JPH0931088A - Ｗｂ９６８物質群およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 本発明は、生理活性を有し、医療の分野で使
用される新規化合物のＷＢ９６８物質群を提供する。 【解決手段】 抗菌および抗腫瘍活性を有するＷＢ９６
８物質群（ＦＲ１８３７３７物質、ＦＲ１８３７３９物
質、ＦＲ１８３７４２物質、ＦＲ１８３７４３物質）、
それらの製造法およびそれらを含有する医薬組成物に関
するものである。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術的分野】この発明は、生物活性を有
する新規化合物、詳しくはＦＲ１８３７３７物質、ＦＲ
１８３７３９物質、ＦＲ１８３７４２物質およびＦＲ１
８３７４３物質（以下ＷＢ９６８物質群と呼ぶ）に関す
る。より詳しくは、この発明は、抗菌活性および抗腫瘍
活性を有する生物学的に活性な新規ＷＢ９６８物質群、
それらの製造法およびそれらを含有してなる医薬組成物
に関する。

【０００２】

【発明の構成】この発明のＷＢ９６８物質群は、クロモ
バクテリウム・ヴィオラセウム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｖｉｏｌａｃｅｕｍ）ＷＢ９６８などのク
ロモバクテリウム属に属するＷＢ９６８物質群生産菌を
栄養培地中で発酵させることによって製造できる。

【０００３】この発酵プロセスを以下詳細に説明する。 （１）微生物 ＷＢ９６８物質群の製造に用いる微生物の詳細を以下に
説明する。

【０００４】ＷＢ９６８株に関する分類学的研究：ＷＢ
９６８株は、山形県で採集された土壌試料から単離され
た。この分類学的研究には、主として、バ−ジ−ズ・マ
ニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジ−
（第１巻）に記載されている諸方法を採用した。

【０００５】（ｉ）形態特性 ＷＢ９６８株の形態観察を、栄養培地および寒天を用い
て３０℃で２０時間培養した細胞について、光学顕微鏡
および電子顕微鏡の下で行った。ＷＢ９６８株は、グラ
ム陰性の運動性細菌であった。細胞の形態は桿菌であ
り、大きさは約０．５〜０．６×１．２〜１．８μｍで
あった。結果を第１表に示す。

【０００６】第１表 ＷＢ９６８株の形態特性

【０００７】（ｉｉ）生理学的特性 ＷＢ９６８株の生理学的特性を第２表にまとめた。成育
温度域は１５〜４０℃であった。ＷＢ９６８株は、オキ
シダ−ゼ陽性、カタラ−ゼ陽性で、Ｏ−Ｆテストは発酵
性を示した。カゼインは加水分解され、エスクリン加水
分解は陰性であった。グルコ−ス、フルクト−スおよび
トレハロ−スは発酵させられた。インド−ルテストは陰
性であった。フォ−ゲス・プレスカウエルテストは陰性
であった。β−ガラクトシダ−ゼテスト（ＯＮＰＧテス
ト）も陰性であった。

【０００８】第２表 ＷＢ９６８株の生理学的特性

【０００９】（ｉｉｉ）同定 バ−ジ−ズ・マニュアル・オブ・システマティック・バ
クテリオロジ−（第１巻）に従い、上記の諸特性から、
ＷＢ９６８株はクロモバクテリウム・ヴィオラセウム
（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖｉｏｌａｃｅｕ
ｍ）であると同定された。クロモバクテリウム・ヴィオ
ラセウムＷＢ９６８の培養物が、ブタペスト条約に基い
て、１９８８年７月２０日付で、工業技術院生命工学工
業技術研究所（茨城県つくば市東１丁目１−３）に寄託
されている（寄託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１９６８）。な
お、ＷＢ９６８株が該機関に寄託された時点では、該株
はアエロモナス属菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）で
あると同定されていたが、現在では、該株は前記の通り
同定されている。

【００１０】（２）ＷＢ９６８物質群の製造 この発明のＷＢ９６８物質群は、クロモバクテリウム属
に属するＷＢ９６８物質群生産菌（例えばクロモバクテ
リウム・ヴィオラセウムＷＢ９６８）を、同化性炭素源
および同化性窒素源を含有する栄養培地中で、好気的条
件下に（例えば振盪培養、液内培養など）培養すると
き、生産される。

【００１１】該栄養培地中の好ましい炭素源は、グルコ
−ス、でんぷん、フルクト−ス、グリセリンなどの炭水
化物である。好ましい窒素源は、ブイヨン、酵母エキ
ス、ペプトン、グルテン粉、綿実粉、大豆粉、コ−ン・
スティ−プ・リカ−、乾燥酵母、小麦麦芽など、並びに
アンモニウム塩類（例えば硝酸アンモニウム、硫酸アン
モニウム、燐酸アンモニウムなど）、尿素、アミノ酸類
などの無機および有機窒素化合物である。炭素源および
窒素源は、組合わせて用いるのが有利であるが、純粋な
形で使用する必要はない。微量の成長因子および相当量
の無機栄養素を含有する純度の高くない材料も使用に適
しているからである。

【００１２】所望により、炭酸ナトリウムもしくは炭酸
カルシウム、燐酸ナトリウムもしくは燐酸カリウム、塩
化ナトリウムもしくは塩化カリウム、沃化ナトリウムも
しくは沃化カリウム、マグネシウム塩類、銅塩類、コバ
ルト塩類などの無機塩類を培地に添加してもよい。必要
ならば、特に培地が著しく発泡するときは、流動パラフ
ィン、脂肪油、植物油、鉱油、シリコ−ンなどの消泡剤
を加えてもよい。他の生物活性物質の大量生産に好まし
く用いられる諸方法の場合と同様に、ＷＢ９６８物質群
の大量生産には、好気的液内培養条件が好ましい。小量
生産には、フラスコ中での振盪培養を用いる。

【００１３】また、培養を大型タンク内で実施するとき
には、ＷＢ９６８物質群生産プロセスでの成育遅延を避
けるために、該細菌の増殖形細胞を用いて生産タンクへ
の接種を行うことが好ましい。従って、まず該細菌の細
胞を比較的小量の培地に接種し、該接種ずみ培地を培養
し、培養された増殖形細胞を大型タンクに移すことが望
ましい。増殖形細胞を生産するための培地は、ＷＢ９６
８物質群の製造に用いる培地と実質的に同じであっても
異なっていてもよい。

【００１４】培養混合物の攪拌および通気は種々の方法
で実施できる。攪拌は、プロペラなどの機械的攪拌装置
により、ファ−メンタ−の回転または振盪により、種々
のポンプ装置により、または減菌空気を培地に通じるこ
とによりもたらしうる。通気は、減菌空気を発酵混合物
に通じることによって実現できる。発酵は、通常、約１
０〜４０℃の間の温度、好ましくは２０〜３５℃で、約
１５〜２０時間にわたって行う。発酵時間は、発酵条件
および規模に応じて変えればよい。

【００１５】発酵完了後、培養液を、生物活性物質の回
収、精製のために慣用されている種々のプロセス、例え
ば適当な溶媒または何種類かの溶媒の混合物による溶媒
抽出、クロマトグラフィ−、適当な溶媒または何種類か
の溶媒の混合物からの再結晶などに付して、ＷＢ９６８
物質群を回収する。この発明によれば、一般にＷＢ９６
８物質群は主として細菌細胞内に存在する。従って、培
養液全体を直接、例えば熱湯、アセトン、酢酸エチル、
これらの溶媒の混合物などの適当な溶媒を用いての抽出
によるなどの、ＷＢ９６８物質群単離プロセスに付す。

【００１６】抽出液を常法により処理して、ＷＢ９６８
物質群を得る。例えば、抽出液を蒸発または蒸留によっ
て小量に濃縮し、ここで得られた活性物質、すなわちＷ
Ｂ９６８物質群を含有する残留物を、慣用の精製プロセ
ス、例えばクロマトグラフィ−や適当な溶媒または何種
類かの溶媒の混合物からの再結晶によって、精製する。

【００１７】ＷＢ９６８物質群の物理化学的性質 上記発酵プロセスに従って得られたＷＢ９６８物質群は
次の物理化学的性質を有する。

【００１８】（ｉ）ＦＲ１８３７３７物質： 外観：白色粉末 本性：中性物質 融点：１８１−１８７℃ 比旋光度：［α］Ｄ²³＝−７゜（ｃ＝１．０， ＣＨＣ
ｌ₃：ＭｅＯＨ＝１：１） 分子式： Ｃ₂₆Ｈ₄₂Ｎ₄Ｏ₇Ｓ₂ 元素分析：Ｃ₂₆Ｈ₄₂Ｎ₄Ｏ₇Ｓ₂として 計算値： Ｃ５１．６４； Ｈ ７．３３； Ｎ ９．
２６ （％） 実測値： Ｃ５１．９９； Ｈ ７．０４； Ｎ ９．
２３ （％） 分子量：ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／Ｚ） ５８７（Ｍ＋Ｈ）⁺ ＨＲＦＡＢ−ＭＳ： Ｃ₂₆Ｈ₄₂Ｎ₄Ｏ₇Ｓ₂＋Ｈとして 計算値：５８７．２５７３ 実測値：５８７．２６００ 溶解性： 易溶：クロロホルム、酢酸エチル、アセトン 可溶：メタノ−ル 不溶：水、ｎ−ヘキサン

【００１９】呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、ヨウ素蒸気反応 陰性：ニンヒドリン反応、塩化第２鉄反応、エ−ルリッ
ヒ反応、モ−リッシュ反応 紫外吸収スペクトル：末端吸収（メタノ−ル中）

【００２０】赤外吸収スペクトル：νｍａｘＫＢｒ＝３
３００， ３２５０， ２９６０，２９３０， １７２
０， １６８０， １６５０， １６２０， １５３
０，１３８０， １２１０， １０３０， ９８０ ｃ
ｍ^{-1 1} Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
（５：１）， ４００ＭＨｚ］ δ：８．７１（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，交換可能），８．１７
（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，交換可能），７．５７
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，交換可能），６．９８（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），６．６９（１Ｈ，
ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），５．７２（１Ｈ，ｍ），５．６２
（１Ｈ，ｍ），４．８１（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８Ｈ
ｚ，交換可能），４．７４（１Ｈ，ｍ），４．５０−
４．４０（２Ｈ，ｍ），４．２３−４．１２（３Ｈ，
ｍ），３．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５，４Ｈｚ），
３．０６−２．９０（２Ｈ，ｍ），２．７７（１Ｈ，
ｍ），２．６５−２．５７（２Ｈ，ｍ），２．５１−
２．４３（２Ｈ，ｍ），２．２０（１Ｈ，ｍ），２．１
０（１Ｈ，ｍ），１．７４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），
１．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９９（６Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ）
ｐｐｍ

【００２１】¹³Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃
−ＣＤ₃ＯＤ（５：１）， １００ＭＨｚ］ δ：１７３．０（ｓ），１７２．１（ｓ），１７１．８
（ｓ），１６９．３（ｓ），１６４．４（ｓ），１３
３．２（ｄ），１３１．６（ｄ），１２８．８（ｓ），
１２８．２（ｄ），６９．０（ｄ），６１．０（ｄ），
５９．３（ｄ），５７．７（ｄ），５５．０（ｄ），４
１．９（ｔ），３９．９（ｔ），３９．３（ｔ），３
１．１（ｔ），３０．８（ｔ），３０．２（ｄ），１
８．７（ｑ），１８．５（ｑ），１７．９（ｑ），１
７．７（ｑ），１３．７（ｑ），１２．９（ｑ） ｐｐ
ｍ

【００２２】アミノ酸分析：ＦＲ１８３７３７物質（１
ｍｇ）を、封管中、６Ｎ塩酸（１ｍｇ）により１１０℃
で２０時間加水分解した。この混合物を自動アミノ酸分
析計で分析した。ＦＲ１８３７３７物質のアミノ酸分析
の結果、バリンおよびアンモニアの存在（１：１）が判
明した。

【００２３】（ｉｉ）ＦＲ１８３７３９物質： 外観：白色粉末 本性：中性物質 融点：２４６−２５１℃ 比旋光度：［α］Ｄ²³＝−１５７゜（ｃ＝１．０， Ｃ
ＨＣｌ₃：ＭｅＯＨ＝１：１） 分子式：Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂ 元素分析：Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂として 計算値：Ｃ ５３．３１； Ｈ ６．７１； Ｎ １
０．３６； Ｓ １１．８６ （％） 実測値：Ｃ ５３．２４； Ｈ ６．７５； Ｎ １
０．０５； Ｓ １１．４９ （％） 分子量：ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／Ｚ） ５４１（Ｍ＋Ｈ）⁺ ＨＲＦＡＢ−ＭＳ：Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂＋Ｈとして 計算値：５４１．２１５５ 実測値：５４１．２１６２ 溶解性： 易溶：クロロホルム、アセトン 可溶：メタノ−ル、酢酸エチル 不溶：水、ｎ−ヘキサン

【００２４】呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、ヨウ素蒸気反応 陰性：ニンヒドリン反応、塩化第２鉄反応、エ−ルリッ
ヒ反応、モ−リッシュ反応 紫外吸収スペクトル：末端吸収（メタノ−ル中）

【００２５】赤外吸収スペクトル：νｍａｘＫＢｒ＝３
４００， ３３００， ２９７０，２９２０， １７１
０， １６８０， １６５０， １５２０， １３３
０，１２７０， １１６０， １０５０， ９９０ ｃ
ｍ^{-1 1} Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
（５：１）， ４００ＭＨｚ］ δ：８．８５（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，交換可能），７．６２
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），７．４１（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），７．３２（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，交換可能），６．２８（１Ｈ，ｂｒ．
ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），６．１２（１Ｈ，ｍ），５．６５
（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ），５．５１（１
Ｈ，ｍ），４．９３（１Ｈ，ｍ），４．３６−４．３１
（２Ｈ，ｍ），３．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５，３Ｈ
ｚ），３．２５−３．０８（３Ｈ，ｍ），２．９４（１
Ｈ，ｍ），２．６５（１Ｈ，ｍ），２．４５（１Ｈ，
ｍ），２．２８（１Ｈ，ｍ），２．１５（１Ｈ，ｍ），
１．９５（１Ｈ，ｍ），１．７３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ），１．０３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．０２
（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．０１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７Ｈｚ），１．００（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ） ｐｐｍ

【００２６】¹³Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃
−ＣＤ₃ＯＤ（５：１）， １００ＭＨｚ］ δ：１７３．０（ｓ），１７１．３（ｓ），１６９．８
（ｓ），１６８．８（ｓ），１６６．９（ｓ），１３
１．１（ｓ），１３０．３（ｄ），１２９．２（ｄ），
１２４．９（ｄ），７１．１（ｄ），６０．０（ｄ），
５９．５（ｄ），５０．８（ｄ），４０．７（ｔ），３
９．１（ｔ），３７．０（ｔ），３１．５（ｔ），３
０．５（ｄ），２８．９（ｄ），１８．９（ｑ），１
８．４（ｑ），１８．１（ｑ），１７．１（ｑ），１
２．２（ｑ） ｐｐｍ

【００２７】アミノ酸分析：ＦＲ１８３７３９物質（１
ｍｇ）を、封管中、６Ｎ塩酸（１ｍｇ）により１１０℃
で２０時間加水分解した。この混合物を自動アミノ酸分
析計で分析した。ＦＲ１８３７３９物質のアミノ酸分析
の結果、バリンおよびアンモニアの存在（１：１）が判
明した。

【００２８】（ｉｉｉ）ＦＲ１８３７４２物質： 外観：白色粉末 本性：中性物質 融点：２４７−２５３℃ 比旋光度：［α］Ｄ²³＝＋６゜（ｃ＝１．０， ＣＨＣ
ｌ₃：ＭｅＯＨ＝１：１） 分子式：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂ 元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂・１／２Ｈ₂Ｏとして 計算値：Ｃ ５３．２７； Ｈ ６．９７； Ｎ ９．
９４ （％） 実測値：Ｃ ５３．２７； Ｈ ６．７７； Ｎ ９．
８４ （％） 分子量：ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／Ｚ） ５５５（Ｍ＋Ｈ）⁺ ＨＲＦＡＢ−ＭＳ：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂＋Ｈとして 計算値：５５５．２３１１ 実測値：５５５．２３１２ 溶解性： 易溶：クロロホルム、酢酸エチル、アセトン 可溶：メタノ−ル 不溶：水、ｎ−ヘキサン

【００２９】呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、ヨウ素蒸気反応 陰性：ニンヒドリン反応、塩化第２鉄反応、エ−ルリッ
ヒ反応、モ−リッシュ反応 紫外吸収スペクトル：末端吸収（メタノ−ル中）

【００３０】赤外吸収スペクトル：νｍａｘＫＢｒ＝３
４００， ３３００， ２９６０，２９２０， １７４
５， １６９５， １６４０， １５３０， １３５
０，１２６０， １２２０， １０２５， ９８０ ｃ
ｍ^{-1 1} Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
（５：１）， ４００ＭＨｚ］ δ：８．４０（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，交換可能），８．２２
（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，交換可能），７．８１
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，交換可能），７．６９（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），６．３７（１Ｈ，
ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），５．７７（１Ｈ，ｍ），５．７１−
５．６４（２Ｈ，ｍ），４．７２（１Ｈ，ｍ），４．５
８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８，４Ｈｚ），４．００（１Ｈ，
ｍ），３．２３−３．１０（３Ｈ，ｍ），３．０１（１
Ｈ，ｍ），２．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４，１．５Ｈ
ｚ），２．７３−２．５８（３Ｈ，ｍ），２．２４（１
Ｈ，ｍ），２．０９（１Ｈ，ｍ），１．７５（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．５９（１Ｈ，ｍ），１．３９
（１Ｈ，ｍ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），
１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９９（３Ｈ，
ｄ， Ｊ＝７Ｈｚ），０．９７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ） ｐｐｍ

【００３１】¹³Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃
−ＣＤ₃ＯＤ（５：１）， １００ＭＨｚ］ δ：１７２．２（ｓ），１７１．４（ｓ），１６８．８
（ｓ），１６８．４（ｓ），１６５．３（ｓ），１３
０．３（ｄ），１２９．６ （ｓ），１２９．５（ｄ），１２９．２（ｄ），７０．
０（ｄ），６２．４（ｄ），５７．６（ｄ），５６．５
（ｄ），３８．１（ｄ），３７．８（ｔ），３７．５
（ｔ），３４．５（ｔ），２９．９（ｔ），２８．９
（ｄ），２５．５（ｔ），１８．９（ｑ），１８．８
（ｑ），１４．５（ｑ），１２．９（ｑ），１１．５
（ｑ） ｐｐｍ

【００３２】アミノ酸分析：ＦＲ１８３７４２物質（１
ｍｇ）を、封管中、６Ｎ塩酸（１ｍｇ）により１１０℃
で２０時間加水分解した。この混合物を自動アミノ酸分
析計で分析した。ＦＲ１８３７４２物質のアミノ酸分析
の結果、バリン、イソロイシンおよびアンモニアの存在
（１：１：１）が判明した。

【００３３】（ｉｖ）ＦＲ１８３７４３物質： 外観：白色粉末 本性：中性物質 融点：２５４−２５６℃ 比旋光度：［α］Ｄ²³＝−９゜（ｃ＝１．０， ＣＨＣ
ｌ₃：ＭｅＯＨ＝１：１） 分子式：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂ 元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂として 計算値：Ｃ ５４．１３； Ｈ ６．９０； Ｎ １
０．１０； Ｓ １１．５６ （％） 実測値：Ｃ ５３．９１； Ｈ ７．０２； Ｎ １
０．０８； Ｓ １１．４４ （％） 分子量：ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／Ｚ） ５５５（Ｍ＋Ｈ）⁺ ＨＲＦＡＢ−ＭＳ：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂＋Ｈとして 計算値：５５５．２３１１ 実測値：５５５．２３２３ 溶解性： 易溶：クロロホルム、酢酸エチル、アセトン 可溶：メタノ−ル 不溶：水、ｎ−ヘキサン

【００３４】呈色反応： 陽性：酸セリウム反応、硫酸反応、ヨウ素蒸気反応 陰性：ニンヒドリン反応、塩化第２鉄反応、エ−ルリッ
ヒ反応、モ−リッシュ反応 紫外吸収スペクトル：末端吸収（メタノ−ル中）

【００３５】赤外吸収スペクトル：νｍａｘＫＢｒ＝３
３７０， ３３００， ２９６０，２９３０， １７４
０， １６９５， １６６０， １６４０， １５２
０，１３００， １２６０， １２２０， ９８０ ｃ
ｍ^{-1 1} Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
（５：１）， ４００ＭＨｚ］ δ：８．３７（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，交換可能），８．１４
（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，交換可能），７．７８
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，交換可能），７．６７（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），６．３７（１Ｈ，
ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），５．７７（１Ｈ，ｍ），５．７１−
５．６３（２Ｈ，ｍ），４．７３（１Ｈ，ｍ），４．５
３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８，４Ｈｚ），４．１９（１Ｈ，
ｍ），３．２２−３．０８（３Ｈ，ｍ），２．９８（１
Ｈ，ｍ），２．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４，１．５Ｈ
ｚ），２．７１−２．５６（３Ｈ，ｍ），２．３９（１
Ｈ，ｍ），２．０７（１Ｈ，ｍ），１．７５（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．５４（１Ｈ，ｍ），１．３９
（１Ｈ，ｍ），１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），
１．０２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．００（３Ｈ，
ｄ， Ｊ＝７Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ） ｐｐｍ

【００３６】¹³Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃
−ＣＤ₃ＯＤ（５：１）， １００ＭＨｚ］ δ：１７２．５（ｓ），１７１．５（ｓ），１６９．１
（ｓ），１６８．３（ｓ），１６５．６（ｓ），１３
０．２（ｄ），１２９．６（ｓ），１２９．５（ｄ），
１２９．２（ｄ），７０．１（ｄ），６０．５（ｄ），
５８．２（ｄ），５６．５（ｄ），３７．８（ｔ），３
７．５（ｔ），３５．２（ｄ），３４．７（ｔ），３
１．５（ｄ），２９．８（ｔ），２５．７（ｔ），１
８．１（ｑ），１８．０（ｑ），１５．３（ｑ），１
３．０（ｑ），１１．３（ｑ） ｐｐｍ

【００３７】アミノ酸分析：ＦＲ１８３７４３物質（１
ｍｇ）を、封管中、６Ｎ塩酸（１ｍｇ）により１１０℃
で２０時間加水分解した。この混合物を自動アミノ酸分
析計で分析した。ＦＲ１８３７４３物質のアミノ酸分析
の結果、バリン、ａｌｌｏ−イソロイシンおよびアンモ
ニアの存在（１：１：１）が判明した。

【００３８】

【発明の効果】ＷＢ９６８物質群の生物学的性質ＷＢ９
６８物質群の生物活性を示す例として、以下に若干の生
物学的デ−タを説明する。 試験例１ ＷＢ９６８物質群の抗菌活性 ＷＢ９６８物質群の抗菌活性を、サブロ−培地中で寒天
希釈法によって試験した。２５℃で４８時間培養し、最
小阻止濃度（ＭＩＣ）をμｇ／ｍｌで表す。結果を第３
表に示す。

【００３９】第３表 ＷＢ９６８物質群の抗菌活性

【００４０】試験例２ ＷＢ９６８物質群によるインビトロでのヒト腫瘍細胞成
育の阻害 各ウェル中に１０％ウシ胎児血清、ペニシリン（５０単
位／ｍｌ）およびストレプトマイシン（５０μｇ／ｍ
ｌ）を添加したダルベッコの最小必須培地１００μｌ中
の腫瘍細胞３×１０³ 個を含むマイクロタイタ−プレ
イトを用いて、細胞毒性試験を実施した。すなわち、こ
の発明の目的化合物をメタノ−ルに溶解し、ダルベッコ
の最小必須培地で希釈し、最終濃度１μｇ／ｍｌ以下と
なるように培養物に加えた。それら細胞を３７℃で３日
間培養し、モスマン（Ｍｏｓｍａｎｎ：ジャ−ナル・オ
ブ・イムノロジカル・メソッズ６５巻５５〜６３頁、１
９８３年）記載の方法に従って、ＭＴＴ［臭化３−
（４，５−ジメチルチアゾ−ル−２−イル）−２，５−
ジフェニルテトラゾリウム、シグマ社製］比色アッセイ
を行った。ＭＴＴを燐酸緩衝液（ＰＢＳ）に５ｍｇ／ｍ
ｌ濃度に溶解し、滅菌濾過して小量の不溶残渣も除去し
た。ヒト腫瘍細胞の培養が終ったのち、このＭＴＴ液を
すべてのアッセイウェルに加え、プレ−トをさらに３７
℃で４時間インキュベ−トした。全ウェルに酸性イソプ
ロピルアルコ−ル（０．０４Ｎ ＨＣｌ イソプロピル
アルコ−ル溶液１００μｌ）を加え、よく混ぜて、暗青
色の結晶を溶解させた。結晶が全部溶解したのち、２波
長マイクロメ−タ−光度計（ＭＴＰ−２２型、コロナ電
気株式会社、勝田市）により、参照波長を６６０ｎｍと
して、５５０ｎｍでプレ−トの読み取りを行った。この
結果を第４表に示す。

【００４１】第４表 ＷＢ９６８物質群によるインビトロでのヒト腫瘍細胞成
育の阻害

【００４２】この発明の医薬組成物は、活性成分として
のＷＢ９６８物質群を、外用、経口投与または非経口投
与に適した有機もしくは無機の担体もしくは賦形剤との
混合物として含有する。例えば固体、半固体または液体
の形の医薬製剤の形で使用できる。該活性成分は、例え
ば錠剤、ペレット、カプセル、坐剤、液剤、乳剤、懸濁
剤、その他の使用に適した剤型のための、医薬として許
容しうる通常の無毒性担体などと混合することができ
る。必要ならば、さらに、諸添加物、安定剤、増粘剤、
着色剤、香料を用いてもよい。ＷＢ９６８物質群は、該
医薬組成物中に、疾患の過程または状態に対して所望の
抗腫瘍作用、抗菌作用を示すに十分な量を含有させれば
よい。

【００４３】該組成物をヒトに適用するには、それを、
静脈内、筋肉内または経口投与によって適用するのが好
ましい。ＷＢ９６８物質群の治療有効量は、処置される
べき各個の患者の年齢および状態によっても変るが、静
脈内投与の場合にはヒトの体重１ｋｇ当り一日量ＷＢ９
６８物質群を０．１〜１００ｍｇを、筋肉内投与の場合
にはヒトの体重１ｋｇ当り一日量０．１〜１００ｍｇ
を、経口投与の場合にはヒトの体重１ｋｇ当り一日量
０．１〜１００ｍｇを腫瘍および感染症の処置のために
投与するのが一般的である。

【００４４】

【実施例】本発明をより詳しく説明するために、以下に
実施例を示す。 実施例１ 発酵：５００ｍｌエルレンマイヤ−フラスコ１６本の各
々に、グルコ−ス（１％）、ブイヨン（１％）、（ＮＨ
₄）₂ＳＯ₄（０．１％）およびＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ
（０．００６％）を含有する培地（１００ｍｌ）を注入
し、１２０℃で２０分間減菌処理した。クロモバクテリ
ウム・ヴィオラセウムＷＢ９６８の斜面培養から１白金
耳ずつを各培地に接種し、回転振盪機上（２５０ｒｐ
ｍ）で２５℃で２４時間培養した。得られた培養物を、
５００ ｌ培養タンク中のグルコ−ス（１％）、ブイヨ
ン（１％）、（ＮＨ₄）₂ＳＯ₄（０．１％）、ＭｇＳＯ₄
・７Ｈ₂Ｏ（０．００６％）およびアデカノ−ルＬＧ１
０５（消泡剤、旭電化工業製）（０．１％）を含有する
培地（３００ ｌ）（前もって１２０℃で２０分間減菌
ずみ）に接種し、通気量３００ ｌ／分、内圧１ｋｇ／
ｃｍ２、攪拌２００ｒｐｍのもとに、２５℃で２４時間
培養した。得られた種培養を、４０００ ｌ培養タンク
内のグルコ−ス（１％）、ブイヨン（１％）、（Ｎ
Ｈ₄）₂ＳＯ₄（０．１％）、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ（０．
００６％）、ＫＨ₂ＰＯ₄（１．１％）、Ｎａ₂ＨＰＯ₄・
１２Ｈ₂Ｏ（０．７２％）およびアデカノ−ルＬＧ１０
５（０．１％）を含有する培地（３０００ ｌ）（前も
って１２０℃で２０分間減菌ずみ）に接種し、通気量３
０００ ｌ／分、内圧１ｋｇ／ｃｍ２、攪拌９０ｒｐｍ
のもとに、２５℃で２４時間培養した。

【００４５】単離および精製：培養終了後、培養液（２
８００ ｌ）を１Ｎ硫酸でｐＨ２．０に調整し、１２１
℃で３０分間減菌した。これを珪藻土（６０ｋｇ）を用
いて濾過した。菌体を水で洗浄した洗浄液と、先に得た
濾液を合わせ（６０００ ｌ）、６Ｎ ＮａＯＨ でｐ
Ｈ６．５とした後、吸着樹脂Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０カ
ラム（商標：三菱化学製、１５０ ｌ）に付した。水
（３００ ｌ）および２５％アセトン水で洗浄後、６５
％アセトン水で溶出した。この溶出液を水分含量７０％
以上となるように水に希釈した。これ（６００ ｌ）を
Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０ｓｓカラム（５０ ｌ）に付し
た。４０％アセトン水（２００ ｌ）で洗浄後、４７％
アセトン水（３００ ｌ）で溶出した。溶出液は ０〜
６０ ｌを溶出画分１、６０〜１７０ ｌを溶出画分
２、１７０〜２９０ ｌを溶出画分３として分画した。

【００４６】（ＦＲ１８３７３７物質の単離）Ｄｉａｉ
ｏｎ ＨＰ２０ｓｓカラムからの溶出画分２を水分含量
が７０％以上となるように水で希釈した。得られた溶液
（２５０ ｌ）をＤｉａｉｏｎ ＨＰ２０カラム（６
ｌ）に付し、２０％アセトン水（３０ ｌ）で洗浄後、
アセトン（５０ ｌ）で溶出した。溶出液を減圧下で濃
縮乾固し、得られた残渣を酢酸エチル（３０ ｌ）に溶
解した。これを予めｎ−ヘキサン：酢酸エチル（１：１
ｖ／ｖ）を用いて充填したシリカゲルカラム（Ｓｉｌｉ
ｃａｇｅｌ ６０，７０−２３０メッシュ，Ｅ．Ｍｅｒ
ｃｋ社製）（７０ ｌ）に付した。カラムをｎ−ヘキサ
ン：酢酸エチル（１：１ ｖ／ｖ， ２１０ ｌ）およ
びｎ−ヘキサン：酢酸エチル（１：２ ｖ／ｖ， ７０
０ ｌ）で展開した。目的化合物を含む画分を合わせ、
減圧下で濃縮した。残渣をアセトン（５ ｌ）に溶解
後、メタノ−ルを加え、減圧濃縮することによりＦＲ９
０１２２８物質の無色柱状結晶（不純物としてＦＲ１８
３７３７物質を含む）２５０ｇを得た。ＦＲ９０１２２
８物質は、公開特許公報（特開平２−８５２９６）中に
開示されている。得られたＦＲ９０１２２８物質の結晶
をアセトン（２０ ｌ）に溶解後、ｎ−ヘキサン（２０
０ ｌ）をゆっくり加えてＦＲ９０１２２８物質を結晶
化させた。得られた母液（２００ ｌ）を減圧下で濃縮
乾固し、得られた残渣をメタノ−ル（１ ｌ）に溶解し
た。これを濃縮しＦＲ９０１２２８物質を結晶として得
た。同様の結晶化を行うことにより、ＦＲ９０１２２８
物質の含有量の少ない母液（０．１ ｌ）を得た。これ
を濃縮することにより、白色粉末５ｇを得た。この粗粉
末をクロロホルム（２５０ｍｌ）に溶解し、予めｎ−ヘ
キサン：酢酸エチル（１：１ ｖ／ｖ）を用いて充填し
たシリカゲル６０カラム（７０−２３０メッシュ）（１
０００ｍｌ）に付した。カラムをｎ−ヘキサン：酢酸エ
チル（１：１ｖ／ｖ， ３ ｌ）およびｎ−ヘキサン：
酢酸エチル（１：２ ｖ／ｖ， ９ｌ）で洗浄後、酢酸
エチル（３ ｌ）で展開した。ＦＲ１８３７３７物質を
含む画分（０．５〜２．９ ｌ）を合わせ、減圧下で濃
縮し白色粉末 １ｇを得た。この粉末をクロロホルム
（５０ｍｌ）に溶解し、予めクロロホルムを用いて充填
したシリカゲル６０カラム（７０−２３０メッシュ）
（１０００ｍｌ）に付した。カラムをクロロホルム：メ
タノ−ル（５０：１ ｖ／ｖ， ２ ｌ）およびクロロ
ホルム：メタノ−ル（２０：１ ｖ／ｖ， ２ ｌ）で
展開した。目的化合物を含む画分（３〜５ ｌ）を合わ
せ、減圧下で濃縮乾固した。残渣（２００ｍｇ）をアセ
トン：ｎ−ヘキサン（１：１０ ｖ／ｖ， ２０ｍｌ）
で沈澱させることによりＦＲ１８３７３７物質の白色粉
末（１００ｍｇ）を得た。

【００４７】（ＦＲ１８３７３９物質の単離）Ｄｉａｉ
ｏｎ ＨＰ２０ｓｓカラムからの溶出画分１を水分含量
が７０％以上となるように水で希釈した。得られた溶液
（１２０ ｌ）をＤｉａｉｏｎ ＨＰ２０カラム（５
ｌ）に付し、２０％アセトン水（１０ ｌ）で洗浄後、
アセトン（３０ ｌ）で溶出した。溶出液を減圧下で濃
縮し、水溶液（５ ｌ）を得た。酢酸エチル（１０
ｌ）で抽出し、減圧下で濃縮乾固することによりＦＲ１
８３７３９物質の白色粗粉末（２．５ｇ）を得た。この
粗粉末をクロロホルム（５０ｍｌ）に溶解し、シリカゲ
ル ６０（７０−２３０メッシュ）（１００ｇ）と混合
した後、減圧濃縮しクロロホルムを除去した。残渣を予
めクロロホルムを用いて充填したシリカゲル６０カラム
（７０−２３０メッシュ）（１０００ｍｌ）の上部に付
した。カラムをクロロホルム（１ ｌ）で洗浄後、クロ
ロホルム：メタノ−ル（５０：１ ｖ／ｖ， ３ ｌ）
およびクロロホルム：メタノ−ル（２０：１ ｖ／ｖ，
４ ｌ）で展開した。目的化合物を含む画分（４〜７
ｌ）を合わせ、減圧下で濃縮乾固し、粉末（２ｇ）を
得た。これを酢酸エチルに溶解し濃縮することにより、
ＦＲ１８３７３９物質の白色粉末（１．８６ｇ）を得
た。

【００４８】（ＦＲ９０１３９９物質、ＦＲ１８３７４
２物質、ＦＲ９００４１４物質、ＦＲ１８３７４３物質
およびＦＲ９０１４０２物質）Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０
ｓｓカラムからの溶出画分３を水分含量が７０％以上と
なるように水で希釈した。得られた溶液（１２０ ｌ）
をＤｉａｉｏｎ ＨＰ２０カラム（５ ｌ）に付し、２
０％アセトン水（１０ ｌ）で洗浄後、アセトン（３０
ｌ）で溶出した。溶出液を減圧下で濃縮し、水溶液
（５ ｌ）を得た。酢酸エチル（１０ ｌ）で抽出し、
減圧下で濃縮することにより油状残渣（２０ｍｌ）を得
た。これを塩化メチレン（２０ｍｌ）に溶解し、予め酢
酸エチル：メタノ−ル（５０：１ ｖ／ｖ）を用いて充
填したγ−アルミナ ＡＣ−１２カラム（商標：住友化
学製）（２．５ ｌ）に付した。カラムを酢酸エチル：
メタノ−ル（１００：１ ｖ／ｖ， １３ ｌ）および
酢酸エチル：メタノ−ル（５０：２ ｖ／ｖ， １３
ｌ）で展開した。溶出液は１３〜１４ ｌを溶出画分
Ｉ、１５〜１８ ｌを溶出画分ＩＩ、１８〜２５ ｌを
溶出画分ＩＩＩとして分画した。

【００４９】（ＦＲ９０１３９９物質の単離）γ−アル
ミナＡＣ−１２カラムからの溶出画分Ｉを減圧下で濃縮
乾固し、残渣（０．３ｇ）を得た。これを酢酸エチル：
ｎ−ヘキサン（１：７ ｖ／ｖ， １２０ｍｌ）で沈澱
させることによりＦＲ９０１３９９物質の白色粉末（２
７９ｍｇ）を得た。ＦＲ９０１３９９物質は、公開特許
公報（特開平７−６７６６８）中に開示されている。

【００５０】（ＦＲ１８３７４２物質の単離）γ−アル
ミナＡＣ−１２カラムからの溶出画分ＩＩを減圧下で濃
縮乾固し、残渣（０．７ｇ）を得た。これをアセトン：
ｎ−ヘキサン（１：７ ｖ／ｖ， ５６０ｍｌ）で沈澱
させた。この沈澱工程をさらに２回繰り返し、ＦＲ１８
３７４２物質を含む白色粗粉末（３４０ｍｇ）を得た。
これを塩化メチレン（１０ｍｌ）に溶解し、予め酢酸エ
チルを用いて充填したγ−アルミナ ＡＣ−１２カラム
（６００ｍｌ）に付した。カラムを酢酸エチル：メタノ
−ル（１００：１ ｖ／ｖ， ３ ｌ）で展開した。Ｆ
Ｒ１８３７４２物質を含む画分（１．５〜２．３ｌ）を
合わせ、減圧下で濃縮し残渣（１３０ｍｇ）を得た。こ
れを塩化メチレン（１０ｍｌ）に溶解し、再度γ−アル
ミナ ＡＣ−１２カラム（２００ｍｌ）に付した。カラ
ムを酢酸エチル：メタノ−ル（１００：１ ｖ／ｖ）で
展開し、ＦＲ１８３７４２物質を含む画分を合わせ、減
圧下で濃縮し残渣を得た。これを２０％メタノ−ル水
（１００ｍｌ）に溶解し、逆相シリカゲル ＯＤＳ−Ａ
Ｍ１２０−Ｓ５０（商標：山村化学研究所製）カラム
（１７０ｍｌ）に付し、２０％メタノ−ル水（１７０ｍ
ｌ）で洗浄後、５５％メタノ−ル水で展開した。ＦＲ１
８３７４２物質を含む溶出画分を合わせ、減圧下で濃縮
乾固し白色粉末（１１２ｍｇ）を得た。これをアセト
ン：ｎ−ヘキサン（１：２０ ｖ／ｖ， ４２０ｍｌ）
で沈澱させることによりＦＲ１８３７４２物質の白色粉
末（１０３ｍｇ）を得た。

【００５１】（ＦＲ９００４１４物質、ＦＲ１８３７４
３物質およびＦＲ９０１４０２物質）γ−アルミナＡＣ
−１２カラムからの溶出画分ＩＩＩを減圧下で濃縮し油
状残渣を得た。これを２０％アセトン水（６００ｍｌ）
に溶解し、Ｄｉａｉｏｎ ＨＰ２０ｓｓカラム（６００
ｍｌ）に付し、４０％アセトン水（１．８ ｌ）で洗浄
後、４５％アセトン水で溶出した。溶出液は １．１〜
１．４ ｌを溶出画分Ａ、１．９〜２．２ ｌを溶出画
分Ｂとして分画した。溶出画分Ａを減圧下で濃縮し、水
溶液（１００ｍｌ）を得た。酢酸エチル（４００ｍｌ）
で抽出し、減圧下で濃縮することにより油状残渣を得
た。これを小量のクロロホルムに溶解し、予めｎ−ヘキ
サン：酢酸エチル（１：１ ｖ／ｖ）を用いて充填した
シリカゲル６０カラム（７０−２３０メッシュ）（５０
０ｍｌ）に付した。カラムをｎ−ヘキサン：酢酸エチル
（１：１ ｖ／ｖ， １．５ ｌ）およびｎ−ヘキサ
ン：酢酸エチル（１：２ ｖ／ｖ， ２．５ ｌ）で展
開した。溶出液は ０．５〜０．９ ｌを溶出画分ｉ、
１．１〜２．３ ｌを溶出画分ｉｉとして分画した。

【００５２】（ＦＲ９００４１４物質の単離）溶出画分
ｉを減圧下で濃縮乾固し残渣（２００ｍｇ）を得た。こ
れをアセトン：ｎ−ヘキサン（１：７ ｖ／ｖ， ５５
０ｍｌ）で沈澱させることによりＦＲ９００４１４物質
の白色粉末（２３３ｍｇ）を得た。ＦＲ９００４１４物
質は、公開特許公報（特開平７−６７６６８）中に開示
されている。

【００５３】（ＦＲ１８３７４３物質の単離）溶出画分
ｉｉを減圧下で濃縮乾固し残渣（４００ｍｇ）を得た。
これを塩化メチレン（１０ｍｌ）に溶解し、予め酢酸エ
チルを用いて充填したγ−アルミナＡＣ−１２カラム
（６００ｍｌ）に付した。カラムを酢酸エチル：メタノ
−ル（１００：１ ｖ／ｖ， ３ ｌ）で展開した。Ｆ
Ｒ１８３７４３物質を含む画分（２．０〜２．７ ｌ）
を合わせ、減圧下で濃縮し残渣（３５０ｍｇ）を得た。
これを塩化メチレン（１０ｍｌ）に溶解し、再度γ−ア
ルミナ ＡＣ−１２カラム（２００ｍｌ）に付した。カ
ラムを酢酸エチル：メタノ−ル（１００：１ ｖ／ｖ）
で展開し、ＦＲ１８３７４３物質を含む画分（３００〜
６００ｍｌ）を合わせ、減圧下で濃縮し残渣を得た。こ
れを２０％メタノ−ル水（１００ｍｌ）に溶解し、ＯＤ
Ｓ−ＡＭ １２０−Ｓ５０ カラム（１７０ｍｌ）に付
し、２０％メタノ−ル水（５１０ｍｌ）および４０％メ
タノ−ル水（５１０ｍｌ）で洗浄後、５５％メタノ−ル
水で展開した。ＦＲ１８３７４３物質を含む溶出画分を
合わせ、減圧下で濃縮乾固し白色粉末（１７５ｍｇ）を
得た。これをアセトン：ｎ−ヘキサン（１：２０ ｖ／
ｖ， ４２０ｍｌ）で沈澱させることによりＦＲ１８３
７４３物質の白色粉末（１５７ｍｇ）を得た。

【００５４】（ＦＲ９０１４０２物質の単離）溶出画分
Ｂを減圧下で濃縮し、水溶液（１００ｍｌ）を得た。酢
酸エチル（４００ｍｌ）で抽出し、減圧下で濃縮するこ
とにより油状残渣を得た。これをアセトン：ｎ−ヘキサ
ン（１：２０ ｖ／ｖ， ５００ｍｌ）で沈澱させた。
得られた沈澱を２０％メタノ−ル水（５００ｍｌ）に溶
解し、ＯＤＳ−ＡＭ １２０−Ｓ５０ カラム（５７ｍ
ｌ）に付し、２０％メタノ−ル水（５７ｍｌ）で洗浄
後、５５％メタノ−ル水で展開した。ＦＲ９０１４０２
物質を含む溶出画分を合わせ、減圧下で濃縮乾固して白
色粉末（６０ｍｇ）を得た。これをアセトン：ｎ−ヘキ
サン（１：２０ ｖ／ｖ， ４２０ｍｌ）で沈澱させる
ことによりＦＲ９０１４０２物質の白色粉末（５０ｍ
ｇ）を得た。ＦＲ９０１４０２物質は、公開特許公報
（特開平７−６７６６８）中に開示されている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 神田 宗和 愛知県名古屋市西区中小田井３丁目289番 地 ライオンズガーデン中小田井509号 (72)発明者 藤田 国雄 岐阜県岐阜市西川手６丁目61番地 (72)発明者 山下 道雄 茨城県つくば市並木３−11−11

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ＦＲ１８３７３７物質、ＦＲ１８３７３
   ９物質、ＦＲ１８３７４２物質およびＦＲ１８３７４３
   物質を包含するＷＢ９６８物質群。ここに、ＦＲ１８３
   ７３７物質は次の物理化学的性状を有し： 外観： 白色粉末 本性： 中性物質 融点： １８１−１８７℃ 比旋光度：［α］Ｄ²³＝ −７゜（ｃ＝１．０， ＣＨ
   Ｃｌ₃：ＭｅＯＨ＝１：１） 分子式：Ｃ₂₆Ｈ₄₂Ｎ₄Ｏ₇Ｓ₂ 元素分析：Ｃ₂₆Ｈ₄₂Ｎ₄Ｏ₇Ｓ₂として 計算値： Ｃ５１．６４； Ｈ ７．３３； Ｎ ９．
   ２６ （％） 実測値： Ｃ５１．９９； Ｈ ７．０４； Ｎ ９．
   ２３ （％） 分子量： ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／Ｚ） ５８７（Ｍ＋Ｈ）
   ⁺ ＨＲＦＡＢ−ＭＳ：Ｃ₂₆Ｈ₄₂Ｎ₄Ｏ₇Ｓ₂＋Ｈとして 計算値：５８７．２５７３ 実測値：５８７．２６００ 溶解性： 易溶： クロロホルム、酢酸エチル、アセトン 可溶： メタノ−ル 不溶： 水、ｎ−ヘキサン 呈色反応： 陽性： 硫酸セリウム反応、硫酸反応、ヨウ素蒸気反応 陰性： ニンヒドリン反応、塩化第２鉄反応、エ−ルリ
   ッヒ反応、モ−リッシュ反応 紫外吸収スペクトル：末端吸収（メタノ−ル中） 赤外吸収スペクトル：νｍａｘＫＢｒ＝３３００， ３
   ２５０， ２９６０，２９３０， １７２０， １６８
   ０， １６５０， １６２０， １５３０，１３８０，
   １２１０， １０３０， ９８０ ｃｍ^{-1 1} Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
   （５：１）， ４００ＭＨｚ］ δ：８．７１（１Ｈ， ｂｒ．ｓ， 交換可能），
   ８．１７（１Ｈ， ｂｒ．ｄ， Ｊ＝６Ｈｚ， 交換可
   能），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，交換可能），
   ６．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），６．６
   ９（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），５．７２（１Ｈ，ｍ），
   ５．６２（１Ｈ，ｍ），４．８１（１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ
   ＝８Ｈｚ，交換可能），４．７４（１Ｈ，ｍ），４．５
   ０−４．４０（２Ｈ，ｍ），４．２３−４．１２（３
   Ｈ，ｍ），３．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５，４Ｈ
   ｚ），３．０６−２．９０（２Ｈ，ｍ），２．７７（１
   Ｈ，ｍ），２．６５−２．５７（２Ｈ，ｍ），２．５１
   −２．４３（２Ｈ，ｍ），２．２０（１Ｈ，ｍ），２．
   １０（１Ｈ，ｍ），１．７４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈ
   ｚ），１．２９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９９
   （６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９７（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝
   ７Ｈｚ） ｐｐｍ¹³ Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
   （５：１）， １００ＭＨｚ］ δ：１７３．０（ｓ），１７２．１（ｓ），１７１．８
   （ｓ），１６９．３（ｓ），１６４．４（ｓ），１３
   ３．２（ｄ），１３１．６（ｄ），１２８．８（ｓ），
   １２８．２（ｄ），６９．０（ｄ），６１．０（ｄ），
   ５９．３（ｄ），５７．７（ｄ），５５．０（ｄ），４
   １．９（ｔ），３９．９（ｔ），３９．３（ｔ），３
   １．１（ｔ），３０．８（ｔ），３０．２（ｄ），１
   ８．７（ｑ），１８．５（ｑ），１７．９（ｑ），１
   ７．７（ｑ），１３．７（ｑ），１２．９（ｑ） ｐｐ
   ｍ アミノ酸分析：アミノ酸分析の結果、バリンおよびアン
   モニア（１：１）が存在し； ＦＲ１８３７３９物質は次の物理化学的性状を有し： 外観： 白色粉末 本性： 中性物質 融点： ２４６−２５１℃ 比旋光度：［α］Ｄ²³＝ −１５７゜（ｃ＝１．０，
   ＣＨＣｌ₃：ＭｅＯＨ＝１：１） 分子式：Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂ 元素分析： Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂として 計算値： Ｃ５３．３１； Ｈ ６．７１； Ｎ １
   ０．３６； Ｓ １１．８６ （％） 実測値： Ｃ５３．２４； Ｈ ６．７５； Ｎ １
   ０．０５； Ｓ １１．４９ （％） 分子量： ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／Ｚ） ５４１（Ｍ＋Ｈ）
   ⁺ ＨＲＦＡＢ−ＭＳ：Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂＋Ｈとして 計算値：５４１．２１５５ 実測値：５４１．２１６２ 溶解性： 易溶：クロロホルム、アセトン 可溶：メタノ−ル、酢酸エチル 不溶： 水、ｎ−ヘキサン 呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、ヨウ素蒸気反応 陰性： ニンヒドリン反応、塩化第２鉄反応、エ−ルリ
   ッヒ反応、モ−リッシュ反応 紫外吸収スペクトル：末端吸収（メタノ−ル中） 赤外吸収スペクトル：νｍａｘＫＢｒ＝３４００， ３
   ３００， ２９７０，２９２０， １７１０， １６８
   ０， １６５０， １５２０， １３３０，１２７０，
   １１６０， １０５０， ９９０ ｃｍ^{-1 1} Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
   （５：１）， ４００ＭＨｚ］ δ：８．８５（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，交換可能），７．６２
   （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），７．４１（１
   Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），７．３２（１Ｈ，
   ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，交換可能），６．２８（１Ｈ，ｂｒ．
   ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），６．１２（１Ｈ，ｍ），５．６５
   （１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ），５．５１（１
   Ｈ，ｍ），４．９３（１Ｈ，ｍ），４．３６−４．３１
   （２Ｈ，ｍ），３．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５，３Ｈ
   ｚ），３．２５−３．０８（３Ｈ，ｍ），２．９４（１
   Ｈ，ｍ），２．６５（１Ｈ，ｍ），２．４５（１Ｈ，
   ｍ），２．２８（１Ｈ，ｍ），２．１５（１Ｈ，ｍ），
   １．９５（１Ｈ，ｍ），１．７３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈ
   ｚ），１．０３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．０２
   （３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．０１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝
   ７Ｈｚ），１．００（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ） ｐｐｍ¹³ Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
   （５：１）， １００ＭＨｚ］ δ：１７３．０（ｓ），１７１．３（ｓ），１６９．８
   （ｓ），１６８．８（ｓ），１６６．９（ｓ），１３
   １．１（ｓ），１３０．３（ｄ），１２９．２（ｄ），
   １２４．９（ｄ），７１．１（ｄ），６０．０（ｄ），
   ５９．５（ｄ），５０．８（ｄ），４０．７（ｔ），３
   ９．１（ｔ），３７．０（ｔ），３１．５（ｔ），３
   ０．５（ｄ），２８．９（ｄ），１８．９（ｑ），１
   ８．４（ｑ），１８．１（ｑ），１７．１（ｑ），１
   ２．２（ｑ） ｐｐｍ アミノ酸分析：アミノ酸分析の結果、バリンおよびアン
   モニア（１：１）が存在し；ＦＲ１８３７４２物質は次
   の物理化学的性状を有し： 外観：白色粉末 本性：中性物質 融点：２４７−２５３℃ 比旋光度：［α］Ｄ²³＝＋６゜（ｃ＝１．０， ＣＨＣ
   ｌ₃：ＭｅＯＨ＝１：１） 分子式：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂ 元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂・１／２Ｈ₂Ｏとして 計算値：Ｃ ５３．２７； Ｈ ６．９７； Ｎ ９．
   ９４ （％） 実測値：Ｃ ５３．２７； Ｈ ６．７７； Ｎ ９．
   ８４ （％） 分子量：ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／Ｚ） ５５５（Ｍ＋Ｈ）⁺ ＨＲＦＡＢ−ＭＳ：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂＋Ｈとして 計算値：５５５．２３１１ 実測値：５５５．２３１２ 溶解性： 易溶：クロロホルム、酢酸エチル、アセトン 可溶： メタノ−ル 不溶： 水、ｎ−ヘキサン 呈色反応： 陽性： 硫酸セリウム反応、硫酸反応、ヨウ素蒸気反応 陰性： ニンヒドリン反応、塩化第２鉄反応、エ−ルリ
   ッヒ反応、モ−リッシュ反応 紫外吸収スペクトル：末端吸収（メタノ−ル中） 赤外吸収スペクトル：νｍａｘＫＢｒ＝３４００， ３
   ３００， ２９６０，２９２０， １７４５， １６９
   ５， １６４０， １５３０， １３５０，１２６０，
   １２２０， １０２５， ９８０ ｃｍ^{-1 1} Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
   （５：１）， ４００ＭＨｚ］ δ：８．４０（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，交換可能），８．２２
   （１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，交換可能），７．８１
   （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，交換可能），７．６９（１
   Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），６．３７（１Ｈ，
   ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），５．７７（１Ｈ，ｍ），５．７１−
   ５．６４（２Ｈ，ｍ），４．７２（１Ｈ，ｍ），４．５
   ８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８，４Ｈｚ），４．００（１Ｈ，
   ｍ），３．２３−３．１０（３Ｈ，ｍ），３．０１（１
   Ｈ，ｍ），２．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４，１．５Ｈ
   ｚ），２．７３−２．５８（３Ｈ，ｍ），２．２４（１
   Ｈ，ｍ），２．０９（１Ｈ，ｍ），１．７５（３Ｈ，
   ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．５９（１Ｈ，ｍ），１．３９
   （１Ｈ，ｍ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），
   １．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９９（３Ｈ，
   ｄ， Ｊ＝７Ｈｚ），０．９７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈ
   ｚ） ｐｐｍ¹³ Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
   （５：１）， １００ＭＨｚ］ δ：１７２．２（ｓ），１７１．４（ｓ），１６８．８
   （ｓ），１６８．４（ｓ），１６５．３（ｓ），１３
   ０．３（ｄ），１２９．６（ｓ），１２９．５（ｄ），
   １２９．２（ｄ），７０．０（ｄ），６２．４（ｄ），
   ５７．６（ｄ），５６．５（ｄ），３８．１（ｄ），３
   ７．８（ｔ），３７．５（ｔ），３４．５（ｔ），２
   ９．９（ｔ），２８．９（ｄ），２５．５（ｔ），１
   ８．９（ｑ），１８．８（ｑ），１４．５（ｑ），１
   ２．９（ｑ），１１．５（ｑ） ｐｐｍ アミノ酸分析：アミノ酸分析の結果、バリン、イソロイ
   シンおよびアンモニア（１：１：１）が存在し；そして
   ＦＲ１８３７４３物質は次の物理化学的性状を有する： 外観：白色粉末 本性：中性物質 融点：２５４−２５６℃ 比旋光度：［α］Ｄ²³＝ −９゜（ｃ＝１．０， ＣＨ
   Ｃｌ₃：ＭｅＯＨ＝１：１） 分子式：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂ 元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂として 計算値：Ｃ ５４．１３； Ｈ ６．９０； Ｎ １
   ０．１０； Ｓ １１．５６ （％） 実測値：Ｃ ５３．９１； Ｈ ７．０２； Ｎ １
   ０．０８； Ｓ １１．４４ （％） 分子量：ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／Ｚ） ５５５（Ｍ＋Ｈ）⁺ ＨＲＦＡＢ−ＭＳ：Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₄Ｏ₆Ｓ₂＋Ｈとして 計算値：５５５．２３１１ 実測値：５５５．２３２３ 溶解性： 易溶：クロロホルム、酢酸エチル、アセトン 可溶：メタノ−ル 不溶：水、ｎ−ヘキサン 呈色反応： 陽性：硫酸セリウム反応、硫酸反応、ヨウ素蒸気反応 陰性：ニンヒドリン反応、塩化第２鉄反応、エ−ルリッ
   ヒ反応、モ−リッシュ反応 紫外吸収スペクトル：末端吸収（メタノ−ル中） 赤外吸収スペクトル：νｍａｘＫＢｒ＝３３７０， ３
   ３００， ２９６０，２９３０， １７４０， １６９
   ５， １６６０， １６４０， １５２０，１３００，
   １２６０， １２２０， ９８０ ｃｍ^-1 Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
   （５：１）， ４００ＭＨｚ］ δ：８．３７（１Ｈ，ｂｒ．ｓ，交換可能），８．１４
   （１Ｈ，ｂｒ．ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，交換可能），７．７８
   （１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，交換可能），７．６７（１
   Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，交換可能），６．３７（１Ｈ，
   ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ），５．７７（１Ｈ，ｍ），５．７１−
   ５．６３（２Ｈ，ｍ），４．７３（１Ｈ，ｍ），４．５
   ３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８，４Ｈｚ），４．１９（１Ｈ，
   ｍ），３．２２−３．０８（３Ｈ，ｍ），２．９８（１
   Ｈ，ｍ），２．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１４，１．５Ｈ
   ｚ），２．７１−２．５６（３Ｈ，ｍ），２．３９（１
   Ｈ，ｍ），２．０７（１Ｈ，ｍ），１．７５（３Ｈ，
   ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．５４（１Ｈ，ｍ），１．３９
   （１Ｈ，ｍ），１．０９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），
   １．０２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．００（３Ｈ，
   ｄ， Ｊ＝７Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈ
   ｚ） ｐｐｍ¹³ Ｈ核磁気共鳴スペクトル：［ＣＤＣｌ₃−ＣＤ₃ＯＤ
   （５：１）， １００ＭＨｚ］ δ：１７２．５（ｓ），１７１．５（ｓ），１６９．１
   （ｓ），１６８．３（ｓ），１６５．６（ｓ），１３
   ０．２（ｄ），１２９．６（ｓ），１２９．５（ｄ），
   １２９．２（ｄ），７０．１（ｄ），６０．５（ｄ），
   ５８．２（ｄ），５６．５（ｄ），３７．８（ｔ），３
   ７．５（ｔ），３５．２（ｄ），３４．７（ｔ），３
   １．５（ｄ），２９．８（ｔ），２５．７（ｔ），１
   ８．１（ｑ），１８．０（ｑ），１５．３（ｑ），１
   ３．０（ｑ），１１．３（ｑ） ｐｐｍ アミノ酸分析：アミノ酸分析の結果、バリン、ａｌｌｏ
   −イソロイシンおよびアンモニア（１：１：１）の存在
   が判明。
2. 【請求項２】 クロモバクテリウム属に属し、ＷＢ９６
   ８物質群を産生しうる菌株を水性栄養培地中で好気的条
   件下に培養し、ＷＢ９６８物質群を回収することを特徴
   とするＷＢ９６８物質群の製造方法。
3. 【請求項３】 クロモバクテリウム属菌株がクロモバク
   テリウム・ヴィオラセウムＷＢ９６８（ＦＥＲＭ ＢＰ
   −１９６８）である請求項２に記載の方法。
4. 【請求項４】 活性成分としてのＷＢ９６８物質群と医
   薬として許容しうる無毒性の担体とを含有する医薬組成
   物。