JPH11279195A - 新規ｆｏ−６９７９物質およびその製造法 - Google Patents
新規ｆｏ−６９７９物質およびその製造法Info
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- JPH11279195A JPH11279195A JP10083659A JP8365998A JPH11279195A JP H11279195 A JPH11279195 A JP H11279195A JP 10083659 A JP10083659 A JP 10083659A JP 8365998 A JP8365998 A JP 8365998A JP H11279195 A JPH11279195 A JP H11279195A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 アシルコエンザイムＡコレステロールアシル
転移酵素阻害活性を有するＦＯ−６９７９物質およびそ
の製造法を得るものである。 【解決手段】 下記式 【化１】 で表されるＦＯ−６９７９物質を生産する能力を有する
微生物を培地に培養し、培養液中に該ＦＯ−６９７９物
質を蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−６９７９物質を採
取する。 【効果】 本物質は、毒性が低くアシルコエンザイムＡ
コレステロールアシル転移酵素を特異的に阻害すること
から、ヒトのコレステロール蓄積に起因する疾病の予防
および治療に有用である。
転移酵素阻害活性を有するＦＯ−６９７９物質およびそ
の製造法を得るものである。 【解決手段】 下記式 【化１】 で表されるＦＯ−６９７９物質を生産する能力を有する
微生物を培地に培養し、培養液中に該ＦＯ−６９７９物
質を蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−６９７９物質を採
取する。 【効果】 本物質は、毒性が低くアシルコエンザイムＡ
コレステロールアシル転移酵素を特異的に阻害すること
から、ヒトのコレステロール蓄積に起因する疾病の予防
および治療に有用である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は新規ＦＯ−６９７９
物質およびその製造法に関する。更に詳しくは、アシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素阻害作用
を有する新規物質、ＦＯ−６９７９物質およびその製造
法に関する。
物質およびその製造法に関する。更に詳しくは、アシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素阻害作用
を有する新規物質、ＦＯ−６９７９物質およびその製造
法に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、食生活の向上に伴い成人の高脂血
症や動脈硬化などコレステロール蓄積に起因する症状が
現代病として問題視されている。コレステロールはアシ
ルコエンザイムＡのアシル基転位によりコレステロール
エステルとなり、細胞内および血中リポ蛋白に蓄積され
る。このアシル基転位反応を触媒する酵素がアシルコエ
ンザイムＡコレステロールアシル転移酵素であり、コレ
ステロールの腸管からの吸収、肝臓でのリポタンパク質
生成および冠動脈における泡末細胞の形成に深くかかわ
っている（Ｓｌｉｓｋｏｖｉｃ，Ｄ．Ｒ．とＷｈｉｔ
ｅ，Ａ．Ｄ．Ｔｒｅｎｄ Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１２
巻、１９４〜１９９頁、１９９１年）。従って、アシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素を阻害す
る物質は、かかる疾病に有効であることが推察される。
しかし、現在まで、このような作用機構に基づく医薬品
の開発には至っていない。
症や動脈硬化などコレステロール蓄積に起因する症状が
現代病として問題視されている。コレステロールはアシ
ルコエンザイムＡのアシル基転位によりコレステロール
エステルとなり、細胞内および血中リポ蛋白に蓄積され
る。このアシル基転位反応を触媒する酵素がアシルコエ
ンザイムＡコレステロールアシル転移酵素であり、コレ
ステロールの腸管からの吸収、肝臓でのリポタンパク質
生成および冠動脈における泡末細胞の形成に深くかかわ
っている（Ｓｌｉｓｋｏｖｉｃ，Ｄ．Ｒ．とＷｈｉｔ
ｅ，Ａ．Ｄ．Ｔｒｅｎｄ Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１２
巻、１９４〜１９９頁、１９９１年）。従って、アシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素を阻害す
る物質は、かかる疾病に有効であることが推察される。
しかし、現在まで、このような作用機構に基づく医薬品
の開発には至っていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】かかる実情において、
アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素阻
害活性を有する物質を提供することは、高脂血症やそれ
に基づく動脈硬化などの成人病の新しい予防および治療
法を提供するものであり有用なことである。
アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素阻
害活性を有する物質を提供することは、高脂血症やそれ
に基づく動脈硬化などの成人病の新しい予防および治療
法を提供するものであり有用なことである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、微生物の
生産する代謝産物について研究を続けた結果、新たに土
壌から分離したＦＯ−６９７９株の培養中にアシルコエ
ンザイムＡコレステロールアシル転移酵素阻害活性を有
する物質が産生されることを見出した。次いで、該培養
物から該アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転
移酵素阻害活性物質を分離、精製した結果、このような
化学構造を有する物質は従来まったく知られていないこ
とから、本物質をＦＯ−６９７９と称することにした。
本発明は、かかる知見に基づいて完成されたものであっ
て、下記式
生産する代謝産物について研究を続けた結果、新たに土
壌から分離したＦＯ−６９７９株の培養中にアシルコエ
ンザイムＡコレステロールアシル転移酵素阻害活性を有
する物質が産生されることを見出した。次いで、該培養
物から該アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転
移酵素阻害活性物質を分離、精製した結果、このような
化学構造を有する物質は従来まったく知られていないこ
とから、本物質をＦＯ−６９７９と称することにした。
本発明は、かかる知見に基づいて完成されたものであっ
て、下記式
【０００５】
【化２】 で表される化合物である新規ＦＯ−６９７９物質に関す
るものである。
るものである。
【０００６】本発明はさらに、ボーベリア属に属し、Ｆ
Ｏ−６９７９物質を生産する能力を有する微生物を培地
に培養し、培養液中にＦＯ−６９７９を蓄積せしめ、該
培養物からＦＯ−６９７９物質を採取する新規ＦＯ−６
９７９物質の製造法に関するものである。
Ｏ−６９７９物質を生産する能力を有する微生物を培地
に培養し、培養液中にＦＯ−６９７９を蓄積せしめ、該
培養物からＦＯ−６９７９物質を採取する新規ＦＯ−６
９７９物質の製造法に関するものである。
【０００７】本発明はまた、ボーベリア属に属し、ＦＯ
−６９７９物質を生産する能力を有する微生物が、ボー
ベリア エスピー ＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕｖｅｒｉ
ａｓｐ．ＦＯ−６９７９ ＦＥＲＭ Ｐ−１６７１６）
である。更に本発明は、ボーベリア エスピー（Ｂｅａ
ｕｖｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９７９（ＦＥＲＭＰ−
１６７１６）株に関するものである。
−６９７９物質を生産する能力を有する微生物が、ボー
ベリア エスピー ＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕｖｅｒｉ
ａｓｐ．ＦＯ−６９７９ ＦＥＲＭ Ｐ−１６７１６）
である。更に本発明は、ボーベリア エスピー（Ｂｅａ
ｕｖｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９７９（ＦＥＲＭＰ−
１６７１６）株に関するものである。
【０００８】前記の式で表されるＦＯ−６９７９物質を
生産する能力を有する微生物（以下、「ＦＯ−６９７９
物質生産菌」と称する）は、ボーベリア属に属するが、
例えば本発明者らが新たに土壌から分離したボーベリア
エスピー（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９
７９株は、本発明において最も有効に使用される株の一
例である。本ＦＯ−６９７９株の菌学的性状を示すと、
以下の通りである。
生産する能力を有する微生物（以下、「ＦＯ−６９７９
物質生産菌」と称する）は、ボーベリア属に属するが、
例えば本発明者らが新たに土壌から分離したボーベリア
エスピー（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９
７９株は、本発明において最も有効に使用される株の一
例である。本ＦＯ−６９７９株の菌学的性状を示すと、
以下の通りである。
【０００９】１．形態的性質 本菌株は、バレイショ・ブドウ糖寒天培地、コーン・ミ
ール寒天培地、麦芽汁寒天培地、三浦寒天培地などで良
好に生育し、分生子の着生も良好である。また、イース
トエキストラクト・ソルブルスターチ寒天培地での生育
は良好であるが、分生子の着生は観察されなかった。
ール寒天培地、麦芽汁寒天培地、三浦寒天培地などで良
好に生育し、分生子の着生も良好である。また、イース
トエキストラクト・ソルブルスターチ寒天培地での生育
は良好であるが、分生子の着生は観察されなかった。
【００１０】コーン・ミール寒天培地に生育したコロニ
ーを顕微鏡で観察すると、菌糸は透明で隔壁を有してい
る。分生子柄は基底菌糸より直接、あるいは短い枝から
生じる。分生子柄の基部は球状あるいはフラスコ状に膨
らんで大きさ２．０〜３．３×２．５〜３．７μｍとな
る。先端は細く伸長し、分生子形成にしたがってジグザ
グ状になり、長さ１２〜２０μｍとなる。分生子は分生
子柄の小突起（約１μｍ）上に出芽形成し、球形あるい
は、幅広い楕円形でときに基部はとがり、無色で大きさ
１．８〜２．５×２．５〜３．３μｍである。
ーを顕微鏡で観察すると、菌糸は透明で隔壁を有してい
る。分生子柄は基底菌糸より直接、あるいは短い枝から
生じる。分生子柄の基部は球状あるいはフラスコ状に膨
らんで大きさ２．０〜３．３×２．５〜３．７μｍとな
る。先端は細く伸長し、分生子形成にしたがってジグザ
グ状になり、長さ１２〜２０μｍとなる。分生子は分生
子柄の小突起（約１μｍ）上に出芽形成し、球形あるい
は、幅広い楕円形でときに基部はとがり、無色で大きさ
１．８〜２．５×２．５〜３．３μｍである。
【００１１】２．各種培地上での培養性状 本菌株を各種寒天培地上で２５℃、１４日間培養した場
合の肉眼的に観察した結果は下記表１に示す通りであ
る。なお、下記の培地において、菌核または菌核様の構
造は形成されない。
合の肉眼的に観察した結果は下記表１に示す通りであ
る。なお、下記の培地において、菌核または菌核様の構
造は形成されない。
【００１２】
【表１】
【００１３】３．生理的、生態的性状 （１）最適生育条件 本菌株の最適生育条件は、ｐＨ４〜７、温度１５〜３０
℃である。 （２）生育範囲 本菌株の生育範囲は、ｐＨ４〜１０、温度１１〜３２℃
である。 （３）好気性、嫌気性の区別 好気性
℃である。 （２）生育範囲 本菌株の生育範囲は、ｐＨ４〜１０、温度１１〜３２℃
である。 （３）好気性、嫌気性の区別 好気性
【００１４】以上のように、本菌株ＦＯ−６９７９株の
形態的特徴、培養性状および生理的性状に基づき、既知
菌種との比較を試みた結果、本菌株はボーベリア（Ｂｅ
ａｕｖｅｒｉａ）属に属する一菌株と同定し、ボーベリ
ア エスピー ＦＯ−６９７９と命名した。なお、本菌
株はボーベリア エスピー ＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕ
ｖｅｒｉａ ｓｐ．ＦＯ−６９７９）として、茨城県つ
くば市東１丁目１番３号に所在する工業技術院生命工学
工業技術研究所に平成１０年３月１８日にＦＥＲＭ Ｐ
−１６７１６として寄託されている。
形態的特徴、培養性状および生理的性状に基づき、既知
菌種との比較を試みた結果、本菌株はボーベリア（Ｂｅ
ａｕｖｅｒｉａ）属に属する一菌株と同定し、ボーベリ
ア エスピー ＦＯ−６９７９と命名した。なお、本菌
株はボーベリア エスピー ＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕ
ｖｅｒｉａ ｓｐ．ＦＯ−６９７９）として、茨城県つ
くば市東１丁目１番３号に所在する工業技術院生命工学
工業技術研究所に平成１０年３月１８日にＦＥＲＭ Ｐ
−１６７１６として寄託されている。
【００１５】本発明で使用されるＦＯ−６９７９物質生
産菌としては、前述のボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖ
ｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９７９菌株が好ましい例と
して挙げられるが、菌の一般的性状として菌学上の性状
は極めて変異し易く、一定したものではなく、自然的に
あるいは通常行われる紫外線照射または変異誘導体、例
えばＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジ
ン、エチルメタンスルホネート等を用いる人工的変異手
段により変異することは周知の事実であり、このような
人工的変異株は勿論、自然変異株も含め、ボーベリア属
に属し、ＦＯ−６９７９物質を生産する能力を有する菌
株はすべて本発明に使用することができる。
産菌としては、前述のボーベリアエスピー（Ｂｅａｕｖ
ｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９７９菌株が好ましい例と
して挙げられるが、菌の一般的性状として菌学上の性状
は極めて変異し易く、一定したものではなく、自然的に
あるいは通常行われる紫外線照射または変異誘導体、例
えばＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジ
ン、エチルメタンスルホネート等を用いる人工的変異手
段により変異することは周知の事実であり、このような
人工的変異株は勿論、自然変異株も含め、ボーベリア属
に属し、ＦＯ−６９７９物質を生産する能力を有する菌
株はすべて本発明に使用することができる。
【００１６】また、細胞融合、遺伝子操作などの細胞工
学的に変異させた菌株も含め、ボーベリア属に属し、前
記の式で表されるＦＯ−６９７９物質（以下、特記しな
い限り「ＦＯ−６９７９物質」と称する）を生産する菌
株は、全て本発明において使用することができる。
学的に変異させた菌株も含め、ボーベリア属に属し、前
記の式で表されるＦＯ−６９７９物質（以下、特記しな
い限り「ＦＯ−６９７９物質」と称する）を生産する菌
株は、全て本発明において使用することができる。
【００１７】本発明を実施するに当たっては、先ずボー
ベリア属に属するＦＯ−６９７９物質生産菌を培地に培
養することにより行われる。上記ＦＯ−６９７９物質生
産に適した栄養源としては、微生物が同化し得る炭素
源、消化し得る窒素源、さらに必要に応じて無機塩、ビ
タミン等を含有させた栄養培地が使用される。炭素源と
しては、グルコース、フラクトース、マルトース、ラク
トース、ガラクトース、デキストリン、澱粉等の糖類、
大豆油等の植物性油脂類が単独または組み合わせて用い
られる。
ベリア属に属するＦＯ−６９７９物質生産菌を培地に培
養することにより行われる。上記ＦＯ−６９７９物質生
産に適した栄養源としては、微生物が同化し得る炭素
源、消化し得る窒素源、さらに必要に応じて無機塩、ビ
タミン等を含有させた栄養培地が使用される。炭素源と
しては、グルコース、フラクトース、マルトース、ラク
トース、ガラクトース、デキストリン、澱粉等の糖類、
大豆油等の植物性油脂類が単独または組み合わせて用い
られる。
【００１８】窒素源としては、ペプトン、酵母エキス、
肉エキス、大豆粉、綿実粉、コーン・スチープ・リカ
ー、麦芽エキス、カゼイン、アミノ酸、尿素、アンモニ
ウム塩類、硝酸塩類等が単独または組み合わせて用いら
れる。その他必要に応じてリン酸塩、マグネシウム塩、
カルシウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等の塩類、鉄
塩、マンガン塩、銅塩、コバルト塩、亜鉛塩などの重金
属塩類やビタミン類、その他本ＦＯ−６９７９物質の生
産に好適なものが適宜添加される。
肉エキス、大豆粉、綿実粉、コーン・スチープ・リカ
ー、麦芽エキス、カゼイン、アミノ酸、尿素、アンモニ
ウム塩類、硝酸塩類等が単独または組み合わせて用いら
れる。その他必要に応じてリン酸塩、マグネシウム塩、
カルシウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等の塩類、鉄
塩、マンガン塩、銅塩、コバルト塩、亜鉛塩などの重金
属塩類やビタミン類、その他本ＦＯ−６９７９物質の生
産に好適なものが適宜添加される。
【００１９】培養するに当たり、発泡の激しいときに
は、必要に応じて液体パラフイン、動物油、植物油、シ
リコン等、界面活性剤等の消泡剤を添加してもよい。上
記の培養は、上記の栄養源を含有すれば、培地は液体で
も固体でもよいが、通常は液体培地を用い、培養するの
がよい。少量生産の場合にはフラスコを用いる培養が好
適である。
は、必要に応じて液体パラフイン、動物油、植物油、シ
リコン等、界面活性剤等の消泡剤を添加してもよい。上
記の培養は、上記の栄養源を含有すれば、培地は液体で
も固体でもよいが、通常は液体培地を用い、培養するの
がよい。少量生産の場合にはフラスコを用いる培養が好
適である。
【００２０】培養を大きなタンクで行う場合は、生産工
程において、菌の生育遅延を防止するため、はじめに比
較的少量の培地に生産菌を接種培養した後、次に培養物
を大きなタンクに移して、そこで生産培養するのが好ま
しい。この場合、前培養に使用する培地および生産培養
に使用する培地の組成は、両者ともに同一であってもよ
いし、必要があれば両者を変えてもよい。
程において、菌の生育遅延を防止するため、はじめに比
較的少量の培地に生産菌を接種培養した後、次に培養物
を大きなタンクに移して、そこで生産培養するのが好ま
しい。この場合、前培養に使用する培地および生産培養
に使用する培地の組成は、両者ともに同一であってもよ
いし、必要があれば両者を変えてもよい。
【００２１】培養を通気攪拌条件で行う場合は、例えば
プロペラやその他機械による攪拌、ファメーターの回転
または振とう、ポンプ処理、空気の吹き込み等既知の方
法が適宜使用される。通気用の空気は滅菌したものを使
用する。培養温度は、本ＦＯ−６９７９物質生産菌が本
ＦＯ−６９７９物質を生産する範囲内で適宜変更し得る
が、通常は２０〜３０℃、好ましくは２７℃前後で培養
するのがよい。培養ｐＨは、通常は５〜８、好ましくは
７前後で培養するのがよい。培養時間は、培養条件によ
っても異なるが、通常は１０〜２０日程度である。
プロペラやその他機械による攪拌、ファメーターの回転
または振とう、ポンプ処理、空気の吹き込み等既知の方
法が適宜使用される。通気用の空気は滅菌したものを使
用する。培養温度は、本ＦＯ−６９７９物質生産菌が本
ＦＯ−６９７９物質を生産する範囲内で適宜変更し得る
が、通常は２０〜３０℃、好ましくは２７℃前後で培養
するのがよい。培養ｐＨは、通常は５〜８、好ましくは
７前後で培養するのがよい。培養時間は、培養条件によ
っても異なるが、通常は１０〜２０日程度である。
【００２２】このようにして得られたＦＯ−６９７９物
質は培養菌体および培養ろ液に存在する。培養物から目
的とするＦＯ−６９７９物質を採取するには、全培養物
をアセトン等の水混和性有機溶媒で抽出し、抽出液を減
圧下有機溶媒を留去後、続いて残渣を酢酸エチル等の水
不混和性有機溶媒で抽出することによって行われる。
質は培養菌体および培養ろ液に存在する。培養物から目
的とするＦＯ−６９７９物質を採取するには、全培養物
をアセトン等の水混和性有機溶媒で抽出し、抽出液を減
圧下有機溶媒を留去後、続いて残渣を酢酸エチル等の水
不混和性有機溶媒で抽出することによって行われる。
【００２３】上記の抽出法に加え、脂溶性物質の採取に
用いられる公知の方法、例えば吸着クロマトグラフィ
ー、ゲル濾過クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフ
ィー、遠心向流分配クロマトグラフィー、高速液体クロ
マトグラフィー等を適宜組み合わせ、あるいは繰り返す
ことにより、ＦＯ−６９７９物質を分離、精製すること
ができる。
用いられる公知の方法、例えば吸着クロマトグラフィ
ー、ゲル濾過クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフ
ィー、遠心向流分配クロマトグラフィー、高速液体クロ
マトグラフィー等を適宜組み合わせ、あるいは繰り返す
ことにより、ＦＯ−６９７９物質を分離、精製すること
ができる。
【００２４】本発明によるＦＯ−６９７９物質の理化学
的性状は次のとおりである。 （１）性状：白色粉末 （２）分子量：４８７（高速原子衝撃質量分析による） （３）分子式：Ｃ27Ｈ41Ｎ3 Ｏ5 （４）比旋光度：［α］D 23＝−３７．８°（ｃ＝０．
３、クロロホルム：メタノール＝４：１）
的性状は次のとおりである。 （１）性状：白色粉末 （２）分子量：４８７（高速原子衝撃質量分析による） （３）分子式：Ｃ27Ｈ41Ｎ3 Ｏ5 （４）比旋光度：［α］D 23＝−３７．８°（ｃ＝０．
３、クロロホルム：メタノール＝４：１）
【００２５】（５）紫外部吸収極大（メタノール中）：
図１に示すとおり、２１５ｎｍ（ε＝２７３００に吸収
を有する。 （６）赤外部吸収極大（ＫＢｒ錠）：図２に示すとお
り、１５３９、１６３９、１６８６、１７２６ｃｍ-1に
極大吸収を有する。 （７）プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホル
ム：重メタノール＝４：１）：図３に示すとおり。 （８）13Ｃ核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重
メタノール＝４：１）：図４に示すとおり。
図１に示すとおり、２１５ｎｍ（ε＝２７３００に吸収
を有する。 （６）赤外部吸収極大（ＫＢｒ錠）：図２に示すとお
り、１５３９、１６３９、１６８６、１７２６ｃｍ-1に
極大吸収を有する。 （７）プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホル
ム：重メタノール＝４：１）：図３に示すとおり。 （８）13Ｃ核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム：重
メタノール＝４：１）：図４に示すとおり。
【００２６】（９）溶剤に対する溶解性：メタノール、
ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶。水、ヘキ
サンに難溶。 （１０）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性。 （１１）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質。
ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチルに可溶。水、ヘキ
サンに難溶。 （１０）呈色反応：硫酸、リンモリブデン酸に陽性。 （１１）酸性、中性、塩基性の区別：中性物質。
【００２７】以上に詳しく述べたように、本ＦＯ−６９
７９物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを検討
した結果、本ＦＯ−６９７９物質は次の化学構造である
ことが決定された。
７９物質の各種理化学的性状やスペクトルデータを検討
した結果、本ＦＯ−６９７９物質は次の化学構造である
ことが決定された。
【００２８】
【化３】
【００２９】次に、本発明のＦＯ−６９７９物質の生物
学的性状および毒性について詳しく述べる。 （１）マウス由来アシルコエンザイムＡコレステロール
アシル転移酵素に対する阻害作用 アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素活
性は、Ｕｅｌｍｅｎらの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅ
ｍ．２７０巻、２６１９２〜２６２０１頁、１９５５
年）を一部改変して行った。酵素源としては、マウス肝
ミクロソーム及びマウス腹腔マクロファージ由来の膜画
分を用いた。マウス肝は緩衝液Ａ（５０ｍＭトリス塩酸
液（ｐＨ７．８）、１ｍＭ ＥＤＴＡ及び１ｍＭフェニ
ルメタンスルフォニルフルオリド）中でポッター型ホモ
ジナイザー（Ｔｏｋｙｏ−ＲＩＫＯ社製）でホモジナイ
ズする。
学的性状および毒性について詳しく述べる。 （１）マウス由来アシルコエンザイムＡコレステロール
アシル転移酵素に対する阻害作用 アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転移酵素活
性は、Ｕｅｌｍｅｎらの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅ
ｍ．２７０巻、２６１９２〜２６２０１頁、１９５５
年）を一部改変して行った。酵素源としては、マウス肝
ミクロソーム及びマウス腹腔マクロファージ由来の膜画
分を用いた。マウス肝は緩衝液Ａ（５０ｍＭトリス塩酸
液（ｐＨ７．８）、１ｍＭ ＥＤＴＡ及び１ｍＭフェニ
ルメタンスルフォニルフルオリド）中でポッター型ホモ
ジナイザー（Ｔｏｋｙｏ−ＲＩＫＯ社製）でホモジナイ
ズする。
【００３０】これを１２，０００×ｇで遠心した上清を
１００，０００×ｇで超遠心した沈渣をミクロソーム画
分とした。一方、腹腔マクロファージは緩衝液Ａで懸濁
後、超音波機（Ｍｉｓｏｎｉｘ社製）で破壊後、１０
０，０００×ｇで超遠心し、その沈渣を膜画分とした。
いずれの画分も５ｍｇ／ｍｌの蛋白質濃度となるように
緩衝液Ａで調製した。
１００，０００×ｇで超遠心した沈渣をミクロソーム画
分とした。一方、腹腔マクロファージは緩衝液Ａで懸濁
後、超音波機（Ｍｉｓｏｎｉｘ社製）で破壊後、１０
０，０００×ｇで超遠心し、その沈渣を膜画分とした。
いずれの画分も５ｍｇ／ｍｌの蛋白質濃度となるように
緩衝液Ａで調製した。
【００３１】アシルコエンザイムＡコレステロールアシ
ル転移酵素活性の測定は、緩衝液Ａ中で酵素源２００μ
ｇ蛋白量、２００ｍＭ牛血清アルブミン、〔１−14Ｃ〕
オレオイルコエンザイムＡ（最終濃度１７０μＭ、０．
０９μＣｉ）とＦＯ−６９７９物質を加え全量１００μ
ｌとして、３７℃で１０分間反応させた。
ル転移酵素活性の測定は、緩衝液Ａ中で酵素源２００μ
ｇ蛋白量、２００ｍＭ牛血清アルブミン、〔１−14Ｃ〕
オレオイルコエンザイムＡ（最終濃度１７０μＭ、０．
０９μＣｉ）とＦＯ−６９７９物質を加え全量１００μ
ｌとして、３７℃で１０分間反応させた。
【００３２】次いでそこに、０．５ｍｌエタノールを加
えて反応を停止させ、１．５ｍｌヘキサンを加えてよく
攪拌した。ヘキサン層１ｍｌを乾固後、ＴＬＣ（シリカ
ゲルプレート、メルク社製、厚さ０．５ｍｍ）にスポッ
トし、石油エーテル／ジエチルエーテル／酢酸（９０：
１０：１、ｖ／ｖ）の溶媒で展開した。次に生成した〔
14Ｃ〕コレステリルオレートの量をラジオスキャナー
（アンビス社製）で定量した。
えて反応を停止させ、１．５ｍｌヘキサンを加えてよく
攪拌した。ヘキサン層１ｍｌを乾固後、ＴＬＣ（シリカ
ゲルプレート、メルク社製、厚さ０．５ｍｍ）にスポッ
トし、石油エーテル／ジエチルエーテル／酢酸（９０：
１０：１、ｖ／ｖ）の溶媒で展開した。次に生成した〔
14Ｃ〕コレステリルオレートの量をラジオスキャナー
（アンビス社製）で定量した。
【００３３】その結果、ＦＯ−６９７９物質のアシルコ
エンザイムＡコレステロールアシル転移酵素活性を５０
％阻害する濃度（ＩＣ50）は、マウス肝ミクロソームを
酵素源としたときは２１μＭ、そしてマウス腹腔マクロ
ファージ膜画分を酵素源としたときは１０μＭと測定さ
れた。
エンザイムＡコレステロールアシル転移酵素活性を５０
％阻害する濃度（ＩＣ50）は、マウス肝ミクロソームを
酵素源としたときは２１μＭ、そしてマウス腹腔マクロ
ファージ膜画分を酵素源としたときは１０μＭと測定さ
れた。
【００３４】（２）マウス腹腔マクロファージ内でのコ
レステリルエステル及び油滴形成に対する阻害作用 マウス腹腔マクロファージ内でのコレステリルエステル
形成および油滴形成は西川らの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃ
ｈｅｍ．２６５巻、５２２６〜５２３１頁、１９９０
年）を一部改変して行った。マウス腹腔より単離したマ
クロファージを６．８％リポ蛋白質欠乏血清を含むダル
ベッコ改変イーグル培地（６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ
培地）に２．０×１０6 ｃｅｌｌｓ／ｍｌで懸濁して、
４８穴マイクロプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）あるい
はスライドチャンバー（Ｎｕｎｃ社製）に０．２５ｍｌ
ずつまく。
レステリルエステル及び油滴形成に対する阻害作用 マウス腹腔マクロファージ内でのコレステリルエステル
形成および油滴形成は西川らの方法（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃ
ｈｅｍ．２６５巻、５２２６〜５２３１頁、１９９０
年）を一部改変して行った。マウス腹腔より単離したマ
クロファージを６．８％リポ蛋白質欠乏血清を含むダル
ベッコ改変イーグル培地（６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ
培地）に２．０×１０6 ｃｅｌｌｓ／ｍｌで懸濁して、
４８穴マイクロプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ社製）あるい
はスライドチャンバー（Ｎｕｎｃ社製）に０．２５ｍｌ
ずつまく。
【００３５】次に、５％炭酸ガスインキュベーター内で
３７℃で２時間培養を行った後、付着しない細胞をハン
クス液（Ｈａｎｋｓ’ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で洗浄するこ
とにより除去する。洗浄後、６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥ
Ｍ培地で一時間培養した後、ＦＯ−６９７９物質（２．
５μｌメタノール溶液）、リポソーム（１０μｌの０．
３Ｍグルコース中にホスファチジルコリン／ホスファチ
ジルセリン／ジセチルホスフェート／コレステロール＝
１０：１０：２：１５（ｎｍｏｌ）の組成から構成され
ている）及び〔１−14Ｃ〕オレイン酸（５μｌ、０．０
５μＣｉ、１ｎｍｏｌ）を添加し、さらに１４時間培養
した。
３７℃で２時間培養を行った後、付着しない細胞をハン
クス液（Ｈａｎｋｓ’ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で洗浄するこ
とにより除去する。洗浄後、６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥ
Ｍ培地で一時間培養した後、ＦＯ−６９７９物質（２．
５μｌメタノール溶液）、リポソーム（１０μｌの０．
３Ｍグルコース中にホスファチジルコリン／ホスファチ
ジルセリン／ジセチルホスフェート／コレステロール＝
１０：１０：２：１５（ｎｍｏｌ）の組成から構成され
ている）及び〔１−14Ｃ〕オレイン酸（５μｌ、０．０
５μＣｉ、１ｎｍｏｌ）を添加し、さらに１４時間培養
した。
【００３６】培養後上清を除去し、細胞内中性脂質をヘ
キサン０．６ｍｌとイソプロパノール０．４ｍｌを加え
て２回抽出した。これを濃縮後、ＴＬＣ（シリカゲルプ
レート、メルク社製、厚さ０．５ｍｍ）にスポットし、
ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸（７０：３０：１、
ｖ／ｖ）の溶媒で展開し、分離した〔14Ｃ〕コレステリ
ルオレートと〔14Ｃ〕トリアシルグリセロールの量をラ
ジオスキャナー（アンビス社製）で定量した。その結
果、ＦＯ−６９７９物質は〔14Ｃ〕コレステリルオレー
トの生成を選択的に阻害し、そのＩＣ50値は０．４１μ
Ｍと測定された。
キサン０．６ｍｌとイソプロパノール０．４ｍｌを加え
て２回抽出した。これを濃縮後、ＴＬＣ（シリカゲルプ
レート、メルク社製、厚さ０．５ｍｍ）にスポットし、
ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸（７０：３０：１、
ｖ／ｖ）の溶媒で展開し、分離した〔14Ｃ〕コレステリ
ルオレートと〔14Ｃ〕トリアシルグリセロールの量をラ
ジオスキャナー（アンビス社製）で定量した。その結
果、ＦＯ−６９７９物質は〔14Ｃ〕コレステリルオレー
トの生成を選択的に阻害し、そのＩＣ50値は０．４１μ
Ｍと測定された。
【００３７】一方、細胞内に形成した油滴は、マクロフ
ァージを６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ培地でＦＯ−６９
７９物質と上記リポソームで１４時間培養後、油滴及び
核をそれぞれオイルレッドＯ（ｏｉｌ ｒｅｄ Ｏ）及
びヘマトキシリンで二重染色し、光学顕微鏡（オリンパ
ス社製）で観察した。その結果、ＦＯ−６９７９物質１
０μＭ存在下で、細胞質に蓄積する油滴の量は薬剤無添
加（コントロール）と比較すると約５０％に減少してい
た。
ァージを６．８％ＬＰＤＳ−ＤＭＥＭ培地でＦＯ−６９
７９物質と上記リポソームで１４時間培養後、油滴及び
核をそれぞれオイルレッドＯ（ｏｉｌ ｒｅｄ Ｏ）及
びヘマトキシリンで二重染色し、光学顕微鏡（オリンパ
ス社製）で観察した。その結果、ＦＯ−６９７９物質１
０μＭ存在下で、細胞質に蓄積する油滴の量は薬剤無添
加（コントロール）と比較すると約５０％に減少してい
た。
【００３８】（３）毒性試験 ＦＯ−６９７９物質は、マウス腹腔マクロファージの生
育に対して最終濃度２０μＭでも全く毒性を示さなかっ
た。また、ＦＯ−６９７９物質を１００ｍｇ／ｋｇでマ
ウス腹腔内に投与したが、何ら毒性変化は認められなか
った。
育に対して最終濃度２０μＭでも全く毒性を示さなかっ
た。また、ＦＯ−６９７９物質を１００ｍｇ／ｋｇでマ
ウス腹腔内に投与したが、何ら毒性変化は認められなか
った。
【００３９】以上に詳しく述べたように、本発明のＦＯ
−６９７９物質は毒性が低く、アシルコエンザイムＡコ
レステロールアシル転移酵素に対して特異的な阻害を示
し、マクロファージ内での油滴形成を阻害することか
ら、ヒトのコレステロール蓄積に起因する疾病の予防治
療に有用であると期待される。
−６９７９物質は毒性が低く、アシルコエンザイムＡコ
レステロールアシル転移酵素に対して特異的な阻害を示
し、マクロファージ内での油滴形成を阻害することか
ら、ヒトのコレステロール蓄積に起因する疾病の予防治
療に有用であると期待される。
【００４０】
【実施例】５００ｍｌ容三角フラスコにグルコース２．
０％、ポリペプトン０．５％、イーストエキストラクト
０．２％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．１％、アガー０．１％、
ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．０５％を水道水で溶解した
培地（ｐＨ６．０に調整）１００ｍｌを仕込み、綿栓
後、蒸気滅菌し、寒天培地上に生育させたボーベリアエ
スピー（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９７９
（ＦＥＲＭ Ｐ−１６７１６）を白金耳にて無菌的に接
種し、２７℃で３日間振とう培養して種培養液を得た。
０％、ポリペプトン０．５％、イーストエキストラクト
０．２％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．１％、アガー０．１％、
ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．０５％を水道水で溶解した
培地（ｐＨ６．０に調整）１００ｍｌを仕込み、綿栓
後、蒸気滅菌し、寒天培地上に生育させたボーベリアエ
スピー（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９７９
（ＦＥＲＭ Ｐ−１６７１６）を白金耳にて無菌的に接
種し、２７℃で３日間振とう培養して種培養液を得た。
【００４１】一方、１０００ｍｌ容ルー型フラスコ５０
本それぞれにスクロース２．０％、グルコース１．０
％、コーンスチープパウダー０．５％、肉エキス０．５
％、炭酸カルシウム０．３％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．１
％、アガー０．１％、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2 Ｏ ０．０５
％、ＦｅＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．００１％、ＭｎＣｌ2
・４Ｈ2 Ｏ ０．００１％、ＺｎＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ
０．００１％、ＣｕＳＯ4 ・５Ｈ2 Ｏ ０．００１％、
ＣｏＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏ ０．００１％、を水道水で溶解
した培地（ｐＨ６．０に調整）２００ｍｌを仕込み、綿
栓後、蒸気滅菌し、種培養した培養液２ｍｌを無菌的に
移植し、２７℃で１４日間静置培養した。
本それぞれにスクロース２．０％、グルコース１．０
％、コーンスチープパウダー０．５％、肉エキス０．５
％、炭酸カルシウム０．３％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．１
％、アガー０．１％、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2 Ｏ ０．０５
％、ＦｅＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．００１％、ＭｎＣｌ2
・４Ｈ2 Ｏ ０．００１％、ＺｎＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ
０．００１％、ＣｕＳＯ4 ・５Ｈ2 Ｏ ０．００１％、
ＣｏＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏ ０．００１％、を水道水で溶解
した培地（ｐＨ６．０に調整）２００ｍｌを仕込み、綿
栓後、蒸気滅菌し、種培養した培養液２ｍｌを無菌的に
移植し、２７℃で１４日間静置培養した。
【００４２】培養後、培養液１０リットルをアセトン１
０リットルで処理してろ過した後、ろ液を減圧濃縮して
アセトンのみを留去し、水溶液を得た。次いで、その水
溶液を酢酸エチル１０リットルで抽出し、抽出液を減圧
濃縮して粗製物９．４ｇを得た。この粗製物をＯＤＳゲ
ル（４７０ｇ、ペガシル、センシュー科学社製）のカラ
ムにチャージし、４０％〜１００％アセトニトリル、１
００％クロロホルム（各５００ｍｌ）で溶出するカラム
クロマトグラフィーを行った。
０リットルで処理してろ過した後、ろ液を減圧濃縮して
アセトンのみを留去し、水溶液を得た。次いで、その水
溶液を酢酸エチル１０リットルで抽出し、抽出液を減圧
濃縮して粗製物９．４ｇを得た。この粗製物をＯＤＳゲ
ル（４７０ｇ、ペガシル、センシュー科学社製）のカラ
ムにチャージし、４０％〜１００％アセトニトリル、１
００％クロロホルム（各５００ｍｌ）で溶出するカラム
クロマトグラフィーを行った。
【００４３】各フラクションは４０ｍｌずつ分画し、活
性成分を含む７０％〜１００％アセトニトリル、１００
％クロロホルム画分を集め、減圧乾固して粗活性黄色物
質６０５ｍｇを得た。更に、粗活性物質をシリカゲル
（３０ｇ、シリカゲル６０、メルク社製）のカラムにチ
ャージし、クロロホルム−メタノール（１００：１〜
０：１００）（各１００ｍｌ）で溶出するカラムクロマ
トグラフィーを行った。各フラクションは１０ｍｌずつ
分画し、活性成分を含むクロロホルム−メタノール（１
００：２〜１００：３）画分を集め、減圧乾固して粗活
性白色物質１６８ｍｇを得た。
性成分を含む７０％〜１００％アセトニトリル、１００
％クロロホルム画分を集め、減圧乾固して粗活性黄色物
質６０５ｍｇを得た。更に、粗活性物質をシリカゲル
（３０ｇ、シリカゲル６０、メルク社製）のカラムにチ
ャージし、クロロホルム−メタノール（１００：１〜
０：１００）（各１００ｍｌ）で溶出するカラムクロマ
トグラフィーを行った。各フラクションは１０ｍｌずつ
分画し、活性成分を含むクロロホルム−メタノール（１
００：２〜１００：３）画分を集め、減圧乾固して粗活
性白色物質１６８ｍｇを得た。
【００４４】これを５０回に分けて高速液体クロマトグ
ラフィーにより分離、精製した。装置はモデルＳＤ−２
００（ＲＡＮＩＮ社製）を用い、カラムはＹＭＣ−Ｐａ
ｃｋＳ−５（ＯＤＳ系樹脂、２０×２５０ｍｍ、山村科
学研究所社製）を用い、溶媒系は５２．５％のアセトニ
トリル水を用い、検出はＵＶ２１５ｎｍ、流速は６ｍｌ
／分で行った。その結果、ＦＯ−６９７９物質１５ｍｇ
を単離した。
ラフィーにより分離、精製した。装置はモデルＳＤ−２
００（ＲＡＮＩＮ社製）を用い、カラムはＹＭＣ−Ｐａ
ｃｋＳ−５（ＯＤＳ系樹脂、２０×２５０ｍｍ、山村科
学研究所社製）を用い、溶媒系は５２．５％のアセトニ
トリル水を用い、検出はＵＶ２１５ｎｍ、流速は６ｍｌ
／分で行った。その結果、ＦＯ−６９７９物質１５ｍｇ
を単離した。
【００４５】
【発明の効果】以上に説明したように、本発明の新規Ｆ
Ｏ−６９７９物質は、毒性が低く、アシルコエンザイム
Ａコレステロールアシル転移酵素を特異的に阻害するこ
とから、ヒトのコレステロール蓄積に起因する疾病の予
防および治療に有用であると期待される。
Ｏ−６９７９物質は、毒性が低く、アシルコエンザイム
Ａコレステロールアシル転移酵素を特異的に阻害するこ
とから、ヒトのコレステロール蓄積に起因する疾病の予
防および治療に有用であると期待される。
【図１】本発明のＦＯ−６９７９物質の紫外部吸収スペ
クトル（メタノール中）を示したものである。
クトル（メタノール中）を示したものである。
【図２】本発明のＦＯ−６９７９物質の赤外部吸収スペ
クトル（ＫＢｒ法）を示したものである。
クトル（ＫＢｒ法）を示したものである。
【図３】本発明のＦＯ−６９７９物質のプロトン核磁気
共鳴スペクトル（重クロロホルム：重メタノール＝４：
１）を示したものである。
共鳴スペクトル（重クロロホルム：重メタノール＝４：
１）を示したものである。
【図４】本発明のＦＯ−６９７９物質の13Ｃ核磁気共鳴
スペクトル（重クロロホルム：重メタノール＝４：１）
を示したものである。
スペクトル（重クロロホルム：重メタノール＝４：１）
を示したものである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 13/02 Ｃ１２Ｒ 1:645）
Claims (6)
- 【請求項１】 下記式 【化１】 で表される化合物である新規ＦＯ−６９７９物質。
- 【請求項２】 ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９物
質を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養
液中にＦＯ−６９７９物質を蓄積せしめ、該培養物から
ＦＯ−６９７９物質を採取することを特徴とする新規Ｆ
Ｏ−６９７９物質の製造法。 - 【請求項３】 ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９物
質を生産する能力を有する微生物が、ボーベリア エス
ピー ＦＯ−６９７９（Ｂｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．ＦＯ
−６９７９ ＦＥＲＭ Ｐ−１６７１６）である請求項
２に記載の製造法。 - 【請求項４】 ボーベリア属に属し、ＦＯ−６９７９物
質を生産する能力を有する微生物。 - 【請求項５】 微生物が、ボーベリア エスピー（Ｂｅ
ａｕｖｅｒｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９７９である請求項
４に記載の微生物。 - 【請求項６】 ボーベリア エスピー（Ｂｅａｕｖｅｒ
ｉａ ｓｐ．）ＦＯ−６９７９（ＦＥＲＭ Ｐ−１６７
１６）株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP08365998A JP4160149B2 (ja) | 1998-03-30 | 1998-03-30 | 新規ｆｏ−６９７９物質およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP08365998A JP4160149B2 (ja) | 1998-03-30 | 1998-03-30 | 新規ｆｏ−６９７９物質およびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11279195A true JPH11279195A (ja) | 1999-10-12 |
| JP4160149B2 JP4160149B2 (ja) | 2008-10-01 |
Family
ID=13808590
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP08365998A Expired - Fee Related JP4160149B2 (ja) | 1998-03-30 | 1998-03-30 | 新規ｆｏ−６９７９物質およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4160149B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002074792A1 (fr) * | 2001-03-21 | 2002-09-26 | Gakkou Houjin Kitasato Gakuen | Substances fo-6979 et procede de production de ces dernieres |
| WO2002077203A1 (fr) * | 2001-03-22 | 2002-10-03 | Gakkou Houjin Kitasato Gakuen | Procedes de selection de beauveriolide i ou beauveriolide iii et procede servant a effectuer la production selective de ces substances |
| WO2005047311A1 (ja) * | 2003-11-17 | 2005-05-26 | Chemgenesis Incorporated | ボーベリオライド誘導体 |
| WO2006048947A1 (ja) * | 2004-11-02 | 2006-05-11 | The Kitasato Institute | マクロファージ泡沫化阻害物質ｆｋｉ−１８４０およびその製造法 |
-
1998
- 1998-03-30 JP JP08365998A patent/JP4160149B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002074792A1 (fr) * | 2001-03-21 | 2002-09-26 | Gakkou Houjin Kitasato Gakuen | Substances fo-6979 et procede de production de ces dernieres |
| US7192742B2 (en) | 2001-03-21 | 2007-03-20 | Gakkou Houjin Kitasato Gakeun | FO-6979 substances and process for producing the same |
| WO2002077203A1 (fr) * | 2001-03-22 | 2002-10-03 | Gakkou Houjin Kitasato Gakuen | Procedes de selection de beauveriolide i ou beauveriolide iii et procede servant a effectuer la production selective de ces substances |
| JPWO2002077203A1 (ja) * | 2001-03-22 | 2004-09-09 | 学校法人北里学園 | ボーベリオライドｉ物質あるいはボーベリオライドｉｉｉ物質の選択培地およびそれらの選択製造法 |
| US6902925B2 (en) | 2001-03-22 | 2005-06-07 | Gakkou Houjin Kitasato Gakuen | Selection media for beauveriolide I or beauveriolide III and process for selectively producing these substances |
| WO2005047311A1 (ja) * | 2003-11-17 | 2005-05-26 | Chemgenesis Incorporated | ボーベリオライド誘導体 |
| WO2006048947A1 (ja) * | 2004-11-02 | 2006-05-11 | The Kitasato Institute | マクロファージ泡沫化阻害物質ｆｋｉ−１８４０およびその製造法 |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4160149B2 (ja) | 2008-10-01 |
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