JPH11508683A - 血液中の白血球の分別測定のための試薬及び方法 - Google Patents
血液中の白血球の分別測定のための試薬及び方法Info
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Description
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- 【特許請求の範囲】 1.(a)次の一般式: R1−R2−(CH2CH2O)n−H (式中、R1は10〜22個の炭素原子を有するアルキル、アルケニル又はアルキ ニル基であり、R2は−O−又は−COO−であり、そしてnは20〜35である) により表わされる、血液試料中の少なくとも4種類の白血球亜集団の測定のため の、ポリオキシエチレンを基礎とする界面活性剤;及び (b)細胞溶解試薬組成物のpHを 2.0〜4.0 の範囲に調整するための酸; を含んで成る、細胞溶解試薬組成物。 2.Rが12〜20個の炭素原子を有するアルキル基である、請求項1に記載の細 胞溶解試薬組成物。 3.前記細胞溶解試薬組成物中の界面活性剤が5g/L〜120g/Lの濃度で ある、請求項1に記載の細胞溶解試薬組成物。 4.pHを調整するために使用される前記の酸が有機酸を含んで成る、請求項1 に記載の細胞溶解試薬組成物。 5.pHを調整するために使用される前記の酸が蟻酸を含んで成る、請求項4に 記載の細胞溶解試薬組成物。 6.pHを調整するために使用される前記の酸が蟻酸と、酢酸、クエン酸、蓚酸 、プロピオン酸、塩酸及びリン酸並びにこれらの混合物から成る群から選択され た酸との有効な混合物を含んで成る、請求項4に記載の細胞溶解試薬組成物。 7.(a)炭素原子数10〜18個のアルキル鎖を有するアルキルサルフェートの アルカリ金属の陰イオン性界面活性剤; (b)次の一般式: R1−R2−(CH2CH2O)n−H (式中、R1は10〜22個の炭素原子を有するアルキル、アルケニル又はアルキ ニル基であり、R2は−O−又は−COO−であり、そしてnは20〜35である) により表わされる、血液試料中の少なくとも4種類の白血球亜集団の測定のため の、ポリオキシエチレンを基礎とする界面活性剤;及び (c)細胞溶解試薬組成物のpHを 2.0〜4.0 の範囲に調整するための酸; を含んで成る、細胞溶解試薬組成物。 8.Rが12〜20個の炭素原子を有するアルキル基である、請求項7に記載の細 胞溶解試薬組成物。 9.前記細胞溶解試薬組成物中の界面活性剤が5g/L〜120g/Lの濃度で ある、請求項8に記載の細胞溶解試薬組成物。 10.pHを調整するために使用される前記の酸が有機酸を含んで成る、請求項7 に記載の細胞溶解試薬組成物。 11.pHを調整するために使用される前記の酸が蟻酸を含んで成る、請求項10に 記載の細胞溶解試薬組成物。 12.pHを調整するために使用される前記の酸が蟻酸と、酢酸、クエン酸、蓚酸 、プロピオン酸、塩酸及びリン酸並びにこれらの混合物から成る群から選択され た酸との有効な混合物を含んで成る、請求項10に記載の細胞溶解試薬組成物。 13.(a)請求項1又は7に記載の細胞溶解試薬系、及び (b)高張アルカリ安定化試薬組成物、 を含んで成る細胞溶解試薬系。 14.前記高張アルカリ安定化試薬組成物が塩酸塩、硫酸塩及び緩 衝剤を含んで成る、請求項13に記載の細胞溶解試薬組成物。 15.前記高張アルカリ安定化試薬組成物が、 (a)安定化試薬組成物の全重量に対して 0.2重量%〜4重量%の量の塩化ナ トリウム及び塩化カリウムから成る群から選択された塩酸塩;及び (b)安定化試薬組成物の全重量に対して 0.3重量%〜8重量%の量の、硫酸 ナトリウム及び硫酸カリウムから成る群から選択された硫酸塩; を含んで成る、請求項14に記載の細胞溶解試薬系。 16.前記安定化試薬組成物のpHを7〜13に調整するための緩衝剤をさらに含ん で成る、請求項13に記載の細胞溶解試薬組成物。 17.(a)請求項1又は7に記載の細胞溶解試薬組成物、及び (b)高張アルカリ安定化剤組成物、 を含んで成る白血球の亜集団の測定のためのキット。 18.前記アルカリ安定化試薬組成物が、塩酸塩、硫酸塩及び緩衝剤を含んで成 る、請求項17に記載の白血球の亜集団を測定するためのキット。 19.前記アルカリ安定化試薬組成物が、該安定化試薬組成物pHを7〜13に調整 するための緩衝剤をさらに含んで成る、請求項18に記載の白血球の亜集団を測定 するためのキット。 20.血液細胞試料中の赤血球細胞の選択的間質溶解及び残った白血球の亜集団 の分析のための方法であって、 (a)血液試料を、請求項1に記載の細胞溶解試薬組成物に10秒間未満の時間 にわたり暴露し; (b)高張アルカリ安定化試薬組成物を、前記暴露された血液試料に添加し、 ここで前記安定化試薬組成物がさらなる細胞溶解作用を阻害し、そして溶血され た血液試料の白血球を安定化し;そして (c)自動化された分析機を用いて、リンパ球、単球、好塩基球、好中球及び 好酸球から成る群から選択された少なくとも4種類の白血球亜集団を分別する; ことを含んで成る方法。 21.前記安定化試薬組成物が、中性pHにおいて、そして350〜650mOsmの浸透圧 の高張媒体中で白血球亜集団を安定化する、請求項20に記載の方法。 22.少なくとも4種類の白血球亜集団の分別を単一段階の測定により行う、請 求項20に記載の方法。 23.前記暴露された血液試料中のヘモグロビン濃度の測定をさらに含んで成る 、請求項20に記載の方法。 24.血液細胞試料中の赤血球細胞の選択的間質溶解及び残った白血球の亜集団 の分析のための方法であって、 (a)血液試料を、請求項7に記載の細胞溶解試薬組成物に、赤血球細胞を溶 解するのに十分な時間にわたり暴露し; (b)高張アルカリ安定化試薬組成物を、前記暴露された血液試料に添加し、 ここで前記安定化試薬組成物がさらなる細胞溶解作用を阻害し、そして溶血され た血液試料の白血球を安定化し;そして (c)自動化された分析機を用いて、リンパ球、単球、好塩基球、好中球及び 好酸球から成る群から選択された少なくとも3種類の白血球亜集団を分別する; ことを含んで成る方法。 25.少なくとも4種類の白血球亜集団の分別を単一段階の測定により行う、請 求項24に記載の方法。 26.少なくとも4種類の白血球亜集団を得る、請求項25に記載の方法。 27.少なくとも5種類の白血球亜集団を得る、請求項26に記載の 方法。 28.前記暴露された血液試料中のヘモグロビン濃度の測定をさらに含んで成る 、請求項24に記載の方法。 29.前記血液試料が細胞の異常な集団を含んで成る、請求項20又は24に記載の 方法。 30.前記血液試料がヒト以外の動物由来である、請求項20又は24に記載の方法 。 31.血液試料中の白血球の少なくとも4種類の亜集団を分別する方法において 、 (a)請求項20又は24に記載の方法により処理された血液試料を、機械により 単一段階測定により分析し、ここで前記単一段階の測定を、白血球の少なくとも 4種類の亜集団を得るために同一の細胞溶解試薬組成物により血液試料の単一の アリコートについて行い、この分析は、 (1)DC体積、 (2)RF、 (3)不透明性、及び (4)光散乱、及び (5)蛍光 から成る群の2つの方法から選択され、 (b)前記血液試料の前記分析の結果をレポートする、 ことを含んで成る方法。 32.分析方法の1つがDC体積である、請求項31に記載の方法。 33.白血球の4種類の亜集団の1つが好塩基球である、請求項31に記載の方法 。 34.白血球の4種類の亜集団の1つが好酸球である、請求項31に記載の方法。
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