JPH09505041A

JPH09505041A - ペプチジル化合物および金属プロテイナーゼのインヒビターとしてのその治療的使用

Info

Publication number: JPH09505041A
Application number: JP7513690A
Authority: JP
Inventors: モンタナ、ジョン; ディッケンズ、ジョナソン; オーエン、デイビッド・アラン; バクスター、アンドリュー・ダグラス
Original assignee: カイロサイエンス・リミテッド
Priority date: 1993-11-10
Filing date: 1994-11-10
Publication date: 1997-05-20
Also published as: WO1995013289A1; BR9408025A; HU9601244D0; HK1015139A1; ES2143611T3; FI961976A0; CZ134996A3; PL314300A1; HU217344B1; KR960705843A; NO961888D0; CZ287780B6; AU679286B2; NO961888L; AU8113394A; DK0728144T3; CA2173470A1; EP0728144A1; HUT73799A; ATE188969T1

Abstract

(57)【要約】次式(Ｉ)で表される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは水和物: 式中、Ｒ¹はＣ_1-6アルキル、Ｃ_2-6アルケニル、アリール、(Ｃ_1-6アルキル)アリールまたはＣ_1-6アルキル−ＡＲ⁹[ＡはＯ、ＮＲ⁹またはＳ(Ｏ)mを示し、Ｒ⁹はＨ、Ｃ_1-4アルキル、アリールまたは(Ｃ_1-4アルキル)アリールを示し、mは０〜２の数を示す]を示し、Ｒ²はＨまたはＣ_1-6アルキルを示し、Ｒ⁴およびＲ⁵は相互に独立してＨまたはＣ_1-6アルキルを示すか[Ｒ⁴のアルキルは所望によりアミノ(ＮＨ₂)、アリールアミノ、保護アミノ、アリール、ジ(Ｃ_1-6アルキル)アミノ、モノ(Ｃ_1-6アルキル)アミノ、ＣＯ₂Ｈ、保護カルボキシル、カルバモイル、モノ(Ｃ_1-6アルキル)カルバモイルまたはジ(Ｃ_1-6アルキル)カルバモイルによって置換されていてもよい]、または両者はＮと共にピロリジノ、ピペリジノまたはモルフォリノを形成し、Ｒ⁶は所望により置換されたＣ_3-6シクロアルキル、Ｃ_3-6シクロアルケニル、Ｃ_1-6アルキル、ベンジル、(Ｃ_1-6アルコキシ)ベンジル、ベンジルオキシベンジルまたは３−インドリルメチルを示し、ＡlkはＣ_1-6アルキルまたはＣ_2-6アルケニルを示し、nは０または１を示し、Ｒ⁷はＨまたはＲ¹⁰ＣＯ[Ｒ¹⁰はＣ_1-4アルキル、(Ｃ_1-4アルキル)アリール、Ｃ_3-6シクロアルキル、(Ｃ_3-6シクロアルキル)Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-6アルケニルまたは(Ｃ_2-6アルケニル)アリールを示す]を示し、Ｒ⁸はＨ、Ｃ_1-4アルキル、(Ｃ_1-4アルキル)アリールまたはアリールを示す。上記の化合物等は、金属プロテイナーゼ、ＴＮＦおよび／またはその他の活性と関連する症状の処置に利用できる。

Description

【発明の詳細な説明】ペプチジル化合物および金属プロテイナーゼのインヒビターとしてのその治療的使用発明の分野この発明は新規なペプチジル誘導体および該誘導体の製法と医学的使用に関する。発明の背景正常な組織においては、細胞結合組織の合成は細胞外基質の退化によって相殺され、この動的平衡においては２つの対立する効果が存在する。マトリックス(m atrix)の退化は内在する結合組織細胞および浸潤する炎症性細胞から放出されるプロテイナーゼの作用によってもたらされ、部分的には少なくとも３つのグループの金属プロテイナーゼの活性に起因する。これらの金属プロテイナーゼはコラゲナーゼ(間質コラゲナーゼ、ＭＭＰ−１;ＰＭＮコラゲナーゼ、ＭＭＰ−８)、ゼラチナーゼ(ゼラチナーゼＡ、ＭＭＰ−２、７２kＤa−ゼラチナーゼ、IV型コラゲナーゼ;ゼラチナーゼＢ、ＭＭＰ−９、９２kＤa−ゼラチナーゼ、IV型コラゲナーゼ)およびストロメリシン(プロテオグリカナーゼ、ＭＭＰ−３、ストロメリシン−１、トランシン;ストロメリシン−２、ＭＭＰ−１０;ストロメリシン− ３、ＭＭＰ−１１)である。通常、これらの異化酵素はこれらの合成と分泌のレベルおよびこれらの細胞外活性のレベルにおいて厳しく調節され、後者の調節は特異的インヒビター、例えば金属プロテイナーゼと不活性錯体を形成するＴＩＭＰ(金属プロテイナーゼの組織インヒビター)等、およびより一般的なプロテイナーゼインヒビター、例えばa₂−マクログロブリン等の作用によっておこなわれる。金属プロテイナーゼによって触媒される細胞外マトリックスの吸収によって促進される結合組織の調節できない破壊は多くの病的症状の特徴である。このような症状としては次のものが例示される:リウマチ性関節炎、骨関節炎、敗血性関節炎、角膜潰瘍、表皮潰瘍、胃漬瘍、腫瘍の転移または浸潤、歯周疾患、タンパク尿症、アテローム性プラク破裂に関連する冠状動脈血栓症および骨疾患。永続的無能をもたらす外傷を伴う病的症状(pathological squaelae)を予防するのにインヒビターは有用である。これらの化合物は排卵または着床を妨げるので産児制限の手段としても有用である。金属プロテイナーゼインヒビターの投与によってこれらの疾患の発病を有利な方向へ改善することが期待されており、このような目的のために多数の化合物が提案されている。これに関する一般的な概説文献としては次のものが挙げられる:ヴァール(Ｗahl)ら、Ａnn．Ｒep．Ｍed．Ｃhem. 、第２５巻、第１７５頁〜第１８５頁、アカデミックプレス社(サンジエゴ)１９９０年発行。金属プロテイナーゼを抑制する多数の低分子量のペプチド様化合物が報告されている。これらのうちで最も注目すべきものはアンギオテンシン転換酵素(ＡＣＥ)に関連するものであり、このような作因はデカペプチドアンギオテンシンＩから強力な昇圧物質であるアンギオテンシンIIへの転換を阻害する作用をする。このタイプの化合物はヨーロッパ特許出願ＥＰ−Ａ−００１２４０１号明細書に記載されている。また、関連するメルカプトアミドペプチジル誘導体も生体外および生体内においてＡＣＥインヒビター活性を示すことが報告されている[ウェラー(Ｗeller)ら、Ｂiochem．Ｂiophys．Ｒes．Ｃomm．、第１２５巻(１)、第８２頁〜第８９頁(１９８４年)]。ＴＮＦは、細胞に結合した２８kＤ前駆体として最初に生産されるサイトカインであり、これは活性な１７kＤ形として放出され[ジュー(Ｊue)ら、Ｂiochemis try、第２９巻、第８３７１頁〜第８３７７頁(１９９０年)]、該活性形は生体内における多数の有害な効果を媒介する。これをヒトまたはその他の動物に投与すると、炎症、発熱、心血管に影響を及ぼす効果、出血、凝固と急性相応答および急性疾患やショック状態の間にみられる症状と類似の症状がもたらされる。長期間にわたる投与によってもカヘキシーおよび無食欲症がもたらされる。ＴＮＦの過度の蓄積は致命的となる。特異的な抗体によるＴＮＦ効果のブロッキングが急性疾患、ショック状態、移植片−宿主反応(graft versus host reaction)および自己免疫疾患に有益であるという重要な証拠が動物実験の研究から得られている。ＴＮＦは一部の骨髄腫やリンパ腫に対する自己毛髪(autocrine)成長因子であり、これらの腫瘍を有する患者の正常な造血を抑制する作用をする。従って、ＴＮＦの生産もしくは作用を防止することは、多くの炎症、感染症、免疫疾患または悪性疾患の強力な治療的方策になると予測されている。この種の疾患には、特に限定的ではないが次のものが例示される:敗血性ショック、血行力学的ショックおよび敗血症症候群[マシソン(Ｍathison)ら、Ｊ.Ｃlin．Ｉnves t．、第８１巻、第１９２５頁〜第１９３７頁(１９８８年);ミースク(Ｍiethke) ら、Ｊ.Ｅxp．Ｍed．、第１７５巻、第９１頁〜第９８頁(１９９２年)]、虚血後の再灌流損傷、マラリア(グラウ(Ｇrau)ら、Ｉmmunol．Ｒev．、第１１２巻、第４９頁〜第７０頁(１９８９年)]、マイコバクテリウム感染症[バーネス(Barnes) ら、Ｉnfect．Ｉmm．、第６０巻、第１４４１頁〜第１４４６頁(１９９２年)]、髄膜炎、乾癬、充血性心不全、線維性疾患、悪態症、移植充血、癌、自己免疫疾患、リウマチ性関節炎、多発性硬化症、放射性障害、免疫反応抑制性モノクローナル抗体、例えば、ＯＫＴ３またはＣＡＭＰＡＴＨ−１等の投与後の毒性および酸素過剰症的歯槽損傷。現在の臨床的な抗ＴＮＦ対策にはコルチコステロイド、例えばデキサメタソン等の使用およびサイトカイン遺伝子転写の非特異的インヒビターであるシクロスポリン−ＡまたはＦＫ５０６の使用が含まれる。ホスホジエステラーゼインヒビター、例えば、ペントキシフィリン等はＴＮＦ遺伝子転写のより特異的なインヒビターであることが報告されている[エンドレス(Ｅndres Ｓ．)、Ｉmmunol．、第７２巻、第５６頁〜第６０頁(１９９１年);シャンデン(Ｓchandene)ら、Ｉmmu nol．、第７６巻、第３０頁〜第３４頁(１９９２年);アレグレ(Ａlegre)ら、Ｔr ansplantation、第５２巻、第６７４頁〜６７９頁(１９９１年);ビアンコ(Ｂian co)ら、Ｂlood、第７８巻、第１２０５頁〜第１２２１頁(１９９１年)]。サリドマイドも白血球によるＴＮＦの生産を抑制する[サンパジョ(Ｓanpajo)ら、Ｊ.Ｅ xp．Ｍed．、第１７３巻、第６９９頁〜第７０３頁(１９９１年)]。実験的条件下においては、抗−ＴＮＦモノクローナル抗体、可溶性ＴＮＦレセプターおよび可溶性ＴＮＦレセプター／免疫アドヘシンはＴＮＦの作用効果を特異的に抑制する[バッグバイ(Ｂagby)ら、Ｊ．Ｉnfect．Ｄis．、第１６３巻、第８３頁〜第８８頁(１９９１年);シャルパンティエ(Ｃharpentier)ら、Ｐresse-med．、第２０巻、第２００９頁〜第２０１１頁(１９９１年);シルバ(Ｓilva)ら、Ｊ．Ｉnfect ．Ｄis．、第１６２巻、第４２１頁〜第４２７頁(１９９０年);フランクス(Ｆra nks)ら、Ｉnfect．Ｉmmun．、第５９巻、第２６０９頁〜第２６１４頁(１９９１年);トレーシー(Ｔracey)ら、Ｎature、第３３０巻、第６６２頁〜第６６４頁( １９８７年);フィッシャー(Ｆischer)ら、ＰＮＡＳＵＳＡ(１９９２年)(印刷中);レスラウアー(Ｌesslauer)ら、Ｅur．Ｊ．Ｉmmunol．、第２１巻、第２８８３頁〜第２８８６頁(１９９１年);アシュケナジ(Ａshkenazi)ら、ＰＮＡＳＵＳＡ、第８８巻、第１０５３５頁〜第１０５３９頁(１９９１年)]。ＴＮＦの効果が２種のペプチド(ＴＮＦ−aおよびＴＮＦ−b)によって媒介されることが最近報告されている。これらのペプチドは相互にわずか３０％の相同性しか有していないが、同じレセプターを活性化させ、また、隣接遺伝子によって直接的にコードされる。従って、腫瘍壊死因子またはＴＮＦという用語は、本明細書で用いるように、腫瘍壊死因子aおよびＴＮＦ−aに比べて高度の配列相同性または実質的に類似の生理的効果を有するペプチド(例えば、ＴＮＦ−b)を意味する。結合組織の破壊に関連する金属プロテイナーゼ、例えば、コラゲナーゼ、ストロメリシンおよびゼラチナーゼ等の作用を抑制する特性を有する化合物が、生体外および生体内におけるＴＮＦの放出を抑制することが報告されている[ギアリング(Ｇearing)ら、Ｎature、第３７０巻、第５５５頁〜第５５７頁(１９９４年 );マクギーハン(ＭcＧeehan)ら、Ｎature、第３７０巻、第５５８頁〜第５６１頁(１９９４年);ＷＯ９３／２００４７]。これらの文献に報告されているインヒビターはヒドロキサミン酸亜鉛結合基を有している。コラゲナーゼを抑制する化合物は米国特許第４,５１１,５０４号明細書(１９８５年４月１６日発行)および同第４,５６８,６６６号明細書(１９８６年２月４日発行)に開示されている。ストロメリシン(プロテオグリカナーゼ)を抑制する関連する構造を有する化合物は米国特許第４,７７１,０３７号明細書(１９８８年９月１３日発行)に開示されている。ストロメリシンおよびコラゲナーゼインヒビターは敗血性関節炎に関連する関節軟骨損傷の防止に有用である。関節の細菌感染症は炎症反応を誘発し、該炎症反応は伝染性作因の除去が必要となる限度を越えて永続するので、組織成分の永続的損傷がもたらされる。細菌剤を動物実験に用いることによって、タンパク質分解活性を発現する関節炎反応を誘発させることが報告されている[ケース(Ｃas e)らＪ.Ｃlin．Ｉnvest．、第８４巻、第１７３１頁〜第１７４０頁(１９８９年 );ウイリアムズ(Ｗilliams)ら、Ａrth．Ｒheum．、第３３巻、第５３３頁〜第５４１頁(１９９０年)]。ストロメリシン、コラゲナーゼおよびゼラチナーゼのインヒビターは腫瘍転移の制御に有用であり、この場合、所望により、常用されている化学療法および／または照射療法を併用してもよい[マトリシアン(Ｍatrisian)ら、ＰＮＡＳＵＳＡ、第８３巻、第９４１３頁〜第９４１７頁(１９８６年);ウィルヘルム(Ｗil lhelm)ら、ＰＮＡＳＵＳＡ、第８４巻、第６７２５頁〜第６７２９頁(１９８７年);ウェルブ(Ｗerb)ら、Ｊ.Ｃell Ｂiol．第１０９巻、第８７２頁〜第８８９頁(１９８９年);リオッタ(Ｌiotta)ら、Ｌab．Ｉnvest．、第４９巻、第６３６頁〜第６４９頁(１９８３年);ライヒ(Ｒeich)ら、Ｍetastasis、チバ財団シンポジウム(ウィリー、チチェスター、１９８８年)、第１９３頁〜第２１０頁]。分泌プロテイナーゼ、例えば、ストロメリシン、コラゲナーゼおよびゼラチナーゼは、転移腫瘍浸潤中における細胞の移動を含む過程において重要な役割を果たす。実際、マトリックス金属プロテイナーゼが特定の腫瘍細胞系において過発現されることが証明されている。この場合、この酵素は下部の基底膜を浸透し、初期の腫瘍形成部位から腫瘍細胞を離脱させて循環系内へ流入させる。血管壁に付着した腫瘍細胞はこれらの金属プロテイナーゼを利用して下部の基底膜を貫通して他の組織内へ浸潤することによって腫瘍転移をもたらす。この過程を抑制することにより、現在利用されている化学療法および／または照射療法の効能を改善することが可能となる。これらのインヒビターは歯周疾患、例えば、歯肉炎等の抑制にも有用である。コラゲナーゼとストロメリシンの活性は、炎症を起こした歯肉から誘導された線維芽細胞から遮断されている[ユイット(Ｕitto)ら、Ｊ.Ｐeriodontal Ｒes．、第１６巻、第４１７頁〜第４２４頁(１９８１年)]。酵素の濃度は歯肉疾患の痛みと関連づけられている[オーバーオール(Ｏverall)ら、Ｊ.Ｐeriodontal Ｒes. 、第２２巻、第８１頁〜第８８頁(１９８７年)]。タンパク質分解過程はアルカリ熱傷による角膜の潰瘍化においても観察されている[ブラウン(Ｂrown)ら、Ａrch．Ｏpthalmol．、第８１巻、第３７０頁〜第３７３頁(１９６９年)]。メルカプト含有ペプチドは、ウサギのアルカリ熱傷角膜から単離されたコラゲナーゼを抑制する[バーンズ(Ｂurns)、Ｉnvest．Ｏpthalm ol．、第３０巻、第１５６９頁〜第１５７５頁(１９８９年)]。アルカリ熱傷眼または感染症により角膜が潰瘍化した眼を、これらの金属エンドプロテイナーゼのインヒビターと共にクエン酸ナトリウムもしくはアスコルビン酸ナトリウムおよび／または殺菌剤を用いて処理すると、角膜崩壊の進行が効果的に防止される。ストロメリシンは、尿中への血漿タンパク質の通過制限を主要な機能とする腎糸球体基底膜(ＧＢＭ)の組織成分の崩壊と関連づけられている[バリコス(Ｂaric os)ら、Ｂiochem．Ｊ.、第２５４巻、第６０９頁〜第６１２頁(１９８９年)]。腎糸球体疾患によってもたらされるタンパク尿は、血漿タンパク質に対するＧＢＭの透過率の増大によって引き起こされる過剰タンパク質含有尿である。ＧＢＭの透過率が増大する原因は知られていないが、ストロメリシンを含むプロテイナーゼが腎糸球体疾患において重要な役割を果たしている。この酵素の抑制により、腎機能不全に関連するタンパク尿が軽減される。ストロメリシンの活性の抑制により、冠状動脈血栓症へ導くアテローム性プラクの破裂が防止される。アテローム性プラクの引き裂きまたは破裂は冠状動脈血栓症を発生させる最も一般的な現象である。これらのプラクを包囲する結合組織マトリックスが炎症性細胞の浸潤によって放出されるサイトカインまたはタンパク質分解酵素によって不安定化または崩壊されることがプラクの亀裂の原因として提案されている。このようなプラクの破裂により、血管から血液が急激に流出すると急性の血栓症がもたらされる。高レベルのストロメリシンのＲＮＡメッセージが、手術時の心臓移植患者から採取されたアテローム性プラク内の個々の細胞に局在化することが見出されている[ヘニー(Ｈenny)ら、ＰＮＡＳＵＳＡ、第８８巻、第８１５４頁〜第８１５８頁]。これらの化合物によるストロメリシンの抑制により、アテローム性プラクを安定化させる結合組織マトリックスの崩壊の防止もしくは遅延を促進させ、これによって急性の冠状動脈血栓症の惹起を防止することができる。ストロメリシンとコラゲナーゼの特異的インヒビターは避妊薬としても有用である。ストロメリシンやコラゲナーゼを含む金属プロテイナーゼの発現は未受精卵、接合体および分割がさらに進行した受精卵において観察されており、その発現は胎児の胞胚段階において増大し、また、内胚葉分化によって増大することが証明されている[ブレンナー(Ｂrenner)ら、Ｇenes ＆Ｄevelop．、第３巻、第８４８頁〜第８５９頁(１９８９年)]。腫瘍の浸潤の場合のように、胞胚は金属プロテイナーゼを発現し、着床中は子宮壁の細胞外マトリックスを貫通する。これらの初期の発育過程におけるストロメリシンとコラゲナーゼの抑制により、子宮内における正常な胚の発育および／または着床が妨げられるものと考えられている。このような妨害作用は避妊法を構成する。さらに、コラゲナーゼが排卵過程においても重要な役割を果たすことが明らかにされている。この場合、卵胞の尖端領域上のコラーゲン被覆層は、卵子を逸脱させるためには貫通されなければならない。コラゲナーゼはこの過程において検出されており、インヒビターが排卵を妨害するのに有効であることが明らかにされている[ヴェスナー(Ｗoessner) ら、Ｓteroids、第５４巻、第４９１頁〜第４９９頁(１９８９年)]。また、排卵中のストロメリシン活性に関する役割も知られている[トー(Ｔoo)ら、Ｅndocrin .、第１１５巻、第１０４３頁〜第１０５０頁(１９８４年)]。コラーゲン分解活性およびストロメリシン活性は栄養失調性表皮水泡症においても観察されている[クロンベルガー(Ｋronberger)ら、Ｊ．Ｉnvest．Ｄermatol .、第７９巻、第２０８頁〜第２１１頁(１９８２年);サワムラ(Ｓawamura)ら、Ｂiochem．Ｂiophys．Ｒes．Ｃommun．、第１８４巻、第１００３頁〜第１００８頁(１９９１年)]。金属エンドプロテイナーゼの抑制により、皮膚の結合成分の急激な破壊は制限されるべきである。組織成分を含有する細胞外マトリックスのほかに、ストロメリシンはa₁−プロテイナーゼインヒビターを含む他の生体内基質を崩壊させるので、他のプロテイナーゼ、例えば、エラスターゼ等の活性に影響を及ぼす[ウィンヤード(Ｗinyard )ら、ＦＥＢＳＬetts．、第２７９巻(１)、第９１頁〜第９４頁(１９９１年)] 。金属エンドプロテイナーゼマトリックスの抑制により、内因性インヒビターの抗プロテイナーゼ活性を高くすることができる。最近の文献によれば、ＭＭＰ系の数種類の新規酵素が同定されており、これらのうちの一部の酵素は疾患において重要な役割を果たすことが明らかにされている。乳癌細胞に対して特有な酵素であるコラゲナーゼ３は乳癌において有用である[フレイジェ(Ｆreije)ら、Ｊ.Ｂiol．Ｃhem．、第２６９巻(２４)、第１６７６６頁〜第１６７７３頁(１９９４年)]。ＭＭＰ系の別の酵素であるＭＴ−ＭＭＰはゼラチナーゼＡの活性化において重要な酵素であることが明らかにされている[サトウ(Ｓato)ら、Ｎature、第３７０巻、第６１頁〜第６５頁(１９９４年)] 。ゼラチナーゼＡは、前述のような腫瘍の増殖と転移において重要な酵素である。 b−アミロイド前駆体タンパク質(ＡＰＰ)の崩壊により、老人性プラクの主要な構成要素であって、アルツハイマー疾患(ＡＤ)の患者にみられるアミロイドプラクが発生する。最近の２つの文献によれば、ＡＰＰを分解してアミロイドプラクを発生する金属プロテイナーゼ酵素が同定されている[アブラハム(Ａbraham) ら、Ｂiochemistry、第３３巻、第１９２頁〜第１９９頁(１９９４年);フーバー (Ｈuber)ら、Ｂiochem．Ｂiophys．Ｒes．Ｃomm．、第２０１巻(１)、第４５頁〜第５３頁(１９９４年)]。当業者に理解されるように、これらの新規な酵素と他のＭＭＰの間のホモロジーの有意な割合は、１種の酵素を抑制する化合物がこれらの新規な酵素をある程度抑制するという可能性をもたらす。従って、本発明に包含されるインヒビターは、これらの新規な酵素が関連する疾患において有用である。本発明の一つの目的は、細胞からのＴＮＦの放出を実質上抑制する化合物であって、ＴＮＦによって媒介される疾患の処置に使用できる化合物を提供することである。このような用途には、特に限定的ではないが、以下に例示する疾患の処置が含まれる:炎症、熱病、心血管効果、出血、凝血および急性相応答(acute p hase response)、カヘキシー、無食欲症、急性感染症、ショック状態、移植片 −宿主反応および自己免疫症。本発明の別の目的は、ＴＮＦの放出を抑制すると共に、ＭＭＰの作用を抑制する化合物であって、ＴＮＦおよび／またはＭＭＰによって媒介される疾患で患う患者の処置に使用できる化合物を提供することである。発明の概要本発明には、マトリックス金属プロテイナーゼおよび／または変性疾患(例えば、前記のような疾患)や癌を含むＴＮＦで媒介される疾患の有用なインヒビターである式(Ｉ)で表される新規なメルカプトアルキルペプチジル化合物が包含される。本発明の一つの観点によれば、新規な化合物は一般式(Ｉ)で表される化合物その塩、溶媒和物および水和物である。一般式(Ｉ)において、Ｒ¹等は少なくとも以下の意義を有する: Ｒ¹はＣ_1-6アルキル、Ｃ_2-6アルケニル、アリール、(Ｃ_1-6アルキル)アリールまたはＣ_1-6アルキル−ＡＲ⁹[ＡはＯ、ＮＲ⁹またはＳ(Ｏ)mを示し、Ｒ⁹はＨ、Ｃ_1-4アルキル、アリールまたは(Ｃ_1-4アルキル)アリールを示し、 mは０〜２の数を示す]を示し、Ｒ²はＨまたはＣ_1-6アルキルを示し、ＸはＮＲ⁴Ｒ⁵を示し、Ｒ⁴およびＲ⁵は相互に独立してＨまたはＣ_1-6アルキルを示すか[Ｒ⁴のアルキルは所望によりアミノ(ＮＨ₂)、アリールアミノ、保護アミノ、アリール、ジ(Ｃ_1-6 アルキル)アミノ、モノ(Ｃ_1-6アルキル)アミノ、ＣＯ₂Ｈ、保護カルボキシル、カルバモイル、モノ(Ｃ_1-6アルキル)カルバモイルまたはジ(Ｃ_1-6アルキル)カルバモイルによって置換されていてもよい]、または両者はＮと共にピロリジノ、ピペリジノまたはモルフォリノを形成し、Ｒ³は[Ａlk]nＲ⁶を示し、Ｒ⁶は所望により置換されたＣ_3-6シクロアルキル、Ｃ_3-6シクロアルケニル、Ｃ_1-6アルキル、ベンジル、(Ｃ_1-6アルコキシ)ベンジル、ベンジルオキシベンジルまたは３−インドリルメチルを示し、ＡlkはＣ_1-6アルキルまたはＣ_2-6アルケニルを示し、 nは０または１を示し、Ｒ⁷はＨまたはＲ¹⁰ＣＯ[Ｒ¹⁰はＣ_1-4アルキル、(Ｃ_1-4アルキル)アリール、Ｃ_3-6 シクロアルキル、(Ｃ_3-6シクロアルキル)Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-6アルケニルまたは(Ｃ_2-6アルケニル)アリールを示す]を示し、Ｒ⁸はＨ、Ｃ_1-4アルキル、(Ｃ_1-4アルキル)アリールまたはアリールを示す。発明の説明本発明による化合物は１個または２個以上の置換された不斉炭素原子[例えば、式(Ｉ)において星印☆で示す炭素原子]を有する。式(Ｉ)で表される化合物中に１個または２個以上の不斉中心があるために立体異性体が存在するが、本発明には鏡像体やジアステレオマーを含む全ての立体異性体およびセラミ混合物を含むこれらの混合物も包含される。これらの式において、「〜」はＲ−およびＳ−立体配置の可能性を示す潜在的不斉中心で使用し、また、「＜」および「・・・」は不斉中心における特有の立体配置を示すのに使用する。「Ｃ_1-6アルキル」は炭素原子数１〜６の直鎖状または分枝鎖状アルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、t−ブチル、ペンチルおよびヘキシル等を示す。従って、例えば、「Ａlk]nＲ⁶はt−ブチルであってもよい。「Ｃ_1-4アルキル」は炭素原子数１〜４の直鎖状または分枝鎖状アルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチルおよびt−ブチル等を示す。「Ｃ_2-6アルケニル」はＥもしくはＺ立体化学が可能な二重結合１個を有する炭素原子数２〜６の直鎖状または分枝鎖状アルケニル基、例えば、ビニル、１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニルおよび２−メチル−２−プロペニル等を示す。「Ｃ_3-6シクロアルキル」は炭素原子数３〜６の飽和脂環式基、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル等を示す。「Ｃ_3-6シクロアルケニル」は二重結合１個を有する炭素原子数３〜６の脂環式基、例えば、シクロペンテニルおよびシクロヘキセニル等を示す。「アリール」は所望により置換基、例えば、ハロゲン(フッ素、塩素、臭素およびヨウ素)、トリフルオロメチル、Ｃ_1-6アルキル、アルコキシおよびフェニル等から選択される置換基を有するフェニル基またはナフチル基を示す。「保護アミノ」および「保護カルボキシル」は、当業者に既知の方法によって保護されたアミノ基およびカルボキシル基を示す。例えば、アミノ基はベンジルオキシカルボニル、t−ブチルカルボニルおよびアセチル等によって保護されていてもよく、あるいはフタルイミド基等の形態であってもよく、また、カルボキシル基は易開裂性エステル、例えば、メチルエステル、エチルエステル、ベンジルエステルまたはt−ブチルエステルの形態で保護されていてもよい。「アルコキシ」は炭素原子数１〜６の直鎖状または分枝鎖状アルコキシ基、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシまたはt−ブトキシを示す。式(Ｉ)で表される化合物の塩には薬学的に許容される塩、例えば、無機酸または有機酸から誘導される酸付加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、p−トルエンスルホン酸塩、リン酸塩、硫酸塩、過塩素酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、クエン酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、酒石酸塩および安息香酸塩等が含まれる。塩は塩基を用いて形成させてもよい。この種の塩には無機塩基または有機塩基から誘導される塩、例えば、アルカリ金属塩(例えば、マグネシウム塩、カルシウム塩等)および有機アミン塩(例えば、モルホリン塩、ピペリジン塩、ジメチルアミン塩、ジエチルアミン塩等)等が含まれる。本発明による化合物中の「保護カルボキシル基」がエステル化されたカルボキシル基の場合、該基は代謝的に不安定なエステルＣＯ₂Ｒ¹¹であってもよい[Ｒ¹¹はエチル、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピル、α−ナフチル、β−ナフチル、２,４−ジメチルフェニル、４−t−ブチルフェニル、２,２,２−トリフルオロエチル、１−(ベンジルオキシ)ベンジル、１−(ベンジルオキシ)エチル、２− メチル−１−プロピオニルオキシプロピル、２,４,６−トリメチルベンジルオキシメチルまたはピバロイルオキシメチルであってもよい]。本発明による好ましい化合物は、式(Ｉ)においてＲ¹等が相互に独立してまたはいずれかの組合せが相互に従属して下記の意義を有する化合物である：Ｒ¹;Ｃ_1-4アルキルまたはＣ_1-3アルキル−ＯＨ基、例えば、２−メチルプロピル(イソブチル)基または２−ヒドロキシエチル基、Ｒ²;水素原子 n;０Ｒ⁴;水素原子またはＣ_1-3アルキル基、例えば、メチル基、Ｒ⁵;水素原子またはＣ^1-3アルキル基、例えば、メチル基、Ｒ⁶;ベンジル基または３−インドリルメチル基、Ｒ⁷;水素原子またはＲ¹⁰ＣＯ(Ｒ¹⁰はＣ_1-4アルキル基、例えば、メチル基を示す)、Ｒ⁸;Ｃ_1-4アルキル、アリールまたは(Ｃ_1-3アルキル)アリール基、例えば、フェニル基およびベンジル基。本発明による特に好ましい化合物には下記の化合物が包含される: Ｎ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドＮ−[(アセトメルカプトアシル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)ペンタノイル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)プロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−３−メチルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−２−フェニルアセチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−３−フェニルプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ −フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−４−フェニルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ− フェニルアラニンＮ−メチルアミドＮ−(アセチルメルカプトアシル)−Ｌ−スレオニル−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドＮ−(アセチルメルカプトアシル)−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファンメチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプトペンタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプトプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプト−３−メチルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプト−２−フェニルアセチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプト−３−フェニルプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプト−４−フェニルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミドＮ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−スレオニル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドおよびＮ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド。一般式(Ｉ)で表される化合物は当該分野で既知の適当な方法および／または以下に説明する方法によって調製してもよく、これらの調製法も本発明の一部を構成する。式(Ｉ)で表される特定の立体異性体が必要な場合には、適当なホモキラル出発原料を用いて本明細書に記載の方法に従って合成してもよく、または、常套の分離技術(例えば、ＨＰＬＣ)を用いて混合物から異性体を分離してもよい。本発明による化合物は以下の方法によって調製してもよい。以下の説明と式において、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸およびＸは、特に言及しない限り、前記と同意義である。以下に記載の種々の化合物中に存在する官能基であって該化合物中に保持するのが望しい基、例えば、アミノ基、ヒドロキシル基またはカルボキシル基はいずれかの反応を開始する前に保護することが必要である。この場合、保護基は特定の反応の最終段階において除去すればよい。このような官能基の適当な保護基は当業者には明らかであり、詳細は例えば、次の文献を参照されたい:「有機合成における保護基」、ウィリー・インターサイエンス社発行、グリーン(Ｔ．Ｗ．Ｇreene)およびウッツ(Ｐ.Ｇ.Ｍ.Ｗuts)著。一般式(Ｉ)で表される化合物の調製法には、一般式(Ｉ)においてＲ⁷が適当な保護基、例えば、t−ブチル基またはアセテート基を示す一般式(II)で表される化合物を、例えば加水分解によって脱保護する工程が含まれる。式(Ｉ)で表される特定の立体異性体が必要な場合には、高速液体クロマトグラフィーのような常套の分離技術によって該異性体を得てもよい。しかしながら、所望により、カップリング反応において適当なホモキラル出発原料を用いて式( Ｉ)で表される特定の立体異性体を得てもよく、これについては以下に例示する。一般式(II)で表される中間体は、式(III)(式中、Ｒ⁷とＲ⁸は前記と同意義である)で表される酸またはこれらの活性誘導体を式(IV)で表されるアミンとカップリングさせることによって調製してもよい。式(III)で表される酸の活性誘導体には、例えば、酸無水物および酸ハロゲン化物(例えば、酸塩化物)が包含される。カップリング反応はこのタイプのアミノ化反応の場合の標準的条件下でおこなってもよい。即ち、この反応は溶剤、例えば、不活性有機溶剤、例えば、エーテル(例えば、テトラヒドロフランのような環状エーテル)、アミド(例えば、ジメチルホルムアミドのような置換アミド)またはハロゲン化炭化水素(例えば、ジクロロメタン)を使用し、所望による塩基、例えば、アミンのような有機塩基(例えば、トリエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンのような環状アミン)の存在下において、低温(例えば、−３０℃)から室温の間の温度、例えば、−２０℃〜０℃でおこなう。式(III)で表される酸を用いる場合、この反応はさらに縮合剤、例えば、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミドのようなジイミドの存在下でおこなってもよいが、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールのようなトリアゾールの存在下でおこなうのが有利である。あるいは、式(IV)で表されるアミンとの反応の前に、該酸をクロロ蟻酸エチルのようなクロロ蟻酸塩と反応させてもよい。一般式(IV)で表されるアミンは、式(Ｖ)で表される酸もしくはその活性誘導体を式(VI)で表されるアミンとカップリングさせた後、保護基を除去することによって調製してもよい。式(Ｖ)で表される酸の活性誘導体には、例えば、先に略述したように、酸無水物または酸塩化物のような酸ハロゲン化物が包含される。一般式(Ｖ)および(VI)で表されるアミノ酸およびこれらの誘導体はキラル体またはラセミ体として得ることができる。キラル体の場合、これらの化合物は、一般式(Ｉ)で表される化合物のキラル合成に必要な基本的な不斉要素を提供する。多数のこれらの誘導体は、出発原料として市販品を使用し、当業者に既知の方法によって容易に得ることができる。これに関しては、例えば、次の文献を参照されたい:「ぺプチド合成の実際」、ボダンスズク(Ｍ．Ｂodanszk)ら著、スプリンガー・フェアラーク(ニューヨーク)１９８４年発行;ＷＯ９２／２１３６０。一般式(II)で表される化合物は、一般式(VII)[式中、Ｒ¹⁴は適当な脱離基(例えば、臭素原子のようなハロゲン原子またはメタンスルホネートのようなアルキルスルホネートエステル)を示す]で表される化合物および一般式(VIII)[式中、Ｒ⁷は適当な保護基(例えば、t−ブチル基またはアセテート基)を示す]で表されるチオールを、当業者に既知の標準的な条件下において(ＷＯ９０／０５７１９参照)、求核置換反応させることによって調製してもよい。一般式(VIII)で表されるチオールは、市販の出発原料を使用し、当業者に既知の方法によって調製してもよい。一般式(VIII)で表される多くのチオールが市販されている。一般式(VII)で表される化合物は、一般式(ＩＸ)(式中、Ｒ¹⁴とＲ⁸は前記と同意義を有する基またはこれらの適当な保護基を示す)で表される酸またはその活性誘導体および一般式(IV)で表されるアミンを、式(II)で表される化合物の調製に関して説明したカップリング条件と類似の条件下でカップリングさせることによって調製してもよい。式(III)および(IX)で表されるカルボン酸はキラル体またはラセミ体として得ることができる。これらの誘導体の多くは、市販の出発原料を使用し、当業者に既知の方法によって容易に得ることができる(ＷＯ９０／０５７１９)。一般式(Ｉ)で表される化合物は、式(Ｉ)で表される他の化合物の相互転換によって調製してもよい。即ち、例えば、式(Ｉ)(式中、Ｒ¹はＣ_1-6アルキル基を示す)で表される化合物は式(Ｉ)(式中、Ｒ¹はＣ_2-6アルキル基を示す)で表される化合物を適当な溶剤、例えば、エタノールのようなアルコール中でカーボン担持パラジウム触媒を用いて水素化することによって調製してもよい。式(Ｉ)においてＲ⁷ がＲ¹⁰ＣＯを示す化合物は、式(Ｉ)においてＲ⁷がＨを示す化合物を適当な溶剤、例えば、ジクロロメタンのような塩素化溶剤中、トリエチルアミンのような塩基の存在下において、適当な酸塩化物Ｒ¹⁰ＣＯＣｌを用いてアシル化することによって調製してもよい。得られる最終生成物または中間体の混合物は、その構成成分の物理化学的な差異に基づいて既知の方法、例えば、クロマトグラフィー、蒸留、分別結晶、または所定の条件下で可能であるならば塩形成等によって分離することができる。本発明による化合物は、ストロメリシン、コラゲナーゼおよびゼラチナーゼに関して生体外抑制活性を示し、また、ＴＮＦの放出に関して生体外抑制活性を示す。該化合物の活性と選択性は、例えば、以下の実施例Ａにおいて説明するような酵素抑制試験によって決定してもよい。本発明は、前述のようにストロメリシンに起因する障害または疾患で患う患者 (ヒトおよび／または乳製品、肉製品もしくは毛皮製品に関連する分野で問題となる哺乳動物またはペットとしての哺乳動物を含む)の処置法、特に、式(Ｉ)で表されるマトリックス金属プロテイナーゼインヒビターを投与することを含む処置法に関する。従って、式(Ｉ)で表される化合物は特に、骨関節炎、リューマチ性関節炎、および特定の転移性腫瘍細胞系においてみられるようなマトリックス金属プロテイナーゼの過発現による適応症や疾患の処置に使用できる。前述のように、式(Ｉ)で表される化合物はＴＮＦおよびＭＭＰのインヒビターとしての活性を示すのでヒトまたは獣医の分野において有用である。従って、別の観点によれば、本発明は、哺乳類、特にヒトにおいてＴＮＦおよび／またはＭＭＰによって媒介される疾患または病状の処置法(治療法および予防法)であって、前記の式(Ｉ)で表される化合物または薬学的に許容されるこれらの塩を哺乳類に有効処置量投与することを含む該処置法に関する。このような用途に対しては、式(Ｉ)で表される化合物は、ＴＮＦおよび／またはＭＭＰによって媒介される疾患または病状を処置(治療または予防)するための製剤の形態で使用してもよい。このような疾患または病状には次のものが含まれる:炎症、熱病、心血管効果、出血、凝血および急性相応答、カヘキシー、無食欲症、急性感染症、ショック状態、移植片−宿主反応、自己免疫症;組織破壊を伴うもの、例えば、骨吸収、炎症性疾患、皮膚病、腫瘍増殖、二次転移による浸潤と血管形成、リューマチ性関節炎、骨関節炎、歯周炎、歯肉炎、角膜潰瘍。リューマチ性関節炎、骨関節炎、特定の転移性腫瘍細胞系等にみられるようなマトリックス金属エンドプロテイナーゼの過発現に起因する適応症や疾患、またはマトリックス金属エンドプロテイナーゼまたはＴＮＦの生産増大によって媒介される他の疾患を処置するためには、式(Ｉ)で表される化合物のほかに非毒性の薬学的に許容されるキャリヤー、アジュバントおよび賦形剤を含有する単位投与形態の配合物を経口的、局所的、非経口的、吸入的、噴霧的または経直腸的に投与する。非経口的投与には皮下注射、静脈注射、筋肉注射、胸骨内注射および注入(infusion)が含まれる。本発明による化合物は温血動物、例えば、マウス、ラット、馬、牛、羊、犬および猫の処置のほかに、ヒトの処置においても有効である。前記の活性成分を含有する薬剤組成物は経口投与用に適した形態に調製してもよく、このような形態としてはタブレット、トローチ、ドロップ、水性もしくは油性懸濁液、分散性の粉末もしくは顆粒、エマルション、硬質もしくは軟質のカプセル、シロップおよびエリキシル等が例示される。経口投与用組成物は薬剤組成物の製造分野において既知のいずれかの方法によって調製すればよく、また、このような組成物には、薬学的に上品で風味のある製剤とするために、甘味剤、香味剤、着色剤および防腐剤から選択される１種または２種以上の添加剤を適宜配合してもよい。タブレットには、活性成分と共にタブレットの製造に適した非毒性の薬学的に許容される賦形剤を配合する。賦形剤としては不活性希釈剤(例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムおよびリン酸ナトリウム)、造粒剤および崩解剤(例えば、コーンスターチ、アルギン酸 )、結合剤(例えば、デンプン、ゼラチンおよびアカシア)および潤滑剤(例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸およびタルク)等が例示される。タブレットは被覆しなくてもよいが、既知の方法によって被覆することにより胃腸管内での崩壊と吸収を遅延させることによって活性成分を長期間にわたって徐放させてもよい。例えば、遅延剤としてモノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンを用いてもよい。タブレットは米国特許第４,２５６,１０８号および同第４,１６６,４５２号各明細書に記載の方法によって被覆することにより、浸透性の徐放性治療錠にしてもよい。経口用組成物は硬質ゼラチンカプセル(この場合、活性成分は固体状の不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリン等と混合する)または軟質カプセル(この場合、活性成分は水または油性媒体、例えは、ピーナッツオイル、流動パラフィンまたはオリーブ油等と混合する)の形態で提供してもよい。水性懸濁液には活性成分と共に、水性懸濁液の調製に適した賦形剤を配合する。このような賦形剤としては沈殿防止剤(例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアゴム )および分散剤もしくは湿潤剤が例示される。分散剤もしくは湿潤剤としてはレシチンのような天然に存在するホスファチド、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合物(例えば、ポリオキシエチレンステアレート)、エチレンオキシドと脂肪族長鎖アルコールとの縮合物(例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール)および脂肪酸とヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドとの縮合物、例えば、脂肪酸と無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとポリオキシエチレンとの縮合物(例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート)等が例示される。水性懸濁液には１種または２種以上の防腐剤(例えば、エチルp−ヒドロキシベンゾエート、n−プロピルp−ヒドロキシベンゾエート)、１種または２種以上の着色剤、１種または２種以上の香味剤、１種または２種以上の甘味剤(例えば、スクロースまたはサッカリン)を配合してもよい。油性懸濁液は、活性成分を植物油(例えば、ピーナッツオイル、オリーブ油、ゴマ油、ヤシ油)または鉱物油(例えば、流動パラフィン)に懸濁することによって調製してもよい。油性懸濁液には増粘剤、例えば、蜜ロウ、硬質パラフィンまたはセチルアルコールを配合してもよい。前記のような甘味剤および香味剤を配合することによって風味のある経口製剤を調製してもよい。これらの組成物は、アスコルビン酸のような抗酸化剤を添加して保存してもよい。水の添加によって水性懸濁液を調製するのに適した分散性の粉末および顆粒には活性成分のほかに分散剤もしくは湿潤剤、沈澱防止剤および１種または２種以上の防腐剤を配合する。適当な分散剤もしくは湿潤剤および沈澱防止剤は先に例示した。甘味剤、香味剤および着色剤を配合してもよい。本発明による薬剤組成物は水中油形エマルションの形態であってもよい。油性相は植物油(例えば、オリーブ油、ピーナッツオイル)、鉱物油(例えば、流動パラフィン)またはこれらの混合物であってもよい。適当な乳化剤としては天然ゴム(例えば、アカシアゴム、トラガントゴム)、天然ホスファチド(例えば、大豆ホスファチド、レシチン)、脂肪酸と無水ヘキシトールから誘導される完全エステルもしくは部分エステル(例えば、ソルビタンモノオレエート)および該部分エステルとエチレンオキシドとの縮合物(例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート)が例示される。このエマルションには甘味剤や香味剤を配合してもよい。シロップおよびエリキシルは甘味剤、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはスクロースを用いて調製してもよい。この種の組成物には粘滑剤、防腐剤、香味剤および着色剤を配合してもよい。薬剤組成物は注射可能な無菌水性もしくは油性懸濁液の形態であってもよい。この種の懸濁液は前記の適当な分散剤もしくは湿潤剤および沈澱防止剤を使用し、既知の方法によって調製すればよい。注射可能な無菌製剤は、非毒性の薬学的に許容される希釈剤もしくは溶剤、例えば、１,３−ブタンジオールを媒体とする注射可能な無菌溶液または懸濁液であってもよい。この場合に使用してもよい賦形剤および溶剤としては、水、リンゲル液および等張性塩化ナトリウム溶液等が例示される。さらに、無菌不揮発油を溶剤または懸濁媒体として用いてもよい。この種の不揮発油としては、合成のモノグリセリドやジグリセリドを含む剌激の少ないいずれの不揮発油を用いてもよい。また、注射用組成物の調製にはオレイン酸のような脂肪酸を用いてもよい。式(Ｉ)で表される化合物は、経直腸投与用の坐剤形態で投与してもよい。この種の組成物は、常温では固体であるが、直腸内の温度では液体となる適当な無刺激性賦形剤と活性成分と混合することによって調製することができ、該組成物は直腸内で融解して活性成分を放出する。適当な賦形剤としてはココア乳脂およびポリエチレングリコールが例示される。局所的用途には、式(Ｉ)で表される化合物を含有するクリーム、軟膏、ゼリー、溶液または懸濁液を用いればよい。このような局所的な投与態様には、含漱剤やうがい剤としての使用が含まれる。前述の疾患や病状を処置するのに有効な１日あたりの投与量は、患者の体重１ kgあたり約０．０５mg〜約１４０mgである(１日あたりの患者への投与量:約２. ５mg〜約７g)。例えば、炎症は、式(Ｉ)で表される化合物を患者の体重１kgあたり約０．０１mg／日〜約５０mg／日投与することによって効果的に処置することができる(１日あたりの患者への投与量：約０．５mg〜約３．５g)。単一投与形態の組成物にキャリヤーと共に配合される活性成分の量は処置される患者の個体差や投与様式の相違によって変化し、例えば、ヒトに経口投与するための組成物の場合には、全組成物の約５〜約９５％である。単位投与形態の組成物中の活性成分の量は、一般的には約１mg〜約５００mgである。しかしながら、個々の患者に対する具体的な投与量は種々の要因によって左右される。このような要因には、使用する特定の化合物の活性、患者の年齢、体重、全身的健康状態および性別、投与のダイエット時間、投与経路、排泄速度、併用薬剤の種類および治療を受ける特定の疾患の痛みの程度等が含まれる。以下の非限定的な実施例１〜２３は、下記の中間体を含む原料を用いる式(Ｉ) で表される化合物の調製例を示すものである。また、実施例Ａ〜Ｄは試験プロトコルを示すものである。実施例においては次の略語を用いる: ＤＣＣ;ジシクロヘキシルカルボジイミドＲＴ;室温ＥＤＣ;１−(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリドＴＨＦ;テトラヒドロフランＴＮＦa;腫瘍壊死因子a ＰＭＡ;ホルボル−１３−ミリステート−１２−アセテートＥＬＩＳＡ;酵素−結合免疫吸着剤アッセイ中間体１Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド乾燥したＴＨＦ(３５ml)にＬ−フェニルアラニン−Ｎ−ベンジルカルバメート (４．００g)とＮ−ヒドロキシスクシンイミド(１．６９g)を溶解した溶液にＤＣＣ(３．０２g)を０℃で添加し、混合物を０℃で１６時間撹拌した後、セライトを用いる濾過処理に付した。濾液をメチルアミンの４０％水溶液(５ml)に添加し、混合物をＲＴで２４時間撹拌した後、反応混合物を真空下で濃縮させ、粗製物 (６．０１g)をエタノール(２５０ml)に溶解させた。ボンベ内に入れた該エタノール溶液に、カーボンにＰdを１０％担持した触媒を約２mlのＨ₂Ｏに加えた懸濁液を添加し、該混合物を７２４kＰa(１０５psi)の水素ガスの存在下において１８時間撹拌した。反応液をセライトを用いる濾過処理に付し、濾液を真空下での蒸発処理に付し、残渣を１Ｎ塩酸(１１０ml)とジクロロメタン(５０ml)を用いる分配処理に付した。分層させ、水性層をジクロロメタン(５０ml)を用いて抽出し、これを３Ｎ水酸化ナトリウム溶液を用いてpＨが約１４になるまで塩基性化させた後、ジクロロメタンを用いて抽出した(３×５０ml)。抽出物を一緒にし、Ｎ a₂ＳＯ₄を用いて乾燥させ、濾過処理に付し、濾液を蒸発処理に付すことによって、標記化合物を無色粘性の油状物として２．２４gを得た(該油状物は高真空下で固化する)。ＴＬＣのＲf:０．１５(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃｌ₂) 中間体２Ｌ−トリプトファンＮ−メチルアミド中間体１の製法に準拠し、Ｌ−トリプトファン−Ｎ−ベンジルカルバメート( ５０g)を出発原料として標記化合物を無色油状物として１４．３g得た[ＴＬＣのＲf:０．３０(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂)]。中間体３Ｎ−[Ｎ−(カルボベンジルオキシ)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド乾燥したＴＨＦ(３０ml)に中間体１(１．３３g)、Ｌ−ロイシン−Ｎ−ベンジルカルバメート(１．９８g)、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール(１．２１g)およびＥＤＣ(１．５７g)を加え、該混合物を０℃で２４時間撹拌した。水(１０ml )とジクロロメタン(１０ml)を反応混合物に加え、有機溶剤を真空下で除去し、水性相を１Ｎ塩酸(１０ml)と酢酸エチル(２０ml)を用いる分配処理に付した。有機層を分離させ、これを重炭酸塩の８％飽和溶液(２０ml)およびブライン(２０m l)を順次用いて洗浄し、Ｎa₂ＳＯ₄を用いる乾燥処理に付し、濾過処理に付した後、濾液を蒸発処理に付して得られた不透明ゲルをジクロロメタンに再溶解させた。該溶液を真空下での蒸発処理に付すことによって標記化合物を無色固体として２．７８g得た[ＴＬＣのＲf:０．６０(酢酸エチル)]。中間体４Ｎ−[Ｎ−(カルボベンジルオキシ)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド中間体３の製法に準拠し、中間体２(１１.４ｇ)を出発原料として標記化合物を白色固体として２０g得た[ＴＬＣのＲf:０．４６(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂)] 。中間体５Ｎ−[Ｎ−(カルボベンジルオキシ)−Ｌ−スレオニル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド中間体３の製法に準拠し、Ｌ−スレオニン−Ｎ−ベンジルカルバメート(４．３g)を出発原料として標記化合物を無色油状物として７．７g得た[ＴＬＣのＲf: ０．３１(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂)]。中間体６Ｎ−(Ｌ−ロイシル)−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド中間体３(２．７８ｇ)をエタノール(１４０ml)に溶解させ、該溶液に、カーボンにＰdを１０％担持させた触媒(０．５ｇ)を約３mlの水に加えたスラリーを添加し、該懸濁液を水素ガス雰囲気下において１６時間撹拌した。反応混合物をセライトを用いる濾過処理に付し、濾液をジクロロメタン(２０ml)を用いて洗浄した後、蒸発処理に付すことによって無色の半固体を得た。該半固体を１Ｎ塩酸( １００ml)に溶解させ、該溶液をジクロロメタンを用いて抽出し(３×５０ml)、３Ｎ水酸化ナトリウム溶液を用いて塩基性化させた後、ジクロロメタンを用いて抽出した(３×５０ml)。一緒にした抽出物をＮa₂ＳＯ₄を用いる乾燥処理に付し、次いで濾過処理に付した後、濾液を蒸発処理に付すことによって標記化合物を無色固体として１．６６g得た[ＴＬＣのＲf:０．１３(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂) 。中間体７Ｎ−(Ｌ−ロイシル)−Ｌ−トリプトファンメチルアミドシクロヘキセン(５０ml)とエタノール(５０ml)との混合溶剤に中間体４(２g) を溶解させた溶液を１０％カーボン担持Ｐd触媒(０．２g)を用いて処理した。混合物は２時間還流させた。反応混合物をセライトを用いる濾過処理に付し、濾液を真空下での蒸発処理に付し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー処理 (ＳiＯ₂、１０％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂)に付すことによって標記化合物を吸湿性の無色固体として１．０５g得た[ＴＬＣのＲf:０．３８(１０％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂ )]。中間体８Ｎ−(Ｌ−スレオニル)−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド中間体７の製法に準拠し、中間体５(６.６g)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として３.３１g得た[ＴＬＣのＲf:０．０５(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂)]。中間体９アセチルメルカプト酢酸エタノール(２０ml)にナトリウム(４６０mg)を加えた溶液にチオール酢酸(１. ５０ml)を添加し、５分後にブロム酢酸(２．７８g)を添加し、該混合物をＲＴで１８時間撹拌した。反応混合物をジクロロメタンを用いて希釈した後、セライトを用いる濾過処理に付し、濾液を蒸発処理に付すことによって淡黄色油状物を得た。この粗製物をジクロロメタン(１０ml)に溶解させ、これをセライトを用いる濾過処理に付した後、濾液を蒸発処理に付すことによって標記化合物を淡黄色油状物として２．８４g得た[¹ＨＮＭＲ(２００ＭＨz;ＣＤＣl₃;ＲefＴＭＳ)２．４１(s,３Ｈ)および３．７５(s,２Ｈ)]。中間体１０ (ＲＳ)−２−ブロモペンタン酸１．２５Ｍ硫酸(１３０ml)にＤ,Ｌ−nor−バリン(１０g)と臭化カリウム(３５．５g)を溶解させた溶液を固体状亜硝酸ナトリウム(８．８ｇ)を用いて０℃で１時間かけて少量ずつ処理した。この溶液をＲＴまで温めた後、２時間撹拌した。混合物をジクロロメタンを用いて抽出し(２×１００ml)、一緒にした抽出物をＭ gＳＯ₄を用いて乾燥させた後、真空下での蒸発処理に付すことによって標記化合物を無色油状物として１１．５３g得た[ＴＬＣのＲf:０．６０(ＥtＯＡc)]。中間体１１ (ＲＳ)−２−ブロモ−３−メチルブタン酸中間体１０の製法に準拠し、Ｄ,Ｌ−バリン(１０ｇ)を出発原料とし、標記化合物を無色油状物として１１．４８g得た[ＴＬＣのＲf:０．５４(ＥtＯＡc)]。中間体１２ (ＲＳ)−２−ブロモ−２−フェニル酢酸中間体１０の製法に準拠し、Ｄ,Ｌ−フェニルグリシン(１０g)を出発原料とし、標記化合物を淡黄色油状物として７．２４g得た[ＴＬＣのＲf:０．５８(ＥtＯＡc)]。中間体１３ (ＲＳ)−２−ブロモ−３−フェニルプロパン酸中間体１０の製法に準拠し、Ｄ,Ｌ−フェニルアラニン(５g)を出発原料とし、標記化合物を淡黄色油状物として６．７２g得た[ＴＬＣのＲf:０．５８(ＥtＯＡ c)]。中間体１４ (ＲＳ)−２−ブロモ−４−フェニルブタン酸中間体１０の製法に準拠し、Ｄ,Ｌ−homo−フェニルアラニン(９７０mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として１．０g得た[ＴＬＣのＲf:０．１３( ＥtＯＡc)]。中間体１５ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)ペンタン酸中間体１０(３．０g)をエタノール(５０ml)に溶解させた溶液をチオール酢酸カリウム(２．１g)を用いて処理し、混合物をＲＴで一夜撹拌した後、真空下での蒸発処理に付し、残渣を水(３０ml)とジクロロメタン(３０ml)を用いる分配処理に付した。有機層をブラインを用いて洗浄し、ＭgＳＯ₄を用いる乾燥処理に付した後、真空下での蒸発処理に付すことによって標記化合物を黄色油状物として２．２３g得た[ＴＬＣのＲf:０．５５(ＥtＯＡc)]。中間体１６ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)プロパン酸中間体１５の製法に準拠し、(ＲＳ)−２−ブロモプロパン酸(１．６３g)を出発原料とし、標記化合物を黄色油状物として１．３８g得た[ＴＬＣのＲf:０．４ (５％ＥtＯＨ−ＣＨＣl₃)]。中間体１７ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−３−メチルブタン酸中間体１５の製法に準拠し、中間体１１(５ｇ)を出発原料とし、標記化合物を淡黄色油状物として４．１g得た[ＴＬＣのＲf:０．５(ＥtＯＡc)]。中間体１８ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−２−フェニル酢酸中間体１５の製法に準拠し、中間体１２(３．０g)を出発原料とし、標記化合物を黄色油状物として１．６４g得た[ＴＬＣのＲf:０．５(ＥtＯＡc)]。中間体１９ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−３−フェニルプロパン酸中間体１５の製法に準拠し、中間体１３(２．０g)を出発原料とし、標記化合物を黄色油状物として１．４１g得た[ＴＬＣのＲf:０．８０(ＥtＯＡc)]。中間体２０ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−４−フェニルブタン酸中間体１５の製法に準拠し、中間体１４(８６０mg)を出発原料とし、標記化合物を黄褐色油状物として３４０mg得た[ＴＬＣのＲf:０．３５(ＥtＯＡc)]。実施例１Ｎ−[Ｎ−(アセチルメルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド中間体６(１１３mg)および中間体９(５２mg)を乾燥ＴＨＦ(１０ml)に溶解させ、これにＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール(６３mg)を添加し、さらにＥＤＣ( ８２mg)を添加した後、０℃で1６時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮させ、残渣を１Ｎ塩酸(２０ml)と酢酸エチル(２０ml)を用いる分配処理に付し、層分離後、有機相を重炭酸ナトリウムの飽和溶液(２×２０ml)およびブライン(２０ml) を用いて抽出し、抽出物をＭgＳＯ4を用いて乾燥させた後、蒸発処理に付すことによって無色固体の粗製物(１４６mg)を得た。この粗製物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(８×１．５cm:溶離液;ＥtＯＡc:充填剤;ＣＨ₂Ｃl₂)を用いて精製することによって標記化合物を無色固体として１１０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．３５(ＥtＯＡc) ¹ＨＮＭＲ(２００ＭＨz;ＣＤＣl₃;ＲefＴＭＳ):０．９０(m,６Ｈ),１．３− １．８(m,３Ｈ),２．４(s,３Ｈ),２．７(d,３Ｈ),２．９−３．３(m,２Ｈ),３．５(s,２Ｈ),４．２(m,１Ｈ),４．６(m,１Ｈ),６．１(m,１Ｈ),６．４５(br．d, １Ｈ),６．６(br．d,１Ｈ),７．１−７．４(m,５Ｈ) 実施例２ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)ペンタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１の手順に準拠し、中間体１５(３００mg)および中間体６(５００mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として５４０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．６３(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂) Ｃ₂₃Ｈ₃₅Ｎ₃Ｏ₄Ｓ[４４９．６];[ＭＨ ]＝４５０;[ＭＮa ]＝４７２．実施例３ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)プロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１の手順に準拠し、中間体１６(１８０mg)およひ中間体６(３５５mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として３１４mg得た。ＴＬＣのＲf:０．３３(ＥtＯＡc) Ｃ₂₁Ｈ₃₁Ｎ₃Ｏ₄Ｓ[４２１．６];[ＭＨ ]＝４２２実施例４ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−３−メチルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１の手順に準拠し、中間体１７(３３０mg)および中間体６(５５３mg)を出発原料とし、標記化合物をジエチルエーテルから再結晶させることによって白色固体として５７０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．３６,０．４０(ジアステレオマー)(ＥtＯＡc) Ｃ₂₃Ｈ₃₅Ｎ₃Ｏ₄Ｓ[４４９．６];[ＭＨ ]＝４５０;[ＭＮa ]＝４７２実施例５ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−２−フェニルアセチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１の手順に準拠し、中間体１８(３６０mg)および中間体６(５００mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として６６０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．３７(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂) Ｃ₂₆Ｈ₃₃Ｎ₃Ｏ₄Ｓ[４８３．６];[ＭＨ ]＝４８４,[ＭＮa ]＝４９６実施例６ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−３−フェニルプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ −フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１の手順に準拠し、中間体１９(４２０mg)および中間体６(５５３mg)を出発原料とし、標記化合物をジエチルエーテルから再結晶させることによって白色固体として４１０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．３６，０．４３(ジアステレオマー)(ＥtＯＡc) Ｃ₂₇Ｈ₃₅Ｎ₃Ｏ₄Ｓ[４９７．７];[ＭＨ ]＝４９８;[ＭＮa ]＝５２０実施例７ (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−４−フェニルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ− フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１の手順に準拠し、中間体２０(３５０mg)および中間体６(５００mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として６４０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．３９(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂) Ｃ₂₈Ｈ₃₇Ｎ₃Ｏ₄Ｓ[５１１．７];[ＭＨ ]＝５１２;[ＭＮa ]＝５３４実施例８Ｎ−[Ｎ−(アセチルメルカプトアセチル)−Ｌ−スレオニル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド実施例１の手順に準拠し、中間体９(０．４８g)および中間体８(１．０g)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として０．８３g得た。ＴＬＣのＲf:０．３５(７％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂) ¹ＨＮＭＲ(２００ＭＨz:ＣＤＣl₃＋ＣＤ₃ＯＤ:ＲefＴＭＳ)．１．１(d,３Ｈ ),２．４(s,３Ｈ),２．７(d,３Ｈ),３．１(m,２Ｈ),３．６(d,２Ｈ),４．２(m, ２Ｈ),４．６(m,１Ｈ),７．２(m,５Ｈ). 実施例９Ｎ−[Ｎ−(アセチルメルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド実施例１の手順に準拠し、中間体９(２２０mg)および中間体７(５００mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として５９０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．２２(ＥtＯＡc) Ｃ₂₂Ｈ₃₀Ｎ₄Ｏ₄Ｓ[４４６．６];[ＭＨ ]＝４４７実施例１０Ｎ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド実施例１で調製した生成物(１６mg)を水酸化アンモニウム飽和溶液(２００ml) およびメタノール(４００ml)と共に窒素雰囲気下、ＲＴで２時間撹拌した。この溶液を２Ｎ塩酸を用いて酸性化し、混合物をジクロロメタンを用いて抽出した( ３×４０ml)。一緒にした抽出物をＮa₂ＳＯ₄を用いて乾燥させ、濾過処理に付した後、濾液を蒸発処理に付すことによって無色固体の粗製物を１４．２mg得た。この粗製物をフラッシュカラムクロマトグラフィー(１．５×１０cm:溶離液;Ｅt ＯＡc:充填剤;ＣＨ₂Ｃl₂)を用いて精製することによって標記化合物を無色固体として６．０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．２３(ＥtＯＡc). ¹ＨＮＭＲ(２００ＭＨz:ＣＤＣl₃;ＲefＴＭＳ):０．９０(d,３Ｈ),０．９３ (d,３Ｈ),１．４８−１．７１(m,３Ｈ),１．８６(t,１Ｈ),２．７４(d,３Ｈ),３．０２−３．１７(m,４Ｈ),４．４０(m,１Ｈ),４．６２(q,１Ｈ),６．０３(br m,１Ｈ),６．８２(br d,１Ｈ),６．９９(br d,１Ｈ),７．１２−７．３７(m, ５Ｈ). 実施例１１ (ＲＳ)−３−メルカプトペンタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１０の手順に準拠し、実施例２で調製した生成物(２００mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として１８０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．３７(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂) Ｃ₂₁Ｈ₃₃Ｎ₃Ｏ₃Ｓ[４０７．６];[ＭＨ ]＝４０８;[ＭＮa ]＝４３０実施例１２ (ＲＳ)−２−メルカプト−３−メチルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１０の手順に準拠し、実施例４で調製した生成物(２００mg)を出発原料として標記化合物を白色固体として１９０mg得た。ＴＬＣのＲf:０．４１(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂) Ｃ₂₁Ｈ₃₃Ｎ₃Ｏ₃Ｓ[４０７．６];[ＭＨ ]＝４０８,[ＭＮa ]＝４３０実施例１３ (ＲＳ)−２−メルカプト−２−フェニルアセチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１０の手順に準拠し、実施例５で調製した生成物(２００mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として１７３mg得た。ＴＬＣのＲf:０．２８[５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃｌ₂] Ｃ₂₄Ｈ₃₁Ｎ₃Ｏ₃Ｓ[４４１．６];[ＭＨ ]＝４４２,[ＭＮa ]＝４６４実施例１４ (ＲＳ)−２−メルカプト−３−フェニルプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１０の手順に準拠し、実施例６で調製した生成物(２００mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として１８５mg得た。ＴＬＣのＲf:０．２８[５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂] Ｃ₂₅Ｈ₃₃Ｎ₃Ｏ₃Ｓ[４５５．６];[ＭＨ ]＝４５６実施例１５ (ＲＳ)−２−メルカプト−４−フェニルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド実施例１０の手順に準拠し、実施例７で調製した生成物(１５０mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として１３８mg得た。ＴＬＣのＲf:０．２０[５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂] Ｃ₂₆Ｈ₃₅Ｎ₃Ｏ₃Ｓ[４６９．６];[ＭＨ ]＝４７０,[ＭＮa ]＝４９２実施例１６Ｎ−[Ｎ−(メルカブトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド実施例１０の手順に準拠し、実施例９で調製した生成物(１２０mg)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として１００mg得た。ＴＬＣのＲf:０．１２[５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂] Ｃ₂₀Ｈ₂₈Ｎ₃Ｏ₃Ｓ[３９０．５];[ＭＨ ]＝３９１実施例１７Ｎ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−スレオニル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド実施例１０の手順に準拠し、実施例８で調製した生成物(０．３g)を出発原料とし、標記化合物を白色固体として０．０９g得た。ＴＬＣのＲf:０．０９[５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂] ¹ＨＮＭＲ(２００ＭＨz,ＤＭＳＯ)１．０(d,３Ｈ),２．５(d,３Ｈ),２．８( m,３Ｈ),３．０(d．d,１Ｈ),３．２(m,２Ｈ),３．９(m,１Ｈ),４．２(d．d,１Ｈ ),４．４(m,１Ｈ),５．０(d,１Ｈ),７．２(m,５Ｈ),７．８(m,１Ｈ),８．０(m, ２Ｈ) 実施例１８ (ＲＳ)−２−メルカプトプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミドナトリウムメトキシド(１０mg)をメタノール(１．５ml)に溶解させた溶液を実施例３で調製した生成物(５６mg;０．１３３mmol)を用いて処理し、混合物をＲＴで１時間撹拌した。溶剤を真空下で蒸発させ、残渣をジクロロメタン(１５ml) と２Ｍ塩酸(１０ml)を用いる分配処理に付し、水性層をジクロロメタン(１０ml) を用いて再抽出し、一緒にした抽出物をＮa₂ＳＯ₄を用いて乾燥させた後、真空下での蒸発処理に付すことによって白色固体を得た。この白色固体をカラムクロマトグラフィー(ＳiＯ₂;３％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂)を用いて精製することによって標記化合物を白色固体として１３mg得た。Ｃ₁₉Ｈ₂₉Ｎ₃Ｏ₃Ｓ[３７９．５];ＭＳ[ＭＨ ]＝３８０ＴＬＣのＲf:０．３２(５％ＭeＯＨ−ＣＨ₂Ｃl₂) 実施例１９〜２３実施例１８の手順に準拠し、下記の５種の化合物を調製した。Ｒ¹＝＜ＣＨ₂ＳＣＨ₃ (実施例１９) Ｒ¹＝＜ＣＨ₂ＳＯＣＨ₃ (実施例２０) Ｒ¹＝＜ＣＨ₂ＳＯ₂ＣＨ₃(実施例２１) Ｒ¹＝＜ＣＨ₂ＯＨ (実施例２２) Ｒ¹＝＜ＣＨ₂ＣＨ₂ＯＨ (実施例２３) なお、一般式(Ｉ)のＲ²等はいずれも同一であり、下記の意義を有する: Ｒ²＝Ｒ⁴＝Ｒ⁸＝ＨＲ⁵＝ＣＨ₃ Ｒ⁶＝…ベンジルＲ⁷＝ＣＨ₃ＣＯ n＝０実施例Ａ一般式(Ｉ)で表される化合物のコラゲナーゼのインヒビターとしての効能をカウストン(Ｃawston)とバレット(Ｂarrett)の方法に従って測定した[Ａnal．Ｂio chem．、第９９巻、第３４０頁〜第３４５頁(１９７９年)]。即ち、被験インヒビターの１mＭ溶液またはその希釈液をコラーゲンおよびコラゲナーゼ[５mＭＣaＣl₂、０．０５％Ｂrij３５、６０mＭＮaＣlおよび０．０２％ＮaＮ₃を含有する５０mＭＴris(pＨ７．６)を用いて緩衝化したもの]と共に３７℃で１６時間インキュベートした。コラーゲンとしては、カウストンとマーフィー(Ｍurp hy)の方法[Ｍethods in Ｅnzymology、第８０巻、第７１１頁(１９８１年)]によって調製したアセチル化した³Ｈ−また¹⁴Ｃ−コラーゲンを用いた。コラゲナーゼのコラーゲン基質分解能は放射性標識の種類によって変化しなかった。試料を遠心分離処理に付すことによって未消化コラーゲンを沈降させ、放射性上澄み液のアリコートを加水分解の尺度としてのシンチレーション計数管上でのアッセイのために採取した。インヒビターの１mＭ溶液またはその希釈液の存在下でのコラゲナーゼ活性を、インヒビターの不存在下での対照中での活性と比較し、コラゲナーゼを５０％抑制するインヒビターの濃度(ＩＣ₅₀)を決定した。実施例Ｂストロメリシン抑制活性一般式(Ｉ)で表される化合物のストロメリシンのインヒビターとしての効能をカウストンらの方法によって測定した[Ｂiochem．Ｊ．、第１９５巻、第１５９頁〜第１６５頁(１９８１年)]。即ち、被験インヒビターの１mＭ溶液またはその希釈液をストロメリシンおよび¹⁴Ｃ−アセチル化カゼイン[５mＭＣaＣl₂、０．０５％Ｂrij３５および０．０２％ＮaＮ₃を含有する５０mＭＴris(pＨ７．６) を用いて緩衝化したもの]と共に３７℃で１６時間インキュベートした。カゼインはカウストンらの上記文献に記載の方法によって¹⁴Ｃ−アセチル化した。インヒビターの１mＭ溶液またはその希釈液の存在下でのストロメリシンの活性を、インヒビターの不存在下での対照中での活性と比較し、ストロメリシンを５０％抑制するインヒビターの濃度(ＩＣ₅₀)を決定した。実施例Ｃゼラチナーゼ抑制活性一般式(Ｉ)で表される化合物のゼラチナーゼのインヒビターとしての効能をハリス(Ｈarris)とクレーン(Ｋrane)の方法[Ｂiochem．Ｂiophys．Ａcta、第２５８巻、第５６６頁〜第５７６頁(１９７２年)]によって測定した。即ち、被験インヒビターの１mＭ溶液またはその希釈液をゼラチナーゼおよび熱変性させた³Ｈ −または¹⁴Ｃ−アセチル化コラーゲン[５mＭＣaＣl₂、０．０５％Ｂrij３５および０．０２％ＮaＮ₃を含有する５０mＭＴris(pＨ７．６)を用いて緩衝化したもの]と共に３７℃で１６時間インキュベートした。³Ｈ−または¹⁴Ｃ−ゼラチンはカウストンとマーフィーによる前述の方法によって調製した³Ｈ−または¹⁴ Ｃ−コラーゲンを６０℃で３０分間インキュベートして熱変性させることによって調製した。未消化ゼラチンはトリクロロ酢酸の添加によって沈澱させた後、遠心分離処理によって除去した。インヒビターの１mＭ溶液またはその希釈液の存在下でのゼラチナーゼ活性を、インヒビターの不存在下での対照中での活性と比較し、ゼラチナーゼを５０％抑制するインヒビターの濃度(ＩＣ₅₀)を決定した。実施例ＤＴＮＦa生産の抑制一般式(Ｉ)で表される化合物のＴＮＦa生産のインヒビターとしての効能を以下の方法によって測定した。被験インヒビターの１mＭ溶液またはその希釈液をＵ９３７細胞(ヒトの組織球リンパ腫)と共に５％ＣＯ₂雰囲気下、３７℃でインキュベートした。該細胞はＲＰＭ１１６４０培地に２×１０⁶／mlの細胞密度で懸濁させた後、最終濃度５０nＭのＰＭＡを用いて処理したものを用いた。１８時間後、市販のＥＬＩＳＡキット(Ｒ＆Ｄシステムズ社製)を用いて上澄み液中のＴＮＦaの濃度を測定した。インヒビターの１mＭ溶液またはその希釈液の存在下での活性を、インヒビターの不存在下での対照中での活性と比較し、ＴＮＦa 生産を５０％抑制するインヒビターの濃度を決定した。本発明による化合物は前記の実施例Ａ〜Ｄにおいてインヒビターとして有意な活性を示した。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年１１月２０日【補正内容】請求の範囲１．次式(Ｉ)で表される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは水和物: 式中、Ｒ¹はＣ^1-6アルキル、Ｃ^2-6アルケニル、アリール、(Ｃ_1-6アルキル)アリールまたはＣ_1-6アルキル−ＡＲ⁹[ＡはＯ、ＮＲ⁹またはＳ(Ｏ)mを示し、Ｒ⁹はＨ、Ｃ_1- ₄ アルキル、アリールまたは(Ｃ_1-4アルキル)アリールを示し、mは０〜２の数を示す]を示し、Ｒ²はＨまたはＣ_1-6アルキルを示し、Ｒ⁴およびＲ⁵は相互に独立してＨまたはＣ_1-6アルキルを示すか[Ｒ⁴のアルキルは所望によりアミノ(ＮＨ₂)、アリールアミノ、保護アミノ、アリール、ジ(Ｃ_1- ₆ アルキル)アミノ、モノ(Ｃ_1-6アルキル)アミノ、ＣＯ₂Ｈ、保護カルボキシル、カルバモイル、モノ(Ｃ_1-6アルキル)カルバモイルまたはジ(Ｃ_1-6アルキル)カルバモイルによって置換されていてもよい]、または両者はＮと共にピロリジノ、ピペリジノまたはモルフォリノを形成し、Ｒ⁶は所望により置換されたＣ_3-6シクロアルキル、Ｃ_3-6シクロアルケニル、Ｃ₁ _-6 アルキル、ベンジル、(Ｃ_1-6アルコキシ)ベンジル、ベンジルオキシベンジルまたは３−インドリルメチルを示し、ＡlkはＣ_1-6アルキルまたはＣ_2-6アルケニルを示し、 nは０または１を示し、Ｒ⁷はＨまたはＲ¹⁰ＣＯ[Ｒ¹⁰はＣ_1-4アルキル、(Ｃ_1-4アルキル)アリール、Ｃ_3- ₆ シクロアルキル、(Ｃ_3-6シクロアルキル)Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-6アルケニルまたは(Ｃ_2-6アルケニル)アリールを示す]を示し、Ｒ⁸はＨ、Ｃ_1-4アルキル、(Ｃ_1-4アルキル)アリールまたはアリールを示し、アリールは、ハロゲン原子、ＣＦ₃、Ｃ_1-6アルキル、アルコキシおよびフェニルから選択される置換基によって随意に置換されていてもよいフェニルまたはナフチルを示す。２．Ｒ¹がアルキル、アルケニル、アリールまたはアルキルアリールであり、Ｒ⁷およびＲ⁸が各々Ｈである請求項１記載の化合物。３．下記の群から選択される請求項１記載の化合物: Ｎ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドＮ−[(アセトメルカプトアシル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド２−(アセチルチオ)ペンタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ− メチルアミド２−(アセチルチオ)プロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ− メチルアミド２−(アセチルチオ)−３−メチルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド２−(アセチルチオ)−２−フェニルアセチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド２−(アセチルチオ)−３−フェニルプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド２−(アセチルチオ)−４−フェニルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ− フェニルアラニンＮ−メチルアミドＮ−(アセチルメルカプトアシル)−Ｌ−スレオニル−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドＮ−(アセチルメルカプトアシル)−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファンメチルアミド２−メルカプトペンタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド２−メルカプトプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド２−メルカプト−３−メチルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド２−メルカプト−２−フェニルアセチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド２−メルカプト−３−フェニルプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド２−メルカプト−４−フェニルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミドＮ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−スレオニル−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドおよびＮ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファンメチルアミド。４．化合物が単一の鏡像体もしくはジアステレオマーまたはこれらの異性体の混合物である請求項１から３いずれかに記載の化合物。５．請求項１から４いずれかに記載の化合物および生理学的に許容される希釈剤またはキャリヤーを含有する治療用薬剤組成物。６．マトリックス金属プロティナーゼまたはＴＮＦ活性と関連する症状の予防もしくは治療用薬剤の製造のための請求項１から４いずれかに記載の化合物の使用法。７．症状が次の群から選択される症状である請求項６記載の使用法:炎症、熱病、心血管効果、出血、凝血および急性相応答、カヘキシー、無食欲症、急性感染症、ショック状態、移植片−宿主反応、自己免疫症、マラリア、再灌流損傷、髄膜炎、乾癬、組織破壊、歯周炎および歯肉炎。８．症状が次の群から選択される症状である請求項６記載の使用法：腫瘍、腫瘍増殖、血管形成および二次転移による浸潤。９．症状が次の群から選択される症状である請求項６記載の使用法：リウマチ性関節炎、骨関節炎、骨吸収および多発性硬化症。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 38/00 ＡＢＣ 9051−4ＣＡ６１Ｋ 37/02 ＡＢＣＡＢＥ 9051−4ＣＡＡＢＡＢＧ 9051−4ＣＡＢＧＡＢＪ 9051−4ＣＡＢＪＡＢＮ 9051−4ＣＡＢＥＡＢＸ 9051−4ＣＡＢＮＡＢＹ 9051−4ＣＡＢＸＡＣＡ 9051−4ＣＡＢＹＡＣＢ 9051−4ＣＡＣＡＡＣＫ 9051−4ＣＡＣＢＡＣＭ 9051−4ＣＡＣＫＡＤＵ 9051−4ＣＡＣＭＡＤＸ 9051−4ＣＡＥＢＡＥＢ 9051−4ＣＡＤＸＣ０７Ｋ 5/065 ＡＤＵ // Ｃ０７Ｍ 7:00 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ディッケンズ、ジョナソンイギリス、ケンブリッジ、シービー４・４ダブリューイー、ミルトン・ロード、ケンブリッジ・サイエンス・パーク（番地の表示なし）、カイロサイエンス・リミテッド内 (72)発明者オーエン、デイビッド・アランイギリス、ケンブリッジ、シービー４・４ダブリューイー、ミルトン・ロード、ケンブリッジ・サイエンス・パーク（番地の表示なし）、カイロサイエンス・リミテッド内 (72)発明者バクスター、アンドリュー・ダグラスイギリス、ケンブリッジ、シービー４・４ダブリューイー、ミルトン・ロード、ケンブリッジ・サイエンス・パーク（番地の表示なし）、カイロサイエンス・リミテッド内

Claims

【特許請求の範囲】１．次式(Ｉ)で表される化合物またはその塩、溶媒和物もしくは水和物: 式中、Ｒ¹はＣ_1-6アルキル、Ｃ_2-6アルケニル、アリール、(Ｃ_1-6アルキル)アリールまたはＣ_1-6アルキル−ＡＲ⁹[ＡはＯ、ＮＲ⁹またはＳ(Ｏ)mを示し、Ｒ⁹はＨ、Ｃ_1- ₄ アルキル、アリールまたは(Ｃ_1-4アルキル)アリールを示し、mは０〜２の数を示す]を示し、Ｒ²はＨまたはＣ_1-6アルキルを示し、Ｒ⁴およびＲ⁵は相互に独立してＨまたはＣ_1-6アルキルを示すか[Ｒ⁴のアルキルは所望によりアミノ(ＮＨ₂)、アリールアミノ、保護アミノ、アリール、ジ(Ｃ_1- ₆ アルキル)アミノ、モノ(Ｃ_1-6アルキル)アミノ、ＣＯ₂Ｈ、保護カルボキシル、カルバモイル、モノ(Ｃ_1-6アルキル)カルバモイルまたはジ(Ｃ_1-6アルキル)カルバモイルによって置換されていてもよい]、または両者はＮと共にピロリジノ、ピペリジノまたはモルフォリノを形成し、Ｒ⁶は所望により置換されたＣ_3-6シクロアルキル、Ｃ_3-6シクロアルケニル、Ｃ₁ _-6 アルキル、ベンジル、(Ｃ_1-6アルコキシ)ベンジル、ベンジルオキシベンジルまたは３−インドリルメチルを示し、ＡlkはＣ_1-6アルキルまたはＣ_2-6アルケニルを示し、 nは０または１を示し、Ｒ⁷はＨまたはＲ¹⁰ＣＯ[Ｒ¹⁰はＣ_1-4アルキル、(Ｃ_1-4アルキル)アリール、Ｃ_3- ₆ シクロアルキル、(Ｃ_3-6シクロアルキル)Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_2-6アルケニルまたは(Ｃ_2-6アルケニル)アリールを示す]を示し、Ｒ⁸はＨ、Ｃ_1-4アルキル、(Ｃ_1-4アルキル)アリールまたはアリールを示す。２．Ｒ¹がアルキル、アルケニル、アリールまたはアルキルアリールであり、Ｒ⁷およびＲ⁸が各々Ｈである請求項１記載の化合物。３．下記の群から選択される請求項１記載の化合物: Ｎ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドＮ−[(アセトメルカプトアシル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)ペンタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)プロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−３−メチルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−２−フェニルアセチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−３−フェニルプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ −フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−(アセチルチオ)−４−フェニルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ− フェニルアラニンＮ−メチルアミドＮ−(アセチルメルカプトアシル)−Ｌ−スレオニル−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドＮ−(アセチルメルカプトアシル)−Ｌ−ロイシル−Ｌ−トリプトファンメチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプトペンタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプトプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプト−３−メチルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプト−２−フェニルアセチル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプト−３−フェニルプロパノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミド (ＲＳ)−２−メルカプト−４−フェニルブタノイル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−フェニルアラニンＮ−メチルアミドＮ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−スレオニル]−Ｌ−フェニルアラニンメチルアミドおよびＮ−[Ｎ−(メルカプトアセチル)−Ｌ−ロイシル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド。４．請求項１から３いずれかに記載の化合物および生理学的に許容される希釈剤またはキャリヤーを含有する治療用薬剤組成物。５．マトリックス金属プロテイナーゼまたはＴＮＦ活性と関連する症状の予防もしくは治療用薬剤の製造のための請求項１から３いずれかに記載の化合物の使用法。６．症状が次の群から選択される症状である請求項５記載の使用法:炎症、熱病、心血管効果、出血、凝血および急性相応答、カヘキシー、無食欲症、急性感染症、ショック状態、移植片−宿主反応、自己免疫症、マラリア、再灌流損傷、髄膜炎、乾癬、リウマチ性関節炎、多発性硬化症および腫瘍。