JPH09132585A - 新規アミノ糖及びキトオリゴ糖又はその類似オリゴ糖の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 新規アミノ糖及び該新規アミノ糖を含むアミ
ノ糖にキチナーゼを作用させる酵素触媒重付加反応を提
供する。 【解決手段】 下記一般式（１）または（２）で表され
るアミノ糖を開発し、さらに、該新規アミノ糖を含むア
ミノ糖を酵素触媒重付加反応することによって、キトオ
リゴ糖又はその類似オリゴ糖を得る。 【化１】 （１）において、Ｒ¹ はＨ、β−グルコシル基又はβ−
ガラクトシル基を示し、（２）において、Ｒ² はβ−グ
ルコシル基又はβ−ガラクトシル基を示す。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規アミノ糖及びこの
新規アミノ糖の酵素触媒重付加反応を利用したキトオリ
ゴ糖又はその類似オリゴ糖の製造方法に関するものであ
る。

【０００２】

【従来の技術】従来より、フッ化β−Ｄ−セロビオシル
（次の式中（IV）で示したもの）については、久保ら
（日本大学獣医学部学術研究報告書，４１，９，１９８
４）により知られている。また、このフッ化β−Ｄ−セ
ロビオシルを出発原料として、これにセルラーゼを作用
させることにより、セルロースオリゴマーが得られるこ
とも知られている（特願平１−２３９６１１号）。

【０００３】

【化４】

【０００４】一方、キチンを加水分解して得られるキト
オリゴ糖は、安全性、生分解性、生体との親和性に優れ
ており、カプセル、多孔性ビーズ、医薬品（抗菌性、抗
カビ性）、ＤＤＳ等の生医学材料分野及び化粧品分野へ
の応用が期待されている。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかし、工業的に生産
されるキチンはカニやエビの殻を原料にしているため： １）大量のカニやエビの殻から少量のキチンしか得るこ
とができない； ２）一定の品質を有するキチンを得るためには、同質の
原料、つまり同種のエビ又はカニを集める必要がある； ３）エビやカニは繁殖期があるので、漁獲量が周期的に
増減し、四季を通じて安定供給が望めない；等、主とし
て原料確保の面で問題が多い。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記問題
点を解決すべく、鋭意検討した結果、下記構造式（Ｉ）
又は（II）で示される新規アミノ糖の合成に成功した。
さらに、該新規アミノ糖にキチナーゼを作用させること
によって、酵素触媒重付加反応を起こさせ結果として、
キトオリゴ糖又はその類似オリゴ糖を得ることに成功し
た。

【０００７】

【化５】 ここで、Ｒ¹ はＨ、β−グルコシル基、又はβ−ガラク
トシル基を示し、ＭｅはＣＨ₃ を示す。

【０００８】

【化６】 ここで、Ｒ² はβ−グルコシル基、又はβ−ガラクトシ
ル基を示し、ＭｅはＣＨ₃ を示す。

【０００９】すなわち、請求項１の発明は、新規アミノ
糖である２−メチル−｛１，２−ジデオキシ−α−グル
コピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（上記構
造式（Ｉ）のうち、Ｒ¹ がＨであるもの）、２−メチル
−｛３−Ｏ−（β−グルコピラノシル）１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（上記構造式（Ｉ）のうち、Ｒ¹ がβ−グルコシ
ル基であるもの）、２−メチル−｛３−Ｏ−（β−ガラ
クトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラ
ノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（上記構造式
（Ｉ）のうち、Ｒ ¹ がβ−ガラクトシル基であるも
の）、２−メチル−｛４−Ｏ−（β−グルコピラノシ
ル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１
−ｄ〕−２−オキサゾリン（上記構造式（II）のうち、
Ｒ² がβ−グルコシル基であるもの）、２−メチル−
｛４−Ｏ−（β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（上記構造式（II）のうち、Ｒ ² がβ−ガラクト
シル基であるもの）を提供するものである。

【００１０】請求項２の発明は、キトオリゴ糖又はその
類似オリゴ糖の製造方法であって、緩衝液中で、請求項
１に記載のアミノ糖にキチナーゼを作用させ、該アミノ
糖の酵素重付加反応によってキトオリゴ糖又はその類似
オリゴ糖を得ることを特徴とする。

【００１１】請求項３の発明は、請求項２のキトオリゴ
糖又はその類似オリゴ糖の製造方法において、アミノ糖
が下記構造式で示される新規アミノ糖（上記一般式
（Ｉ）のうち、Ｒ¹ がＨであるもの）であることを特徴
とする。

【００１２】

【化７】 ここで、ＭｅはＣＨ₃ を示す。

【００１３】後に示す反応式Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅを用い
て、それぞれ新規アミノ糖である２−メチル−｛１，２
−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２
−オキサゾリン（上記構造式（Ｉ）のうち、Ｒ¹ がＨで
あるもの）、２−メチル−｛３−Ｏ−（β−グルコピラ
ノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝
〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（上記構造式（Ｉ）
のうち、Ｒ¹ がβ−グルコシル基であるもの）、２−メ
チル−｛３−Ｏ−（β−ガラクトピラノシル）１，２−
ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−
オキサゾリン（上記構造式（Ｉ）のうち、Ｒ¹ がβ−ガ
ラクトシル基であるもの）、２−メチル−｛４−Ｏ−
（β−グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グ
ルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（上記
構造式（II）のうち、Ｒ² がβ−グルコシル基であるも
の）、２−メチル−｛４−Ｏ−（β−ガラクトピラノシ
ル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１
−ｄ〕−２−オキサゾリン（上記構造式（II）のうち、
Ｒ² がβ−ガラクトシル基であるもの）の製造方法を説
明する。以下の説明において、物質名の後にかっこ書き
で示した数字は、反応式Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅにおいて示
した化学式の番号である。

【００１４】新規アミノ糖である２−メチル−｛１，２
−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２
−オキサゾリン（１）は、Ｎ−アセチルグルコサミン
（１ａ）を出発原料として、以下の反応式Ａで示される
経路により、合成することができる。

【００１５】

【化８】 ここで、ＡｃはＣＨ₃ ＣＯ、ＭｅはＣＨ₃ 、Ｅｔ₄ Ｎ⁺
Ｃｌ^- は塩化テトラエチルアンモニウム、ＮａＯＭｅは
ナトリウムメトキシドを示す。

【００１６】Ｎ−アセチルグルコサミン（１ａ）を塩化
アセチルなどのアセチル化剤と反応させることを含む工
程によって、塩化３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２
−アセトアミド−２−デオキシ−α−グルコピラノシル
（１ｂ）を得ることができる。塩化３，４，６−トリ−
Ｏ−アセチル−２−アセトアミド−２−デオキシ−α−
グルコピラノシル（１ｂ）をアセトニトリルなどの有機
溶媒に溶かした溶液を、塩化テトラエチルアンモニウム
及び炭酸水素ナトリウムと反応させることを含む工程に
よって、２−メチル−（３，４，６−トリ−Ｏ−アセチ
ル−１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ）〔２，１
−ｄ〕−２−オキサゾリン（１ｃ）を得ることができ
る。

【００１７】２−メチル−（３，４，６−トリ−Ｏ−ア
セチル−１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ）
〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（１ｃ）を無水メタ
ノールなどのアルコール系溶媒に溶解させ、さらにナト
リウムメトキシドなどのアルコキシドを加えて反応させ
ることを含む工程によって、２−メチル−｛１，２−ジ
デオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オ
キサゾリン（１）を得ることができる。

【００１８】新規アミノ糖である２−メチル−｛３−Ｏ
−（β−グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−
グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン
（２）は、２−メチル−（３，４，６−トリ−Ｏ−アセ
チル−１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ）〔２，
１−ｄ〕−２−オキサゾリン（１ｃ）及びグルコース
（２ｇ）を出発原料として、反応式Ｂで示される経路に
より合成することができる。

【００１９】

【化９】

【００２０】ここで、ＡｃはＣＨ₃ ＣＯ、ＴｓＯＨはｐ
−トルエンスルホン酸、ＢｎはＣ₆Ｈ₅ ＣＨ₂ 、ＰｈＣ
Ｈ₂ （ＯＭｅ）₂ はα，α−ジメトキシトルエン、Ｐｙ
はピリジン、ＮａＯＭｅはナトリウムメトキシドを示
す。

【００２１】２−メチル−（３，４，６−トリ−Ｏ−ア
セチル−１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ）
〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（１ｃ）をクロロホ
ルムなどの有機溶媒に溶解させ、さらにベンジルアルコ
ール及びｐ−トルエンスルホン酸を加えて反応させるこ
とを含む工程によって、ベンジルＮ−アセチル−３，
４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−グルコサミニド（２
ｄ）を得ることができる。ベンジルＮ−アセチル−３，
４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−グルコサミニド（２
ｄ）をメタノールなどのアルコール系溶媒に溶解させ、
さらにナトリウムメトキシドなどのアルコキシドを加え
て反応させることを含む工程によって、ベンジルＮ−ア
セチル−β−グルコサミニド（２ｅ）を得ることができ
る。

【００２２】ベンジルＮ−アセチル−β−グルコサミニ
ド（２ｅ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下、
「ＤＭＦ」と略す）及びテトラヒドロフラン（以下、
「ＴＨＦ」と略す）の混合溶液に溶解し、ｐ−トルエン
スルホン酸及びα，α−ジメトキシトルエンを加えるこ
とを含む工程によって、ベンジルＮ−アセチル−４，６
−Ｏ−ベンジリデン−β−グルコサミニド（２ｆ）を得
ることができる。

【００２３】グルコース（２ｇ）をピリジンなどの有機
溶媒に分散させ、無水酢酸などのアセチル化剤と反応さ
せることを含む工程によって、グルコースペンタアセテ
ート（２ｈ）を得ることができる。グルコースペンタア
セテート（２ｈ）をクロロホルムなどの有機溶媒に溶解
し、ＨＢｒ酢酸溶液と反応させることを含む工程によっ
て、臭化２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−
グルコシル（２ｉ）を得ることができる。

【００２４】ベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−β−グルコサミニド（２ｆ）を塩化メチレン
などの有機溶媒中で、トリフルオロメタンスルホン酸
銀、１，１，３，３−テトラ−メチル−尿素、及び臭化
２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−グルコシ
ル（２ｉ）と反応させることを含む工程によって、ベン
ジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ
−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グル
コピラノシル）−β−グルコサミニド（２ｊ）を得るこ
とができる。

【００２５】パラジウム−カーボンをメタノールなどの
アルコール系溶媒に懸濁し、水素置換を行った後、ベン
ジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ
−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グル
コピラノシル）−β−グルコサミニド（２ｊ）及びＴＨ
Ｆを加えることを含む工程によって、Ｎ−アセチル−３
−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−
グルコピラノシル）−グルコサミン（２ｋ）を得ること
ができる。

【００２６】Ｎ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，４，６
−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）−グ
ルコサミン（２ｋ）を塩化アセチルと反応させることを
含む工程によって、塩化Ｎ−アセチル−４，６，２′，
３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−ラミナ
リビオサミシル（２ｌ）を得ることができる。

【００２７】塩化Ｎ−アセチル−４，６，２′，３′，
４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−ラミナリビオ
サミシル（２ｌ）をアセトニトリルなどの有機溶媒に溶
解し、塩化テトラエチルアンモニウムと炭酸水素ナトリ
ウムと反応させることを含む工程によって、２−メチル
−｛４，６−ジ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，
４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシ
ル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１
−ｄ〕−２−オキサゾリン（２ｍ）を得ることができ
る。

【００２８】２−メチル−｛４，６−ジ−Ｏ−アセチル
−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−
β−グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グル
コピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（２ｍ）
をメタノールなどのアルコール系溶媒に溶解し、ナトリ
ウムメトキシドなどのアルコキシドと反応させることを
含む工程によって、２−メチル−｛３−Ｏ−（β−グル
コピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラ
ノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（２）を得るこ
とができる。

【００２９】新規アミノ糖である２−メチル−｛３−Ｏ
−（β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α
−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン
（３）は、ベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジ
リデン−β−グルコサミニド（２ｆ）及びガラクトース
（３ａ）を出発原料として、反応式Ｃで示される経路に
より合成することができる。

【００３０】

【化１０】 ここで、ＡｃはＣＨ₃ ＣＯ、Ｐｙはピリジン、Ｅｔ₄ Ｎ
⁺ Ｃｌ^- は塩化テトラエチルアンモニウム、ＮａＯＭｅ
はナトリウムメトキシドを示す。

【００３１】ガラクトース（３ａ）をピリジンに分散さ
せ、無水酢酸などのアセチル化剤と反応させることを含
む工程によって、ガラクトースペンタアセテート（３
ｂ）を得ることができる。ガラクトースペンタアセテー
ト（３ｂ）をクロロホルムなどの有機溶媒に溶解し、Ｈ
Ｂｒ酢酸溶液と反応させることを含む工程によって、臭
化２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−ガラク
トシル（３ｃ）を得ることができる。

【００３２】ベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−β−グルコサミニド（２ｆ）とトリフルオロ
メタンスルホン酸銀をアルゴン置換し、塩化メチレンを
加え、さらに、臭化２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセ
チル−α−ガラクトシル（３ｃ）と反応させることを含
む工程によって、ベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−
ベンジリデン−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ
−アセチル−β−ガラクトピラノシル）−β−グルコサ
ミニド（３ｄ）を得ることができる。

【００３３】パラジウム−カーボンをメタノールなどの
有機溶媒に懸濁させ、水素置換を行った後、ベンジルＮ
−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−
（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガラク
トピラノシル）−β−グルコサミニド（３ｄ）と反応さ
せることを含む工程によって、Ｎ−アセチル−３−Ｏ−
（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガラク
トピラノシル）−グルコサミン（３ｅ）を得ることがで
きる。

【００３４】Ｎ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，４，６
−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガラクトピラノシル）−
グルコサミン（３ｅ）を塩化アセチルなどのアセチル化
剤と反応させることを含む工程によって、塩化４，６，
２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−
ラクト−Ｎ−ビオシルＩ（３ｆ）を得ることができる。
塩化４，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−ア
セチル−α−ラクト−Ｎ−ビオシルＩ（３ｆ）をアセト
ニトリルなどの有機溶媒に溶解し、塩化テトラエチルア
ンモニウム及び炭酸水素ナトリウムと反応させることを
含む工程によって、２−メチル−｛４，６−ジ−Ｏ−ア
セチル−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセ
チル−β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−
α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン
（３ｇ）を得ることができる。

【００３５】２−メチル−｛４，６−ジ−Ｏ−アセチル
−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−
β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グ
ルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（３
ｇ）をメタノールなどのアルコール系溶媒に溶解し、ナ
トリウムメトキシドなどのアルコキシドと反応させるこ
とを含む工程によって、２−メチル−｛３−Ｏ−（β−
ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコ
ピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（３）を得
ることができる。

【００３６】新規アミノ糖である２−メチル−｛４−Ｏ
−（β−グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−
グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン
（４）は、セロビオースオクタアセテート（４ａ）を出
発原料として、反応式Ｄで示される経路により合成する
ことができる。

【００３７】

【化１１】 ここで、ＡｃはＣＨ₃ ＣＯ、ＮａＯＭｅはナトリウムメ
トキシド、Ｅｔ₄ Ｎ⁺Ｃｌ^- は塩化テトラエチルアンモ
ニウムを示す。

【００３８】セロビオースオクタアセテート（４ａ）を
クロロホルムに溶解させ、ＨＢｒ酢酸溶液を反応させる
ことを含む工程によって、臭化２，３，６，２′，
３′，４′，６′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−α−セロビ
オシル（４ｂ）を得ることができる。酢酸ナトリウム１
水和物の酢酸溶液に粉末亜鉛を懸濁させた後、硫酸銅５
水和物と反応させ、さらに臭化２，３，６，２′，
３′，４′，６′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−α−セロビ
オシル（４ｂ）と反応させることを含む工程によって、
３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチ
ル−Ｄ−セロビアール（４ｃ）を得ることができる。

【００３９】３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ
−Ｏ−アセチル−Ｄ−セロビアール（４ｃ）の酢酸溶液
と亜硝酸イソペンチルの混合溶液と濃塩酸と酢酸の混合
溶液を反応させることを含む工程によって、塩化３，
６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−
２−デオキシ−２−ニトロシル−α−セロビオシル（４
ｄ）を得ることができる。パラジウム−カーボンをＴＨ
Ｆに懸濁させ、水素置換を行った後、塩化３，６，
２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−２−
デオキシ−２−ニトロシル−α−セロビオシル（４ｄ）
の塩化メチレン溶液と反応させることを含む工程によっ
て、塩化３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ
−アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−α−セロビオ
シル（４ｅ）を得ることができる。塩化３，６，２′，
３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−２−アミノ
−２−デオキシ−α−セロビオシル（４ｅ）のピリジン
などの有機溶媒に溶解し、無水酢酸と反応させることを
含む工程によって、Ｎ−アセチルセロビオサミンヘプタ
アセテート（４ｆ）を得ることができる。

【００４０】Ｎ−アセチルセロビオサミンヘプタアセテ
ート（４ｆ）をメタノールなどのアルコール系溶媒に溶
解し、ナトリウムメトキシドなどのアルコキシドと反応
させることを含む工程によって、Ｎ−アセチルセロビオ
サミン（４ｇ）を得ることができる。Ｎ−アセチルセロ
ビオサミン（４ｇ）を塩化アセチルと反応させることを
含む工程によって、塩化Ｎ−アセチル−３，６，２′，
３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−セロビ
オサミシル（４ｈ）を得ることができる。

【００４１】塩化Ｎ−アセチル−３，６，２′，３′，
４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−セロビオサミ
シル（４ｈ）をアセトニトリルなどの有機溶媒に溶解
し、塩化テトラアンモニウム及び炭酸水素ナトリウムと
反応させることを含む工程によって、２−メチル−
｛３，６−ジ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，
６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）
１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−
ｄ〕−２−オキサゾリン（４ｉ）を得ることができる。

【００４２】２−メチル−｛３，６−ジ−Ｏ−アセチル
−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−
β−グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グル
コピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（４ｉ）
をメタノールなどのアルコール系溶媒に溶解し、ナトリ
ウムメトキシドなどのアルコキシドと反応させることを
含む工程によって、２−メチル−｛４−Ｏ−（β−グル
コピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラ
ノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（４）を得るこ
とができる。

【００４３】新規アミノ糖である２−メチル−｛４−Ｏ
−（β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α
−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン
（５）は、ラクトース（５ａ）を出発原料として、反応
式Ｅで示される経路により合成することができる。

【００４４】

【化１２】

【００４５】

【化１３】 ここで、ＡｃはＣＨ₃ ＣＯ、Ｐｙはピリジン、ＮａＯＭ
ｅはナトリウムメトキシドを示す。

【００４６】ラクトース（５ａ）をピリジンなどの有機
溶媒に分散させ、無水酢酸などのアセチル化剤と反応さ
せることを含む工程によって、ラクトースオクタアセテ
ート（５ｂ）を得ることができる。ラクトースオクタア
セテート（５ｂ）をクロロホルムなどの有機溶媒に溶解
し、ＨＢｒ酢酸溶液と反応させることを含む工程によっ
て、臭化２，３，６，２′，３′，４′，６′−ヘプタ
−Ｏ−アセチル−α−ラクトシル（５ｃ）を得ることが
できる。

【００４７】酢酸ナトリウム１水和物の酢酸溶液に粉末
亜鉛を懸濁させた後、硫酸銅５水和物の水溶液を滴下
し、さらに、臭化２，３，６，２′，３′，４′，６′
−ヘプタ−Ｏ−アセチル−α−ラクトシル（５ｃ）と反
応させることを含む工程によって、３，６，２′，
３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−Ｄ−ラクタ
ール（５ｄ）を得ることができる。

【００４８】３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ
−Ｏ−アセチル−Ｄ−ラクタール（５ｄ）の酢酸と亜硝
酸イソペンチルの混合溶液に、濃塩酸と酢酸の混合溶液
を反応させることを含む工程によって、塩化３，６，
２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−２−
デオキシ−２−ニトロシル−α−ラクトシル（５ｅ）を
得ることができる。

【００４９】パラジウム−カーボンをアセトンなどの有
機溶媒に懸濁して水素置換を行った後、塩化３，６，
２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−２−
デオキシ−２−ニトロシル−α−ラクトシル（５ｅ）の
クロロホルム溶液と反応させることを含む工程によっ
て、塩化３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ
−アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−α−ラクトシ
ル（５ｆ）を得ることができる。

【００５０】塩化３，６，２′，３′，４′，６′−ヘ
キサ−Ｏ−アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−α−
ラクトシル（５ｆ）をピリジンなどの有機溶媒に溶解
し、無水酢酸などのアセチル化剤と反応させることを含
む工程によって、Ｎ−アセチルラクトサミンヘプタアセ
テート（５ｇ）を得ることができる。Ｎ−アセチルラク
トサミンヘプタアセテート（５ｇ）をメタノールなどの
アルコール系溶媒に溶解し、ナトリウムメトキシドなど
のアルコキシドと反応させることを含む工程によって、
Ｎ−アセチルラクトサミン誘導体（５ｈ）を得ることが
できる。Ｎ−アセチルラクトサミン誘導体（５ｈ）を塩
化アセチルと反応させることを含む工程によって、塩化
Ｎ−アセチル−３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキ
サ−Ｏ−アセチル−α−ラクトサミシル（５ｉ）を得る
ことができる。

【００５１】塩化Ｎ−アセチル−３，６，２′，３′，
４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−ラクトサミシ
ル（５ｉ）をアセトニトリルなどの有機溶媒に溶解し、
塩化テトラアンモニウムと炭酸水素ナトリウムと反応さ
せることを含む工程によって、２−メチル−｛３，６−
ジ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ
−Ｏ−アセチル−β−ガラクトピラノシル）１，２−ジ
デオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オ
キサゾリン（５ｊ）を得ることができる。

【００５２】２−メチル−｛３，６−ジ−Ｏ−アセチル
−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−
β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グ
ルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（５
ｊ）をメタノールなどのアルコール系溶媒に溶解し、ナ
トリウムメトキシドなどのアルコキシドと反応させるこ
とを含む工程によって、２−メチル−｛４−Ｏ−（β−
ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコ
ピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（５）を得
ることができる。

【００５３】また、上記した新規アミノ糖の１つであ
り、下記構造式で示される２−メチル−｛１，２−ジデ
オキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキ
サゾリン（１）を含む新規アミノ糖は、緩衝液中でキチ
ナーゼ等の酵素を作用させることにより酵素触媒重付加
反応しキトオリゴ糖又はその類似オリゴ糖が生成する。

【００５４】

【化１４】 ここで、ＭｅはＣＨ₃ を示す。

【００５５】ここで、酵素触媒重付加反応は、全く新し
い重合反応形式であり、２−メチル−｛１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（１）を例にとると、次のような反応機構で重合
が進むと考えられる。ただし、本発明の酵素触媒重付加
反応は、２−メチル−｛１，２−ジデオキシ−α−グル
コピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（１）の
重合のみに限定されるものではない。

【００５６】

【化１５】 ここで、ＡｃはＣＨ₃ ＣＯ、ｎは１以上の整数を示す。

【００５７】すなわち、２−メチル−｛１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（１）分子中のオキサゾリン環が触媒により開環
して、アミノ糖カチオン体（６）が生成し、さらにこの
アミノ糖カチオン体（６）が、２−メチル−｛１，２−
ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−
オキサゾリン（１）が加水分解して生成したＮ−アセチ
ルグルコサミン（１ａ）の４位の水酸基と反応して、ア
ミノ二糖を生成し、さらに別のアミノ糖カチオン体
（６）が、このアミノ二糖の非還元末端４位の水酸基と
反応してアミノ三糖を生成する過程をくり返し、最終的
にオキサゾリン環が加水分解により開環してオリゴ糖を
生成する。なお、緩衝液としては、クエン酸緩衝溶液、
リン酸緩衝溶液等の当業者に公知の好適なもの、触媒と
しては、バチルス由来のキチナーゼ等を例示することが
できる。

【００５８】

【実施例】以下、実施例に基づき、本発明を詳しく説明
する。

【００５９】実施例１ 上記反応式Ａに従って、２−メチル−｛１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（１）の製造方法を以下に示す。塩化３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−アセトアミ
ド−２−デオキシ−α−グルコピラノシル（１ｂ）の製
造 ５．０ｇ（２２．６mmol）のＮ−アセチルグルコサミン
（１ａ）に２０mlの塩化アセチルを加えて攪拌し、室温
で３日間反応させた。薄層クロマトグラフィー（以下、
「ＴＬＣ」と略す）により反応終了を確認した後、クロ
ロホルムで希釈し、冷水（×１）、飽和炭酸ナトリウム
水溶液（×２），更に冷水（×３）にてｐＨが中性にな
るまで分液操作を行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸
ナトリウムにより乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過に
より除去した。濾液をエバポレートにより濃縮し、更に
減圧乾燥することで５．９ｇの塩化３，４，６−トリ−
Ｏ−アセチル−２−アセトアミド−２−デオキシ−α−
グルコピラノシル（１ｂ）（１６．１mmol，７１％）を
得た。

【００６０】２−メチル−（３，４，６−トリ−Ｏ−ア
セチル−１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ）
〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（１ｃ）の製造 ５．９ｇ（１６．１mmol）の塩化３，４，６−トリ−Ｏ
−アセチル−２−アセトアミド−２−デオキシ−α−グ
ルコピラノシル（１ｂ）を４０mlのアセトニトリルに溶
かした溶液を３．０ｇ（１８．１mmol／ｌ）の塩化テト
ラエチルアンモニウムと３．０ｇ（３５．７mmol／ｌ）
の炭酸水素ナトリウムに加えて１時間反応させた。ＴＬ
Ｃにて反応終了を確認した後、ガラスフィルターＧ４で
固体を除き、濾液を濃縮してクロロホルムに溶かして分
液を行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムに
より乾燥した。濾過により硫酸ナトリウムを除いた後、
溶液を濃縮しシリカゲルカラムクロマトグラフ（ゲル;M
erck社製Sirica gel 60,粒径 0.040-0.063mm: 展開溶
媒；酢酸エチル／ヘキサン＝５／２）により精製し、
２．９ｇの２−メチル−（３，４，６−トリ−Ｏ−アセ
チル−１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ）〔２，
１−ｄ〕−２−オキサゾリン（１ｃ）（８．８mmol，５
５％）を得た。

【００６１】２−メチル−｛１，２−ジデオキシ−α−
グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン
（１）の製造 ２．０ｇ（６．０７mmol）の２−メチル−（３，４，６
−トリ−Ｏ−アセチル−１，２−ジデオキシ−α−グル
コピラノ）〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（１ｃ）
を７０mlの無水メタノールに溶解させた。さらに、２．
４ml（０．３０４Ｍ）のナトリウムメトキシドのメタノ
ール溶液を加えて、室温にて４５分間反応させた。ＴＬ
Ｃにより反応終了を確認した後、溶媒をエバポレートに
より除去してエーテルを用いて再結晶を行い、結晶を集
めることで３１８mgの２−メチル−｛１，２−ジデオキ
シ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾ
リン（１）（１．５６mmol，２５％）を得た。その ¹Ｈ
ＮＭＲ及び¹³ＣＮＭＲは次の通りであった。それぞれを
図１、図２に示す。

【００６２】 ¹ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ）：δ
６．０７｛１Ｈ，d, J_1,2 ＝7.28Hz, anomeric ¹Ｈ（Ｈ
−１），α｝，４．１２｛１Ｈ, dd, Ｈ−２｝，３．９
６｛１Ｈ, t,Ｈ−３｝，２．０４｛３Ｈ, s, methyl ¹
Ｈ of oxazoline ｝ ¹³ＣＮＭＲ（６２．９ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ） ：δ１６８．９
｛１Ｃ，２−¹³Ｃ ofoxazoline ｝，１０１．３（Ｃ−
１），７３．８（Ｃ−３），７２．５（Ｃ−５），６
９．５（Ｃ−４），６６．７（Ｃ−２），６２．５（Ｃ
−６），１３．８｛１Ｃ, methyl¹³Ｃ of oxazoline ｝

【００６３】実施例２ 上記反応式Ｂに従って、２−メチル−｛３−Ｏ−（β−
グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピ
ラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（２）の製造
方法を以下に示す。

【００６４】ベンジルＮ−アセチル−３，４，６−トリ
−Ｏ−アセチル−β−グルコサミニド（２ｄ）の製造 アルゴン雰囲気下、２９．１０ｇ（７．９３５×１０¹
mmol）の２−メチル−（３，４，６−トリ−Ｏ−アセチ
ル−１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ）〔２，１
−ｄ〕−２−オキサゾリン（１ｃ）のクロロホルム溶液
（１００ml）に１５０ml（１．４５０mol ，１８．３e
q. ）のベンジルアルコールと２．９１０ｇ（１．６９
０×１０¹ mol ，０．２１eq. ）の無水ｐ−トルエンス
ルホン酸を加えた。さらに、２．９ｇ（１０ｗｔ％）の
粉末モレキュラーシーブ３Ａを分散させ、６０℃で３時
間反応させた。セライト濾過によって粉末モレキュラー
シーブを除き、濾液をエバポレートした後、減圧蒸留に
よって濃縮した。残留物を過剰量のクロロホルムで希釈
し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を行った。
集めた有機溶媒層は、無水硫酸ナトリウムによって乾燥
した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾液
をエバポレートによって濃縮した後、熱エタノールを用
いて再結晶を行った。濾別して得られた白色結晶を冷エ
タノールによって洗浄し、減圧乾燥することで、１１．
５１６ｇのベンジルＮ−アセチル−３，４，６−トリ−
Ｏ−アセチル−β−グルコサミニド（２ｄ）（２．６３
３×１０ ¹ mmol，３３．１８％）を得た。

【００６５】ベンジルＮ−アセチル−β−グルコサミニ
ド（２ｅ）の製造 １１．５１６ｇ（２．６３３×１０¹ mmol）のベンジル
Ｎ−アセチル−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−
グルコサミニド（２ｄ）のメタノール溶液（２５０ml）
に３．２ml（０．７８７Ｍ）のナトリウムメトキシドの
メタノール溶液を加え、室温で２時間反応させた。ＴＬ
Ｃにより反応終了を確認した後、イオン交換樹脂Amberl
ite IR−120 （Ｈ⁺ ）を加えて攪拌し、反応溶液が中性
になったのをｐＨ試験紙で確認した後、濾過によりイオ
ン交換樹脂を取り除いた。濾液をエバポレートによって
濃縮し、さらに減圧乾燥することで、７．８８９ｇのベ
ンジルＮ−アセチル−β−グルコサミニド（２ｅ）
（２．５３４×１０¹ mmol，９６．２４％）を得た。

【００６６】ベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−β−グルコサミニド（２ｆ）の製造 アルゴン雰囲気下、７．８８９ｇ（２．５３４×１０¹
mmol）のベンジルＮ−アセチル−β−グルコサミニド
（２ｅ）を１００mlのＤＭＦと３００mlのＴＨＦの混合
溶液に溶解させ、０．８ｇ（４．６４６mmol，０．１８
eq. ）の無水ｐ−トルエンスルホン酸と、１０ml（６．
７×１０¹ mmol，２．６eq. ）のα，α−ジメトキシト
ルエンを加え、１５時間反応させた。ＴＬＣにより反応
終了を確認した後、１０mlのピリジンを加えることによ
り反応溶液を中和した後、エバポレートによって濃縮し
た。残留物を過剰量のクロロホルムで希釈し、ｐＨが中
性になるまで冷水にて分液操作を行った。集めた有機溶
媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾燥した後、硫酸ナ
トリウムを濾過によって分離した。濾液をエバポレート
して、減圧蒸留によって濃縮した後、熱エタノールを用
いて再結晶を行った。濾別して得られた白色結晶を冷エ
タノールによって洗浄し、減圧乾燥することで、９．２
５７ｇのベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリ
デン−β−グルコサミニド（２ｆ）（２．３１７×１０
¹ mmol，９１．４６％）を得た。

【００６７】グルコースペンタアセテート（２ｈ）の製
造 ３０．０４０ｇ（１．６６７×１０² mmol）のグルコー
ス（２ｇ）を１００mlのピリジンに分散させ、０℃にお
いて２００mlの無水酢酸を滴下し、室温で２４時間反応
させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、反応溶液
をエバポレートによって約３分の１に濃縮して、大量の
氷水中に滴下し、白色沈澱を生成させた。グラスフィル
ターＧ４による濾別によって沈澱を収集し、減圧乾燥す
ることで５９．５５７ｇのグルコースペンタアセテート
（２ｈ）（１．５２６×１０²mmol ，９１．５３％）を
得た。

【００６８】臭化２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチ
ル−α−グルコシル（２ｉ）の製造 ２０．３０２ｇ（５．２０１×１０¹mmol ）のグルコー
スペンタアセテート（２ｈ）のクロロホルム溶液（５０
ml）に、４０mlの３０％ＨＢｒ酢酸溶液を２０mlのクロ
ロホルムで希釈した混合溶液を０℃において滴下し、３
時間反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、
ｐＨが中性になるまで冷水を用いて分液操作を行った。
集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾燥し
た後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾液を
エバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥すること
で、２０．０３０ｇの臭化２，３，４，６−テトラ−Ｏ
−アセチル−α−グルコシル（２ｉ）（４．８７１×１
０¹ mmol，９３．６６％）を得た。

【００６９】ベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ア
セチル−β−グルコピラノシル）−β−グルコサミニド
（２ｊ）の製造 暗所にて、３．０７０ｇ（７．６８６mmol）のベンジル
Ｎ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−β−グルコ
サミニド（２ｆ）と９．３ｇ（３．６×１０¹mmol，
４．７eq. ）のトリフルオロメタンスルホン酸銀と０．
９３ｇ（銀触媒に対し１０ｗｔ％）の粉末モレキュラー
シーブ４Ａを１時間脱気した。その後、アルゴン置換を
行い、４００mlの塩化メチレンを加えて１時間攪拌し
た。６．５ml（５．４×１０¹ mmol，７．０eq. ）の
１，１，３，３−テトラ−メチル−尿素を加えた後、
９．３０２ｇ（２．２６２×１０¹ mmol，２．９eq. ）
の臭化２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−グ
ルコシル（２ｉ）の塩化メチレン溶液（５０ml）を−７
８℃にて滴下し、室温にて４０時間反応させた。ＴＬＣ
により反応終了を確認した後、セライト濾過によって銀
触媒及び、粉末モレキュラーシーブを除き、濾液をエバ
ポレートによって濃縮した。残留物を過剰量のクロロホ
ルムで希釈し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作
を行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによ
って乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離し
た。濾液をエバポレートによって濃縮した後、約８０ml
の熱エタノールに溶解させ、還流中に約２０mlのヘキサ
ンを加え再結晶を行った。濾別して得られた白色結晶を
冷エタノールによって洗浄し、減圧乾燥することで、
３．９１４ｇのベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベ
ンジリデン−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−
アセチル−β−グルコピラノシル）−β−グルコサミニ
ド（２ｊ）（５．３６４mmol，６９．７９％）を得た。

【００７０】Ｎ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，４，６
−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）−グ
ルコサミン（２ｋ）の製造 ６００mgのパラジウム−カーボン（１０％）を１０mlの
メタノールに懸濁させ、約３０秒間脱気し水素置換を行
った。この作業を１０回以上くり返した後、水素雰囲気
下、３．９１４ｇ（５．３６４mmol）のベンジルＮ−ア
セチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−（２，
３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノ
シル）−β−グルコサミニド（２ｊ）のメタノール（３
０ml）とＴＨＦ（３０ml）の混合溶液を加え、２日間反
応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、セライ
ト濾過によってパラジウム粉末を除き、濾液をエバポレ
ートによって濃縮し、さらに減圧乾燥することで、２．
９６３ｇのＮ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，４，６−
テトラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）−グル
コサミン（２ｋ）（５．３６４mmol，ｑｕａｎｔ．）を
得た。

【００７１】塩化Ｎ−アセチル−４，６，２′，３′，
４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−ラミナリビオ
サミシル（２ｌ）の製造 ２．９６３ｇ（５．３６４mmol）のＮ−アセチル−３−
Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グ
ルコピラノシル）−グルコサミン（２ｋ）に３０mlの塩
化アセチルと１０mlのクロロホルムを加え、室温で３日
間反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、過
剰量のクロロホルムで希釈し、冷水（×１）、飽和炭酸
ナトリウム水溶液（×１）、さらにｐＨが中性になるま
で冷水にて分液操作を行った。集めた有機溶媒層は無水
硫酸ナトリウムによって乾燥した後、硫酸ナトリウムを
濾過によって分離した。濾液をエバポレートによって濃
縮し、さらに減圧乾燥することで、３．７０４ｇの塩化
Ｎ−アセチル−４，６，２′，３′，４′，６′−ヘキ
サ−Ｏ−アセチル−α−ラミナリビオサミシル（２ｌ）
（５．３６４mmol，ｑｕａｎｔ．）を得た。

【００７２】２−メチル−｛４，６−ジ−Ｏ−アセチル
−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−
β−グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グル
コピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（２ｍ）
の製造 アルゴン雰囲気下、３．７０４ｇ（５．３６４mmol）の
塩化Ｎ−アセチル−４，６，２′，３′，４′，６′−
ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−ラミナリビオサミシル（２
ｌ）のアセトニトリル溶液（２５ml）に４８０mg（２．
８８６mmol，０．５４eq. ）の塩化テトラエチルアンモ
ニウムと４８５mg（５. ７６９mmol，１．１eq. ）の炭
酸水素ナトリウムを加え、６０℃にて３０分間反応させ
た。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、グラスフィル
ターＧ４による濾過で固形物を除き、濾液をエバポレー
トによって濃縮した。さらに、過剰量のクロロホルムで
希釈し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を行っ
た。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾
燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾
液をエバポレートによって濃縮し、残留物をシリカゲル
フラッシュカラムクロマトグラフィー（ゲル:Merck社
製、Silica gel 60 、粒径 0.040-0.063mm、展開溶媒：
酢酸エチル／ヘキサン＝１３／２）にて単離精製し、展
開後の溶液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧
乾燥することで、２．２３２ｇの２−メチル−｛４，６
−ジ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，４，６−テト
ラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）１，２−ジ
デオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オ
キサゾリン（２ｍ）（３．６１４mmol，６７．５８％）
を得た。

【００７３】２−メチル−｛３−Ｏ−（β−グルコピラ
ノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝
〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（２）の製造 ２．２３２ｇ（３．６１４mmol）の２−メチル−｛４，
６−ジ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，４，６−テ
トラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）１，２−
ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−
オキサゾリン（２ｍ）のメタノール溶液（５０ml）に
５．３ml（０．１５６Ｍ）のナトリウムメトキシドのメ
タノール溶液を加え、室温で４時間反応させた。ＴＬＣ
により反応終了を確認した後、イオン交換樹脂Amberlit
e IR−120 （Ｈ⁺ ）を加えて攪拌し、反応溶液が中性に
なったのをｐＨ試験紙で確認した後、濾過によりイオン
交換樹脂を取り除いた。濾液をエバポレートによって濃
縮し、さらに減圧乾燥することで、１．４１３ｇの２−
メチル−｛３−Ｏ−（β−グルコピラノシル）１，２−
ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−
オキサゾリン（２）（３．６１４mmol，ｑｕａｎｔ．）
を得た。その ¹ＨＮＭＲ及び¹³ＣＮＭＲは次の通りであ
った。それぞれを図３、図４に示す。

【００７４】 ¹ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ）：δ
６．１２｛１Ｈ，ｄ，Ｊ_1,2 ＝７．２８Ｈｚ，anomeric
proton （Ｈ−１）｝，４．６７｛１Ｈ，ｄ，
Ｊ₁ ′_,2′＝７．９５Ｈｚ，anomeric proton （Ｈ−
１′）｝，４. ３３｛１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−２｝，４．１７
｛１Ｈ，ｔ，Ｈ−３｝，２．０８｛３Ｈ，ｓ，methyl p
roton ofoxazoline｝ ¹³ＣＮＭＲ（６２．９ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ） ：δ１０１．１
（Ｃ−１），１０２．７（Ｃ−１′），６４．８（Ｃ−
２），７３．８（Ｃ−２′），８０．０（Ｃ−３），７
６．４（Ｃ−３′），６８．５（Ｃ−４），７０．５
（Ｃ−４′），７３．１（Ｃ−５），７６．９（Ｃ−
５′），６１．６（Ｃ−６），６２．４（Ｃ−６′），
１３．７｛methyl¹³Ｃ of oxazoline ｝，１６９．３
｛２−¹³Ｃ ofoxazoline （Ｏ−Ｃ＝Ｎ）｝

【００７５】実施例３ 上記反応式Ｃに従って、２−メチル−｛３−Ｏ−（β−
ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコ
ピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（３）の製
造方法を以下に示す。

【００７６】ガラクトースペンタアセテート（３ｂ）の
製造 ８．０３０ｇ（４．４５７×１０¹ mmol）のガラクトー
ス（３ａ）を３０mlのピリジンに分散させ、０℃におい
て６０mlの無水酢酸を滴下し、室温で３日間反応させ
た。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、反応溶液をエ
バポレートによって濃縮し、過剰量のクロロホルムで希
釈し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を行っ
た。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾
燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾
液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥する
ことで、１７．２１１ｇのガラクトースペンタアセテー
ト（３ｂ）（４．４０９×１０¹ mmol，９８．９３％）
を得た。

【００７７】臭化２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチ
ル−α−ガラクトシル（３ｃ）の製造 １７．２１１ｇ（４．４０９×１０¹ mmol）のガラクト
ースペンタアセテート（３ｂ）のクロロホルム溶液（５
０ml）に、１００mlの３０％ＨＢｒ酢酸溶液を０℃にお
いて滴下し、２時間反応させた。ＴＬＣにより反応終了
を確認した後、ｐＨが中性になるまで冷水を用いて分液
操作を行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウム
によって乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分
離した。濾液をエバポレートによって濃縮し、さらに減
圧乾燥することで、１７．８７４ｇの臭化２，３，４，
６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−ガラクトシル（３ｃ）
（４．３４７×１０¹ mmol，９８．５９％）を得た。

【００７８】ベンジルＮ−アセチル−４，６−Ｏ−ベン
ジリデン−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ア
セチル−β−ガラクトピラノシル）−β−グルコサミニ
ド（３ｄ）の製法 暗所にて、２．２６１ｇ（５．６６０mmol）のベンジル
Ｎ−アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−β−グルコ
サミニド（２ｆ）と１２．０ｇ（４．７×１０ ¹ mmol，
８．３eq. ）のトリフルオロメタンスルホン酸銀を１時
間脱気した後、アルゴン置換を行い、３５０mlの塩化メ
チレンを加え１時間攪拌した。１１．５ml（９．６×１
０¹ mmol，１７．０eq. ）の１，１，３，３−テトラ−
メチル−尿素を加えた後、１１．９８６ｇ（２．９１５
×１０¹ mmol，５．２eq. ）の臭化２，３，４，６−テ
トラ−Ｏ−アセチル−α−ガラクトシル（３ｃ）の塩化
メチレン溶液（５０ml）を−７８℃にて滴下し、室温に
て４０時間反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認し
た後、セライト濾過によって銀触媒を除き、濾液をエバ
ポレートによって濃縮した。残留物を過剰量のクロロホ
ルムで希釈し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作
を行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによ
って乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離し
た。濾液をエバポレートによって濃縮した後、残留物を
シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー( ゲ
ル:Merck社製、Silica gel 60 、粒径 0.063-0.200mm、
展開溶媒：酢酸エチル／ヘキサン＝３／２）にて単離精
製し、展開後の溶液をエバポレートによって濃縮し、さ
らに減圧乾燥することで、２．２７８ｇのベンジルＮ−
アセチル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−（２，
３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガラクトピラ
ノシル）−β−グルコサミニド（３ｄ）（３．１２２mm
ol，５５．１５％）を得た。

【００７９】Ｎ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，４，６
−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガラクトピラノシル）−
グルコサミン（３ｅ）の製造 ５００mgのパラジウム−カーボン（１０％）を１０mlの
メタノールに懸濁させ、約３０秒間脱気し水素置換を行
った。これを１０回以上くり返した後、水素雰囲気下、
２．２７８ｇ（３．１２２mmol）のベンジルＮ−アセチ
ル−４，６−Ｏ−ベンジリデン−３−Ｏ−（２，３，
４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガラクトピラノシ
ル）−β−グルコサミニド（３ｄ）のメタノール溶液
（３０ml）を加え、２日間反応させた。ＴＬＣにより反
応終了を確認した後、セライト濾過によってパラジウム
粉末を除き、濾液をエバポレートによって濃縮し、さら
に減圧乾燥することで、１．６９７ｇのＮ−アセチル−
３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β
−ガラクトピラノシル）−グルコサミン（３ｅ）（３．
０７７mmol，９８．５６％）を得た。

【００８０】塩化４，６，２′，３′，４′，６′−ヘ
キサ−Ｏ−アセチル−α−ラクト−Ｎ−ビオシルＩ（３
ｆ）の製造 １．６５８ｇ（３．００６mmol）のＮ−アセチル−３−
Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガ
ラクトピラノシル）−グルコサミン（３ｅ）に１３mlの
塩化アセチルを加え、室温で３日間反応させた。ＴＬＣ
により反応終了を確認した後、過剰量のクロロホルムで
希釈し、冷水（×１）、飽和炭酸ナトリウム水溶液（×
１）、さらにｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を
行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによっ
て乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離し
た。濾液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾
燥することで、２．０８４ｇの塩化４，６，２′，
３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−ラクト
−Ｎ−ビオシルＩ（３ｆ）（３．０７７mmol，ｑｕａｎ
ｔ．）を得た。

【００８１】２−メチル−｛４，６−ジ−Ｏ−アセチル
−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−
β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グ
ルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（３
ｇ）の製法 アルゴン雰囲気下、２．０８４ｇ（３．０７７mmol）の
塩化４，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−ア
セチル−α−ラクト−Ｎ−ビオシルＩ（３ｆ）のアセト
ニトリル溶液（１５ml）に２８０mg（１．６９２mmol，
０．５５eq. ）の塩化テトラエチルアンモニウムと２８
４mg（３．３８５mmol，１．１eq. ）の炭酸水素ナトリ
ウムを加え、６０℃にて３０分間反応させた。ＴＬＣに
より反応終了を確認した後、グラスフィルターＧ４によ
る濾過で固形物を除き、濾液をエバポレートによって濃
縮し、過剰量のクロロホルムで希釈し、ｐＨが中性にな
るまで冷水にて分液操作を行った。集めた有機溶媒層は
無水硫酸ナトリウムによって乾燥した後、硫酸ナトリウ
ムを濾過によって分離した。濾液をエバポレートによっ
て濃縮し、残留物をシリカゲルフラッシュカラムクロマ
トグラフィー（ゲル:Merck社製、Silica gel 60 、粒径
0.040-0.063mm、展開溶媒：酢酸エチル／ヘキサン＝１
３／２）にて単離精製し、展開後の溶液をエバポレート
によって濃縮し、さらに減圧乾燥することで、７８２mg
の２−メチル−｛４，６−ジ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−
（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガラク
トピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラ
ノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（３ｇ）（１．
２２７mmol，３９．８６％）を得た。

【００８２】２−メチル−｛３−Ｏ−（β−ガラクトピ
ラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝
〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（３）の製法 ７４８mg（１．１７３mmol) の２−メチル−｛４，６−
ジ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ
−Ｏ−アセチル−β−ガラクトピラノシル）１，２−ジ
デオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オ
キサゾリン（３ｇ）のメタノール溶液（２０ml）にナト
リウムメトキシドのメタノール溶液（０．１６１Ｍ，
２．０ml）を加え、室温で２時間反応させた。ＴＬＣに
より反応終了を確認した後、イオン交換樹脂Amberlite
IR−120 （Ｈ⁺ ）を加え攪拌し、反応溶液が中性になっ
たのをｐＨ試験紙で確認した後、濾過によりイオン交換
樹脂を取り除いた。濾液をエバポレートによって濃縮
し、さらに減圧乾燥することで、４８０mgの２−メチル
−｛３−Ｏ−（β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデ
オキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキ
サゾリン（３）（１．１７３mmol, ｑｕａｎｔ．）を得
た。その ¹ＨＮＭＲ及び¹³ＣＮＭＲは次の通りであっ
た。それぞれを図５、図６に示す。

【００８３】 ¹ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ）：δ
６．１０｛１Ｈ，ｄ，Ｊ_1,2 ＝７．２９Ｈｚ，anomeric
proton （Ｈ−１）｝，４．５８｛１Ｈ，ｄ，
Ｊ ₁′_,2′＝８．１０Ｈｚ，anomeric proton （Ｈ−
１′）｝，４．４３｛１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−２｝，４．３２
｛１Ｈ，ｔ，Ｈ−３｝，２．０８｛３Ｈ，ｓ，methyl p
roton ofoxazoline｝ ¹³ＣＮＭＲ（６２．９ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ） ：δ１０１．２
（Ｃ−１），１０３．３（Ｃ−１′），６４．９（Ｃ−
２），７３．１（Ｃ−２′），８０．０（Ｃ−３），７
３．４（Ｃ−３′），６８．６（Ｃ−４），６９．５
（Ｃ−４′），７１．５（Ｃ−５），７６．２（Ｃ−
５′），６１．９（Ｃ−６），６２．４（Ｃ−６′），
１３．９｛methyl¹³Ｃ of oxazoline ｝，１６９．５
｛２−¹³Ｃ ofoxazoline （Ｏ−Ｃ＝Ｎ）｝

【００８４】実施例４ 上記反応式Ｄに従って、２−メチル−｛４−Ｏ−（β−
グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピ
ラノ｝〔２，１−ｄ）−２−オキサゾリン（４）の製造
方法を以下に示す。

【００８５】臭化２，３，６，２′，３′，４′，６′
−ヘプタ−Ｏ−アセチル−α−セロビオシル（４ｂ）の
製造 ４９．６５ｇ（７．３１７×１０¹mmol ）のセロビオー
スオクタアセテート（４ａ）のクロロホルム溶液（２５
０ml) に、７５mlの３０％ＨＢｒ酢酸溶液を５０mlのク
ロロホルムで希釈した混合溶液を０℃において滴下し、
３時間反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した
後、ｐＨが中性になるまで冷水を用いて分液操作を行っ
た。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾
燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾
液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥する
ことで、４９．７０２ｇの臭化２，３，６，２′，
３′，４′，６′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−α−セロビ
オシル（４ｂ）（７．１０６×１０¹ mmol，９７．１２
％）を得た。

【００８６】３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ
−Ｏ−アセチル−Ｄ−セロビアール（４ｃ）の製造 ７０ｇ（６．９９６×１０² mmol，１０．５eq. ）の酢
酸ナトリウム１水和物の５０％酢酸溶液（１６５ml）に
４０ｇ（６．１１７×１０² mmol, ９．２eq．）の粉末
亜鉛を懸濁させ、５ｇ（２．００２×１０¹ mmol, ０．
３０eq．）の硫酸銅５水和物の水溶液（１０ml）を−５
℃において滴下した。気体の発生が収まり始めた頃に、
３７．３０２ｇ（６．６５５×１０¹ mmol）の臭化２，
３，６，２′，３′，４′，６′−ヘプタ−Ｏ−アセチ
ル−α−セロビオシル（４ｂ）の酢酸溶液（３５０ml）
を滴下し、−５℃において３時間反応させた。セライト
濾過によって粉末亜鉛を除き、過剰量のクロロホルムで
希釈し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を行っ
た。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾
燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾
液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥する
ことで、２５．９０３ｇの３，６，２′，３′，４′，
６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−Ｄ−セロビアール（４
ｃ）（４．６２１×１０¹ mmol, ８６．６６％）を得
た。

【００８７】塩化３，６，２′，３′，４′，６′−ヘ
キサ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−ニトロシル−
α−セロビオシル（４ｄ）の製造 ５．００ｇ（８．９２０mmol）の３，６，２′，３′，
４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−Ｄ−セロビアール
（４ｃ）の酢酸溶液（２０ml）と亜硝酸イソペンチル
（１０ml）の混合溶液に５mlの濃塩酸（１０Ｎ）と５ml
の酢酸の混合溶液を０℃において滴下し、１５分間反応
させた。十分に結晶が析出したらグラスフィルターＧ４
による濾過によって収集し、十分にエーテルで洗浄した
後、結晶をクロロホルムで溶解してｐＨが中性になるま
で冷水にて分液操作を行った。集めた有機溶媒層は無水
硫酸ナトリウムによって乾燥した後、硫酸ナトリウムを
濾過によって分離した。濾液をエバポレートによって濃
縮し、さらに減圧乾燥することで、２．４２４ｇの塩化
３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチ
ル−２−デオキシ−２−ニトロシル−α−セロビオシル
（４ｄ）（３．８７２mmol, ４３．４１％）を得た。

【００８８】Ｎ−アセチルセロビオサミンヘプタアセテ
ート（４ｆ）の製造 ６１１mgのパラジウム−カーボン（１０％）を１０mlの
ＴＨＦに懸濁させ、約３０秒間脱気し水素置換を行っ
た。この手順を１０回以上くり返した後、水素雰囲気
下、５．４４７ｇ（８．７０２mmol）の塩化３，６，
２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−２−
デオキシ−２−ニトロシル−α−セロビオシル（４ｄ）
の塩化メチレン溶液（８０ml）を加え、１週間反応させ
た。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、セライト濾過
によってパラジウム粉末を除き、濾液をエバポレートに
よって濃縮し、さらに減圧乾燥することで、塩化３，
６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−
２−アミノ−２−デオキシ−α−セロビオシル（４ｅ）
を得た。これはアノマー位が加水分解したものと混在し
ているので、このピリジン溶液（１０ml）に０℃におい
て２０mlの無水酢酸を滴下し、室温において１５時間反
応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、エバポ
レートによって濃縮し、過剰量のクロロホルムで希釈
し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を行った。
集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾燥し
た後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾液を
エバポレートによって濃縮し、残留物をシリカゲルフラ
ッシュカラムクロマトグラフィー（ゲル:Merck社製、Si
lica gel 60 、粒径 0.040-0.063mm、展開溶媒：酢酸エ
チル／ヘキサン＝４／１）にて単離精製し、展開後の溶
液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥する
ことで、２．０５０ｇのＮ−アセチルセロビオサミンヘ
プタアセテート（４ｆ）（３．０８０mmol, ３５．３９
％）を得た。

【００８９】Ｎ−アセチルセロビオサミン（４ｇ）の製
造 アルゴン雰囲気下、２．０５０ｇ（３．０８０mmol）の
Ｎ−アセチルセロビオサミンヘプタアセテート（４ｆ）
のメタノール溶液（１００ml）にナトリウムメトキシド
のメタノール溶液（０．２２６Ｍ，４．６３ml）を加
え、室温で２．５時間反応させた。ＴＬＣにより反応終
了を確認した後、イオン交換樹脂Amberlite IR−120(Ｈ
⁺ ）を加え攪拌し、反応溶液が中性になったのをｐＨ試
験紙で確認した後、濾過によりイオン交換樹脂を取り除
いた。濾液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧
乾燥することで１．０７８ｇのＮ−アセチルセロビオサ
ミン（４ｇ）（２．７９７mmol, ９０．８２％）を得
た。

【００９０】塩化Ｎ−アセチル−３，６，２′，３′，
４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−セロビオサミ
シル（４ｈ）の製造 １．０７８ｇ（２．７９７mmol）Ｎ−アセチルセロビオ
サミン（４ｇ）に１０mlの塩化アセチルと５mlのクロロ
ホルムを加え、室温で３日間反応させた。ＴＬＣにより
反応終了を確認した後、過剰量のクロロホルムで希釈
し、冷水（×１）、飽和炭酸ナトリウム水溶液（×
１）、さらにｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を
行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによっ
て乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離し
た。濾液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾
燥することで、１．７６４ｇの塩化Ｎ−アセチル−３，
６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−
α−セロビオサミシル（４ｈ）（２．７４８mmol, ９
８．２３％）を得た。

【００９１】２−メチル−｛３，６−ジ−Ｏ−アセチル
−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−
β−グルコピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グル
コピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（４ｉ）
の製造 アルゴン雰囲気下、１．０１５ｇ（１．５５２mmol）の
塩化Ｎ−アセチル−３，６，２′，３′，４′，６′−
ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−セロビオサミシル（４ｈ）
のアセトニトリル溶液（７．５ml）に１５０ｍｇ（９．
０５２×１０^-1mmol, ０．５８eq．）の塩化テトラエチ
ルアンモニウムと２００ｍｇ（１．７８６mmol, １．２
eq．）の炭酸水素ナトリウムを加え、６０℃にて４０分
間反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、グ
ラスフィルターＧ４による濾過で固形物を除き、濾液を
エバポレートによって濃縮した後、過剰量のクロロホル
ムで希釈し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を
行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによっ
て乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離し
た。濾液をエバポレートによって濃縮し、残留物をシリ
カゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ゲル:Mer
ck社製、Silica gel 60 、粒径 0.040-0.063mm、展開溶
媒：酢酸エチル／ヘキサン＝３／１）にて単離精製し、
展開後の溶液をエバポレートによって濃縮し、さらに減
圧乾燥することで、１５３ｍｇの２−メチル−｛３，６
−ジ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テト
ラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）１，２−ジ
デオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オ
キサゾリン（４ｉ）（２．４７３×１０^-1mmol, １５．
９３％）を得た。

【００９２】２−メチル−｛４−Ｏ−（β−グルコピラ
ノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝
〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（４）の製造 １５３ｍｇ（２．４７３×１０^-1mmol）の２−メチル−
｛３，６−ジ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，
６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）
１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−
ｄ〕−２−オキサゾリン（４ｉ）のメタノール溶液（１
０ml）にナトリウムメトキシドのメタノール溶液（０．
４７８×１０^-1Ｍ，２．６４ml）を加え、室温で２時間
反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、イオ
ン交換樹脂Amberlite IR−120 （Ｈ⁺）を加えて攪拌
し、反応溶液が中性になったのをｐＨ試験紙で確認した
後、濾過によりイオン交換樹脂を取り除いた。濾液をエ
バポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥すること
で、０．２６１ｇの２−メチル−｛４−Ｏ−（β−グル
コピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラ
ノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（４）（６．５
５８×１０^-1mmol, ｑｕａｎｔ．）を得た。その ¹ＨＮ
ＭＲ及び¹³ＣＮＭＲは次の通りであった。それぞれを図
７、図８に示す。

【００９３】 ¹ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ）：δ
６．０９｛１Ｈ，ｄ，Ｊ_1,2 ＝７．２５Ｈｚ，anomeric
proton （Ｈ−１）｝，４．４９｛１Ｈ，ｄ，Ｊ ₁′
_{, 2} ′＝７．７９Ｈｚ，anomeric proton （Ｈ−
１′）｝，４．２０｛１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−２｝，４．３９
｛１Ｈ，ｔ，Ｈ−３｝，２．０７｛３Ｈ，ｓ，methyl p
rotonof oxazoline｝ ¹³ＣＮＭＲ（６２．９ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ） ：δ１００．７
（Ｃ−１），１０４．８（Ｃ−１′），６６．２（Ｃ−
２），７４．０（Ｃ−２′），７１．８（Ｃ−３），７
６．５（Ｃ−３′），７９．４（Ｃ−４），７０．０
（Ｃ−４′），７０．４（Ｃ−５），７６．９（Ｃ−
５′），６１．５（Ｃ−６），６２．５（Ｃ−６′），
１３．８｛methyl¹³Ｃ of oxazoline ｝，１６９．０
｛２−¹³Ｃ ofoxazoline （Ｏ−Ｃ＝Ｎ）｝

【００９４】実施例５ 上記反応式Ｅに従って、２−メチル−｛４−Ｏ−（β−
ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコ
ピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（５）の製
造方法を以下に示す。

【００９５】ラクトースオクタアセテート（５ｂ）の製
造 ２５．０１ｇ（７．３０６×１０¹ mmol）のラクトース
（５ａ）を１００mlのピリジンに分散させ、０℃におい
て２００mlの無水酢酸を滴下し、室温で３日間反応させ
た。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、反応溶液をエ
バポレートによって濃縮し、過剰量のクロロホルムで希
釈し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を行っ
た。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾
燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾
液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥する
ことで、４９．９７１ｇのラクトースオクタアセテート
（５ｂ）（７．３０６×１０¹ mmol, ｑｕａｎｔ. ）を
得た。

【００９６】臭化２，３，６，２′，３′，４′，６′
−ヘプタ−Ｏ−アセチル−α−ラクトシル（５ｃ）の製
造 ２５．０９７ｇ（３．６９８×１０¹ mmol）のラクトー
スオクタアセテート（５ｂ）のクロロホルム溶液（１２
０ml）に、４０mlの３０％ＨＢｒ酢酸溶液を３０mlのク
ロロホルムで希釈した混合溶液を０℃において滴下し、
３時間反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した
後、ｐＨが中性になるまで冷水を用いて分液操作を行っ
た。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾
燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾
液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥する
ことで、２５．１６０ｇの臭化２，３，６，２′，
３′，４′，６′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−α−ラクト
シル（５ｃ）（３．５９７×１０ ¹ mmol, ９７．２６
％）を得た。

【００９７】３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ
−Ｏ−アセチル−Ｄ−ラクタール（５ｄ）の製造 ３４ｇ（３．３９８×１０²mmol,９．４eq．）の酢酸ナ
トリウム１水和物の５０％酢酸溶液（８３ml）に２５ｇ
（３．８２３×１０²mmol,１０．６eq．）の粉末亜鉛を
懸濁させ、２．５ｇ（１．００１×１０¹mmol,０．２８
eq．）の硫酸銅５水和物の水溶液（８ml）を−５℃にお
いて滴下した。気体の発生が収まり始めた頃に、２５．
１６０ｇ（３．５９７×１０¹ mmol）の臭化２，３，
６，２′，３′，４′，６′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−
α−ラクトシル（５ｃ）の酢酸溶液（１００ml）を滴下
し、−５℃において３時間反応させた。セライト濾過に
よって粉末亜鉛を除き、過剰量のクロロホルムで希釈
し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を行った。
集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾燥し
た後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾液を
エバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥すること
で、２０．１６１ｇの３，６，２′，３′，４′，６′
−ヘキサ−Ｏ−アセチル−Ｄ−ラクタール（５ｄ）
（３．５９７×１０¹mmol, ｑｕａｎｔ. ）を得た。

【００９８】塩化３，６，２′，３′，４′，６′−ヘ
キサ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−ニトロシル−
α−ラクトシル（５ｅ）の製造 ２０．１６１ｇ（３．５９７×１０¹ mmol）の３，６，
２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−Ｄ−
ラクタール（５ｄ）の酢酸溶液（１００ml）と４０mlの
亜硝酸イソペンチルの混合溶液に、２０mlの濃塩酸（１
０Ｎ）と２０mlの酢酸の混合溶液を０℃において滴下
し、１５分間反応させた。十分に結晶が析出したら、グ
ラスフィルターＧ４による濾過によって収集し、十分に
エーテルで洗浄した後、結晶をクロロホルムで溶解しｐ
Ｈが中性になるまで冷水にて分液操作を行った。集めた
有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾燥した後、
硫酸ナトリウムを濾過によって分離した。濾液をエバポ
レートによって濃縮し、さらに減圧乾燥することで、
９．３６６ｇの塩化３，６，２′，３′，４′，６′−
ヘキサ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−ニトロシル
−α−ラクトシル（５ｅ）（１．４９６×１０¹ mmol,
４１．６０％）を得た。

【００９９】Ｎ−アセチルラクトサミンヘプタアセテー
ト（５ｇ）の製造 １．５０３ｇのパラジウム−カーボン（１０％）を１０
０mlのアセトンに懸濁させ、約３０秒間脱気し水素置換
を行った。この手順を１０回以上くり返した後、水素雰
囲気下、９．１６６ｇ（１．４６４×１０¹ mmol）の塩
化３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセ
チル−２−デオキシ−２−ニトロシル−α−ラクトシル
（５ｅ）のクロロホルム溶液（３００ml）を加え、１週
間反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、セ
ライト濾過によってパラジウム粉末を除き、濾液をエバ
ポレートによって濃縮し、さらに減圧乾燥することで、
塩化３，６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−ア
セチル−２−アミノ−２−デオキシ−α−ラクトシル
（５ｆ）を得た。これはアノマー位が加水分解したもの
と混在しているので、このピリジン溶液（２５ml）に０
℃において５０mlの無水酢酸を滴下し、室温において１
５時間反応させた。ＴＬＣにより反応終了を確認した
後、エバポレートによって濃縮し、過剰量のクロロホル
ムで希釈し、ｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を
行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによっ
て乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離し
た。濾液をエバポレートによって濃縮し、残留物をシリ
カゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ゲル:Mer
ck社製、Silica gel 60 、粒径 0.063-0.200mm、展開溶
媒：酢酸エチル／ヘキサン＝１３／２）にて単離精製
し、展開後の溶液をエバポレートによって濃縮し、さら
に減圧乾燥することで、１．５７８ｇのＮ−アセチルラ
クトサミンヘプタアセテート（５ｇ）（２．４８３mmo
l, １６．６０％）を得た。

【０１００】塩化Ｎ−アセチル−３，６，２′，３′，
４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−ラクトサミシ
ル（５ｉ）の製造 アルゴン雰囲気下、１．３６６ｇ（２．０８９mmol）の
Ｎ−アセチルラクトサミンヘプタアセテート（５ｇ）の
メタノール溶液（２５ml）にナトリウムメトキシドのメ
タノール溶液（０．２８７Ｍ，０．９ml）を加え、０℃
で３０分間反応させた。ＴＬＣによりアノマー位の脱ア
セチル化の終了を確認した後、イオン交換樹脂Amberlit
e IR−120 （Ｈ⁺ ）を加えて攪拌し、反応溶液が中性に
なったのをｐＨ試験紙で確認した後、濾過によりイオン
交換樹脂を取り除いた。濾液をエバポレートによって濃
縮し、さらに減圧乾燥することで、脱アセチル化がある
程度進行した１．２６４ｇのＮ−アセチルラクトサミン
誘導体（５ｈ）を得た。このＮ−アセチルラクトサミン
誘導体（５ｈ）に２０mlの塩化アセチルと１０mlのクロ
ロホルムを加え、室温で３日間反応させた。ＴＬＣによ
り反応終了を確認した後、過剰量のクロロホルムで希釈
し、冷水（×１）、飽和炭酸ナトリウム水溶液（×
１）、さらにｐＨが中性になるまで冷水にて分液操作を
行った。集めた有機溶媒層は無水硫酸ナトリウムによっ
て乾燥した後、硫酸ナトリウムを濾過によって分離し
た。濾液をエバポレートによって濃縮し、さらに減圧乾
燥することで、１．４３７ｇの塩化Ｎ−アセチル−３，
６，２′，３′，４′，６′−ヘキサ−Ｏ−アセチル−
α−ラクトサミシル（５ｉ）（２．０８９mmol, ｑｕａ
ｎｔ.)を得た。

【０１０１】２−メチル−｛３，６−ジ−Ｏ−アセチル
−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−
β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グ
ルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（５
ｊ）の製造 アルゴン雰囲気下、１．４３７ｇ（２．０８９mmol）の
塩化Ｎ−アセチル−３，６，２′，３′，４′，６′−
ヘキサ−Ｏ−アセチル−α−ラクトサミシル（５ｉ）の
アセトニトリル溶液（１０ml）に２００mg（１．２０７
mmol, ０．５７eq. ）の塩化テトラエチルアンモニウム
と２００mg（２．３８１mmol, １. １eq.)の炭酸水素ナ
トリウムを加え、６０℃にて３０分間反応させた。ＴＬ
Ｃにより反応終了を確認した後、グラスフィルターＧ４
による濾過で固形物を除き、濾液をエバポレートによっ
て濃縮した後、過剰量のクロロホルムで希釈し、ｐＨが
中性になるまで冷水にて分液操作を行った。集めた有機
溶媒層は無水硫酸ナトリウムによって乾燥した後、硫酸
ナトリウムを濾過によって分離した。濾液をエバポレー
トによって濃縮し、残留物をシリカゲルフラッシュカラ
ムクロマトグラフィー（ゲル:Merck社製、Silica gel 6
0 、粒径 0.040-0.063mm、展開溶媒：酢酸エチル／ヘキ
サン＝４／１）にて単離精製し、展開後の溶液をエバポ
レートによって濃縮し、さらに減圧乾燥することで、４
０５mgの２−メチル−｛３，６−ジ−Ｏ−アセチル−４
−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−
ガラクトピラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコ
ピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（５ｊ）
（６．５５８×１０^-1mmol, ２９．８５％）を得た。

【０１０２】２−メチル−｛４−Ｏ−（β−ガラクトピ
ラノシル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ）
〔２，１−ｄ〕−２−オキサゾリン（５）の製造 ４０５mg（６．５５８×１０^-1mmol）の２−メチル−
｛３，６−ジ−Ｏ−アセチル−４−Ｏ−（２，３，４，
６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−ガラクトピラノシル）
１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−
ｄ〕−２−オキサゾリン（５ｊ）のメタノール溶液（１
０ml）にナトリウムメトキシドのメタノール溶液（０．
１９６Ｍ，０．５４ml）を加え、室温で２時間反応させ
た。ＴＬＣにより反応終了を確認した後、イオン交換樹
脂Amberlite IR−120 （Ｈ⁺ ）を加え攪拌し、反応溶液
が中性になったのをｐＨ試験紙で確認した後、濾過によ
りイオン交換樹脂を取り除いた。濾液をエバポレートに
よって濃縮し、さらに減圧乾燥することで、０．２６１
ｇの２−メチル−｛４−Ｏ−（β−ガラクトピラノシ
ル）１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１
−ｄ〕−２−オキサゾリン（５）（６．５５８×１０^-1
mmol, ｑｕａｎｔ. ）を得た。その ¹ＨＮＭＲ及び¹³Ｃ
ＮＭＲは次の通りであった。それぞれを図９、図１０に
示す。

【０１０３】 ¹ＨＮＭＲ（２５０ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ）：δ
６．０９｛１Ｈ，d, J_1,2 ＝７．３５Hz, anomericprot
on（Ｈ−１）｝，４．４２｛１Ｈ, d, J₁ ′_,2′＝８．
００Ｈｚ，anomericproton（Ｈ−１′）｝，４．１８
｛１Ｈ，dd, Ｈ−２｝，４．４６｛１Ｈ，ｔ，Ｈ−
３｝，２．０６｛３Ｈ，ｓ，methyl proton of oxazoli
ne｝ ¹³ＣＮＭＲ（６２．９ＭＨｚ，Ｄ₂ Ｏ）：δ１０
０．３（Ｃ−１），１０５．１（Ｃ−１′），６６．０
（Ｃ−２），７１．８（Ｃ−２′），７１．７（Ｃ−
３），７３．４（Ｃ−３′），７８．９（Ｃ−４），６
９．５（Ｃ−４′），７０．３（Ｃ−５），７６．１
（Ｃ−５′），６２．１（Ｃ−６），６２．４（Ｃ−
６′），１３．９｛methyl¹³Ｃ of oxazoline ｝，１６
９．０｛２−¹³Ｃ ofoxazoline（Ｏ−Ｃ＝Ｎ）｝

【０１０４】実施例６ ２．５mgのバチルス由来のキチナーゼを０．０１Ｍのク
エン酸緩衝溶液に溶解したものに、実施例１で得た２
４．４mg（０．１２mmol）の２−メチル−｛１，２−ジ
デオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オ
キサゾリン（１）を０．０１Ｍの上記緩衝溶液に溶解さ
せたものを加え、反応系における（１）の濃度を５．０
×１０^-2mol ／ｌとして重合反応を開始した。クエン酸
緩衝溶液のｐＨは、ｐＨ６、ｐＨ７、ｐＨ８とし、反応
時間は、表１の通りとした。４０℃で所定時間、反応を
行った後、反応液に過剰のＴＨＦを加え、１００℃で１
５分間、加熱することで酵素を失活させ、反応を停止さ
せた。反応溶液をエバポレートにより濃縮した後、さら
に減圧乾燥することで、有機溶媒を除いた。その後、高
性能液体クロマトグラフィーによる分取を行い、さらに
凍結乾燥することで、表１に示されるキトオリゴ糖を得
た。

【０１０５】

【表１】 ここで、下記構造式において、Ｇ１はｎ＝０、Ｇ２はｎ
＝１、Ｇ３はｎ＝２、Ｇ４はｎ＝３、Ｇ５はｎ＝４のも
のを表す。

【０１０６】

【化１６】

【０１０７】

【発明の効果】以上、詳細に説明したように、本発明に
よれば、キトオリゴ糖を得るために好適な新規のアミノ
糖が提供され、さらに該アミノ糖を酵素触媒中付加反応
させることによって、品質の安定したキトオリゴ糖及び
その類似オリゴ糖が提供される。本発明を実施すること
によって得られるキトオリゴ糖及びその類似オリゴ糖
は、医薬品やＤＤＳ材料のような生医学材料分野、及び
多孔性ビーズや界面活性剤のような化粧品分野への応用
が可能である。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１
−ｄ〕−２−オキサゾリン（１）の ¹ＨＮＭＲの結果を
示すグラフである。

【図２】図２は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛１，２−ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１
−ｄ〕−２−オキサゾリン（１）の¹³ＣＮＭＲの結果を
示すグラフである。

【図３】図３は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛３−Ｏ−（β−グルコピラノシル）１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（２）の ¹ＨＮＭＲの結果を示すグラフである。

【図４】図４は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛３−Ｏ−（β−グルコピラノシル）１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（２）の¹³ＣＮＭＲの結果を示すグラフである。

【図５】図５は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛３−Ｏ−（β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデ
オキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキ
サゾリン（３）の ¹ＨＮＭＲの結果を示すグラフであ
る。

【図６】図６は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛３−Ｏ−（β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデ
オキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキ
サゾリン（３）の¹³ＣＮＭＲの結果を示すグラフであ
る。

【図７】図７は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛４−Ｏ−（β−グルコピラノシル）１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（４）の ¹ＨＮＭＲの結果を示すグラフである。

【図８】図８は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛４−Ｏ−（β−グルコピラノシル）１，２−ジデオ
キシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキサ
ゾリン（４）の¹³ＣＮＭＲの結果を示すグラフである。

【図９】図９は、本発明によって得られた、２−メチル
−｛４−Ｏ−（β−ガラクトピラノシル）１，２−ジデ
オキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−オキ
サゾリン（５）の ¹ＨＮＭＲの結果を示すグラフであ
る。

【図１０】図１０は、本発明によって得られた、２−メ
チル−｛４−Ｏ−（β−ガラクトピラノシル）１，２−
ジデオキシ−α−グルコピラノ｝〔２，１−ｄ〕−２−
オキサゾリン（５）の¹³ＣＮＭＲの結果を示すグラフで
ある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 清貞 俊次 宮城県仙台市若林区若林２−６−４ レデ ィースミトミ406 (72)発明者 高田 江美子 神奈川県横浜市鶴見区尻手２−３−48 ひ まわりマンション302

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記一般式（Ｉ）又は（II）で示される
   新規アミノ糖。 【化１】 ここで、Ｒ¹ はＨ、β−グルコシル基、又はβ−ガラク
   トシル基を示し、ＭｅはＣＨ₃ を示す。 【化２】 ここで、Ｒ² はβ−グルコシル基、又はβ−ガラクトシ
   ル基を示し、ＭｅはＣＨ₃ を示す。
2. 【請求項２】 緩衝液中で、請求項１に記載のアミノ糖
   にキチナーゼを作用させ、該アミノ糖の酵素重付加反応
   によってキトオリゴ糖又はその類似オリゴ糖を得ること
   を特徴とするキトオリゴ糖又はその類似オリゴ糖の製造
   方法。
3. 【請求項３】 アミノ糖が下記構造式（III)で示される
   アミノ糖であることを特徴とする請求項２に記載のキト
   オリゴ糖の製造方法。 【化３】 ここで、ＭｅはＣＨ₃ を示す。