JPH10503522A

JPH10503522A - 化学療法剤とともに使用するための防御性プロスタグランジン

Info

Publication number: JPH10503522A
Application number: JP8506689A
Authority: JP
Inventors: ハンソン，ウェイン，ロバート
Original assignee: ロヨラユニバーシティオブシカゴ
Priority date: 1994-08-04
Filing date: 1995-08-03
Publication date: 1998-03-31
Also published as: EP0767665A1; US5578640A; US5605931A; AU3272995A; US5578643A; CA2196751A1; WO1996003992A1

Abstract

(57)【要約】ＰＧＥ−タイプのプロスタグランジンを化学療法剤の投与に先立って投与することにより、組織を化学療法剤に由来する損傷から保護するために、ＰＧＥタイプのプロスタグランジンを治療上有効な量で投与することができる。

Description

【発明の詳細な説明】化学療法剤とともに使用するための防御性プロスタグランジン発明の背景本出願は、１９９２年５月２０日出願の米国特許出願第０７／８８６，２７０号の一部継続出願である。本発明は、癌の治療を目的として投与される細胞毒性物質（化学療法剤）により引き起こされる傷害から、種々の正常な細胞や組織を防御する方法を提供する。特に、プロスタグランジンは、化学療法剤の投与により引き起こされる傷害から、毛髪や毛包のような正常な組織および骨髄中の白血球（ＷＢＣ）前駆体を含む造血系を防御することが見いだされた。防御される他の組織には、皮膚、胃（胃組織）を含む胃腸管、小腸、大腸および結腸−直腸組織、食道、口（口腔粘膜を含む）、腎臓、膣、膀胱、鼻道、および目があるが、これらに限定されない。組織傷害の防止は、癌化学療法の死亡率を低下させるか、および／または組織の正常な細胞を傷害することなくまたは非常に少ない傷害で、癌患者に対してより多量でより治療効果の大きい化学療法処方を可能にする。本発明は、ヒトの癌の化学療法に通常使用されている化学療法により引き起こされる傷害から、体の種々のタイプの正常な細胞や組織を防御する方法に関する。細胞毒性化学療法剤の投与の前に、ミソプロストール（misoprostol）［（± ）（１６ＲＳ）−１５−デオキシ−１６−ヒドロキシ−１６−メチルプロスタグランジンＥ₁、メチルエステルとしても知られており、ジー・ディー・サール（G .D．Searle & Co.）からサイトテック（Cytotec）（登録商標）として販売されている］を全身的または局所的に投与、または（±）メチル７−［３α−ヒドロキシ−２β−（４Ｒ−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｅ，５Ｅ，７Ｅ−ノナトリエニル）−５−オキソ−１α−シクロペンチル］−４Ｚ−ヘプテノエートまたは１６，１６−ジメチルプロスタグランジンＥ₂すなわちＰＧＥ₁を全身的に投与することは、化学療法剤により引き起こされる死亡から動物を防御したり、および／または傷害または損傷から正常な組織中の異なるタイプの細胞を防御するのに有用であることが見いだされている。癌を有すると診断された人達は、原発性の癌の部位でまたは癌が転移した遠い部位で癌細胞を殺すために、単一のまたは複数の細胞毒性化学療法剤（細胞毒性物質）により頻繁に治療される。化学療法は、単回のまたは数回の大量で投与されるか、またはより一般的には１日１回〜４回の少量で数週間から数ヶ月投与される。癌の治療には多数の細胞毒性物質が使用されており、各物質の細胞毒性作用の機序は、ほとんど不明であるかほんのわずかしかわかっていない。その機序にかかわらず、有用な化学療法剤は癌と正常な組織の両方の細胞を傷害し死滅させることが知られている。癌の治療のための化学療法剤の使用の有効性は、決定的に重要な正常な組織に比較して癌細胞に対する化学療法剤の差別的死滅効果に依存する。正常な組織に対する化学療法剤の作用は、癌治療の副作用と見なされる。化学療法の直後（数分から数時間）の副作用には、めまい、吐き気、嘔吐、および下痢がある。これらの副作用は不快であるが、それ自身は生命に危険を及ぼすものではない。化学療法の過程で数日から数週間以内に起きる正常な組織内の細胞の死滅または傷害は、不快であるかおよび／または生命に危険を及ぼす副作用となることがある。これらの副作用には、抜け毛、聴力喪失、不妊症、胃腸管の粘膜上皮への傷害、口腔粘膜、食道、小腸および大腸への傷害、腎臓傷害、皮膚傷害、心臓傷書、感染症を引き起こすことになる白血球の死滅と抑制、および造血生成細胞の死滅がある。これらの副作用の多くは、分裂細胞数の多い（増殖細胞）組織や器官系に関係している。これらの副作用のあるものは生命に対する危険はない。しかし、これらの副作用を低下または防止することは、癌患者にとって有益であるか、または正常組織中の細胞の傷害または死滅を最小にして、より多量の化学療法剤を投与することを可能にするであろう。化学療法により引き起こされる毛髪喪失（脱毛症）は、生命に対する危険性はないが防止または少なくすることができる副作用の例である。脱毛症は典型的には、男性患者も女性患者も疾患が急速に進展している兆候であると見ており、化学療法治療の副作用として見ていない。脱毛症はしばしば癌患者の不安や自信の喪失を引き起こす。脱毛症のような生命に危険を及ぼさない化学療法の副作用の低下または防止は、患者の生活の質（クオリティオブライフ）を向上し、治療中の患者の前途を向上させる。化学療法の他の副作用は生命に危険を及ぼし、従って治療中の癌患者に安全に投与できる化学療法剤の投与量が制限される。化学療法剤の投与量を限定する生命に危険を及ぼす副作用の低下または防止は、患者の正常な細胞の傷害または死滅の危険性を低下させ、より多量の化学療法剤の投与を可能にし、化学療法後の生存率や生存者の数を増加させる。化学療法の副作用の低下または防御は、癌患者にとって大きな利益である。これらの副作用を低下させるためのこれまでの試みの多くはうまくいっていない。生命に危険を及ぼさない副作用については、あまり努力がなされていない。例えば毛髪の喪失を防ぐ試みには、頭皮内の薬物濃度を低下させるために、冷キャップや止血帯を使用した。患者のコンプライアンスは良くなく、これらの方法はあまり用いられない。さらに最近では、イムベルト（ImuVert）（セル・テクノロジー社（Cell Technology，Inc.）製）と呼ばれる化合物が、抗癌剤を投与されたラットの毛の喪失を低下させることができたと報告されているが、インフルエンザ様の副作用があるため実用的ではない（エー・エム・フセイン、ジェイ・ジェイ・ジメネズ、シー・エー・マコール、エー・エー・ユニス（Hussein，A.M. ，Jimenez，J.J.，McCall，C.A.，Yunis，A.A.）、ラットモデルで化学療法により誘導される脱毛症の防御、Ｓｃｉｅｎｃｅ２４９：１５６４−１５６６；１９９０を参照）。生命に危険を及ぼす副作用では、副作用を低下させるために化学療法剤の投与量やスケジュールを変更することに焦点が当てられた。化学療法の開始の前に種々の組織の正常な細胞の数を増加させるために、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、顆粒球−マクロファージ−ＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）または上皮増殖因子（ＥＧＦ）の使用なども可能になってきている（ジェイ・ジェイ・ジメネズ、エー・エー・ユニス（Jimenez，J.J.，Yunis，A.A.）、ラットモデルの上皮増殖因子と繊維芽細胞増殖因子によるアラビノフラノシルクトシン（Arabinofuranosylctosine ）誘導性の脱毛症の防御、ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５２：４１３−４１５（１９９２））。これらの因子による防御機序は充分解明されてはいないが、おそらく細胞毒性物質による治療の前に、正常な決定的に重要な標的細胞の数が増加することと関係している。化学療法による傷害を直接防御する化合物はほとんどない。シスプラスチンのボーラス注入により引き起こされる傷害から腎臓を防御すると報告された１つの物質は、Ｓ−２−（３−アミノプロピルアミノ）エチルホスホロチオキシック酸（Ｗ２７２１）である。（ディー・グローバー、ケー・アール・フォックス、シー・ウェイラー、エム・エム・クリガーマン、エー・ツリシ、ジェイ・エィチ・グリック（Glover，D.；Fox，K.R.；Weiler，C.；Kligerman，M.M.；Turrisi，A .；Glick，J.H.）、アルキル化剤化学療法と放射線療法前のＷＲ−２７２１の臨床治験、ＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ３９：３；１９８８を参照）。ＷＲ−２７２１自身は大量の防御的投与量では、ヒトで低血圧、吐き気および嘔吐を引き起こすため、この化合物は有用性が限定されているようであり、大量単回投与でのみ有用である。これらの毒性は毎日使用すると上昇し、その結果典型的な化学療法を数日から数週間続けると、有効性がなくなることが見いだされている。化学療法剤の副作用の有効な防御を提供することが好ましいであろう。コンプライアンスを確保し、化学療法剤の有効な治療効果を妨害しないような単純な方法による防御を提供することが好ましいであろう。プロスタグランジンは、胃粘膜および腸粘膜に関連する防御性が知られている。プロスタグランジンは、胃腸管に対するエタノール誘導性の傷害、胃腸管に対するＮＳＡＩＤ誘導性の傷害、および放射線誘導性の傷害に対する防御作用が知られている。エタノール傷害に関連する機序は、粘液分泌および／または重炭酸塩分泌に関係するようである。プロスタグランジンとシスプラスチン傷害に対する防御が証明されたＷＲ−２７２１との間の明らかな因果関係はない。米国特許第４，０８１，５５３号（ロバート（Robert））は、放射線照射により引き起こされる腸炎症性疾患、およびクローン病、炎症性腸疾患、感染性腸炎、熱帯性下痢および腸に現れる食物に対するアレルギー応答のいずれかに罹っている患者に対して、細胞防御性プロスタグランジンを投与して治療する方法を提供している。このような細胞防御性プロスタグランジンは、胃または腸の組織への炎症性浸潤を変更させ、組織への障害後に投与される。米国特許第４，０９７，６０３号（ロバート（Robert））は、炎症を引き起こす薬剤の投与の３０分前に予防的に投与することを含むプロスタグランジンの投与により、胃炎症性疾患および潰瘍性（びらん性）疾患から胃の組織を防御する方法を開示している。ロバート（Robert）の記載する胃組織に対する傷害のタイプは、そのような組織の炎症に由来する傷害である。ロバート（Robert）は、開示された方法による治療に適した被験者は、家庭用クリーナーや化学療法剤のような悪性の物質に接触した患者であると記載している。胃や腸の組織のプロスタグランジンによる防御の機序は、粘液分泌の増加または重炭酸塩分泌の増加に関係している。（ティー・エー・ミラー（T.A．Miller ）、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、２４５：Ｇ６０１−Ｇ６２３、１９８３を参照）。このような分泌増加は、胃や腸組織の生理に特徴的であり、そのような機序は、非粘液分泌性および／または非重炭酸塩分泌性組織では不可能である。本発明は、化学療法剤に引き起こされる細胞傷害から、いくつかの非粘液分泌性および非重炭酸塩分泌性組織（例えば、毛包、骨髄および皮膚）に対して細胞防御を提供する。さらに本発明は、炎症性疾患からの胃や腸組織の防御とは異なる、実際の細胞の死滅からの正常組織の防御を提供する。すなわち、本発明のＥ −型プロスタグランジンの作用機序は独特であり、炎症からの胃や腸組織のプロスタグランジン誘導性防御の提唱された作用機序とは異なる。発明の要約本発明は、化学療法剤の投与の前に、治療上有効量のＥ−型プロスタグランジンを投与することよりなる、化学療法剤により引き起こされる傷害から哺乳動物の胃ではない組織を防御する方法を提供する。さらに好ましくは、投与されるＥ −型プロスタグランジンは、１６，１６−ジメチルＰＧＥ₂；およびＰＧＥ₁ （式中、Ｒは、水素、または１〜６個の炭素原子を有する低級アルキルであり；Ｒ₁は、水素、ビニルまたは１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルであり、波線はＲまたはＳ立体異性体を示し；Ｒ₂、Ｒ₃、およびＲ₄は、水素または１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルであるか、またはＲ₂とＲ₃は炭素Ｙと一緒に、炭素原子４〜６個を有するシクロアルケニルを形成するか、またはＲ₃とＲ₄ は、炭素ＸおよびＹと一緒に、炭素４〜６個を有するシクロアルケニルを形成し、ここでＸ−Ｙ結合は飽和しているかもしくは不飽和である）よりなる群から選択される。最も好ましくは、投与されるＥ−型プロスタグランジンはミソプロストール（misoprostol）である。図面の簡単な説明図１は、ミソプロストールの投与と次のドキソルビシン（doxorubicin）の投与の間の時間間隔（時間）の関数としての１５日間のマウスの生存パーセントを示すグラフである。（２つの曲線は、２重測定の実験である；１つの実験当たりマウス１２匹）。図２は、０．５ｍｇのドキソルビシン投与後の１５日間のマウスの生存パーセント（白丸）と、０．５ｍｇのドキソルビシン投与の２時間前に４０μｇのミソプロストールを投与したマウスの生存パーセント（黒丸）を示すグラフである。（各群でＮ＝１６）。図３は、０．７５ｍｇのドキソルビシン投与後の１５日間のマウスの生存パーセント（白丸）と、０．７５ｍｇのドキソルビシン投与の２時間前に４０μｇのミソプロストールを投与したマウスの生存パーセント（黒丸）を示すグラフである。（各群でＮ＝１６）。図４は、１２．５ｍｇの５−フルオロウラシル投与後の１５日間のマウスの生存パーセント（白丸）と、１２．５ｍｇの５−フルオロウラシル投与の２時間前に４０μｇのミソプロストールを投与したマウスの生存パーセント（黒丸）を示すグラフである。（各群でＮ＝８）。図５は、段階的濃度のドキソルビシン投与後の１５日間のマウスの生存パーセント（白丸）と、段階的濃度のドキソルビシン投与の２時間前に４０μｇのミソプロストールを投与したマウスの生存パーセント（黒丸）を示すグラフである。白三角は、０．７５ｍｇのドキソルビシン投与の３０分前に、ＷＲ−２７２１を投与した１０匹のマウスの群のデータである。（線は、データからコンピューターでフィッティングしたスプライン曲線である；各曲線のデータ点当たりｎ＝２４）。図６は、段階的濃度のドキソルビシン投与後の１５日間のマウスの生存パーセント（白丸）と、段階的濃度のドキソルビシン投与の２時間前に１０μｇの１６，１６−ジメチルＰＧＥ₂（白丸）、もしくは２５μｇの（±）メチル，７−［３α−ヒドロキシ−２β−（４Ｒ−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｅ，５Ｅ，７Ｅ −ノナトリエニル）−５−オキソ−１α−シクロペンチル］−４Ｚ-ヘプタノエート（白三角）を投与したマウスの生存パーセントを示すグラフである。（線は、データからコンピューターでフィッティングしたスプライン曲線である；各ＰＧ処理群についてのデータ点当たりｎ＝８であり、ドキソルビシンのみで処理したマウスのデータ点についてはｎ＝２４）。図７は、時間（日）の関数としての白血球数に及ぼすドキソルビシン単独の作用と比較した、白血球数に及ぼすミソプロストール（ドキソルビシンの２時間前に投与）の防御作用を示すグラフである。（数字１と２は、２重実験である）。図８は、未処理の対照マウス（パネルＡ）と毎日０．１ｍｇのドキソルビシンを５日間投与して処理したマウス（パネルＢ）の、臀部の４．４２平方ｍｍの領域からの毛の低倍率（３０×）顕微鏡写真である。パネルＣは、５日間毎日０．１ｍｇのドキンルビシンの投与の２時間前に４０μｇのミソプロストールを投与したマウスの顕微鏡写真である。平均の毛の数を図９に示す。図９は、対照マウス、毎日０．１ｍｇのドキソルビシンを５日間投与したマウス、５日間毎日０．１ｍｇのドキソルビシンの投与の２時間前に４０μｇのミソプロストールを投与したマウスの、４．４２平方ｍｍの皮膚の領域からの毛の数を示すグラフである。（データは、６匹のマウス（マウス１匹当たり２視野）の平均±１標準誤差である。）図１０は、対照マウス、毎日１．０ｍｇのサイトキサン（cytoxan）を５日間投与したマウス、５日間毎日サイトキサンの投与の２時間前に４０μｇのミソプロストールを投与したマウスの、４．４２平方ｍｍの皮膚の領域からの毛の数を示すグラフである。（データは、６匹のマウス（マウス１匹当たり２視野）の平均±１標準誤差である。）図１１は、対照マウス、毎日０．５ｍｇのドキソルビシンを投与したマウス、０．５ｍｇのドキソルビシンの投与の２時間前に１０μｇのＰＥＧ₁を投与したマウスの、４．１６平方ｍｍの皮膚の領域からの毛の数を示すグラフである。（データは、６匹のマウス（マウス１匹当たり２視野）の平均±１標準誤差である。）図１２は、０．５ｍｇのドキソルビシンを投与したマウス、０．５ｍｇのドキソルビシンの投与の２時間前に１０μｇのＰＥＧ₁を投与したマウスの、腸の周囲当たりのマイクロコロニーの数を示すグラフである。（データは、４匹のマウスの平均±１標準誤差である。）図１３は、対照マウス（パネルＡ）と０．３ｍｇのＶＰ−１６−２１３を単回投与した４日後のマウス（パネルＢ）の髄質細胞の１本線を示す毛の軸の写真である。図１３のパネルＣは、ＶＰ−１６−２１３の投与２時間前にミソプロストールを皮下投与した４日後のマウスの髄質細胞の写真であり、パネルＤは、ＶＰ −１６−２１３の投与２時間前にミソプロストールを局所投与した４日後のマウスの髄質細胞の写真である。詳細な説明本発明は、化学療法剤の投与の前に、治療上有効量のＥ−型プロスタグランジンを投与することよりなる、化学療法剤により引き起こされる傷害から哺乳動物の胃ではない組織を防御する方法を提供する。さらに好ましくは、投与されるＥ −型プロスタグランジンは、１６，１６−ジメチルＰＧＥ₂；およびＰＧＥ₁ （式中、Ｒは、水素、または１〜６個の炭素原子を有する低級アルキルであり；Ｒ₁は、水素、ビニルまたは１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルであり、波線はＲまたはＳ立体異性体を示し；Ｒ₂、Ｒ₃、およびＲ₄は、水素または１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルであるか、またはＲ₂とＲ₃は炭素Ｙと一緒に、炭素原子４〜６個を有するシクロアルケニルを形成するか、またはＲ₃とＲ₄ は、炭素ＸおよびＹと一緒に、炭素４〜６個を有するシクロアルケニルを形成し、ここでＸ−Ｙ結合は飽和しているかもしくは不飽和である）よりなる群から選択される。最も好ましくは、投与されるＥ−型プロスタグランジンはミソプロストール（misoprostol）である。本発明はさらに、このようなＥ−型プロスタグランジンの全身的または局所的投与を提供し、さらに詳しくは、化学療法剤の投与の０．５〜３時間前にプロスタグランジンの投与を提供する。本発明はさらに、治療上有効量の前述のＥ−型プロスタグランジンを投与することにより、リンパ球減少性の化学療法剤で治療されている哺乳動物のリンパ球の減少を阻害する方法を提供する。本発明は、化学療法剤の投与により引き起こされる傷害または細胞死滅から正常組織の細胞を防御する方法を提供する。本明細書において「細胞の死滅」という用語は、化学療法剤の活性により引き起こされる再生能力またはクローン原生能力の喪失を意味する。化学療法剤の全身的投与により引き起こされる傷害または細胞の死滅からの、癌患者の正常な組織の防御は、本明細書に記載のプロスタグランジンを局所的に適当なビヒクル中で、毛包、皮膚、口腔粘膜および咽頭粘膜、食道、大腸、直腸、膀胱、膣、または非侵襲的に届く管腔表面が中にある体の外部の任意の臓器のような表面構造に投与することにより行われる。局所的投与は、毛包および口腔粘膜の防御に特に適している。骨髄、腎臓、小腸、肝臓、脳、生殖腺、または化学療法傷害を受ける任意の他の正常な内蔵の防御は、本明細書に記載のプロスタグランジンを、経口投与および静脈内、筋肉内および皮下注射を含む、患者の血流中に化合物を導入することができる任意の方法で投与することにより行われる。化学療法剤により引き起こされる傷害または細胞の死滅からの正常な組織の防御を目的とするプロスタグランジン化合物は、化学療法剤投与の約３０分〜３時間前に投与され、より好ましくは、プロスタグランジンは化学療法剤投与の約１時間〜約３時間前に投与される。最も好ましくは、プロスタグランジンは化学療法剤投与の約１，５時間〜約２．５時間前に投与される。これらの範囲外の時間でプロスタグランジンを投与してもある程度の防御が達成されるが、この範囲内でより大きな防御が提供される。投与される防御性プロスタグランジンの投与量は、患者の状態や症状により異なる。投与される治療上有効量のプロスタグランジンは、１日当たり体重１ｋｇにつき約０．０１０μｇ〜約５０μｇの量である。より好適な投与量は、体重１ｋｇにつき約０．１μｇ〜約２０μｇの量である。最も好適な量は、体重１ｋｇにつき約０．２μｇ〜約１０．０μｇの量である。適当な投与量を、１日当たり複数回に分けてサブ投与量で投与してもよい。これらのサブ投与量は、単回投与型で投与される。典型的には、投与量またはサブ投与量は、単回投与型当たり約５．０μｇ〜約８００μｇの活性化合物を含有する。より好適な投与量は、単回投与型当たり約１０μｇ〜約４００μｇの活性化合物を含有する。最も好適な投与量は、単回投与型当たり約１０μｇ〜約２００μｇの活性化合物を含有する。活性化合物は、薬剤学的に許容される処方中で投与することができる。このような処方は、１つまたはそれ以上の薬剤学的に許容される担体または希釈剤と一緒の活性Ｅ−型プロスタグランジンよりなる。他の治療薬も処方中に存在することができる。薬剤学的に許容される担体または希釈剤は、好ましくない副作用を引き起こすことなく活性化合物を送達するための適当なビヒクルを提供する。このような処方中の活性化合物の送達は、経口、経鼻、局所的、口内および舌下を含む種々の投与経路、または皮下、筋肉内、静脈内および皮内経路などの非経口投与でもよい。経口投与用の処方は、活性化合物をゼラチンもしくはヒドロキシプロピルメチルセルロースのような結合剤中に、１つまたはそれ以上の滑沢剤、保存剤、界面活性剤もしくは分散剤とともに分散して含有するカプセルもしくは錠剤でもよい。そのようなカプセルもしくは錠剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース中に活性化合物を分散して得られるような調節放出処方を含有してもよい。非経口投与用の処方は、水性または非水性の等張無菌注射溶液または懸濁液の型でもよい。これらの溶液および懸濁液は、経口投与用の処方での使用で記載した１つまたはそれ以上の担体または希釈剤を有する無菌の粉末または顆粒から調製される。以下に本発明の具体例を示す。これらの例は本発明を例示するためであって、決して本発明の精神または範囲を限定するものではない。生物学的評価ヒトの癌を治療するために使用される化学療法剤により引き起こされる正常な組織への傷害の防御物質としての本明細書に記載のプロスタグランジンの有用性は、以下の測定法および結果により示される。実施例１マウスの死亡率は化学療法剤で与えられる正常細胞のひどい損傷に因る死亡からのＰＧ−誘発保護の尺度である。この検定はマウスの個別群に、ある範囲の化学療法剤量を腹腔内注射（ＩＰ）することにより行われた。各化学療法剤の剤量範囲は死亡させない低剤量と特定の時間内で１００％死亡させる高剤量との間で変えた。マウスの幾つかの群において、生き残った動物数（パーセント生存率）を化学療法剤の投与を行った時間に対してプロットすることにより寿命を記録した。この有毒化学療法剤からのＰＧ−誘発保護を化学療法剤のＩＰ投与前後の色々な時間においてＰＧを皮下（ＳＣ）注射することにより測定した。図１は、１５日間生存したマウスのパーセントをマイソプロストール（misoprostol）の投与と化学療法剤のドキソルビシン（ＤＯＸ）の投与との間の期間（時間）の関数として示すものである。投与間期間を１５分から５時間まで変えた。２本の曲線は各実験で２０匹のマウスを用いた２つの別個の実験を表す。時間“０”の点はドキソルビシンだけを投与した後に１５日間生存したマウスの百分率である。結果は、マイソプロストールがドキソルビシンの投与前に与えられるとき、最高に近いマイソプロストール誘発保護を達成する最適期間は約１乃至約３時間であることを示している。図２は、ドキソルビシン（ＤＯＸ）が０．５ｍｇ与えられたマウス（ｎ＝１６）とドキソルビシン０．５ｍｇの投与２時間前にマイソプロストールが４０μｇ与えられた別のマウス群（ｎ＝１６）のパーセント生存率を示すものである。ＤＯＸの単独投与１５日後までマウスの約２５％がなお生存していた。ＤＯＸ投与前にマイソプロストールの投与を受けたマウス群では、１５日後もマウスの１００％がなお生存していた。ＳＰＳＳ／ＰＣ＋ソフトウエア（ＩＬ州、シカゴ（Ｃｈｉｃａｇｏ）のＳＰＳＳ社（SPSS Inc.）の４．０１バーションで生命表アルゴリズムを用いて行った統計分析はｐ値が≦０．００１であることを示した。図３は、図２のデーターと同様のデーターを示すものであるが、但しマウスの一方の群（ｎ＝１６）にはＤＯＸを０．７５ｍｇ／マウスを与え、マウスの他方の群にはＤＯＸ・０．７５ｍｇの投与２時間前に４０μｇのマイソプロストールを与えた。ＤＯＸ・０．７５ｍｇのＩ．Ｐ．投与を行った後６日までにマウスは全て死亡した。ＤＯＸ・０．７５ｍｇの投与２時間前に４０μｇのマイソプロストールが与えられたマウスの群では、約８５％が１５日間までなお生きていた。これらのデーターにはｐ≦０．００１の値において統計的に有意差がある。１２．５ｍｇの５−フルオロウラシル単独の毒性と５−フルオロウラシルの投与２時間前に与えられたマイソプロストール４０μｇの５−フルオロウラシルに因る死亡から保護する有効性が図４に示される。そのデーターは、マイソプロストールは５−フルオロウラシルの損傷作用からマウスを保護するとき有効であったことを示している。生命表を分析すると、ｎ＝８でｐ値は≦０．０５であることが示された。ＤＯＸ治療だけに因る全ての急性死亡はＤＯＸの投与を行った後１５日前に起こったことが観察された。続いて、１５日以内での死亡のパラメーターを用いて、ＤＯＸをＩＰだけで投与したときの、又は４０μｇのマイソプロストールを皮下（ｓｃ）投与で与えた２時間後に投与したときのＤＯＸ剤量応答性を調べた。この研究では、平均３０グラムのマウスにつきＤＯＸの剤量約０．５ｍｇでＤＯＸ治療マウスの５０％が死亡した（図５を参照されたい）。ＤＯＸをその剤量に勾配を付して（graded dose）投与する２時間前に４０μｇのマイソプロストールを与えたマウスの群では、マウスの母集団の５０％を死なせるのに要する剤量は平均３０グラムのマウスにつきＤＯＸ約１．０ｍｇまで増加された。ＰＧは、防御を与えるためには、化学療法剤の前に与えられなければならなかった。ＤＯＸの投与５分後又は１時間後にＰＧを投与しても、ＤＯＸ治療マウスには保護がもたらされなかった（データーを示さない）。ＰＧ−誘発保護をＷＲ−２７２１による保護と比較した；ある種の化学療法剤から保護する試剤を報告した。ＷＲ−２７２１はマウス（ｎ＝１０）をＤＯＸによる治療から保護しなかった（図５を参照されたい）。マイソプロストールとは異なる構造のプロスタグランジンを表す他の２種のＰＧの、勾配付き剤量のＤＯＸの投与によりもたらされる死亡からマウスを保護する場合の有効性についても調べた。１０μｇの１６，１６−ジメチルＰＧＥ₂及び２５μｇの（±）メチル，７−［３α−ヒドロキシ−２β−（４Ｒ−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｅ，５Ｅ，７Ｅ−ノナトリエニル）−５−オキソ−１α−シクロペンチル］−４Ｚ−ヘプテノエート（ＳＣ−４４９３２としても知られている）はマウスの母集団（ｎ＝８）の５０％死なせるのに必要なＤＯＸの剤量を増加させた。これらＰＧによる保護の程度はマイソプロストールについて認められたものと同様であった。ＰＧ類が化学療法剤から保護する機構は知られていないが、但し証拠は幾つかの組織が保護されることを示唆している。ＤＯＸ治療だけの１５日以内の死亡が骨髄損傷と最も関連している可能性がある。ＤＯＸ治療マウス（ＤＯＸ・０．５ｍｇ／３０グラムのマウス）の抹消循環における白血球（ＷＢＣ）は治療を行った後７日にわたって急激に減少した（図７を参照されたい）。ＤＯＸの投与２時間前にマイソプロストール（４０μｇ／３０グラムのマウス）が与えられたマウスでは、ＷＢＣ数は対象レベル付近のままであった。循環しているＷＢＣの入れ替わりは急速（好中球について６時間、また多くのリンパ球について１〜３日以内）であるから、これらのデーターは、マイソプロストールは骨髄中のＷＢＣ前駆体をＤＯＸによる損傷から保護することを示唆している。分画（differential count）は、リンパ球の百分率は対象マウスの約８５％からＤＯＸが０．５ｍｇ与えられたマウスの１０％未満まで低下せしめられたことを示した。ＤＯＸは、従って、全ＷＢＣを減少させるだけでなく、リンパ球に対して特に顕著な効果を有しているようである。抹消血液の分画は、リンパ球の百分率はＤＯＸが０．５ｍｇ与えられたマウスの１０％未満からＤＯＸ・０．５ｍｇの投与２時間前に４０μｇのマイソプロストールが与えられたマウスの３０％以上まで増加されたことを示した。ＰＧ類が化学療法剤による損傷から色々な組織を保護することを示すもう１つの例を次の実施例に示す。実施例２化学療法剤により引き起こされる脱毛からのＰＧ誘発保護の尺度としての体毛損失量癌患者における化学療法剤の副作用の１つは体毛の損失、即ち脱毛である。化学療法剤により引き起こされる脱毛からのＰＧ類の可能な保護作用を測定する研究を行った。これらの研究に使用された化学療法剤はＤＯＸとサイトキサン（cy toxan：CTX）であった。マウス（ｎ＝４／群）の臀部の体毛を引き抜いて毛包内に約１８日間続く成長サイクル即ち発育相サイクルを誘発させた。引き抜き１０日後に、ＤＯＸ（０．１ｍｇ／平均３０グラムのマウス／日）又はＣＴＸ（１．０ｍｇ／平均３０グラムのマウス／日）による毎日５回の治療をＩ．Ｐ．投与で行った。引き抜かれたマウスの別の群では、マイソプロストールが各剤量のＤＯＸ又はＣＴＸの投与２時間前にｓ．ｃ．で与えられた。対照群は治療又はマイソプロストール単独投与を受けなかった。全マウスを治療の開始２週間後に殺し、そして４．４２平方ｍｍの面積中の体毛数を数え、平均した（試料当たり２区域）。図８のパネルＡは低出力光学顕微鏡による試験での未治療対照の体毛の代表的区域を示す。図８のパネルＢはＤＯＸが少量ずつに分けられて５日間与えられたマウスの体毛に対する代表的損傷区域を示す。図８のパネルＣはＤＯＸの毎日の治療の各々の２時間前にマイソプロストールが与えられたマウスから撮った代表的区域を示す。マイソプロストールとＤＯＸで治療されたマウス（パネルＣ）の体毛の外観は正常な未治療マウスの体毛の外観と同様である。対照（白抜き棒）の皮膚区域、ＤＯＸ（斜線入り棒）及びマイソプロストール＋ＤＯＸ（黒塗り棒）でそれぞれ治療されたマウスの皮膚区域からの体毛本数を図９に示す。ＤＯＸ単独はは体毛本数を対照の４．４２平均ｍｍ当たり２４８± ５本から１４４±３まで減少させた。ＤＯＸの投与前に与えられたマイソプロストールは体毛本数を２１３±７．８本まで増加させた。同様のデーターがＣＴＸ及びマイソプロストール＋ＣＴＸでそれぞれ治療されたマウスにも見いだされる。図１０を参照されたい。その値は対照（白抜き棒）について２４８±５．５本、ＣＴＸ治療マウス（斜線入り棒）について１４３±５．５本及びマイソプロストール＋ＣＴＸ治療マウス（黒塗り棒）について２２２±５．５であった。証拠は、組織のプロスタグランジン保護はその組織に存在する受容体に依存するだろうことを示唆している。プロスタグランジンの受容体は一様には分布していないから、ＰＧＥ₁は皮膚（毛包）に関連があるが、腸には関連がない。ドキソルビシンにより引き起こされる細胞の損傷からの、ＰＧＥ₁の皮膚（毛包）及び小腸を保護する能力を試験した。図１１は対照マウスにおける４．１６平方ｍｍ当たりの体毛本数（４３±５本）を示す。ドキソルビシンの０．５ｍｇと言う単一剤量はこの本数を４３±８本まで減少させた。ドキソルビシンの投与に先立ってＰＧＥ₁ １０μｇを投与すると、１１１±１２までの体毛本数の増加で示されるとおりの保護が得られた。図１２では、ＤＯＸ治療マウスにおける周縁当たりの腸管コロニーの数はＰＧＥ₁１０μｇをドキソルビシンの投与２時間前に与えられたとき変化しなかった。これらの結果は、Ｅ−タイプのプロスタグランジンであるマイソプロストールは受容体に結合し、広範囲の組織を保護するが、これに対してＰＧＥ₁は受容体と結合し、より狭い範囲の組織を保護するが、腸管細胞をドキソルビシンから保護しないことを示唆している。これらのデーターは、マイソプロストールとＰＧＥ₁は毛包を化学療法剤の投与に由来する損傷から保護する強い証拠を与えるものである。更なる証拠が実施例３に与えられる。実施例３化学療法剤により引き起こされる損傷からの保護の尺度としての体毛の髄質細胞の数ＣＦ₁マウスの毛幹には通常約５０±１個の髄質細胞の１本の線が含まれている。これらの細胞は細胞毒性剤に非常に敏感である［ポッテン，Ｃ．Ｓ．（Pott en，C.S.）、ゲング，Ｌ（Geng，L）及びテーラー，Ｐ（Taylor，P）著・毛の髄質細胞の計測数（Hair Medullary Cell Counts）：放射線暴露の簡単、鋭敏なインジケーター（a Simple and Sensitive Indicator of Radiation Exposure）、 Int．J Radat．Biol.、57:13-21、1990を参照されたい］。種々の単一剤量での細胞毒性化学療法剤は髄質細胞数を著しく減少させ、髄質細胞はその化学療法剤の投与４日後に最低数に達する。この細胞系が数種の化学療法剤からのマイソプロストール誘発保護の評価に使用されている。ＣＦ₁マウスは、前記実施例２に記載されたように、それらの臀部のある領域から体毛が引き抜かれて発育相の成長を誘発させた。２週間後にマウスを各々４匹の群に分け、次の治療を施した：対照（治療せず）、又は単一剤量の次の化学療法剤、即ちＤＯＸ、ＣＴＸ、エトポシド（etoposide：VP-16-213）、サイトシンアラビノシド（ＡＲＡ−Ｃ）、ヒドロキシ尿素（ＨＵ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、メトトレキセート、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、カーボプラチン又はタキソールの内の１種を受容したマウス。別の群において、マウスはマイソプロストール（４０μｇ／平均３０ｇのマウス）を上記の化学療法剤の各々の投与２時間前に皮下か、局所適用で受容した。未治療対照は、水若しくは水中２％ＥｔＯＨ又はｐＨ＝６．８のリン酸塩緩衝液（使用された全化学療法剤のビヒクル）が、未治療対照に比較して、細胞数に影響を及ぼさないことが前以て確認されていたので、使用された。各群、各マウスからの２５本の毛を、治療４日後にそれらマウスから採取したフォイルゲン（Feulgen）染色試料から切り取った。図１３は、対照マウス（パネルＡ）、ＶＰ−１６−２１３を受容したマウス（パネルＢ）、ＶＰ−１６−２１３の投与前にマイソプロストールをｓｃで受容したマウス（パネルＣ）及びＶＰ−１６−２１３の投与前にマイソプロストールを局所的に受容したマウス（パネルＤ）の毛からの髄質細胞の光学顕微鏡写真図を示すものである。髄質細胞数は各治療群について平均した。これまでに試験した全化学療法剤についての結果を表Ｉに示す。マイソプロストールは、ＰＧを局所投与したとき、ＤＯＸ、ＣＴＸ、ＶＰ−１６−２１３、メトトレキセート、マイトマイシンＣにより引き起こされる損傷から髄質細胞を、またＨＵ治療マウスについて髄質細胞を有意に（ｐ≦０．０１）保護した。マイソプロストールは、全てのケースで５−ＦＵが与えられたマウスの値は他の化学療法剤についての場合よりかなり低かったけれども、ＡＲＡ−Ｃ、ブレオマイシン、ＨＵ（マイソプロストールは全身的に与えられた）、シスプラチン、カーボプラチン又は５−ＦＵで治療されたマウスの髄質細胞を保護しなかった。本明細書に与えられた試験結果は、種々の化学療法剤の投与に先立ってマイソプロストール及び／又は他のＥ−タイプのプロスタグランジンを投与すると、それら化学療法剤により引き起こされる損傷又は細胞死からの種々の正常細胞の保護が得られることを証明している。Ｅ−タイプのプロスタグランジンが全ていずれの化学療法剤によっても引き起こされる損傷又は細胞死から全ての正常細胞を保護する際に有効であるとは限らないだろうけれども、当業者は、本明細書の開示と方法論を顧慮すれば、どのＥ−タイプのプロスタグランジンが異なる化学療法剤により引き起こされる損傷又は細胞死からどの組織を保護するのに有効であるかを決定することができるであろう。ここに開示される試験の結果から、更に、１種より多いＥ−タイプのプロスタグランジンの組み合わせ投与は、１）所定の組織内における何らかのＥ−タイププロスタグランジンの受容体の存在；２）所定の組織内の受容体のタイプ；及び３）化学療法剤の組み合わせに依存する損傷及び／又は細胞死から正常細胞を保護するに当たって、１種のそのようなＥ− タイププロスタグランジンの投与と少なくとも同じくらい有利であろうことが当然に考えられ得る。正常細胞の保護を誘発するそのようなＥ−タイププロスタグランジンは、本明細書に開示されるように、化学療法による治療を受けている患者には、そのような組織の保護が副作用を減少させ、そしてそのような患者の生活の質を高め、かつ延命すると言う点で有利であろう。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年７月１日【補正内容】請求の範囲１．哺乳類生物の非胃系組織を保護するための薬剤を癌治療の目的から投与される細胞毒性のある試剤（１種又は複数種）の投与に先立って投与することにより、そのような組織をそのような細胞毒性試剤（１種又は複数種）に由来する損傷から保護するための該薬剤を製造するための、マイソプロストール及びＰＧＥ₁ から選ばれるＥ−タイプのプロスタグランジンの使用（原請求の範囲第１項に相当：補正あり）。（原請求の範囲第２項は削除）２．Ｅタイプのプロスタグランジンがマイソプロストールである、請求の範囲第１項に記載の使用（原請求の範囲第３項に相当：補正あり）。３．Ｅタイプのプロスタグランジンを約０．０１μｇ／ｋｇ／日〜約５０μｇ／ｋｇ／日の剤量で投与する、請求の範囲第２項に記載の使用（原請求の範囲第４項に相当：補正あり）。４．Ｅタイプのプロスタグランジンを局所投与する、請求の範囲第２項に記載の使用（原請求の範囲第５項に相当：補正あり）。５．Ｅタイプのプロスタグランジンを細胞毒性試剤（１種又は複数種）の投与１〜３時間前に投与する、請求の範囲第１項に記載の使用（原請求の範囲第６項に相当：補正あり）。６．Ｅタイプのプロスタグランジンを局所投与する、請求の範囲第１項に記載の使用（原請求の範囲第７項に相当：補正あり）。７．Ｅタイプのプロスタグランジンを細胞毒性試剤（１種又は複数種）の投与１〜３時間前に投与する、請求の範囲第２項に記載の使用（原請求の範囲第８項に相当：補正あり）。（原請求の範囲第９〜１６項は削除）８．該治療の目的から投与されるリンパ球減少性の細胞毒性がある試剤により治療されている哺乳類生物におけるリンパ球の減少を抑制するための薬剤を製造するための、ＰＧＥ₁及びマイソプロストールよりなる群から選ばれるＥ−タイプのプロスタグランジンの使用（原請求の範囲第１７項に相当：補正あり）。９．Ｅタイプのプロスタグランジンを細胞毒性のある試剤（１種又は複数種）の投与１〜３時間前に投与する、請求の範囲第８項に記載の使用（原請求の範囲第１８項に相当：補正あり）。１０．哺乳類生物の正常組織の細胞を保護するための薬剤を癌治療の目的から投与される細胞毒性のある試剤（１種又は複数種）の投与に先立って投与することにより、そのような細胞をそのような細胞毒性試剤（１種又は複数種）に由来する細胞死から保護するための該薬剤を製造するための、ＰＧＥ₁及びマイソプロストールから選ばれるＥ−タイプのプロスタグランジンの使用（原請求の範囲第１９項に相当：補正あり）。１１．Ｅタイプのプロスタグランジンを細胞毒性のある試剤（１種又は複数種）の投与約１〜約３時間前に投与する、請求の範囲第１０項に記載の使用（原請求の範囲第２０項に相当：補正あり）。１２．癌治療の目的から投与される細胞毒性のある試剤（１種又は複数種）により哺乳類生物に誘発される脱毛を予防するための薬剤を製造するための、細胞毒性試薬（１種又は複数種）のＰＧＥ₁及びマイソプロストールから選ばれるＥ −タイプのプロスタグランジンの使用（原請求の範囲第１２項に相当：補正あり）。１３．Ｅタイプのプロスタグランジンがマイソプロストールである、請求の範囲第１２項に記載の使用（原請求の範囲第２２項に相当：補正あり）。１４．ＥタイプのプロスタグランジンがＰＧＥ₁である、請求の範囲第１２項に記載の使用（原請求の範囲第２３項に相当：補正あり）。１５．哺乳類生物の組織を保護するための薬剤を癌治療の目的から投与される細胞毒性のある試剤（１種又は複数種）の投与に先立って投与することにより、そのような組織をそのような細胞毒性試剤（１種又は複数種）に由来する損傷から保護するための該薬剤を製造するための、マイソプロストール及びＰＧＥ₁の使用（原請求の範囲第２４項に相当：補正あり）。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．化学療法剤の投与に先立って治療上有効な量のＥ−タイプのプロスタグランジンを投与することから成る、哺乳類生物の非胃系組織をそのような化学療法剤に由来する損傷から保護する方法。２．化学療法剤の投与に先立って、次の：１６，１６−ジメチルＰＧＥ₂；及びＰＧＥ₁より成る群から選ばれるＥ−タイプのプロスタグランジンを投与することから成る、組織をそのような化学療法剤に由来する損傷から保護する、請求の範囲第１項に記載の方法：但し、上記の式においてＲは水素又は１〜６個の炭素原子を有する低級アルキルを表し；Ｒ₁は水素、ビニル又は１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルを表し、そして波線はＲ−又はＳ−立体化学配置を表し；Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は水素、若しくは１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルを表すか、又はＲ₂とＲ₃とが炭素Ｙと一緒になって４〜６個の炭素原子を有するシクロアルケニルを形成しているか、或いはＲ₃ とＲ₄とが炭素Ｘ及びＹと一緒になって４〜６個の炭素原子を有するシクロアルケニルを形成しており、ここでＸ−Ｙ結合は飽和であってもよいし、或いは不飽和であってもよい。３．Ｅタイプのプロスタグランジンがマイソプロストールである、請求の範囲第２項に記載の方法。４．Ｅタイプのプロスタグランジンを約０．０１μｇ／ｋｇ／日〜約５０μｇ／ｋｇ／日の剤量で投与する、請求の範囲第３項に記載の方法。５．Ｅタイプのプロスタグランジンを局所投与する、請求の範囲第３項に記載の方法。６．Ｅタイプのプロスタグランジンを化学療法剤の投与１〜３時間前に投与する、請求の範囲第２項に記載の方法。７．Ｅタイプのプロスタグランジンを局所投与する、請求の範囲第２項に記載の方法。８．Ｅタイプのプロスタグランジンを化学療法剤の投与１〜３時間前に投与する、請求の範囲第２項に記載の方法。９．Ｅタイプのプロスタグランジンが（±）メチル７−［３α−ヒドロキシ −２β−（４Ｒ−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｅ，５Ｅ，７Ｅ−ノナトリエニル）−５−オキソ−１α−シクロペンチル］−４Ｚ−ヘプテノエート又は１６，１６−ジメチルＰＧＥ₂である、請求の範囲第２項に記載の方法。１０．Ｅタイプのプロスタグランジンを約０．０１μｇ／ｋｇ／日〜約５０μ ｇ／ｋｇ／日の剤量で投与する、請求の範囲第９項に記載の方法。１１．Ｅタイプのプロスタグランジンを局所投与する、請求の範囲第１０項に記載の方法。１２．Ｅタイプのプロスタグランジンを化学療法剤の投与１〜３時間前に投与する、請求の範囲第９項に記載の方法。１３．Ｅタイプのプロスタグランジンが１６，１６−ジメチルＰＧＥ₂である、請求の範囲第２項に記載の方法。１４．Ｅタイプのプロスタグランジンを約０．０１μｇ／ｋｇ／日〜約５０μ ｇ／ｋｇ／日の剤量で投与する、請求の範囲第１３項に記載の方法。１５．Ｅタイプのプロスタグランジンを局所投与する、請求の範囲第１３項に記載の方法。１６．Ｅタイプのプロスタグランジンを化学療法剤の投与１〜３時間前に投与する、請求の範囲第１３項に記載の方法。１７．治療上有効な量の、次の：１６，１６−ジメチルＰＧＥ₂；及びＰＧＥ₁より成る群から選ばれるＥ−タイプのプロスタグランジンを化学療法剤の投与に先立って投与することにより、リンパ球減少性化学療法剤により治療されている哺乳類生物におけるリンパ球の減少を抑制する方法：但し、上記の式においてＲは水素又は１〜６個の炭素原子を有する低級アルキルを表し；Ｒ₁は水素、ビニル又は１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルを表し、そして波線はＲ−又はＳ−立体化学配置を表し；Ｒ₂、Ｒ₃ 及びＲ₄は水素、若しくは１〜４個の炭素原子を有する低級アルキルを表すか、又はＲ₂とＲ₃とが炭素Ｙと一緒になって４〜６個の炭素原子を有するシクロアルケニルを形成しているか、或いはＲ₃とＲ₄とが炭素Ｘ及びＹと一緒になって４〜６個の炭素原子を有するシクロアルケニルを形成しており、ここでＸ−Ｙ結合は飽和であってもよいし、或いは不飽和であってもよい。１８．Ｅタイプのプロスタグランジンを化学療法剤の投与１〜３時間前に投与する、請求の範囲第１７項に記載の方法。１９．化学療法剤の投与に先立って治療上有効な量のＥ−タイプのプロスタグランジンを投与することから成る、哺乳類生物の正常組織の細胞を化学療法剤に由来する細胞死から保護する方法。２０．Ｅタイプのプロスタグランジンを化学療法剤の投与約１〜約３時間前に投与する、請求の範囲第１９項に記載の方法。２１．化学療法剤の投与に先立って治療上有効な量のＥ−タイプのプロスタグランジンを投与することから成る、化学療法剤により哺乳類生物に誘発される脱毛を予防する方法。２２．Ｅタイプのプロスタグランジンがマイソプロストールである、請求の範囲第２１項に記載の方法。２３．ＥタイプのプロスタグランジンがＰＧＥ₁である、請求の範囲第２１項に記載の方法。２４．化学療法剤の投与に先立って治療上有効な量の２種又はそれ以上のＥ− タイプのプロスタグランジンを投与することから成る、哺乳類生物の組織をそのような化学療法剤に由来する損傷から保護する方法。２５．投与されるＥタイプのプロスタグランジンがマイソプロストール及びＰＧＥ₁である、請求の範囲第２４項に記載の方法。