JPH09510228A - ▲ざ▼蒼の処置および予防のためのｅｇｆまたはｔｇｆ−アルファの拮抗物質の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】

Description

【発明の詳細な説明】 ＴＧＦ−アルファの拮抗物質の使用 本発明は、皮膚への局所適用用組成物並びにそれらの化粧品 用いるのに適した組成物に関する。本発明の背景 開放または閉鎖面皰が形成される。 試験管内でのヒトの毛包脂腺導管の単離および維持が、以前にガイ等により「 ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ダーマトロジー（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕ ｒｎａｌ ｏｆ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ）（１９９３），１２８，２４２〜 置剤である１３−シスレチノイン酸が該導管のレベルに直接作用すると報告して いる。 本発明者は、以前に報告された単離されたヒトの皮脂導管モデルを有意的に改 善した。以前に報告されたような補足されたウィリアムのＥ培地の代わりに、ウ シの下垂体の抽出物および高濃度の塩化カルシウム（約２ｍＭ）が補足された商 業的に供給される“ケラチノサイト血清非含有培地(keratinocyteserum-free me dium)”中で皮脂導管を維持することにより、細胞分裂速度の低下を伴うことな く７日間の期間にわたって導管構造の保持が得られる。更に、ケラチノサイト培 地中に維持された導管における細胞分裂速度は、２４時間後および７日後、ウィ リアムのＥ培地中に維持された導管におけるよりも有意的に高いことが分かった 。 本発明者らは更に、ケラチノサイトの維持培地への表皮成長因子（以後、ＥＧ Ｆ）またはトランスフォーミング成長因子α（以後、ＴＧＦ−α）の添加が導管 構造の崩壊を起こすがしかし細胞分裂または蛋白質合成の速度の付随の減少を伴 わないことを驚くべきことに見出した。これは、炎症性の皮膚反応に通 る。 瘡の主症状であるこの組織崩壊およびその結果として生じる炎症性反応を低減ま たは制限する際に有用である。発明の定義 本発明は、ＥＧＦ、ＴＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体の機能の拮抗物質１種また はそれ以上および随意に化粧上または生理学上許容可能な賦形剤からなる局所用 組成物を提供する。 ＴＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体の機能の拮抗物質１種またはそれ以上および随意 に化粧上または生理学上許容可能な賦形剤からなる組成物を皮膚に適用すること からなる上記方法を提供する。 たはＥＧＦ受容体の機能の拮抗物質１種またはそれ以上の使用を提供する。 ＴＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体の機能の拮抗物質１種またはそれ以上の使用をも 提供する。 の候補物質をスクリーニングまたは試験する方法であって、試 験物質とケラチノサイト血清非含有培地（もしくは導管の維持に対して同様な有 益な効果を有する培地）中に維持された単離されたヒトの皮脂導管とをＥＧＦま たはＴＧＦ−αの存在下で接触させ、そして該試験物質に対する該導管の応答を 評価することからなる上記方法を提供する。ＥＧＦ、ＴＧＦ−αまたは ある物質は、導管の断裂を低減または防止するであろう。発明の開示 本明細書において用いられる用語“ＥＧＦ機能の拮抗物質”は、細胞の成長に 対するＥＧＦまたはＴＧＦの刺激的効果を妨害することが可能である薬剤を意味 する。特に該用語は、ＥＧＦ単独の投与により引き起こされる、本明細書におい て記載されているような単離されたヒトの毛包脂腺導管調製物の性質の変化を低 減または排除する効果を有する薬剤を意味する。ＥＧＦ機能の拮抗物質は、ＥＧ Ｆ、ＴＧＦ−αの活性並びにＥＧＦ受容体の機能またはＥＧＦ受容体により刺激 される経路を妨害する薬剤を含む。 ＥＧＦ機能に拮抗しそして本発明により用いられ得る化合物の一つの適当なク ラスは、チルホスチン（ｔｙｒｐｈｏｓｔｉ ｎ）として普通知られている式（Ｉ）の蛋白質チロシンキナーゼ阻害剤である。 ここで、 Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³およびＲ⁴は、同じかまたは異なり、 −Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ_nＨ_2n+1、−ＮＯ₂、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆおよび から選ばれ、 Ｒ⁵およびＲ⁶は、同じまたは異なり、 から選ばれ、 Ｒ⁷は、−Ｈおよび−ＯＨから選ばれ、そして ｎは、１〜８の整数である。 本発明による組成物はまた、該阻害剤の混合物からなり得る。 該阻害剤の例は、次のものである。即ち、 次の構造を有する１−カルボキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチレン 次の構造を有する１，１−ジカルボキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチ レン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチレン 次の構造を有する１−カルボキシ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）エチ レン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−（３−ヒドロキシフェニル）エチレン 次の構造を有する１−シアノ−１−カルボキシ−２−（２，５−ジヒドロキシフ ェニル）エチレン 次の構造を有する１−カルボキシ−１−シアノ−２−（３，４−ジヒドロキシフ ェニル）エチレン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）エ チレン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−（３−メトキシ−４，５−ジヒドロキ シフェニル）エチレン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−（３，４，５−トリヒドロキシフェニ ル）エチレン 次の構造を有する１−アミド−１−シアノ−２−（３，４−ジヒドロキシフェニ ル）エチレン 次の構造を有する１−チオアミド−１−シアノ−２−（３，４−ジヒドロキシフ ェニル）エチレン 次の構造を有する１−シアノ−２−（４−ヒドロキシフェニル）エチレン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−（３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニ ル）エチレン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフ ェニル）エチレン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−（３−メトキシ−４−ヒドロキシフェ ニル）エチレン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−（３，５−ジヒドロキシフェニル）エ チレン 次の構造を有する１，１−ジシアノ−２−ヒドロキシ−２−（３，４，５−トリ ヒドロキシフェニル）エチレン 次の構造を有する１−カルボキシ−１−シアノ−２−（４−メトキシフェニル） エチレン 次の構造を有する１−カルボキシ−１−シアノ−２−（４−フルオロフェニル） エチレン 次の構造を有する１−カルボキシ−１−シアノ−２−（３−メトキシ−４−ヒド ロキシフェニル）エチレン 次の構造を有する１−カルボキシ−１−シアノ−２−（３，５−ジメトキシ−４ −ヒドロキシフェニル）エチレン 次の構造を有する１−カルボキシ−１−シアノ−２−（４−ヒドロキシフェニル ）エチレン 次の構造を有する１−カルボキシ−１−シアノ−２−（４−フェニルカルボキシ アルデヒド）エチレン 次の構造を有する１−シアノ−１−カルボキシ−２−（２，５−ジヒドロキシフ ェニル）エチレン 式（Ｉ）の化合物は、欧州特許出願ＥＰ−Ａ−０４０３２３８から公知である 。それらは、毛の成長を誘発し、維持しまたは促進させるために適していると記 載される。 または、ＥＧＦまたはＴＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体に対する抗体を用いてそ れらの機能に拮抗させることである。 モノクロナールまたはポリクロナールもしくは抗体断片であり得るかかる抗体 は、当該技術における慣用の技法により例えば組換えＤＮＡ技法を用いて得られ 得る。特定の結合サブユニットまたは抗体断片もまた用いられ得る。これらは、 同様に、例えばパパインまたはペプシンを用いる無傷の抗体分子の酵素的消化も しくは組換えＤＮＡ技法の使用のような慣用の技法により得られ得る。抗体断片 はまた、慣用の分子生物学的技法により生じせしめられ得る。 好都合には、本発明による組成物は、ＥＧＦ機能の拮抗物質１種またはそれ以 上を組成物の０．０００００１〜１０重量％、好ましくは組成物の０．００００ １〜１０重量％の量にて含む。 本発明による組成物は、好ましくは、該組成物が皮膚に適用されるとき分配を 容易にするように該組成物中のＥＧＦ機能の拮抗物質のための希釈剤、分散剤ま たは担体として作用する賦形剤も含む。好ましくは、該賦形剤は、化粧上および ／または生理学上許容可能なものである。賦形剤は、処方物の他の成分に対して 相容性でありかつその受容体に対して有害でないという意味で許容可能でなけれ ばならない。 賦形剤は、水あるいは液体または固体のエモリエント剤、溶媒、保湿剤、増粘 剤および粉末のような物質を含み得る。 単独にてもしくは１種またはそれ以上の混合物として用いられ得る、賦形剤の これらのタイプの各々の例は次の通りである。 ステアリルアルコール、グリセリルモノリシノレエート、グリセリルモノステ アレート、ミンク油、セチルアルコール、イソプロピルイソステアレート、ステ アリン酸、イソブチルパルミテート、イソセチルステアレート、オレイルアルコ ール、イソプロピルラウレート、ヘキシルラウレート、デシルオレエート、オク タデカン−２−オール、イソセチルアルコール、エイコサニルアルコール、ベヘ ニルアルコール、セチルパルミテート、ジメチルポリシロキサンのようなシリコ ーン油、ジ−ｎ−ブチルセバケート、イソプロピルミリステート、イソプロピル パルミテート、イソプロピルステアレート、ブチルステアレート、ポリエチレン グリコール、トリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、トウモロコシ油、 綿実油、牛脂、ラード、オリーブ油、パーム核油、ナタネ油、ベニバナ種子油、 ヨイマチグサ油、ダイズ油、ヒマワリ種子油、アボカド油、オリーブ油、 ゴマ種子油、ヤシ油、ナンキンマメ油、ヒマシ油、アセチル化ラノリンアルコー ル、石油ゼリー、鉱油、ブチルミリステート、イソステアリン酸、パルミチン酸 、イソプロピルリノレエート、ラウリルラクテート、ミリスチルラクテート、デ シルオレエート、ミリスチルミリステートのような、エモリエント剤。 空気、プロパン、ブタン、イソブタン、ジメチルエーテル、二酸化炭素、亜酸 化窒素のような、噴射剤。 エチルアルコール、メチレンクロライド、イソプロパノール、アセトン、エチ レングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル 、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジメチルスルホキシド、ジメチル ホルムアミド、テトラヒドロフランのような、溶媒。 白亜、タルク、フラー土、カオリン、デンプン、ガム、コロイドシリカ、ナト リウムポリアクリレート、テトラアルキルおよび／またはトリアルキルアリール アンモニウム、スメクタイト、化学変性珪酸マグネシウムアルミニウム、有機変 性モンモリロナイト粘土、水和珪酸アルミニウム、ヒュームドシリカ、カルボキ シビニルポリマー、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチレングリコー ルモノステアレートのような、粉末。 賦形剤は、通常エマルジョンの１０〜９９．９重量％、好ましくは５０〜９９ 重量％を形成し、そして他の添加剤の不存在下では本組成物の残余を形成し得る 。 本発明による組成物はまた、界面活性剤例えば陰イオン性、非イオン性および 両性界面活性剤、保存剤、香料、モイスチャライザーおよび酸化防止剤のような 、皮膚への局所適用のための化粧用または治療用製品において慣用的に有用であ る他の物質を含み得る。組成物の使用 処置するためのヒトの皮膚への局所適用用製品として意図されている。ここにお ける処置への言及は、確かな疾患の処置のみならず予防にも及ぶ。 本組成物の量並びに皮膚への適用頻度は、患者の状態並びに用いられるＥＧＦ 機能の特定の拮抗物質に依存することが理解されよう。一般に、選択された拮抗 物質を１日当たり０．１ｍｇないし１０ｍｇの局所適用することが提案される。 使用に際し、本組成物の少量例えば１ｍｌが適当な容器またはアプリケーター から皮膚の領域へ適用され、そして必要な ら、次いで手または指もしくは適当な器具を用いて皮膚上に拡げられおよび／ま たは皮膚中に擦り込まれる。 本発明の局所皮膚処置用組成物は、好都合には、４，０００〜１０，０００ｍ Ｐａｓの粘度を有するローション、１０，０００〜２０，０００ｍＰａｓの粘度 を有するフルイドクリームもしくは２０，０００〜１００，０００ｍＰａｓまた はそれ以上の粘度を有するクリームとして処方され得る。該組成物は、その粘度 および消費者による予定の使用法に適合するように適当な容器に包装され得る。 例えば、ローションまたはフルイドクリームは、ボトルまたはロールボールアプ リケーターまたは噴射剤作動エアゾール装置または指操作に適したポンプを備え た容器に包装され得る。該組成物がクリームであるとき、それは単に非変形性ボ トルもしくはチューブまたは蓋付きジャーのようなスクィーズ容器中に貯蔵され 得る。 従って本発明はまた、本明細書において定義されたような化粧上許容可能な組 成物を含有する閉鎖容器を提供する。 本発明が充分に理解され得るようにするために、次の例が例示としてのみにて 与えられている。例１ ローションは、次の組成を有する。 ％ｗ／ｗ ３，４−ジヒドロキシ−ｄ−シアノシンナムアミド ０．００１ エタノール １０ 香料 充分な量 ブチル化ヒドロキシトルエン ０．０１ 水 １００になるま で例２ ＥＧＦ機能の拮抗物質を含む組成物の効能を、次の通り検討した。皮脂導管の（sepaceous ducts）単離 充分な量の女性の顔面の皮膚を、美容外科的手法により得た。その後、皮膚の 層を槍状刀により除去した。表皮層を除去するために、最初に０．１ｍｍの皮膚 表面を取った。次いで、第２層の０．２ｍｍの真皮を取り、そしてリン酸塩緩衝 塩水中に入れた。この層は、毛包脂腺導管を含有する。該導管は、軟毛の毛包の 導管よりもはるかに大きくかつ末端毛包の突起した 毛を欠くので、解剖顕微鏡を用いて容易に同定された。加えて、該導管は、透視 の際に暗く見える多量の皮脂を含有することが見られた。該導管を穏やかな顕微 解剖により除去した。単離された毛包脂腺導管の維持 ５０μｇ／ｍｌのウシの下垂体の抽出物および適切な場合５ｎｇ／ｍｌのＥＧ Ｆまたは５ｎｇ／ｍｌのＴＧＦ−αが補足された、ケラチノサイト血清非含有(k eratinocyte serum free)基礎培地（ギブコ社から供給された。）中に、５％Ｃ Ｏ₂／９５％空気の給湿雰囲気中３７℃において導管を維持した。適切な場合、 ＥＧＦ機能の拮抗物質を、ＥＧＦまたはＴＧＦ−αと同時に添加した。用いた拮 抗物質は、次のチルホスチン類のものであった。即ち、チルホスチン毒性につい て陰性なものとして、１０００μＭにおけるチルホスチン１（４−メトキシベン ジリデン）アロノニトライト並びにＥＧＦ機能の拮抗物質として、１００μＭに おけるチルホスチン４６（３，４−ジヒドロキシ−α−シアノシンナムアミド） または２４μＭにおけるチルホスチン４７（３，４−ジヒドロキシ−α−シアノ チオシンナムアミド）。 必要に応じ、抗生物質および抗カビ剤が、細菌およびカビの 汚染を防ぐために培地に添加され得る。導管の形態および培養における挙動 ＥＧＦまたはＴＧＦ−αの不存在下で試験管内で維持された導管は、少なくと も７日間正常な形態を維持した。該導管は、単離の際および培養期間の終わりの 際の両方において、組織切片に見られるのと同様な組織化された重層の角化した 扁平上皮を示す。（正常な導管形態の例については、「ガイ等，ブリティッシュ ・ジャーナル．オブ・ダーマトル（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄ ｅｒｍａｔｏｌ．），１９９３，１２８，２４２〜２４８」の第３図参照。）し かしながら、ＥＧＦまたはＴＧＦ−α（典型的には５ｎｇ／ｍｌ）を培地へ添加 すると、正常な導管の形態は４日以内に喪失した。毛包脂 導管が断裂した。（断裂した導管の例については、ガイ等の第４図参照。）ＥＧ Ｆ機能の拮抗物質（チルホスチン４６またはチルホスチン４７）を添加すると、 ＥＧＦの存在下で導管の断裂を防止した。陰性の対照（チルホスチン１）を添加 した場合には、導管の断裂を防止できずかつ細胞毒性に対して効果がなかった。 更に、ＥＧＦの存在下でＥＧＦに対する中和性抗体を （例えば、５０マイクログラム／ｍｌで）添加した場合も、導管の断裂を防止し た。これらのデータは、受容体の機能を抑制し得る拮抗物質もしくは配位子の機 能を妨げ得る拮抗物質を含めてＥＧＦ機能の拮抗物質が、ＥＧＦに対する応答に おける試験管内での導管の断裂を防止し得ることを示している。 ここに記載された７日間にわたる導管の維持は、異なる培地ウィリアムズＥを 用いるガイ等（上掲）により報告されているものよりもはるかに優れている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 39/395 9284−4Ｃ Ａ６１Ｋ 39/395 Ｄ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)， ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，Ｃ Ｈ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ， ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ， ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 グリーン，マーテイン・リチヤード イギリス国、シー・ビー・４・１・エイ チ・エス、ケンブリツジ、ド・フルビル・ アベニユー・36 (72)発明者 ガイ，ロバート イギリス国、シー・ビー・１・４・ジー・ ジエイ、ケンブリツジ、タマリン・カーデ ンズ・120 (72)発明者 キアリー，テレンス・ジヨージ・イブリン イギリス国、シー・ビー・１・２・エイ チ・エヌ、ケンブリツジ、リンドウオー ド・ロード・21

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ＥＧＦ、ＴＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体の機能の拮抗物質１種またはそれ以上の 使用。 ２． ＥＧＦ機能の拮抗物質が式（Ｉ） 〔ここで、 Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄は、同じでも異なっていてもよく、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ_n Ｈ_2n+1、−ＮＯ₂、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆおよび−ＣＨＯから選ばれ、 Ｒ₅およびＲ₆は、同じでも異なっていてもよく、−Ｈ、−ＣＮ、−ＣＯ₂Ｈ、Ｃ ＯＮＨ₂およびＣＳＮＨ₂から選ばれ、Ｒ₇は、−Ｈおよび−ＯＨから選ばれ、そ して ｎは、１〜８の整数である。〕 の化合物およびそれらの混合物からなる、請求の範囲第１項に記載の使用。 ３． ＥＧＦ、ＴＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体の機能の拮抗物質が、ＥＧＦ、Ｔ ＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体に対する抗体または抗体断片からなる、請求の範囲 第１項に記載の使用。 ４． ＥＧＦ、ＴＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体の機能の拮抗物質が、組成物の０ ．００００００１〜１０重量％の量にて存在する、請求の範囲第１項から第３項 のいずれか一項に記載の使用。 ５． 組成物が化粧上または生理学上許容可能な賦形剤を更に含む、請求の範囲 第１項から第４項のいずれか一項に記載の使用。 ６． ＥＧＦ、ＴＧＦ−αまたはＥＧＦ受容体に対する抗体を含んでなる、局所 適用用組成物。 であって、次の工程 （ｉ）試験物質とケラチノサイト血清非含有培地中に維持された単離されたヒト 皮脂導管とをＥＧＦまたはＴＧＦ−αの存在下で接触させ、 （ii）該試験物質に対する該導管の応答を評価する工程からなる上記方法。