JPH0967393A - ５α−還元酵素阻害剤デイセファロステロール - Google Patents
５α−還元酵素阻害剤デイセファロステロールInfo
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- JPH0967393A JPH0967393A JP22494395A JP22494395A JPH0967393A JP H0967393 A JPH0967393 A JP H0967393A JP 22494395 A JP22494395 A JP 22494395A JP 22494395 A JP22494395 A JP 22494395A JP H0967393 A JPH0967393 A JP H0967393A
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- dicephalosterol
- decephalosterol
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Abstract
(57)【要約】
【課題】５α−還元酵素阻害作用を有し、例えば前立腺
肥大症の予防薬および／または治療薬として有用な化合
物を提供する。 【解決手段】式 【化１】
肥大症の予防薬および／または治療薬として有用な化合
物を提供する。 【解決手段】式 【化１】
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は５α−還元酵素阻害
作用を有する新規なデイセファロステロールまたはその
塩に関する。
作用を有する新規なデイセファロステロールまたはその
塩に関する。
【０００２】
【従来の技術】前立腺肥大症は、男性の加齢に伴う疾患
であり、近年の平均寿命の延長によりその疾患者数は著
しく増加している。本疾患の基本的病態は肥大血節の増
大による尿道抵抗の増加で、症状は排尿障害、残尿感で
ある。ところで、前立腺肥大症組織では正常前立腺組織
と比較して、５α−ジヒドロテストステロン（５α−Ｄ
ＨＴ）含量が有意に高いことが知られている。この５α
−ＤＨＴはおもに男性の生殖器である前立腺で、テスト
ステロンからテストステロン−５α−還元酵素によって
合成される。そこでテストステロン−５α−還元酵素を
阻害し、５α−ＤＨＴを低下させることで前立腺肥大症
を治療しようとする薬剤の開発が行われている。現在ま
でに開発されている薬剤としては、４−アザステロイド
骨格を有するフィナステロイド(G. H. Rasmusson, J.
R. Berman et al., J. Med. Chem.,29巻、 2298-2315頁
(1986年))がある。またステロイド骨格をもたない合成
化合物としてはベンズアニリド骨格を有するＯＮＯ−３
８０５(EP 0 291 245 A2)が知られている。また天然物
由来の物としては、フェナジン骨格を有するＷＳ−９６
５９ＡおよびＢ (O. Nakayama, M. Kohsaka et al., J.
Antibiot., 42巻、1221−1240頁 (1989年))、リボフラ
ビン(O. Nakayama, M. Kohsaka et al., J.Antibiot.,
43 巻、 1615-1616頁 (1990年))が知られている。
であり、近年の平均寿命の延長によりその疾患者数は著
しく増加している。本疾患の基本的病態は肥大血節の増
大による尿道抵抗の増加で、症状は排尿障害、残尿感で
ある。ところで、前立腺肥大症組織では正常前立腺組織
と比較して、５α−ジヒドロテストステロン（５α−Ｄ
ＨＴ）含量が有意に高いことが知られている。この５α
−ＤＨＴはおもに男性の生殖器である前立腺で、テスト
ステロンからテストステロン−５α−還元酵素によって
合成される。そこでテストステロン−５α−還元酵素を
阻害し、５α−ＤＨＴを低下させることで前立腺肥大症
を治療しようとする薬剤の開発が行われている。現在ま
でに開発されている薬剤としては、４−アザステロイド
骨格を有するフィナステロイド(G. H. Rasmusson, J.
R. Berman et al., J. Med. Chem.,29巻、 2298-2315頁
(1986年))がある。またステロイド骨格をもたない合成
化合物としてはベンズアニリド骨格を有するＯＮＯ−３
８０５(EP 0 291 245 A2)が知られている。また天然物
由来の物としては、フェナジン骨格を有するＷＳ−９６
５９ＡおよびＢ (O. Nakayama, M. Kohsaka et al., J.
Antibiot., 42巻、1221−1240頁 (1989年))、リボフラ
ビン(O. Nakayama, M. Kohsaka et al., J.Antibiot.,
43 巻、 1615-1616頁 (1990年))が知られている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明者等はディセフ
ァロスポラ（Dicephalospora）属に属するＳＡＮＫ １
０６９５株、ＳＡＮＫ １８２９１株、ＳＡＮＫ １０
７９５株の培養液から５α−還元酵素阻害作用を有する
新規化合物デイファセロステロールが生産されることを
見出して本発明を完成した。
ァロスポラ（Dicephalospora）属に属するＳＡＮＫ １
０６９５株、ＳＡＮＫ １８２９１株、ＳＡＮＫ １０
７９５株の培養液から５α−還元酵素阻害作用を有する
新規化合物デイファセロステロールが生産されることを
見出して本発明を完成した。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明のデイセファロス
テロールは下記の性状を有する。 １）構造式
テロールは下記の性状を有する。 １）構造式
【０００５】
【化４】
【０００６】２）物質の性状：針状結晶 ３）融点：１５２℃ ４）分子式： Ｃ30Ｈ48Ｏ6 （高分解能マススペクトル
法により測定） ５）分子量： ５０４（質量分析法により測定）。
法により測定） ５）分子量： ５０４（質量分析法により測定）。
【０００７】６）赤外吸収スペクトル：νmax ｃｍ-1 臭化カリウム（ＫＢｒ）錠剤法で測定した赤外線吸収ス
ペクトルは、次に示す通りである。 3490, 3370, 2960, 2930, 1730, 1710, 1370, 1270, 10
40, 1030。
ペクトルは、次に示す通りである。 3490, 3370, 2960, 2930, 1730, 1710, 1370, 1270, 10
40, 1030。
【０００８】７）1 Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：（δ：
ppm） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(360 MHz) は、次に
示す通りである。 5.43 (1H, brt, J=6.6 Hz), 5.13 (1H, brs), 5.05
(1H, s),4.88 (1H, s), 4.47 (1H, brd, J=10.2 Hz),
3.92 (1H, m),3.78 (1H, brs), 2.44 (1H, brm), 2.
16-2.26 (3H, m),1.97 (3H, s), 1.94-1.97 (2H, m),
1.46-1.81 (12H, m),1.44 (3H, s), 1.25-1.29 (1H,
m), 1.08 (3H, d, J=6.9 Hz),1.06 (3H, d, J=6.9 H
z), 0.79 (3H, s), 0.78 (3H, s)。
ppm） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(360 MHz) は、次に
示す通りである。 5.43 (1H, brt, J=6.6 Hz), 5.13 (1H, brs), 5.05
(1H, s),4.88 (1H, s), 4.47 (1H, brd, J=10.2 Hz),
3.92 (1H, m),3.78 (1H, brs), 2.44 (1H, brm), 2.
16-2.26 (3H, m),1.97 (3H, s), 1.94-1.97 (2H, m),
1.46-1.81 (12H, m),1.44 (3H, s), 1.25-1.29 (1H,
m), 1.08 (3H, d, J=6.9 Hz),1.06 (3H, d, J=6.9 H
z), 0.79 (3H, s), 0.78 (3H, s)。
【０００９】８）13Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：（δ：
ppm） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(91 MHz)は、次に示
す通りである。 172.8 (s), 161.4 (s), 140.5 (s), 119.3 (d), 10
8.0 (t),77.9 (d), 76.6 (s), 73.7 (d), 73.2 (d),
67.9 (d), 66.8 (d),54.4 (d), 48.0 (t), 46.3
(t), 42.3 (d), 42.1 (t), 39.9 (s),39.7 (t), 3
9.3 (t), 35.5 (d), 35.1 (t), 31.5 (d), 31.5
(t),26.6 (q), 24.7 (q), 24.1 (q), 22.0 (q), 2
1.8 (t), 15.5 (q),14.5 (q)。
ppm） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(91 MHz)は、次に示
す通りである。 172.8 (s), 161.4 (s), 140.5 (s), 119.3 (d), 10
8.0 (t),77.9 (d), 76.6 (s), 73.7 (d), 73.2 (d),
67.9 (d), 66.8 (d),54.4 (d), 48.0 (t), 46.3
(t), 42.3 (d), 42.1 (t), 39.9 (s),39.7 (t), 3
9.3 (t), 35.5 (d), 35.1 (t), 31.5 (d), 31.5
(t),26.6 (q), 24.7 (q), 24.1 (q), 22.0 (q), 2
1.8 (t), 15.5 (q),14.5 (q)。
【００１０】９）紫外線吸収スペクトル：λmax ｎｍ
（ε） 末端吸収のみ。
（ε） 末端吸収のみ。
【００１１】１０）溶解性：メタノール、エタノール、
アセトン、クロロホルム、ジメチルスルホキシド、ベン
ゼン、エーテル、酢酸エチルに溶解。水に不溶。
アセトン、クロロホルム、ジメチルスルホキシド、ベン
ゼン、エーテル、酢酸エチルに溶解。水に不溶。
【００１２】１１）呈色反応：硫酸、ヨードに陽性。
【００１３】１２）薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値； ０．４ 吸着剤； シリカゲルプレート(Kieselgel 60 F254, メ
ルク社製） 展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝４：６。
ルク社製） 展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝４：６。
【００１４】本発明のデイセファロステロールは不斉炭
素原子を有する。従って、デイセファロステロールにお
いては、不斉炭素原子に基づく異性体を有する。本発明
のデイセファロステロールにおいては、これらの異性体
の等量および非等量混合物がすべて単一の式で示されて
いる。従って、本発明においてはこれらの異性体および
これらの異性体の混合物をもすべて含むものである。
素原子を有する。従って、デイセファロステロールにお
いては、不斉炭素原子に基づく異性体を有する。本発明
のデイセファロステロールにおいては、これらの異性体
の等量および非等量混合物がすべて単一の式で示されて
いる。従って、本発明においてはこれらの異性体および
これらの異性体の混合物をもすべて含むものである。
【００１５】更に本発明において、デイセファロステロ
ールが溶剤和物（例えば水和物）を形成する場合には、
これらもすべて含むものである。
ールが溶剤和物（例えば水和物）を形成する場合には、
これらもすべて含むものである。
【００１６】例えば、本発明のデイセファロステロール
が、大気中に放置されたり、または再結晶をすることに
より、水分を吸収し、吸着水が付着したり、水和物を形
成する場合がある。本発明にはこのような溶剤和物も含
まれる。
が、大気中に放置されたり、または再結晶をすることに
より、水分を吸収し、吸着水が付着したり、水和物を形
成する場合がある。本発明にはこのような溶剤和物も含
まれる。
【００１７】更に本発明において、生体内において代謝
されてデイセファロステロールに変換される化合物、い
わゆるプロドラッグもすべて含むものである。
されてデイセファロステロールに変換される化合物、い
わゆるプロドラッグもすべて含むものである。
【００１８】本発明のデイセファロステロールを生産す
る上記ＳＡＮＫ １０６９５株、ＳＡＮＫ １８２９１
株、ＳＡＮＫ １０７９５株 の菌学的性状は以下の通
りである。
る上記ＳＡＮＫ １０６９５株、ＳＡＮＫ １８２９１
株、ＳＡＮＫ １０７９５株 の菌学的性状は以下の通
りである。
【００１９】ＳＡＮＫ １０６９５株は１９９０年１０
月１８日、茨城県真壁市きのこ山において採集した子実
体から子嚢胞子を分離し、培養して得たものである。Ｓ
ＡＮＫ １０６９５株の分離源である子実体は、次のよ
うな菌学的特徴を有している。子嚢盤は基質の表皮およ
び皮層に形成されるストロマより生じ、突出する。子嚢
盤は有柄の皿形〜浅い椀型、子実層面はほとんど平ら
か、しばしば中央が盛り上がり、黄橙色〜赤橙色であ
り、その径は １．０−２．５ｍｍである。柄は円筒形
で長さ０．５−１．０ｍｍ、径 ０．２−０．５ｍｍ、
子嚢盤とほぼ同色だが、かなり淡色となる。托外皮層は
厚さ ５０−６０μｍ、矩形菌組織を呈す。托髄層は絡
み合い菌組織を呈す。子実層は １３０−１５０μｍで
ある。子嚢は円筒状棍棒形、薄壁、先端はやや丸みを帯
び、ヨード試薬で青変する。子嚢胞子は長紡錘形で幾分
湾曲、大きさ ３０．５−３７．５×４−６μm であ
る。無色、薄壁で単細胞である。多数の油球を生じ、両
側に杯型〜クッション状の付属器を有する。側糸は糸
状、幅約 １．５μｍ、無色、隔壁あり、基部にて分枝
する。ＳＡＮＫ １０６９５株の培養下での菌学的性状
は次の通りである。ＰＤＡ平板上での成長は２５℃、１
０日で約２ｃｍに達する。全体が赤橙色だが、中央部で
より濃色である。菌糸は比較的均一に伸長し、密に集合
して厚い菌糸のマットを形成する。赤橙色の可溶性色素
を浸出する。気菌糸の量は少なく、コロニーは全体に平
坦である。
月１８日、茨城県真壁市きのこ山において採集した子実
体から子嚢胞子を分離し、培養して得たものである。Ｓ
ＡＮＫ １０６９５株の分離源である子実体は、次のよ
うな菌学的特徴を有している。子嚢盤は基質の表皮およ
び皮層に形成されるストロマより生じ、突出する。子嚢
盤は有柄の皿形〜浅い椀型、子実層面はほとんど平ら
か、しばしば中央が盛り上がり、黄橙色〜赤橙色であ
り、その径は １．０−２．５ｍｍである。柄は円筒形
で長さ０．５−１．０ｍｍ、径 ０．２−０．５ｍｍ、
子嚢盤とほぼ同色だが、かなり淡色となる。托外皮層は
厚さ ５０−６０μｍ、矩形菌組織を呈す。托髄層は絡
み合い菌組織を呈す。子実層は １３０−１５０μｍで
ある。子嚢は円筒状棍棒形、薄壁、先端はやや丸みを帯
び、ヨード試薬で青変する。子嚢胞子は長紡錘形で幾分
湾曲、大きさ ３０．５−３７．５×４−６μm であ
る。無色、薄壁で単細胞である。多数の油球を生じ、両
側に杯型〜クッション状の付属器を有する。側糸は糸
状、幅約 １．５μｍ、無色、隔壁あり、基部にて分枝
する。ＳＡＮＫ １０６９５株の培養下での菌学的性状
は次の通りである。ＰＤＡ平板上での成長は２５℃、１
０日で約２ｃｍに達する。全体が赤橙色だが、中央部で
より濃色である。菌糸は比較的均一に伸長し、密に集合
して厚い菌糸のマットを形成する。赤橙色の可溶性色素
を浸出する。気菌糸の量は少なく、コロニーは全体に平
坦である。
【００２０】ＳＡＮＫ １８２９１株は１９９０年６月
２９日に、茨城県大洗にて採集した腐朽木上に発生して
いた子実体から子嚢胞子を分離し、培養して得たもので
ある。ＳＡＮＫ １８２９１株はその分離源である子実
体の子嚢胞子の大きさが３６．５−４６．８×３．５−
４．５μである点が異なるだけで、他の菌学的性状およ
び培養上の菌学的性状はＳＡＮＫ １０６９５株のそれ
と変わらない。
２９日に、茨城県大洗にて採集した腐朽木上に発生して
いた子実体から子嚢胞子を分離し、培養して得たもので
ある。ＳＡＮＫ １８２９１株はその分離源である子実
体の子嚢胞子の大きさが３６．５−４６．８×３．５−
４．５μである点が異なるだけで、他の菌学的性状およ
び培養上の菌学的性状はＳＡＮＫ １０６９５株のそれ
と変わらない。
【００２１】ＳＡＮＫ １０７９５株は１９９３年７月
４日に、茨城県裏筑波にて採集した腐朽木上に発生して
いた子実体から子嚢胞子を分離し、培養して得たもので
ある。ＳＡＮＫ １０７９５株はその分離源である子実
体の子嚢胞子の大きさが、２６−４１×４−６である点
が異なるのみで、他の菌学的性状および培養上の菌学的
性状部分はＳＡＮＫ １０６９５株のそれと変わらな
い。
４日に、茨城県裏筑波にて採集した腐朽木上に発生して
いた子実体から子嚢胞子を分離し、培養して得たもので
ある。ＳＡＮＫ １０７９５株はその分離源である子実
体の子嚢胞子の大きさが、２６−４１×４−６である点
が異なるのみで、他の菌学的性状および培養上の菌学的
性状部分はＳＡＮＫ １０６９５株のそれと変わらな
い。
【００２２】以上の菌学的特徴より本菌に該当する菌を
検索したところ、スプーナー・ビー・エム（Spooner
B. M.）著 "Helotiales in Australasia: Geoglossacea
e,Orbiliaceae, Sclerotiniaceae, Hyaloscyhaceae".
Bib. Mycol. 116 巻、 1−711 頁、 1990 年、および大
谷吉雄著、「日本産盤菌綱菌類雑記」、菌じん研究所研
究報告、28巻、251-256 頁、 1990年に掲載されているデ
ィセファロスポラ・ルフォコルニア・バークレイ・アン
ド・ブルーム・スプーナー(Dicephalosporarufocornea
(Berkeley & Broome) Spooner) とその菌学的性状が一
致した。よって、ＳＡＮＫ １８２９１株、ＳＡＮＫ
１０６９５株、ＳＡＮＫ １０７９５株をそれぞれディ
セファロスポラ・ルフォコルニア・バークレイ・アンド
・ブルーム・スプーナー（Dicephalospora rufocornea
(Berkeley & Broome) Spooner）と同定した。
検索したところ、スプーナー・ビー・エム（Spooner
B. M.）著 "Helotiales in Australasia: Geoglossacea
e,Orbiliaceae, Sclerotiniaceae, Hyaloscyhaceae".
Bib. Mycol. 116 巻、 1−711 頁、 1990 年、および大
谷吉雄著、「日本産盤菌綱菌類雑記」、菌じん研究所研
究報告、28巻、251-256 頁、 1990年に掲載されているデ
ィセファロスポラ・ルフォコルニア・バークレイ・アン
ド・ブルーム・スプーナー(Dicephalosporarufocornea
(Berkeley & Broome) Spooner) とその菌学的性状が一
致した。よって、ＳＡＮＫ １８２９１株、ＳＡＮＫ
１０６９５株、ＳＡＮＫ １０７９５株をそれぞれディ
セファロスポラ・ルフォコルニア・バークレイ・アンド
・ブルーム・スプーナー（Dicephalospora rufocornea
(Berkeley & Broome) Spooner）と同定した。
【００２３】なお、これらの菌株はそれぞれディセファ
ロスポラ・ルフォコルニア・バークレイ・アンド・ブル
ーム・スプーナー ＳＡＮＫ １８２９１株がＦＥＲＭ
ＢＰ−５０２９として、ＳＡＮＫ １０６９５株がＦＥ
ＲＭ ＢＰ−５０２７として、ＳＡＮＫ １０７９５株
がＦＥＲＭ ＢＰ−５０２８としてブダペスト条約に従
って通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に国
際寄託されている。
ロスポラ・ルフォコルニア・バークレイ・アンド・ブル
ーム・スプーナー ＳＡＮＫ １８２９１株がＦＥＲＭ
ＢＰ−５０２９として、ＳＡＮＫ １０６９５株がＦＥ
ＲＭ ＢＰ−５０２７として、ＳＡＮＫ １０７９５株
がＦＥＲＭ ＢＰ−５０２８としてブダペスト条約に従
って通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に国
際寄託されている。
【００２４】以上、デイセファロステロール生産菌株の
ＳＡＮＫ １８２９１株、ＳＡＮＫ１０６９５株および
ＳＡＮＫ １０７９５株について説明したが、周知の如
くこれらの菌株の諸性質は一定したものではなく、自然
的、または人工的な操作（例えば、紫外線照射、放射線
照射、化学薬品処理等）により、変異を起こし易く、本
発明の菌株もこの点は同じである。本発明にいう菌株は
そのすべての変異株を包含する。また、これらの変異株
の中には、遺伝学的方法、例えば、組み替え、形質導
入、形質転換等により得られたものも包含される。即
ち、デイセファロスポラ属に属するデイセファロステロ
ールを生産する菌株、その変異株およびそれらと明確に
区別されない菌株は、すべて本発明にいう菌株に包含さ
れるものである。
ＳＡＮＫ １８２９１株、ＳＡＮＫ１０６９５株および
ＳＡＮＫ １０７９５株について説明したが、周知の如
くこれらの菌株の諸性質は一定したものではなく、自然
的、または人工的な操作（例えば、紫外線照射、放射線
照射、化学薬品処理等）により、変異を起こし易く、本
発明の菌株もこの点は同じである。本発明にいう菌株は
そのすべての変異株を包含する。また、これらの変異株
の中には、遺伝学的方法、例えば、組み替え、形質導
入、形質転換等により得られたものも包含される。即
ち、デイセファロスポラ属に属するデイセファロステロ
ールを生産する菌株、その変異株およびそれらと明確に
区別されない菌株は、すべて本発明にいう菌株に包含さ
れるものである。
【００２５】
【発明の実施の形態】本発明の菌株を分離するに際し
て、使用される分離培地としては炭素源、窒素源、無機
イオンおよび有機栄養源等より選択されたものを適宜含
有する培地であれば合成または天然培地のいずれでも使
用可能である。分離操作は常法に従って行われる。
て、使用される分離培地としては炭素源、窒素源、無機
イオンおよび有機栄養源等より選択されたものを適宜含
有する培地であれば合成または天然培地のいずれでも使
用可能である。分離操作は常法に従って行われる。
【００２６】本発明の新規化合物デイセファロステロー
ルを得るため、これらの微生物の培養は他の発酵生成物
を生産するために用いられるような培地中で行なわれ
る。このような培地中には、微生物が資化出来る炭素
源、窒素源および無機塩を含有する。
ルを得るため、これらの微生物の培養は他の発酵生成物
を生産するために用いられるような培地中で行なわれ
る。このような培地中には、微生物が資化出来る炭素
源、窒素源および無機塩を含有する。
【００２７】一般に、炭素源としてグルコース、フラク
トース、マルトース、シュークロース、マンニトール、
グリセロール、デキストリン、オート麦、ライ麦、トウ
モロコシデンプン、ジャガイモ、トウモロコシ粉、大豆
粉、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸などを単一に、あ
るいは併用して用いる事が出来る。一般には、培地量の
１−１０重量％で変量する。好適には ７−９重量％
であり、最適には ８重量％である。
トース、マルトース、シュークロース、マンニトール、
グリセロール、デキストリン、オート麦、ライ麦、トウ
モロコシデンプン、ジャガイモ、トウモロコシ粉、大豆
粉、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸などを単一に、あ
るいは併用して用いる事が出来る。一般には、培地量の
１−１０重量％で変量する。好適には ７−９重量％
であり、最適には ８重量％である。
【００２８】窒素源としては、一般に蛋白質を含有する
物質を発酵工程に用いる。適当な窒素源としては、大豆
粉、フスマ、落花生粉、綿実粉、カゼイン加水分解物、
ファーマミン、魚粉、コーンスチープリカー、ペプト
ン、肉エキス、イースト、イーストエキス、マルトエキ
ス等の動物系、植物系またはエキス類の窒素源、硝酸ナ
トリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等の無
機窒素源である。窒素源は、単一または併用して培地量
の ０．１−６重量％の範囲で用いる。好適には２−４
重量％であり、最適には ３重量％である。
物質を発酵工程に用いる。適当な窒素源としては、大豆
粉、フスマ、落花生粉、綿実粉、カゼイン加水分解物、
ファーマミン、魚粉、コーンスチープリカー、ペプト
ン、肉エキス、イースト、イーストエキス、マルトエキ
ス等の動物系、植物系またはエキス類の窒素源、硝酸ナ
トリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等の無
機窒素源である。窒素源は、単一または併用して培地量
の ０．１−６重量％の範囲で用いる。好適には２−４
重量％であり、最適には ３重量％である。
【００２９】培地中に取り入れる栄養無機塩は、ナトリ
ウム、アンモニウム、カルシウム、カリウム、マグネシ
ウム、鉄、フォスフェート、サルフェート、クロライ
ド、カーボネート等のイオンを得ることの出来る通常の
塩類である。また、コバルト、マンガン、ストロンチウ
ム等の微量の金属、その他ブロマイド、フルオライド、
ボレ−ト、シリケ−ト等の微量イオンを得る塩も含む。
ウム、アンモニウム、カルシウム、カリウム、マグネシ
ウム、鉄、フォスフェート、サルフェート、クロライ
ド、カーボネート等のイオンを得ることの出来る通常の
塩類である。また、コバルト、マンガン、ストロンチウ
ム等の微量の金属、その他ブロマイド、フルオライド、
ボレ−ト、シリケ−ト等の微量イオンを得る塩も含む。
【００３０】液体培養に際しては、消泡剤としてシリコ
ン油、植物油、界面活性剤等が使用される。
ン油、植物油、界面活性剤等が使用される。
【００３１】ＳＡＮＫ １８２９１株、ＳＡＮＫ １０
６９５株またはＳＡＮＫ １０７９５株を培養しデイセ
ファロステロールを生産する培地の ｐＨは、５．０−
８．０に変化させることが出来る。好ましくはｐＨは、
７前後である。
６９５株またはＳＡＮＫ １０７９５株を培養しデイセ
ファロステロールを生産する培地の ｐＨは、５．０−
８．０に変化させることが出来る。好ましくはｐＨは、
７前後である。
【００３２】菌の生育温度は ４℃ から ３２℃ ま
でであるが ２０℃ から ３０℃の範囲が生育良好で
あり、 更にデイセファロステロールの生産には、２３℃
付近が好適である。
でであるが ２０℃ から ３０℃の範囲が生育良好で
あり、 更にデイセファロステロールの生産には、２３℃
付近が好適である。
【００３３】デイセファロステロールは、好気的に培養
して得られるが通常用いられる好気的培養法、例えば固
体培養法、振とう培養法、通気撹拌培養法等が用いられ
る。特に、振とう培養法が好ましい。
して得られるが通常用いられる好気的培養法、例えば固
体培養法、振とう培養法、通気撹拌培養法等が用いられ
る。特に、振とう培養法が好ましい。
【００３４】小規模な培養においては、２０℃ から
２６℃で数日間振とう培養を行うのが良好である。培養
は三角フラスコ中で、１ー２段階の種の発育工程により
開始する。種発育段階の培地は、炭素源および窒素源を
併用出来る。種フラスコは定温インキュベーター中で
２３℃、１乃至３日間振とうするか、または充分に成長
するまで振とうする。成長した種は第二の種培地、また
は生産培地に接種するのに用いる。中間の発育工程を用
いる場合には、本質的に同様の方法で成長させ、生産培
地に接種するためにそれを部分的に用いる。接種したフ
ラスコを一定温度で １乃至３日間、または生産量が最
大に達するまで振とうし、インキュベーションが終わっ
たらフラスコの含有物を遠心分離またはろ過する。
２６℃で数日間振とう培養を行うのが良好である。培養
は三角フラスコ中で、１ー２段階の種の発育工程により
開始する。種発育段階の培地は、炭素源および窒素源を
併用出来る。種フラスコは定温インキュベーター中で
２３℃、１乃至３日間振とうするか、または充分に成長
するまで振とうする。成長した種は第二の種培地、また
は生産培地に接種するのに用いる。中間の発育工程を用
いる場合には、本質的に同様の方法で成長させ、生産培
地に接種するためにそれを部分的に用いる。接種したフ
ラスコを一定温度で １乃至３日間、または生産量が最
大に達するまで振とうし、インキュベーションが終わっ
たらフラスコの含有物を遠心分離またはろ過する。
【００３５】大量培養の場合には、撹拌機、通気装置を
付けた適当なタンクで培養するのが好ましい。この方法
によれば、栄養培地をタンクの中で作成出来る。栄養培
地を１２５℃ まで加熱して滅菌し、冷却後、滅菌培地
にあらかじめ成長させてあった種を接種する。培養は
２０℃乃至 ２６℃で通気撹拌して行う。この方法は、
多量の化合物を得るのに適している。
付けた適当なタンクで培養するのが好ましい。この方法
によれば、栄養培地をタンクの中で作成出来る。栄養培
地を１２５℃ まで加熱して滅菌し、冷却後、滅菌培地
にあらかじめ成長させてあった種を接種する。培養は
２０℃乃至 ２６℃で通気撹拌して行う。この方法は、
多量の化合物を得るのに適している。
【００３６】培養の経過に伴って生産されるデイセファ
ロステロールの量の経時変化は、高速液体クロマトグラ
フィーを用いて測定することが出来る。通常は、振とう
培養法で５日間から８日間の培養でデイセファロステロ
ールの生産量は最高値に達する。
ロステロールの量の経時変化は、高速液体クロマトグラ
フィーを用いて測定することが出来る。通常は、振とう
培養法で５日間から８日間の培養でデイセファロステロ
ールの生産量は最高値に達する。
【００３７】培養終了後、培養液中の液体部分及び菌体
内に存在するデイセファロステロールは、培養液と同容
量程度のアセトンなどのケトン類、アセトニトリルなど
のニトリル類のような有機溶媒を添加し、混合すること
により抽出する。抽出液中に存在する菌体、その他の固
形部分を珪藻土をろ過助剤とする、ろ過操作または遠心
分離によって分別し、そのろ液または上清中および菌体
中に存在するデイセファロステロールを、５α−還元酵
素阻害活性を指標にしてその物理化学的性状を利用し抽
出精製することにより得られる。例えば、ろ液または上
清中に存在するデイセファロステロールは、最初に濃縮
操作で混在する有機溶媒を除去した後、中性または酸性
ｐＨ条件下で水と混和しない有機溶剤、例えばブタノ
ールなどのアルコール類、メチルエチルケトンなどのケ
トン類、酢酸エチルなどのエステル類、クロロホルム、
塩化エチレン、塩化メチレンなどのハロゲン化炭化水素
類を用いて単独または、それらの組み合わせにより抽出
精製することができる。
内に存在するデイセファロステロールは、培養液と同容
量程度のアセトンなどのケトン類、アセトニトリルなど
のニトリル類のような有機溶媒を添加し、混合すること
により抽出する。抽出液中に存在する菌体、その他の固
形部分を珪藻土をろ過助剤とする、ろ過操作または遠心
分離によって分別し、そのろ液または上清中および菌体
中に存在するデイセファロステロールを、５α−還元酵
素阻害活性を指標にしてその物理化学的性状を利用し抽
出精製することにより得られる。例えば、ろ液または上
清中に存在するデイセファロステロールは、最初に濃縮
操作で混在する有機溶媒を除去した後、中性または酸性
ｐＨ条件下で水と混和しない有機溶剤、例えばブタノ
ールなどのアルコール類、メチルエチルケトンなどのケ
トン類、酢酸エチルなどのエステル類、クロロホルム、
塩化エチレン、塩化メチレンなどのハロゲン化炭化水素
類を用いて単独または、それらの組み合わせにより抽出
精製することができる。
【００３８】あるいは吸着剤として、例えば活性炭また
は吸着用樹脂であるアンバーライトＸＡＤ−２、ＸＡＤ
−４ (ローム・アンド・ハース社製) 等や、ダイアイオ
ンＨＰ−１０、ＨＰ−２０、ＣＨＰ−２０Ｐ、ＨＰ−５
０（三菱化成（株) 社製) 等が使用される。デイセファ
ロステロールを含む液を上記のごとき吸着剤の層を通過
させて不純物を吸着させて取り除くか、またはデイセフ
ァロステロールを吸着させた後、アセトン水などの含水
ケトン類、メタノール水、ブタノール水などの含水メタ
ノール類を用いて溶出させることにより得られる。ま
た、菌体内に存在するデイセファロステロールは、５０
−９０％ 含水アセトンなどの含水ケトン類または含水
メタノール類などの含水アルコール類により抽出し、次
いで有機溶剤を除去した後、ろ液と同様な抽出精製操作
を行なうことにより得られる。
は吸着用樹脂であるアンバーライトＸＡＤ−２、ＸＡＤ
−４ (ローム・アンド・ハース社製) 等や、ダイアイオ
ンＨＰ−１０、ＨＰ−２０、ＣＨＰ−２０Ｐ、ＨＰ−５
０（三菱化成（株) 社製) 等が使用される。デイセファ
ロステロールを含む液を上記のごとき吸着剤の層を通過
させて不純物を吸着させて取り除くか、またはデイセフ
ァロステロールを吸着させた後、アセトン水などの含水
ケトン類、メタノール水、ブタノール水などの含水メタ
ノール類を用いて溶出させることにより得られる。ま
た、菌体内に存在するデイセファロステロールは、５０
−９０％ 含水アセトンなどの含水ケトン類または含水
メタノール類などの含水アルコール類により抽出し、次
いで有機溶剤を除去した後、ろ液と同様な抽出精製操作
を行なうことにより得られる。
【００３９】このようにして得られたデイセファロステ
ロールは、更にシリカゲル、マグネシウムーシリカゲル
系のフロリジルのような担体を用いた吸着カラムクロマ
トグラフィー、 セファデックス ＬＨ−２０（ファル
マシア社製) などを用いた分配カラムクロマトグラフィ
ー、セファデックス Ｇ−２５（ファルマシア社製)な
どを用いたゲルろ過クロマトグラフィー、および順相、
逆相カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー等で精
製することが出来る。以上の分離、精製の手段を単独ま
たは適宜組み合わせ反復用いることによりデイセファロ
ステロールを分離精製することができる。
ロールは、更にシリカゲル、マグネシウムーシリカゲル
系のフロリジルのような担体を用いた吸着カラムクロマ
トグラフィー、 セファデックス ＬＨ−２０（ファル
マシア社製) などを用いた分配カラムクロマトグラフィ
ー、セファデックス Ｇ−２５（ファルマシア社製)な
どを用いたゲルろ過クロマトグラフィー、および順相、
逆相カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー等で精
製することが出来る。以上の分離、精製の手段を単独ま
たは適宜組み合わせ反復用いることによりデイセファロ
ステロールを分離精製することができる。
【００４０】本発明のデイセファロステロールは、文献
未載の新規化合物であり、動物（例、ヒト、イヌ、ネ
コ、ウサギ等) において、５α−還元酵素阻害作用を示
すことから、５α−還元酵素阻害剤として有用である。
未載の新規化合物であり、動物（例、ヒト、イヌ、ネ
コ、ウサギ等) において、５α−還元酵素阻害作用を示
すことから、５α−還元酵素阻害剤として有用である。
【００４１】本発明のデイセファロステロールを医薬と
して用いる場合、常法に従って種々の形態で投与され
る。その投与形態としては例えば散剤、顆粒剤、錠剤、
カプセル剤、シロップ剤などの形態で経口的または注射
剤（静脈内、筋肉内、皮下）、点滴剤、座剤、塗布剤、
軟膏剤などの形態で非経口的に安全に投与することが出
来る。これらの各種製剤は、常法に従って主薬に賦形
剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、溶
解補助剤、懸濁剤、コ−ティング剤、希釈剤などの医薬
の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤を
用いて製剤化することができる。投与量は対象疾患、投
与経路および投与回数などにより異なるが、例えば成人
に対しては １日 上限２０００ｍｇ、好ましくは５０
０ｍｇ、から下限２０ｍｇ、好ましくは１００ｍｇ、を
症状に応じて１回または数回に分けて投与するのが好ま
しい。
して用いる場合、常法に従って種々の形態で投与され
る。その投与形態としては例えば散剤、顆粒剤、錠剤、
カプセル剤、シロップ剤などの形態で経口的または注射
剤（静脈内、筋肉内、皮下）、点滴剤、座剤、塗布剤、
軟膏剤などの形態で非経口的に安全に投与することが出
来る。これらの各種製剤は、常法に従って主薬に賦形
剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、溶
解補助剤、懸濁剤、コ−ティング剤、希釈剤などの医薬
の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助剤を
用いて製剤化することができる。投与量は対象疾患、投
与経路および投与回数などにより異なるが、例えば成人
に対しては １日 上限２０００ｍｇ、好ましくは５０
０ｍｇ、から下限２０ｍｇ、好ましくは１００ｍｇ、を
症状に応じて１回または数回に分けて投与するのが好ま
しい。
【００４２】
【実施例】次に実施例をあげて本発明を更に具体的に説
明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００４３】実施例 １． （１）培養 ＳＡＮＫ １０６９５株を、下記の組成の前培養培地
１００ｍｌを含む５００ｍｌの三角フラスコ（種フラス
コ）に接種した。次いでこれを２３℃で７日間、２１０
ｒｐｍのロータリー振蘯機で前培養を行った。
１００ｍｌを含む５００ｍｌの三角フラスコ（種フラス
コ）に接種した。次いでこれを２３℃で７日間、２１０
ｒｐｍのロータリー振蘯機で前培養を行った。
【００４４】 前培養培地組成 グルコース １０ ｇ グリセロール １０ ｇ シュクロース １０ ｇ ソイビーンミール ２０ ｇ オートミール ５ ｇ カザミノ酸 ５ ｇ 炭酸カルシウム １ ｇ ───────────────────────── 水道水 １０００ ｍｌ（ｐＨ ７．０）。
【００４５】本培養は次のように行った。滅菌した下記
の本培養培地 １００ｍｌを含む１００ｍｌの三角フラ
スコ ５０本に種培養液をそれぞれ ５ｍｌ入れ、２３
℃で ７日間、 ２１０ｒｐｍのロータリー振蘯機で培
養を行った。
の本培養培地 １００ｍｌを含む１００ｍｌの三角フラ
スコ ５０本に種培養液をそれぞれ ５ｍｌ入れ、２３
℃で ７日間、 ２１０ｒｐｍのロータリー振蘯機で培
養を行った。
【００４６】 本培養培地組成 グリセロール ７０ ｇ ポリペプトン １０ ｇ 大豆粉 １０ ｇ 硫酸マグネシウム・７水和物 １ ｇ グルコース ３０ ｇ 硝酸ナトリウム ５ ｇ コーン・スチープ・リカー １０ ｇ ＣＢ−４２２（消泡剤） ０．５ ｍｌ ───────────────────────── 水道水 １０００ ｍｌ（ｐＨ ７．０）。
【００４７】（２）単離 三角フラスコ ５０本のＳＡＮＫ １０６９５培養液に
アセトンを加えて抽出後、吸引ろ過を行った。次に、ろ
液を減圧留去してアセトンを除き、その抽出液を水で平
衡化した ５００ｍｌのＨＰ−２０カラムクロマトグラ
フィー（三菱化成（株）社製）に充填した。このカラム
を各 １０００ｍｌの水、２０％、４０％、８０％の含
水アセトン、 １００％アセトンで溶出し、以下の試験
例 １．の（２）ラットの５α−還元酵素阻害試験 に
記載する５α−還元酵素阻害活性の認められた ８０％
含水アセトン画分を濃縮したところ、 ２．７４ｇの濃
褐色物質を得た。このうち ２．６ｇを ５ｍｌのメタ
ノールに溶解し、ヘキサンー酢酸エチル（２：８）で平
衡化した ２５０ｍｌのシリカゲルカラム（シリカゲル
６０、メルク社製）に充填し、同じ溶媒で ５５０ｍ
ｌ溶出した後、酢酸エチル ５００ｍｌで溶出した。こ
の酢酸エチル溶出画分を減圧留去して溶媒を除去する
と、７３．５ｍｇの淡黄色物質が得られた。次にこの物
質 ７３．５ｍｇを ３ｍｌのメタノールに溶解し、ヘ
キサンー酢酸エチル（２：８）で平衡化した ６０ｍｌ
のシリカゲルカラム（シリカゲル ６０、メルク社製）
に充填し、同じ溶媒で溶出し、２５０−４９０ｍｌの溶
出画分を分画した。減圧留去により溶媒を除去すると、
白色針状結晶のデイセファロステロール ６５．６ｍｇ
が得られた。
アセトンを加えて抽出後、吸引ろ過を行った。次に、ろ
液を減圧留去してアセトンを除き、その抽出液を水で平
衡化した ５００ｍｌのＨＰ−２０カラムクロマトグラ
フィー（三菱化成（株）社製）に充填した。このカラム
を各 １０００ｍｌの水、２０％、４０％、８０％の含
水アセトン、 １００％アセトンで溶出し、以下の試験
例 １．の（２）ラットの５α−還元酵素阻害試験 に
記載する５α−還元酵素阻害活性の認められた ８０％
含水アセトン画分を濃縮したところ、 ２．７４ｇの濃
褐色物質を得た。このうち ２．６ｇを ５ｍｌのメタ
ノールに溶解し、ヘキサンー酢酸エチル（２：８）で平
衡化した ２５０ｍｌのシリカゲルカラム（シリカゲル
６０、メルク社製）に充填し、同じ溶媒で ５５０ｍ
ｌ溶出した後、酢酸エチル ５００ｍｌで溶出した。こ
の酢酸エチル溶出画分を減圧留去して溶媒を除去する
と、７３．５ｍｇの淡黄色物質が得られた。次にこの物
質 ７３．５ｍｇを ３ｍｌのメタノールに溶解し、ヘ
キサンー酢酸エチル（２：８）で平衡化した ６０ｍｌ
のシリカゲルカラム（シリカゲル ６０、メルク社製）
に充填し、同じ溶媒で溶出し、２５０−４９０ｍｌの溶
出画分を分画した。減圧留去により溶媒を除去すると、
白色針状結晶のデイセファロステロール ６５．６ｍｇ
が得られた。
【００４８】（３）同定 三角フラスコ ５０本のＳＡＮＫ １８２９１株培養液
にアセトンを加えて抽出後、吸引ろ過を行った。次に、
ろ液を減圧留去してアセトンを除き、その抽出液を水で
平衡化した ５００ｍｌのＨＰ−２０カラムクロマトグ
ラフィー（三菱化成（株）社製）に充填した。このカラ
ムを各 １０００ｍｌの水、２０％、４０％、８０％の
含水アセトン、１００％アセトンで溶出し、８０％含水
アセトン画分を濃縮した。この濃縮エキスを逆相系高速
液体クロマトグラフィー（センシュウパック ＯＤＳ−
２２５２−Ｈ、センシュウ科学（株）社製）に付し、６
０％含水アセトニトリルで溶出して先に得られたデイセ
ファロステロールを同定した。
にアセトンを加えて抽出後、吸引ろ過を行った。次に、
ろ液を減圧留去してアセトンを除き、その抽出液を水で
平衡化した ５００ｍｌのＨＰ−２０カラムクロマトグ
ラフィー（三菱化成（株）社製）に充填した。このカラ
ムを各 １０００ｍｌの水、２０％、４０％、８０％の
含水アセトン、１００％アセトンで溶出し、８０％含水
アセトン画分を濃縮した。この濃縮エキスを逆相系高速
液体クロマトグラフィー（センシュウパック ＯＤＳ−
２２５２−Ｈ、センシュウ科学（株）社製）に付し、６
０％含水アセトニトリルで溶出して先に得られたデイセ
ファロステロールを同定した。
【００４９】ＳＡＮＫ １０７９５株についても同様の
課程を行い、同定した。
課程を行い、同定した。
【００５０】
【発明の効果】以下に５α−還元酵素阻害作用の試験結
果を述べる。
果を述べる。
【００５１】試験例 １． （１）ラット前立腺からの５α−還元酵素の調製 成熟雄ラット（３５０−４００ｇ：Ｓｐａｇｕｅ−Ｄａ
ｗｌｅｙ) の前立腺腹葉をはさみで小片に細切後、組織
の約３倍量の緩衝液（０．３３Ｍシュクロース、１ｍＭ
ジチオスレイトール、５０ｍＭ ニコチンアミドアデニ
ンジヌクレオチドホスフェートー還元体（ＮＡＤＰ
Ｈ）、０．００１％フェニルメチルスルホニルフルオラ
イド（ＰＭＳＦ）を含む ２０ｍＭリン酸カリウム緩衝
液 (ｐＨ７．４) を加え、まずポリトロン（ＫＩＮＥＭ
ＡＴＩＣＡ Ｇｍｂ）で、ついでテフロンーガラスホモ
ジナイザーでホモジナイズした。得られたホモジネート
を遠心分離 (１００、０００×ｇ、６０分) し、沈殿物
を上記緩衝液に懸濁し、再び同条件で遠心分離して洗浄
した。この沈殿物をラット５α−還元酵素とし、上記緩
衝液を加えて、蛋白量を約 ２０ｍｇ／ｍｌに調製後、
−８０℃で凍結保存した。
ｗｌｅｙ) の前立腺腹葉をはさみで小片に細切後、組織
の約３倍量の緩衝液（０．３３Ｍシュクロース、１ｍＭ
ジチオスレイトール、５０ｍＭ ニコチンアミドアデニ
ンジヌクレオチドホスフェートー還元体（ＮＡＤＰ
Ｈ）、０．００１％フェニルメチルスルホニルフルオラ
イド（ＰＭＳＦ）を含む ２０ｍＭリン酸カリウム緩衝
液 (ｐＨ７．４) を加え、まずポリトロン（ＫＩＮＥＭ
ＡＴＩＣＡ Ｇｍｂ）で、ついでテフロンーガラスホモ
ジナイザーでホモジナイズした。得られたホモジネート
を遠心分離 (１００、０００×ｇ、６０分) し、沈殿物
を上記緩衝液に懸濁し、再び同条件で遠心分離して洗浄
した。この沈殿物をラット５α−還元酵素とし、上記緩
衝液を加えて、蛋白量を約 ２０ｍｇ／ｍｌに調製後、
−８０℃で凍結保存した。
【００５２】（２）ラットの５α−還元酵素阻害試験 ラットの５α−還元酵素（蛋白量 ２００ｍｇ) 、２ｍ
Ｍ［14Ｃ］テストステロン、１ｍＭジチオスレイトー
ル、１．５ｍＭ ＮＡＤＰＨを含む ４０ｍＭリン酸カ
リウム緩衝液 (ｐＨ ７．０) にジメチルスルホキシド
（場合によってはエタノールを用いて）に溶解した検体
２ｍｌ（対照群には溶媒のみ）を加え、総液量が １
００ｍｌになるように調製した後、３７℃で２５分間ー
４０分間インキュベートした。その後、 １００ｍｌの
エタノールを加えて反応を停止し、この反応液のうちの
２５ｍｌを薄層クロマトプレート（ＬＫ６ＤＦ ｓｉ
ｌｉｃａ ｐｌａｔｅ、Ｗｈａｔｍａｎ社製）にスポッ
トし、酢酸エチル−シクロヘキサン（１：１）混合液で
室温中で２度展開した。薄層クロマトプレート上の放射
活性はバイオイメージアナライザー（富士写真フィルム
（株）社製）を用いて測定した。ラットの５α−還元酵
素活性は、加えた［14Ｃ］テストステロンのうち、［14
Ｃ］５α−ジヒドロテストステロンとなった割合（変換
率（％）) で表し、検体の５α−還元酵素阻害活性は次
式を用いて求めた。
Ｍ［14Ｃ］テストステロン、１ｍＭジチオスレイトー
ル、１．５ｍＭ ＮＡＤＰＨを含む ４０ｍＭリン酸カ
リウム緩衝液 (ｐＨ ７．０) にジメチルスルホキシド
（場合によってはエタノールを用いて）に溶解した検体
２ｍｌ（対照群には溶媒のみ）を加え、総液量が １
００ｍｌになるように調製した後、３７℃で２５分間ー
４０分間インキュベートした。その後、 １００ｍｌの
エタノールを加えて反応を停止し、この反応液のうちの
２５ｍｌを薄層クロマトプレート（ＬＫ６ＤＦ ｓｉ
ｌｉｃａ ｐｌａｔｅ、Ｗｈａｔｍａｎ社製）にスポッ
トし、酢酸エチル−シクロヘキサン（１：１）混合液で
室温中で２度展開した。薄層クロマトプレート上の放射
活性はバイオイメージアナライザー（富士写真フィルム
（株）社製）を用いて測定した。ラットの５α−還元酵
素活性は、加えた［14Ｃ］テストステロンのうち、［14
Ｃ］５α−ジヒドロテストステロンとなった割合（変換
率（％）) で表し、検体の５α−還元酵素阻害活性は次
式を用いて求めた。
【００５３】 検体の５α−還元酵素阻害活性＝ ｛１ー（検体添加群の変換率／（対照群の変換率）｝x １００ （％） 更に、検体の濃度を変えて上式を用いて阻害活性（％）
を求め、その値から５０％阻害濃度（ＩＣ50）を求め
た。
を求め、その値から５０％阻害濃度（ＩＣ50）を求め
た。
【００５４】デイセファロステロールの５α−還元酵素
阻害活性（ＩＣ50）は ５．８６μｇ／ｍｌであった。
阻害活性（ＩＣ50）は ５．８６μｇ／ｍｌであった。
【００５５】以上から、本発明のデイセファロステロー
ルは５α−還元酵素阻害作用を有し、前立腺肥大症の予
防薬および／または治療薬などの医薬として有用であ
る。
ルは５α−還元酵素阻害作用を有し、前立腺肥大症の予
防薬および／または治療薬などの医薬として有用であ
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 浜田 孝和 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社内 (72)発明者 細矢 剛 茨城県つくば市御幸が丘33 三共株式会社 内 (72)発明者 高松 安行 福島県いわき市泉町下川字大剱389−４ 三共株式会社内
Claims (7)
- 【請求項１】 式 【化１】 を有するデイセファロステロール。
- 【請求項２】下記の性状を有するデイセファロステロー
ル。 １）物質の性状：針状結晶 ２）融点：１５２℃ ３）分子式： Ｃ30Ｈ48Ｏ6 （高分解能マススペクトル
法により測定） ４）分子量： ５０４（質量分析法により測定） ５）赤外吸収スペクトル：νmax ｃｍ-1 臭化カリウム（ＫＢｒ）錠剤法で測定した赤外線吸収ス
ペクトルは、次に示す通りである。 3490, 3370, 2960, 2930, 1730, 1710, 1370, 1270, 10
40, 1030 ６）1 Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：（δ： ppm） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(360 MHz) は、次に
示す通りである。 5.43 (1H, brt, J=6.6 Hz), 5.13 (1H, brs), 5.05
(1H, s),4.88 (1H, s), 4.47 (1H, brd, J=10.2 Hz),
3.92 (1H, m),3.78 (1H, brs), 2.44 (1H, brm), 2.
16-2.26 (3H, m),1.97 (3H, s), 1.94-1.97 (2H, m),
1.46-1.81 (12H, m),1.44 (3H, s), 1.25-1.29 (1H,
m), 1.08 (3H, d, J=6.9 Hz),1.06 (3H, d, J=6.9 H
z), 0.79 (3H, s), 0.78 (3H, s) ７）13Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：（δ： ppm） 重メタノール中、内部基準にテトラメチルシランを使用
して測定した核磁気共鳴スペクトル(91 MHz)は、次に示
す通りである。 172.8 (s), 161.4 (s), 140.5 (s), 119.3 (d), 10
8.0 (t),77.9 (d), 76.6 (s), 73.7 (d), 73.2 (d),
67.9 (d), 66.8 (d),54.4 (d), 48.0 (t), 46.3
(t), 42.3 (d), 42.1 (t), 39.9 (s),39.7 (t), 3
9.3 (t), 35.5 (d), 35.1 (t), 31.5 (d), 31.5
(t),26.6 (q), 24.7 (q), 24.1 (q), 22.0 (q), 2
1.8 (t), 15.5 (q),14.5 (q) ８）紫外線吸収スペクトル：λmax ｎｍ（ε） 末端吸収のみ。 ９）溶解性：メタノール、エタノール、アセトン、クロ
ロホルム、ジメチルスルホキシド、ベンゼン、エーテ
ル、酢酸エチルに溶解。水に不溶。 １０）呈色反応：硫酸、ヨードに陽性。 １１）薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値； ０．４ 吸着剤； シリカゲルプレート(Kieselgel 60 F254, メ
ルク社製） 展開溶媒；ヘキサン：酢酸エチル＝４：６ - 【請求項３】デイセファロスポラ属に属するデイセファ
ロステロール生産菌を培養し、その培養物からデイセフ
ァロステロール 【化２】 を採取することからなるデイセファロステロールの製
法。 - 【請求項４】デイセファロスポラ属に属するデイセファ
ロステロール生産菌がディセファロスポラ・ルフォコル
ニア・バークレイ・アンド・ブルーム・スプーナーＳＡ
ＮＫ １０６９５株、ＳＡＮＫ １８２９１株、ＳＡＮ
Ｋ １０７９５株である請求項３記載の製法。 - 【請求項５】 式 【化３】 を有するデイセファロステロールからなる医薬。
- 【請求項６】デイセファロステロールを有効成分とする
５α−還元酵素阻害剤。 - 【請求項７】デイセファロステロールを有効成分とする
前立腺肥大症の予防薬および／または治療薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22494395A JPH0967393A (ja) | 1995-09-01 | 1995-09-01 | ５α−還元酵素阻害剤デイセファロステロール |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22494395A JPH0967393A (ja) | 1995-09-01 | 1995-09-01 | ５α−還元酵素阻害剤デイセファロステロール |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0967393A true JPH0967393A (ja) | 1997-03-11 |
Family
ID=16821631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22494395A Pending JPH0967393A (ja) | 1995-09-01 | 1995-09-01 | ５α−還元酵素阻害剤デイセファロステロール |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0967393A (ja) |
-
1995
- 1995-09-01 JP JP22494395A patent/JPH0967393A/ja active Pending
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