JPH11137290A - ２’−デオキシアデノシン、２’−デオキシグアノシンの製造法 - Google Patents
２’−デオキシアデノシン、２’−デオキシグアノシンの製造法Info
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- JPH11137290A JPH11137290A JP31389197A JP31389197A JPH11137290A JP H11137290 A JPH11137290 A JP H11137290A JP 31389197 A JP31389197 A JP 31389197A JP 31389197 A JP31389197 A JP 31389197A JP H11137290 A JPH11137290 A JP H11137290A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】抗ウィルス剤等の医薬原料、特に最近話題にな
っているアンチセンス医薬の原料として使用される２’
−デオキシアデノシンおよび２’−デオキシグアノシン
の効率的および工業的に有利な製造方法を提供する。 【解決手段】 （１）デオキシリボース−１−リン酸もしくはその塩
と、アデニン、アデノシンもしくは５’−アデニル酸か
ら微生物の作用により２’−デオキシアデノシンが生成
する方法。 （２）無機リン酸もしくはその塩の存在下で２’−デオ
キウリジンもしくはチミジンと、アデニン、アデノシン
もしくは５’−アデニル酸から微生物の作用により２’
−デオキシアデノシンが生成する方法。 （３）２’−デオキシリボース−１−リン酸もしくはそ
の塩と、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル
酸から微生物の作用により２’−デオキシグアノシンが
生成する方法。 （４）無機リン酸もしくはその塩の存在下で２’−デオ
キウリジンもしくはチミジンと、グアニン、グアノシン
もしくは５’−グアニル酸から微生物の作用により２’
−デオキシグアノシンが生成する方法。
っているアンチセンス医薬の原料として使用される２’
−デオキシアデノシンおよび２’−デオキシグアノシン
の効率的および工業的に有利な製造方法を提供する。 【解決手段】 （１）デオキシリボース−１−リン酸もしくはその塩
と、アデニン、アデノシンもしくは５’−アデニル酸か
ら微生物の作用により２’−デオキシアデノシンが生成
する方法。 （２）無機リン酸もしくはその塩の存在下で２’−デオ
キウリジンもしくはチミジンと、アデニン、アデノシン
もしくは５’−アデニル酸から微生物の作用により２’
−デオキシアデノシンが生成する方法。 （３）２’−デオキシリボース−１−リン酸もしくはそ
の塩と、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル
酸から微生物の作用により２’−デオキシグアノシンが
生成する方法。 （４）無機リン酸もしくはその塩の存在下で２’−デオ
キウリジンもしくはチミジンと、グアニン、グアノシン
もしくは５’−グアニル酸から微生物の作用により２’
−デオキシグアノシンが生成する方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】２’−デオキシアデノシンお
よび２’−デオキシグアノシンは医薬原料、特に最近話
題になっているアンチセンス医薬の原料として大量合成
が望まれている。
よび２’−デオキシグアノシンは医薬原料、特に最近話
題になっているアンチセンス医薬の原料として大量合成
が望まれている。
【０００２】
【従来の技術】２’−デオキシアデノシンおよび２’−
デオキシグアノシンの製造法としては化学合成法の収率
が非常に低いため、工業的製造法はＤＮＡ（デオキシリ
ボ核酸）の加水分解物よりの抽出が中心となっている。
しかしながら、本方法では使用する微生物にわずかなが
ら基質のヌクレオチドを分解する活性が存在し、基質が
一部分解されるため、反応液中に副生物が生成し、さら
に基質の分解により収率が低下する。また、菌体当りの
活性が低いため、高濃度の基質を添加して反応を行えな
い等の欠点があった。しかし、従来の抽出法において
は、ＤＮＡの加水分解物中に目的の２’−デオキシアデ
ノシンおよび２’−デオキシグアノシン以外に２’−デ
オキシシチジン、チミジンが含まれており、抽出工程が
煩雑、コスト高の方法であるため、更に効率の良い方法
の開発が望まれていた。
デオキシグアノシンの製造法としては化学合成法の収率
が非常に低いため、工業的製造法はＤＮＡ（デオキシリ
ボ核酸）の加水分解物よりの抽出が中心となっている。
しかしながら、本方法では使用する微生物にわずかなが
ら基質のヌクレオチドを分解する活性が存在し、基質が
一部分解されるため、反応液中に副生物が生成し、さら
に基質の分解により収率が低下する。また、菌体当りの
活性が低いため、高濃度の基質を添加して反応を行えな
い等の欠点があった。しかし、従来の抽出法において
は、ＤＮＡの加水分解物中に目的の２’−デオキシアデ
ノシンおよび２’−デオキシグアノシン以外に２’−デ
オキシシチジン、チミジンが含まれており、抽出工程が
煩雑、コスト高の方法であるため、更に効率の良い方法
の開発が望まれていた。
【０００３】微生物のヌクレオシドホスホリラーゼを利
用する２’−デオキシヌクレオシドの生化学的生産方法
としては、２’−デオキシプリンヌクレオシドとしては
２’−デオキシリボフラノシルプリン、２’−デオキシ
リボフラノシルチオグアニンの製造法（特開昭５８−６
３３９３）、２’−デオキシピリミジンヌクレオシドと
しては２’−デオキシシチジン（特開平０１−０６０３
９６）およびチミジン（特開平０１−１０４１９０）の
製造法が知られているが、２’−デオキシアデノシン、
２’−デオキシグアノシンの製造法は全く知られていな
かった。
用する２’−デオキシヌクレオシドの生化学的生産方法
としては、２’−デオキシプリンヌクレオシドとしては
２’−デオキシリボフラノシルプリン、２’−デオキシ
リボフラノシルチオグアニンの製造法（特開昭５８−６
３３９３）、２’−デオキシピリミジンヌクレオシドと
しては２’−デオキシシチジン（特開平０１−０６０３
９６）およびチミジン（特開平０１−１０４１９０）の
製造法が知られているが、２’−デオキシアデノシン、
２’−デオキシグアノシンの製造法は全く知られていな
かった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、２’
−デオキシアデノシンおよび２’−デオキシグアノシン
の工業的に安価で効率の良い製造法を提供することであ
る。
−デオキシアデノシンおよび２’−デオキシグアノシン
の工業的に安価で効率の良い製造法を提供することであ
る。
【０００５】
【課題を解決するための手段】そこで本発明者は、効率
の良い２’−デオキシアデノシン、２’−デオキシグア
ノシンの製造法を確立すべく鋭意検討を重ねた結果、
（１）デオキシリボース−１−リン酸もしくはその塩
と、アデニン、アデノシンもしくは５’−アデニル酸か
ら微生物の作用により２’−デオキシアデノシンが生成
すること、（２）無機リン酸もしくはその塩の存在下で
２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、アデニン、
アデノシンもしくは５’−アデニル酸から微生物の作用
により２’−デオキシアデノシンが生成すること、
（３）２’−デオキシリボース−１−リン酸もしくはそ
の塩と、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル
酸から微生物の作用により２’−デオキシグアノシンが
生成すること、（４）無機リン酸もしくはその塩の存在
下で２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、グアニ
ン、グアノシンもしくは５’−グアニル酸から微生物の
作用により２’−デオキシグアノシンが生成することを
見いだし、本発明を完成させるに至った。
の良い２’−デオキシアデノシン、２’−デオキシグア
ノシンの製造法を確立すべく鋭意検討を重ねた結果、
（１）デオキシリボース−１−リン酸もしくはその塩
と、アデニン、アデノシンもしくは５’−アデニル酸か
ら微生物の作用により２’−デオキシアデノシンが生成
すること、（２）無機リン酸もしくはその塩の存在下で
２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、アデニン、
アデノシンもしくは５’−アデニル酸から微生物の作用
により２’−デオキシアデノシンが生成すること、
（３）２’−デオキシリボース−１−リン酸もしくはそ
の塩と、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル
酸から微生物の作用により２’−デオキシグアノシンが
生成すること、（４）無機リン酸もしくはその塩の存在
下で２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、グアニ
ン、グアノシンもしくは５’−グアニル酸から微生物の
作用により２’−デオキシグアノシンが生成することを
見いだし、本発明を完成させるに至った。
【０００６】２’−デオキシリボース−１−リン酸、
２’−デオキシウリジンまたはチミジンと反応させる塩
基および塩基誘導体は、上記アデニン、アデノシン、
５’−アデニル酸、グアニン、グアノシン、５’−グア
ニル酸にかかわらず、酵素反応が進行するものであれば
対応する２’−デオキシヌクレオシドを生成することが
できる。
２’−デオキシウリジンまたはチミジンと反応させる塩
基および塩基誘導体は、上記アデニン、アデノシン、
５’−アデニル酸、グアニン、グアノシン、５’−グア
ニル酸にかかわらず、酵素反応が進行するものであれば
対応する２’−デオキシヌクレオシドを生成することが
できる。
【０００７】即ち本発明は、（１）２’−デオキシリボ
ース−１−リン酸もしくはその塩と、アデニン、アデノ
シンもしくは５’−アデニル酸から２’−デオキシアデ
ノシンを生成する能力を有し、アクロモバクター属、ア
グロバクテリウム属、アシネトバクター属、アルカリゲ
ネス属、アースロバクター属、エアロモナス属、エシェ
リヒア属、エンテロバクター属、エルビニア属、キサン
トモナス属、クレブシエラ属、クルチア属、クルイヘラ
属、コリネバクテリウム属、ザルチナ属、サルモネラ
属、シトロバクター属、シュードモナス属、ストレプト
マイセス属、スポロザルチナ属、スタフィロコッカス
属、セラチア属、セルロモナス属、ノカルディア属、バ
チルス属、ハフニア属、ビブリオ属、フラボバクテリウ
ム属、プラノコッカス属、ブレビバクテリウム属、、プ
ロタミノバクター属、プロテウス属、ヘモフィラス属、
ミクロコッカス属、ミコプラナ属、ミクロバクテリウム
属、リゾビウム属またはロドコッカス属に属する微生物
の培養物、該培養物より分離した微生物菌体もしくは該
微生物菌体の処理物を２’−デオキシリボース−１−リ
ン酸もしくはその塩と、アデニン、アデノシンもしくは
５’−アデニル酸に作用させて２’−デオキシアデノシ
ンを生成させ、これを採取することを特徴とする２’−
デオキシアデノシンの製造法、（２）無機リン酸もしく
はその塩の存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミ
ジンと、アデニン、アデノシンもしくは５’−アデニル
酸から２’−デオキシアデノシンを生成する能力を有
し、アクロモバクター属、アグロバクテリウム属、アシ
ネトバクター属、アルカリゲネス属、アースロバクター
属、エアロモナス属、エシェリヒア属、エンテロバクタ
ー属、エルビニア属、キサントモナス属、クレブシエラ
属、クルチア属、クルイヘラ属、コリネバクテリウム
属、ザルチナ属、サルモネラ属、シトロバクター属、シ
ュードモナス属、ストレプトマイセス属、スポロザルチ
ナ属、スタフィロコッカス属、セラチア属、セルロモナ
ス属、ノカルディア属、バチルス属、ハフニア属、ビブ
リオ属、フラボバクテリウム属、プラノコッカス属、ブ
レビバクテリウム属、、プロタミノバクター属、プロテ
ウス属、ヘモフィラス属、ミクロコッカス属、ミコプラ
ナ属、ミクロバクテリウム属、リゾビウム属またはロド
コッカス属に属する微生物の培養物、該培養物より分離
した微生物菌体もしくは該微生物菌体の処理物を無機リ
ン酸もしくはその塩の存在下で２’−デオキウリジンも
しくはチミジンと、アデニン、アデノシンもしくは５’
−アデニル酸に作用させて２’−デオキシアデノシンを
生成させ、これを採取することを特徴とする２’−デオ
キシアデノシンの製造法。（３）２’−デオキシリボー
ス−１−リン酸もしくはその塩と、グアニン、グアノシ
ンもしくは５’−グアニル酸から２’−デオキシグアノ
シンを生成する能力を有し、アクロモバクター属、アグ
ロバクテリウム属、アシネトバクター属、アルカリゲネ
ス属、アースロバクター属、エアロモナス属、エシェリ
ヒア属、エンテロバクター属、エルビニア属、キサント
モナス属、クレブシエラ属、クルチア属、クルイヘラ
属、コリネバクテリウム属、ザルチナ属、サルモネラ
属、シトロバクター属、シュードモナス属、ストレプト
マイセス属、スポロザルチナ属、スタフィロコッカス
属、セラチア属、セルロモナス属、ノカルディア属、バ
チルス属、ハフニア属、ビブリオ属、フラボバクテリウ
ム属、プラノコッカス属、ブレビバクテリウム属、、プ
ロタミノバクター属、プロテウス属、ヘモフィラス属、
ミクロコッカス属、ミコプラナ属、ミクロバクテリウム
属、リゾビウム属またはロドコッカス属に属する微生物
の培養物、該培養物より分離した微生物菌体もしくは該
微生物菌体の処理物を２’−デオキシリボース−１−リ
ン酸もしくはその塩と、グアニン、グアノシンもしくは
５’−グアニル酸に作用させて２’−デオキシグアノシ
ンを生成させ、これを採取することを特徴とする２’−
デオキシグアノシンの製造法、（４）無機リン酸もしく
はその塩の存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミ
ジンと、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル
酸から２’−デオキシグアノシンを生成する能力を有
し、アクロモバクター属、アグロバクテリウム属、アシ
ネトバクター属、アルカリゲネス属、アースロバクター
属、エアロモナス属、エシェリヒア属、エンテロバクタ
ー属、エルビニア属、キサントモナス属、クレブシエラ
属、クルチア属、クルイヘラ属、コリネバクテリウム
属、ザルチナ属、サルモネラ属、シトロバクター属、シ
ュードモナス属、ストレプトマイセス属、スポロザルチ
ナ属、スタフィロコッカス属、セラチア属、セルロモナ
ス属、ノカルディア属、バチルス属、ハフニア属、ビブ
リオ属、フラボバクテリウム属、プラノコッカス属、ブ
レビバクテリウム属、、プロタミノバクター属、プロテ
ウス属、ヘモフィラス属、ミクロコッカス属、ミコプラ
ナ属、ミクロバクテリウム属、リゾビウム属またはロド
コッカス属に属する微生物の培養物、該培養物より分離
した微生物菌体もしくは該微生物菌体の処理物を無機リ
ン酸もしくはその塩の存在下で２’−デオキウリジンも
しくはチミジンと、グアニン、グアノシンもしくは５’
−グアニル酸に作用させて２’−デオキシグアノシンを
生成させ、これを採取することを特徴とする２’−デオ
キシグアノシンの製造法に関するものである。
ース−１−リン酸もしくはその塩と、アデニン、アデノ
シンもしくは５’−アデニル酸から２’−デオキシアデ
ノシンを生成する能力を有し、アクロモバクター属、ア
グロバクテリウム属、アシネトバクター属、アルカリゲ
ネス属、アースロバクター属、エアロモナス属、エシェ
リヒア属、エンテロバクター属、エルビニア属、キサン
トモナス属、クレブシエラ属、クルチア属、クルイヘラ
属、コリネバクテリウム属、ザルチナ属、サルモネラ
属、シトロバクター属、シュードモナス属、ストレプト
マイセス属、スポロザルチナ属、スタフィロコッカス
属、セラチア属、セルロモナス属、ノカルディア属、バ
チルス属、ハフニア属、ビブリオ属、フラボバクテリウ
ム属、プラノコッカス属、ブレビバクテリウム属、、プ
ロタミノバクター属、プロテウス属、ヘモフィラス属、
ミクロコッカス属、ミコプラナ属、ミクロバクテリウム
属、リゾビウム属またはロドコッカス属に属する微生物
の培養物、該培養物より分離した微生物菌体もしくは該
微生物菌体の処理物を２’−デオキシリボース−１−リ
ン酸もしくはその塩と、アデニン、アデノシンもしくは
５’−アデニル酸に作用させて２’−デオキシアデノシ
ンを生成させ、これを採取することを特徴とする２’−
デオキシアデノシンの製造法、（２）無機リン酸もしく
はその塩の存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミ
ジンと、アデニン、アデノシンもしくは５’−アデニル
酸から２’−デオキシアデノシンを生成する能力を有
し、アクロモバクター属、アグロバクテリウム属、アシ
ネトバクター属、アルカリゲネス属、アースロバクター
属、エアロモナス属、エシェリヒア属、エンテロバクタ
ー属、エルビニア属、キサントモナス属、クレブシエラ
属、クルチア属、クルイヘラ属、コリネバクテリウム
属、ザルチナ属、サルモネラ属、シトロバクター属、シ
ュードモナス属、ストレプトマイセス属、スポロザルチ
ナ属、スタフィロコッカス属、セラチア属、セルロモナ
ス属、ノカルディア属、バチルス属、ハフニア属、ビブ
リオ属、フラボバクテリウム属、プラノコッカス属、ブ
レビバクテリウム属、、プロタミノバクター属、プロテ
ウス属、ヘモフィラス属、ミクロコッカス属、ミコプラ
ナ属、ミクロバクテリウム属、リゾビウム属またはロド
コッカス属に属する微生物の培養物、該培養物より分離
した微生物菌体もしくは該微生物菌体の処理物を無機リ
ン酸もしくはその塩の存在下で２’−デオキウリジンも
しくはチミジンと、アデニン、アデノシンもしくは５’
−アデニル酸に作用させて２’−デオキシアデノシンを
生成させ、これを採取することを特徴とする２’−デオ
キシアデノシンの製造法。（３）２’−デオキシリボー
ス−１−リン酸もしくはその塩と、グアニン、グアノシ
ンもしくは５’−グアニル酸から２’−デオキシグアノ
シンを生成する能力を有し、アクロモバクター属、アグ
ロバクテリウム属、アシネトバクター属、アルカリゲネ
ス属、アースロバクター属、エアロモナス属、エシェリ
ヒア属、エンテロバクター属、エルビニア属、キサント
モナス属、クレブシエラ属、クルチア属、クルイヘラ
属、コリネバクテリウム属、ザルチナ属、サルモネラ
属、シトロバクター属、シュードモナス属、ストレプト
マイセス属、スポロザルチナ属、スタフィロコッカス
属、セラチア属、セルロモナス属、ノカルディア属、バ
チルス属、ハフニア属、ビブリオ属、フラボバクテリウ
ム属、プラノコッカス属、ブレビバクテリウム属、、プ
ロタミノバクター属、プロテウス属、ヘモフィラス属、
ミクロコッカス属、ミコプラナ属、ミクロバクテリウム
属、リゾビウム属またはロドコッカス属に属する微生物
の培養物、該培養物より分離した微生物菌体もしくは該
微生物菌体の処理物を２’−デオキシリボース−１−リ
ン酸もしくはその塩と、グアニン、グアノシンもしくは
５’−グアニル酸に作用させて２’−デオキシグアノシ
ンを生成させ、これを採取することを特徴とする２’−
デオキシグアノシンの製造法、（４）無機リン酸もしく
はその塩の存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミ
ジンと、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル
酸から２’−デオキシグアノシンを生成する能力を有
し、アクロモバクター属、アグロバクテリウム属、アシ
ネトバクター属、アルカリゲネス属、アースロバクター
属、エアロモナス属、エシェリヒア属、エンテロバクタ
ー属、エルビニア属、キサントモナス属、クレブシエラ
属、クルチア属、クルイヘラ属、コリネバクテリウム
属、ザルチナ属、サルモネラ属、シトロバクター属、シ
ュードモナス属、ストレプトマイセス属、スポロザルチ
ナ属、スタフィロコッカス属、セラチア属、セルロモナ
ス属、ノカルディア属、バチルス属、ハフニア属、ビブ
リオ属、フラボバクテリウム属、プラノコッカス属、ブ
レビバクテリウム属、、プロタミノバクター属、プロテ
ウス属、ヘモフィラス属、ミクロコッカス属、ミコプラ
ナ属、ミクロバクテリウム属、リゾビウム属またはロド
コッカス属に属する微生物の培養物、該培養物より分離
した微生物菌体もしくは該微生物菌体の処理物を無機リ
ン酸もしくはその塩の存在下で２’−デオキウリジンも
しくはチミジンと、グアニン、グアノシンもしくは５’
−グアニル酸に作用させて２’−デオキシグアノシンを
生成させ、これを採取することを特徴とする２’−デオ
キシグアノシンの製造法に関するものである。
【０００８】
【発明の実施の形態】本発明において使用される微生物
は、アクロモバクタ−属、アグロバクテリウム属、アシ
ネトバクター属、アルカリゲネス属、アースロバクター
属、エアロモナス属、エシェリヒア属、エンテロバクタ
ー属、エルビニア属、キサントモナス属、クレブシエラ
属、クルチア属、クルイヘラ属、コリネバクテリウム
属、ザルチナ属、サルモネラ属、シトロバクター属、シ
ュードモナス属、ストレプトマイセス属、スポロザルチ
ナ属、スタフィロコッカス属、セラチア属、セルロモナ
ス属、ノカルディア属、バクテリウム属、バチルス属、
ハフニア属、ビブリオ属、フラボバクテリウム属、プラ
ノコッカス属、ブレビバクテリウム属、、プロタミノバ
クター属、プロテウス属、ヘモフィラス属、ミクロコッ
カス属、ミコプラナ属、ミクロバクテリウム属、リゾビ
ウム属またはロドコッカス属に属し、２’−デオキシリ
ボース−１−リン酸もしくはその塩と、アデニン、アデ
ノシンもしくは５’−アデニル酸から２’−デオキシア
デノシンを生成する能力、無機リン酸もしくはその塩の
存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、ア
デニン、アデノシンもしくは５’−アデニル酸から２’
−デオキシアデノシンを生成する能力、２’−デオキシ
リボース−１−リン酸もしくはその塩と、グアニン、グ
アノシンもしくは５’−グアニル酸から２’−デオキシ
グアノシンを生成する能力または無機リン酸もしくはそ
の塩の存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミジン
と、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル酸か
ら２’−デオキシグアノシンを生成する能力を有するも
のであればいずれのもでも良いが、具体的には下記に示
す微生物を例示することができる。
は、アクロモバクタ−属、アグロバクテリウム属、アシ
ネトバクター属、アルカリゲネス属、アースロバクター
属、エアロモナス属、エシェリヒア属、エンテロバクタ
ー属、エルビニア属、キサントモナス属、クレブシエラ
属、クルチア属、クルイヘラ属、コリネバクテリウム
属、ザルチナ属、サルモネラ属、シトロバクター属、シ
ュードモナス属、ストレプトマイセス属、スポロザルチ
ナ属、スタフィロコッカス属、セラチア属、セルロモナ
ス属、ノカルディア属、バクテリウム属、バチルス属、
ハフニア属、ビブリオ属、フラボバクテリウム属、プラ
ノコッカス属、ブレビバクテリウム属、、プロタミノバ
クター属、プロテウス属、ヘモフィラス属、ミクロコッ
カス属、ミコプラナ属、ミクロバクテリウム属、リゾビ
ウム属またはロドコッカス属に属し、２’−デオキシリ
ボース−１−リン酸もしくはその塩と、アデニン、アデ
ノシンもしくは５’−アデニル酸から２’−デオキシア
デノシンを生成する能力、無機リン酸もしくはその塩の
存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、ア
デニン、アデノシンもしくは５’−アデニル酸から２’
−デオキシアデノシンを生成する能力、２’−デオキシ
リボース−１−リン酸もしくはその塩と、グアニン、グ
アノシンもしくは５’−グアニル酸から２’−デオキシ
グアノシンを生成する能力または無機リン酸もしくはそ
の塩の存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミジン
と、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル酸か
ら２’−デオキシグアノシンを生成する能力を有するも
のであればいずれのもでも良いが、具体的には下記に示
す微生物を例示することができる。
【０００９】アクロモハ゛クター ヒ゛スコサス (Achromobacter viscos
us) ATCC 12448アク゛ロハ゛クテリウム ツメファシエンス (Agrobacterium tumefaciens)
ATCC 4720アシネトハ゛クター ルオフィー (Acinetobacter johnsonii) ATCC 903
6アルカリケ゛ネス フェカリス (Alcaligenes faecalis subsp. faeca
lis) ATCC 8750アースロハ゛クター オキシタ゛ンス (Arthrobacter oxydans) ATCC 1435
8エアロモナス サルモニシタ゛ (Aeromonas salmonicida subsp. salmo
nicida) ATCC 14174エシェリヒア コリ (Escherichia coli) ATCC 10798エンテロハ゛クター クロアカエ (Enterobacter cloacae) ATCC 7256エルヒ゛ニア ヘルヒ゛コラ (Erwinia herbicola) ATCC 1453キサントモナス シトリ (Xanthomonas citri) AJ 2785(FERM P-339
6)クレフ゛シエラ ニューモニアエ (Klebsiella pneumoniae) IFO 3321クルチア ソ゛フィー (Kurthia zopfii) ATCC 6900クルイヘラ シトロフィラ (Kluyvera citrophila) AJ 2626(FERM P-
8193)コリネハ゛クテリウム アセトアシト゛フィラム (Corynebacterium acetoacido
philum) ATCC 21407サ゛ルチナ ルテア (Sartina lutea) AJ 1218（FERM P-7400）サルモネラ チフミリウム (Salmonella typhimurium) AJ 2636(FERM
P-3753)シトロハ゛クター フロインテ゛ィ (Citrobacter freundi) ATCC 8090シュート゛モナス テ゛ィミニュータ (Pseudomonas diminuta) ATCC 1156
8ストレフ゜トマイセス タナシエンス (Streptomyces tanashiens) ATCC
15238スホ゜ロサ゛ルチナ ウレアエ (Sporosarcina ureae) IFO 12698スタフィロコッカス エヒ゜テ゛ルミテ゛ィス (Staphyrococcus epidermidis)
ATCC 155セラチア マルセッセンス (Serratia marcescens) ATCC 14226セルロモナス フラヒ゛ケ゛ラ (Cellulomonas flavigera) ATCC 486ノカルテ゛ィア アステロイテ゛ス (Nocardia asteroides) ATCC 19247ハ゛チルス ス゛フ゛チリス (Bacillus subtilis) ATCC 6633ハフニア アルヘ゛イ (Hafnia alvei) ATCC 9760ヒ゛フ゛リオ メチュニコヒ゛ (Vibrio metschnikovii) ATCC 7708フラホ゛ハ゛クテリウム フ゛レヘ゛ (Flavobacterium breve) ATCC 1423
4フ゜ラノコッカス ユーシナタス (Planococcus eucinatus) AJ 1656(FE
RM P-9133)フ゛レヒ゛ハ゛クテリウム フ゜シルム (Brevibacterium pusillum) ATCC
19096フ゜ロタミノハ゛クター アルホ゛フラフ゛ス (Protaminobacter alboflavus)
ATCC 8458フ゜ロテウス レッテケ゛リ (Proteus rettegeri) AJ 2770(FERM BP-
941)ヘモフィラス インフルエンサ゛エ (Haemophilus influenzae) ATCC 913
4ミクロコッカス ルテウス (Micrococcus luteus) ATCC 4698ミコフ゜ラナ テ゛ィモルファ (Mycoplana dimorpha) ATCC 4279ミクロハ゛クテリウム ラクチクム (Microbacterium lacticum) ATCC 81
80リソ゛ヒ゛ウム メィロッティ (Rhizobium melilotti) AJ 2823(FERM
P-8197)ロト゛コッカス ロト゛クラウス (Rhodococcus rhodochraus) ATCC 191
49
us) ATCC 12448アク゛ロハ゛クテリウム ツメファシエンス (Agrobacterium tumefaciens)
ATCC 4720アシネトハ゛クター ルオフィー (Acinetobacter johnsonii) ATCC 903
6アルカリケ゛ネス フェカリス (Alcaligenes faecalis subsp. faeca
lis) ATCC 8750アースロハ゛クター オキシタ゛ンス (Arthrobacter oxydans) ATCC 1435
8エアロモナス サルモニシタ゛ (Aeromonas salmonicida subsp. salmo
nicida) ATCC 14174エシェリヒア コリ (Escherichia coli) ATCC 10798エンテロハ゛クター クロアカエ (Enterobacter cloacae) ATCC 7256エルヒ゛ニア ヘルヒ゛コラ (Erwinia herbicola) ATCC 1453キサントモナス シトリ (Xanthomonas citri) AJ 2785(FERM P-339
6)クレフ゛シエラ ニューモニアエ (Klebsiella pneumoniae) IFO 3321クルチア ソ゛フィー (Kurthia zopfii) ATCC 6900クルイヘラ シトロフィラ (Kluyvera citrophila) AJ 2626(FERM P-
8193)コリネハ゛クテリウム アセトアシト゛フィラム (Corynebacterium acetoacido
philum) ATCC 21407サ゛ルチナ ルテア (Sartina lutea) AJ 1218（FERM P-7400）サルモネラ チフミリウム (Salmonella typhimurium) AJ 2636(FERM
P-3753)シトロハ゛クター フロインテ゛ィ (Citrobacter freundi) ATCC 8090シュート゛モナス テ゛ィミニュータ (Pseudomonas diminuta) ATCC 1156
8ストレフ゜トマイセス タナシエンス (Streptomyces tanashiens) ATCC
15238スホ゜ロサ゛ルチナ ウレアエ (Sporosarcina ureae) IFO 12698スタフィロコッカス エヒ゜テ゛ルミテ゛ィス (Staphyrococcus epidermidis)
ATCC 155セラチア マルセッセンス (Serratia marcescens) ATCC 14226セルロモナス フラヒ゛ケ゛ラ (Cellulomonas flavigera) ATCC 486ノカルテ゛ィア アステロイテ゛ス (Nocardia asteroides) ATCC 19247ハ゛チルス ス゛フ゛チリス (Bacillus subtilis) ATCC 6633ハフニア アルヘ゛イ (Hafnia alvei) ATCC 9760ヒ゛フ゛リオ メチュニコヒ゛ (Vibrio metschnikovii) ATCC 7708フラホ゛ハ゛クテリウム フ゛レヘ゛ (Flavobacterium breve) ATCC 1423
4フ゜ラノコッカス ユーシナタス (Planococcus eucinatus) AJ 1656(FE
RM P-9133)フ゛レヒ゛ハ゛クテリウム フ゜シルム (Brevibacterium pusillum) ATCC
19096フ゜ロタミノハ゛クター アルホ゛フラフ゛ス (Protaminobacter alboflavus)
ATCC 8458フ゜ロテウス レッテケ゛リ (Proteus rettegeri) AJ 2770(FERM BP-
941)ヘモフィラス インフルエンサ゛エ (Haemophilus influenzae) ATCC 913
4ミクロコッカス ルテウス (Micrococcus luteus) ATCC 4698ミコフ゜ラナ テ゛ィモルファ (Mycoplana dimorpha) ATCC 4279ミクロハ゛クテリウム ラクチクム (Microbacterium lacticum) ATCC 81
80リソ゛ヒ゛ウム メィロッティ (Rhizobium melilotti) AJ 2823(FERM
P-8197)ロト゛コッカス ロト゛クラウス (Rhodococcus rhodochraus) ATCC 191
49
【００１０】上記菌株の内、キサントモナス シトリ (Xanthomonas
citri) AJ 2785(FERM P-3396)は、国際寄託当局：通商
産業省工業技術院微生物工業技術研究所（現、通商産業
省工業技術院生命工学工業技術研究所）に昭和５１年１
月２７日に寄託された受託番号FERM P-3396の菌株であ
り、クルイヘラ シトロフィラ (Kluyvera citrophila) AJ 2626(FER
M P-8193)は、同寄託当局に昭和６０年４月２３日に寄
託された受託番号FERM P-8193の菌株であり、サ゛ルチナ ルテア
(Sartina lutea) AJ 1218（FERM P-7400）は、同寄託
当局に昭和５９年１月２０日に寄託された受託番号FERM
P-7400の菌株であり、サルモネラ チフミリウム (Salmonella typh
imurium) AJ 2636(FERM P-3753)は、同寄託当局に昭和
５１年１０月６日に寄託された受託番号FERM P-3753の
菌株であり、フ゜ラノコッカス ユーシナタス (Planococcus eucinatu
s) AJ 1656(FERM P-9133)は、同寄託当局に昭和６２年
１月１９日に寄託された受託番号FERM P-9133の菌株で
あり、フ゜ロテウス レッテケ゛リ (Proteus rettegeri) AJ 2770(FE
RM BP-941)は、同寄託当局に昭和６０年４月２５日に寄
託され、昭和６０年１１月２８日にブダペスト条約に基
づく国際寄託に移管された受託番号FERM BP-941の菌株
であり、リソ゛ヒ゛ウム メィロッティ(Rhizobium melilotti) AJ 282
3(FERM P-8197)は、同寄託当局に昭和６０年４月２５日
に寄託された受託番号FERM P-8197の菌株である。
citri) AJ 2785(FERM P-3396)は、国際寄託当局：通商
産業省工業技術院微生物工業技術研究所（現、通商産業
省工業技術院生命工学工業技術研究所）に昭和５１年１
月２７日に寄託された受託番号FERM P-3396の菌株であ
り、クルイヘラ シトロフィラ (Kluyvera citrophila) AJ 2626(FER
M P-8193)は、同寄託当局に昭和６０年４月２３日に寄
託された受託番号FERM P-8193の菌株であり、サ゛ルチナ ルテア
(Sartina lutea) AJ 1218（FERM P-7400）は、同寄託
当局に昭和５９年１月２０日に寄託された受託番号FERM
P-7400の菌株であり、サルモネラ チフミリウム (Salmonella typh
imurium) AJ 2636(FERM P-3753)は、同寄託当局に昭和
５１年１０月６日に寄託された受託番号FERM P-3753の
菌株であり、フ゜ラノコッカス ユーシナタス (Planococcus eucinatu
s) AJ 1656(FERM P-9133)は、同寄託当局に昭和６２年
１月１９日に寄託された受託番号FERM P-9133の菌株で
あり、フ゜ロテウス レッテケ゛リ (Proteus rettegeri) AJ 2770(FE
RM BP-941)は、同寄託当局に昭和６０年４月２５日に寄
託され、昭和６０年１１月２８日にブダペスト条約に基
づく国際寄託に移管された受託番号FERM BP-941の菌株
であり、リソ゛ヒ゛ウム メィロッティ(Rhizobium melilotti) AJ 282
3(FERM P-8197)は、同寄託当局に昭和６０年４月２５日
に寄託された受託番号FERM P-8197の菌株である。
【００１１】これらの微生物を用いて２’−デオキシア
デノシンもしくは２’−デオキシグアノシンせしめる方
法は、微生物の培養中に基質を添加する培養法を用いて
も良いし、また培養した菌体あるいはこの処理物を基質
に作用させる静止菌体法を用いても良い。培養法を用い
る場合には、炭素源、窒素源、リン源、Ｓ源、無機イオ
ン等、更に必要ならばビタミン、有機窒素源を含有する
通常の培地を用いれば良い。炭素源としては、グルコ−
ス等の炭水化物、グリセロ−ル等のアルコ−ル類、酢酸
等の有機酸、窒素源としては、アンモニアガス、アンモ
ニア水、アンモニウム塩、硝酸およびその塩等、リン源
としてはリン酸１カリウム等の無機リン酸およびその塩
等、Ｓ源としては硫酸マグネシウム等、無機イオンとし
ては、マグネシウムイオン、カリウムイオン、鉄イオ
ン、マンガンイオン、その他が必要に応じ適宜使用され
る。有機栄養源としては、ビタミン、アミノ酸等及びこ
れらを含有する酵母エキス、ペプトン、肉エキス、コ−
ンスティ−プリカ−、カゼイン分解物その他が適宜用い
られる。培養条件にも格別の制限はなく、例えば、好気
的条件下pH５〜８及び温度25〜40℃の範囲内でpH及び温
度を適当に制限しつつ12〜72時間程度培養を行なえばよ
い。
デノシンもしくは２’−デオキシグアノシンせしめる方
法は、微生物の培養中に基質を添加する培養法を用いて
も良いし、また培養した菌体あるいはこの処理物を基質
に作用させる静止菌体法を用いても良い。培養法を用い
る場合には、炭素源、窒素源、リン源、Ｓ源、無機イオ
ン等、更に必要ならばビタミン、有機窒素源を含有する
通常の培地を用いれば良い。炭素源としては、グルコ−
ス等の炭水化物、グリセロ−ル等のアルコ−ル類、酢酸
等の有機酸、窒素源としては、アンモニアガス、アンモ
ニア水、アンモニウム塩、硝酸およびその塩等、リン源
としてはリン酸１カリウム等の無機リン酸およびその塩
等、Ｓ源としては硫酸マグネシウム等、無機イオンとし
ては、マグネシウムイオン、カリウムイオン、鉄イオ
ン、マンガンイオン、その他が必要に応じ適宜使用され
る。有機栄養源としては、ビタミン、アミノ酸等及びこ
れらを含有する酵母エキス、ペプトン、肉エキス、コ−
ンスティ−プリカ−、カゼイン分解物その他が適宜用い
られる。培養条件にも格別の制限はなく、例えば、好気
的条件下pH５〜８及び温度25〜40℃の範囲内でpH及び温
度を適当に制限しつつ12〜72時間程度培養を行なえばよ
い。
【００１２】具体的には、（１）２’−デオキシリボー
ス−１−リン酸から２’−デオキシアデノシンを生産す
る場合には、上記基本培地に２’−デオキシリボース−
１−リン酸と、アデニンもしくははアデノシンもしくは
５’−アデニル酸を適宜添加し、（２）２’−デオキシ
リボース−１−リン酸から２’−デオキシグアノシン
２’−デオキシグアノシンを生産する場合には、上記基
本培地に２’−デオキシリボ−ス−１−リン酸と、グア
ニンもしくはグアノシンもしくは５’−グアニル酸を適
宜添加し、（３）２’−デオキウリジンもしくはチミジ
ンから２’−デオキシアデノシンを生産する場合には、
上記培地に２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、
アデニンもしくはアデノシンもしくは５’−アデニル酸
を適宜添加し、または（４）２’−デオキウリジンもし
くはチミジンから２’−デオキシグアノシンを生産する
場合には、上記培地に２’−デオキウリジンもしくはチ
ミジンと、グアニンもしくはグアノシンもしくは５’−
グアニル酸を適宜添加して培養を行えば良い。上記基質
の添加は培養初期でも培養途中でも構わない。
ス−１−リン酸から２’−デオキシアデノシンを生産す
る場合には、上記基本培地に２’−デオキシリボース−
１−リン酸と、アデニンもしくははアデノシンもしくは
５’−アデニル酸を適宜添加し、（２）２’−デオキシ
リボース−１−リン酸から２’−デオキシグアノシン
２’−デオキシグアノシンを生産する場合には、上記基
本培地に２’−デオキシリボ−ス−１−リン酸と、グア
ニンもしくはグアノシンもしくは５’−グアニル酸を適
宜添加し、（３）２’−デオキウリジンもしくはチミジ
ンから２’−デオキシアデノシンを生産する場合には、
上記培地に２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、
アデニンもしくはアデノシンもしくは５’−アデニル酸
を適宜添加し、または（４）２’−デオキウリジンもし
くはチミジンから２’−デオキシグアノシンを生産する
場合には、上記培地に２’−デオキウリジンもしくはチ
ミジンと、グアニンもしくはグアノシンもしくは５’−
グアニル酸を適宜添加して培養を行えば良い。上記基質
の添加は培養初期でも培養途中でも構わない。
【００１３】静止菌体法を用いる場合の酵素源として
は、上記基本培地で培養した、上記の方法で得られた培
養液そのまま、あるいは洗浄菌体が使用できる他、菌体
処理物も使用できる。菌体処理物としては、アセトン乾
燥菌体、菌体摩砕物、菌体の超音波あるいはダイノミル
あるいはフレンチプレス等処理物、界面活性剤またはト
ルエン等に接触せしめた菌体、リゾチ−ム、プロテアー
ゼ等の酵素処理した菌体、菌体より抽出した後、透析処
理等で分離したタンパク画分、本反応の酵素活性を有す
る精製酵素、更に上記菌体または処理物の固定化物等何
れもが使用できる。
は、上記基本培地で培養した、上記の方法で得られた培
養液そのまま、あるいは洗浄菌体が使用できる他、菌体
処理物も使用できる。菌体処理物としては、アセトン乾
燥菌体、菌体摩砕物、菌体の超音波あるいはダイノミル
あるいはフレンチプレス等処理物、界面活性剤またはト
ルエン等に接触せしめた菌体、リゾチ−ム、プロテアー
ゼ等の酵素処理した菌体、菌体より抽出した後、透析処
理等で分離したタンパク画分、本反応の酵素活性を有す
る精製酵素、更に上記菌体または処理物の固定化物等何
れもが使用できる。
【００１４】具体的には、（１）２’−デオキシリボー
ス−１−リン酸から２’−デオキシアデノシンを生産す
る場合には、２’−デオキシリボース−１−リン酸と、
アデニンもしくははアデノシン、５’−アデニル酸を含
む水溶液に前記微生物菌体またはその処理物、（２）
２’−デオキシリボ−ス−１−リン酸から２’−デオキ
シグアノシン２’−デオキシグアノシンを生産する場合
には、２’−デオキシリボース−１−リン酸と、グアニ
ン、グアノシンもしくは５’−グアニル酸を含む水溶液
に前記微生物菌体またはその処理物、（３）２’−デオ
キウリジンもしくはチミジンから２’−デオキシアデノ
シンを生産する場合には、２’−デオキウリジンもしく
はチミジンと、アデニン、アデノシンもしくは５’−ア
デニル酸を含む水溶液に前記微生物菌体またはその処理
物、または（４）２’−デオキウリジンもしくはチミジ
ンから２’−デオキシグアノシンを生産する場合には、
２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、グアニン、
グアノシンもしくは５’−グアニル酸をを含む水溶液に
前記微生物菌体またはその処理物を添加し適宜添加して
反応を行えば良い。
ス−１−リン酸から２’−デオキシアデノシンを生産す
る場合には、２’−デオキシリボース−１−リン酸と、
アデニンもしくははアデノシン、５’−アデニル酸を含
む水溶液に前記微生物菌体またはその処理物、（２）
２’−デオキシリボ−ス−１−リン酸から２’−デオキ
シグアノシン２’−デオキシグアノシンを生産する場合
には、２’−デオキシリボース−１−リン酸と、グアニ
ン、グアノシンもしくは５’−グアニル酸を含む水溶液
に前記微生物菌体またはその処理物、（３）２’−デオ
キウリジンもしくはチミジンから２’−デオキシアデノ
シンを生産する場合には、２’−デオキウリジンもしく
はチミジンと、アデニン、アデノシンもしくは５’−ア
デニル酸を含む水溶液に前記微生物菌体またはその処理
物、または（４）２’−デオキウリジンもしくはチミジ
ンから２’−デオキシグアノシンを生産する場合には、
２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、グアニン、
グアノシンもしくは５’−グアニル酸をを含む水溶液に
前記微生物菌体またはその処理物を添加し適宜添加して
反応を行えば良い。
【００１５】反応は通常、温度２０〜８０℃、望ましく
は４０〜７０℃で、ｐＨ３〜１１望ましくはｐＨ４〜１
０が好結果を与える。反応には静置あるいは撹はんのい
ずれの方法も採用し得る。反応時間は使用する酵素の活
性、基質濃度などの条件によって異なるが、１０分〜１
０日間保持反応させれば良い。このようにして生成した
２’−デオキシヌクレオシドを反応終了混合物より採取
分離するには、合成吸着樹脂を用いる方法や、その他通
常の採取分離方法が採用できる。また２’−デオキシグ
アノシン、２’−デオキシアデノシンの定量は高速液体
クロマトグラフィーを用いる方法で行えば良い。以下、
実施例にて本発明を詳細に説明する。
は４０〜７０℃で、ｐＨ３〜１１望ましくはｐＨ４〜１
０が好結果を与える。反応には静置あるいは撹はんのい
ずれの方法も採用し得る。反応時間は使用する酵素の活
性、基質濃度などの条件によって異なるが、１０分〜１
０日間保持反応させれば良い。このようにして生成した
２’−デオキシヌクレオシドを反応終了混合物より採取
分離するには、合成吸着樹脂を用いる方法や、その他通
常の採取分離方法が採用できる。また２’−デオキシグ
アノシン、２’−デオキシアデノシンの定量は高速液体
クロマトグラフィーを用いる方法で行えば良い。以下、
実施例にて本発明を詳細に説明する。
【００１６】
【実施例】（実施例 １）酵母エキス 5 g/l、肉エキス
10 g/l、ペプトン １0 g/l、NaCl 5 g/l を含有する栄
養培地（pH 7.0） 50 ml を 坂口フラスコ（500 ml)に
入れ、120 ℃にて20 分間加熱殺菌した。これに、ブイ
ヨン寒天培地で 30℃, 16 時間培養した第１表に示す微
生物をそれぞれ１白金耳づつ接種し、30℃にて 18 時間
振盪培養した。得られた培養液から菌体を遠心分離によ
り分離した後、50 mM トリスバッファー(pH 7.2)で洗浄
し、更に遠心分離することにより洗浄菌体を調製した。
上記洗浄菌体を 100 mM の２’−デオキシリボース−１
−リン酸と 100 mM のアデニン、もしくは 100 mM のグ
アノシンを含む50 mM のトリスバッファー(pH7.2) 10 m
l に 上記洗浄菌体を 50 g/l になるように添加し、60
℃にて 2 時間反応させた。反応液中に生成した２’−
デオキシアデノシンあるいは２’−デオキシグアノシン
の濃度を高速液体クロマトグラフィーを用いて測定し、
その結果を表１に示した。
10 g/l、ペプトン １0 g/l、NaCl 5 g/l を含有する栄
養培地（pH 7.0） 50 ml を 坂口フラスコ（500 ml)に
入れ、120 ℃にて20 分間加熱殺菌した。これに、ブイ
ヨン寒天培地で 30℃, 16 時間培養した第１表に示す微
生物をそれぞれ１白金耳づつ接種し、30℃にて 18 時間
振盪培養した。得られた培養液から菌体を遠心分離によ
り分離した後、50 mM トリスバッファー(pH 7.2)で洗浄
し、更に遠心分離することにより洗浄菌体を調製した。
上記洗浄菌体を 100 mM の２’−デオキシリボース−１
−リン酸と 100 mM のアデニン、もしくは 100 mM のグ
アノシンを含む50 mM のトリスバッファー(pH7.2) 10 m
l に 上記洗浄菌体を 50 g/l になるように添加し、60
℃にて 2 時間反応させた。反応液中に生成した２’−
デオキシアデノシンあるいは２’−デオキシグアノシン
の濃度を高速液体クロマトグラフィーを用いて測定し、
その結果を表１に示した。
【００１７】
【表１】
【００１８】（実施例 ２）酵母エキス 5 g/l、肉エキ
ス 10 g/l、ペプトン １0 g/l、NaCl 5 g/l を含有する
栄養培地（pH 7.0） 50 ml を 坂口フラスコ（500 ml)
に入れ、120 ℃にて20 分間加熱殺菌した。これに、ブ
イヨン寒天培地で 30℃, 16 時間培養した第２表に示す
微生物をそれぞれ１白金耳づつ接種し、30℃にて 18 時
間振盪培養した。得られた培養液から菌体を遠心分離に
より分離した後、50 mM リン酸バッファー(pH 7.0)で洗
浄し、更に遠心分離することにより洗浄菌体を調製し
た。上記洗浄菌体を 100 mM の２’−デオキシウリジン
と 100 mM のアデニン、もしくはグアノシンを含む50 m
M のリン酸バッファー(pH 7.0) 10 ml に上記洗浄菌体
を 50 g/l になるように添加し、60℃にて 2 時間反応
させた。反応液中に生成した２’−デオキシアデノシン
あるいは２’−デオキシグアノシンの濃度を高速液体ク
ロマトグラフィーを用いて測定し、その結果を表２に示
した。
ス 10 g/l、ペプトン １0 g/l、NaCl 5 g/l を含有する
栄養培地（pH 7.0） 50 ml を 坂口フラスコ（500 ml)
に入れ、120 ℃にて20 分間加熱殺菌した。これに、ブ
イヨン寒天培地で 30℃, 16 時間培養した第２表に示す
微生物をそれぞれ１白金耳づつ接種し、30℃にて 18 時
間振盪培養した。得られた培養液から菌体を遠心分離に
より分離した後、50 mM リン酸バッファー(pH 7.0)で洗
浄し、更に遠心分離することにより洗浄菌体を調製し
た。上記洗浄菌体を 100 mM の２’−デオキシウリジン
と 100 mM のアデニン、もしくはグアノシンを含む50 m
M のリン酸バッファー(pH 7.0) 10 ml に上記洗浄菌体
を 50 g/l になるように添加し、60℃にて 2 時間反応
させた。反応液中に生成した２’−デオキシアデノシン
あるいは２’−デオキシグアノシンの濃度を高速液体ク
ロマトグラフィーを用いて測定し、その結果を表２に示
した。
【００１９】
【表２】
【００２０】（実施例 ３）酵母エキス 5 g/l、肉エキ
ス 10 g/l、ペプトン １0 g/l、NaCl 5 g/l を含有する
栄養培地（pH 7.0） 50 ml を 坂口フラスコ（500 ml)
に入れ、120 ℃にて20 分間加熱殺菌した。これに、ブ
イヨン寒天培地で 30℃, 16 時間培養したクレフ゛シエラ ニューモ
ニアエ (Klebsiella pneumoniae) IFO 3321 を１白金耳づ
つ接種し、30℃にて 18 時間振盪培養した。得られた培
養液から菌体を遠心分離により分離した後、50 mM リン
酸バッファー(pH 7.0)で洗浄し、更に遠心分離すること
により洗浄菌体を調製した。上記洗浄菌体を 100 mM の
２’ーデオキシウリジンと 100 mM のアデニン、もしく
はアデノシン、もしくは５’-アデニル酸、もしくはグ
アニン、もしくはグアノシン、もしくは５’ーグアニル
酸を含む50 mM のリン酸バッファー(pH 7.0)10 ml に
上記洗浄菌体を 50 g/l になるように添加し、60℃にて
2 時間反応させた。反応液中に生成した２’−デオキ
シアデノシンあるいは２’−デオキシグアノシンの濃度
を高速液体クロマトグラフィーを用いて測定し、その結
果を表３に示した。
ス 10 g/l、ペプトン １0 g/l、NaCl 5 g/l を含有する
栄養培地（pH 7.0） 50 ml を 坂口フラスコ（500 ml)
に入れ、120 ℃にて20 分間加熱殺菌した。これに、ブ
イヨン寒天培地で 30℃, 16 時間培養したクレフ゛シエラ ニューモ
ニアエ (Klebsiella pneumoniae) IFO 3321 を１白金耳づ
つ接種し、30℃にて 18 時間振盪培養した。得られた培
養液から菌体を遠心分離により分離した後、50 mM リン
酸バッファー(pH 7.0)で洗浄し、更に遠心分離すること
により洗浄菌体を調製した。上記洗浄菌体を 100 mM の
２’ーデオキシウリジンと 100 mM のアデニン、もしく
はアデノシン、もしくは５’-アデニル酸、もしくはグ
アニン、もしくはグアノシン、もしくは５’ーグアニル
酸を含む50 mM のリン酸バッファー(pH 7.0)10 ml に
上記洗浄菌体を 50 g/l になるように添加し、60℃にて
2 時間反応させた。反応液中に生成した２’−デオキ
シアデノシンあるいは２’−デオキシグアノシンの濃度
を高速液体クロマトグラフィーを用いて測定し、その結
果を表３に示した。
【００２１】
【表３】
【００２２】（実施例 ４）酵母エキス 5 g/l、肉エキ
ス 10 g/l、ペプトン １0 g/l、NaCl 5 g/l を含有する
栄養培地（pH 7.0） 50 ml を 坂口フラスコ（500 ml)
に入れ、120 ℃にて20 分間加熱殺菌した。これに、ブ
イヨン寒天培地で 30℃, 16 時間培養したクレフ゛シエラ ニューモ
ニアエ (Klebsiella pneumoniae) IFO 3321 を１白金耳づ
つ接種し、30℃にて 18 時間振盪培養した。得られた培
養液から菌体を遠心分離により分離した後、50 mM リン
酸バッファー(pH 7.0)で洗浄し、更に遠心分離すること
により洗浄菌体を調製した。上記洗浄菌体を 100 mM の
チミジンと 100 mM のアデニン、もしくはアデノシン、
もしくは５’−アデニル酸、もしくはグアニン、もしく
はグアノシン、もしくは５’−グアニル酸を含む50 mM
のリン酸バッファー(pH 7.0) 10 ml に上記洗浄菌体を
50 g/l になるように添加し、60℃にて 2 時間反応させ
た。反応液中に生成した２’−デオキシアデノシンある
いは２’−デオキシグアノシンの濃度を高速液体クロマ
トグラフィーを用いて測定し、その結果を第４表に示し
た。
ス 10 g/l、ペプトン １0 g/l、NaCl 5 g/l を含有する
栄養培地（pH 7.0） 50 ml を 坂口フラスコ（500 ml)
に入れ、120 ℃にて20 分間加熱殺菌した。これに、ブ
イヨン寒天培地で 30℃, 16 時間培養したクレフ゛シエラ ニューモ
ニアエ (Klebsiella pneumoniae) IFO 3321 を１白金耳づ
つ接種し、30℃にて 18 時間振盪培養した。得られた培
養液から菌体を遠心分離により分離した後、50 mM リン
酸バッファー(pH 7.0)で洗浄し、更に遠心分離すること
により洗浄菌体を調製した。上記洗浄菌体を 100 mM の
チミジンと 100 mM のアデニン、もしくはアデノシン、
もしくは５’−アデニル酸、もしくはグアニン、もしく
はグアノシン、もしくは５’−グアニル酸を含む50 mM
のリン酸バッファー(pH 7.0) 10 ml に上記洗浄菌体を
50 g/l になるように添加し、60℃にて 2 時間反応させ
た。反応液中に生成した２’−デオキシアデノシンある
いは２’−デオキシグアノシンの濃度を高速液体クロマ
トグラフィーを用いて測定し、その結果を第４表に示し
た。
【００２３】
【表４】
【００２４】
【発明の効果】本発明によれば、２’−デオキシアデノ
シンおよび２’−デオキシグアノシンが工業的に安価で
効率良く、製造可能である。
シンおよび２’−デオキシグアノシンが工業的に安価で
効率良く、製造可能である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:06） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:19） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:64） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:22） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:15） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:42） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:38） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:465） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:44） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:425） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:365） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:125） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:13） (Ｃ１２Ｐ 19/40 Ｃ１２Ｒ 1:265）
Claims (4)
- 【請求項１】 ２’−デオキシリボース−１−リン酸も
しくはその塩と、アデニン、アデノシンもしくは５’−
アデニル酸から２’−デオキシアデノシンを生成する能
力を有し、アクロモバクター属、アグロバクテリウム
属、アシネトバクター属、アルカリゲネス属、アースロ
バクター属、エアロモナス属、エシェリヒア属、エンテ
ロバクター属、エルビニア属、キサントモナス属、クレ
ブシエラ属、クルチア属、クルイヘラ属、コリネバクテ
リウム属、ザルチナ属、サルモネラ属、シトロバクター
属、シュードモナス属、ストレプトマイセス属、スポロ
ザルチナ属、スタフィロコッカス属、セラチア属、セル
ロモナス属、ノカルディア属、バチルス属、ハフニア
属、ビブリオ属、フラボバクテリウム属、プラノコッカ
ス属、ブレビバクテリウム属、、プロタミノバクター
属、プロテウス属、ヘモフィラス属、ミクロコッカス
属、ミコプラナ属、ミクロバクテリウム属、リゾビウム
属またはロドコッカス属に属する微生物の培養物、該培
養物より分離した微生物菌体もしくは該微生物菌体の処
理物を２’−デオキシリボース−１−リン酸もしくはそ
の塩と、アデニン、アデノシンもしくは５’−アデニル
酸に作用させて２’−デオキシアデノシンを生成させ、
これを採取することを特徴とする２’−デオキシアデノ
シンの製造法。 - 【請求項２】 無機リン酸もしくはその塩の存在下で
２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、アデニン、
アデノシンもしくは５’−アデニル酸から２’−デオキ
シアデノシンを生成する能力を有し、アクロモバクター
属、アグロバクテリウム属、アシネトバクター属、アル
カリゲネス属、アースロバクター属、エアロモナス属、
エシェリヒア属、エンテロバクター属、エルビニア属、
キサントモナス属、クレブシエラ属、クルチア属、クル
イヘラ属、コリネバクテリウム属、ザルチナ属、サルモ
ネラ属、シトロバクター属、シュードモナス属、ストレ
プトマイセス属、スポロザルチナ属、スタフィロコッカ
ス属、セラチア属、セルロモナス属、ノカルディア属、
バチルス属、ハフニア属、ビブリオ属、フラボバクテリ
ウム属、プラノコッカス属、ブレビバクテリウム属、、
プロタミノバクター属、プロテウス属、ヘモフィラス
属、ミクロコッカス属、ミコプラナ属、ミクロバクテリ
ウム属、リゾビウム属またはロドコッカス属に属する微
生物の培養物、該培養物より分離した微生物菌体もしく
は該微生物菌体の処理物を無機リン酸もしくはその塩の
存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、ア
デニン、アデノシンもしくは５’−アデニル酸に作用さ
せて２’−デオキシアデノシンを生成させ、これを採取
することを特徴とする２’−デオキシアデノシンの製造
法。 - 【請求項３】 ２’−デオキシリボース−１−リン酸も
しくはその塩と、グアニン、グアノシンもしくは５’−
グアニル酸から２’−デオキシグアノシンを生成する能
力を有し、アクロモバクター属、アグロバクテリウム
属、アシネトバクター属、アルカリゲネス属、アースロ
バクター属、エアロモナス属、エシェリヒア属、エンテ
ロバクター属、エルビニア属、キサントモナス属、クレ
ブシエラ属、クルチア属、クルイヘラ属、コリネバクテ
リウム属、ザルチナ属、サルモネラ属、シトロバクター
属、シュードモナス属、ストレプトマイセス属、スポロ
ザルチナ属、スタフィロコッカス属、セラチア属、セル
ロモナス属、ノカルディア属、バチルス属、ハフニア
属、ビブリオ属、フラボバクテリウム属、プラノコッカ
ス属、ブレビバクテリウム属、、プロタミノバクター
属、プロテウス属、ヘモフィラス属、ミクロコッカス
属、ミコプラナ属、ミクロバクテリウム属、リゾビウム
属またはロドコッカス属に属する微生物の培養物、該培
養物より分離した微生物菌体もしくは該微生物菌体の処
理物を２’−デオキシリボース−１−リン酸もしくはそ
の塩と、グアニン、グアノシンもしくは５’−グアニル
酸に作用させて２’−デオキシグアノシンを生成させ、
これを採取することを特徴とする２’−デオキシグアノ
シンの製造法。 - 【請求項４】 無機リン酸もしくはその塩の存在下で
２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、グアニン、
グアノシンもしくは５’−グアニル酸から２’−デオキ
シグアノシンを生成する能力を有し、アクロモバクター
属、アグロバクテリウム属、アシネトバクター属、アル
カリゲネス属、アースロバクター属、エアロモナス属、
エシェリヒア属、エンテロバクター属、エルビニア属、
キサントモナス属、クレブシエラ属、クルチア属、クル
イヘラ属、コリネバクテリウム属、ザルチナ属、サルモ
ネラ属、シトロバクター属、シュードモナス属、ストレ
プトマイセス属、スポロザルチナ属、スタフィロコッカ
ス属、セラチア属、セルロモナス属、ノカルディア属、
バチルス属、ハフニア属、ビブリオ属、フラボバクテリ
ウム属、プラノコッカス属、ブレビバクテリウム属、、
プロタミノバクター属、プロテウス属、ヘモフィラス
属、ミクロコッカス属、ミコプラナ属、ミクロバクテリ
ウム属、リゾビウム属またはロドコッカス属に属する微
生物の培養物、該培養物より分離した微生物菌体もしく
は該微生物菌体の処理物を無機リン酸もしくはその塩の
存在下で２’−デオキウリジンもしくはチミジンと、グ
アニン、グアノシンもしくは５’−グアニル酸に作用さ
せて２’−デオキシグアノシンを生成させ、これを採取
することを特徴とする２’−デオキシグアノシンの製造
法。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
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Applications Claiming Priority (1)
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|---|---|---|---|
| JP31389197A JP3928676B2 (ja) | 1997-11-14 | 1997-11-14 | ２’−デオキシアデノシン、２’−デオキシグアノシンの製造法 |
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| JP3928676B2 JP3928676B2 (ja) | 2007-06-13 |
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|---|---|---|---|---|
| WO2000070074A1 (fr) * | 1999-05-13 | 2000-11-23 | Mitsui Chemicals, Incorporated | Procede de production de compose nucleosidique |
| WO2002031176A1 (fr) * | 2000-10-12 | 2002-04-18 | Mitsui Chemicals, Inc. | Procédé permettant la production de nucléosides |
| WO2002036800A1 (fr) * | 2000-11-06 | 2002-05-10 | Mitsui Chemicals, Inc. | Procede de production de compose nucleoside |
| JP2003055392A (ja) * | 2001-08-08 | 2003-02-26 | Mitsui Chemicals Inc | １−リン酸化糖の製造法並びにヌクレオシドの製造法 |
| WO2003057895A1 (fr) * | 2001-12-28 | 2003-07-17 | Yamasa Corporation | Procede de production de 2'-desoxyguanosine |
| US6777208B2 (en) | 2000-10-25 | 2004-08-17 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing 2′ -deoxyribonucleoside |
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| CN110408667A (zh) * | 2019-06-29 | 2019-11-05 | 赤峰蒙广生物科技有限公司 | 一种提高β-胸苷产量的发酵工艺 |
-
1997
- 1997-11-14 JP JP31389197A patent/JP3928676B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| US7223589B2 (en) | 2000-10-25 | 2007-05-29 | Ajinomoto Co., Inc. | Bacterium for the production of 2′-deoxyribonucleoside |
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| CN110408667A (zh) * | 2019-06-29 | 2019-11-05 | 赤峰蒙广生物科技有限公司 | 一种提高β-胸苷产量的发酵工艺 |
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