JP3074038B2 - Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法 - Google Patents
Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法Info
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、アシルコエンザイムＡ
コレステロールアシル転位酵素阻害を有する新規物質Ｆ
Ｏ−１５１３Ａ物質およびその製造法に関する。
コレステロールアシル転位酵素阻害を有する新規物質Ｆ
Ｏ−１５１３Ａ物質およびその製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、いくつかの高脂血症薬物が知られ
ていたが、未だに有効な物質は得られていない。
ていたが、未だに有効な物質は得られていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】近年、食生活の向上に
伴い成人の高脂血症や動脈硬化などコレステロール蓄積
に起因する症状が現代病として問題視されている。コレ
ステロールはアシルコエンザイムＡからアシル基転位に
よりコレステロールとなり、細胞内および血中リポ蛋白
に蓄積される。このアシル基転位反応を触媒する酵素が
アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素で
あり、コレステロールの腸管からの吸収および冠動脈に
おける泡沫細胞の形成に深く係わつている。したがつ
て、アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転位酵
素を阻害する物質は、かかる疾病に有効であることが推
察される。
伴い成人の高脂血症や動脈硬化などコレステロール蓄積
に起因する症状が現代病として問題視されている。コレ
ステロールはアシルコエンザイムＡからアシル基転位に
よりコレステロールとなり、細胞内および血中リポ蛋白
に蓄積される。このアシル基転位反応を触媒する酵素が
アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素で
あり、コレステロールの腸管からの吸収および冠動脈に
おける泡沫細胞の形成に深く係わつている。したがつ
て、アシルコエンザイムＡコレステロールアシル転位酵
素を阻害する物質は、かかる疾病に有効であることが推
察される。
【０００４】かかる実情において、アシルコエンザイム
Ａコレステロールアシル転位酵素阻害活性を有する物質
を提供することは、高脂血症やそれに基く動脈硬化など
の成人病の治療上有用なことである。
Ａコレステロールアシル転位酵素阻害活性を有する物質
を提供することは、高脂血症やそれに基く動脈硬化など
の成人病の治療上有用なことである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、微生物の
生産する代謝産物について研究を続けた結果、新たな土
壌から分離したＦＯ−１５１３菌株の培養物中にアシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素阻害活性
を有する物質が産生されることを見出した。次いで、該
培養物からアシルコエンザイムＡコレステロールアシル
転位酵素阻害活性物質を分離、精製した結果、後記の理
化学的性質を有する物質は従来全く知られていないこと
から、本物質をＦＯ−１５１３Ａ物質と称することにし
た。本発明は、かかる知見に基いて完成されたものであ
って、分子式Ｃ45Ｈ82Ｏ5 で表されるＦＯ−１５１３Ａ
物質を提供するものである。
生産する代謝産物について研究を続けた結果、新たな土
壌から分離したＦＯ−１５１３菌株の培養物中にアシル
コエンザイムＡコレステロールアシル転位酵素阻害活性
を有する物質が産生されることを見出した。次いで、該
培養物からアシルコエンザイムＡコレステロールアシル
転位酵素阻害活性物質を分離、精製した結果、後記の理
化学的性質を有する物質は従来全く知られていないこと
から、本物質をＦＯ−１５１３Ａ物質と称することにし
た。本発明は、かかる知見に基いて完成されたものであ
って、分子式Ｃ45Ｈ82Ｏ5 で表されるＦＯ−１５１３Ａ
物質を提供するものである。
【０００６】更に、本発明は、グリオクラジウム属に属
し、ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有する微生
物を培地に培養し、該培養物にＦＯ−１５１３Ａ物質を
蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取
することを特徴とするＦＯ−１５１３Ａ物質の製造法を
提供するものである。
し、ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有する微生
物を培地に培養し、該培養物にＦＯ−１５１３Ａ物質を
蓄積せしめ、該培養物からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取
することを特徴とするＦＯ−１５１３Ａ物質の製造法を
提供するものである。
【０００７】ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有
する微生物（以下、ＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌と称す
る）は、グリオクラジウム属に属するが、例えば、本発
明者らが分離したグリオクラジム属に属するＦＯ−１５
１３菌株は、本発明の最も有効に使用される菌株の一例
であって、本菌株の菌学的性状を示すと次の通りであ
る。
する微生物（以下、ＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌と称す
る）は、グリオクラジウム属に属するが、例えば、本発
明者らが分離したグリオクラジム属に属するＦＯ−１５
１３菌株は、本発明の最も有効に使用される菌株の一例
であって、本菌株の菌学的性状を示すと次の通りであ
る。
【０００８】本発明のＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する
ために使用される菌株としては、例えば、本発明者らに
よつて土壌から分離されたグリオクラジウム エスピ
ー．（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｓｐ．）ＦＯ−１５１
３株が挙げられる。本菌株は表１に示すような培養所見
を示す。本所見は各種培地上２５℃、１４日間培養し、
観察した結果である。
ために使用される菌株としては、例えば、本発明者らに
よつて土壌から分離されたグリオクラジウム エスピ
ー．（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｓｐ．）ＦＯ−１５１
３株が挙げられる。本菌株は表１に示すような培養所見
を示す。本所見は各種培地上２５℃、１４日間培養し、
観察した結果である。
【０００９】
【表１】
【００１０】ＦＯ−１５１３株の生育温度範囲は１０℃
〜３２℃、至適温度範囲は１６．５℃〜２７℃である。
また、生育ｐＨ範囲はｐＨ３〜９、至適ｐＨの範囲はｐ
Ｈ５〜７である。前記すべての培地には菌の生育に伴う
菌核の形成や厚膜胞子は観察されなかった。
〜３２℃、至適温度範囲は１６．５℃〜２７℃である。
また、生育ｐＨ範囲はｐＨ３〜９、至適ｐＨの範囲はｐ
Ｈ５〜７である。前記すべての培地には菌の生育に伴う
菌核の形成や厚膜胞子は観察されなかった。
【００１１】分生子柄は、ほとんど平滑でその大きさは
８０〜２００×４〜６ミクロンであり、その先端にペニ
シリを形成する。ペニシリは対称体ないし非対称体を呈
し、メトレは通常２〜４本、その大きさは１５〜２５×
２〜３ミクロンである。フイアライドの形状は細長いペ
ン先型である。分生子の形状は、だ円形を呈し、その大
きさは３〜７×３ミクロンであり、分生子が互いに密着
し、直径２０〜４０ミクロンの粘球となつて、メトレの
先端にかたまりを形成する。
８０〜２００×４〜６ミクロンであり、その先端にペニ
シリを形成する。ペニシリは対称体ないし非対称体を呈
し、メトレは通常２〜４本、その大きさは１５〜２５×
２〜３ミクロンである。フイアライドの形状は細長いペ
ン先型である。分生子の形状は、だ円形を呈し、その大
きさは３〜７×３ミクロンであり、分生子が互いに密着
し、直径２０〜４０ミクロンの粘球となつて、メトレの
先端にかたまりを形成する。
【００１２】上記ＦＯ−１５１３株の培養所見、形態的
特徴等に基づき、既知菌種との比較を試みた結果、本菌
株をグリオクラジウム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ）属に
属する一菌株と同定し、グリオクラジウム エスピー．
ＦＯ−１５１３と命名した。本菌株はグリオクラジウム
エスピー．ＦＯ−１５１３として工業技術院微生物工
業技術研究所に寄託されている。（ＦＥＲＭ Ｐ−１２
２２０号）。
特徴等に基づき、既知菌種との比較を試みた結果、本菌
株をグリオクラジウム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ）属に
属する一菌株と同定し、グリオクラジウム エスピー．
ＦＯ−１５１３と命名した。本菌株はグリオクラジウム
エスピー．ＦＯ−１５１３として工業技術院微生物工
業技術研究所に寄託されている。（ＦＥＲＭ Ｐ−１２
２２０号）。
【００１３】以上、ＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌につい
て説明したが、菌の一般的性状として菌学上の性状はき
わめて変異し易く、一定したものではなく、自然的にあ
るいは通常行われる紫外線照射または変異誘導体、例え
ばＮ−メチル−Ｎ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、
エチルメタンスルホネートなどを用いる人工的変異手段
により変異することは周知の事実であり、このような人
工的変異株は勿論、自然変異株も含め、グリオクラジウ
ム属に属し、ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有
する菌株はすべて本発明に使用することができる。ま
た、細胞融合、遺伝子操作などの細胞工学的に変異させ
た菌株も物質ＦＯ−１５１３物質生産菌として包含され
る。
て説明したが、菌の一般的性状として菌学上の性状はき
わめて変異し易く、一定したものではなく、自然的にあ
るいは通常行われる紫外線照射または変異誘導体、例え
ばＮ−メチル−Ｎ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、
エチルメタンスルホネートなどを用いる人工的変異手段
により変異することは周知の事実であり、このような人
工的変異株は勿論、自然変異株も含め、グリオクラジウ
ム属に属し、ＦＯ−１５１３Ａ物質を生産する能力を有
する菌株はすべて本発明に使用することができる。ま
た、細胞融合、遺伝子操作などの細胞工学的に変異させ
た菌株も物質ＦＯ−１５１３物質生産菌として包含され
る。
【００１４】本発明においては、先ずグリオクラジウム
に属するＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌が培地に培養され
る。本菌の培養においては、通常真菌の培養法が一般に
用いられる。培地としては、微生物が同化し得る炭素
源、資化し得る窒素源、さらには必要に応じて無機酸塩
などを含有させた栄養培地が使用される。同化し得る炭
素源としては、ブドウ糖、ショ糖、糖密、デキストリ
ン、セルロースなどが単独または組み合わせて用いられ
る。
に属するＦＯ−１５１３Ａ物質生産菌が培地に培養され
る。本菌の培養においては、通常真菌の培養法が一般に
用いられる。培地としては、微生物が同化し得る炭素
源、資化し得る窒素源、さらには必要に応じて無機酸塩
などを含有させた栄養培地が使用される。同化し得る炭
素源としては、ブドウ糖、ショ糖、糖密、デキストリ
ン、セルロースなどが単独または組み合わせて用いられ
る。
【００１５】資化し得る窒素源としては、ペプトン、肉
エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・ステ
イープ・リカー、綿実粕、カゼイン、大豆蛋白加水分解
物、アミノ酸、尿素などの有機窒素源、硝酸塩、アンモ
ニウム塩などの無機窒素化合物が単独または組み合わせ
て用いられる。その他、必要に応じてナトリウム塩、カ
リウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、リン酸塩な
どの無機塩、重金属塩類が添加される。さらに、培地に
は、必要に応じて、本菌の生育やＦＯ−１５１３Ａ物質
の生産を促進する微量栄養素、発育促進物質、前駆物質
などを適当に添加してもよい。
エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・ステ
イープ・リカー、綿実粕、カゼイン、大豆蛋白加水分解
物、アミノ酸、尿素などの有機窒素源、硝酸塩、アンモ
ニウム塩などの無機窒素化合物が単独または組み合わせ
て用いられる。その他、必要に応じてナトリウム塩、カ
リウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、リン酸塩な
どの無機塩、重金属塩類が添加される。さらに、培地に
は、必要に応じて、本菌の生育やＦＯ−１５１３Ａ物質
の生産を促進する微量栄養素、発育促進物質、前駆物質
などを適当に添加してもよい。
【００１６】培養は通常振とうまたは通気攪拌培養など
の好気的条件下で行うのがよい。培養のｐＨは中性付近
で培養を行うのが好ましい。培養温度は２０〜３７℃で
行い得るが、通常は２４〜３０℃に保つのがよい。培養
時間は、液体の場合、通常２〜３日間培養を行うと、本
ＦＯ−１５１３Ａ物質が蓄積されるので、培養中の蓄積
量が最大に達した時に、培養を終了すればよい。
の好気的条件下で行うのがよい。培養のｐＨは中性付近
で培養を行うのが好ましい。培養温度は２０〜３７℃で
行い得るが、通常は２４〜３０℃に保つのがよい。培養
時間は、液体の場合、通常２〜３日間培養を行うと、本
ＦＯ−１５１３Ａ物質が蓄積されるので、培養中の蓄積
量が最大に達した時に、培養を終了すればよい。
【００１７】これらの培地組成、培地の液性、培養温
度、通気量などの培養条件は使用する菌株の種類や外部
の条件などに応じて好ましい結果が得られるように適宜
調節、選択されることはいうまでもない。液体培養にお
いて、発泡があるときは、シリコン油、植物油、界面活
性剤などの消泡剤を適宜使用できる。
度、通気量などの培養条件は使用する菌株の種類や外部
の条件などに応じて好ましい結果が得られるように適宜
調節、選択されることはいうまでもない。液体培養にお
いて、発泡があるときは、シリコン油、植物油、界面活
性剤などの消泡剤を適宜使用できる。
【００１８】このようにして得られた培養物に蓄積され
るＦＯ−１５１３Ａ物質は、菌体内および培養濾液中に
含有されるので、培養物を遠心分離して培養濾液と菌体
とに分離し、各々から本ＦＯ−１５１３Ａ物質を採取す
るのが有利である。
るＦＯ−１５１３Ａ物質は、菌体内および培養濾液中に
含有されるので、培養物を遠心分離して培養濾液と菌体
とに分離し、各々から本ＦＯ−１５１３Ａ物質を採取す
るのが有利である。
【００１９】培養濾液からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取
するには、先ず培養濾液を酢酸エチル、酢酸ブチル、ベ
ンゼンなどの非親水性有機溶媒で抽出し、抽出液を減圧
濃縮して粗製のＦＯ−１５１３Ａ物質が得られる。この
粗製物質はさらに脂溶性物質の精製に通常用いられる公
知の方法、例えばシリカゲル、アルミナなどの担体を用
いるカラムクロマトグラフイーによりＦＯ−１５１３Ａ
物質を分離精製することができる。
するには、先ず培養濾液を酢酸エチル、酢酸ブチル、ベ
ンゼンなどの非親水性有機溶媒で抽出し、抽出液を減圧
濃縮して粗製のＦＯ−１５１３Ａ物質が得られる。この
粗製物質はさらに脂溶性物質の精製に通常用いられる公
知の方法、例えばシリカゲル、アルミナなどの担体を用
いるカラムクロマトグラフイーによりＦＯ−１５１３Ａ
物質を分離精製することができる。
【００２０】菌体からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取する
には、菌体を含水アセトン、含水メタノールなどの含水
親水性有機溶媒で抽出し、得られた抽出液を減圧濃縮
し、その濃縮物を酢酸エチル、酢酸ブチル、ベンゼンな
どの非親水性有機溶媒で抽出し、得られた抽出液は、前
記の培養濾液から得た抽出液と合わせて分離精製する
か、あるいは前記と同じ方法によりＦＯ−１５１３Ａ物
質を分離精製することができる。
には、菌体を含水アセトン、含水メタノールなどの含水
親水性有機溶媒で抽出し、得られた抽出液を減圧濃縮
し、その濃縮物を酢酸エチル、酢酸ブチル、ベンゼンな
どの非親水性有機溶媒で抽出し、得られた抽出液は、前
記の培養濾液から得た抽出液と合わせて分離精製する
か、あるいは前記と同じ方法によりＦＯ−１５１３Ａ物
質を分離精製することができる。
【００２１】次に、本発明のＦＯ−１５１３Ａ物質の理
化学的性状について述べる。 （１）分子式；Ｃ45Ｈ82Ｏ5 （高分解能スペクトルでｍ
／ｚ６３０（Ｍ−４Ｈ2Ｏ）+ が観察された） （２）分子量；７０２（ＦＡＢマススペクトルよりｍ／
ｚ７０３（Ｍ＋１）+ が観察された） （３）比旋光度；［α］22 D ＝＋０．４（Ｃ＝１、クロ
ロホルム） （４）紫外線吸収スペクトル（メタノール中）；図１の
通り （５）赤外線吸収スペクトル（四塩化炭素中）；図２の
通り
化学的性状について述べる。 （１）分子式；Ｃ45Ｈ82Ｏ5 （高分解能スペクトルでｍ
／ｚ６３０（Ｍ−４Ｈ2Ｏ）+ が観察された） （２）分子量；７０２（ＦＡＢマススペクトルよりｍ／
ｚ７０３（Ｍ＋１）+ が観察された） （３）比旋光度；［α］22 D ＝＋０．４（Ｃ＝１、クロ
ロホルム） （４）紫外線吸収スペクトル（メタノール中）；図１の
通り （５）赤外線吸収スペクトル（四塩化炭素中）；図２の
通り
【００２２】（６）溶媒に対する溶解性；メタノール、
エタノール、アセトニトリル、酢酸エチル、ベンゼンに
可溶、水に不溶 （７）塩基性、酸性、中性の区別；中性 （８）物質の色、形状；無色油状 （９）プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム
中）；図３の通り。
エタノール、アセトニトリル、酢酸エチル、ベンゼンに
可溶、水に不溶 （７）塩基性、酸性、中性の区別；中性 （８）物質の色、形状；無色油状 （９）プロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム
中）；図３の通り。
【００２３】次に、本発明のＦＯ−１５１３Ａ物質の生
物学的性状について述べる。ラツト由来アシルコエンザ
イムＡコレステロールアシル転位酵素に対する阻害作用
アシルコエンザイムＡコステロールアシル転位酵素活性
に対する影響は、ラツト肝ミクロソーム画分より調整し
た粗酵素を用い３００μＭ〔１−14Ｃ〕Ｏｌｅｏｙｌ−
ＣｏＡ；３mg／mlコレステロールを各々２０μl （０．
０２μＣｉ）；６．６７μl 添加し、３７℃で３０分間
反応させ、総脂質をクロロホルム：メタノール（２：
１）混合液で抽出した。
物学的性状について述べる。ラツト由来アシルコエンザ
イムＡコレステロールアシル転位酵素に対する阻害作用
アシルコエンザイムＡコステロールアシル転位酵素活性
に対する影響は、ラツト肝ミクロソーム画分より調整し
た粗酵素を用い３００μＭ〔１−14Ｃ〕Ｏｌｅｏｙｌ−
ＣｏＡ；３mg／mlコレステロールを各々２０μl （０．
０２μＣｉ）；６．６７μl 添加し、３７℃で３０分間
反応させ、総脂質をクロロホルム：メタノール（２：
１）混合液で抽出した。
【００２４】抽出後、ＴＬＣ（キーゼルゲルＧＦ254 、
展開溶媒として石油エーテル：ジエチルエーテル：酢
酸、９０：１０：１）で各脂質を分離後、コレステロー
ルエステル画分をかきとり、液体シンチレーシヨンカウ
ンターでアシルコエンザイムＡコレステロールアシル転
位酵素活性を測定した。本酵素活性を５０％阻害する濃
度を算定した結果、ＦＯ−１５１３Ａ物質は２５μｇ／
mlであつた。
展開溶媒として石油エーテル：ジエチルエーテル：酢
酸、９０：１０：１）で各脂質を分離後、コレステロー
ルエステル画分をかきとり、液体シンチレーシヨンカウ
ンターでアシルコエンザイムＡコレステロールアシル転
位酵素活性を測定した。本酵素活性を５０％阻害する濃
度を算定した結果、ＦＯ−１５１３Ａ物質は２５μｇ／
mlであつた。
【００２５】
【発明の効果】以上のように、本発明のＦＯ−１５１３
Ａ物質はアシルコエンザイムＡコレステロールアシル転
位酵素に対して著しい阻害活性を示すことから、ヒトの
コレステロール蓄積に起因する疾病の予防および治療に
有用である。
Ａ物質はアシルコエンザイムＡコレステロールアシル転
位酵素に対して著しい阻害活性を示すことから、ヒトの
コレステロール蓄積に起因する疾病の予防および治療に
有用である。
【００２６】次に、実施例を挙げて本発明を具体的に説
明する。
明する。
【実施例】５００ml容三角フラスコにグルコース０．１
％、スターチ２．４％、ペプトン０．３％、肉エキス
０．３％、イーストエキストラクト０．５％、炭酸カル
シウム０．４％を含む培地（ｐＨ７．０の調整）１００
mlを仕込み、綿栓後、蒸気滅菌し、寒天培地上に生育さ
せたグリオグラジウム エスピー．ＦＯ−１５１３（Ｆ
ＥＲＭ Ｐ−１２２２０）を白金耳にて無菌的に接種
し、２７℃で４８時間振とう培養して種培養液を得た。
％、スターチ２．４％、ペプトン０．３％、肉エキス
０．３％、イーストエキストラクト０．５％、炭酸カル
シウム０．４％を含む培地（ｐＨ７．０の調整）１００
mlを仕込み、綿栓後、蒸気滅菌し、寒天培地上に生育さ
せたグリオグラジウム エスピー．ＦＯ−１５１３（Ｆ
ＥＲＭ Ｐ−１２２２０）を白金耳にて無菌的に接種
し、２７℃で４８時間振とう培養して種培養液を得た。
【００２７】一方、５０l ジヤーフアーメンター１基に
グルコース１．０％、可溶性デンプン３．０％、大豆粉
２．０％、ドライイースト０．３％、塩化カリウム０．
３％、炭酸カルシウム０．２％、硫酸マグネシウム０．
０５％、リン酸カリウム０．５％、寒天０．１％（ｐＨ
７．０に調整）に仕込み、蒸気滅菌冷却後、種培養した
種培養液２００mlを無菌的に移植し、攪拌速度２５０ｒ
ｐｍ、通気量１０l ／分の培養条件下で２７℃で７２時
間、通気攪拌した。
グルコース１．０％、可溶性デンプン３．０％、大豆粉
２．０％、ドライイースト０．３％、塩化カリウム０．
３％、炭酸カルシウム０．２％、硫酸マグネシウム０．
０５％、リン酸カリウム０．５％、寒天０．１％（ｐＨ
７．０に調整）に仕込み、蒸気滅菌冷却後、種培養した
種培養液２００mlを無菌的に移植し、攪拌速度２５０ｒ
ｐｍ、通気量１０l ／分の培養条件下で２７℃で７２時
間、通気攪拌した。
【００２８】培養後、培養液３０l を酢酸エチル１８l
で抽出し、抽出液を減圧濃縮して粗製物を得た。この粗
製物をシリカゲル（２５０ｇ、メルク社製、Ａｒｔ．９
３８５）のカラムにチヤージし、クロロホルム−メタノ
ール（９：１）で溶出するカラムクロマトグラフイーを
行った。各フラクシヨンは１００mlづつ分画し、活性成
分を含むフラクシヨンを集め、減圧乾固して粗活性物質
１．５ｇを得た。
で抽出し、抽出液を減圧濃縮して粗製物を得た。この粗
製物をシリカゲル（２５０ｇ、メルク社製、Ａｒｔ．９
３８５）のカラムにチヤージし、クロロホルム−メタノ
ール（９：１）で溶出するカラムクロマトグラフイーを
行った。各フラクシヨンは１００mlづつ分画し、活性成
分を含むフラクシヨンを集め、減圧乾固して粗活性物質
１．５ｇを得た。
【００２９】これを５回に分けて高速液体クロマトグラ
フイーにより分離精製した。装置はトリロータＶ（日本
分光社製）を用い、カラムはＹＭＣ−Ｐａｃｋ Ａ−３
４３（ＯＤＳ系樹脂、山村化学研究所製）を用い、溶媒
系は、８５％のアセトニトリル水を用い、検出はＵＶ２
８０ｎｍ、流速は８ml／分で行った。その結果、ＦＯ−
１５１３Ａ物質２００mgを単離した。
フイーにより分離精製した。装置はトリロータＶ（日本
分光社製）を用い、カラムはＹＭＣ−Ｐａｃｋ Ａ−３
４３（ＯＤＳ系樹脂、山村化学研究所製）を用い、溶媒
系は、８５％のアセトニトリル水を用い、検出はＵＶ２
８０ｎｍ、流速は８ml／分で行った。その結果、ＦＯ−
１５１３Ａ物質２００mgを単離した。
【図１】ＦＯ−１５１３Ａ物質の紫外線吸収スペクトル
である。（メタノール溶液として測定）
である。（メタノール溶液として測定）
【図２】ＦＯ−１５１３Ａ物質の赤外線吸収スペクトル
である。（四塩化炭素溶液として測定）
である。（四塩化炭素溶液として測定）
【図３】ＦＯ−１５１３Ａ物質のプロトン核磁気共鳴ス
ペクトルである。（重クロロホルム溶液）
ペクトルである。（重クロロホルム溶液）
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 1/02 Ｃ１２Ｒ 1:645） (56)参考文献 ＪＦＣＣ ＣＡＴＡＬＯＧＵＥ ＯＦ ＣＵＬＴＵＲＥＳ，1979，Ｔｈｉｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊａｐａｎ Ｓｃｉ ｅｎｔｉｆｉｃ Ｓｏｃｉｅｔｉｅｓ Ｐｒｅｓｓ，Ｐ．199 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07G 17/00 C12P 1/02 C12N 1/14 C12N 9/99 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (3)
- 【請求項１】 次の理化学的性質を有するＦＯ−１５１
３Ａ物質。 （１）分子式；Ｃ45Ｈ82Ｏ5 （高分解能スペクトルでｍ
／ｚ６３０（Ｍ−４Ｈ2Ｏ）+ が観察された） （２）分子量；７０２（ＦＡＢマススペクトルよりｍ／
ｚ７０３（Ｍ＋１）+ が観察された） （３）比旋光度；［α］22 D ＝＋０．４（Ｃ＝１、クロ
ロホルム） （４）紫外線吸収スペクトル（メタノール中）；図１の
通り （５）赤外線吸収スペクトル（四塩化炭素中）；図２の
通り （６）溶媒に対する溶解性；メタノール、エタノール、
アセトニトリル、酢酸エチル、ベンゼンに可溶、水に不
溶 （７）塩基性、酸性、中性の区別；中性 （８）物質の色、形状；無色油状 - 【請求項２】 グリオクラジウム属に属し、ＦＯ−１５
１３Ａ物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養
して培養中にＦＯ−１５１３Ａ物質を蓄積せしめ、該培
養物からＦＯ−１５１３Ａ物質を採取することを特徴と
するＦＯ−１５１３Ａ物質の製造法。 - 【請求項３】 グリオクラジウム属に属し、ＦＯ−１５
１３Ａ物質を生産する能力を有する微生物がグリオクラ
ジウム エスピー．ＦＯ−１５１３（Ｇｌｉｏｃｌａｄ
ｉｕｍ ｓｐ．ＦＯ−１５１３ ＦＥＲＭ Ｐ−１２２
２０）である請求項２記載の製造法。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP03162182A JP3074038B2 (ja) | 1991-06-06 | 1991-06-06 | Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03162182A JP3074038B2 (ja) | 1991-06-06 | 1991-06-06 | Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04360894A JPH04360894A (ja) | 1992-12-14 |
| JP3074038B2 true JP3074038B2 (ja) | 2000-08-07 |
Family
ID=15749575
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03162182A Expired - Fee Related JP3074038B2 (ja) | 1991-06-06 | 1991-06-06 | Ｆｏ−１５１３ａ物質およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3074038B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100186758B1 (ko) * | 1996-08-09 | 1999-04-01 | 영진약품공업 주식회사 | 프라바스타틴(pravastatin)전구체의제조방법 |
| DE69827043D1 (de) | 1998-02-16 | 2004-11-18 | Kitasato Inst | Neue verbindungen kf-1040 und verfahren zu ihrer herstellung |
-
1991
- 1991-06-06 JP JP03162182A patent/JP3074038B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ＪＦＣＣ ＣＡＴＡＬＯＧＵＥ ＯＦ ＣＵＬＴＵＲＥＳ，１９７９，Ｔｈｉｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊａｐａｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｓｏｃｉｅｔｉｅｓ Ｐｒｅｓｓ，Ｐ．１９９ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04360894A (ja) | 1992-12-14 |
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