグメントの配合量および分散している粒子の粒度に依存している。Saltzman et al.，Biophys．J．55: 163（1989); Sherwood et al.,前掲．固体剤形は、Ansel et al.,PHARMACEUTIC AL DOSAGE F0RMS AND DRUG DELIVERY SYSTEMS，5th Edition（Lea&Febiger 1990 )，and Gennaro（ed.)，REMINGTONS PHARMACEUTICAL SCIENCES，18th Edition（ Mack Publishing Company 1990)で説明されている。本発明の治療用製剤は公知の方法により処方し、製薬的に許容できる担体を用いて免疫接合体、抗体や抗体フラグメントの混合物を作って、製薬的に有用な組成物を調製する。この組成物を投与して服用哺乳動物が許容すれば、薬学的に許容できる組成物であると言う。無菌リン酸緩衝食塩水は、製薬的に許容できる担体の一例である。他の好適担体は当業者に周知である。例えば、Ansel et al.， PHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS AND DRUG DELIVERY SYSTEMS，5th Edition（Lea & Febiger 1990)，and Gennaro（ed.)，REMINGTONS PHARMACEUTICAL SCIENCES， 18thEdition（Mack Publishing Company 1990)を参照されたい。免疫接合体、抗体やフラグメントは哺乳動物に静脈内投与または皮下投与する。さらに、連続注入による投与、あるいは一回または複数回の大量投与でもよい。好ましくは、抗体ワクチンは皮下投与、ワクチンではない抗体製剤は静脈内投与を行う。一般に、ヒトに対する免疫接合体、抗体またはフラグメントの投与量は、患者の年齢、体重、身長、性別、全般医学条件、およびこれまでの病歴などの要因によって変わる。典型的には、服用者に対して約１ｐｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ（薬剤の重量／患者の体重）の範囲内の用量で、免疫接合体、抗体またはフラグメントを服用者に投与することが望ましい。勿論、必要に応じてこの範囲より多いあるいは少ない用量を投与しても良い。治療目的のためには、治療有効量の免疫接合体、抗体またはフラグメントを啼乳動物に投与しなくてはならない。抗体製剤では、投与量が生理的に有意である場合に「治療有効量」であると言う。また、薬剤の存在によって服用哺乳動物の生理に検出できる変化が生じた場合、この薬剤は生理的に有意であると言う。特に、本発明の抗体製剤は、存在することによって服用哺乳動物の体液性および／または細胞性の免疫応答が誘導されるとき、生理的に有意であるとする。ＩＮＦ−γ、ＩＬ−２，またはＩＬ−１２などのサイトカインは、Ａｂ１ワクチンやＡｂ２ワクチンの投与前および投与中に投与してもよい。また、サイトカインは抗体ワクチンと同時に投与しても良いし、抗体ワクチンの投与前および投与中に投与しても良い。哺乳動物に対するサイトカインの投与経路は、静脈内、筋肉内または皮下である。例えば、組換えＩＬ−１２の場合は、静脈内に６×１０５ＩＵ／ｋｇを大量投与するか、あるいは１８×１０６ＩＵ／ｍ２／ｄを連続注入する。Weiss et al.，J．Clin．Onco1．10: 275（1992)．さらにまた、ＩＬ −２は１２×１０６ＩＵを皮下投与する。Vogelzang et al.，J．Clin．Oncol． 11: 1809（1993)．さらにまた、ＩＮＦ−γは、１．５×１０６Ｕの用量を皮下投与する。Lienard et al.，J．Clin．Onco1．10: 52（1992)．さらに、Nadeau et al.，J．Pharmacol．Exp．Ther．274: 78（1995)は、リ−サス・モンキ−に組換えＩＬ−１２（４２．５μｇ／キログラム）を一回静脈内に投与したところ、ＩＮＦ−γ濃度が上昇したことを立証している。好適なＩＬ−２処方には、PROLEUKIN（Chiron Corp.／Cetus Oncology Corp.; Emeryville，CA)およびTECELEUKIN（Hoffman-La Roche，Inc.; Nutley，NJ)がある。また、ACTIMMUNE（Genetech，Inc.; South San Francisco，CA）は好適ＩＮＦ−γ製剤である。さらに、Ａｂ１による初回治療後二重特異性抗体を投与することができる。二重特異性抗体の機能は、リンパ球とＣＥＡを保持している腫瘍細胞との間を架橋し、リンパ球を介して細胞溶解の引き金を引くことにある。二重特異性抗体の投与方法は、上記で説明したガイドラインに従って行う。しかしながら、二重特異性抗体は、抗体ワクチンと異なり、免疫原とは接合しない。当業者は上記で説明した方法は、感染性物質の予防にも使用できることを理解するであろう。したがって、本発明では哺乳動物が感染性物質に暴露される前に哺乳動物を保護することを目的に、本明細書で説明している方法を使用することを考慮している。これまで本発明を一般的に説明してきたが、つぎの実施例により理解がより容易になるが、これらの実施例は説明のみを目的としてなされたものであって、したがって、本発明を限定することを意図したものではない。実施例１ネズミ抗ＣＥＡＭＡｂ（ＭＮ−１４）の産生ＭＮ−１４、第三種抗ＣＥＡＭＡｂの産生を、Hansen at al.，Cancer 71: 3 478（1993)が説明している。この文献は引用することにより本明細書の一部とする。簡単に述べると、部分精製ＣＥＡ７．５μｇを完全フロイントアジュバントに溶解した溶液を、２０グラムのＢＡＬＢ／ｃ雌マウスに皮下接種した。第３日、このマウスをＣＥＡ７．５μｇを不完全フロイントアジュバントに溶解した溶液の皮下接種により追加免疫し、さらに第６日と第９日にはＣＥＡ７．５μｇを食塩水に溶解した溶液の静脈内投与により追加免疫した。このマウスに、第２７８日にはＣＥＡ６５μｇを食塩水に溶解した溶液を、第４０４日にはＣＥＡ９０ μｇを食塩水に溶解した溶液を、いずれも静脈内に投与した。第４０７日マウスを殺して脾臓細胞の懸濁液を作り、ポリエチレン・グリコ−ルを用いて脾臓細胞とＳＰ２／０−Ａｇ１４（ATCC ＣＲＬ１５８１）骨髄腫細胞とを融合させ、この細胞を８−アザグアニン含有培地で培養した。１２５１−ＣＥＡラジオイムノアッセイ（Ｒｏｃｈｅ，Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）を用いてハイブリド−マ上澄み液をスクリ−ニングして、ＣＥＡ反応性抗体を得た。正のクロ−ンは、再びクロ− ニングした。ＭＮ−１４と名付けたクロ−ンは、第三種抗ＣＥＡ特異性ＭＡｂ，ＮＰ−４，に似ている特性を持ち、通常の交差反応性抗原およびｍｅｃｏｎｉｕｍ抗原と反応しなかった。しかしながら、ＭＮ−１４は、ＮＰ−４と比較して、ヒト結腸腫瘍異種移植切片モデルにおいて顕著に優れた腫瘍標的性を持ち、また凍結結腸癌片において常に強い染色性を持っていることが証明された。実施例２ＣＤＲ移稙ＭＮ−１４（ｈＭＮ−１４）ＭＮ−１４の相補性決定域（ＣＤＲ）をヒトＩｇＧのフレ−ムワ−ク領域に移稙して修飾抗体を調製した。ＣＤＲ移植（「ヒト化」）ＭＮ−１４抗体を「ｎＭＮ−１４」と名付けた。ヒト化抗体産生の一般方法は、例えば、Riechmann et a １.，Nature 332: 323（1988)，Verhoeyen et al.，Science 239: 1534（1988) ，Carter et al.，Proc．Natl Acad．Sci．USA 89: 4285（1992)，Sandhu，Crit .Rev．Biotech．12: 437（1992)，and Singer et al.，J．Immun．150: 2844（1 993)で説明されている。ｈＭＮ−１４ワクチンは、ｈＭＮ−１４を、ｋｅｙｈｏｌｅｌｉｍｐｅｔヘモシアニンと接合させて調製する。典型的には、この接合体（２ｍｇ／注射）と、ＴｉｃｅＢａｃｉｌｌｕｓ−Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ（Ｏｒｇａｎｏｎ；ＷｅｓｔＯｒａｎｇｅ，ＮＪ）１００μｇとを混合した溶液を皮下注射により患者を免疫する。実施例３ＭＮ−１４（Ｗ１２）に対するラット・モノククロナ−ルＡｂ２およびＡｂ２ワクチン（Ｗ１２ワクチン）の調製Ｌｏｓｍａｎｅｔａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ５６:５８０（１９９４）が説明した通りにして、ＭＮ−１４に対するラットＡｂ２を調製した。この文献は引用することにより本明細書の一部とする。簡単に述べると、ＭＮ−１４Ｆ（ａｂ '）₂フラグメント２００μｇを完全フロイント・アジュバントに溶解した乳液を、雌、３週齢のコペンハ−ゲン・ラットの腹腔内に注射した。第２００日、第２３０日および第２３５日において、同一用量の抗原を不完全フロイント・アジュバントに溶解した溶液によりそれぞれ追加免疫した。最終注射の４日後、実験動物を殺し、脾臓細胞懸濁液を作り、常法によりこの細胞とネズミ非分泌性プラスマ細胞腫ＳＰ２／０とを融合させた。このハイブリド−マ細胞をラット腹腔支持細胞（peritoneal feeder cells）（１０，０００細胞／２００μ ｌ培養ウェル）の存在下で培養した。ＥＬＩＳＡにより培養物の上澄み液からＭＮ−１４との反応性およびコントロ −ル・ネズミＭＡｂとの反応性の不存在をスクリ−ニングした。正のハイブリド −マは、ラット腹腔支持細胞の存在下で希釈を制限しながら、少なくとも二回クロ−ニングを行った。Ｗ１２はＭＮ−１４に特異的なＩｇＧ_1kＡｂ２であり、したがってアイソタイプが一致しても他の抗ＣＥＡＭＡＢ類とは反応しない。（コントロ−ル・ラットＩｇＧではなく）マウスやウサギをＷ１２で免疫すると、Ａｂ１’抗ＣＥＡ抗体の産生が誘導された。したがって、Ｗ１２はイディオタイプ抗体としてＣＥＡ産生腫瘍を持つ患者に使用することができる。ｈＭＮ−１４ワクチンの製法で説明した通りにすれば、Ｗ１２からＷ１２ワクチンを調製することができる。実施例４ｈＭＮ−１４ワクチン（ｈＡｂ１−ワクチン）およびＷ１２ワクチン（Ａｂ２ワクチン）による治療ＤｕｋｅｓＣ結腸癌を持つ患者から、根治療法として腫瘍の一次切除を行った後、フルオロウラシルとレバミソ−ル・アジュバントによる療法を施術した。手術前のＣＥＡ滴定濃度は１５．５ｎｇ／ｍｌであった。一次手術から三ヶ月後のＣＥＡ滴定濃度は正常範囲、つまり２．５ｎｇ／ｍｌ以下であった。二年後この患者のＣＥＡ滴定濃度は２５ｎｇ／ｍｌであり、ＣＡＴスキャンしたところ、肝臓左葉に５ｃｍの腫瘍、右葉に２ｃｍの腫瘍があることが見出された。一ヶ月後ＣＥＡ滴定濃度が２５ｎｇ／ｍｌであつたので、この患者にｈＡｂ１ワクチン２ｍｇを皮下接種した（第０日）。第７日には反復して接種を行った。第３０日患者にＡｂ１と反応するリンパ球（Ｔ２細胞）があることが見出された。第４０日患者にｈＡｂ１を１００ｍｇ静脈内投与した。二ヶ月後ＣＥＡ滴定濃度は５ｎｇ／ｍｌであり、ＣＡＴスキャンでは、左葉の腫瘍の大きさが２ｃｍまで小さくなり、右葉の腫瘍は完全に後退していることを示していた。六ヶ月後左葉腫瘍が大きくなっていて、しかも腹部に大きな腫瘍塊が存在することが生検針で確認された。ＣＥＡ滴定濃度は５０ｎｇ／ｍｌまで増加していた。患者に、第０日と第３０日において、Ｗ１２Ａｂ２ワクチン（２ｍｇ）を皮下投与した。第３５日において、激しい反応が注射部位に発生したが、次第に消失していった。三ヶ月後ＣＥＡ滴定濃度は２．５ｎｇ／ｍｌ以下に減少しており、左葉腫瘍は完全に消散していることが見出された。腹部の塊も小さくなって、生検針ではその存在を確認することができず、繊維組識にリンパ球が浸透しているのを認めたにすぎなかった。二年後ＣＡＴスキャンニングを行ったところ、腫瘍の再発を認めず、またＣＥＡ滴定濃度は２．５ｎｇ／ｍｌ以下であった。実施例５一次感作を誘導する免疫接合体の調製と使用ＩＭＭＵ−ＬＬ１（ＥＰＢ−１）は、マクロファ−ジ、単球およびＢ−リンパ球のプラズマ膜上のＨＬＡ−ＤＲ複合体に結合した後、急速に内在化（internal izes）するネズミ・モノクロナ−ル抗体である。ＩＭＭＵ−ＬＬ１の調製は、Pa wak-Byczkowska et al.，Cancer Res．49: 4568（1989)が説明している。Ｆ（ａｂ'）２フラグメントは、従来からのタンパク分解法により無傷のＩＭＭＵ−ＬＬ１から調製し、上記で説明したように、ヒンジ部でテタナス毒素のＰ２ペプチド〔ＳＥＱＩＤＮＯ: １〕と接合させる。さらに、Leung et al.，J．Immunol ．154: 5919（1995)の技術を使って、抗体フラグメントのＬ鎖上の炭水化物部分を操作し、この操作炭水化物部分を介してＰ２ペプチドを接合させても良い。ＩＭＭＵ−ＬＬＩ−Ｐ２ワクチンは皮下投与して、Ｐ２部分によって誘導される強いＭＨＣ−制限免疫応答による一次感作を安定させる。また、免疫応答の追加免疫としてＩＭＭＵ−ＬＬＩ−ｐ２を静脈内投与する。ＬＬ２はＢ−細胞リンパ腫のＣＤ２２と結合するネズミ・モノクロナ−ル抗体である。例えば、Goldenberg et al.，J．Clin．Onjcol．9: 548（1991); Murth y et al.，Eur．J.Nucl．Med．19: 394（1992)を参照されたい。ヒト化ＬＬ２は Leung et al.，Hybridoma 13: 469（1994)の説明に従って調製し、ヒト化ＬＬ２の抗体フラグメントを常法により調製する。上記の説明にしたがってＬＬ２−Ｐ２を調製して、これを感作患者に静脈内投与して、ＣＤ２２抗原を保持する腫瘍細胞に対して免疫応答を指向させる。実施例６腫瘍関連抗原のエピト−プからなる免疫接合体の調製と使用ＣＥＡ発現腫瘍細胞を標的とするためには、ＣＥＡのＡ３Ｂ３エピトープを組換えにより、あるいは公知のアミノ酸配列を用いるペプチド合成により産生する。Jessup et al.，Int．J．Cancer 55: 262（1993); Zhou et al.，Cancer Res ．53: 3817（1993); およびHefta et al.，Cancer Res．52: 5647（1992)。上記の常法によりＡ３Ｂ３ペプチドをＩＭＭＵ−ＬＬＩ抗体またはフラグメントと接合させる。このＩＭＭＵ−ＬＬ１−Ａ３Ｂ３ワクチンを皮下投与して、ＣＥＡ保持腫瘍細胞に対する免疫応答を誘導する。また、同じ腫瘍細胞に対する免疫応答の二次免疫として、このワクチンを静脈内投与することもできる。実施例７最小認識単位からなる免疫接合体の調製と使用実施例２で説明したＡｂ２抗体の最小認識単位のアミノ酸配列を持つペプチドは、上記第６章で説明した技術を用いて調製する。このペプチドをＩＭＭＵ− ＬＬ１抗体またはフラグメントと接合させて、免疫応答の誘導（皮下投与）やこれに対する追加免疫（静脈内投与）に好適な免疫接合体を産生する。実施例８肺腺癌患者の主要な腫瘍（primary tumor）を切除し、免疫組識学的にＣＥＡが癌細胞に存在していることが認める。三ヶ月後血中ＣＥＡが５ｎｇ／ｍｌから２０ｎｇ／ｍｌに上昇しているので、骨のスキャンを行ったところ多数の部位に癌が再発しているのが認められる。標準化学療法を施術したが、ＣＥＡ滴定濃度は上昇を続けるので、再度骨のスキャンを行い腫瘍が進行しているのを認める。このため、実施例４と同様に、患者の皮内にｈＭＮ１４とｈＷ１２を接種する。接種中にＩＬ−２を投与して、免疫応答をＴ１ヘルパ−細胞の経路に向けて方向転換させる。その後、第三種抗ＣＥＡ特異性ＭＡｂ（ｈＮＰ−４−ＩＬ−５）であるＩＬ−５とｈＮＰ−４との接合体を静脈内に注入する。続く三ケ月間に、血中ＣＥＡ滴定濃度は検出不能濃度にまで低下し、骨のスキャンでも治療に対して完全に反応したことがみとめられる。実施例９ＭＵＣＩ（ＭＡ５）に特異的なＡｂ１、ＭＡ５（Ａｂ２−Ｗ５）に対して産生される抗Ｉｄ、およびｈＮＰ−４−ＩＬ−２接合体による治療主要な乳癌を持つ患者おいて、癌が肺、肝臓および骨に転移しているのが認められる。免疫組識学的には、癌細胞はエストロゲン・レセプタ−に対して陰性ではあるが、ＣＥＡとＭＵＣ１の両方を産生していることが立証されている。主要な腫瘍を切除し、患者に化学療法を施術するが、反応はほどんとない。そこで、この患者に、ＭＵＣ１に特異的なＡｂ１とＭＡ５（Ａｂ２−Ｗ５）に対して産生される抗Ｉｄとを含有するワクチンを皮内投与する。これまでに、ウサギによる実験において、Ｗ５はＡｂ３を誘導して、ＭＵＣ１と強く反応させることが立証されている。ＩＬ−２をワクチンと共に併用投与する。その後、静脈内にｈＮＰ−４−ＩＬ−２接合体を注人する。三ヶ月後肺と骨に沈着していた腫瘍は消失し、肝臓腫瘍の小節は小さくなっている。この患者にさらにＡｂ１／Ａｂ２ワクチンとｈＮＰ−４−ＩＬ−２で治療する。三ヶ月後肝臓腫瘍の小節はすべて消散し、他の器官に腫瘍が存在する証拠は認められなかった。上記において、特に好ましい態様を挙げてはいるが、本発明はこれらのみに限定されていないことを理解しなければならない。当業者は、開示した態様に各種の変更を加えることが可能ではあるが、そのような変更は次の請求項で輪郭が定められている本発明の範囲内に入ると考えなければならない。本明細書で言及した著作物および特許出願は、本発明が関与する分野における当業者の技術水準を示すものである。これらの著作物および特許出願は、恰もその一々について引用することにより本明細書の一部とすると宣言したように、すべてを引用することにより本明細書の一部とする。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 39/00 Ａ６１Ｋ 37/02 37/66 Ｈ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．（ａ）（ｉ）ＨＬＤ−ＤＲ−吹き剛体に結合する抗体成分と、（ｉｉ）抗原性ペプチドであって、ＴＡＡ又は抗原関連の該感染性物質のエピト−プいずれか一種を含む該抗原性ペプチドとを含んでなる該第一ワクチンを哺乳動物に皮内投与することと、（ｂ）該哺乳動物に該ワクチンを静脈内投与することとを含んでなる、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を発現する、あるいは感染性物質に起因する哺乳動物の腫瘍に対する体液性および細胞性の免疫応答を誘導する方法。２．上記の抗体成分が（ａ）ネズミ・モノクロナ−ル抗体と、（ｂ）ネズミ・モノクロナ−ル抗体から誘導されるヒト化抗体と、（ｃ）ヒト・モノクロナ−ル抗体と、（ｄ）（ａ），（ｂ）または（ｃ）から誘導される抗体フラグメントとからなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。３．上記抗体フラグメントが、F（ab｀)₂，F（ab)₂，Fab’，Fab，Fv，sFvおよび最小認識単位（minimal recognition unit)からなる群から選ばれる、請求項２に記載の方法。４．上記方法がさらに、上記哺乳動物に対する上記ワクチンの静脈内投与前およびその投与中にインタ−ロイキン２、インタ−フェロンγおよびインタ−ロイキン１２を投与することからなる、請求項１に記載の方法。５．上記方法がさらに、上記第一ワクチンの皮内投与後、モノクロナール抗体とサイトカインまたはリンホカインとの接合体を投与することからなる、請求項１に記載の方法。６．（ａ）第一ワクチンであって、（ｉ）ＨＬＤ−ＤＲ−複合体に結合する抗体成分と、（ｉｉ）主要組識適合性（ＭＨＣ）制限免疫応答を誘導する抗原性ペプチドとを含んでなる該第一ワクチンを哺乳動物に皮内投与することと、（ｂ）該哺乳動物に該ワクチンを静脈内投与することとを含んでなる、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を発現する哺乳動物の腫瘍に対する体液性および細胞性免疫応答を誘導する方法。７．上記抗体成分が（ａ）ネズミ・モノクロナ−ル抗体と、（ｂ）ネズミ・モノクロナ−ル抗体から誘導されるヒト化抗体と、（ｃ）ヒト・モノクロナ−ル抗体と、（ｄ）（ａ），（ｂ）または（ｃ）から誘導される抗体フラグメントとからなる群から選ばれる、請求項６に記載の方法。８．上記抗体フラグメントが、F（ab｀)₂，F（ab)₂，Fab'，Fab，Fv，sFvおよび最小認識単位からなる群から選ばれる、請求項６に記載の方法。９．上記方法がさらに、上記哺乳動物に対する上記ワクチンの静脈内投与前およびその投与中にインタ−ロイキン２、インタ−フェロンγおよびインタ−ロイキン１２からなる群から選ばれるサイトカイン少なくとも一種を投与することからなる、請求項６に記載の方法。１０．上記抗原性ペプチドがテタナス毒素Ｐ２ペプチドである請求項６に記載の方法。１１．上記方法がさらに、上記第一ワクチンの皮内投与後、モノクロナ−ル抗体とサイトカインまたはリンホカインとの接合体を投与することからなる、請求項６に記載の方法。１２．さらに、第二ワクチンを静脈内投与することからなり、該第二ワクチンが（ｉ）ＴＡＡに結合する抗体成分と、（ｉｉ）ＭＨＣ制限免疫応答を誘導する抗原性ペプチドとを含んでなる免疫接合体を含有している、請求項６に記載の方法。１３．上記第二ワクチンの上記抗原性ペプチドがテタナス毒素Ｐ２ペプチドである請求項１２に記載の方法。１４．上記方法がさらに、上記哺乳動物に対する上記第二ワクチンの静脈内投与前およびその投与中にインタ−ロイキン２、インタ−ロイキン１２およびインターフェロンγからなる群から選ばれるサイトカイン少なくとも一種をを投与することからなる、請求項６に記載の方法。１５．（ａ）第一ワクチンがＣＥＡに結合する抗体成分からなり、該抗体成分が可溶の免疫原性担体タンパクと接合している該第一ワクチンを哺乳動物に皮内投与することと、（ｂ）第二ワクチンが該ＣＥＡのエピト−プを擬態する抗イデイオタイプ抗体フラグメントからなり、該イディオタイプ抗体フラグメントが可溶の免疫原性担体タンパクと接合している該第二ワクチンを哺乳動物に皮内投与することと、（ｃ）第三ワクチンがＣＥＡのエピト−プからなる抗原性ペプチドとＨＬＡ− ＤＲ複合体に結合する抗体成分とを含む免疫接合体からなり、該第三ワクチンを該哺乳動物に投与することとからなるがん胎児性抗原（ＣＥＡ）を発現する哺乳動物の腫瘍に対する体液性および細胞性免疫応答を誘導する方法。１６．上記第三ワクチンの上記抗原性ペプチドがＣＥＡのＡ３Ｂ３領域からなる、請求項１５に記載の方法。１７．上記第三ワクチンの上記抗原性ペプチドが上記ＣＥＡのエピト−プを擬態する抗イディオタイプ抗体の最小認識単位からなる、請求項１４に記載の方法。１８．上記第一ワクチンの上記抗体成分が（ａ）ネズミ・モノクロナ−ル第三種抗ＣＥＡ抗体と、（ｂ）ネズミ・モノクロナ−ル第三種抗ＣＥＡ抗体から誘導されるヒト化抗体と、（ｃ）ヒト・モノクロナ−ル抗ＣＥＡ抗体と、（ｄ）（ａ），（ｂ）または（ｃ）から誘導される抗体フラグメントとからなる群から選ばれる、請求項１５に記載の方法。１９．上記抗体フラグメントが、F（ab｀)₂，F（ab)₂，Fab'，Fab，Fv，sFvおよび最小認識単位からなる群から選ばれる、請求項１８に記載の方法。２０．上記抗イディオタイプ抗体フラグメントが（ａ）第三種抗ＣＥＡ抗体の可変部に結合するポリクロナ−ル抗体と、（ｂ）第三種抗ＣＥＡ抗体の可変部に結合するネズミ・ポリクロナ−ル抗体と、（ｃ）（ｂ）から誘導されるヒト化抗体と、（ｄ）第三種抗ＣＥＡ抗体の可変部に結合するヒト・ポリクロナ−ル抗体と、（ｅ）第三種抗ＣＥＡ抗体の可変部に結合する類人霊長類ポリクロナ−ル抗体と、（ｆ）（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）または（ｅ）から誘導される抗体フラグメントとからなる群から選ばれる、請求項１５に記載の方法。２１．上記抗体フラグメントが、F（ab｀)₂，F（ab)₂，Fab'，Fab，Fv，sFvおよび最小認識単位からなる群から選ばれる、請求項２０に記載の方法。２２．上記方法がさらに、上記第二ワクチンの投与前およびその投与中にインタ−ロイキン２、インタ−フェロンγおよびインタ−ロイキン１２からなる群から選ばれるサイトカイン少なくとも一種をを投与することからなる、請求項１５に記載の方法。２３．上記方法がさらに、モノクロナ−ル抗体とサイトカインまたはリンホカインとの接合体を投与することからなる、請求項１５に記載の方法。２４．腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を発現する腫瘍に対して、または感染性物質に起因する疾患に対して、患者の体液性および細胞性免疫応答を誘導する改良方法に使用するための医薬製剤中における、（ｉ）ＨＬＡ−ＤＲ複合体に結合する抗体成分と、（ｉｉ）抗原性ペプチドであって、ＴＡＡまたは上記感染性物質の関連抗原のエピト−プ少なくとも一種を含む該抗原性ペプチドとからなる免疫接合体を含むワクチンの使用であって、該患者に対して、（ａ）該ワクチンの皮下投与と、（ｂ）該ワクチンの静脈内投与とを行う使用。２５．腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を発現する腫瘍に対して、または感染性物質に起因する疾患に対して、患者の体液性および細胞性免疫応答を誘導する改良方法に使用するための医薬製剤中における、（ｉ）ＨＬＡ−ＤＲ複合体に結合する抗体成分と、（ｉｉ）主要組識適合性（ＭＨＣ）制限免疫応答を誘導する該抗原性ペプチドとからなる免疫接合体を含むワクチンの使用であって、該患者に対して、（ａ）該ワクチンの皮下投与と、（ｂ）該ワクチンの静脈内投与とを行う使用。２６．腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を発現する腫瘍に対して、患者の体液性および細胞性免疫応答を誘導する改良方法に使用するための医薬製剤中における、（１）（ｉ）ＨＬＡ−ＤＲ−複合体に結合する抗体成分、および（ｉｉ）主要組識適合性（ＭＨＣ）制限免疫応答を誘導する該抗原性ペプチドとを含んでなる免疫接合体を含む第一ワクチンと、（２）（ｉ）ＴＡＡに結合する抗体成分と、（ｉｉ）ＭＨＣ制限免疫応答を誘導する該抗原性ペプチドとを含んでなる免疫接合体を含む第二ワクチンの使用であって、該患者に対して、（ａ）該第一ワクチンの皮下投与と、（ｂ）該第一ワクチンの静脈内投与と、（ｃ）該第二ワクチンの静脈内投与とを行う使用。２７．がん胎児性抗原（ＣＥＡ）を発現する腫瘍に対して、哺乳動物の体液性および細胞性免疫応答を誘導する改良方法に使用するための医薬製剤中における、（１）ＣＥＡに結合し、且つ可溶の免疫原性担体タンパクと接合する抗体成分からなる第一ワクチンと、（２）該ＣＥＡのエピト−プを擬態する抗イディオタイプ抗体成分からなり、該抗イディオタイプ抗体成分が可溶の免疫原性担体タンパクと接合する、第二ワクチンと、（３）ＣＥＡのエピト−プを含む抗原性ペプチドとＨＬＡ−ＤＲ複合体に結合する抗体成分とからなる免疫接合体を含む第三ワクチンとの使用であって、該患者に対して（ａ）該第一ワクチンの投与と、（ｂ）該第二ワクチンの投与と、（ｃ）該第三ワクチンの投与を行う使用。２８．上記抗体成分が（ａ）ネズミ・モノクロナ−ル抗体と（ｂ）ネズミ・モノクロナ−ル抗体から誘導されるヒト化抗体と、（ｃ）ヒト・モノクロナ−ル抗体と、（ｄ）（ａ），（ｂ）または（ｃ）から誘導される抗体フラグメントとからなる群から選ばれる、請求項２４ないし２７のいずれかに記載の使用。２９．上記抗体フラグメントが、Ｆ（ａｂ‘）２，Ｆ（ａｂ）２，Ｆａｂ’， Fab，Fv，ｓＦｖおよび最小認識単位からなる群から選ばれる、請求項２４ないし２７のいずれかに記載の使用。３０．上記医薬製剤ががさらに、インタ−ロイキン２、インタ−ロイキン１２およびインタ−フェロンγからなる群から選ばれるサイトカイン少なくとも一種を含み、且つ、上記ワクチンの静脈内投与前およびその投与中に上記患者にサイトカイン少なくとも一種を投与する、請求項２４または２５のいずれかに記載の使用。３１．上記医薬製剤ががさらに、インタ−ロイキン２、インタ−ロイキン１２およびインタ−フェロンγからなる群から選ばれるサイトカイン少なくとも一種を含んでなり、且つ、上記ワクチンの静脈内投与前およびその投与中に上記患者にサイトカイン少なくとも一種を投与する、請求項２６または２７のいずれかに記載の使用。３２．上記抗原性ペプチドがテタナス毒素Ｐ２ペプチドである請求項２４または２５のいずれかに記載の使用。３３．上記第三ワクチンの上記抗原性ペプチドがＣＥＡのＡ３Ｂ３領域からなる、請求項２７に記載の使用。３４．上記第三ワクチンの上記抗原性ペプチドが、上記ＣＥＡのエピト−プを擬態する抗イディオタイプ抗体の最小認識単位からなる、請求項２７に記載の使用。３５．上記第三ワクチンの上記抗体成分が（ｉ）ネズミ・モノクロナ−ル第三種抗ＣＥＡ抗体と、（ｉｉ）ネズミ・モノクロナ−ル第三種抗ＣＥＡ抗体から誘導されるヒト化抗体と、（ｉｉｉ）ヒト・モノクロナール抗ＣＥＡ抗体と、（ｉｖ）（ｉ），（ｉｉ）または（ｉｉｉ）から誘導される抗体フラグメントと、からなる群から選ばれる、請求項２７に記載の使用。３６．上記第二ワクチンの上記抗イディオタイプ抗体フラグメントが（ｉ）第三種抗ＣＥＡ抗体の可変部に結合するポリクロナール抗体と、（ｉｉ）第三種抗ＣＥＡ抗体の可変部に結合するネズミ・ポリクロナ−ル抗体と、（ｉｉｉ）（ｉｉ）から誘導されるヒト化抗体と、（ｉｖ）第三種抗ＣＥＡ抗体の可変部に結合するヒト・モノクロナ−ル抗体と（ｖ）第三種抗ＣＥＡ抗体の可変部に結合する類人霊長類ポリクロナ−ル抗体と、（ｖｉ）（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）または（ｖ）から誘導される抗体フラグメントとからなる群から選ばれる、請求項２７に記載の方法。３７．上記医療製剤ががさらに、上記哺乳動物に対する上記ワクチンの静脈内投与前およびその投与中にインタ−ロイキン−２、インタ−ロイキン−１２およびインタ−フェロン−γからなる群から選ばれるサイトカイン少なくとも一種を投与することからなる、請求項２４または２５のいずれかに記載の使用。３８．上記医薬製剤ががさらに、モノクロナ−ル抗体と、サイトカインまたはリンホカインとの接合体からなり、上記ワクチンの皮内投与後にこのＭａｂとサイトカインまたはリンホカインの接合体を上記患者に投与する、請求項２４ないし２６のいずれかに記載の使用。