JPH08506587A

JPH08506587A - 様々なａ環側鎖を有するタキソール、類似体及び中間体の合成

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Publication number: JPH08506587A
Application number: JP6518249A
Authority: JP
Inventors: スウィンデル，チャールズ; クラウス，ナンシィ
Original assignee: ブリンモーアーカレッジ
Priority date: 1993-02-05
Filing date: 1994-02-04
Publication date: 1996-07-16
Anticipated expiration: 2015-04-10
Also published as: US6307088B1; DE69433297D1; US6262281B1; BR9405687A; EP0682660A4; WO1994018186A1; AU6133694A; CA2155304C; ATE253563T1; EP0682660B1; JP3031715B2; DE69433297T2; AU695530B2; US6509484B2; US5770745A; EP1260507A1; BR9405687C1; CN1284501A; US5939566A; CA2155304A1

Abstract

(57)【要約】タキソール、タキソール類似体及びそれらの中間体の合成に効果的なプロトコルが記載されている。その方法はタキソールＡ環側鎖をバカティンIIIに結合することを含み、様々なＡ環側鎖構造を有するタキソール及びタキソール類似体の合成のためである。Ｎ−ベンジロキシカルボニル基を有するＯ−保護されたイソセリン及び３−フェニルイソセリン酸を、７−Ｏ−保護されたバカティンIIIのＣ−１３位のヒドロキシルに、エステル化が速く非常に効率的に起き、続いて脱保護−アシル化が起こり、光親和性標識候補者を含むタキソール、セファロマニン及び様々な類似体が製造される。

Description

【発明の詳細な説明】様々なＡ環側鎖を有するタキソール、類似体及び中間体の合成発明の分野本発明は、タキソール、タキソールの類似体及びそれらの中間体の合成製造に関するものである。発明の背景タキソールは、更なる開発にかなりの可能性を有する抗腫瘍薬剤として著しく臨床活性を示すタキサン（taxane）ジテルペノイドから自然に生じる。タキソール療法での志願者への広く行き渡った治療は、現在薬不足のために制限されている。自然源即ち成長の遅いセイヨウイチイの樹皮中にはタキソールが余り存在しないので、単離によるタキソールの入手可能性は長期的に見込みが思わしくない。タキソールは下記に示される通りの一般式とそれに対応する番号付けシステムを有する。有機化学者によって取り組まれ得るタキソールの供給に関する問題への解決方法としては、バカティンIII（BaccatinIII）等のＣ−１３位から突き出るＡ環側鎖を有する自然に誘導される物質に結合することによって、この薬又は臨床的に効果のある類似体を部分的に合成する方法が挙げられる。タキソール及びその類似体の調製は知られている。例えば、１９９０年５月８日にデニス等に発行された米国特許第４９２４０１１号明細書には、（２Ｒ，３Ｓ）側鎖酸をタキサン誘導体で縮合し、次いでヒドロキシル基を保護している様々な基を除去することによってタキソールを調製する方法が開示されている。１９９０年５月８日にコリン等に発行された米国特許第４９２４０１２号明細書には、バカティンIII（Bacca tinIII）及び１０−デアセチルバカティンIIIの誘導体で酸を縮合し、次いで水素によって保護基を除去することによって、バカティンIII及び１０−デアセチルバカティンIIIの誘導体を調製する方法が開示されている。TAXOTERE（Rhone-P oulenc Sante への登録商標）及び関連する化合物の様々な合成方法が、 Journal of Organic Chemistry、１９８６年、５１、４６；１９９０年、５５、１９５７；１９９１年、５６、１６８１；１９９１年、５６、６９３９；１９９２年、５７、４３２０；１９９２年、５７、６３８７及び９９３年、５８、２５５に報告されており、また、１９９１年５月１４日にホルトンに発行された米国特許第５０１５７４４号明細書にはこの様な合成方法が記載されている。タキソールの部分合成を最も簡単に行うのに必要なのは、キラル、非ラセミ側鎖及び誘導体、即ちバカティンIII又は非常に関連したジテルペノイド物質からなる豊富にある自然源に便利に近づくこと、及び、その２つを結ぶ効果的な手段である。次いで、下記の側鎖を有する下記一般式のバカティンIII及び１０−デアセチルバカティンIIIの縮合が特に興味を持たれている。しかしながら、半球体のタキサン骨格構造の凹面域に位置するバカティンIII のＣ−１３位にあるヒドロキシルの立体障害のために、これら２つの単位のエステル化は難しい。例えば、グリーン（Green）及びゲリッテ−ボーゲルン（Gueritt e-Vogelein）は、タキソールの部分合成方法の１つでは、１００時間後に転化率がたったの５０％であることを報告した。（J.Am.Chem.Soc.１９８８年、１１０、５９１７）ホルテン特許は、より効率的な合成に関する１つ以上の方法に取り組んでいる。それでもなお、タキソールのＡ環側鎖をタキサン骨格構造（例えばバカティンIII）に結合するための、また様々なＡ環側鎖構造を有するタキソール、タキソール類似体及びそれらの中間体の合成するための更に効率的な実験計画（プロトコル）に対する需要がある。本発明の要約従って、本発明の全般的な目的は、従来技術の欠点を克服する様々なＡ環側鎖構造を有するタキソール、タキソール類似体及びそれらの中間体の合成のために、タキソールのＡ環側鎖をタキサン骨格構造に結合するための、新規で有用でかつ効率的なプロトコルを提供することである。本発明の他の目的は、バカティンIIIにタキソールのＡ環側鎖を結合させ、様々なＡ環側鎖構造を有するタキソール、タキソール類似体及びそれらの中間体を合成することである。本発明の更なる目的は、Ｎ−ベンジロキシカルボニル基を有するＯ−保護されたイソセリン及び３−フェニルイソセリン酸を、７−Ｏ−保護されたバカティン IIIのＣ−１３位のヒドロキシルに、素早く非常に効率的にエステル化することを提供することである。本発明の他の目的は、前記のものに続いて脱保護−アシル化を提供して、光親和性標識候補者（photoaffinity labeling candidates）を含むタキソール、セファロマニン（cephalomannine）、１０−アセチルTAXOTERE及び様々な類似体を提供することである。その広い形において、本発明はタキソール、タキソール類似体及びそれらの中間体の製造に有用な化学的方法を提供する。この方法は、下記一般式の化合物を下記一般式の構造のタキサンで縮合して、下記一般式の構造の中間体を与える工程からなる。式中、Ｒ¹＝アルキル基、オレフィン基又は芳香族基、若しくは、ＰｈＣＨ₂ Ｒ³＝水素、アルキル基、オレフィン基又は芳香族基、若しくは、ＰｈＲ⁴＝水素、酸素基又はアセトキシＲ⁵＝水素、酸素基又はカルボニルＲ⁶＝水素、酸素基又はアセトキシＲ⁷＝水素、酸素基ベンゾイロキシ又はアロイロキシＲ⁸＝水素又はヒドロキシル基Ｐ¹＝ヒドロキシル保護基一般的な方法による様々な置換を熟考し、特にはＲ¹がＰｈＣＨ₂、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＨ、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂及びＲ⁸がＯＨであるものである。一般的な方法は、中間体中のＲ¹ Ｏ及びＰ¹を置き換える工程を続けて、下記一般構造の化合物を製造しても良い。式中、Ｒ²＝水素、アルキル、オレフィン、芳香族、酸素、窒素、硫黄、又は、Ｐｈ基更に、様々な好ましい置換を熟考する。反応は芳香族系溶媒、活性化剤及びもしかしたら縮合剤の存在下で起こり得る。好ましい反応温度が７０℃〜７５℃であることが開示されている。発明の詳細な説明本発明は、タキソール、タキソールの類似体及びそれらの中間体の効率的な製造の化学的な方法に関する。これはタキソールのＡ環側鎖をバカティンIIIに結合させることによって成し遂げられ得る。これにより、様々なＡ環側鎖構造を有するタキソール、タキソールの類似体及びそれらの中間体の合成が行われる。この発明は更に、Ｎ−ベンジロキシカルボニル基を有するＯ−保護されたイソセリン及び３−フェニルイソセリン酸を、７−Ｏ−保護されたバカティンIIIのＣ− １３位のヒドロキシルに、素早く効率的にエステル化することに関する。イソセリン類似体以前に我々は、グリーン、ゲリッテ−ボーゲルンプロトコルの変形によって、Ａ環側鎖置換基のないタキソール類似体の部分合成を報告した。スウィンデル（ Swindell）等のJ.Med.Chem、１９９１年、３４、１１７６参照。グリーン、ゲリッテ−ボーゲルンプロトコルは以下の様に要約され得る。：一般化された反応による我々の研究成果は、以下の表１に要約され得る。：式中、Ｐ¹はヒドロキシル保護基、例えば、（トリクロロ）エトキシメチル、メトキシメチル、１−エチオキシメチル、ベンジロキシメチル、２−（トリメチルシリル）エトキシメチル、テトラヒドロピラニル及びアリロキシメチルである。；及びＰ²はヒドロキシル保護基、例えば、３，３，３−（トリクロロ）エチオキシカルボニル、トリアルキルシリル、アリロキシカルボニル及びベンジロキシカルボニルである。この研究を行う上での我々の目標の１つは、タキソール側鎖よりも効率的に従来のエステル化化学によって、バカティンIIIに結合され得る構造的に簡単な側鎖を有する生物学的に活性なタキソール類似体の発見であった。我々は、乳酸エステル及びフェニル乳酸エステル類似体（１２及び１３）に、側鎖の複雑さと側鎖の結合速度及び効率との間に直接的な関係を見つけた。しかしながら、我々は、議論の余地があるが、フェニル乳酸９と同様に立体配置的に要求の厳しいＮ− （ベンゾイル）イソセリン側鎖酸１０が、７−Ｏ−保護されたバカティンIII７に非常に速い速度でかつ効率的にエステル化されることを驚くべきことに見いだした（マグリ（Magri）等、J.Org.Chem．、１９８６年、５１、３２３９参照）。我我は、ベンズアミドカルボニル酸素の予備的な分子内アシル化から形成される一般式のジヒドロオキサジンの介在を提案した。我々が提案したのは以下のことである。：（ｉ）その制限される立体配置的な要求のために、環状アシル化剤１６がバカティンIIIのＣ−１３位のヒドロキシルに向かって特に反応性であること、及び、（ii）１６に対するより複雑なジヒドロオキサジン類似体により、タキソール側鎖結合問題に一般的な解決方法が提供され得ること。タキソールの構造活性プロフィール及びその結果として微小管性の結合場所によるその認識においてＡ環側鎖が中央の位置にあるために、側鎖中の光機能性を有する光親和性標識タキソール類似体は、タキソール−微小管性の相互作用の詳細を化学的に研究する際に価値があるであろう。この様に、我々は動機を与えられて、側鎖の結合に続くＮ−脱保護−アシル化が、遅い段階で光標識機能性と放射線標識（radiolabel）の両方の結合で光標識剤に近づくであろうという予想以外に、ベンジルウレタンで保護された側鎖酸１１の関与を追求した。７、１１、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（ＤＭＡＰ）のトルエン中の混合物を表１に集められたエステル化と比較させる濃度で温めた時、ベンズアミド１０との結合よりも速くて高い収率で側鎖の結合が生じた。式のジヒドロオキサジンが介在すること及びその形成が速度の制限事象であるという仮定で、−このエステル化では中間体が全く検出され得ない−１１の高い反応性はウレタンカルボニル酸素の求核性が高い結果である。この特徴により、側鎖酸が使用される超過量がかなり減少する。トリクロロエトキシをベースとしたＯ−保護されている基を亜鉛で誘導して除去することによって、タキソール類似体が導びかれた。：続いて起きるトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含有する溶液中のベンジルウレタンの水素化分解除去及び下記の反応に従うアミノ基の選択的なアシル化により、表２に示されるタキソール類似体が生じた。タキサンの足掛かりのオレフィンは水素添加に耐性があることが知られているので、ベンジルを保護する基はこの状況において有用である。バクスター（Baxt er）等のJ.Chme.Soc．、１９６２年、２９６４参照。３−フェニルイソセリン類似体側鎖１１の結合速度が促進させられたことは上記の類似体の調製では都合が良かった以上に、タキソールのより複雑なＮ−アシル−３−フェニルイソセリン側鎖特性のバカティンIIIのＣ−１３位のヒドロキシルへのエステル化での同様の改良は劇的な衝撃を与えるであろう。我々は、以下の機構による３−フェニルイソセリン側鎖エステル化を研究し、その結果は以下の表３に要約されている。残念ながら、側鎖酸２７に対するグリーン、ゲリッテ−ボーゲルンのタキソール部分合成及び我々自身の同様の観察においてエステル化の速度が遅いことからは、Ｎ−ベンゾイル及び３−フェニル置換基の組み合わせを有する側鎖酸から、ジヒドロオキサジンが速くは近づかれていないことが示唆された。更には、ＤＰＣがカルボキシル活性化試薬として供給された時（再度、表３に要約されたエステル化が比較され得る）、グリーン（デニス等、J.Org.Chem．、１９９０年、５５、１９５７）及びヤコブセン（デン（Deng）等、J.Org.Chem．、１９９２年、５７、４３２０）のタキソール側鎖合成の組み合わせによって、調製されたベンジルウレタン酸２８のエステル化で全く速度の向上が見られなかった。しかしながら、ＤＣＣと組み合わせた２８により、上記で示されたと同様の高速度で高収率が導かれた。それが、おそらく下記の形成がその場で起きる際に特に効果的なカルボキシル活性化試薬として、より求核性のウレタン酸素とＤＣＣとの組み合わせであることが、２７の効果的な結合を生じさせるためのＤＣＣの失敗によって示された。もし関連するならば、中間体は２８でのエステル化では検出され得ないので、３１の形成速度が制限されるに違いない。現在まで我々が研究した側鎖結合において、ベンジルウレタンを含有する側鎖酸の速いエステル化を介在させる点でＤＣＣは最も効果的であるので、側鎖窒素がベンゾイル基を有する際には、タキソール側鎖エステル化のためにグリーン及びゲリッテ−ボーゲルンによって導入されたＤＰＣは、最も効果的な試薬である。３０の亜鉛処理により３３が導かれた。一連の水素化分解−アシル化実験によって、タキソール、セファロマニン、１０−アセチルTAXOTERE及び表４に列挙される残りの類似体が与えられ、以下の機構によって反応が一般化される。：（式中、Ｘはあらゆる脱離基であり、例えば−Ｃｌ、−ＯＣＯ₂（ＣＨ₂ ）₃、又は、、またｉ−ＰｒＯＨはイソプロピルアルコールである。）３３の水素化分解後に遭遇したアミノトリオールは特にＣ−２’位置でＯ−アシル化しやすい。例えば、セファロマニンの調製において、チグリン酸のＮ−ヒドロキシ琥珀酸イミドエステルが使用された場合でさえも顕著なＯ−アシル化がおきた。更には、トリエチルアミン−塩化メチレン溶液中での酸塩化物の使用は、低温でさえも、興味のある全ての類似体に対しては確かに選択的ではなかった。驚いたことに、選択的なアミノアシル化をもたらすのに最も良い条件では、ＤＭＡＰ触媒で室温でピリジン溶液中の酸塩化物が必要とされた。タキソールの効果的な部分合成を達成して満足であると同時に、光親和性標識アジド類似体３４の調製はこの方法論の有用性を強調する。我々の手による、Ｎ −ｐ−アジドベンゾイル基を有するＯ−保護された側鎖酸からの３４の調製への、グリーン、ゲリッテ−ボーゲルンのエステル化の適用は、アジド部分の熱不安定性のために失敗した。本明細書中に記載される化学によって、放射線標識された物質の調製に従う順序で３４は優れた収率で利用可能である。Ｃ−２’位及びＣ−７位のヒドロキシル保護様々なヒドロキシ保護プロトコルをこの研究で調べた。タキソール及びタキソール類似体の部分合成へのその場のカルボキシル活性アプローチは、これらの保護基が都合のよいことには酸安定性であることを要求する。我々の手の内でこの基準に合致し損なったものとしては、イソセリン側鎖のＣ−２’位のヒドロキシルに対するトリエチルシリル及び３−フェニルイソセリン側鎖型でのこのヒドロキシルに対するエトキシエチルが挙げられる。一般に、我々は３−フェニルイソセリン側鎖酸中の側鎖ヒドロキシル保護基の酸安定性は、より簡単なイソセリン酸において必要とされる以上が必要であることを見いだした。同様に、エステル化後に酸で化学変化を起こしやすいヒドロキシル保護基を除去することは、イソセリンタキソール類似体ではより難しい。この理由としては、エトキシエチルは後者の側鎖の分類には不適当であったことである。エステル化を複雑にさせるか防止させる側鎖ヒドロキシルマスキング基には、トリイソプロピルシリル及びトリクロロエトキシカルボニルがあった。ベンジロキシメチル基はイソセリン側鎖に極めて受け入れられ得るが、結合した３−フェニルイソセリン側鎖中でより妨げられたＣ−２’位のヒドロキシルからは除去され得ない。この経験から、我々は公知のトリクロロエトキシメチル保護基及び公知のトリクロロエトキシカルボニル基は、Ｃ−２’位及びＣ−７位のヒドロキシルにとって優れた保護基であることを立証した。これらの機構は、エステル化反応中側鎖カルボン酸に対して確固としており、両方とも、１８、３３、タキソール及び関連した複雑なタキサン¹⁷ の機能性と相容性のある１段回の還元操作で除去可能である。Ｎ−ベンジロキシカルボニル機能性を組み込んでいるＯ−保護されたイソセリン及び３−フェニルイソセリン側鎖酸を、７−Ｏ−保護されたバカティンIIIの立体障害の大きいＣ−１３位のヒドロキシルへ、速く高収率でエステル化することに基づいているタキソール及び類似体の調製にとって、簡単で効果的な順番を開発した。我々は、その場で形成される１７及び下記の化合物の様なジヒドロオキサジンが介在していると考えている。エステル化生成物の脱保護及び側鎖アミノ基のアシル化は目標の物質を供給する。バカティンIIIから、全部で５工程が必要である。この研究の前に、バカティンIIIのＣ−１３位のヒドロキシルにタキソール側鎖を結合させるための最も効果的な方法では、β−ラクタム及びジヒドロオキサジンアシル化剤の独立した形成が必要であった。適当な保護された側鎖酸からその場でジヒドロオキサジンを生成させるための本方法論では、報告されたタキソール側鎖の様々な不斉反応が、タキソール及び関連した薬の部分合成に特に有用になる。一般化された式（タキソール、タキソール類似体及びそれらの中間体）次いで、タキソール、タキソール類似体及びそれらの中間体の製造のための本発明の化学的方法は、下記一般式の化合物を、下記一般構造のタキサンで縮合した化合物として、下記一般構造の中間体を与えて、一般化され得る。式中、Ｒ¹＝アルキル、オレフィン又は芳香族基、若しくは、ＰｈＣＨ₂ Ｒ³＝水素、アルキル、オレフィン又は芳香族、若しくは、ＰｈＲ⁴＝水素、酸素基又はアセトキシＲ⁵＝水素、酸素基又はカルボニルＲ⁶＝水素、酸素基又はアセトキシＲ⁷＝水素、酸素基、ベンゾイロキシ又はアロイロキシＲ⁸＝水素又はヒドロキシル基Ｐ¹＝ヒドロキシル保護基この一般的な方法において、或るより特定の反応としては、（ｉ）Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｒ³がＰｈ及びＰ¹がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃の場合、（ii）Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃、Ｒ⁷がPｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ¹がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃の場
合、（iii）Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶ がＯＨ、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ¹がＨの場合、及び、（iv）Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ（尚、Ｐ²はヒドロキシル保護基である）場合、のものが挙げられる。上述した一般的な方法は、Ｒ¹ Ｏ及びＰ¹を置き換えて、下記の一般構造の化合物を与える工程で続けられ得る。：式中、Ｒ²＝水素、アルキル、オレフィン、芳香族、酸素、窒素又は硫黄基代わりに、上述した一般的な方法は下記の方法でより特定でされていても良い。：（ｉ）Ｒ¹がアルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ²がヒドロキシル保護基であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで並びにＰ¹とＰ²を水素で置き換える工程を含み、タキソールを製造する場合、（ii）Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｐ¹がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃及びＰ²がＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで置き換える工程をＰｈＣＨ₂ ＯＣ＝Ｏ基をＰｈＣ＝Ｏ基と交換することによって成し遂げる場合、（iii）Ｒ¹がアルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ³が水素、アルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ² 、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ²がヒドロキシル保護基であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで並びにＰ¹とＰ²を水素で置き換える工程を含み、タキソール類似体を製造する場合、及び、（iv）Ｒ¹がＰｈＣＨ₂ Ｏ、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴ がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ²がヒドロキシル保護基であり、縮合が芳香族系溶媒及び活性化剤の存在下で行われた３−フェニルイソセリン側鎖エステル化である場合。最後の（iv）の場合では、Ｐ²がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃で、Ｐ²がＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃であっても良い。ここで、活性化剤は４−（ジメチルアミノ）ピリジ
ン等のジアルキルアミノピリジンから選ばれる。有機溶媒はベンゼン、トルエン、キシレン、エチルベンゼン、イソプロピルベンゼン及びクロロベンゼンから選ばれる。反応は約７０〜７５℃の温度で最も上手く行われる。エステル化は、縮合剤の存在下で行われ、この縮合剤は、ジ−シクロヘキシル−カルボジイミド及びジ−２−ピリジルカーボネートからなる群から選ばれ得る。最後に（iv）の反応は、ジ−シクロヘキシル−カルボジイミド及びジ−２−ピリジルカーボネートからなる群から選ばれた縮合剤の存在下で行われ得り、活性化剤は４−（ジメチルアミノ）ピリジンである。加えて、タキソール類似体の調製のための化学的方法はまた、下記の工程からなる方法によって一般化され得る。：１０−デアセチルバカティンIIIを下記に転化して、次いで、下記で縮合することによって、下記にし、下記に転化し、続いて下記に転化し、次いで、最後に下記のタイプのタキソール類似体にする。式中、Ｒ¹＝アルキル、オレフィン又は芳香族基Ｒ²＝水素、アルキル、オレフィン、芳香族、酸素、窒素又は硫黄基Ｒ³＝水素、アルキル、オレフィン又は芳香族基Ｐ¹、Ｐ²及びＰ³＝ＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃又は他のヒドロキシル保護基実験項マグリ（Magri）等、J.Org.Chem．、１９８６年、５１、３２３９に記載される通りに、国立癌研究所（National Cancer Institute）、国立健康研究所（Nat ional Institutes of Health）のケニーススネード（Kenneth Snade）博士によって提供されたタキソール−セファロマニン混合物を分解することによって、バカティンIIIを調製した。それはこの手順に従って、バカティンIII７−トリクロロエチルカーボネート（７）に転化された。無水条件及び不活性雰囲気を必要とする反応は、無水溶媒を使用して窒素下で、火炎乾燥されたガラス製品中で行われた。ＣＤＣｌ₃溶液の¹ Ｈ及び¹³ＣのＮＭＲスペクトルを、内標準としてテトラメチルシラン（¹ Ｈ σ＝０ｐｐｍ）、残留クロロホルム（Ｈ σ＝７．２７ｐｐｍ）、又はＣＤＥＣｌ₃（¹³Ｃ σ＝７７ｐｐｍ）を使用して、３００ＭＨｚ及び７５ＭＨｚでそれぞれ記録した。¹³ＣＮＭＲスペクトルのために、陽イオン置換の程度をＩＦＤＥＰＴ実験の助けで特定した。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を、ウォーターズ（Waters）ブランドの装置で、３．９ｍｍ ×１５ｃｍのNovaPak ブランドのＤ₁₈カラム、又は、７．８ｍｍ×３０ｃｍのNo vaPak Ｃ₁₃カラムで、２５４ナノメーター（ｎｍ）でＵＶ検出を使用して行った。別な方法で、クロマトグラフィーをシリカゲルで行った。高分解能マススペクトル測定を、米国、ＰＡ、フィラデルフィア、ペンシルバニア大学、化学科、質量分析研究室で行った。簡単なイソセリンの追加の要求を標準的な方法で調製し、以下を含んでいた。：（ｉ）（２Ｒ）−Ｎ−（ベンジロキシカルボニル）−Ｏ−（トリクロロエトキシメチル）−イソセリン（化合物１１）、（ii）バカティンIIIエステル１５（化合物１１から形成された化合物１５）、及び、（iii）バカティンIIIエステル１８（化合物１５から形成された化合物１８）化合物２８、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンジロキシカルボニル−Ｏ−（トリクロロエトキシメチル）−３−フェニルイソセリンを調製した。ここで、（２Ｒ，３Ｒ）−エチル３−フェニルグリシデート３．１２ｇ（１６．３ｍｍｏｌ）、ギ酸メチル１３．５ｍｌ及びアジ化ナトリウム５．２８ｇ（８１．５ｍｍｏｌ）の、９５％エターノール：水が８：１のもの８１ｍｌ中の溶液を４５時間で５０ ℃まで加熱した。反応混合物を、水とジエチルエーテルとの間で分配させ、水層をジエチルエーテルで抽出し、有機層を混合、乾燥（ＭｇＳＯ₄）、濾過、及び濃縮した。酢酸エチル−ヘキサンで溶出してカラムクロマトグラフィーで残渣を精製して、無色の油状の４３を２．９１ｇ（９４％）得た。酢酸エチル８０ｍｌ中の４３を１．８８ｇ（８．００ｍｍｏｌ）及び１０％Ｐｄ−炭素１８８ｍｇからなる混合物を水素下（３５ｐｓｉ）で１４時間振り混ぜた。濾過及び濃縮により、融点６９〜７１℃の白色の粉末状の粗アミノアルコール４４を得て、それを精製せずに使用した。エーテル−水１：１のもの５７ｍｌ中の４４を１．９８ｇ（９．４８ｍｍｏｌ）及び炭酸ナトリウム２．９８ｇ（１０．４３ｍｍｏｌ）に、０℃でクロロギ酸ベンジル１．３５ｍｌ（９．４８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３０分間攪拌し、溶媒を蒸発させ、残渣を塩化メチレンと水との間で分配した。有機層を乾燥させ（硫酸ナトリウム）、濃縮して、ウレタン４５を得た（４３からの収率は９１％）。融点１０３〜１０５℃（塩化メチレン−ヘキサン）乾燥ＴＨＦ７９ｍｌ中ウレタン４５が６．７８ｇ（１９．８ｍｍｏｌ）からなる溶液に−６８℃で、攪拌しながらｍ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、１２．４ｍｌ、１９．８ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。５分後、トリクロロエトキシメチルクロリド３．８９ｍｌ（２９．７ｍｍｏｌ）及びＬｉＩ２．６５ｇ（１９．８ｍｍｏｌ）を添加した。引き続いて、混合物を１時間以上かけて室温まで温めさせた。次いで、反応混合物を１Ｎの塩酸に注いで、塩化メチレンで抽出し、有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濃縮した。酢酸エチル−ヘキサンで溶出してカラムクロマトグラフィーで残渣を精製して、無色の油状の４６を８．２２ｇ（８２％）得た。メタノール−水３：１のもの１６．３ｍｌ中の４６を４９４ｍｇ（０．９８ｍｍｏｌ）及び水酸化リチウム一水和物２０５ｍｇ（４．８８ｍｍｏｌ）からなる混合物を、室温で２時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を塩化メチレンと１Ｎの塩酸との間で分配した。有機層を乾燥させ（硫酸ナトリウム）、濃縮して、２８を４５８ｍｇ（９６％）を得た。酸２８をそのジシクロヘキシルアンモニウム塩に元素分析のために転化した。融点１３３．５〜１３６．０℃（エーテル）バカティンIIIエステル３０：トルエン５．２５ｍｌ中、７を８０ｍｇ（０．１０５ｍｍｏｌ）、２８を３０１ｍｇ（９．６２９ｍｍｏｌ）、４−（ジメチルアミノ）ピリジン３６ｍｇ（０．２１０ｍｍｏｌ）、及び、ジシクロヘキシルカルボンジイミド１３０ｍｇ（０．６２９ｍｍｏｌ）からなる混合物を７５℃で１時間攪拌した。反応混合物を冷却し、濾過し、濾過物を０．５Ｎの塩酸と水で洗争し、乾燥（硫酸ナトリウム）させた。濃縮し、酢酸エチル−ヘキサンで溶出してカラムクロマトグラフィーで残渣を精製して、無色の非晶性の固体状の３０を１２０ｍｇ（９４％）得た。トルエン中の７、１０等量の２８、１０等量のジ−２−ピリジルカーボネート及び３．３等量の４−（ジメチルアミノ）ピリジンで７５℃３６時間行われた同様の反応により、５０％の収率で３０を得た（回収された７をベースとして７８％）。バカティンIIIエステル３３：酢酸−メタノール１：１のもの１．２ｍｌ中の３０を１２０ｍｇ（０．０９９６ｍｍｏｌ）及び亜鉛ダストを９７ｍｇ（１．４９ｍｍｏｌ）からなる混合物を、３０分間超音波処理した。更に亜鉛（６５mg ；０．９９６ｍｍｏｌ）を添加して、全部で５時間超音波処理を続けた。溶媒をデカントし、亜鉛と亜鉛塩をメタノールで濯ぎ、有機層を混合し、水で希釈し、塩化メチレンで抽出した。塩化メチレン層を水で洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム）、濃縮した。酢酸エチル−ヘキサンで溶出して残渣のカラムクロマトグラフィーにより、３３を５７〜７５ｍｇ（６５〜８５％）得た。タキソール、セファロマニン及び３４〜３９を与えるための３３の脱保護−アシル化：イソプロパノール４ｍｌ中、３３を２４２ｍｇ（０．２７４ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸４２μｌ及びＰｄブラック４３ｍｇからなる混合物を、１．５時間水素（３５ｐｓｉ）下で振り混ぜた。濾過及び濾過物の濃縮により、対応するアンモニウムトリフルオロ酢酸を得て、それを精製せずに使用した。ピリジン１．３ｍｌ中のこの物質２０ｍｇ（０．０２３ｍｍｏｌ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン２ｍｇに、室温でアシル化剤０．０２８ｍｍｏｌを攪拌しながら滴下した。３０分後、更にアシル化剤０．０１８４ｍｍｏｌを添加し、必要ならば、攪拌を更に３０分間維持した。次いで、混合物を塩化メチレンで希釈し、１Ｎの塩酸と水で洗浄し、有機層を乾燥させた（硫酸ナトリウム）。濃縮し、酢酸エチル−ヘキサンで溶出してカラムクロマトグラフィーで残渣を精製して生成物を得て、それを酢酸エチル−ヘキサンで溶出してカラムクロマトグラフィーにかけ、クロマトグラフィー的にまた分光学的に純粋な生成物を得た。タキソール：塩化ベンゾイルから９０％の収率で調製され、クロマトグラフィー的にまた分光学的に本物の試料²⁹と同じ物質を与えた。セファロマニン：塩化チグロイルから８１％の収率で調製され、分光学的にまたクロマトグラフィー的に本物の試料²⁹と同じ物質を与えた。ＨＲＭＳ（負のイオンＣＩ；メタン試薬ガス）計算値（Ｍ）８３１．３４５５、実測値８３１．３３８９アジドタキソール３４：４−アジドベンゾイルクロライドから７１％の収率で調製された。トリフルオロメチルタキソール３５：４−（トリフルオロメチル）ベンゾイルクロライドから８６％の収率で調製された。ブロモタキソール３６：４−ブロモベンゾイルクロライドから７６％の収率で調製された。アセチルタキソール３７：４−（アセチル）ベンゾイルクロライドから６７％の収率で調製された。ベンゾイルタキソール３８：４−（ベンゾイル）ベンゾイルクロライドから６６％の収率で調製された。ヒドロキシタキソール３９：サリチル酸Ｎ−ヒドロキシ琥珀酸イミドエステルから５１％の収率で調製された。１０−アセチルTAXOTERE及び３４を与えるための３３の脱保護−アシル化：アシル化を室温で行った以外は、上記したと同様に３３の水素化分解脱保護（１６ｈ）及びアシル化のためのプロトコルを続けた。１０−アセチルTAXOTERE：ジ−ｔ−ブチルジカーボネートから収率９４％で調製されて、報告されたもの¹²と同じ分光学的なパラメータを有する物質を与えた。ＨＲＦＡＢＭＳ計算値（Ｍ＋Ｈ）８５０．３６５０、実測値８５０．３６８７アジドタキソール３４：４−アジド安息香酸Ｎ−ヒドロキシ琥珀酸イミドエステル及び過剰のアンモニウム塩から収率７９％で調製された。上記から、従って本発明は、以下の構造のある中間体及びタキソール類似体を熟考している。更に詳述することなしで、上記は、他人が現在の又は将来の知識を適用することによって様々な設備条件下で使用するために同じように適合し得るほどに完全に我々の発明を説明しているであろう。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年２月２１日【補正内容】２．Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｒ³がＰｈ及びＰ¹がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃である、請求項１記載の化学的方法。３．Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃、Ｒ⁷ がＰｈＣＯ₂及びＲ⁸がＯＨである、請求項２記載の化学的方法。４．Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＨ、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ¹がＨである、請求項１記載の化学的方法。５．Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨであり、かつ、Ｐ²はヒドロキシル保護基である、請求項１記載の化学的方法。６．Ｒ¹ Ｏ及びＰ¹を置き換えて、一般構造の化合物（式中、Ｒ²＝水素、アルキル、オレフィン、芳香族、酸素又は窒素若しくは硫黄基）を与える更なる工程を含む、請求項１記載の化学的方法。７．Ｒ¹がアルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵ が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ²がヒドロキシル保護基であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで並びにＰ¹とＰ²を水素で置き換えて、タキソールを製造する工程を含む、請求項１記載の化学的方法。８．Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｐ¹がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃及びＰ²がＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで置き換える工程をＰｈＣＨ₂ ＯＣ＝Ｏ基をＰｈＣ＝Ｏ基と交換することによって成し遂げる、請求項７記載の化学的方法。９．Ｒ¹がアルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ³が水素、アルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ²がヒドロキシル保護基であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで並びにＰ¹とＰ²を水素で置き換えて、タキソール類似体を製造する工程を含む、請求項１記載の化学的方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＺ，ＦＩ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＺ

Claims

【特許請求の範囲】１．タキソール、タキソール類似体及びそれらの中間体の製造に有用な化学的方法において、下記一般式の化合物を、下記一般構造のタキサンと縮合させて、下記一般構造の中間体（式中、Ｒ¹＝アルキル、オレフィン又は芳香族基、若しくは、ＰｈＣＨ₂ Ｒ³＝水素、アルキル、オレフィン、芳香族基、若しくは、ＰｈＲ⁴＝水素、酸素基又はアセトキシＲ⁵＝水素、酸素基又はカルボニルＲ⁶＝水素、酸素基又はアセトキシＲ⁷＝水素、酸素基、ベンゾイロキシ又はアロイロキシＲ⁸＝水素又はヒドロキシル基Ｐ¹＝ヒドロキシル保護基）を与える工程から成る前記方法。２．Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｒ³がＰｈ及びＰ¹がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃である、請求項１記載の化学的方法。３．Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃、Ｒ⁷ がＰｈＣＯ₂及びＲ⁸がＯＨである、請求項２記載の化学的方法。４．Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＨ、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ¹がＨである、請求項１記載の化学的方法。５．Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ² 、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨであり、かつ、Ｐ²はヒドロキシル保護基である、請求項１記載の化学的方法。６．Ｒ¹ Ｏ及びＰ¹を置き換えて、一般構造の化合物（式中、Ｒ²＝水素、アルキル、オレフィン、芳香族、酸素又は窒素若しくは硫黄基）を与える更なる工程を含む、請求項１記載の化学的方法。７．Ｒ¹がアルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵ が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ²がヒドロキシル保護基であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで並びにＰ¹とＰ²を水素で置き換えて、タキソールを製造する工程を含む、請求項１記載の化学的方法。８．Ｒ¹がＰｈＣＨ₂、Ｐ¹がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃及びＰ²がＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで置き換える工程をＰｈＣＨ₂ ＯＣ＝Ｏ基をＰｈＣ＝Ｏ基と交換することによって成し遂げる、請求項７記載の化学的方法。９．Ｒ¹がアルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ³が水素、アルキル、オレフィン又は芳香族基、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ²がヒドロキシル保護基であり、Ｒ¹ ＯをＰｈで並びにＰ¹とＰ²を水素で置き換えて、タキソール類似体を製造する工程を含む、請求項１記載の化学的化合物。 10．Ｒ¹がＰｈＣＨ₂ Ｏ、Ｒ³がＰｈ、Ｒ⁴がＡｃＯ、Ｒ⁵が二重結合したＯ、Ｒ⁶がＯＰ²、Ｒ⁷がＰｈＣＯ₂、Ｒ⁸がＯＨ及びＰ²がヒドロキシル保護基であり、縮合が芳香族系溶媒及び活性化剤の存在下で行われた３−フェニルイソセリン側鎖のエステル化である、請求項１記載の化学的方法。 11．Ｐ¹がＣＨ₂ ＯＣＨ₂ ＣＣｌ₃で、Ｐ²がＣＯ₂ ＣＨ₂ ＣＣｌ₃である、請求項１０記載の化学的方法。 12．活性化剤がジアルキルアミノピリジン類から選ばれる、請求項１１記載の方法。 13．ジアルキルアミノピリジンが４−（ジメチルアミノ）ピリジンである、請求項１２記載の方法。 14．有機溶媒が、ベンゼン、トルエン、キシレン、エチルベンゼン、イソプロピルベンゼン及びクロロベンゼンから選ばれる、請求項１２記載の方法。 15．反応が約７０〜７５℃の温度で行われる、請求項１２記載の方法。 16．エステル化が、縮合剤の存在下で行われる、請求項１２記載の方法。 17．縮合剤が、ジ−シクロヘキシル−カルボジイミド及びジ−２−ピリジルカーボネートからなる群から選ばれる、請求項１６記載の方法。 18．反応が、ジ−シクロヘキシル−カルボジイミド及びジ−２−ピリジルカーボネートからなる群から選ばれた縮合剤の存在下で行われ、活性化剤が４−（ジメチルアミノ）ピリジンである、請求項１２記載の方法。 19．請求項１〜１８のいずれか一項の方法によって調製された生成物。