JPH09315994A - 抗腫瘍活性物質 - Google Patents
抗腫瘍活性物質Info
- Publication number
- JPH09315994A JPH09315994A JP8134774A JP13477496A JPH09315994A JP H09315994 A JPH09315994 A JP H09315994A JP 8134774 A JP8134774 A JP 8134774A JP 13477496 A JP13477496 A JP 13477496A JP H09315994 A JPH09315994 A JP H09315994A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- active substance
- antitumor
- molecular weight
- average molecular
- weight average
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 固型癌に対しても強力な抗腫瘍効果を発揮す
る物質を得ることを目的とする。 【解決手段】 ハラタケ属に属するカワリハラタケの子
実体の熱水不溶でかつエタノール抽出残渣成分を５％蓚
酸アンモニウム水溶液で抽出し、抽出物を塩酸で分解
後、ゲル濾過及びアフィニティークロマトグラフによ
り、ゲル濾過で測定した時の重量平均分子量２９×１０
4 ダルトンで分散度７．３、重量平均分子量２．４×１
０4 ダルトンで分散度４．１、及び重量平均分子量２．
０×１０4 ダルトンで分散度３．６の抗腫瘍活性物質が
得られる。この物質は、固型癌に対して有意な抗腫瘍効
果を発揮する。
る物質を得ることを目的とする。 【解決手段】 ハラタケ属に属するカワリハラタケの子
実体の熱水不溶でかつエタノール抽出残渣成分を５％蓚
酸アンモニウム水溶液で抽出し、抽出物を塩酸で分解
後、ゲル濾過及びアフィニティークロマトグラフによ
り、ゲル濾過で測定した時の重量平均分子量２９×１０
4 ダルトンで分散度７．３、重量平均分子量２．４×１
０4 ダルトンで分散度４．１、及び重量平均分子量２．
０×１０4 ダルトンで分散度３．６の抗腫瘍活性物質が
得られる。この物質は、固型癌に対して有意な抗腫瘍効
果を発揮する。
Description
【０００１】
【発明の技術分野】本発明は、抗腫瘍活性物質、それを
含有する抗腫瘍剤及び健康食品に関する。更に詳細に
は、ハラタケ属に属するカワリハラタケの子実体のエタ
ノール抽出残渣を集め、この残渣を熱水抽出し、その残
渣を更に５％蓚酸アンモニウム水溶液で抽出して得られ
る可溶性抽出物を酸分解し、濃縮精製して得ることので
きる抗腫瘍活性物質、それを含有する抗腫瘍剤及び健康
食品に関する。
含有する抗腫瘍剤及び健康食品に関する。更に詳細に
は、ハラタケ属に属するカワリハラタケの子実体のエタ
ノール抽出残渣を集め、この残渣を熱水抽出し、その残
渣を更に５％蓚酸アンモニウム水溶液で抽出して得られ
る可溶性抽出物を酸分解し、濃縮精製して得ることので
きる抗腫瘍活性物質、それを含有する抗腫瘍剤及び健康
食品に関する。
【０００２】
【従来の技術】ハラタケ属に属するカワリハラタケ（Ａ
ｇａｒｉｃｕｓ ｂｌａｚｅｉ Ｍｕｒｉｌｌ）は別名
ヒメマツタケとも呼ばれ、主にブラジル東南部サンパウ
ロのピエダーテの出地に自生し、昔から住民が食用にし
ていたキノコの一種である。近年、日本においてもカワ
リハラタケは栽培されるようになり、糖尿病や高血圧の
治療に利用されてきた。
ｇａｒｉｃｕｓ ｂｌａｚｅｉ Ｍｕｒｉｌｌ）は別名
ヒメマツタケとも呼ばれ、主にブラジル東南部サンパウ
ロのピエダーテの出地に自生し、昔から住民が食用にし
ていたキノコの一種である。近年、日本においてもカワ
リハラタケは栽培されるようになり、糖尿病や高血圧の
治療に利用されてきた。
【０００３】カワリハラタケから抗腫瘍活性を有する物
質を探索する研究も多く行われており、例えばカワリハ
ラタケの子実体あるいは菌子体を水性溶媒で抽出するこ
とにより抗腫瘍作用を有する多糖体が得られることが報
告されている（特開昭５５−７４７９７号公報、特開昭
６４−６７１９４号公報、特開昭６４−６７１９５号公
報、特開昭５５−１０８２９２号公報など）。また、ヒ
メマツタケの子実体から抗腫瘍作用を有する核酸成分が
得られることも報告されている（特開昭６４−６６１２
７号公報）。これらの抗腫瘍活性を有する物質は、いず
れも水性溶媒あるいは熱水に可溶な成分から採取された
ものである。
質を探索する研究も多く行われており、例えばカワリハ
ラタケの子実体あるいは菌子体を水性溶媒で抽出するこ
とにより抗腫瘍作用を有する多糖体が得られることが報
告されている（特開昭５５−７４７９７号公報、特開昭
６４−６７１９４号公報、特開昭６４−６７１９５号公
報、特開昭５５−１０８２９２号公報など）。また、ヒ
メマツタケの子実体から抗腫瘍作用を有する核酸成分が
得られることも報告されている（特開昭６４−６６１２
７号公報）。これらの抗腫瘍活性を有する物質は、いず
れも水性溶媒あるいは熱水に可溶な成分から採取された
ものである。
【０００４】他方、特開平２−７８６３０号公報には、
カワリハラタケ子実体の熱水抽出残渣から抗腫瘍活性を
有する蛋白多糖体が単離されたことが報告されている。
即ち、カワリハラタケ子実体を熱水抽出処理して水溶性
成分を除去し、得られる残渣を加熱した１％蓚酸アンモ
ニウム水溶液で更に抽出処理して得られる残渣から抗腫
瘍活性を有する蛋白多糖体が得られたことが報告されて
いる。上記した物質は、いずれも、水性溶媒あるいは熱
水に可溶な成分から得られるものであるか、あるいは熱
水抽出残渣から得られるものであって加熱した１％蓚酸
アンモニウム水溶液には不溶な成分由来のものである。
カワリハラタケ子実体の熱水抽出残渣から抗腫瘍活性を
有する蛋白多糖体が単離されたことが報告されている。
即ち、カワリハラタケ子実体を熱水抽出処理して水溶性
成分を除去し、得られる残渣を加熱した１％蓚酸アンモ
ニウム水溶液で更に抽出処理して得られる残渣から抗腫
瘍活性を有する蛋白多糖体が得られたことが報告されて
いる。上記した物質は、いずれも、水性溶媒あるいは熱
水に可溶な成分から得られるものであるか、あるいは熱
水抽出残渣から得られるものであって加熱した１％蓚酸
アンモニウム水溶液には不溶な成分由来のものである。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】一方、本発明者らは、
カワリハラタケ子実体の熱水抽出残渣を加熱した１％蓚
酸アンモニウム水溶液で抽出し、その抽出物から抗腫瘍
作用を有する物質が得られることを見出し、特願平４−
１６０９２４（特開平６−９４２３号公報）として特許
出願した。しかしながら、この物質は、固型癌の治療用
に用いるための薬物としては、その抗腫瘍活性が十分に
強いとは言い難いものである。また、前記した、カワリ
ハラタケ子実体の水性溶媒あるいは熱水に可溶な成分か
ら得られる物質、及び熱水抽出残渣から得られるもので
あって加熱した１％蓚酸アンモニウム水溶液には不溶な
物質のいずれも同様にその抗腫瘍活性が十分に強いとは
言い難いものである。
カワリハラタケ子実体の熱水抽出残渣を加熱した１％蓚
酸アンモニウム水溶液で抽出し、その抽出物から抗腫瘍
作用を有する物質が得られることを見出し、特願平４−
１６０９２４（特開平６−９４２３号公報）として特許
出願した。しかしながら、この物質は、固型癌の治療用
に用いるための薬物としては、その抗腫瘍活性が十分に
強いとは言い難いものである。また、前記した、カワリ
ハラタケ子実体の水性溶媒あるいは熱水に可溶な成分か
ら得られる物質、及び熱水抽出残渣から得られるもので
あって加熱した１％蓚酸アンモニウム水溶液には不溶な
物質のいずれも同様にその抗腫瘍活性が十分に強いとは
言い難いものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らはカワリハラ
タケの子実体を加熱した７５〜９０％、望ましくは８０
〜８５％エタノールで６時間〜２４時間、望ましくは１
８時間〜２２時間処理し、抽出残渣を集め、これを熱水
で６時間〜２４時間、望ましくは１８時間〜２２時間抽
出して可溶成分を除去して再び残渣を集め、この残渣を
更に加熱した１％〜５％、望ましくは５％蓚酸アンモニ
ウムで６時間〜２４時間、望ましくは１８時間〜２２時
間抽出して得られた抽出物を、更に酸分解し、得られる
酸分解物を精製することによって、強力な抗腫瘍活性を
有する物質が得られ、この物質は抗腫瘍剤及び健康食品
の成分として有用であることを見出し本発明を完成し
た。
タケの子実体を加熱した７５〜９０％、望ましくは８０
〜８５％エタノールで６時間〜２４時間、望ましくは１
８時間〜２２時間処理し、抽出残渣を集め、これを熱水
で６時間〜２４時間、望ましくは１８時間〜２２時間抽
出して可溶成分を除去して再び残渣を集め、この残渣を
更に加熱した１％〜５％、望ましくは５％蓚酸アンモニ
ウムで６時間〜２４時間、望ましくは１８時間〜２２時
間抽出して得られた抽出物を、更に酸分解し、得られる
酸分解物を精製することによって、強力な抗腫瘍活性を
有する物質が得られ、この物質は抗腫瘍剤及び健康食品
の成分として有用であることを見出し本発明を完成し
た。
【０００７】本発明は、ハラタケ属に属するカワリハラ
タケの子実体の熱水不溶成分の１〜５％、望ましくは５
％蓚酸アンモニウム水溶液抽出物を酸分解して精製する
ことによって得ることのできる、ゲル濾過で測定した時
の重量平均分子量２９×１０ 4 ダルトンで分散度７．
３、重量平均分子量２．４×１０4 ダルトンで分散度
４．１、あるいは重量平均分子量２．０×１０4 ダルト
ンで分散度３．６の抗腫瘍活性物質に関する。更に本発
明は、上記抗腫瘍活性物質を有効成分として含有する抗
腫瘍剤に関する。更に本発明は、上記抗腫瘍活性物質を
有効成分として含有する健康食品に関する。
タケの子実体の熱水不溶成分の１〜５％、望ましくは５
％蓚酸アンモニウム水溶液抽出物を酸分解して精製する
ことによって得ることのできる、ゲル濾過で測定した時
の重量平均分子量２９×１０ 4 ダルトンで分散度７．
３、重量平均分子量２．４×１０4 ダルトンで分散度
４．１、あるいは重量平均分子量２．０×１０4 ダルト
ンで分散度３．６の抗腫瘍活性物質に関する。更に本発
明は、上記抗腫瘍活性物質を有効成分として含有する抗
腫瘍剤に関する。更に本発明は、上記抗腫瘍活性物質を
有効成分として含有する健康食品に関する。
【０００８】
【発明の実施の形態】ハラタケ属に属するカワリハラタ
ケは、既に広く知られているが、工業技術院微生物工業
研究所に受託番号、微工研菌寄第４７３１号として寄託
されている。カワリハラタケの子実体から本発明の抗腫
瘍活性物質を得るには以下の方法が採用される。子実体
は生の子実体あるいは乾燥した子実体のいずれでもよ
く、通常、生の子実体の場合には千切りにしたものが、
乾燥品の場合にはよく粉砕したものが用いられる。先
ず、子実体を加熱した７５〜９０％、望ましくは８０〜
８５％、例えば８０％エタノールで処理して可溶な成分
を除去して残渣を集める。この場合の温度は通常８０℃
程度であり、その処理時間は処理量などにもよるが通常
６時間〜２４時間、望ましくは１８〜２２時間程度であ
る。尚、このような処理により低分子有機化合物成分が
除去される。
ケは、既に広く知られているが、工業技術院微生物工業
研究所に受託番号、微工研菌寄第４７３１号として寄託
されている。カワリハラタケの子実体から本発明の抗腫
瘍活性物質を得るには以下の方法が採用される。子実体
は生の子実体あるいは乾燥した子実体のいずれでもよ
く、通常、生の子実体の場合には千切りにしたものが、
乾燥品の場合にはよく粉砕したものが用いられる。先
ず、子実体を加熱した７５〜９０％、望ましくは８０〜
８５％、例えば８０％エタノールで処理して可溶な成分
を除去して残渣を集める。この場合の温度は通常８０℃
程度であり、その処理時間は処理量などにもよるが通常
６時間〜２４時間、望ましくは１８〜２２時間程度であ
る。尚、このような処理により低分子有機化合物成分が
除去される。
【０００９】次いで、得られた残渣を熱水で処理して熱
水に可溶な成分を除去して、再び残渣を集める。これに
より、熱水可溶性中性及び酸性多糖類が除去される。こ
こで用いる熱水の温度は通常８０〜１００℃である。処
理時間は通常６時間〜２４時間、望ましくは１８〜２２
時間である。次いで、集めた残渣を加熱した１％〜５
％、望ましくは５％蓚酸アンモニウム水溶液で抽出し、
蓚酸アンモニウム水溶液に可溶な成分を回収する。蓚酸
アンモニウム水溶液は通常煮沸した状態にて抽出処理を
行う。かくして回収された可溶成分を集めて濃縮し、濃
縮後蓚酸アンモニウムを限外濾過により脱塩濃縮して凍
結乾燥する。
水に可溶な成分を除去して、再び残渣を集める。これに
より、熱水可溶性中性及び酸性多糖類が除去される。こ
こで用いる熱水の温度は通常８０〜１００℃である。処
理時間は通常６時間〜２４時間、望ましくは１８〜２２
時間である。次いで、集めた残渣を加熱した１％〜５
％、望ましくは５％蓚酸アンモニウム水溶液で抽出し、
蓚酸アンモニウム水溶液に可溶な成分を回収する。蓚酸
アンモニウム水溶液は通常煮沸した状態にて抽出処理を
行う。かくして回収された可溶成分を集めて濃縮し、濃
縮後蓚酸アンモニウムを限外濾過により脱塩濃縮して凍
結乾燥する。
【００１０】次いでこの凍結乾燥品を酸分解する。酸分
解に用いる酸としては、塩酸、硫酸、硝酸などの強酸が
好ましく、特に塩酸が好ましい。具体的には、例えば、
１Ｎ塩酸に凍結乾燥品を溶解し、室温にて１晩放置する
ことによって酸分解を実施することができる。酸分解
後、例えば、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、得
られる水溶液を遠心分離して不要物を除去し、上清を限
外濾過膜で脱塩濃縮し、凍結乾燥し、次いで精製工程に
付す。
解に用いる酸としては、塩酸、硫酸、硝酸などの強酸が
好ましく、特に塩酸が好ましい。具体的には、例えば、
１Ｎ塩酸に凍結乾燥品を溶解し、室温にて１晩放置する
ことによって酸分解を実施することができる。酸分解
後、例えば、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で中和し、得
られる水溶液を遠心分離して不要物を除去し、上清を限
外濾過膜で脱塩濃縮し、凍結乾燥し、次いで精製工程に
付す。
【００１１】得られる酸分解物の凍結乾燥品の精製は、
ゲル濾過及びアフィニティークロマトグラフィーにより
達成できる。ゲル濾過は、例えばＧＰＣカラム、ＴＳＫ
ｇｅｌ Ｇ ５０００ＰＷとＴＳＫｇｅｌ Ｇ ３００
０ＰＷ（各２１．５mm×３００mm、東ソー社製）を連結
したものなどを用いることによって実施できる。ゲル濾
過によって、酸分解物を、分子量１０5 〜１０6 ダルト
ン前後の高分子画分、及び分子量５×１０3 〜５×１０
4 ダルトン前後の低分子画分に分離する。次いで、得ら
れる高分子画分及び低分子画分を、それぞれアフィニテ
ィークロマトグラフィーに付して精製することによっ
て、本発明のゲル濾過で測定した時の重量平均分子量２
９×１０4 ダルトンで分散度７．３の抗腫瘍活性物質、
及びゲル濾過で測定した時の重量平均分子量２．４×１
０4 ダルトンで分散度４．１の抗腫瘍活性物質並びに重
量平均分子量２．０×１０4 ダルトンで分散度３．６の
抗腫瘍活性物質を、それぞれ高分子画分及び低分子画分
から得ることができる。アフィニティークロマトグラフ
ィーは、例えばＤＥＡＥカラム、ＴＳＫｇｅｌＤＥＡＥ
−５ＰＷ（２１．５mm×１５０mm×２：東ソー社製）な
どを用いることによって実施できる。本発明の重量平均
分子量２９×１０4 ダルトンで分散度７．３の抗腫瘍活
性物質は、ＤＥＡＥカラムに上記の高分子画分を吸着さ
せ、次いで０．５Ｍ ＮａＣｌ水溶液で溶出することに
よって得られる。重量平均分子量２．４×１０4 ダルト
ンで分散度４．１の抗腫瘍活性物質は、ＤＥＡＥカラム
に上記の低分子画分を吸着させ、次いで０．２Ｍ Ｎａ
Ｃｌ水溶液で溶出することにより、また重量平均分子量
２．０×１０4 ダルトンで分散度３．６の抗腫瘍活性物
質は０．５Ｍ ＮａＣｌ水溶液で溶出することによって
得られる。
ゲル濾過及びアフィニティークロマトグラフィーにより
達成できる。ゲル濾過は、例えばＧＰＣカラム、ＴＳＫ
ｇｅｌ Ｇ ５０００ＰＷとＴＳＫｇｅｌ Ｇ ３００
０ＰＷ（各２１．５mm×３００mm、東ソー社製）を連結
したものなどを用いることによって実施できる。ゲル濾
過によって、酸分解物を、分子量１０5 〜１０6 ダルト
ン前後の高分子画分、及び分子量５×１０3 〜５×１０
4 ダルトン前後の低分子画分に分離する。次いで、得ら
れる高分子画分及び低分子画分を、それぞれアフィニテ
ィークロマトグラフィーに付して精製することによっ
て、本発明のゲル濾過で測定した時の重量平均分子量２
９×１０4 ダルトンで分散度７．３の抗腫瘍活性物質、
及びゲル濾過で測定した時の重量平均分子量２．４×１
０4 ダルトンで分散度４．１の抗腫瘍活性物質並びに重
量平均分子量２．０×１０4 ダルトンで分散度３．６の
抗腫瘍活性物質を、それぞれ高分子画分及び低分子画分
から得ることができる。アフィニティークロマトグラフ
ィーは、例えばＤＥＡＥカラム、ＴＳＫｇｅｌＤＥＡＥ
−５ＰＷ（２１．５mm×１５０mm×２：東ソー社製）な
どを用いることによって実施できる。本発明の重量平均
分子量２９×１０4 ダルトンで分散度７．３の抗腫瘍活
性物質は、ＤＥＡＥカラムに上記の高分子画分を吸着さ
せ、次いで０．５Ｍ ＮａＣｌ水溶液で溶出することに
よって得られる。重量平均分子量２．４×１０4 ダルト
ンで分散度４．１の抗腫瘍活性物質は、ＤＥＡＥカラム
に上記の低分子画分を吸着させ、次いで０．２Ｍ Ｎａ
Ｃｌ水溶液で溶出することにより、また重量平均分子量
２．０×１０4 ダルトンで分散度３．６の抗腫瘍活性物
質は０．５Ｍ ＮａＣｌ水溶液で溶出することによって
得られる。
【００１２】本発明の重量平均２９×１０4 ダルトンで
分散度７．３の抗腫瘍活性物質は、アイボリーホワイ
ト、綿状で強吸湿性で、水に可溶性であるという性質を
有している。重量平均分子量２．４×１０4 ダルトンで
分散度４．１並びに重量平均分子量２．０×１０4 ダル
トンで分散度３．６の抗腫瘍活性物質は、褐色、吸湿性
で水に可溶性であるという性質を有している。重量平均
分子量２９×１０4 ダルトンで分散度７．３の抗腫瘍活
性物質は、ＵＶ２８０ｎｍでわずかに吸収が認められる
ことからその組成は主に多糖体からなるか一部若干蛋白
多糖体であると考えられる。重量平均分子量２．４×１
０4 ダルトンで分散度の４．１の抗腫瘍活性物質は、Ｕ
Ｖ２８０ｎｍでわずかに吸収を示すことからほとんど多
糖体より成り、重量平均分子量２．０×１０4 ダルトン
で分散度３．６の抗腫瘍活性物質はＵＶ２８０ｎｍで相
当程度の吸収が認められることから大部分は蛋白より構
成されその一部に多糖体が結合している複合体と考えら
れる。
分散度７．３の抗腫瘍活性物質は、アイボリーホワイ
ト、綿状で強吸湿性で、水に可溶性であるという性質を
有している。重量平均分子量２．４×１０4 ダルトンで
分散度４．１並びに重量平均分子量２．０×１０4 ダル
トンで分散度３．６の抗腫瘍活性物質は、褐色、吸湿性
で水に可溶性であるという性質を有している。重量平均
分子量２９×１０4 ダルトンで分散度７．３の抗腫瘍活
性物質は、ＵＶ２８０ｎｍでわずかに吸収が認められる
ことからその組成は主に多糖体からなるか一部若干蛋白
多糖体であると考えられる。重量平均分子量２．４×１
０4 ダルトンで分散度の４．１の抗腫瘍活性物質は、Ｕ
Ｖ２８０ｎｍでわずかに吸収を示すことからほとんど多
糖体より成り、重量平均分子量２．０×１０4 ダルトン
で分散度３．６の抗腫瘍活性物質はＵＶ２８０ｎｍで相
当程度の吸収が認められることから大部分は蛋白より構
成されその一部に多糖体が結合している複合体と考えら
れる。
【００１３】本発明の抗腫瘍活性物質は、例えば悪性黒
色腫由来のＭｅｔｈＡに対して強力な抗腫瘍作用を示
す。ＭｅｔｈＡは一般の固型癌の中でもっとも化学療法
剤に抵抗性を有することが知られたものであり〔Ｂｉｏ
ｔｈｅｒａｐｙ，３（２），５５７（１９８９）；Ｂｉ
ｏｔｈｅｒａｐｙ，４（４）９１５（１９９０）；癌と
化学療法，１８（１１）１８１２（１９９１）〕、従っ
て本発明の物質は他の固型癌に対しても十分に有効なも
のと期待できる。本発明の抗腫瘍活性物質は、治療に適
用する場合には、経口投与あるいは注射による投与が採
用される。経口投与の場合の剤型としては、錠剤、カプ
セル剤、顆粒剤などが挙げられ、これらは通常の方法に
より調製することができる。注射剤も通常用いられる注
射用ビークルに抗腫瘍活性物質を溶解もしくは分散させ
る通常の方法によって調製することができる。本発明の
抗腫瘍活性物質の投与量は、腫瘍の種類、投与ルートな
どによって変動するが、通常５〜１００mg／体重kgであ
る。
色腫由来のＭｅｔｈＡに対して強力な抗腫瘍作用を示
す。ＭｅｔｈＡは一般の固型癌の中でもっとも化学療法
剤に抵抗性を有することが知られたものであり〔Ｂｉｏ
ｔｈｅｒａｐｙ，３（２），５５７（１９８９）；Ｂｉ
ｏｔｈｅｒａｐｙ，４（４）９１５（１９９０）；癌と
化学療法，１８（１１）１８１２（１９９１）〕、従っ
て本発明の物質は他の固型癌に対しても十分に有効なも
のと期待できる。本発明の抗腫瘍活性物質は、治療に適
用する場合には、経口投与あるいは注射による投与が採
用される。経口投与の場合の剤型としては、錠剤、カプ
セル剤、顆粒剤などが挙げられ、これらは通常の方法に
より調製することができる。注射剤も通常用いられる注
射用ビークルに抗腫瘍活性物質を溶解もしくは分散させ
る通常の方法によって調製することができる。本発明の
抗腫瘍活性物質の投与量は、腫瘍の種類、投与ルートな
どによって変動するが、通常５〜１００mg／体重kgであ
る。
【００１４】また、本発明の抗腫瘍活性物質は、健康食
品の有効成分として用いることもできる。健康食品とし
て用いる場合には乾燥原料を前記した方法で精製し、凍
結乾燥品とした後、既存の食品に一定の割合にて配合
し、食品とする。例えば、その凍結乾燥品を含んだふり
かけとして、あるいはティーパックやカプセルに調製し
て用いることができる。また、その凍結乾燥品あるいは
濃縮液を、乳製品、油脂製品、調味料、菓子、果実ジュ
ース、清涼飲料等に添加して用いることもできる。これ
らに用いる場合の本発明の抗腫瘍活性物質の添加量は、
通常、健康食品中に０．００１〜０．１重量％含有する
量である。
品の有効成分として用いることもできる。健康食品とし
て用いる場合には乾燥原料を前記した方法で精製し、凍
結乾燥品とした後、既存の食品に一定の割合にて配合
し、食品とする。例えば、その凍結乾燥品を含んだふり
かけとして、あるいはティーパックやカプセルに調製し
て用いることができる。また、その凍結乾燥品あるいは
濃縮液を、乳製品、油脂製品、調味料、菓子、果実ジュ
ース、清涼飲料等に添加して用いることもできる。これ
らに用いる場合の本発明の抗腫瘍活性物質の添加量は、
通常、健康食品中に０．００１〜０．１重量％含有する
量である。
【００１５】
【発明の効果】ハラタケ属に属するカワリハラタケの子
実体の熱水不溶でかつエタノール不溶成分からの１〜５
％蓚酸アンモニウム水溶液抽出物を酸分解し、次いで精
製することによって、固型癌に対して強い抗腫瘍活性を
有する物質を得ることができる。
実体の熱水不溶でかつエタノール不溶成分からの１〜５
％蓚酸アンモニウム水溶液抽出物を酸分解し、次いで精
製することによって、固型癌に対して強い抗腫瘍活性を
有する物質を得ることができる。
【００１６】
【実施例】以下、本発明を実施例により更に詳細に説明
する。 実施例１．抗腫瘍活性物質の製造 (1) ヒメマツタケ乾燥子実体３０kgを粗粉砕（５mm以
下）する。子実体３０kgに８０％ v／v 、エタノール２
７０リットルを加え、加熱還流下２２時間抽出し、固液
分離をした後、残渣に８０％ v／v エタノール２７０リ
ットルを加えて上記と同様に処理し、これを３回繰り返
した。 (2) 上記(1) の抽出残渣に精製水２７０リットルを加
え、加熱還流下２２時間抽出し、固液分離をした。その
後、残渣に精製水２７０リットルを加えて上記と同様に
処理し、これを３回繰り返した。 (3) 上記(2) の抽出残渣に５％蓚酸アンモニウム水２７
０リットルを加え、加熱還流下２２時間抽出した。固液
分離後、３液を濃縮した。残渣に５％蓚酸アンモニウム
水２７０リットル加え、上記と同様に処理し、これを３
回繰り返した。全抽出液８００リットルを濃縮して８０
〜１００リットルとした。 (4) この溶液を濾紙で濾過し、限外濾過膜（分画分子量
１００００）で脱塩濃縮した。凍結乾燥したものを１Ｎ
ＨＣｌに溶解し、２４時間放置し、その後１ＮＮａＯ
Ｈ水溶液にて中和しpH７とした。遠心分離で不要物を切
除し、上清を限外濾過膜（分画分子量１００００）で脱
塩濃縮し、凍結乾燥した。
する。 実施例１．抗腫瘍活性物質の製造 (1) ヒメマツタケ乾燥子実体３０kgを粗粉砕（５mm以
下）する。子実体３０kgに８０％ v／v 、エタノール２
７０リットルを加え、加熱還流下２２時間抽出し、固液
分離をした後、残渣に８０％ v／v エタノール２７０リ
ットルを加えて上記と同様に処理し、これを３回繰り返
した。 (2) 上記(1) の抽出残渣に精製水２７０リットルを加
え、加熱還流下２２時間抽出し、固液分離をした。その
後、残渣に精製水２７０リットルを加えて上記と同様に
処理し、これを３回繰り返した。 (3) 上記(2) の抽出残渣に５％蓚酸アンモニウム水２７
０リットルを加え、加熱還流下２２時間抽出した。固液
分離後、３液を濃縮した。残渣に５％蓚酸アンモニウム
水２７０リットル加え、上記と同様に処理し、これを３
回繰り返した。全抽出液８００リットルを濃縮して８０
〜１００リットルとした。 (4) この溶液を濾紙で濾過し、限外濾過膜（分画分子量
１００００）で脱塩濃縮した。凍結乾燥したものを１Ｎ
ＨＣｌに溶解し、２４時間放置し、その後１ＮＮａＯ
Ｈ水溶液にて中和しpH７とした。遠心分離で不要物を切
除し、上清を限外濾過膜（分画分子量１００００）で脱
塩濃縮し、凍結乾燥した。
【００１７】(5) 上記(4) の酸分解処理後、精製した乾
燥粉末を１０mg／mlの割合で０．２ＭＮａＣｌで溶解し
た。溶解後遠心分離し、溶解上清を０．８μＭのｍｅｍ
ｂｒａｎｅ ｆｉｌｌｅｒで濾過した。上記濾過上清を
ゲル濾過カラム（ＴＳＫｇｅｌ Ｇ ５０００ＰＷ＋Ｔ
ＳＫｇｅｌ Ｇ ３０００ＰＷ；各５mm×３０mm、連結
カラム）にかけ、溶解した成分をＲ１（示差屈折率計）
にて高分子画分及び低分子画分を得た。この各画分を限
外濾過（分画分子量５０００）にて脱塩し、濃縮した。
高分子濃縮分画をＤＥＡＥカラム（ＴＳＫｇｅｌ ＤＥ
ＡＥ−５ＰＷ）にかけ、０．２Ｍ ＮａＣｌにて溶出し
たものを除去後０．５Ｍ ＮａＣｌで溶出し、限外濾過
にて脱塩したものを凍結乾燥濃縮後、水溶液としその可
溶性物質に強い抗腫瘍活性を認めた。又低分子濃縮分画
を同種のカラムにかけ、水で溶解したものを除去し、
０．２Ｍ ＮａＣｌと０．５Ｍ ＮａＣｌで溶出したも
のを限外濾過にて脱塩し、他と同じように調製した水溶
液に強い抗腫瘍活性を認めた。 (6) 上記(5) の工程を、以下の表１に更に具体的にし
た。
燥粉末を１０mg／mlの割合で０．２ＭＮａＣｌで溶解し
た。溶解後遠心分離し、溶解上清を０．８μＭのｍｅｍ
ｂｒａｎｅ ｆｉｌｌｅｒで濾過した。上記濾過上清を
ゲル濾過カラム（ＴＳＫｇｅｌ Ｇ ５０００ＰＷ＋Ｔ
ＳＫｇｅｌ Ｇ ３０００ＰＷ；各５mm×３０mm、連結
カラム）にかけ、溶解した成分をＲ１（示差屈折率計）
にて高分子画分及び低分子画分を得た。この各画分を限
外濾過（分画分子量５０００）にて脱塩し、濃縮した。
高分子濃縮分画をＤＥＡＥカラム（ＴＳＫｇｅｌ ＤＥ
ＡＥ−５ＰＷ）にかけ、０．２Ｍ ＮａＣｌにて溶出し
たものを除去後０．５Ｍ ＮａＣｌで溶出し、限外濾過
にて脱塩したものを凍結乾燥濃縮後、水溶液としその可
溶性物質に強い抗腫瘍活性を認めた。又低分子濃縮分画
を同種のカラムにかけ、水で溶解したものを除去し、
０．２Ｍ ＮａＣｌと０．５Ｍ ＮａＣｌで溶出したも
のを限外濾過にて脱塩し、他と同じように調製した水溶
液に強い抗腫瘍活性を認めた。 (6) 上記(5) の工程を、以下の表１に更に具体的にし
た。
【００１８】
【表１】
【００１９】表１に示されているように、図−１にゲル
濾過（ＧＰＣ分画）によるクロマトグラムのプロファイ
ルを示す。図−２及び図−３に、ゲル濾過により得られ
る高分子画分及び低分子画分を、アフィニティークロマ
トグラフィー（ＤＥＡＥ分画）に付した時のプロファイ
ルをそれぞれ示す。 (7) 表１に示されている酸分解処理品、ゲル濾過により
得られる高分子成分(a)及び低分子成分(b) 、更にアフ
ィニティークロマトグラフィーにより得られる高分子成
分ａ−１、ａ−２及びａ−３、及び低分子成分ｂ−１、
ｂ−２、ｂ−３について、ゲル濾過分析を行った。その
結果を表２に示す。
濾過（ＧＰＣ分画）によるクロマトグラムのプロファイ
ルを示す。図−２及び図−３に、ゲル濾過により得られ
る高分子画分及び低分子画分を、アフィニティークロマ
トグラフィー（ＤＥＡＥ分画）に付した時のプロファイ
ルをそれぞれ示す。 (7) 表１に示されている酸分解処理品、ゲル濾過により
得られる高分子成分(a)及び低分子成分(b) 、更にアフ
ィニティークロマトグラフィーにより得られる高分子成
分ａ−１、ａ−２及びａ−３、及び低分子成分ｂ−１、
ｂ−２、ｂ−３について、ゲル濾過分析を行った。その
結果を表２に示す。
【００２０】
【表２】
【００２１】ゲル濾過分析条件 カラム：TSKgel G5000PW＋TSKgel G3000PW （各２１．
５mm×３００mm） 検出：ＲＩ カラム温度：４０℃ 移動相：５０mM 硝酸ナトリウム 流速：０．５ml／分 注入量：２００μｌ（約１mg／ml、移動相） 分子量較正：プルラン（Shodex: ０．５８×１０4 、
１．２２×１０4 、２．３７×１０4 、４．８０×１０
4 、１０．０×１０4 、１８．６×１０4 、３８．６×
１０4 、８５．３×１０4 ）
５mm×３００mm） 検出：ＲＩ カラム温度：４０℃ 移動相：５０mM 硝酸ナトリウム 流速：０．５ml／分 注入量：２００μｌ（約１mg／ml、移動相） 分子量較正：プルラン（Shodex: ０．５８×１０4 、
１．２２×１０4 、２．３７×１０4 、４．８０×１０
4 、１０．０×１０4 、１８．６×１０4 、３８．６×
１０4 、８５．３×１０4 ）
【００２２】本発明の重量平均分子量２９×１０4 ダル
トンで分散度７．３の抗腫瘍活性物質は、表−１及び表
−２の高分子成分ａ−３に相当し、本発明の重量平均分
子量２．４×１０4 ダルトンで分散度４．１並びに重量
平均分子量２．０×１０4 ダルトンで分散度３．６の抗
腫瘍活性物質は、表−１及び表−２の低分子成分ｂ−２
及びｂ−３に相当する。
トンで分散度７．３の抗腫瘍活性物質は、表−１及び表
−２の高分子成分ａ−３に相当し、本発明の重量平均分
子量２．４×１０4 ダルトンで分散度４．１並びに重量
平均分子量２．０×１０4 ダルトンで分散度３．６の抗
腫瘍活性物質は、表−１及び表−２の低分子成分ｂ−２
及びｂ−３に相当する。
【００２３】実施例２抗腫瘍活性の測定 ＭｅｔｈＡ（悪性黒色腫由来）をマウス（１群５匹、Ｂ
ａｌｂ／Ｃ、６週雄令）の右（１×１０6 ）および左下
腹部（２×１０5 ）の皮内に同時に接種し、その接種後
３日目、４日目、５日目に、実施例１で得られた本発明
の抗腫瘍活性物質、高分子成分ａ−３、低分子成分ｂ−
２及びｂ−３それぞれ乾燥重量１mg／マウスの割合で同
じ場所の右下腹部腫瘍内（左下腹部腫瘍内には抽出物は
注射しない）に、生理食塩水に溶解させて注射した。ま
た対照として別のマウス群に生理食塩水を右下腹部腫瘍
内に上記スケジュールで同じように注射した（ｃｏｎｔ
ｒｏｌ）。更には、効果比較のために精製前の酸分解処
理品を別のマウス群の右腫瘍内に上記スケジュールで注
射した。腫瘍接種後２１日まで右下腹部及び左下腹部の
腫瘍の大きさ（面積）および重量を一定の時期に測定
し、実施例１で得られた抽出物の効果を見た。表３及び
４には腫瘍接種後２１日目の実験結果を示す。
ａｌｂ／Ｃ、６週雄令）の右（１×１０6 ）および左下
腹部（２×１０5 ）の皮内に同時に接種し、その接種後
３日目、４日目、５日目に、実施例１で得られた本発明
の抗腫瘍活性物質、高分子成分ａ−３、低分子成分ｂ−
２及びｂ−３それぞれ乾燥重量１mg／マウスの割合で同
じ場所の右下腹部腫瘍内（左下腹部腫瘍内には抽出物は
注射しない）に、生理食塩水に溶解させて注射した。ま
た対照として別のマウス群に生理食塩水を右下腹部腫瘍
内に上記スケジュールで同じように注射した（ｃｏｎｔ
ｒｏｌ）。更には、効果比較のために精製前の酸分解処
理品を別のマウス群の右腫瘍内に上記スケジュールで注
射した。腫瘍接種後２１日まで右下腹部及び左下腹部の
腫瘍の大きさ（面積）および重量を一定の時期に測定
し、実施例１で得られた抽出物の効果を見た。表３及び
４には腫瘍接種後２１日目の実験結果を示す。
【００２４】
【表３】
【００２５】
【表４】
【００２６】表−３及び表−４の結果から、本発明の高
分子成分ａ−３、低分子成分ｂ−２及びｂ−３は、強い
抗腫瘍効果を示すことが明らかである。また対照と比較
して、成分を注射しない左側腫瘍も縮小することから、
本発明の成分には宿主の免疫相当細胞を活性化させ、免
疫機能活性化により抗腫瘍活性が発揮されることも明ら
かになった。
分子成分ａ−３、低分子成分ｂ−２及びｂ−３は、強い
抗腫瘍効果を示すことが明らかである。また対照と比較
して、成分を注射しない左側腫瘍も縮小することから、
本発明の成分には宿主の免疫相当細胞を活性化させ、免
疫機能活性化により抗腫瘍活性が発揮されることも明ら
かになった。
【００２７】実施例３錠剤の製造 実施例１で得られる本発明の抗腫瘍活性物質（高分子成
分ａ−３）１００ｇ、マンニトール１００ｇ及びブドウ
糖１００ｇを混合し、通常の成形機にて錠剤化する。
分ａ−３）１００ｇ、マンニトール１００ｇ及びブドウ
糖１００ｇを混合し、通常の成形機にて錠剤化する。
【００２８】実施例４健康食品の製造 実施例１で得られる本発明の抗腫瘍活性物質（高分子成
分ａ−３）を１ｍｇを含む水溶液１リットルを適量のデ
キストリンに加え攪拌しながら基材に吸着させる。この
粉末を押し出し顆粒機にかけ、網目１mmにて粉末を押し
出して顆粒化し、受けに１２ｍｅｓｈの篩いを用いて篩
い分けする。得られる顆粒を乾燥機に入れ６０℃で一晩
乾燥させ、これにより水分約３％の顆粒ができる。この
顆粒は、お茶などの飲物用添加物として用いられる。
分ａ−３）を１ｍｇを含む水溶液１リットルを適量のデ
キストリンに加え攪拌しながら基材に吸着させる。この
粉末を押し出し顆粒機にかけ、網目１mmにて粉末を押し
出して顆粒化し、受けに１２ｍｅｓｈの篩いを用いて篩
い分けする。得られる顆粒を乾燥機に入れ６０℃で一晩
乾燥させ、これにより水分約３％の顆粒ができる。この
顆粒は、お茶などの飲物用添加物として用いられる。
【図１】図１は、カワリハラタケの子実体から得られる
酸分解処理品をゲル濾過に付したときのクロマトグラム
のプロファイルを示す。
酸分解処理品をゲル濾過に付したときのクロマトグラム
のプロファイルを示す。
【図２】図２は、図２に示したゲル濾過により得られる
高分子成分をアフィニティークロマトグラフィー（ＤＥ
ＡＥ分画）に付したときのプロファイルを示す。
高分子成分をアフィニティークロマトグラフィー（ＤＥ
ＡＥ分画）に付したときのプロファイルを示す。
【図３】図３は、図２に示したゲル濾過により得られる
低分子成分をアフィニティークロマトグラフィー（ＤＥ
ＡＥ分画）に付したときのプロファイルを示す。
低分子成分をアフィニティークロマトグラフィー（ＤＥ
ＡＥ分画）に付したときのプロファイルを示す。
Claims (4)
- 【請求項１】 ハラタケ属に属するカワリハラタケの子
実体の熱水不溶でかつエタノール不溶成分を１〜５％蓚
酸アンモニウム水溶液で抽出して得られる抽出物をさら
に酸分解して精製することによって得ることのできる、
ゲル濾過で測定した時の重量平均分子量２９×１０4 ダ
ルトンで分散度７．３、重量平均分子量２．４×１０4
ダルトンで分散度４．１、あるいは重量平均分子量２．
０×１０4 ダルトンで分散度３．６の抗腫瘍活性物質。 - 【請求項２】 酸分解後に、ゲル濾過、次いでアフィニ
ティークロマトグラフィーによって精製することによっ
て得ることのできる請求項１の抗腫瘍活性物質。 - 【請求項３】 請求項１または２の抗腫瘍活性物質を有
効成分として含有する抗腫瘍剤。 - 【請求項４】 請求項１または２の抗腫瘍活性物質を有
効成分として含有する健康食品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8134774A JPH09315994A (ja) | 1996-05-29 | 1996-05-29 | 抗腫瘍活性物質 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8134774A JPH09315994A (ja) | 1996-05-29 | 1996-05-29 | 抗腫瘍活性物質 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09315994A true JPH09315994A (ja) | 1997-12-09 |
Family
ID=15136257
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8134774A Pending JPH09315994A (ja) | 1996-05-29 | 1996-05-29 | 抗腫瘍活性物質 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09315994A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000143526A (ja) * | 1998-11-13 | 2000-05-23 | Asuke Yakuhin Kk | 田七人参、霊芝、アガリクス茸を主成分とする糖尿・高血圧・肝機能改善剤およびこれの製造方法 |
| WO2001051070A1 (fr) * | 2000-01-12 | 2001-07-19 | Life Science Laboratories Co., Ltd. | Substance eem-s physiologiquement active issue de champignons, methode de production de ladite substance et medicaments |
| JP2007291001A (ja) * | 2006-04-24 | 2007-11-08 | Bizen Chemical Co Ltd | 新規抗癌剤 |
-
1996
- 1996-05-29 JP JP8134774A patent/JPH09315994A/ja active Pending
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000143526A (ja) * | 1998-11-13 | 2000-05-23 | Asuke Yakuhin Kk | 田七人参、霊芝、アガリクス茸を主成分とする糖尿・高血圧・肝機能改善剤およびこれの製造方法 |
| WO2001051070A1 (fr) * | 2000-01-12 | 2001-07-19 | Life Science Laboratories Co., Ltd. | Substance eem-s physiologiquement active issue de champignons, methode de production de ladite substance et medicaments |
| US6783771B2 (en) | 2000-01-12 | 2004-08-31 | Life Science Laboratories Co., Ltd. | Physiologically active substance EEM-S originating in mushrooms, process for producing the same and drugs |
| CN100346796C (zh) * | 2000-01-12 | 2007-11-07 | 有限会社生命科学研究所 | 来自菌类的生理活性物质eem－s、其制造方法和药物 |
| JP4728551B2 (ja) * | 2000-01-12 | 2011-07-20 | 有限会社生命科学研究所 | 茸からの生理活性物質ｅｅｍ−ｓ、その製造方法および医薬 |
| JP2007291001A (ja) * | 2006-04-24 | 2007-11-08 | Bizen Chemical Co Ltd | 新規抗癌剤 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wachtel-Galor et al. | Ganoderma lucidum (Lingzhi or Reishi): a medicinal mushroom | |
| KR100831408B1 (ko) | 미세조류로부터 얻은 유효 면역자극제 | |
| KR100780014B1 (ko) | 고순도 수용성 키토산 올리고당, 이를 포함하는 조성물 및그의 제조방법 | |
| KR100858569B1 (ko) | 버섯으로부터의 생리활성 추출물 eem-s, 그의 제조 방법 및 의약 | |
| Guidara et al. | Effect of extraction procedures on the chemical structure, antitumor and anticoagulant properties of ulvan from Ulva lactuca of Tunisia coast | |
| CA1055487A (en) | Process for the preparation of antitumorigenic substances | |
| JP3051073B2 (ja) | 抗腫瘍活性物質 | |
| CN109160954B (zh) | 一种香瓜茄酸性多糖及其提纯方法和用途 | |
| WO2009102008A1 (ja) | 免疫賦活作用および抗腫瘍作用を有するマイタケ由来の低分子物質 | |
| JPH0539305A (ja) | アストラガルス・メンブラナセウスから抽出した免疫 変調性多糖類及びこれらを含有する薬剤組成物 | |
| JPH09315994A (ja) | 抗腫瘍活性物質 | |
| KR101949889B1 (ko) | 청귤 추출박 또는 청피 유래의 항암 또는 면역활성 다당의 제조방법 | |
| CN115010822A (zh) | 一种亮菌菌丝体多糖及其用途 | |
| JPH11228602A (ja) | 免疫力強化剤及び免疫力強化食品 | |
| CN106866831A (zh) | 茯苓酸性多糖提取物的制备方法及用途 | |
| KR101179101B1 (ko) | 면역 증강 활성을 갖는 녹조류 유래 다당류 및 그 제조방법 | |
| Mushroom et al. | Ganoderma lucidum | |
| CN106690326B (zh) | 一种复合海藻多糖降血脂口服液及其制备方法 | |
| JP6198867B2 (ja) | 創傷治療剤 | |
| KR100729213B1 (ko) | 면역 증강 활성을 갖는 잎새 버섯의 액체배양물로부터분리한 세포외 생체고분자 | |
| CN113637089B (zh) | 一种醇水两溶性党参葡果聚糖、制备工艺及抗肿瘤应用 | |
| KR101403591B1 (ko) | 장수버섯 자실체 유래의 다당체로부터 얻은 올리고당 및 이의 제조방법 | |
| CN115991795B (zh) | 一种艾根多糖及其制备方法和用途 | |
| JP2001010970A (ja) | カワリハラタケの抗腫瘍性画分 | |
| CN110818808B (zh) | 酸性当归多糖asp3、酸性当归多糖-阿霉素共聚物纳米粒以及两者的制备方法和应用 |