JPH03223300A

JPH03223300A - 生理活性物質ｂｅ―１６６２７類

Info

Publication number: JPH03223300A
Application number: JP2312957A
Authority: JP
Inventors: Nobuo Kanbayashi; 神林　信夫; Kyozo Naito; 内藤　恭三; Akira Okuyama; 奥山　彬; Hajime Suzuki; 肇鈴木; Shigeru Nakajima; 茂中島; Hiroyuki Suda; 寛之須田; Masanori Okanishi; 岡西　昌則
Original assignee: Banyu Phamaceutical Co Ltd
Current assignee: MSD KK
Priority date: 1989-11-24
Filing date: 1990-11-20
Publication date: 1991-10-02

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】駁菓二立剋里公厨本発明は医薬の分野で有用であり、さらに詳細には蛋白
分解酵素による細胞外マトリックスの分解に起因する癌
細胞の転移、浸潤あるいはリュウマチ様関節炎、歯肉炎
や糸球体腎炎等の治療及び予防に使用できるストロメラ
イシン（ヒト）の新規阻害物質、その製法及び用途並び
に該物質の産生微生物に関するものである。

灸来立肢歪ストロメライシン（ヒト）は広い基質特異性を持ち、癌
細胞マトリックスを含む多くの蛋白質（■及び■型コラ
ーゲン、ラミニン、プロテログリカン、フィブロネタチ
ン、カゼイン、エラスチン並びにゼラチン）を分解し（
ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ
．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｃｍ．）、第２６１巻、１４２４５〜
１４２５５頁、１９８６年参照）、細胞外マトリックス
破壊に原因するリュウマチ様関節炎（前掲の文献参照）
、癌細胞の転移（プロシーディング・オブ・ナショナル
・アカデミ−・オブ・サイエンス（Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔ
ｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　）、Ｕ．　Ｓ．　Ａ．　
、第８３巻、９４１３　〜９４１７頁、１９８６年参照
）、歯肉炎（ジャーナル・オブ・ベリオドンタル・リサ
ーチ（Ｊ．Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔ，　ｅｔ　ａｌ．　Ｒｅ
ｓ．　）、第１７巻、１８３〜１９０頁、１９８２年参
照）、糸球体腎炎（グラソック・アール・ジェイ（Ｇｌ
ａｓｓｏｃｋ，　Ｒ．　Ｊ．　）、ブレンナー・ビー・
エム（Ｂｒｅｎｎｅｒ，　Ｂ．　Ｍ．　）等線、ザ・キ
ドニー（Ｔｈｅ　Ｋｉｄｎｅｙ）、第３版、第１巻、９
３９〜９４５頁、ダヴユリー・ビー・サンダース（’Ｉ
Ｉ．　Ｂ．　Ｓａｕｎｄｅｒｓ　Ｃｏ．　）出版、フィ
ラデルフィア（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ）参照）等の
疾病を引き起こすことが知られている。更にコラゲナー
ゼも細胞外マトリックス破壊には重要な役割を果たして
いる（アースライティス・アンド・リュウマチズム（＾
ｒｔｈｒｉｔｉｓ　Ｒｈｅｕｍ．）、第２７巻、２８５
〜２９ｏ頁、１９８０年参照）が、ストロメライシンは
コラゲナーゼの前駆体（プロコラゲナーゼ）を活性化し
、間接的にコラゲナーゼ活性の調節にも関与している（
バイオケミカル・ジャーナル（Ｂｉｏｃｈｅｍ．　Ｊ．
　）、第２４８巻、２６５〜２６８頁、１９８７年参照
）。従って、ストロメライシンあるいはコラゲナーゼに
対する特異的な阻害剤を提供することは、これらの酵素
の関与する疾患の治療及び予防に有用であるが、現在ま
でに低毒性の阻害剤は開発されるに至っていない。

が　　しよ“と　るこのような状況においては、より低毒性のストロメライ
シン（ヒト）の低分子阻害剤の開発が求められている。

−　　　　　るための本発明者らは、ストロメライシン（ヒト）の阻害活性を
有する物質について微生物代謝産物を広くスクリーニン
グした結果、後記一般式で表される化合物が優れたスト
ロメライシン阻害作用を示すことを見い出して本発明を
完成した。

即ち、本発明は一般式［式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す］で表される
生理活性物質ＢＥー１６６２７類又はその薬学的に許容
しつる塩、その製造法及びその用途並びに該ＢＥー１６
６２７類を産生する微生物に関するものである。

ここにおいて、Ｒが水素原子である化合物をＢＥ−１６
６２７＾と、Ｒがメチル基である化合物をＢＥ−１６６
２７Ｂと称する。

以下に、本発明に係わる化合物について理化学的性状を
示す。

ＢＥ−１６６２７Ａの理化学的性状性状：無色アモルファス状固体若しくは結晶分子式・Ｃ
，＊　Ｈｖ　Ｎｓ　Ｏ。

元素分析値：理論値炭素４９．　８５％、水素７５３％
窒素１１．６３％実測値炭素４９．　８１％、水素７５２％窒素１１．６
８％マススペクトル：ＦＡＢマススペクトルを第１図に示す
。（３６２．　＋９４１，　［Ｍ＋Ｈ］’）υＶスペク
トル・末端吸収１媒、メタノール）ｌＲスヘクトル・Ｋ
Ｂｒ錠剤法によるＩＲスペクトルヲ第２図に示す。

）１−ＮＭＲスペクトル、ｄ６−ジメチルスルホキシド
中で測定した’＋１−ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ
）　ヲＪＲ３図に示す。

”Ｃ−ＮＭＲスペクトル・ｄ、−ジメチルスルホキシド
中で測定した”Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ）を
第４図に示す。

融点　９０ｉ００°Ｃ旋光度［α］！’ニー２０．１（Ｃ＝０．４１７．メタ
ノール）溶解性アルカリ性の水に溶けやす（、クロロポ
ルム、酢酸エチル、ベンゼン、ヘキサンなどの有機溶媒
には溶けにくい。

酸性、中性、塩基性物質の区別、酸性物質Ｒｆ値０．６
５（メルク社製、キーゼル’７’　／Ｌ７６０Ｆ、１１
使用。

展開溶媒、ｎ−ブタノール／酢酸／水（４１：２））呈色反応ライドン−スミス反応陽性塩化第二鉄反応陽性ＢＥ−１６６２７Ｂの理化学的性状性状　無色アモルファス状固体若しくは結晶分子式　Ｃ
，、Ｉ−（９Ｎ、　Ｏ。

元素分析値：理論値炭素５１．１９％、水素７．７９％
窒素１１．１９％実測値炭素５１．１７％、水素７７０％窒素１１．２３
％マススペクトル・ＦＡＢマススペクトルを第５図に示す
。（３７６、２０５５，［Ｍ＋Ｈ］’）ＵＶスペクトル
、末端吸収（溶媒、メタノール）ＩＲスペクトル：ＫＢ
ｒ錠剤法によるＩＲスペクトルを第６図に示す。

Ｈ−ＮＭＲスペクトル：ｄ、−ジメチルスルホキシド中
で測定した’　ＩＩ−ＮＭＲスペクトル（３００Ｍｔｌ
ｚ）を第７図に示す。

”Ｃ−ＮＭＲスペクトルｄ６−ジメチルスルホキシド中
で測定した”Ｃ−ＮＭＲスペクトル（７５ＭＨｚ）を第
８図に示す。

融点・９５−１０５°Ｃ旋光度［α］ｐ　ニー９．１　（Ｃ＝０．４１７．　メ
９　／　−ル）溶解性アルカリ性の水に溶けやすく、ク
ロロホルム、酢酸エチル、ベンゼン、ヘキサンなどの有
機溶媒には溶けにくい。

酸性、中性、塩基性物質の区別：酸性物質Ｒｆ値０６９
（メルク社製、キーゼルゲル６０　Ｆ、、、使用展開溶
媒、ｎ−ブタノール／酢酸／水（４：１２））呈色反応ライドン−スミス反応陽性塩化第二鉄反応陽性のＢＥ−１６６２７Ａ　　びＢのＢＥ−＋６６２７Ａ及びＢのストロメライシン、コラゲ
ナーゼを含む各種蛋白分解酵素に対する阻害活性を求め
るため、試験管内で試験を行った。ストロメライシン（
ヒト）は遺伝子工学的手法により作成したプロストロメ
ライシン（英国セルチック社）をトリブノン（１０μｇ
７ｍｌ　）で３７℃、１０分間の処理を行って活性化し
、余剰のトリプシン活性を大豆トリブンンインヒビター
（５０μｇ／ｍｌ　）で阻害して用いた。その他の酵素
の由来及び基質は第１表に示した通りである。各酵素の
活性を５０％阻害する濃度（ＩＣ９値）を第１表に示し
た。

第１表から明らかな如く、本発明のＢＥ１６６２７Ａ及
びＢは金属酵素の活性を特異的に阻害し、ストロメライ
シン（ヒト）を最も強く、次いでコラゲナーゼ、サーモ
ラインを強く阻害した。

ＢＥ−１６６２７Ａのマウス培養癌細胞（Ｐ２Ｓ５）に
対する細胞毒性試験では、そのＩＣ，値は１００μｇ７
ｍ１以上であった。

基質Ｂ　サクノニルーアラニループロリルーアラニルー
メチルクマリルアミド上述したように、本発明のＢＥ−
１６６２７Ａ及びＢは、ストロメライシン（ヒト）に対
し、顕著な阻害作用を示す。従って、本発明はストロメ
ライシンの活性亢進に起因する種々の疾患、たとえば癌
細胞の転移、浸潤あるいはリュウマチ様関節炎、歯肉炎
や糸球体腎炎等に対する治療剤として有用である。

本発明はまた、本発明化合物をストロメラインン阻害剤
として使用する場合、有効量の本発明化合物単独または
有効量の本発明の化合物及び不活性且つ薬学的に許容し
うる担体から成る医薬組成物として使用される。

この医薬組成物は、本発明の化合物と不活性な薬学的担
体とを組み合わせて製造され、各種の処方で経口的、非
経口的若しくは局所的に投与される。適切な組成物の例
としては、錠剤、カプセル、火剤、粉末、顆粒等の経口
投与用の固形組成物、溶液、サスペンション、エマルジ
ョンのような経口投与用の液体組成物を包含する。また
、使用直前に滅菌水、生理的食塩水若しくは他の注射用
滅菌溶剤に溶解しつる滅菌組成物の形で製造することも
できる。

本発明化合物の薬学的に許容しつる塩としては、本発明
の化合物に例えば水酸化ナトリウム、水酸（ＩＪリウム
若しくは炭酸水素ナトリウムのようなアルカリの当量ま
たはトリエチルアミン若しくは２−アミノエタノールの
ような有機アミン類を加えることによって形成されるア
ルカリ付加塩である。

本発明化合物の実際に好ましい投与量は、使用される化
合物の種類、配合された組成物の種類、適用頻度及び治
療すべき特定部位、宿主及び病状によって変化すること
に注意すべきである。−日当りの成人−人当りの投与量
は、経口投与の場合、１０〜５００ｍｇであり、非経口
投与、好ましくは静脈内注射の場合、１日当りｌＯ〜１
００ｒｙ＋σである。なお、投与回数は投与方法及び症
状により異なるが、１回〜数回である。

次に本発明のＢＥ−１６６２７Ａ及びＢの製造法につい
て説明する。

本発明のＢＥ−１６６２７類の製造に使用する微生物又
はその変異株は、ＢＥ−１６６２７類を産生ずるものな
らばいずれでも良いが、例えば以下の菌学的性状を有す
る微生物を挙げることができる。

この微生物は、昭和６３年１０月、山梨県北法の土壌よ
り分離採取された。

１、形態本菌株は、良く伸長し分岐する基生菌糸と気菌糸を形成
し、輪生岐及び菌糸の分断は認められない。気菌糸上に
は胞子の連鎖（２０個以上）をつくり、その形態は直線
状及び波状である。

胞子の表面は平滑で大きさが１．６Ｘ０．８〜ｌ、ＯＸ
ｏ、６μｍ位の円筒状であり、胞子のう、鞭毛胞子及び
菌核等の特殊な器官は観察されない。

２各種寒天平板培地における培養性状各種寒天平板培地において、２８℃で１４日間本菌株を
培養した結果を第２表に示す。

第２表３、生育温度（イースト・麦芽寒天培地、１４日間培養
）５°Ｃ：生育せず１０℃：生育及び気菌糸形成不良１２°Ｃ：生育及び気菌糸形成良好１７℃：生育及び気菌糸形成非常に良好２０°Ｃ６生育
及び気菌糸形成非常に良好２８℃：生育及び気菌糸形成
非常に良好３５°Ｃ：生育せず３７℃：生育せず４、生理学的諸性質（１）ゼラチンの液化　　　　　　　　　　陽性（グル
コース・ペプトン・ゼラチン培地）（２）スターチの加
水分解　　　　　　　　陰性（スターチ・無機塩寒天培
地）（３）脱脂牛乳の凝固　　　　　　　　　　陰性（スキ
ムミルク培地）（４）脱脂牛乳のペプトン化　　　　　　　陽性（スキ
ムミルク培地）（５）メラニン様色素の生成　　　　　　　陰性（６）
食塩耐性　　　食塩含有量２％以下で生育（イースト・
麦芽寒天培地）５．炭素源の利用能ブリドハム・ゴドリーブ寒天を基礎培地とし、下記各稲
穂を添加して、２８℃、１４日間培養した。その結果を
第３表に示す。

６、細胞壁組成ＬＬ−ンアミノピメリン酸が検出された。

以上の菌学的諸性質により、本菌株はストレプトミセス
属に属することが判明した。したがって、本菌株をスト
レプトミセス・エスピー４１６６２７（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅｓｓｐ、　Ａ１６６２７）と称することにした
。

なお、本菌株は通商産業省工業技術院微生物工業技術研
究所に寄託されており、その微工研受託番号は微工研菌
寄第３１２６号（ＦＥＲＭ　ＢＰ−３１２６）である。

本発明で使用するＢＥ−１６６２７類を産生ずる微生物
の変異株は、例えばＸ線若しくは紫外線等の照射処理、
例えばナイトロジェン・マスタード、アザセリン、亜硝
酸、２−アミノプリン若しくはＮ−メチル−Ｎｏ−ニト
ロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）等の変異誘起剤
による処理、ファージ接触、形質転換、形質導入又は接
合等の通常用いられる菌種変換処理方法によりＢＥ−１
６６２７類産生菌を変異させた微生物である。

本発明のＢＥ−１６６２７類を製造するにあたり、ＢＥ
−１６６２７類の生産菌株を栄養源含有培地に接種して
好気的に発育させることにより、ＢＥ−１６６２７類を
含む培養物が得られる。栄養源としては、放線菌の栄養
源として公知のものが使用できる。例えば、炭素源とし
ては、市販されているブドウ糖、グリセリン、麦芽糖、
デンプン、蔗糖、糖蜜又はデキストリンなどが単独又は
混合物として用いられる。窒素源としては、市販されて
いる大豆粉、コーンステイープリカー、肉エキス、酵母
エキス、綿実粉、ペプトン、小麦胚芽、魚粉、無機アン
モニウム塩又は硝酸ナトリウムなどが単独又は混合物と
して用いられる。無機塩としては、市販されている炭酸
カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マグ
ネシウム又は各種リン酸塩などを使用することができる
。その他必要に応じて、鉄、マンガン又は亜鉛などの重
金属塩を微量添加することもできる。また、発泡の著し
い時には、消泡剤として、例えば大豆油又は亜麻仁油等
の植物油、オクタデカノール等の高級アルコール類、各
種シリコン化合物等を適宜添加しても良い。これらのも
の以外でも、該生産菌が利用し、ＢＥ−１６６２７類の
生産に役立つものであれば、いずれも使用することがで
きる。

培養方法としては、一般の微生物代謝産物の生産方法と
同様に行えばよく、固体培養でも液体培養でもよい。液
体培養の場合は、静置培養、攪拌培養、振盪培養または
通気培養などのいずれを実施してもよいが、特に振盪培
養または深部通気攪拌培養が好ましい。培養温度は２０
℃〜３７℃が適当であるが、２５℃〜３０℃が好ましい
。好ましい培地のｐＨは４〜８の範囲で、培養時間は２
４時間〜１９２時間、好ましくは４８時間〜１４４時間
である。

培養物から目的とする本発明のＢＥ−１６６２７類を採
取するには、微生物の培養物から採取するのに通常使用
される分離手段が適宜利用される。本発明のＢＥ−１６
６２７類は培養濾液中に存在するので、培養濾液より通
常の分離手段、例えば溶媒抽出法、イオン交換樹脂法ま
たは吸着若しくは分配クロマトグラフィー法及びゲル濾
過法等を単独又は組合せて行うことにより精製できる。

また高速液体クロマトグラフィーや薄層クロマトグラフ
ィーなども抽出精製に利用可能である。

好ましい分離−精製の例としては次の方法が挙げられる
。まず培養濾液を遠心分離し、菌体と培養上清とに分け
る。培養上清のｐＨを酸性にし、ｎ−ブタノールなどの
有機溶媒で抽出して減圧下に濃縮すれば、ＢＥ−１６６
２７類を含む粗物質が得られる。得られた粗物質につい
て、ダイアイオンＩＩＰ−２０（三菱化成）を用いたカ
ラムクロマトグラフィー、ＤＥＡＥセファデックスＡ−
２５（ファルマシア社）を用いたカラムクロマトグラフ
ィー及びカプセルバック−Ｃ１１（資生堂）を用いた高
速液体クロマトグラフィーなどを行えば本発明のＢＥ−
１６６２７類を無色の粉末として得ることができる。

次に実施例を挙げ、本発明を具体的に説明する。

しかしながら、本発明は実施例に限定されるものではな
く、実施例の修飾手段はもちろん、本発明によって明ら
かにされたＢＥ−１６６２７類の性状に基づいて、公知
の手段を用いてＢＥ−１６６２７類を生産、濃縮、抽出
、精製する方法すべてを包括する。

丈里別斜面寒天培地に培養した放線菌＾１６６２７株をグルコ
ース０．１％、デキストリン２０％、コーングルテンミ
ール］、Ｄ％、魚粉０５％、酵母エキスＯ１％、塩化ナ
トリウムＯ１％、硫酸マグネシウム００５％、塩化カル
シウム００５％、硫酸第一鉄０゜０００２％、塩化第二
銅０．００００４％、塩化マンガン０．００００４％、
塩化コバルト０．００００４％、硫酸亜鉛０、００００
８％、ホウ酸ナトリウム０．００００８％、モリブデン
酸アンモニウム０．０００２４％、及び３−（Ｎ−モル
ホリノ）プロパンスルホン酸０．５％からなる培地（ｐ
Ｈ６，７）　１００ｍ１を含む５００ｒｙ＋／容の三角
フラスコ４本に接種し、２８℃で７２時間、回転振盪機
（毎分１８０回転）上で培養した。この培養液を２ｍｌ
ずつ、上記の培地を１００ｒｒ＋ｌ含む５００ｍｌ容の
三角フラスコ１００本に接種し、２８℃で１２４時間、
回転振盪機（毎分１８０回転）上で培養した。

培養液（＋０７）を濾過法によって濾過し、得られた培
養濾液８，５１を２Ｎ塩酸でｐＨ２，０とした後、ｎ−
ブタノール８．５１で抽出した。ｎ−ブタノール層を分
取して、これに４１の脱イオン水を添加し、２Ｎの水酸
化ナトリウムで水層のｐＨを９．０にすると、活性物質
は水層に転溶される。水層を分離し、水層に含まれるｎ
−ブタノールを減圧下に留去したのち、２Ｎ塩酸でｐｉ
（を３．０に調整した。この水溶液をダイアイオンＨＰ
−２０の塔（４ｃｍ　ｘ　４０ｃｍ　）にかけ、脱イオ
ン水１１で水洗した後、５０％メタノール−水ｌｌを用
いて活性物質を溶出した。

溶出液を減圧下に濃縮することにより、粗物質１１ｇを
得た。得られた粗物質１．１ｇを０．０１Ｍ蟻酸ナトリ
ウム４００ｍ１に溶解し、ＤＥＡＥ−セファデックスＡ
−２５の塔（２ｃｍ　ｘ　３０ｃｍ　）にかけ、０．０
１Ｍ蟻酸ナトリウム１１と０．３Ｍ蟻蟻酸ナトリウムｌ
色を用いて直線的濃度勾配法によって活性物質を溶出し
、１フラクション１５ｇで分画するとフラクション４８
番から６０番にわたって活性物質が溶出された。活性分
画に含まれる蟻酸ナトリウムを除くため、活性分画を集
めて２Ｎ塩酸でｐＨを３０に調整したのち、ダイアイオ
ンＨＰ−２０の塔（２Ｃｍｘ　２０ｃｍ　）にかけて水
洗後、８０％メタノール２００ｍ１を用いて活性物質を
溶出し、粗物質０２５ｇを得た。

得られた粗物質０．２５ｆＪを高速液体クロマトグラフ
ィー（カプセルバック−Ｃｎ、２０ｃｍ　ｘ　１５０ｃ
ｍ、資生堂）にかけ、流速１０ｍ／／ｍｉｎでアセトニ
トリル−０１％トリフルオロ酢酸（１５：８５）の展開
溶媒を用いて溶出することにより、保持時間２７分から
２９分の間にＢＥ−１６６２７＾を、保持時間５７分か
ら６０分の間にＢＥ−１６６２７Ｂを得た。ＢＥ１６６
２７ＡとＢＥ−１６６２７Ｂの活性分画をそれぞれ減圧
下に濃縮し、乾固した後、メタノールに溶解し、それぞ
れを、セファデックスＬＨ−２０の塔（］　ｃｍ　ｘ　
３０ｃｍ　）にかけ、メタノールで展開し、活性画分を
それぞれ減圧下に濃縮することによりＢＥ−１６６２７
Ａ　９．７ｍｑ及びＢＥ−１６６２７Ｂ　７１ｍｇを白
色粉末として得た。

光列！房か果本発明のＢＥ−１６６２７＾及びＢは、細胞毒性が低く
、金属酵素であるストロメライシン（ヒト）を強く阻害
することから、本酵素の関与する細胞外マトリックス分
解に起因する癌細胞の転移、浸潤及びリュウマチ様関節
炎、歯肉炎、糸球体腎炎等の疾患の治療及び予防に有用
である。

【図面の簡単な説明】

第１図及び第５図は各々ＢＥ−１６６２７Ａ及びＢのＦ
ＡＢ−マススペクトルの図である。第２図及び第６図は
各々ＫＢｒ錠剤法によるＢＥ−１６６２７Ａ及びＢの光
外部吸収スペクトルの図である。第３図及び第７図は各
々ｄ、−ジメチルスルホキシド中で測定したＢＥ−１６
６２７Ａ及びＢＨ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ）スペクトル
の図である。第４図及び第８図は各々ｄ、−ジメチルス
ルホキシド中で測定したＢＥ−１６６２７＾及びＢの”
　Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ）スペクトルの図である。

Claims

【特許請求の範囲】（１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す］で表される
生理活性物質ＢＥ−１６６２７類又はその薬学的に許容
しうる塩。（２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す］で表される
生理活性物質ＢＥ−１６６２７類又はその薬学的に許容
しうる塩を有効成分とするリュウマチ治療剤。（３）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す］で表される
生理活性物質ＢＥ−１６６２７類又はその薬学的に許容
しうる塩を有効成分とする癌転移阻害剤。（４）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素原子又はメチル基を示す］で表される
生理活性物質ＢＥ−１６６２７類又はその薬学的に許容
しうる塩の製造に際し、ＢＥ−１６６２７類を産生する
微生物又はその変異株を培養してＢＥ−１６６２７類を
蓄積させ、採取することを特徴とする製法。（５）スト
レプトミセス・エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓ
ｐ．）Ａ１６６２７株又はその変異株を培養することを
特徴とする第３請求項記載の製法。（６）生理活性物質ＢＥ−１６６２７類を産生する能力
を有する微生物又はその変異株。（７）ストレプトミセ
ス・エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ａ１
６６２７株又はその変異株であることを特徴とする第５
請求項記載の微生物又はその変異株。