JPH08506825A

JPH08506825A - ヒスタミンとアミノ酸から得られるカップリング生成物

Info

Publication number: JPH08506825A
Application number: JP6518712A
Authority: JP
Inventors: バビザィエフ，マルク; スジュアン，マリー−クリスチーヌ
Original assignee: エクシモルソシエテアノニムモニガスク; バビザィエフ，マルク
Priority date: 1993-02-22
Filing date: 1994-02-21
Publication date: 1996-07-23
Anticipated expiration: 2018-02-04
Also published as: WO1994019325A1; GR3036979T3; RU2166510C2; EP0684944B1; DE69427814T2; FR2701948A1; MX9401347A; US5792784A; ES2161758T3; JP3373852B2; BR9406126A; DE69427814D1; EP0684944A1; FR2701948B1

Abstract

(57)【要約】本発明は、ヒスタミンまたはメチル置換ヒスタミンと、下記式（Ｉ）：（式中、Ａはアミン類、アミド類、ラクタム類、ウレタン類からなる群から選択される基を表し；Ｒ₁、Ｒ₁'、Ｒ₂、Ｒ₂'…Ｒ_n、Ｒ_n'は各々水素原子、炭化水素基または官能基を表し；ＹとＺは各々水素原子もしくはフッ素原子、または一つもしくは複数の官能基で置換されてもよい炭化水素基を表し；ｎは１以上の整数を表す）で表されるアミノ酸とをカップリングさせることによって得られ、ヒスタミンまたはメチル置換ヒスタミンとの共有結合が該アミノ酸のカルボキシル基とヒスタミンのアミノ基とのペプチド結合であるプソイドジペプチド化合物に関する。本発明のプソイドジペプチド化合物は、治療、化粧品および農業栄養の分野の用途、特に白内障の治療に用いることができる。

Description

【発明の詳細な説明】ヒスタミンとアミノ酸から得られるカップリング生成物本発明は、ヒスタミン由来の生成物に関し、さらに詳しくはヒスタミンもしくはメチル置換ヒスタミンとアミノ酸とのカップリング生成物、その製造方法、ならびに治療分野および美容学的分野での活性成分としてまたは治療分野、美容学的分野もしくは農業栄養分野（agro-alimentary field）に属する配合物の安定性を改善する試薬としての使用に関する。 β−アラニル−ヒスチジンのようなジペプチドの生物学的特性は、生体が防御しかつ修復する自然の方法を増強するのに寄与している場合、特に興味深い。それにもかかわらずβ−アラニル−ヒスチジンのようなその構造物中に１個以上のアミノ酸を含有する化合物は、生体が一般的に充分許容する一群の活性成分を形成しているが、これらの生成物は、生体によって迅速に分解されるのでその抗力は著しく低下する。さらに、酵素による失活に対する感受性は、非常に小さいペプチドの場合かなり低下するが（J.Dressman“Opportu-nities for peptide abs orption in the GI tract”Communication GTRV、1992年、フランス、パリ）、ジペプチドを酵素で失活させると、場合によってはヒスタミンが放出される。元のジペプチドの活性の喪失に関連するこのいわゆる「プロヒスタミン」活性は本発明の範囲内には含めない。それ故、本発明の主目的は、上記のジペプチドに近いが、その効力は生体によって劣化されないために低下しないペプチド生成物を最終的に得ることである。本発明の他の目的は、生体が自然に防御し修復するのを強化する特性を有するヒスタミン由来のプソイドペプチド生成物を製造することである。本発明のさらに他の目的は、アミノ末端をアセチル化すると生体内利用性が改善される、上記のようなプソイドペプチド生成物を製造することである。本発明のさらに他の目的は、上記のようなアセチル化された基を有し、その結果アセチルペプチドヒドロラーゼ型の酵素で加水分解することによってその場で活性生成物を放出できるペプチド生成物を製造することである。したがって、本発明は、ヒスタミンまたはメチル置換ヒスタミンと、下記式：（式中、Ａはアミノ、アミド、ラクタム、ウレタン基からなる群から選択される基を表し；Ｒ₁、Ｒ₁'、Ｒ₂、Ｒ₂'…Ｒ_n、Ｒ_n'は各々水素原子、または一つ以上の官能基で置換されてもよい一つ以上の炭化水素基で置換されてもよい炭化水素基を表し；ＹとＺは各々水素分子もしくはフッ素原子または一つ以上の官能基で置換してもよい炭化水素基を表し；およびｎは１以上の整数を表す）で表されるアミノ酸とをカップリングさせることによって得られ、ヒスタミンまたはメチル置換ヒスタミンとの共有結合が、該アミノ酸のカルボキシル気とヒスタミンのアミノ基とのペプチド結合であるプソイドジペプチド生成物に関する。本発明の他の目的は、アミノ酸とヒスタミンとのカップリングによって得られたカルボニル基の酸素原子が硫黄原子で置換されている前記目的で定義されたプソイドジペプチドである。本発明における前記式に対応するアミノ酸のうち、下記のアミノ酸類が最高の結果を与える。式：H₂N-CH₂-CH₂-COOHで表されるβ−アラニン；式：H₂N-CH₂-CH₂-CH₂-COOHで表されるγ−アミノ酪酸；酩酸；式：H₂N-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-COOHで表される５−アミノ吉草酸； −アミノプロピオン酸；式：H₂N-（CH₂）₇-COOHで表される６−アミノカプロン酸；式：H₂N-（CH₂）₇-COOHで表される８−アミノオクタン酸；式：CH₃-NH-CH₂-CH₂-CH₂-COOHで表される４−メチル−アミノ酩酸；酪酸；ミン酸；そのNH₂基をピログルタメート基に変えて得た下記式：で表されるアミノ酸、またはそのアミン末端がアシル化された下記アミノ酸である。実際に、この基をある種の酵素（アセチルペプチドヒドロラーゼ型）で加水分解すると、その場で活性生成物を放出させることができる。Ｎ−アセチル−β−アラニン：Ｎ−アセチル−３−フェニル−３−アミノプロピオン酸：さらに、下記のアシル化アミノ酸は、本発明のプソイドジペプチド生成物の活性を強化するある種の固有の抗酸化特性をもっている。それにもかかわらず、β−アラニンは、本発明の目的を完全に達成するプソイドジペプチド生成物を得ることができるアミノ酸である。β−アラニンは、下記式：または下記式：スタミンすなわち１−メチルイミダゾールエチルアミン；または下記式：スタミンすなわち３−メチル−イミダゾールエチルアミンとカップリングさせることができる。本発明の範囲内に含まれる好ましいプソイドジペプチド生成物は、下記式： β−アラニル−ヒスタミンである。本発明のプソイドジペプチド生成物は、化学的方法または全面的にもしくは部分的に酵素を用いる合成方法を利用して製造することができる。その化学的製造方法を下記図式で示す。この方法の第一ステップは、Ｘをカップリングさせることによってアミノ酸（ＡＡ）の窒素を保護し次いでＹをカップリングさせることによって酵素を活性化することで構成されている。窒素の保護は、該アミノ酸の水素原子を、アシル基、アシルオキシ基等でもよいＸ基で置換して実施することが好ましい。最も興味深い保護基として挙げることができるのはベンジルオキシカルボニル、tert−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、９−フルオレニル−メチル−オキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、ベンジル基類、フタロイル、２−ニトロフェニル−スルフェニル、トリフルオロ−アセチルであるが、tert−ブチルオキシカルボニルが好ましい。第一ステップは窒素保護を行わずに実施できるが、ｏ−活性化は本発明のブソイドジペプチド生成物を得る方法の特徴の一つである。この活性化は、シアノメチルアルコール、ｏ−ニトロフェノール、２，４，５−トリクロロフェノール、ｐ−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、ペンタフルオロフェノール、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、１−ヒドロキシピペリジンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ− キノリンからなる群から選択される化合物によって、アミノ酸のカルボン酸官能基をエステル化して実施することが好ましい。そしてＹをカップリングさせる場合にペンタフルオロフェニルを使用するとき、R-COOHが本発明のアミノ酸である場合、その反応は次のとおりである。本発明の製造方法の第二ステップは、ヒスタミンとのカップリング反応であり、この反応は、カップリング剤を使用もしくは使用せずに、該アミノ酸の窒素の保護および／または酸素の活性化を行って、好ましくはジ塩酸塩の形態のヒスタミンと反応させて行う。このカップリング剤はｏ−活性化アミノ酸に対しては必須なものではないことは述べておかねばならない。カップリング剤を用いないカップリング反応は、ある種の触媒条件下（例えばイミダゾール、Ｎ−エチルモルホリン等）にて、有機溶媒（例えばクロロホルム、１，２−ジメトキシエタン、ジメチルホルムアミド等）中の酸（例えば酢酸等）もしくは塩基（例えばトリエチルアミン）によって、または水性有機溶媒（例えばピリジン−水もしくは水−１，２−ジメトキシエタン等）中の塩基（例えば水酸化ナトリウムもしくは重炭酸ナトリウム等）および酸（例えば塩酸等）によって行われる。カップリング剤を用いる場合のカップリング剤としては次の化合物がある。例えば、ジシクロヘキシル−カルボジイミド、１−イソブチルオキシカルボニル− ２−イソブチルオキシ−１，２−ジヒドロキノリン、カルボニルジイミダゾール、ウッドワード試薬Ｋ、α−クロロビニルエチルエーテル、α，α−ジクロロジエチルエーテル、ジクロロメチルメチルエーテル、DＤＣと添加剤（ＤＤＣ−ペンタクロロフェノール、ＤＣＣ−ペンタフルオロフェノール）、シアナミド、ケテンイミン類とケテン類、オキサゾリウム塩類、ＥＥＤＱ（１−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキノリン）、エナミン類、アシルホスホニウム類、亜リン酸トリフェニルとイミダゾール、銅（II）錯体、SiCl₄等である。第三ステップにて、Ｘカップリング基すなわち窒素保護基を脱離させる。この脱離反応は、上記保護基について、水素化分解、液体アンモニア中でのナトリウム還元反応、加ヒドラジン分解、酸分解、加水分解または酵素法によって行う。好ましい方法は、この脱保護のステップを、酢酸中、塩酸によって酸分解によって行うことからなる方法である。この最後の場合、プソイドジペプチド生成物は塩酸塩の形態で得られるので、塩基生成物を回収するにはある種の塩基性樹脂で処理しなければならない。一例をあげると、β−アラニル−ヒスタミンは次の方法を用いて製造される。 370g（２mmol）のヒスタミン塩酸塩を７mlのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解する。その混合物に、0.56ml（４mmol）のトリエチルアミンと800mg（2.2 5mmol）のＮ−tert−ブチルオキシカルボニル−β−アラニル−ペンタフルオロフェニルエステルを添加する。得られた混合物を０℃で30分間、次に室温で３時間攬拌する。残渣を濾過し次いでジメチルホルムアミドで洗浄する。ジメチルホルムアミドを減圧蒸発させる。その残渣にエーテルを添加し、生成した油状化合物Ｎ−tert−ブチルオキシカルボニル−β−アラニル−ヒスタミンをデカンテーションで回収する。次にＮ−tert−ブチルオキシカルボニル−β−アラニル−ヒスタミンを、酢酸に溶解した塩酸で30分間処理することによってアラニル−ヒスタミン塩酸塩が得られる。その酢酸は一部を減圧蒸発させ、次いで残渣にいくらかのエーテルを再度添加する。次に残渣を濾過する。エタノール／メタノール系（50／50）−エチルエーテルで再結晶させることによって300mgのβ−アラニル −ヒスタミン塩酸塩が得られる。最後に、その塩酸塩型を適切な樹脂で溶離させることによって塩基型のβ−アラニル−ヒスタミンが得られる。酵素による合成は、アミノ酸（ＡＡ）の窒素を保護し（Ｘ基）次に酸素を活性化して（Ｙ基）から下記のカップリング反応を利用することによって行う。この場合、化学的製造方法ですでに述べた窒素保護によって反応媒体に対するアミノ酸の溶解度を上昇させることができる。この窒素保護は、有機媒体に対するアミノ酸の溶解度を増大するようＸカップリングを選択して実施できる。したがってＸとしてはベンジルオキシカルボニル基が好ましい。 X＝Ph-CH₂-O-CO- 酸素活性化は、脂肪族アルコール好ましくはエタノール、ハロゲノ−アルキルアルコール類例えば２，２，２−トリクロロ−エタノール、芳香族アルコール類例えばフェノール、ならびに化学的製造法ですでに挙げたアルコール類からなる群から選択されるアルコールで、カルボン酸基をエステル化することによって行うことができる。しかしtert−アルコール類は除外しなければならない。ヒスタミン（もしくはそのメチル化誘導体）またはヒスタミンの塩（もしくはそのメチル化誘導体）例えばヒスタミンの二塩酸塩とのカップリング反応は、各種の有機溶媒中で行われ、これらの溶媒としては、脂肪族炭化水素類（シクロヘキサン、ヘプタン等）もしくは芳香族化合物類（トルエン）、第三級アルコール類（tert−ブタノール、tert−アミルアルコール）、ハロゲン化アルキル類（塩化メチレン）、エーテル類（イソプロピルエーテル）、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドがある。これらの溶媒は単独でも混合しても用いることができ、また無水でもよくもしくは少量の水を含有していてもよい。この反応はトリエチルアミンのような塩基があってもなくても実施できる。酵素触媒は、微生物、動物もしくは植物が起源の加水分解酵素（リパーゼ）である。酵素は純粋な状態または非精製状態でもよい。したがって、微生物：シュードモナス属菌（Pseudo-monas sp.）、カンジダ・ルゴーサ（Candide rugosa）、ムコール属（Mucor）から抽出したリパーゼ類、または動物起源のリパーゼ：ブタ膵臓リパーゼ（ＬＰＰ）；プロテアーゼ類：トリプシン、ケモトリプシン、ズブチリシン、パパイン等を触媒として採用することができる。触媒は、反応媒体に不溶性であるが、単独で溶媒中に拡散させるかまたはそのリサイクルを容易にするため不活性担体上に固定する。反応は、４℃〜70℃の温度で行うが、攪拌しながら35℃〜45℃で行うことが好ましい。カップリング反応の生成物を、濾過によってまたは適切な溶媒で抽出した後に集める。脱保護と精製は、化学的製造法について先に述べた方法にしたがって実施することができる。しかし、この脱保護のステップは下記図式にしたがって酵素反応によって実施することができる。この手順は前記カップリングステップについて記載した手順に類似している。しかしＲ＝Ｈの場合、この反応は水中で行う。このカップリング法は、余り好ましい解決法ではないと考えられる。しかし窒素は保護されていないが（Ｘ＝Ｈ）、Ｏ活性化がなされているアミノ酸、または窒素は保護されているが、Ｏ活性化がなされていない（Ｙ＝Ｈ）アミノ酸、またはアミノ酸自体（Ｘ＝Ｙ＝Ｈ）さえ用いる場合、製造コストを顕著に低下させることができる。その実験条件は、アミノ酸が窒素を保護されかつＯ活性化がなされている場合について先に記載した条件に類似している。次の実施例では、Ｎ−アセチル−β−アラニル−ヒスタミンが以下のようにして製造される。 2.38g（15mmol）のＮ−アセチル−β−アラニンエチルエステルおよび1.11g（ 10mmol）のヒスタミンを、40mlのtert−アルコール−ヘプタン（25：75）混合物に溶解する。 0.5gのリパーゼAmano P（シュードモナス属）を添加し、得られた懸濁液を攪拌しながら４℃で48時間加熱する。ヒスタミンが完全に消失したことはＨＰＬＣ（R.P.C.-18-H₂O-CH₃CN-TFA:99/1 /0.1）で確認する。次に触媒を濾過によって回収する。有機溶媒を減圧蒸発させて油状化合物が得られる。この残留物をエチルエーテル中でくだいて過剰のＮ−アセチル−β−アラニルエチルエステルを除く。その結果1.9gのＮ−アセチル−β−アラニル−ヒスタミンが得られる。薬理学的性質すでに述べたように、本発明のプソイドジペプチド化合物は、生体の防御と修復のいくつかの機構を強化することができる。また本発明のプソイドジペプチド化合物は組織（目、筋肉、皮膚などの組織）の老化と変性に対抗する方式で戦い、治癒を促進する。これら化合物の抗酸化特性、一層正確にいえばこれら生成物の、遊離基（F.R. ）捕捉剤の特性および生体に対し有毒な過酸化物を消失させる性能は、観察される薬理特性を部分的に説明している。酸化的ストレスと戦い、したがって生体の抗酸化防御システムを形成する性能を有しているので、これら化合物は、各種の病因を阻害することができる。またこれら化合物の、抗炎症作用、放射線治療時の放射線に対する防護を行う場合の役割、抗アテローム動脈硬化特性（ＬＤＬの酸化の阻害）、抗白内障特性または抗腫瘍特性を挙げることができる。なおこれら特性については科学文献に報告されている。すでに述べたように、本発明のプソイドジペプチド化合物は、皮膚組織および粘膜組織の抗老化および抗変性の特性を示す。一般にこれらの特性は、これら化合物の抗酸化活性、特にこれら化合物が示す抗遊離基活性、プソイドペルオキシダーゼ、抗しわ性、および組成の再生性に起因している。さらに、多数の実験による分析と疫学的論拠は、遊離基が起こす生化学的損傷が蓄積すると重大な老化を起こすという理論を支持する有力な論拠になっている。酸素によって遊離基の種が生成する原因になっている太陽光線に対する暴露は、いわゆる老年性白内障を起こす主要因であるように早期皮膚老化の原因であることは、特に明らかである。実際に、細胞の成分は大部分が遊離基の攻撃に対する有力な標的である。膜のリン脂質の一部分を構成している不飽和脂肪酸は遊離基の侵襲に対して特に敏感である。これらの脂肪酸が酸化すると、膜が破壊され、細胞内成分が損失し、（毒性の）アルデヒド類が生成して、リポタンパク質複合体（リポフスチン）になる。タンパク質も遊離基の標的であり、遊離基に攻撃されるとタンパク質は変性されて切断される。遊離基による結合組織の損傷はその破壊作用の重要な部分である。糖含有成分も攻撃されて、ヒアルロン酸が解重合され、糖タンパク質の膜受容体が損傷を受ける。最後に、核酸は大きい機能を有する標的である。 “酸化的ストレス”に対してタンパク質を保護する、本発明のプソイドジペプチド化合物の他の特徴は、ヒスタミンのイミダゾール環が存在していることである。実際に、タンパク質の損傷の原因である酸化現象には、アミノ酸のヒスチジンのイミダゾール環が特に関連しているようである（引用文献：“Hydroxyl rad ical mediated damage to proteins with special reference to the cristalli ns”，Biochemistry，31巻、4296頁、1992年）。このことは、本発明の化合物が遊離基に対する“餌”の役割を演じることができることを示している。本発明のプソイドジペプチド化合物は、他のレベルで、“酸化的ストレス”に対して抵抗することができる。これらの化合物は、遊離基の種に反応できるだけでなく、上記酸化現象の後に、ある種の細胞成分に対する遊離基の反応によって放出される毒性副産物の過酸化物類に対して反応できる。生体内で過酸化物類を除く働きをする酵素に与えられた名前から類推して“ペルオキシダーゼ”と命名されたこの活性体は、これらの過酸化物類を中和して連鎖反応を防止することができる。なおこの連鎖反応によって特に細胞膜が破られる。このようにして修復活性が得られる。誘発された各種の抗酸化特性を明らかにするため生体外試験をいくつか実施した。 Biochemistry Journal，224巻、761-767頁、1984年にJ.M.C．Gutteridgeが報告した試験法は次のとおりである。酸化基質：デオキシリボーススーパーオキシドアニオンの産生系：キサンチンオキシダーゼ／ヒポキサンチン検出：チオバルビツル酸／マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）またこの活性体は、膜のリン脂質を防御する作用を有している。酸素によって生成した遊離基はリン脂質と反応して、細胞膜を弱くして破れさせる不安定な生成物を生成する。下記の試験はこの作用を示す。手順１酸化基質：ホスファチジルコリンリポソーム遊離基生成系：Ｆｅ／アスコルビン酸検出：チオバルビツル酸（ＴＢＡ）／マロンジアルデヒド（ＭＤＡ） “Anti-Oxidant activity of L-carnosine，a natural histidine-containing dipeptide in cristallin lens”，Biochem．Biophys．Acta，1004巻、363-371 頁、1989年に記載されているプロトコル手順２酸化基質：リノール酸（0.25mg／ml）遊離基生成系：Ｆｅ／アルコルビン酸検出：チオバルビツル酸（ＴＢＡ）／マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）本発明のプソイドジペプチド化合物のペルオキシダーゼ型活性は、酸素由来遊離基による膜脂質攻撃で生成する過酸化物型L-OOHを還元することから生じる。細胞膜の破壊をもたらすこれらの過酸化された形態は分解させることができる。この作用機構は上記のように抗遊離基活性に対し相補的なものであり、生物学的膜に進行している分解を特に有効に不活性化することができる。この反応は、過酸化水素に対して作用するある種の酵素（カタラーゼ類、グルタチオン−ペルオキシダーゼ）から類推して“ペルオキシダーゼ活性”と呼称する。 β−アラニル−ヒスタミンのような本発明のプソイドジペプチド化合物は、下記のように過酸化物を還元することによって、 L-OOH -------→ L-OH 下記の反応： L-OOH ------→ 分解生成物（テトラジエン類、セトジエン類）を阻害する。リノール酸の13−モノ過酸化物またはホスファチジルコリンのヒドロペルオキシドのような過酸化化合物で実施したある種の試験は、本発明のプソイドジペプチド化合物であるβ−アラニル−ヒスタミンが、β−アラニル−ヒスチジンまたはカルノシンと同等のしかたで挙動することを示す。この生成物の生物学的還元挙動は、上記分解反応を同一のしかたで阻害する化学的還元剤ホウ水素化ナトリウムと同等であった。下記の試験はこの活性を示す。手順１脂質過酸化物の発生を下記の三つの方法で監視する。 1ⁿ）233nmの波長光による分光分析による測定。ｅ＝2.8 10⁴M^-1cm^-1 （O.S.Privett，C.Nickell，W.O.Lundberg，およびP.D.Bayer，dans J.Am．Oil Chem．Soc.，32巻、505-511頁、1955年） 2ⁿ）ヨウ素滴定法：M.Hicks'とJ.H.Gebicki's法、Analytical Biochemistry，99 巻、249-253頁、1979年。 3ⁿ）シリカゲルプレートによるクロマトグラフィー（ヘキサン／エーテル／酢酸、8/7／0.1）手順２ “ペルオキシダーゼ”型活性も“リポソーム”モデルで評価した。ホスファチジルコリンヒドロペルオキシド（PC-OOH）を、リノール酸モノペルオキシドについてすでに述べたのと類似の方法で製造した。過酸化物の種を還元した後、Hicks M.およびGebicki J.M.-Anal．Biochem，99 巻、249-253頁、1979年に記載の方法にしたがって残りの過酸化物を定量する。上記試験結果を見ると、場合によっては、Ｌ−カルノシンの方がβ−アラニル −ヒスタミンより優れた結果を示すことが分かる。一方、皮膚レベルでの、Ｌ− カルノシンの酵素による不活性化は、生体内での優れた結果を望めない。本発明のプソイドジペプチドは、その“抗リポフスチン”作用によって、“酸化的ストレス”現象よりずっと後に反応することができる。本発明の発明者らはこのことをすでに知っていた。脂肪酸、特にリン脂質が過酸化されると破壊される。破壊によるこれらの副産物は毒性でありタンパク質の網状化を誘発する。その自然に生成する着色したリポタンパク質複合体は“リポフスチン”と呼称される。遊離基によって脂肪酸を過酸化すると、これらの酸が破壊されるだけでなく、 “架橋ポリマー”を生成してタンパク質を不活性化する。まず酵素を選択してなされ同時に細胞小器官に対してなされうるこのプロセスは、老化プロセスで一つの役割を演じていると考えられる。ポリ不飽和脂肪酸とタンパク質の架橋結合によって生成するこれらポリマーはリポフスチンと呼ばれている。生体の自然防御を強化するため創製した本発明のプソイドジペプチド類は、リポタンパク質複合体が生成するのを少なくすることによって上記プロセスによるタンパク質の劣化を顕著に制限することができる。本発明のこれらプソイドジペプチド化合物の他の作用方式は、それらの抗グリケーション特性、すなわちタンパク質のアミノ部分と還元糖類の特にグルコースとの自発縮合を阻害する性能に基づいている。続いて起こる一連の連続化学反応が、メイラード反応という名称で、食品加工業界の化学者に最近の10年間にわたって知られている。この反応によって、タンパク質間の付可逆性の結合が蓄積され、その数は年齢とともに増加する。この反応によって、コラーゲンまたはエラスチンのようなタンパク質間の“架橋結合” が生成して（引用文献：K.Reiser，R.J．McCormickおよびR.B.Rucker，“Enzyma tic and nonenzymatic cross-linking of collagen and elastin”-FASEB Journ al，６巻、2439-3449頁、1992年）、その結果、組織が硬直し（stiffening）“ 硬化（rigidification）”するが、これは老化組織の特徴的な現象である。この現象はとりわけ、長寿命のタンパク質（水晶体、コラーゲン、ミエリンのタンパク質）に関連があり、また“糖尿病性白内障”の原因になっている。そしてこの種の人の場合、網状化タンパク質の生成が強く加速される。抗グリケーション性は、本発明のプソイドジペプチド化合物がアミノ化された求核性化合物であって、タンパク質が糖の作用で網状化するのに対抗し、メイラード反応の中間体のレベルで阻害することが原因である（上記参照）。本発明の化合物の中で、この特性を与えるのは立体的にあまり妨害されていない求核性アミンである。最後に、本発明のプソイドジペプチド化合物の、治癒プロセスで細胞を再生させる活性について述べる。実際に、その治癒プロセスは三つの相で構成されている。すなわち血管と炎症の相；線維芽細胞の増殖とコラーゲンの新合成（neosyn thesis）が起こる増殖相、およびコラーゲン分解（collagenolysis）と生合成の間の平衡状態に到達する再モデリングの相である。このプロセスでは、本発明のプソイドジペプチドは、組織の再製に関与する細胞の瘢痕部位に到達する化学走性剤（chemiotactic）または活性化剤として作用する。本発明のプソイドジペプチド化合物のβ−アラニル−ヒスタミンの、皮膚結合組織を修復する活性を示す試験をラットで実施した。この試験は12頭の一群の Wistarラットについて実施した。全体として深さが表皮と真皮まで達し長さが12 mmの切開手術を行った。治癒過程の最終段階で３週間、ラットの局所にβ−アラニル−ヒスタミンを塗布して治療した。同時に12頭ラットの対照群は、同じ試験期間中、プラシーボで治療した。３週間の試験の後、瘢痕組織の組織学的サンプリングを行ったところ、皮膚表面の瘢痕はわずかになるかまたは目視できないことが分かった。表皮は充分に回復している。角質層は周囲の正常な表皮のそれと同一である。これら角質層は、対照の動物かまたは治療された動物とみなすかによって各種の態様を示す。治癒途中の真皮領域は、表皮から筋肉層まで広がる比較的幅が狭い帯状体のようにみえる。傷付けられていない領域との境界線は明瞭であり、遷移の態様は全くない。結合組織の構成部分の密度と態様は、毛細血管層および深部層と明らかに同じである。一方細くて弾性があるすなわち網繊維の数は一般に真皮の表層が多い。トルイジンブルーで着色することによって〔酸性pHにおける異染色性とリスベルク法（Lissberg'stechnique）〕で示されるように、基本的な物質は正常部分より豊富である。一方、対照群のラットは、表皮が、正常表皮より厚く膨潤している瘢痕を有している。その瘢痕領域全体にわたって、線維芽細胞と新生血管の過形成がみとめられる。その外、線維芽細胞は、一時的に肥厚する。まれに太いコラーゲンバンドルが認められることがあるが、バンドルの大部分は短くかつ平均の太さである。他の作用方式によって、本発明のプソイドジペプチド化合物は、治癒の早期段階で関与しかつ主な役割が成長因子を分泌することである、免疫系の細胞（リンパ球、肥満細胞、単球）に作用することによって治癒を促進する。この免疫剌激活性を、マウス脾細胞で生体外試験を行うことによって示す。その手順は、J.Kunert-Radek，H.Stepien，K.LysonおよびM.Pawlikowski-“Effect of calcium channel modulators on the proliferation of mouse spleen lymp hocytes in vitro”-Agent and Actions，29巻、３〜４号、254-258頁、1990年から引用した。細胞を増殖させてから、トリチウム化チミジンの細胞内への組込みの程度を測定し、バックグランドから差引いて毎分当り発生する壊変の数で示した。対照の免疫剌激剤のコンタナバリンＡで得た結果を比較対象として示す。免疫剌激作用は剌激指数（Index of Stimulation）（ＩＳ）で示す。ＩＳ＝マイトジェン化合物を添加した細胞懸濁液の毎分当り発生する壊変の数／マイトジェン化合物なしの対照の細胞懸濁液の毎分当り発生する壊変の数示した値は三つの測定値の平均値である。実際には、β−アラニル−ヒスタミンの濃度が25μg/mlの場合に最高の免疫剌激作用がみとめられる。要するに、このプソイドジペプチドは、5〜25μg/mlの範囲内の濃度で妥当な免疫剌激作用（細胞増殖）が認められる。この活性は対照のマイトジェンのコンカナバリンＡと同等である。本発明のプソイドジペプチド化合物は、特にアナフラキシ−ショックを遮断して免疫応答の調節活性を示すことによって、アレルギー反応に対する生体の保護に関与することができる。またこの種の化合物は、水腫生成に対するエフェクターのブラジキニンに対する拮抗作用によって、水腫に関与している血管の透過性を制限することがある（引用文献：K.Nagai；編集“Studies of carnosine and related chemicals on t he physiology of wound repair mechanism”、24〜26頁、1976年、東京）。それはこの群の潜在的な抗ヒスタミン特性でありこの群はこの特性で一つの役割を演じている。治療および化粧品学上の使用先に述べたすべての特性は、その必須の特徴が生体の自然に行う防御と修復を強化することに関与することであるが、本発明のプソイドジペプチドに対してかなりの治療および化粧品学上の使用をもたらす。本発明のプソイドジペプチドは抗酸化特性を有しているので、これらの生成物を、“酸化的ストレス”が原因の病変の治療に提案することができる。重要治療上の使用は白内障の治療に用いることである。白内障は種々の原因によって起こる。これらの病変に関与する機構は、“老年性白内障”型または“糖尿病性白内障”型であるかによって次の二つの範疇に集約される。すなわち酸化の機構（M.A．Babizhayev，A.I．Deyev，L.F．Lindberg，“Lipid peroxidation as a possible cause of cataract”，Mechanisms of Ageing Dev.，44巻、69- 89頁、1988年）およびグリケーション型網状化の機構（T.J．Lyons，G.Silvestr i，J.A．Dunn，D.G．Dyer，J.W．Baynes，“Role of glycation of lens cystal ins in diabetic and nondiabetic senile cataracts”，Diabetes，40巻、８号、1010-1015頁、1991年）である。すでに述べたように、本発明のプソイドジペプチドは、特にその抗遊離活性と “ペルオキシダーゼ”型およびその抗グリケーション活性で分っている抗酸化特性によって、白内障を治療するのに有効な物質である。本発明のプソイドジペプチドは、アテローム性動脈硬化症に関与する酸化現象に対して抵抗できる。この病変では、血流中に流動している低比重リポタンパク質粒子（ＬＤＬ）の酸化は、これら粒子の脂質部分に対する酸化なので、粒子のタンパク質部分（アポタンパク質Ｂ）の分解に関与している。生成した断片によって、血管壁上に凝集してアテロームのプラークを生成しうる異常な細胞群（コレステロール中に組み込まれた単球とマクロファージ）の発生が誘発される。さらに、グリケーション現象もアテロームプラークの生成に関与していることが最近立証されたので（引用文献：T.J．Lyons-“Glycation and Oxidation-Aro le in the pathogenesis of Atherosclerosis“-American Journal of Cardiolo gy，71巻、６号、1326-1331頁、1933年）、本発明のプソイドジペプチド化合物は上記疾患を治療するのに特に適合している。また本発明のプソイドジペプチド化合物は、酸素由来のラジカル種がＤＮＡ鎖の切断または変化に関与していることが立証されたので、癌発生のプロセスに抵抗することができる。なおこれらの変化によって健康な細胞が腫瘍細胞になり始める。同様本発明のプソイドジペプチド化合物は、その抗酸化特性によって、病変炎症状態の治療、特にリウマチ性関節炎の治療に用いることができる。実際に、滑液の劣化は炎症型の関節炎の特徴的な症状であり、その必須成分の一つであるヒアルロン酸の劣化は“酸化的ストレス”が原因であることが分かった。ごく最近の研究にも（引用文献：B.HalliwellおよびJ.M.C．Gutteridge-“chronic infla mmation and the autoimmune disease“-Free radicals in Biology and Medeci ne-B.HalliwellおよびJ.M.C.Gutteridge編集-Clarenton Press，オックスフォード、1989年、422-438頁）、このプロセスに関与する脂質の過酸化現象が記載され、本発明の化合物の有益な作用が説明されている。また本発明のプソイドジペプチド化合物の抗酸化特性は、放射線治療法の補助剤としても使用できる。この放射線防護作用は、β−アラニル−ヒスチジンについてすでに知られているが、特に、放射線治療に用いられる放射線に対して非常に敏感な骨髄細胞に対するこの種の化合物の細胞剌激特性に依存している。最近のデータによれば、いくつかのてんかん症状は、脳の特定の領域に、遊離基由来の酸素で生成した損傷が原因である（引用文献：G.R.Jackson，K.Werrbac h- Perer，J.R．Perez-Polo“Role of nerve growth factor in Oxidant-antioxida nt balance and neuronalinjury-II-A conditioning lesion paradigon”-Journ al of Neuroscience Research，25巻、３号、369-374頁、1990年）。本発明の生成物の組織（この場合神経組織）を再生させる性能は、神経組織の退化に関連する疾患の場合、重要な要素である。またこれらの化合物は、脳組織に関する“酸化的ストレス”が関与しているパーキンソン病を治療するのにも利用できる。皮膚のレベルで、本発明のプソイドジペプチド化合物の抗酸化特性は、太陽光で生成する遊離基の種由来の酸素の作用を中和するのに利用できる。このように、これら化合物は、光アレルギー反応（遊離基種は皮膚レベルで光感作分子を誘発する）を有効に遮断する。酸化に敏感な活性成分（例えばクロルプロマジン）について、これら生成物は、この活性成分が毒性化合物に変換するのを防止する。この成分は、ある種の皮膚病の光化学療法による治療に最高の用途がある。実際にこれら治療では光感作物質（例えばソラレン）が使用され、この物質は放射線下では有益な作用（ＤＮＡとの相互作用）をもたらすが、あいにく、望ましくない副作用の原因であるラジカル種が生成する。ポルフィリンは遊離基による損傷を大きくするので、本発明の化合物は、ポルフィリン症のヒトの皮膚症状の作用に対抗するために利用できる。また本発明の化合物は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）のような自己免疫疾患に罹っているヒトの“酸化的ストレス”には付随する皮膚損傷の生成に抵抗する。また本発明の化合物は、“日焼け”の作用すなわち紅斑、水腫および皮膚への日焼け細胞の生成に対して有効に抵抗する。本発明の化合物の抗酸化特性は勿論、皮膚の老化を予防するのに用いることができる。この方法が正しいと理由づける理論および実験による論拠はさきに述べた。結局、これらの化合物が、皮膚の老化組織の他の特有の現象に対して抵抗することが証明されたのである。すなわち糖によって仲介される、コラーゲンもしくはエラスチンのようなタンパク質の非酵素的網状化（V.M．Monnier-“Nonenzyma tic glycosylation，the Maillard reaction and the aging process”-Journal of Gerontology，45巻、４号、B105-111頁、1990年）、およびリポタンパク質複合体（リポフスチン）の生成である。本発明のプソイドジペプチド化合物の他の範囲の使用は、その細胞剌激特性および先に示したようにその免疫剌激特性に依存している。これらの特性によって、組織の再生と治癒が促進され、そして一般的な方式で、免疫応答のメディエータの関与を含む機能が調節される。このように本発明の化合物は、障害を受けた皮膚の結合組織の再生を促進するのに使用できる。また本発明の化合物は、日焼け後、または化学療法もしくは放射線療法の後の粘膜の修復を促進する。この原理にしたがって、これらの化合物は、しわの予防と治療に利用できる。本発明のプソイドジペプチドの細胞剌激特性と再生特性は、類縁の天然のジペプチドのβ−アラニル−ヒスチジンの濃度が高いことが分かっている筋肉組織に対して作用することは特に注目すべきである。この化合物の生理学的役割は、現時点では完全には確かめられていないが、筋肉の収縮性の改善に関与しかつ心臓の収縮を調節することに密接に関連している。この種の特性も、Dushenの筋ジストロフィーとしての特定筋肉の退化を治療するのに使用することができる。本発明のプソイドジペプチド化合物の治癒特性には多数の分野に用途がある。カルノシンの類縁のジペプチド化合物が優れた結果を示した胃潰瘍の治療結果が報告されている（M．Ito，T.TanakaおよびT.Suzuki-“Effect of N-（3-aminopr opionyl）-L-histidinato zinc（z-103）on healing and hydrocortisone-inducedrelease of acetic acid ulcers in rats with limitedfood-intake-time”-Iapanese Journal of Pharm acology，54巻、513-521頁、1990年）。その外に、本発明の化合物の抗酸化特性と抗炎症特性はこの症状を治療するのに有用である。また本発明のプソイドジペプチド化合物は角膜障害の治療に特に用いられる。これら化合物は、例えば近視を矯正するため角膜を切開した後の術後の治療中に投与できる。本発明の化合物は、“ドライアイ（dry eye）”の病状治療に用いて角膜上皮の治癒を促進するのに最も有利に使用できるが、また“酸化的ストレス”（健康状態、炎症、U.V.の照射）に対して損傷組織を保護する“人工涙液”の挙動によって、配合物に入れると涙液膜の再製に役立つ。また本発明のプソイドジペプチドを含有する組成物は、その免疫剌激作用と再生作用によって、網膜変性の現象に抵抗することができる。本発明の化合物は、成分の“酸化的ストレス”が上記症状に干渉するためその作用が増強されることになる（引用文献：R.E．Anderson，L.M．Rapp，R.D．Wiegand-Current Eye Res earch，３巻、223-237貞、1984年）。本発明のプソイドジペプチド化合物の他の重要な使用は、その免疫調節特性に一層関係が深い。したがってアレルギー反応、特にある種の強い臭気組成物によって起こるアナフィラキシー・ショックを遮断するため、香料および防臭剤に、本発明のプソイドジペプチド化合物を含有させることは特に好ましい。安定剤および保存剤としての使用本発明のプソイドジペプチドは、許容性に優れかつ適度の抗酸化特性と細胞剌激特性を有しているので、酸化に対して敏感な物質、加工食品、または生体外で保存される臓器の保存と保護に、本発明の化合物を用いることを提案できる。安定性を改善しかつ毒性副産物が生成するのを回避するためリポソームの酸化を防止すること；遊離基の解重合作用に対する、化粧用配合物に添加されるヒアルロン酸の保護；油類と酸化し易い食料製品；および食品の保護も挙げることができる。本発明の化合物は、血液と血清ワクチンならびに移植組織として用いられる臓器（特に挙げられるのは心臓である）の保存状態を改善することができる。医薬または安定剤として用いられる本発明のプソイドジペプチド化合物の投与量と組成を示す下記の実施例で、これら化合物の使用を明らかにした。実施例１この実施例は、β−アラニル−ヒスタミンを用いて行う白内障の患者の治療に関する。この試験は、白内障の患者の水晶体混濁度の変化の有望な評価が得られるように設計した。患者は全員が初期眼科検査を受けた。この検査には次のものが含まれていた。すなわち患者の医学的経歴記録の作成、最高矯正を行った場合の視力の測定、直接もしくは間接の検眼鏡検査、スリットランプによる混濁度の評価、瞳孔を最大に散大させた後の水晶体の臨床格付け、白内障のタイプの分類、およびレトロイルミネーション（retroillumination）による水晶体の写真である。さらに血液試料を、試験開始時とその後ひきつづき採取して化学分析を行った。一般的な診察によって、治療前の患者の初期状態を確認できた（“ベースライン”の定義）。眼の追跡検査は、２箇月間は２週間毎に行い、その後は１箇月毎に行った。この検査には、矯正後の最高視力、直接または間接の検眼鏡検査、スリットランプによる検査、瞳孔を最高に拡大した後（原発性開放角緑内障の患者を除く）の水晶体の臨床格付け、白内障の分類が含まれる。レトロイルミネーションまたはスリットランプで観察した水晶体の写真もとった。水晶体の変化はすべての患者についても、ツァイス社製スリットランプを備えた顕微鏡を用いて検査した。この方法で得た写真による観察には、ベースラインの検査、中間試験、および治療期間の最後の時点での最終検査が含まれる。スリットランプ法を用いる場合、角膜から後部水晶体包まで、眼の前部全体が見えるように、水晶体の断層写真をとった。この方法を用い、通常のレトロイルミネーションにしたがって赤色反射検査を行った。次に水晶体の変化を、解剖学的位置および変化の価値にしたがって格付けした。角膜の混濁度はレトロイルミネーションを用いて格付けし写真をとった。次いでこのフィルムを、微小濃度計を用い線形デンシトメトリーで測定した。混濁度の値は、混濁化の標準尺度を用いて相対値で報告した。角膜混濁度の測定は、照射光に暴露される全表面を考慮しながら行った。後部被膜下の（posterior subc apsular）混濁度は、スリットランプのスケールを用い、底部から頂部まで最長の高さでかつ最大幅で、レトロイルミネーションにて測定した。核および皮質の混濁度についても水晶体の写真をとり、次いで格付けを行った。スリットランプでとった別のネガ写真を、“プランビコン管”を使用して分析した。この装置は光の強度の測定値を高精度で電気信号に変換することができ、その電気信号はコンピュータ化された画像分析システムに組込まれて記憶される。特定のプログラムによって、“ディジタル化された ”水晶体の画像は、二次元または三次元のグラフとして再現することができる。この画像処理法は、Babizhayev M.A.，Zhukotskii A.V．およびSologub A.A. ，“Image analysis of the lens opacities induced in developing chick emb ryo by glucocorticoid”，Exp．Eye Res.，55巻、521-537頁、1992年に詳細に説明されている。これらの再構成された画像の例を付属書類１に示す。この図のヒストグラムは、このような評価法の重要性を具体例で示している。後部被膜下白内障の症例を、１％のβ−アラニル−ヒスタミンを含有する点眼液を局所投与する前と投与してから2.5箇月後に検査した。これらのヒストグラムは、治療前は、積分ピークが58.44±18.14で、治療を行ってから2.5箇月後は積分ピークが44.95±8.77の混濁度の量的分布を示す。これらの分析結果は、水晶体の後部被膜下領域の混濁度が部分的に低下したことを示す。この方法で得た試験結果は標準の臨床検査の結果と一致した。この試験では、下記の異なる群を測定した。対照の第一群：未治療の患者（５名の患者、７個の眼）。第二群：１％のβ−アラニル−ヒスタミンを含有する等脹食塩水の点眼薬（pH7.4）を投与した。１日当り２回の局所投与を続けた（10名の患者、15個の眼）。第三群：第二群と同じ治療を行い、最初の２週間中に“攻撃型治療（attack t ype of treatment）”で剌激した。すなわち第二群の場合に定義した食塩水0.10 〜0.15mlを１週間当り２回、２度づつ結膜下注射を行った（３名の患者、４個の眼）。第四群：等脹食塩水の点眼液を１日当り２回、局所投与した（５名の患者、７個の眼）。第四群は対照群の第一群と類似している。上記のプロトコルにしたがって、混濁度と視力によって水晶体の光学濃度の値を24箇月後に測定した。これら二つのパラメータを検討して、24時間後の視力の変化に関する結果を示す付属書類２の表、および24時間後の視覚混濁度の変化に関する結果を示す付属書類３の表を得た。上記二つの選択されたパラメータを検討した結果、上記化合物を投与すると、視力の改善と白内障の軽減が非常に顕著であると結論することができる。同様に、等脹食塩水中１％の活性成分Ｎ−アセチル−β−アラニル−ヒスタミンを含有する一種の点眼液を試験したが、本発明の目的に合致する結果を得た。１日当り１回だけ局所投与するだけでその結果は先に得た結果と同一であった。この確認された事実は、アシル化型の化合物の方が生体内利用性に優れていることで説明できる。上記実施例では点眼液について述べられているが、本発明の化合物は、１〜10 0mMのβ−アラニル−ヒスタミンを含有するゲル剤などのような一般に受け入れられているすべての眼科用配合剤の形態で投与することができる（引用文献：“ Remington's pharmaceuticalsciences handbook”Hack Pub．Co．社、米国参照）。実施例２非常に少ない投与量で配合物を用いて、本発明の化合物の粘膜に対する修復活性を実証した。種々の起源による口内炎歯肉炎〔適合不良の義歯、腐食性液体の誤用および口咽頭領域のコバルト照射治療による罹患〕に対するこの作用を試験することができた。これらすべての症例では、歯肉および頬の粘膜が劣化する原因がなくなった。適応させて計画的に行った伝統的な治療に加えて、患者の50％に、0.28％のＮ− アセチル−３−フェニル−３−アミノプロピオニル−ヒスタミンを含有するオレンジ香味の水性ゲルを投与した。これらの異なる症例を観察したところ、優れた許容性を示し、修復時間が20％〜55％有意に減少することが分かった。配合物を投与すると正の活性が得られると結論することができる。実施例３下記組成の治癒クリームを用いることによって治癒特性を実証することができた。５％のｇ−アミノブチリルヒスタミン10ｇを含有し、水分散性賦形剤を加えて 100gとしたpH6.5のナノスフェア（Nanosphere）（直径100nm）。このクリーム剤を、閉鎖創に軽くマッサージしながら１日当り２回塗布した。瘢痕領域と瘢痕の近傍領域は軟膏が完全に浸透するまでマッサージした。試験した症例は、手術後14箇月未満の傷痕３例、ケロイド２例および座瘡による残症作用５例であった。すべての症例で、有意に、傷痕が改善されかつ皮膚の腫脹と凹凸が減少し、二つの症例では傷痕が完全に消失した。同時に、均一な肌合いが再現して膨満状態が消失するのがみとめられた。これらの結果は非常に明白である。実施例４下記の点眼剤を、角膜の損傷、特に“ドライアイ”の症状の治療に用いた。ホスファチジルコリン製のリポソーム-----８mg/ml ヒト血漿起源のフィブロネクチン---------10mg/ml β−アラニル−ヒスタミン---------------25mg/ml をpHが6.2〜7.4の緩衝媒体中に入れた点眼剤。 “フィブロネクチン”とβ−アラニル−ヒスタミンはリポソーム中に被包した。フィブロネクチンは、治癒および涙液被膜の回復を促進する細胞結合分子である。この点眼剤は１日当たり２回、10日間、眼球の表面に点滴して用いる。使用量は眼球表面に連続被膜を生成するのに充分な量でなければならない。試験結果上記配合物は、眼球表面に保護層を永続的に再構成する。このことは蛍光トレーサーを角膜上に保持する試験で実証した（その手段は、R.F．Barber，P.N．Sh ek，“liposomes and tear film．1．Release of vesicle entrapped carboxy-f luorescein”-Biochimica Biophysica Aeta：lipids and lipid metabolism，87 9巻（L81）、２号、157-163頁、1986年から引用した）。治癒はスリットランプを利用して追跡する。すなわち角膜上皮の迅速な再構成を観測する。実施例５この実施例で用いる軟膏は、第１度と第２度の表面火傷の治療に用いた。パラヒドロキシケイ皮酸------------------0.1g ハッカ油--------------------------------0.3g ラベンダー油----------------------------0.5g ノナスフェライズドメントール（nonaspherized menthol）---------0.05g β−アミノイソブチリル−ヒスタミン------0.5g 水分散性賦形剤を加えて100gとする。火傷が発生したならば早く薄い層で軟骨を塗布する。最初、この塗布は痛みがなくなるまで一時間毎に繰り返す。第１度の火傷の場合、紅斑は迅速に消失する。火傷を受けて表面が赤くなった表皮にフライクテン（flyctene）と水腫を有する第２度の表面火傷の場合、２時間以内に水腫が吸収され、３、４時間以内に痛みが減少することがみとめられる。続く２〜３日中に、下側の組織が一層迅速に再生する。これら下側組織が保有する小水泡を放出して新しい表皮層を生成して死んだ組織を除くことができる。一方では、表皮修復の加速がみとめられ、他方では優れた性質が認められる。実施例６本発明のプソイドジペプチド化合物の抗遊離基活性を、アフターシェーブローションとして使用できる化粧用配合物の下記実施例で実証した。 16ｇの６−アミノカプロイル−ヒスタミンを、５％の液体香料賦形剤のヒドロアルコール６°でナノスフェライズして100gにした配合物。ひげそり後、通常どおりに塗布することによって皮膚を良好な状態に保持できる。実施例７上記実施例と同じ活性成分を主薬として用いて日焼け用ローションを下記の配合で製造した。３−フェニル−３−アミノプロピオニル−ヒスタミン１ｇミクロ分散型のヒドロ脂質（hydrolipidic）賦形剤を加えて100gとする。美容院のＵＶＢ照射コースで異なる例を試験した。同等の日焼け色を得るため、露光後、上記クリーム剤を塗布すると、表皮は、照射してから数日間で優れた性質を示す。実施例８同じ活性成分に基づいて、下記の組成を有し、顔面を良好に保護するクリーム剤を製造した。５−アミノバレリル−ヒスタミン20ｇの溶液を、４％のイオンCu⁺⁺、Fe⁺⁺（アセチルメチオニン塩として）水分散性賦形剤でナノスフェライズして100gにしたクリーム剤（pH6.5）。抗老化クリーム剤の場合は、１日当り２回塗布するが、小じわが減少し、よりしなやかで一層生き生きした皮膚が得られることが分かった。クリーム剤が各種の攻撃に対して優れた修復保護を行うには１日１回の塗布で充分である。クリーム剤は完全に吸収されるまでマッサージして塗布する。そしてそのナノスフェアは均一な被膜を形成して長時間放出を続ける。このクリーム剤を塗布した後メイクアップを行うことができる。健康、柔軟性、肌合いの新鮮さ、均一な日焼けおよび良好な水分状態の下記の基準によって示されるように、いくつかの目視可能な結果が顔面の皮膚にみとめられる。実施例９本発明のプソイドジペプチド化合物は、化粧品または食品に配合されている不飽和脂肪酸類中に豊富な、容易に酸化する化粧油を保護するのにも用いることができる。下記の配合にしたがって、油１ｌ当り本発明のプソイドジペプチド化合物15〜 25mmolを添加することが必要であった。 20mmolのアセチル化β−アラニル−ヒスタミンに、海水中で栽培された微細藻類から抽出され、ＥＰＡを含む不飽和脂肪酸が非常に豊富な油を加えて１ｌにした配合物。この保護された油の老化を、１箇月後に、マロンジアルデヒドを添加することによって、未保護の油と比較した。その結果、未保護の油の場合、ジアルデヒドの含量が顕著に増加することがみとめられ、これは、酸化しないように保護するアセチル化β−アラニル−ヒスタミンの活性をよく立証している。実施例10 先に述べたのと同じ原理で下記の化粧油を製造した。 25mmolの８−アミノ−オクタノイル−ヒスタミンにジャコウバラ油を加えて１ｌにした化粧油。保護された油／未保護の油の製品を、５週間後に、酸滴定法で比較した。この場合の測定結果は有意に増大したことを示す（未保護の油の場合の10倍もの高い値になる）。したがって８−アミノオクタノイル−ヒスタミンが存在すると、ジャコウバラ油に対する抗酸化作用があると結論できる。上記実施例はすべて、本発明のプソイドジペプチドが、１ｌ当り１〜100ミリモルの範囲の活性体の統計的範囲内で活性であり、活性の主ピークが10〜25mMの間にあることを示した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/415 ＡＢＬ 9454−4ＣＡＢＸＡＤＳＡＤＴ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＢＲ，ＪＰ，ＲＵ，ＵＡ，ＵＳ (72)発明者スジュアン，マリー−クリスチーヌフランス、エフ―06360 イーゼ、アヴニュデディアーブル―ブロー、3921

Claims

【特許請求の範囲】１．ヒスタミンもしくはメチル置換ヒスタミン、および下記式：（式中、Ａはアミン、アミド、ラクタム、ウレタン基からなる群から選択される基を表し；Ｒ₁、Ｒ₁'、Ｒ₂、Ｒ₂'…Ｒ_n、Ｒ_n'は各々水素原子、炭化水素基、またはアルコール官能基、アルコキシもしくはチオール、アミン官能基、アルコキシもしくはチオエーテル基、硫酸基もしくはリン酸基などの官能基を表し；ＹとＺは各々水素原子またはフッ素原子または１個以上の官能基で置換されている炭化水素基を表し；ｎは１以上の整数である）で表されるアミノ酸をカップリングさせることによって得られ、ヒスタミンもしくはメチル置換ヒスタミンとの共有結合が、該アミノ酸のカルボキシル基とヒスタミンのアミノ基とのペプチド結合であるプソイドジペプチド化合物。２．アミノ酸が下記式：（式中、Ｘは水素原子またはアセチル基を表し；ｍは２以上の整数を表す）で表されることを特徴とする請求の範囲１記載のプソイドジペプチド化合物。３．アミノ酸が下記式：（式中、Ｒ₁は水素原子またはフェニル基を表し；Ｒ₂は水素原子またはメチル基を表し；ｐはゼロ以上で３以下の整数を表す）で表されることを特徴とする請求の範囲２記載のプソイドジペプチド化合物。４．前記アミノ酸が、β−アラニン、Ｔ−アミノ酩酸、β−アミノ−イソ酩酸、５−アミノ吉草酸、３−フェニル−３−アミノプロピオン酸、６−アミノカプロン酸、８−アミノオクタン酸、Ｎ−アセチル−β−アラニン、Ｎ−アセチル− ３−フェニル−３−アミノプロピオン酸、４−メチル−アミノ酩酸、ＤＬ−β− アミノ酩酸およびＬ−グルタミン酸からなる群から選択されることを特徴とする請求の範囲２記載の生成物。５．Ｘ、Ｒ₁およびＲ₂が水素原子を表し、ｍ＝０であり、前記アミノ酸がβ− アラニンであり、かつプソイドジペプチド化合物が下記式：で表されることを特徴とする請求の範囲２記載のプソイドジペプチド化合物。６．ヒスタミンと前記アミノ酸とのカップリングによって生成したカルボニル基の酸素原子が硫黄原子で置換されていることを特徴とする請求の範囲１、２または３に記載のプソイドジペプチド化合物。７．下記ステップ：すなわち前記アミノ酸を基Ｘによって窒素を保護し；前記アミノ酸を基Ｙによって酸素を活性化し；窒素を保護し次いでＯを活性化した前記アミノ酸と、ヒスタミンまたはメチル置換ヒスタミンとをカップリングさせ；次いで使用されるプソイドジペプチド化合物によって、Ｘを除去するかまたは除去しない；ステップを特徴とする、請求の範囲１〜５のいずれか一つに記載の化合物の化学的製造方法。８．アミノ酸が、そのカルボン酸官能基をエステル化することによって酸素を活性化されることを特徴とする請求の範囲７記載の方法。９．アミノ酸の酸素を活性化するエステル化のステップを、シアノメチルアルコール、ｏ−ニトロフェノール、２，４，５−トリクロロフェノール、ｐ−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、ペンタフルオロフェノール、Ｎ− ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、１−ヒドロキシピペリジンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンからなる群から選択される化合物の反応によって実施することを特徴とする請求の範囲８記載の方法。 10．プソイドジペプチド化合物が、下記の方法：すなわち 370mg（２mmol）のヒスタミン塩酸塩を７mlのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し；その混合物に、0.56ml（４mmol）のトリエチルアミンと800mg（2.25mmol）のＮ−tert−ブチルオキシカルボニル−β−アラニル−ペンタフルオロフェニルエステル（2.25mmol）を添加し；得られた混合物を０℃で30分間続いて室温で３時間攪拌し；残留物を濾過し次にジメチルホルムアミドで洗浄し；そのジメチルホルムアミドを減圧蒸発させ；残留物にエーテルを添加し、次に油状化合物のＮ−tert−ブチルオキシカルボニル−β−アラニル−ヒスタミンをデカンテーションで収集し；次に、塩酸の酢酸溶液で、Ｎ−tert−ブチルオキシカルボニル−β−アラニル−ヒスタミンを30分間処理することによってβ−アラニル−ヒスタミンの塩酸塩を得て；上記酢酸を一部分減圧蒸発させ、次いで残留物にいくらかのエーテルを添加し；その際、残留物を濾過し；エタノール／メタノール系（50／50）−エチルエーテルで再結晶させて、300m gのβ−アラニル−ヒスタミン塩酸塩を生成させ；次いでこの塩酸塩形を適切な樹脂を用して溶離させることによって塩基形のβ−アラニル−ヒスタミンを得る；方法で製造されるβ−アラニル−ヒスタミンであることを特徴とする請求の範囲７、８または９に記載の方法。 11．ヒドラーゼ型の酵素触媒の存在下、アミノ酸と、ヒスタミンまたはメチル置換ヒスタミンとをカップリングさせることからなることを特徴とする、請求の範囲１〜５のいずれか一つに記載の化合物の酵素的製造方法。 12．前記酵素触媒が、微生物または動物起源から抽出されたリパーゼ類からなる群およびプロテアーゼ類から選択されるヒドロラーゼであることを特徴とする請求の範囲11記載の方法。 13．下記ステップ：すなわちアミノ酸を基Ｘで窒素を保護し；アミノ酸を基Ｙで酸素を活性化し；窒素を保護し次いで酸素を活性化したアミノ酸と、ヒスタミンまたはメチル置換ヒスタミンとを前記触媒を用いてカップリングさせ；次いで使用されるプソイドジペプチド化合物によって、基Ｘを除く；ステップを特徴とする請求の範囲11または12に記載の方法。 14．前記アミノ酸が、そのカルボン酸官能基をエステル化することによって酸素が活性化されることを特徴とする請求の範囲13記載の方法。 15．アミノ酸の酸素を活性化する前記エステル化のステップが、第三級アルコールを除き、特にエタノール、ハロゲノ−アルキルアルコール類例えば２，２，２−トリクロロエタノール、フェノール、シアノメチルアルコール、ｏ−ニトロフェノール、２，４，５−トリクロロフェノール、ｐ−ニトロフェノール、２，４−ジニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、ペンタフルオロフェノール、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、１−ヒドロキシピペリジンおよび５−クロロ−８−ヒドロキシ−キノリンを含む脂肪族もしくは芳香族のアルコールからなる群から選択される化合物の反応で実施されることを特徴とする請求の範囲14記載の方法。 16．Ｎ−アセチル−β−アラニル−ヒスタミンであるプソイドジペプチド化合物が、下記のステップ：すなわち 2.38g（15mmol）のＮ−アセチル−β−アラニンエチルエステルと1.11g（10mm ol）のヒスタミンとをtert−アミルアルコール−ヘプタン混合物（25：75）40ml に溶解し； 0.5gのAmano Pリパーゼ（シュードモナス属）を添加し、生成した懸濁液を、ヒスタミンが完全に消失するまで、攪拌しながら40℃で加熱し；リパーゼを濾過して収集し；溶媒のtert−アミルアルコール−ヘプタンを減圧蒸発させて油状化合物を得て、次いで得られた残留物をエチルエーテル中で摩砕して、過剰のＮ−アセチル−β−アラニンエステルを除き約1.9ｇのＮ−アセチル−β−アラニル−ヒスタミンを得る；ステップで得られることを特徴とする請求の範囲11〜15のいずれか一つに記載の方法。 17．白内障の治療に用いる医薬を得るための、請求の範囲１〜６のいずれか一つに記載の化合物の使用。 18．点眼液またはゲルなどの通常受容される眼を保護する配合物の形態で投与される、請求の範囲17記載の使用のための医薬。 19．約１％のβ−アラニル−ヒスタミンを含有する結膜下注射液で投与される請求の範囲17記載の使用のための医薬。 20．アテローム性動脈硬化症の治療に用いる医薬を得るための、請求の範囲１〜６のいずれか一つに記載の化合物の使用。 21．酸化性ストレスに関連する各種の炎症状態の治療に用いる医薬を得るための、請求の範囲１〜６のいずれか一つに記載の生成物の使用。 22．光アレルギー、ポリフィリン症およびエリテマトーデスのような酸化性ストレスに関連する皮膚疾患の治療に用いる医薬を得るための、請求の範囲１〜６のいずれか一つに記載の生成物の使用。 23，皮膚組織、胃潰瘍および眼の組織などの組織を治癒させるのに用いる医薬を得るための、請求の範囲１〜６のいずれか一つに記載の化合物の使用。 24．角膜の損傷の治療および特に“ドライアイ”の症状に用いる洗眼剤で投与される、請求の範囲23記載の使用のための医薬。 25．下記組成：ホスファチジルコリン製のリポソーム ------- 8mg/ml ヒト血漿起源フィブロネクチン -------------10μg/ml β−アラニル−ヒスタミン -----------------25μg/ml を有する請求の範囲24記載の医薬。 26．抗アレルギー治療に用いる医薬を得るための、請求の範囲１〜６のいずれか一つに記載の化合物の使用。 27．粘膜組織および皮膚組織のような組織を再生させかつ若返らせるのに用いる治療用もしくは化粧用組成物を得るための、請求の範囲１〜６のいずれか一つに記載の化合物の使用。 28．酸化に敏感な物質、食品、または生体外で保存される臓器と組織を保存し安定化するのに用いるための、請求の範囲１〜６のいずれか一つに記載の化合物の用途。