JPH10158195A - 配位結合を利用した薬物−高分子複合体製剤の調製方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 生体内で不安定な薬物を高分子運搬体に、
化学結合ではなく、金属イオンを介して配位的に結合さ
せることにより、簡易な薬物−高分子複合体の調整方法
を提供する。 【効果】 キレート能を有する薬物、該薬物を包含し
た運搬体または診断薬と、キレート能を有する高分子材
料とを金属イオンの存在下にて混合することにより、薬
物−高分子複合体が容易に得られ、しかも薬効発現が極
めて顕著である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、金属イオンを介した配
位結合による治療薬あるいは診断薬と高分子とからなる
薬物−高分子複合体製剤、および高分子との複合体化に
よる薬物の体内動態の修飾ならびにその徐放化とその作
用の増強に関する。

【０００２】

【従来の技術】一般に、薬物は、生体内半減期が短く、
水溶液として投与しただけでは期待する薬効は得られな
い。そのため、薬物の生体内での安定性を高める（例え
ば、薬物の血中寿命の延長など）とともに、ある一定の
期間、薬物を徐々に放出できるように製剤化すること
（薬物の徐放化）が望ましい。また、生体内に投与され
た薬物のうちの、活性を保持したまま標的作用部位に到
達した薬のみが治療および診断効果を示し、残りの部分
は無効となるか、場合によっては不必要な部位に作用し
て副作用の原因となることが知られている。そこで、薬
物を標的部位に選択的に作用させること（薬物のターゲ
ティング）によって、薬物治療法を有効に行わせること
が必要である。これらの目的のために、現在、高分子材
料を用いた薬物のドラッグデリバリーシステム的な修飾
が行われている。診断薬に関しても同じことがいえる。
すなわち、診断を行なおうとする標的部位への薬物のタ
ーゲティングはその診断効果をさらに高めることにな
る。したがって、もしも薬物にターゲティング能を付与
することができるならば、治療薬の薬理作用ならびに診
断薬の効果を発現させるための薬物投与量を低下できる
とともに、多量投与による治療薬で特に問題となってい
る薬物の副作用の低減も期待できる。

【０００３】運搬体（キャリアー）を用いた薬物体内動
態の修飾には、運搬体自身の体内での運命を知っておく
必要がある。例えば、生体に対する特別な親和性のない
合成および天然水溶性高分子の生体内分布はその分子量
ならびに電荷などの影響を強くうけること、糖鎖をもつ
水溶性高分子修飾によって薬物を特定臓器へ能動的ター
ゲティングできることなどが、これまでに報告されてい
る（例えば、Ｔａｋａｋｕｒａ，Ｙ．など、Ｐｈａｒ
ｍ．Ｒｅｓ，７巻、ｐ３３９、１９９０、Ｙａｍａｏｋ
ａ，Ｔ．など、Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、１巻、ｐ
７５，１９９３、およびＴａｋａｋｕｒａ，Ｙ．など、
Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．，１９
巻、ｐ３７７、１９９６など）。また、薬物運搬体とし
てよく用いられているリポソームなどもその表面を水溶
性高分子で修飾することにより、生体内分布が変化する
ことが報告されている（例えば、Ｗｏｏｄｌｅ，Ｍ．
Ｃ．など、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔ
ａ，１１１３巻，ｐ１７１、１９９２、および原 耕平
など、ターゲティング療法、医薬ジャーナル社、ｐ１２
５、１９８５など）。さらに、癌組織と正常組織との間
の解剖学的な違いを利用して、高分子化合物およびリポ
ソームなどの運搬体を用いた治療薬の癌組織への受動的
ターゲティングが試みられている（例えばＭａｅｄａ，
Ｈ．など、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒａｐ．Ｄｒｕｇ
Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓ．，６巻，ｐ１９３，１９８
９など）。

【０００４】以上のように、薬物運搬体としての高分子
材料あるいはリポソームと薬物、あるいは薬物含有リポ
ソーム、薬物含有高分子ミセル、あるいは薬物含有高分
子微粒子と高分子材料とを適当に組み合わせることによ
って、薬物を特定部位へターゲティングすることができ
ると考えられる。すでに、これらの高分子材料と薬物、
あるいは高分子材料と上述の薬物包含運搬体との複合体
化に関しては、非常に多くの報告が出されている。しか
し、これまでの複合体調製においては、ほとんど必ず、
薬物と高分子材料との両者の間に化学的な結合反応が行
われているため、その化学反応の煩雑さ、ならびに化学
結合による薬物の活性低下の問題が常につきまとう。こ
のことが、高分子との複合体化によって薬物の有効性が
高められるという多くの報告があるにもかかわらず、そ
れらの企業化を遅らせている一つの原因と考えられる。
そこで、このような化学結合反応を行うことなく、より
簡便に薬物と高分子とを結合させ、複合体を調製する方
法が望まれていた。

【０００５】これまでにも生体内分解吸収性あるいは非
分解吸収性の高分子材料を用いた治療薬の徐放化の報告
は多い（例えば、瀬崎 仁編集、医薬品の開発、第１３
巻、薬物送達法、廣川書店、１９８８年など）。例え
ば、代表的な生体内分解吸収性高分子であるグリコール
酸−乳酸共重合体などの高分子材料と薬物とを混合し、
薬物を徐放する試みがある。しかし、それらの高分子が
油溶性であるため、相溶性の不足から、水溶性薬物の徐
放化には問題があった。そこでその一つの解決策とし
て、生体内にて分解吸収する高分子ハイドロゲルを薬物
徐放用マトリックスとして利用しようという試みが報告
されている（例えば、Ｇｏｍｂｏｔｚ，Ｗ．Ｒ．など、
Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｃｍ．，６巻，ｐ３３
２，１９９５など）。しかしながら、この場合の薬物の
徐放期間は、基本的にはハイドロゲル内における薬物の
自己拡散性により決定されるため、その徐放性を広範囲
にわたって変化させることは困難である。このため、特
に、注射可能な小さなサイズをもつ高分子ハイドロゲル
においては、薬物の徐放化は事実上、不可能となる。そ
こで、何らかの方法によってハイドロゲル内へ薬物を固
定化し、ハイドロゲルマトリックスの分解性を制御する
ことによって、分解に伴って放出される薬物の徐放をコ
ントロールするアプローチが現実的である。ハイドロゲ
ルへの薬物の固定化には化学結合法と物理結合法とがあ
るが、前者の方法では、放出された薬物にマトリックス
フラグメントが化学的に結合しているため、薬効発現の
点からは後者の固定化法のほうが好ましい。後者の物理
結合を介した薬物の固定化の一例としては、薬物とハイ
ドロゲルマトリックスとの間の静電的相互作用を利用す
る試みがあり、注射可能な粒子状ハイドロゲルマトリッ
クスからのタンパク質薬物の徐放化が報告されている
（Ｔａｂａｔａ，Ｙ．など、Ｐｒｏｃ．４ｔｈ Ｊａｐ
ａｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＳＡＭＰ Ｓｙｍ
ｐｏｓｉｕｍ，ｐ２５，１９９５）。

【０００６】担体に固定化されたキレート配位子へ金属
イオンを介した結合力（配位結合力）により物質を相互
作用させ、その相互作用の強弱によって物質を分離精製
しようとする金属アフィニティクロマトグラフィと呼ば
れる方法がある（例えば、Ｐｏｒａｔｈ，Ｊ．など，Ｎ
ａｔｕｒｅ，２５８巻，ｐ５９８，１９７５など）。例
えば、ペプチド、タンパク質、あるいは核酸などは、そ
れ自体に金属イオンに対するキレート能をもつため、あ
らかじめ金属イオンにキレートさせておいたアフィニテ
ィカラムにそれらの物質を単に流すことによって物質は
担体に吸着する。次に、ｐＨあるいはイオン強度の異な
る溶液をカラム内に流すことにより、吸着した物質は容
易に担体より脱着される。この場合、カラムと物質との
間のアフィニティは、物質と金属イオンとの組み合わせ
によって変化する。この方法により、すでに種々の生理
活性タンパク質などの分離精製が行われるとともに、脱
離された後のタンパク質の生物活性が保持されているこ
とが報告されている（例えば、Ｖｉｃｔｏｒ，Ｇ．な
ど，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５２巻，ｐ５９３
４，１９７７など）。

【０００７】英国特許１９７２年１−３８８−５８０に
は、金属アフィニティ結合力を薬物の固定化とその徐放
に利用するという記載があるが、これは、水不溶性の高
分子ハイドロゲルに対するものであり、キレート能をも
つ水溶性の高分子物質を用いた応用（例えば、薬物の血
中寿命の延長、薬物のターゲティングなど）については
示唆されていない。さらに、この特許では、キレート能
をもつ高分子物質、薬物、および金属イオンの３者を同
時に混合する方法によって作製された高分子ハイドロゲ
ルをホモジェナイズすることによって、それらの体内へ
の注射投与が可能であるとの記述がある。しかしなが
ら、あらかじめ作製しておいた注射可能なサイズをもつ
高分子ハイドロゲル（例えば、粒子状、マイクロゲル
状、および流動性固体状の高分子ハイドロゲルなど）を
金属イオンの存在下にて薬物と混合することによって、
簡易に薬物が固定化された高分子ハイドロゲルの作製が
可能となることについては記載されていない。また、適
用できる薬物として、分子量が３，０００以上の薬物、
例えば、ホルモン、酵素、インターフェロン誘導用のＲ
ＮＡなどが挙げられているが、本発明においては、後述
するように、それらの薬物を含み、あるいはそれ以外の
治療薬、治療薬を包含した薬物運搬体、および診断薬に
対しても適用拡大が可能である。

【０００８】金属イオンを介して高分子ハイドロゲルを
作製することに関する報告があるが（例えば、Ｂｏｎａ
ｃｃｏｒｓｉ，Ｆ．など，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｏｌｙｍｅｒ
ｉｃＭａｔｅｒ．，１８巻，ｐ１６５，１９９２な
ど）、得られたハイドロゲルへの薬物の固定化、および
その徐放化への応用については示唆されていない。

【０００９】診断薬に関しては、ジエチレントリアミン
ペンタ酢酸（以下ＤＴＰＡという）残基などのキレート
配位子をポリエチレングリコール、デキストラン、ある
いは血清アルブミンなどの水溶性高分子に導入し、ガド
リニウムなどをキレートさせた後、核磁気共鳴イメージ
（以下ＭＲＩという）の増感剤として利用するという報
告があり（例えば、Ｄｅｓｓｏｒ，Ｔ．Ｓ．など、Ｊ．
Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ Ｉｍａｇｉｎ
ｇ，４巻，ｐ４６７，１９９４など）、すでに、配位結
合が診断薬分野に応用されている。しかしながら、これ
は単にＭＲＩ増感効果の高い金属イオンを水溶性高分子
に導入するという報告であり、これらの高分子−金属増
感剤に金属イオンを介して、さらに生理活性物質も結合
した薬物−増感性金属−高分子複合体を作製し、診断と
同時に治療にも利用しようということに関しては記載さ
れていない。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、生体内で不
安定な薬物を高分子運搬体に化学結合させるのではな
く、金属イオンを介して配位的に結合させることによっ
て、薬物−高分子複合体の簡易な製法を提供する。これ
らの配位結合を利用して調製された薬物−高分子複合体
は、従来の化学結合法によって作製されてきた薬物−高
分子複合体と同様に、薬物の血中寿命の延長およびその
ターゲティング、ならびに薬物の徐放化を可能とする。

【００１１】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の問
題点を解決するために鋭意検討した結果、キレート配位
子を有する高分子材料あるいはそれ自身でキレート能を
有する高分子材料と薬物とを金属イオンの存在下に単に
混合することにより、薬物と高分子との複合体を容易に
得ること、さらに、得られた複合体が薬物体内動態の修
飾ならびに薬物の徐放化などの特性を有し、従来の化学
結合法により作製されてきた薬物−高分子複合体と同様
に、薬効発現が極めて有利となることを見出し、本発明
を完成した。

【００１２】以下、本発明の技術的構成を説明する。本
発明の薬物−高分子複合体製剤は以下の方法によって得
ることができる。アミノ基あるいは水酸基をもつ高分子
のジメチルホルムアミド溶液にＤＴＰＡ酸無水物を加
え、高分子にキレート能をもつＤＴＰＡ残基を導入す
る。反応後、水に対する透析を行って高分子に結合して
いないＤＴＰＡを除去し、凍結乾燥により金属キレート
配位子のＤＴＰＡ残基をもつ高分子を得る。次に、これ
らのＤＴＰＡ残基導入高分子と金属イオンとを混合し、
室温にて撹拌する。混合物をゲル濾過することにより、
結合していない金属イオンを分離除去し、金属アフィニ
ティ結合力を有する水溶性の高分子を作製する。この水
溶性高分子をタンパク質薬物を含む水溶液内に投入す
る。得られた混合物をゲル濾過することにより、結合し
ていない薬物を分離除去し、水溶性のタンパク質薬物−
高分子複合体を得る。タンパク質薬物と金属イオンとを
同時にＤＴＰＡ残基導入高分子と混合、室温にて撹拌す
ることによっても、同様に水溶性のタンパク質薬物−高
分子複合体を得ることができる。一方、ＤＴＰＡ残基を
もつ高分子を化学架橋すること、あるいはあらかじめ作
製しておいた架橋高分子ハイドロゲル粒子へＤＴＰＡ残
基を導入することによって、金属キレート配位子を有す
る高分子ハイドロゲル粒子を作製する。これらの高分子
ハイドロゲル粒予を金属イオン水溶液に浸漬させること
によって、金属キレートを形成させた後、遊離金属イオ
ンを除去し、金属アフィニティ結合力を有する高分子ハ
イドロゲル粒子を作製する。次に、これらの高分子ハイ
ドロゲル粒子をタンパク質薬物を含む水溶液中に投入す
る。得られたハイドロゲルを水洗することにより、結合
していない薬物を分離除去し、タンパク質薬物が固定化
された高分子ハイドロゲル粒子を得る。

【００１３】本発明に用いる薬物としては、それ自体に
キレート能をもつ物質であれば、その分子量ならびに種
類に関係はない。例えば、抗ガン剤、抗菌剤、抗炎症剤
などの低分子治療薬、インターフェロン、インターロイ
キン、種々の酵素薬物、種々の分化因子、および増殖因
子などのぺプチドおよびタンパク質薬物、ムラミルジペ
プチドあるいはポリＩ−Ｃなどの免疫を賦活する作用を
もつ薬物、インターフェロン誘導用ＲＮＡ、さらにプラ
スミドおよびアンチセンスＤＮＡなどの遺伝子治療に用
いられる核酸薬物などを用いることができる。得られた
薬物−高分子複合体の安定性の点から、薬物としては高
分子量治療薬の使用が好ましい。また、治療薬単独では
なく、薬物を含有したリポソーム、高分子ミセル、ある
いは高分子微粒子などの薬物包含運搬体、ならびに超音
波造影剤、ＭＲＩ増感剤などの診断薬に対しても本発明
の複合体調製方法は適用可能である。

【００１４】本発明に用いる高分子材料としては、特に
限定されるものではないが、それ自身に金属に対するキ
レート能をもつポリエチレングリコール（以下ＰＥＧと
いう）、ポリエチレンイミン、ポリアリルアミン、ある
いは核酸などが挙げられる。しかしながら、もし高分子
材料がキレート能の弱い、あるいはそれをもたない場合
には、キレート配位子を分子内に積極的に導入すること
によって本発明の目的に用いることができる。キレート
能をもたないあるいは弱い高分子として、例えば、ポリ
ビニルアルコール、ポリアミノ酸、ポリアクリル酸、あ
るいは多糖類などが挙げられるが、これらの高分子は、
その側鎖に金属キレート残基を導入することによって本
発明に用いることができる。さらに、ＰＥＧ分子の末端
に金属キレート残基を導入することによって、ＰＥＧの
末端のみを用いたシンプルな薬物との複合化も可能であ
る。本発明では、これらの高分子材料を水溶液のまま、
あるいは化学架橋により得られるハイドロゲルとの２つ
の形態で用いることができる。前者は薬物あるいは薬物
含有運搬体との複合体化に用いられ、それらの血中寿命
の延長ならびに特定臓器へのターゲティングなどを目的
としている。一方、後者は薬物の固定化のための担体と
して用いられる。あらかじめ作製しておいた生体内分解
吸収性の高分子材料からなる注射可能な形状をもつ高分
子ハイドロゲルに、金属アフィニティ結合力を利用する
とことによって薬物を固定化する。ハイドロゲル本体の
分解とともに、薬物は徐放化されていく。

【００１５】高分子材料へ化学的に導入されるキレート
配位子としては、カルボキシル基、カルボニル基、シア
ノ基、アミノ基、イミダゾール基、チオール基、あるい
は水酸基など、金属イオンを配位結合する化学構造をも
つものであれば、特に限定されるものではない。例え
ば、イミノジ酢酸、ニトリロトリ酢酸、エチレンジアミ
ンテトラ酢酸（以下ＥＤＴＡという）、ＤＴＰＡ、トリ
エチレンテトラミンヘキサ酢酸、Ｎ−ヒドロキシエチル
エチレンジアミノトリ酢酸、エチレングリコールジエチ
ルエーテルジアミンテトラ酢酸（以下ＥＧＤＴＡとい
う）、およびエチレンジアミンテトラプロピオン酸など
のコンプレクサン型配位子、ジエチレントリアミン、ト
リエチレンテトラミン、あるいはα−アミノ酸（グルタ
ミン酸、リジン、アスパラギン酸、シスチン、ヒスチジ
ン、およびチロシンなど）などが挙げられる。これらの
キレート配位子の高分子への導入反応については、種々
の方法が考えられる。例えば、水酸基を分子内にもつ高
分子の場合には、塩化シアヌル法、臭化シアン法、ある
いはエピクロルヒドリン法などで水酸基とキレート配位
子のアミノ基との間に化学結合を形成させる。また、多
糖類に対しては、これら以外に、過ヨウ素酸酸化法によ
る結合反応も有効である。水酸基をカルボニルイミダゾ
ールにより活性化した後、配位子のカルボキシル基ある
いはアミノ基と結合させることも可能である。カルボキ
シル基をもつ高分子では、カルボジイミド、Ｎ−ヒドロ
キシスクシンイミドとカルボジイミド、クロロ炭酸エチ
ルなどを用いたカルボキシル基と配位子のアミノ基との
間の結合反応、アミノ基をもつ高分子材料に対してはカ
ルボジイミドなどを用いた配位子のカルボキシル基との
間の結合反応、ならびに塩化シアヌルなどを用いた配位
子とアミノ基との間の結合反応なども、キレート配位子
の高分子材料への導入反応のために有用である。上述の
結合反応に加えて、ＤＴＰＡ酸無水物、およびＥＤＴＡ
のアミノベンジルあるいはイソチオシアノベンジル誘導
体などは、混合するだけで容易に高分子のアミノ基ある
いは水酸基などと反応し、キレート配位子を高分子鎖に
導入することができるため好ましい。その他、キレート
能に優れた２、２’−ジピリジン、１、１０−フェナン
トロリン残基の高分子への導入も有効である。以上のよ
うに、キレート能をもつ配位子残基を高分子鎖へ直接導
入する方法に加えて、キレート配位残基と高分子との間
にスペーサーを導入することもできる。例えば、まず、
アミノ基を両末端にもつ、Ｎ^１，Ｎ^１−ビス（３−アミ
ノプロピル）１、３−プロピルジアミン、ビス（３−ア
ミノプロピル）アミン、炭素鎖長の異なる脂肪族ジアミ
ン、あるいはリジンのエステル誘導体などを高分子鎖へ
導入しておく。その後、未反応の片末端アミノ基へキレ
ート配位子を導入し、スペーサーを介してキレート配位
子が導入された高分子材料を調製する。上述の例以外
に、分子両末端に水酸基、カルボキシル基などの化学反
応性官能基をもつ他のスペーサー分子を利用することも
可能であり、上述の反応を組み合わせることによって、
スペーサーを介在したキレート配位残基導入高分子を合
成できる。なお、配位子／高分子材料の配合比は特に限
定されるものではないが、１／１０００から１／１０の
配合比が好ましい。

【００１６】使用される金属としては、生体に安全であ
れば、特に限定されるものではなく、２価あるいはそれ
以上の原子価をもつ遷移およびアルカリ土類金属など、
高分子に導入されたキレート配位残基と安定なキレート
を形成するものであればよい。金属キレートの安定性お
よびその毒性の観点から、銅、亜鉛、マンガン、あるい
は鉄などが好ましい。これらの金属の生体毒性に関して
は多くの報告（例えば、銅と衛生、財団法人日本銅セン
ター発行、あるいは糸川嘉則、Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｆｒ
ｏｎｔｉｅｒ、３巻，ｐ４２５，１９９２など）があ
り、毒性のきわめて高いと考えられている銅のＬＤ_５０
値は＞４、０００ｍｇ／ｋｇ（マウス経口）である。本
研究の目的に使用される銅の量は１〜１．５ｍｇ／ｋｇ
程度であり、文献値に比較して１／１０００以下であ
る。ちなみに、日本人では毎日銅を０．７８〜２．５４
ｍｇ／ｋｇ摂取していることが知られており、使用金属
イオンの生体毒性は問題にならないと考えられる。それ
らの金属は塩化物、硫酸塩、あるいは酢酸塩などとして
薬物−高分子複合体の調製に使用される。

【００１７】キレート能を有する高分子物質または化学
的に導入されたキレート配位子を有する高分子物質を金
属イオンと混合し金属キレートを形成させる条件は、特
に限定されるものではないが、用いる高分子物質の濃度
として０．１〜５０ｗｔ％、混合温度としては４〜５０
℃が望ましい。また、溶液のｐＨは３〜１０が望まし
い。必要に応じて、水酸化ナトリウムあるいは塩化水素
水溶液を添加することによって反応水溶液のｐＨを調製
することができる。金属イオンの添加量はキレート配位
子に対して０．１〜１０倍等量が望ましい。金属キレー
トを形成した金属アフィニティ結合力を有する高分子物
質と薬物との混合条件は、特に限定されるものではない
が、薬物の添加量は金属キレート形成配位子に対して１
〜１０倍等量が望ましい。また、その混合温度としては
４〜５０℃、溶液のｐＨは３〜１０が望ましい。必要に
応じて、水酸化ナトリウムあるいは塩化水素水溶液を添
加することによって反応水溶液のｐＨを調製することが
できる。

【００１８】用いる薬物−高分子複合体は、水溶性およ
び水不溶性のいずれでもよい。その形状も水溶液状、マ
イクロゲル状、粒子状、あるいは流動性固体状など、特
に限定されるものではない。とりわけ、前３者は、薬物
あるいは薬物含有運搬体の血中寿命の延長ならびにその
特定臓器へのターゲティングなどの用途に適している。
また、後２者の水不溶性の複合体は薬物の徐放化に適し
ている。すなわち、水不溶性の高分子担体に金属イオン
を介して固定化された薬物は、主に、担体自身の分解に
よって放出される。担体の分解とともに水可溶化された
高分子フラグメントとともに薬物が担体より遊離、放出
される。薬物の放出パターンは高分子担体の分解パター
ンにより制御できる。

【００１９】本発明の薬物−高分子複合体製剤は、その
まま用いてもよく、さらには緩衝液、生理食塩水、注射
用溶媒などの希釈剤に溶解、あるいは分散してＡｓｓａ
ｙあるいは治療、診断に用いることもできる。さらに、
凍結乾燥後、使用時に希釈剤に溶解、あるいは分散して
から用いてもよい。

【００２０】本発明の金属キレート配位結合を利用した
薬物−高分子複合体製剤は次の優れた特徴をもつ。 １）薬物と高分子とを単に混合するだけで複合体が作製
できる。 ２）薬物と高分子とのアフィニティは薬物、金属イオ
ン、およびキレート配位子の３者の組み合わせによって
調節できる。 ３）薬物単独に対してだけではなく、薬物と運搬体とか
らなる製剤に対しても適用可能である。

【００２１】

【実施例】以下、実施例を挙げて本発明について説明す
るが、本発明は以下の実施例に限定されるものではな
い。

【００２２】

【実施例１】１１０ｍｇのプルラン（分子量２００，０
００、東京化成工業株式会社製）を含む１０ｍｌのジメ
チルスルホキシド溶液中へ３．３，６．６，１３．２，
２６．５，６６．２，および１３２．４ｍｇのＤＴＰＡ
酸無水物（株式会社同仁化学研究所製）と４．９７ｍｇ
の４−ジメチルアミノピリジン（ナカライテスク株式会
社製）を加えた。この混合溶液を４０℃、２４時間、撹
拌し、プルランの水酸基へＤＴＰＡ残基を導入した。反
応後、２日間の水に対する透析と凍結乾燥を行い、ＤＴ
ＰＡ残基導入プルランを得た。ＤＴＰＡ残基の導入率を
伝導度滴定より求めたところ、上述のＤＴＰＡ酸無水物
の添加量の増加とともに、導入率は０．０６２，０．１
２，０．２２，０．３４，０．５３，および０．７３μ
ｍｏｌｅ／ｍｇプルランと増加した。反応前後における
プルランの分子量変化をゲルパーミエーションクロマト
グラフィ（東ソー株式会社製、カラム：ＴＳＫｇｅｌ３
０００ＰＷＸＬ＋ＴＳＫｇｅｌ６０００ＰＷＸＬ、カラ
ム温度：４０℃、溶出液：０．２Ｍリン酸緩衝溶液（ｐ
Ｈ６．８）、溶出速度：０．９ｍｌ／ｍｉｎ、検出器：
示差屈折計）を用いて評価したところ、ＤＴＰＡ導入反
応によるプルランの分子量変化は認められなかった。こ
の結果は、ＤＴＰＡ酸無水物によるプルラン分子間の架
橋反応は生じておらず、この反応により側鎖にＤＴＰＡ
残基の導入されたプルランが得られていることを示して
いる。

【００２３】

【実施例２】用いる水溶性高分子がポリビニルアルコー
ル（以下ＰＶＡという、ユニチカ株式会社製、重量平均
分子量７０，０００、ケン化度９９．８％）である以外
は、実施例１と同様の方法でＤＴＰＡ残基導入ＰＶＡを
作製した。加えたＤＴＰＡ酸無水物は６．６，１３．
２，２６．５，４２．４，および５３．０ｍｇである。
ＤＴＰＡ残基導入率はＤＴＰＡ酸無水物の添加量の増加
とともに、０．１５，０．２１，０．２６，０．３９，
および０．６２μｍｏｌｅ／ｍｇＰＶＡと増加した。Ｄ
ＴＰＡ残基導入反応によるＰＶＡの分子量変化は認めら
れなかった。

【００２４】

【実施例３】実施例１において作製したＤＴＰＡ残基導
入プルラン（ＤＴＰＡ残基導入率：０．０６２μｍｏｌ
ｅ／ｍｇ）５ｍｇを０．１２５ｍｇ／ｍｌ濃度の硫酸銅
水溶液へ溶解させた。３０分間の撹拌の後、混合物をゲ
ル濾過し（Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ−Ｓ２００、０．５ｃｍ
内径，３６ｃｍ長のカラム、溶出液ＰＢ、溶出速度０．
３３ｍｌ／ｍｉｎ）、遊離銅イオンを反応系から分離除
去した。銅イオンをキレートしているＤＴＰＡ残基導入
プルランの銅キレート量および糖質量（プルラン量）
は、それぞれ、原子吸光法およびアンスロン−硫酸法に
よって定量した。溶出曲線によれば、プルランの溶出位
置と銅イオンの溶出位置が一致した。ゲル濾過後のＤＴ
ＰＡ残基導入プルランの回収率は９５％であり、銅イオ
ンのキレート結合率は１．２０個／ＤＴＰＡ残基であっ
た。なお、ＤＴＰＡ残基の導入されていない元のプルラ
ンを同様に硫酸銅水溶液へ溶解させたところ、銅イオン
のプルランへの結合は認められなかった。このことは、
銅イオンが金属配位子であるＤＴＰＡ残基を介してキレ
ートされていることを示している。

【００２５】

【実施例４】０．２２ｇの生体内分解吸収性アミロペク
チン（ナカライテスク株式会社製、ポテトより精製）を
２ｍｌの水へ投入後、８０℃、数分間の撹拌により、ア
ミロぺクチン水溶液を調製した。この水溶液を４００ｍ
ｌのオリーブ油（和光純薬株式会社製）に加え、２５
℃、４５０ｒｐｍに条件にて、１時間撹拌することによ
って、Ｗ／０型エマルジョンを調製した。次に、このエ
マルジョン中へアセトンを加え、アミロペクチンを沈澱
固化させた。粒子をアセトンにより遠心洗浄（２５℃、
３、０００ｒｐｍ、１０分間）することによってアミロ
ペクチン粒子を得た。このアミロペクチン粒子（６６．
６ｍｇ）を１０ｍｍｏｌｅのエチレングリコールジグリ
シジルエーテル（デナコールＥＸ−８１０、ナガセ化成
工業株式会社製）を溶解させたアセトン／１Ｎ水酸化ナ
トリウムの等量混合溶液１０ｍｌ内へ投入した。３０℃
にて、３時間、撹拌条件下、架橋反応を行わせた後、さ
らにアセトン／０．１Ｎ水酸化ナトリウムの等量混合溶
液１０ｍｌ中で、４０℃にて２時間、処理した。アセト
ン／水の等量混合溶液と、ジメチルスルホキシドにて粒
子を遠心洗浄し、最終的に架橋ハイドロゲル粒子をジメ
チルスルホキシド中にて膨潤させた。架橋ハイドロゲル
粒子の３７℃、水中での膨潤操作前後の粒子径変化より
粒子の含水率を評価したところ、９５．６％であった。
また、水膨潤時における粒子径は２０〜１００μｍであ
った。膨潤架橋ハイドロゲル粒子を含むジメチルスルホ
キシド溶液中へ１．４６ｍｇのＤＴＰＡ酸無水物および
１０．０ｍｇの４−ジメチルアミノピリジンを加え、４
０℃にて１、３、６、１２、および２４時間反応させ
た。反応終了後、架橋ハイドロゲル粒子を水にてよく遠
心洗浄した。架橋アミロペクチンハイドロゲル粒子への
ＤＴＰＡ残基の導入率を伝導度滴定より求めたところ、
ＤＴＰＡ残基導入率は反応時間の増加とともに、０．０
６３，０．０６９，０．０８８，０．１０，および０．
１２μｍｏｌｅ／ｍｇ乾燥粒子と増加した。ハイドロゲ
ルの含水率はＤＴＰＡ残基の導入とともに９５．６から
９７．５％へと増加した。ＤＴＰＡ残基導入反応による
粒子径の変化はほとんど見られなかった。

【００２６】

【実施例５】実施例４において作製したＤＴＰＡ残基を
もつ架橋アミロペクチンハイドロゲル粒子（ＤＴＰＡ残
基導入率：０．１０μｍｏｌｅ／ｍｇ乾燥ハイドロゲ
ル）の乾燥重量６ｍｇを濃度の異なる硫酸銅水溶液へ浸
漬後、４０℃にて、１時間、放置した。水溶液中の銅イ
オン濃度をキレート滴定により定量し、スキャッチャー
ド解析を行ったところ、ハイドロゲル粒子への銅イオン
のキレート率は１．５０個／ＤＴＰＡ残基であった。

【００２７】

【実施例６】実施例１において作製したＤＴＰＡ残基導
入プルラン（ＤＴＰＡ残基導入率：０．０６２μｍｏｌ
ｅ／ｍｇプルラン）の５ｍｇ／ｍｌ濃度の水溶液へ、最
終濃度が１０μｇ／ｍｌとなるようにヒト遺伝子組み換
え型インターフェロンαＡ／Ｄ（以下ＩＦＮという）水
溶液を（２ｘ１０^７国際単位（ＩＵ）／１００μｇｐｒ
ｏｔｅｉｎ／ｍｌ）投入した。次に、この混合水溶液へ
最終濃度が１．９ｍｇ／ｍｌとなるように塩化亜鉛水溶
液を加えた。室温にて１時間撹拌し、ＩＦＮを亜鉛イオ
ンを介して配位結合にてＤＴＰＡ残基導入プルランに結
合させた。反応前後におけるＩＦＮの分子量変化をゲル
パーミエーションクロマトグラフィ（東ソー株式会社
製、カラム：ＴＳＫｇｅｌ３０００ＰＷＸＬ＋ＴＳＫｇ
ｅｌ６０００ＰＷＸＬ．カラム温度：４０℃、溶出液：
０．０５Ｍリン酸緩衝溶液（ｐＨ６．８）＋０．３Ｍ塩
化ナトリウム水溶液、溶出速度：０．９ｍｌ／ｍｉｎ、
検出器：蛍光分光光度計（励起波長２７８ｎｍ、発光波
長３４８ｎｍ））を用いて評価した。コントロールとし
て、ＩＦＮ、ＤＴＰＡ残基導入プルラン、およびＩＦＮ
とＤＴＰＡ残基導入プルランとの混合物を用いた。その
結果を図１に示す。

【００２８】

【図１】

【００２９】亜鉛イオンの存在下において、ＩＦＮとＤ
ＴＰＡ残基導入プルランとを混合することによって、Ｉ
ＦＮ自体の蛍光ピークが短時間側にシフトした。しかし
ながら、亜鉛イオンが存在しない場合には、ＩＦＮピー
クの移動は認められなかった。なお、ＤＴＰＡ残基導入
プルラン自身には蛍光吸収は見られなかった。亜鉛イオ
ンの代わりに銅イオンを用いて同様の検討を行ったが、
銅イオンの添加によるＩＦＮピークの移動は認められな
かった。これらの結果は、亜鉛イオンを介してＩＦＮと
ＤＴＰＡ残基導入プルランとが配位結合し、ＩＦＮの分
子サイズが大きくなっていること、また金属イオンの種
類によって、ＤＴＰＡ残基導入プルランとＩＦＮとの配
位結合力が変化することを示している。この例が示すよ
うに、水溶性高分子とタンパク質とを単に水中で混ぜ合
わせることによって、金属イオンを介した配位結合を通
した複合体が容易に形成できることがわかる。

【００３０】

【実施例７】実施例２において作製したＤＴＰＡ残基導
入ＰＶＡ（ＤＴＰＡ残基導入率：０．１５μｍｏｌｅ／
ｍｇＰＶＡ）５ｍｇ／ｍｌ濃度の水溶液へ、最終濃度が
１０μｇ／ｍｌとなるようにリゾチーム（以下Ｌｙｚと
いう，ナカライテスク株式会社製）水溶液を投入した。
次に、この混合水溶液へ最終濃度が１．９ｍｇ／ｍｌと
なるように硫酸銅水溶液を加えた。室温にて１時間撹拌
し、銅イオンを介した配位結合にてＬｙｚをＤＴＰＡ残
基導入ＰＶＡに結合させた。反応前後におけるＬｙｚの
分子量変化を実施例６に記載のゲルパーミエーションク
ロマトグラフィを用いて評価した。コントロールとし
て、Ｌｙｚ、ＤＴＰＡ残基導入ＰＶＡ、およびＬｙｚと
ＤＴＰＡ残基導入ＰＶＡとの混合物を用いた。銅イオン
存在下にてＬｙｚとＤＴＰＡ残基導入ＰＶＡとを混合す
ることにより、Ｌｙｚ自体の蛍光ピークが短時間側にシ
フトした。しかしながら、銅イオンが存在しない場合に
は、Ｌｙｚピークの移動は認められなかった。これらの
結果は、亜鉛イオンを介してＬｙｚとプルランとが配位
結合により結合し、Ｌｙｚの分子サイズが大きくなって
いることを示している。以上のように、この場合にも、
ＤＴＰＡ残基導入ＰＶＡとタンパク質とを単に水中で混
ぜ合わせることによって、両者の複合体が形成できるこ
とがわかった。

【００３１】

【実施例８】実施例４と同様の方法にて作製したＤＴＰ
Ａ残基をもつ架橋アミロペタチンハイドロゲル粒子（Ｄ
ＴＰＡ残基導入率：０．１０μｍｏｌｅ／ｍｇ乾燥ハイ
ドロゲル）の乾燥重量２０ｍｇを濃度の異なる硫酸銅水
溶液へ浸漬後、４０℃にて１時間、放置した。その後、
ハイドロゲル粒子を水にてよく遠心洗浄し、キレートさ
れていない銅イオンを除去した。水溶液中の銅イオンを
キレート滴定により定量することによってハイドロゲル
粒子へキレートされた銅イオン量を評価したところ、
０．０００５，０．００１，０．００６，および０．０
４μｍｏｌｅ／ｍｇ乾燥ハイドロゲル粒子であった。銅
イオンをキレートさせたＤＴＰＡ残基導入架橋アミロペ
クチンハイドロゲル粒子を１ｍｇ／ｍｌ濃度の牛血清ア
ルブミン（以下ＢＳＡという、和光純薬株式会社製）の
水溶液３．２ｍｌ中へ浸漬した。時間毎に上澄み中のタ
ンパクを定量することによってハイドロゲル粒子へのタ
ンパク質吸着を評価した。タンパク質はＢｉｏ−ｒａｄ
Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ法により定量した。その
結果を図２に示す。

【００３２】

【図２】

【００３３】銅イオンをキレートしているＤＴＰＡ残基
導入架橋アミロペクチンハイドロゲル粒子においては、
タンパク質の吸着量は時間および銅イオンキレート量の
増加とともに増加した。一方、銅イオンをキレートして
いないＤＴＰＡ残基導入架橋アミロペクチンハイドロゲ
ル粒子へのタンパク質吸着は認められなかった。ＤＴＰ
Ａ残基を導入していない架橋アミロペクチンハイドロゲ
ル粒子に対しても、同様のタンパク質吸着を調べたが、
銅イオンの有無に関係なく、いずれのハイドロゲルにお
いてもタンパク質の吸着は認められなかった。以上の結
果より、金属イオンをキレート固定化したアミロペクチ
ンハイドロゲル粒子をタンパク質水溶液中へ浸漬するこ
とによって、タンパク質をハイドロゲル粒子へ結合でき
ることがわかった。

【００３４】

【実施例９】実施例１において作製したＤＴＰＡ残基導
入プルラン（ＤＴＰＡ残基導入率：０．０６２μｍｏｌ
ｅ／ｍｇ）の１５ｍｇ／ｍｌ濃度の水溶液へ、最終濃度
が１００μｇ／ｍｌとなるようにＩＦＮ水溶液（２ｘ１
０^７国際単位（ＩＵ）／１００μｇｐｒｏｔｅｉｎ／ｍ
ｌ）を投入した。次に、この混合液へ最終濃度が１８．
２ｍｇ／ｍｌとなるように塩化亜鉛水溶液を加えた。室
温にて３時間撹拌し、ＩＦＮを亜鉛イオンを介して配位
結合にてＤＴＰＡ残基導入プルランに結合させた。次
に、混合物のゲル濾過（Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ−Ｓ２０
０、０．５ｃｍ内径，３６ｃｍ長のカラム、溶出液０．
０１Ｍリン酸緩衝溶液＋０．２５Ｎ ＮａＣｌ、溶出速
度０．３３ｍｌ／ｍｉｎ）を行い、遊離亜鉛イオンと遊
離ＩＦＮとをＩＦＮ−ＤＴＰＡ残基導入プルラン結合体
から分離除去した。ＩＦＮ−プルラン結合体のタンパク
質量（ＩＦＮ量）および糖質量（プルラン量）を、それ
ぞれ、Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ法
およびアンスロン−硫酸法にて定量したところ、プルラ
ンの回収率は９５％であり、結合体へ結合されているタ
ンパク質量は、仕込みタンパク質量の５６％であった。
ＩＦＮ−プルラン結合体のＩＦＮ活性をｉｎ ｖｉｔｒ
ｏにおけるその抗ウイルス活性から評価（Ｒｕｂｉｎｓ
ｔｅｉｎ，Ｓ．など、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，３７巻、ｐ７
５５，１９８１）したところ、その活性は７．２ｘ１０
^７ＩＵ／ｍｇ結合体であり、結合反応前後におけるＩＦ
Ｎ活性の回収率は３６％であった。

【００３５】

【実施例１０】ＩＦＮ濃度として２０μｇ／ｍｌの水溶
液１００μｌと２００μｌの０．５Ｍリン酸緩衝溶液
（ｐＨ７．５）とを混合した。この混合溶液中へ４μｌ
のＮａ^１２５Ｉ（３．７ＧＢｑ／ｍｌ ０．１ＭＮａＯ
Ｈ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ＮＥＮＲｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒ
ｏｄｕｃｔｓ社製）を加えた。０．２ｍｇ／ｍｌ濃度の
クロラミンＴの０．０５Ｍリン酸緩衝溶液（ｐＨ７．
２）を２００μｌ加えた後、室温にて２分間、ＩＦＮの
放射ラベル化反応を行った。次に、２００μｌの４ｍｇ
／ｍｌ二亜硫酸ナトリウムの０．５Ｍリン酸緩衝溶液
（ｐＨ７．２）を加えて反応を停止させた。陰イオン交
換樹脂（Ｄｏｗｅｘ１−Ｘ８）を詰めたカラムに反応物
を通過させ、ラベル化されていない^１２５Ｉ⁻を分離除
去した。このようにして得られた^１２５Ｉラベル化遊離
ＩＦＮ（最終濃度３．９２μｇ／ｍｌ）を実施例１にお
いて作製したＤＴＰＡ残基導入プルラン（ＤＴＰＡ導入
率：０．０６２μｍｏｌｅ／ｍｇ）の６．５３ｍｇ／ｍ
ｌ濃度の水溶液へ投入した。次に、この混合水溶液へ最
終濃度が３７０μｇ／ｍｌとなるように塩化亜鉛あるい
は硫酸銅水溶液を加えた。室温にて３時間撹拌し、金属
イオンを介した配位結合によってＩＦＮをＤＴＰＡ残基
導入プルランに結合させた。^１２５Ｉラベル化遊離ＩＦ
Ｎあるいは^１２５Ｉラベル化ＩＦＮ−ＤＴＰＡ残基導入
プルラン結合体をＢａｌｂ／ｃマウス（９週齢、メス、
三匹／グループ）の尾静脈内へ投与した。投与３０分後
に、血液、心臓、肺、胸腺、肝臓、牌臓、腎臓、胃腸
管、甲状腺、それ以外の部位、および尿、糞などを回収
し、それぞれの臓器の放射活性をガンマカウンターにて
計測した。コントロールとして金属イオンを加えていな
いＤＴＰＡ残基導入プルランと^１２５Ｉラベル化ＩＦＮ
との混合物を用いた。結果を表１に示す。

【００３６】

【表１】

【００３７】体内分布に明らかな違いが認められる臓器
は肝臓であった。亜鉛イオン存在下にてＤＴＰＡ残基導
入プルランと混合したＩＦＮでは、その肝臓への蓄積量
が遊離ＩＦＮに比較して有意に高くなっている。また、
亜鉛イオンがない状態における両者の混合は、ＩＦＮの
肝臓への蓄積には影響を与えなかった。肝臓以外の臓器
に関しては、遊離ＩＦＮとＩＦＮ−プルラン結合体との
間に大きな差は認められなかった。これらの結果は、肝
臓へＩＦＮを移行させるプルランに金属配位結合を介し
てＩＦＮを複合化することによって、肝臓へのＩＦＮの
ターゲティングが達成できたことを示している。この優
れた肝臓ターゲティング能ハイドロゲルは化学結合によ
ってＩＦＮとプルランとを結合させた場合と同様の結果
を示している。このことは、ＤＴＰＡ残基導入プルラン
とＩＦＮとを、単に水溶液中で混ぜ合わせるだけで金属
配位結合を介してＩＦＮがプルラン修飾され、その結
果、肝臓へのターゲティング効果が現れたことを示して
いる。しかしながら、金属イオンとして銅イオンを用い
た場合には、ＩＦＮの肝臓へのターゲティング効果は認
めらなかった。銅イオンの存在がゲルパーミエーション
クロマトグラフィのＩＦＮピークを高分子量側にシフト
できなかったことを考えると、金属配位結合を介したＩ
ＦＮとＤＴＰＡ残基導入プルランとの結合は、用いる金
属イオンの種類に影響されることがわかる。

【００３８】

【実施例１１】実施例２において作製したＤＴＰＡ残基
導入ＰＶＡ（ＤＴＰＡ残基導入率：０．１５μｍｏｌｅ
／ｍｇＰＶＡ）、タンパク質としてＬｙｚ、および銅イ
オンを用いる以外は実施例６と同様の方法で、銅イオン
を介したＬｙｚとＤＴＰＡ残基導入ＰＶＡとの結合体を
作製し、それらの結合体ならびに遊離Ｌｙｚの血液動態
を調べた。遊離Ｌｙｚ、ＬｙｚとＤＴＰＡ残基導入ＰＶ
Ａとの混合物、銅イオンを介したＤＰＴＡ−ＰＶＡとＬ
ｙｚとの結合体の血中半減期は、それぞれ、約３０、３
２、および８００分間であった。このように、ＤＴＰＡ
残基導入ＰＶＡを銅イオン存在下にて混ぜ合わせるだけ
で、Ｌｙｚの血中半減期が有意に延長した。一方、銅イ
オンのない状態で両者を混合した場合には、Ｌｙｚの血
中半減期の有意な増加は見られなかった。化学結合法に
てＬｙｚ−ＰＶＡ結合体を作製した場合にも、Ｌｙｚの
血中半減期の増加が見られたことから、Ｌｙｚ分子が金
属イオンを介した配位結合とＤＴＰＡ残基導入ＰＶＡに
よって修飾された結果、Ｌｙｚの血中動態が変化したと
考えられる。

【００３９】

【実施例１２】実施例４と同様の方法にて作製したＤＴ
ＰＡ残基をもつ架橋アミロペクチンハイドロゲル粒子
（ＤＴＰＡ残基導入率：０．１０μｍｏｌｅ／ｍｇ乾燥
ハイドロゲル）の乾燥重量１０ｍｇを２．５μＭ濃度の
硫酸銅水溶液２ｍｌへ浸漬し、４０℃１時間、放置し
た。その後、ハイドロゲル粒子を水にてよく遠心洗浄
し、キレートされていない銅イオンを除去し、凍結乾燥
した。水溶液中の銅イオンをキレート滴定により定量し
たところ、ハイドロゲル粒子ヘキレートされた銅イオン
量は、０．３μｍｏｌｅ／ｍｇ乾燥ハイドロゲル粒子で
あった。次に、ＩＦＮの代わりにＢＳＡを用いる以外、
実施例１０と同様の方法にて^１２５Ｉラベル化ＢＳＡを
調製した。この水溶液（１ｍｇ／ｍｌ濃度）の０．１ｍ
ｌを乾燥ハイドロゲル粒子に滴下し、ゲル内へＢＳＡを
含浸させた。これらの^１２５Ｉラベル化ＢＳＡ含浸銅イ
オンキレート架橋アミロペクチンハイドロゲル粒子を、
マウス背部皮下へ注射投与した後、ハイドロゲル粒子重
量とハイドロゲル粒子内に残存している放射活性を経時
的に測定した。ハイドロゲル粒子は時間とともにｉｎ
ｖｉｖｏで分解され、その残存重量は、注射１、４、
７、１４日後で、それぞれ、９０、７３、４０、０％で
あった。ハイドロゲル内に残存している放射活性は時間
とともに、８５、６７、４３、０％と減少した。一方、
銅イオン処理していないＤＴＰＡ残基をもつ架橋アミロ
ペクチンハイドロゲル粒子を用いて同様の検討を行った
ところ、その残存重量は、注射１、４、７、１４日後
で、それぞれ、８９、７０、４６、０％と、ｉｎ ｖｉ
ｖｏ分解性に関しては、銅イオン処理ハイドロゲル粒子
群に比べて相違は見られなかった。しかしながら、残存
放射活性は、注射１日後に初期含浸量の２０％まで低下
し、４日後にはその活性は認められなかった。以上のよ
うに、銅イオンを介して配位固定されたタンパク質は、
ｉｎｖｉｖｏにおいてもハイドロゲル粒子からはずれる
こととなく、ハイドロゲルの分解とともに、ハイドロゲ
ル粒子から徐放されたと考えられる。

【００４０】

【発明の効果】本発明は、生体内で不安定な薬物を高分
子運搬体に、化学結合ではなく、金属イオンを介して配
位的に結合させることを特徴とする、簡易な薬物−高分
子複合体調製方法である。この調製方法に適用される薬
物は、治療薬、治療薬を包含した薬物運搬体、および診
断薬のいずれでもよい。キレート配位子を有する高分子
材料あるいはそれ自身でキレート能を有する高分子材料
と薬物とを金属イオンの存在下にて混合することによ
り、薬物と高分子との複合体が容易に得られること、さ
らに、得られた複合体が薬物の血中寿命の延長およびそ
のターゲティング、ならびに薬物の徐放化などを通し
て、従来の化学結合法によって作製されてきた薬物−高
分子複合体と同様に、薬効発現が極めて容易であり、本
発明の産業利用性は非常に大きいといえる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 亜鉛イオンの存在下におけるＩＦＮとＤＴＰ
Ａ残基導入プルランとの混合によるＩＦＮ分子サイズの
変化を示す図である。

【図２】 ＤＴＰＡ残基導入架橋アミロペクチンハイド
ロゲル粒子へのＢＳＡの吸着を示す図である。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】キレート能を有する薬物とキレート能を有
   する高分子物質または化学的に導入されたキレート配位
   子を有する高分子物質とを金属イオンの存在下で混合す
   ることを特徴とする、薬物−高分子複合体製剤の調製方
   法。
2. 【請求項２】キレート能を有する高分子物質が水溶性あ
   るいはマイクロゲル状、粒子状、流動性固体状等の注射
   可能な形状であることを特徴とする請求項１に記載の薬
   物−高分子複合体製剤の調製方法。
3. 【請求項３】キレート能を有する薬物含有リポソーム、
   高分子ミセル、あるいは高分子微粒子などの薬物包含運
   搬体と請求項１に記載の高分子物質とを金属イオンの存
   在下で混合することを特徴とする、薬物−高分子複合体
   製剤の調製方法。
4. 【請求項４】キレート能を有する薬物を含有した超音波
   造影剤あるいは核磁気共鳴増感剤などの診断薬と請求項
   １に記載の高分子物質とを金属イオンの存在下で混合す
   ることを特徴とする、薬物−高分子複合体製剤の調製方
   法。