JPH08256762A - 新規ビフィズス菌及びその利用 - Google Patents
新規ビフィズス菌及びその利用Info
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- JPH08256762A JPH08256762A JP7070149A JP7014995A JPH08256762A JP H08256762 A JPH08256762 A JP H08256762A JP 7070149 A JP7070149 A JP 7070149A JP 7014995 A JP7014995 A JP 7014995A JP H08256762 A JPH08256762 A JP H08256762A
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Landscapes
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 新規なビフィズス菌株を提供する。
【構成】 血清コレステロール上昇抑制作用を有するビ
フィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longu
m)を育種改良して、血清コレステロール上昇抑制作用を
有すると共に発酵乳製品中での生残性が高いビフィドバ
クテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を得
る。 【効果】 このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum)を用いることにより、血清コレステ
ロール上昇抑制作用を有すると共に生残性の高い発酵乳
製品を提供することができる。
フィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longu
m)を育種改良して、血清コレステロール上昇抑制作用を
有すると共に発酵乳製品中での生残性が高いビフィドバ
クテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を得
る。 【効果】 このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum)を用いることにより、血清コレステ
ロール上昇抑制作用を有すると共に生残性の高い発酵乳
製品を提供することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、血清コレステロール上
昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中での生残性が高
いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium l
ongum)に関する。また、本発明は、このビフィドバクテ
リウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を含有する
発酵乳用スターターに関する。さらに、本発明は、この
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum)を含有する発酵乳用スターターを用いた発酵乳製品
の製造法に関する。
昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中での生残性が高
いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium l
ongum)に関する。また、本発明は、このビフィドバクテ
リウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を含有する
発酵乳用スターターに関する。さらに、本発明は、この
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum)を含有する発酵乳用スターターを用いた発酵乳製品
の製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】ビフィズス菌は、人間の腸内細菌におけ
る主要菌叢であり、人間の健康に有益な効果があるとさ
れている。この有益な効果としては、血清コレステロー
ル上昇抑制作用、免疫賦活作用、抗変異原性、抗腫瘍性
などの生理効果や下痢治癒、便秘改善、腸内有害物質の
低減などの整腸効果などが挙げられる。
る主要菌叢であり、人間の健康に有益な効果があるとさ
れている。この有益な効果としては、血清コレステロー
ル上昇抑制作用、免疫賦活作用、抗変異原性、抗腫瘍性
などの生理効果や下痢治癒、便秘改善、腸内有害物質の
低減などの整腸効果などが挙げられる。
【０００３】このような効果を有するビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)の中、ビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT2933R (FERM P-8743) には、菌体及びその培養物に強
い血清コレステロール上昇抑制作用があることが知られ
ており [青江誠一郎ら, 第６回日本ビフィズス菌センタ
ー学術集会予稿集, p.18, 1987] 、この菌体や培養物を
血清コレステロール上昇抑制剤として利用することが提
案されている [特開昭 62-258323号公報] 。しかしなが
ら、このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743) で代表される血
清コレステロール上昇抑制作用を有するビフィズス菌は
発酵乳製品中における生残性が低く、このビフィズス菌
を含有する発酵乳用スターターで製造した発酵乳製品中
では、賞味期限である製造より14日の保存期間中、ビフ
ィズス菌の生菌数を107/g 以上に維持できない場合が多
かった。
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)の中、ビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT2933R (FERM P-8743) には、菌体及びその培養物に強
い血清コレステロール上昇抑制作用があることが知られ
ており [青江誠一郎ら, 第６回日本ビフィズス菌センタ
ー学術集会予稿集, p.18, 1987] 、この菌体や培養物を
血清コレステロール上昇抑制剤として利用することが提
案されている [特開昭 62-258323号公報] 。しかしなが
ら、このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743) で代表される血
清コレステロール上昇抑制作用を有するビフィズス菌は
発酵乳製品中における生残性が低く、このビフィズス菌
を含有する発酵乳用スターターで製造した発酵乳製品中
では、賞味期限である製造より14日の保存期間中、ビフ
ィズス菌の生菌数を107/g 以上に維持できない場合が多
かった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、上述の
問題に鑑み、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) で代表され
る血清コレステロール上昇抑制作用を有するビフィズス
菌の発酵乳製品中での生残性を向上させるべく、鋭意研
究を進めたところ、育種改良することにより、血清コレ
ステロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中で
の生残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum)を取得することができることを見出
した。そして、このビフィドバクテリウム・ロンガム(B
ifidobacterium longum)を含有する発酵乳用スターター
を調製し、この発酵乳用スターターを用い発酵乳製品を
製造したところ、10℃、14日間の保存後もビフィズス菌
の生菌数が107/g 以上に維持されていることを見出し、
本発明を完成するに至った。したがって、本発明は、血
清コレステロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製
品中での生残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム
(Bifidobacterium longum)を提供することを課題とす
る。また、本発明は、血清コレステロール上昇抑制作用
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacteriumlongum)を含
有する発酵乳用スターターを提供することを課題とす
る。さらに、本発明は、血清コレステロール上昇抑制作
用を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を
含有する発酵乳用スターターを用い発酵乳製品を製造す
る方法を提供することを課題とする。
問題に鑑み、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) で代表され
る血清コレステロール上昇抑制作用を有するビフィズス
菌の発酵乳製品中での生残性を向上させるべく、鋭意研
究を進めたところ、育種改良することにより、血清コレ
ステロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中で
の生残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum)を取得することができることを見出
した。そして、このビフィドバクテリウム・ロンガム(B
ifidobacterium longum)を含有する発酵乳用スターター
を調製し、この発酵乳用スターターを用い発酵乳製品を
製造したところ、10℃、14日間の保存後もビフィズス菌
の生菌数が107/g 以上に維持されていることを見出し、
本発明を完成するに至った。したがって、本発明は、血
清コレステロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製
品中での生残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム
(Bifidobacterium longum)を提供することを課題とす
る。また、本発明は、血清コレステロール上昇抑制作用
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacteriumlongum)を含
有する発酵乳用スターターを提供することを課題とす
る。さらに、本発明は、血清コレステロール上昇抑制作
用を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を
含有する発酵乳用スターターを用い発酵乳製品を製造す
る方法を提供することを課題とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明では、血清コレス
テロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中で生
残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobac
terium longum)を得るために、血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) の育種
改良を試みた。次に、この育種改良法について説明す
る。
テロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中で生
残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobac
terium longum)を得るために、血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) の育種
改良を試みた。次に、この育種改良法について説明す
る。
【０００６】発酵乳を遠心分離して得られる上清に血清
コレステロール上昇抑制作用を有するビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT2933R (F
ERMP-8743) を懸濁し、10℃、７日間保存した後、生残
した菌を回収した。さらに、この菌を同様に懸濁し、保
存した後、回収するという操作を繰り返し、生残性の高
い菌株を得た。そして、この菌株をビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 と命
名した。このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum) SBT10254 の菌学的性質を次に示す。
コレステロール上昇抑制作用を有するビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT2933R (F
ERMP-8743) を懸濁し、10℃、７日間保存した後、生残
した菌を回収した。さらに、この菌を同様に懸濁し、保
存した後、回収するという操作を繰り返し、生残性の高
い菌株を得た。そして、この菌株をビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 と命
名した。このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum) SBT10254 の菌学的性質を次に示す。
【０００７】分類学的性状 （１）菌形 ＢＬ寒天平板培地を用い、37℃、72時間スチールウール
法により嫌気培養したとき、 大きさ： 0.3〜0.8 × 4〜10μm 形状：桿菌で多形性 (棍棒型、Ｙ字型など) （２）グラム染色性 （１）と同一条件で培養したとき、陽性を示す。 （３）コロニー形態 （１）と同一条件で培養したときのコロニー形態は次の
通りである。 形状：円形 隆起：半球状に隆起 周縁：波状 大きさ：１〜４mm 色調：黄褐色 表面：円滑 （４）芽胞形成：陰性 （５）ガス産生：なし （６）運動性：なし （７）カタラーゼ活性：陰性 （８）脱脂乳凝固性：凝固 （９）ゼラチン液化性：なし （１０）硝酸塩還元性：なし （１１）インドール産生：なし （１２）硫化水素産生：なし （１３）酢酸／Ｌ (＋) 乳酸のモル比： 1.5以上 （１４）酢酸生成性：あり （１５）糖の発酵性
法により嫌気培養したとき、 大きさ： 0.3〜0.8 × 4〜10μm 形状：桿菌で多形性 (棍棒型、Ｙ字型など) （２）グラム染色性 （１）と同一条件で培養したとき、陽性を示す。 （３）コロニー形態 （１）と同一条件で培養したときのコロニー形態は次の
通りである。 形状：円形 隆起：半球状に隆起 周縁：波状 大きさ：１〜４mm 色調：黄褐色 表面：円滑 （４）芽胞形成：陰性 （５）ガス産生：なし （６）運動性：なし （７）カタラーゼ活性：陰性 （８）脱脂乳凝固性：凝固 （９）ゼラチン液化性：なし （１０）硝酸塩還元性：なし （１１）インドール産生：なし （１２）硫化水素産生：なし （１３）酢酸／Ｌ (＋) 乳酸のモル比： 1.5以上 （１４）酢酸生成性：あり （１５）糖の発酵性
【０００８】光岡の方法 [光岡知足, 臨床検査，vol.1
8, pp.1163-1172, 1974] に従って実施した。 １．アラビノース ＋ ２．キシロース − ３．リボース − ４．グルコース − ５．マンノース ＋ ６．フラクトース − ７．ガラクトース − ８．シュクロース − ９．マルトース − １０．セロビオース − １１．ラクトース ＋ １２．トレハロース − １３．メリビオース − １４．ラフィノース − １５．メレジトース − １６．デンプン − １７．グリコーゲン − １８．イヌリン − １９．マンニット − ２０．ソルビット − ２１．イノシット − ２２．エスクリン − ２３．サリシン − ２４．アミグダリン − （＋は発酵性ありを示し、−は発酵性なしを示す。）
8, pp.1163-1172, 1974] に従って実施した。 １．アラビノース ＋ ２．キシロース − ３．リボース − ４．グルコース − ５．マンノース ＋ ６．フラクトース − ７．ガラクトース − ８．シュクロース − ９．マルトース − １０．セロビオース − １１．ラクトース ＋ １２．トレハロース − １３．メリビオース − １４．ラフィノース − １５．メレジトース − １６．デンプン − １７．グリコーゲン − １８．イヌリン − １９．マンニット − ２０．ソルビット − ２１．イノシット − ２２．エスクリン − ２３．サリシン − ２４．アミグダリン − （＋は発酵性ありを示し、−は発酵性なしを示す。）
【０００９】（１６）ＤＮＡホモロジー試験 ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT10254 、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R 、基準株のビフィドバ
クテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) ATCC1
5707及び標準コントロールとして大腸菌(Escherichia c
oli)のＤＮＡを抽出、精製し、ホモロジー試験を行った
結果を図１に示す。基準株のビフィドバクテリウム・ロ
ンガム(Bifidobacterium longum) ATCC15707のホモロジ
ーを 100％とし、大腸菌(Escherichia coli)のホモロジ
ーを０％としたとき、取得したビフィドバクテリウム・
ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 は70％以
上の高いホモロジーを示した。
gum) SBT10254 、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R 、基準株のビフィドバ
クテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) ATCC1
5707及び標準コントロールとして大腸菌(Escherichia c
oli)のＤＮＡを抽出、精製し、ホモロジー試験を行った
結果を図１に示す。基準株のビフィドバクテリウム・ロ
ンガム(Bifidobacterium longum) ATCC15707のホモロジ
ーを 100％とし、大腸菌(Escherichia coli)のホモロジ
ーを０％としたとき、取得したビフィドバクテリウム・
ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 は70％以
上の高いホモロジーを示した。
【００１０】上記した性状の中、糖の発酵性では、典型
的なビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum)としての糖の発酵性を示すビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT2933R に比
べ、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum) SBT10254 は陽性となった項目が少なく、異な
る性質を示したが、その他の菌学的性質は、Bergey's M
anual of SystematicBacteriology, vol.2, 1986 の分
類基準に従うとビフィドバクテリウム(Bifidobacteriu
m) としての性質を示しており、さらに、ＤＮＡホモロ
ジー試験においてビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum)としてのホモロジーを示すことか
ら取得した菌株は、ビフィドバクテリウム・ロンガム(B
ifidobacterium longum)であると同定した。このビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT10254 は、血清コレステロール上昇抑制作用を有する
と共に発酵乳製品中での生残性が高いという点では新規
である。そして、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT10254 は、(FERM P-14820)と
して寄託されている。次に、実施例を挙げて本発明を具
体的に説明する。
的なビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum)としての糖の発酵性を示すビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT2933R に比
べ、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum) SBT10254 は陽性となった項目が少なく、異な
る性質を示したが、その他の菌学的性質は、Bergey's M
anual of SystematicBacteriology, vol.2, 1986 の分
類基準に従うとビフィドバクテリウム(Bifidobacteriu
m) としての性質を示しており、さらに、ＤＮＡホモロ
ジー試験においてビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum)としてのホモロジーを示すことか
ら取得した菌株は、ビフィドバクテリウム・ロンガム(B
ifidobacterium longum)であると同定した。このビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT10254 は、血清コレステロール上昇抑制作用を有する
と共に発酵乳製品中での生残性が高いという点では新規
である。そして、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT10254 は、(FERM P-14820)と
して寄託されている。次に、実施例を挙げて本発明を具
体的に説明する。
【００１１】
【実施例１】血清コレステロール上昇抑制作用を有する
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT2933R (FERM P-8743) を親株とし、血清コレス
テロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中での
生残性の高い育種株であるビフィドバクテリウム・ロン
ガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FERM P-1482
0)を得た。すなわち、発酵乳 (無脂乳固形分 9.5％、脂
肪 3.2％) を遠心分離して得られた上清をpH 4.0に調整
して除菌フィルターで濾過して得た濾液に、ＴＧＡＭ培
地（日水製薬社製）にトマトジュースを添加した培地で
培養したビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743)の菌体を懸濁
し、10℃で７日間保存した後、ＢＬ寒天平板培地（日水
製薬社製）に塗抹し、37℃で72時間嫌気培養して生残菌
を回収した。この生残菌をＴＧＡＭ培地で培養し、同様
の濾液に懸濁し、同様に保存し、回収するという操作を
繰り返すことにより生残性の高いビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacteriumlongum) SBT10254 (FERM P
-14820)を取得した。
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT2933R (FERM P-8743) を親株とし、血清コレス
テロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中での
生残性の高い育種株であるビフィドバクテリウム・ロン
ガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FERM P-1482
0)を得た。すなわち、発酵乳 (無脂乳固形分 9.5％、脂
肪 3.2％) を遠心分離して得られた上清をpH 4.0に調整
して除菌フィルターで濾過して得た濾液に、ＴＧＡＭ培
地（日水製薬社製）にトマトジュースを添加した培地で
培養したビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743)の菌体を懸濁
し、10℃で７日間保存した後、ＢＬ寒天平板培地（日水
製薬社製）に塗抹し、37℃で72時間嫌気培養して生残菌
を回収した。この生残菌をＴＧＡＭ培地で培養し、同様
の濾液に懸濁し、同様に保存し、回収するという操作を
繰り返すことにより生残性の高いビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacteriumlongum) SBT10254 (FERM P
-14820)を取得した。
【００１２】
【試験例１】本発明の血清コレステロール上昇抑制作用
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT
10254 (FERM P-14820)と従来の血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) につい
て、発酵乳製品中での生残性を確認した。
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT
10254 (FERM P-14820)と従来の血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) につい
て、発酵乳製品中での生残性を確認した。
【００１３】脱脂粉乳 11.53％、酵母エキス 0.5％及び
アスコルビン酸0.03％を含有する還元脱脂乳培地に各ビ
フィズス菌を接種し、37℃で16時間培養してバルクスタ
ーターとした。なお、このバルクスターターの乳酸酸度
は約 1.3％であった。一方、脱脂粉乳 11.53％、酵母エ
キス 0.5％を含有する還元脱脂乳培地にラクトバチルス
・アシドフィルス(Lactobacillus acidophilus) SBT206
2 (FERM P-10730)及びストレプトコッカス・サリバリウ
ス・サブスピーシズ・サーモフィルス(Streptococcus s
alivarius subsp. thermophilus) SBT1021A (FERM P-10
658)を接種し、32℃で16時間培養してバルクスターター
とした。なお、このバルクスターターの乳酸酸度は1.20
〜1.40％であった。
アスコルビン酸0.03％を含有する還元脱脂乳培地に各ビ
フィズス菌を接種し、37℃で16時間培養してバルクスタ
ーターとした。なお、このバルクスターターの乳酸酸度
は約 1.3％であった。一方、脱脂粉乳 11.53％、酵母エ
キス 0.5％を含有する還元脱脂乳培地にラクトバチルス
・アシドフィルス(Lactobacillus acidophilus) SBT206
2 (FERM P-10730)及びストレプトコッカス・サリバリウ
ス・サブスピーシズ・サーモフィルス(Streptococcus s
alivarius subsp. thermophilus) SBT1021A (FERM P-10
658)を接種し、32℃で16時間培養してバルクスターター
とした。なお、このバルクスターターの乳酸酸度は1.20
〜1.40％であった。
【００１４】生乳及び脱脂粉乳からなる原料ミックスに
ラクトバチルス・アシドフィルス(Lactobacillus acido
philus) SBT2062 (FERM P-10730)及びストレプトコッカ
ス・サリバリウス・サブスピーシズ・サーモフィルス(S
treptococcus salivarius subsp. thermophilus) SBT10
21A (FERM P-10658)からなるバルクスターターを５％添
加し、さらに、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)又はビフ
ィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacteriumlongum)
SBT2933R (FERM P-8743) からなるバルクスターターを
５％添加した後、それぞれ、38℃で乳酸酸度が0.80％に
なるまで発酵させて発酵乳製品を製造した。これらの発
酵乳製品について、10℃で保存し、経時的に発酵乳製品
中のビフィズス菌数を測定した。その結果を図２に示
す。育種株であるビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)は、10
℃、14日間の保存後も 107/g以上の生菌数を維持してお
り、親株であるビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) に比べて
生残性が改善されていることが判る。
ラクトバチルス・アシドフィルス(Lactobacillus acido
philus) SBT2062 (FERM P-10730)及びストレプトコッカ
ス・サリバリウス・サブスピーシズ・サーモフィルス(S
treptococcus salivarius subsp. thermophilus) SBT10
21A (FERM P-10658)からなるバルクスターターを５％添
加し、さらに、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)又はビフ
ィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacteriumlongum)
SBT2933R (FERM P-8743) からなるバルクスターターを
５％添加した後、それぞれ、38℃で乳酸酸度が0.80％に
なるまで発酵させて発酵乳製品を製造した。これらの発
酵乳製品について、10℃で保存し、経時的に発酵乳製品
中のビフィズス菌数を測定した。その結果を図２に示
す。育種株であるビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)は、10
℃、14日間の保存後も 107/g以上の生菌数を維持してお
り、親株であるビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) に比べて
生残性が改善されていることが判る。
【００１５】
【試験例２】本発明の血清コレステロール上昇抑制作用
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT
10254 (FERM P-14820)と従来の血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) につい
て、血清コレステロール上昇抑制作用を確認した。
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT
10254 (FERM P-14820)と従来の血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) につい
て、血清コレステロール上昇抑制作用を確認した。
【００１６】８％濃度の還元チーズホエーのpHを1Nアン
モニア水で 6.8〜7.0 に調整し、不溶解物を遠心分離し
て除去した後、コッホ殺菌器で15分間加熱し、再び遠心
分離して沈澱を除去した。このようにして得られたホエ
ーに、アスコルビン酸ナトリウム0.05％及び酵母エキス
0.2％を添加し、オートクレーブで 121℃、15分間滅菌
したものを培地として用いた。この培地に、予め同培地
中で前培養したビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)又はビフ
ィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)
SBT2933R (FERM P-8743) を２％接種し、37℃で18時間
培養した。なお、培養中は培地のpHが 6.5〜6.8 となる
ようpHスタットを用い1Nアンモニア水で中和した。培養
終了後、遠心分離して菌体を集め、生理食塩水で２回洗
浄した後、得られた菌体をグルタミン酸ナトリウムを１
％添加した10％濃度の還元脱脂乳培に分散して凍結乾燥
した。そして、この凍結乾燥菌体を血清コレステロール
上昇抑制作用を確認するための試料とした。なお、この
試料中の菌数は1010/gであった。
モニア水で 6.8〜7.0 に調整し、不溶解物を遠心分離し
て除去した後、コッホ殺菌器で15分間加熱し、再び遠心
分離して沈澱を除去した。このようにして得られたホエ
ーに、アスコルビン酸ナトリウム0.05％及び酵母エキス
0.2％を添加し、オートクレーブで 121℃、15分間滅菌
したものを培地として用いた。この培地に、予め同培地
中で前培養したビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)又はビフ
ィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)
SBT2933R (FERM P-8743) を２％接種し、37℃で18時間
培養した。なお、培養中は培地のpHが 6.5〜6.8 となる
ようpHスタットを用い1Nアンモニア水で中和した。培養
終了後、遠心分離して菌体を集め、生理食塩水で２回洗
浄した後、得られた菌体をグルタミン酸ナトリウムを１
％添加した10％濃度の還元脱脂乳培に分散して凍結乾燥
した。そして、この凍結乾燥菌体を血清コレステロール
上昇抑制作用を確認するための試料とした。なお、この
試料中の菌数は1010/gであった。
【００１７】表１に示した配合のコレステロール負荷飼
料に上記した試料を添加し、実験動物へ給与して血清コ
レステロール値を測定した。また、対照として上記の試
料に代えて同量の脱脂粉乳を添加したものについても同
様に測定した。
料に上記した試料を添加し、実験動物へ給与して血清コ
レステロール値を測定した。また、対照として上記の試
料に代えて同量の脱脂粉乳を添加したものについても同
様に測定した。
【００１８】
【表１】 ──────────────────────────────────── 成分 試験群(SBT10254) 試験群(SBT2933R) 対照群 ──────────────────────────────────── カゼイン 22 22 22 ラード 9 9 9 コーン油 1 1 1 ミネラル混合物 * 4 4 4 ビタミン混合物 * 0.85 0.85 0.85 コレステロール 1 1 1 コール酸ナトリウム 0.25 0.25 0.25 塩化コリン 0.15 0.15 0.15 ショ糖 60.8 60.8 60.8 試料 (乾燥菌体) 0.95 0.95 − 脱脂粉乳 − − 0.95 ──────────────────────────────────── * : ハーパーの混合物 [Harper, A.E., Journal of Nutrition, vol.68, pp.4 05-418, 1959]
【００１９】ＳＤ系雄ラット（４週令) を市販飼料 (CE
-2、日本クレア社製) で７日間予備飼育した後、体重が
ほぼ平均化するように１群８匹に群分けし、各群に上記
各飼料を自由に摂取させた。ラットの１日平均飼料摂取
量及びコレステロール負荷量は、群間で差は認められな
かった。そして、自由摂取開始12日目から24時間絶食さ
せ、13日目に断頭採血し、血清コレステロール値を測定
した。なお、対照群の平均血清コレステロールに対する
試験群の平均血清コレステロールの上昇抑制率（％）は
次式で求めた。｛（対照群の平均血清コレステロール
値）−（試験群の平均血清コレステロール値）｝÷（対
照群の平均血清コレステロール値）× 100その結果、試
験群の血清コレステロールの上昇抑制率は、親株である
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT2933R (FERM P-8743) の凍結乾燥試料摂取群が
25％であるのに対し、育種株であるビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FER
M P-14820)の凍結乾燥試料摂取群は26％であり、同等の
血清コレステロール上昇抑制作用を有していることが判
る。
-2、日本クレア社製) で７日間予備飼育した後、体重が
ほぼ平均化するように１群８匹に群分けし、各群に上記
各飼料を自由に摂取させた。ラットの１日平均飼料摂取
量及びコレステロール負荷量は、群間で差は認められな
かった。そして、自由摂取開始12日目から24時間絶食さ
せ、13日目に断頭採血し、血清コレステロール値を測定
した。なお、対照群の平均血清コレステロールに対する
試験群の平均血清コレステロールの上昇抑制率（％）は
次式で求めた。｛（対照群の平均血清コレステロール
値）−（試験群の平均血清コレステロール値）｝÷（対
照群の平均血清コレステロール値）× 100その結果、試
験群の血清コレステロールの上昇抑制率は、親株である
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT2933R (FERM P-8743) の凍結乾燥試料摂取群が
25％であるのに対し、育種株であるビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FER
M P-14820)の凍結乾燥試料摂取群は26％であり、同等の
血清コレステロール上昇抑制作用を有していることが判
る。
【００２０】
【実施例２】脱脂粉乳 11.53％、酵母エキス 0.5％及び
アスコルビン酸0.03％を含有する還元脱脂乳培地５kg
に、本発明の血清コレステロール上昇抑制作用を有する
と共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (F
ERM P-14820)の前培養物を３％接種し、37℃で16時間培
養して発酵乳用スターターを調製した。なお、この発酵
乳用スターターの乳酸酸度は1.25％であった。
アスコルビン酸0.03％を含有する還元脱脂乳培地５kg
に、本発明の血清コレステロール上昇抑制作用を有する
と共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (F
ERM P-14820)の前培養物を３％接種し、37℃で16時間培
養して発酵乳用スターターを調製した。なお、この発酵
乳用スターターの乳酸酸度は1.25％であった。
【００２１】
【実施例３】脱脂粉乳 11.53％、酵母エキス 0.5％を含
有する還元脱脂乳培地５kgに、ラクトバチルス・アシド
フィルス(Lactobacillus acidophilus) SBT2062 (FERM
P-10730)及びストレプトコッカス・サリバリウス・サブ
スピーシズ・サーモフィルス(Streptococcus salivariu
s subsp. thermophilus) SBT1021A (FERM P-10658)の前
培養物をそれぞれ 1.5％接種し、32℃で16時間培養して
発酵乳用スターターを調製した。なお、この発酵乳用ス
ターターの乳酸酸度は1.30％であった。
有する還元脱脂乳培地５kgに、ラクトバチルス・アシド
フィルス(Lactobacillus acidophilus) SBT2062 (FERM
P-10730)及びストレプトコッカス・サリバリウス・サブ
スピーシズ・サーモフィルス(Streptococcus salivariu
s subsp. thermophilus) SBT1021A (FERM P-10658)の前
培養物をそれぞれ 1.5％接種し、32℃で16時間培養して
発酵乳用スターターを調製した。なお、この発酵乳用ス
ターターの乳酸酸度は1.30％であった。
【００２２】生乳及び脱脂粉乳からなる原料ミックス 1
00kgに、上述したラクトバチルス・アシドフィルス(Lac
tobacillus acidophilus) SBT2062 (FERM P-10730)及び
ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシズ・
サーモフィルス(Streptococcus salivarius subsp. the
rmophilus) SBT1021A (FERM P-10658)からなる発酵乳用
スターター５kgを添加し、さらに、実施例２で得られた
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT10254 (FERM P-14820)からなる発酵乳用スター
ター５kgを添加した後、38℃で乳酸酸度が0.75％になる
まで発酵させ、酸素透過性容器に充填して発酵乳製品を
製造した。この発酵乳製品中のビフィズス菌数は、製造
直後で 7.0×108cfu/gであり、10℃で14日間保存後で
3.0×107cfu/gであった。また、この発酵乳製品は通常
の製品と何ら変わらないものであった。
00kgに、上述したラクトバチルス・アシドフィルス(Lac
tobacillus acidophilus) SBT2062 (FERM P-10730)及び
ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシズ・
サーモフィルス(Streptococcus salivarius subsp. the
rmophilus) SBT1021A (FERM P-10658)からなる発酵乳用
スターター５kgを添加し、さらに、実施例２で得られた
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT10254 (FERM P-14820)からなる発酵乳用スター
ター５kgを添加した後、38℃で乳酸酸度が0.75％になる
まで発酵させ、酸素透過性容器に充填して発酵乳製品を
製造した。この発酵乳製品中のビフィズス菌数は、製造
直後で 7.0×108cfu/gであり、10℃で14日間保存後で
3.0×107cfu/gであった。また、この発酵乳製品は通常
の製品と何ら変わらないものであった。
【００２３】
【発明の効果】本発明の血清コレステロール上昇抑制作
用を有すると共に発酵乳製品中での生残性が高いビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を
用いることにより、優れた血清コレステロール上昇抑制
作用を有すると共にビフィズス菌の生残性の高い発酵乳
製品を提供することができる。
用を有すると共に発酵乳製品中での生残性が高いビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を
用いることにより、優れた血清コレステロール上昇抑制
作用を有すると共にビフィズス菌の生残性の高い発酵乳
製品を提供することができる。
【図１】ＤＮＡホモロジー試験の結果を示す。
【図２】試験例１における保存中の発酵乳製品に生残す
るビフィズス菌数を示す。
るビフィズス菌数を示す。
○はビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum) SBT10254 (FERM P-14820)の生残する菌数を示
す。△はビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743) の生残する菌数
を示す。
longum) SBT10254 (FERM P-14820)の生残する菌数を示
す。△はビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743) の生残する菌数
を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 青山 顕司 埼玉県狭山市東三ツ木183−４ シャトレ ー新狭山201 (72)発明者 小久保 江美子 埼玉県川越市上野田町１−５
Claims (4)
- 【請求項１】 次の性質を有するビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacterium longum)。 （１）血清コレステロール上昇抑制作用を有する。 （２）発酵乳製品中で10℃、14日間保存後の生菌数が 1
07/g以上である。 - 【請求項２】 ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum)SBT10254 (FERM P-14820)である請
求項１記載のビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum)。 - 【請求項３】 次の性質を有するビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacterium longum)を含有することを
特徴とする発酵乳用スターター。 （１）血清コレステロール上昇抑制作用を有する。 （２）発酵乳製品中で10℃、14日間保存後の生菌数が 1
07/g以上である。 - 【請求項４】 次の性質を有するビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacterium longum)を含有する発酵乳
用スターターを添加して培養することを特徴とする発酵
乳製品の製造法。 （１）血清コレステロール上昇抑制作用を有する。 （２）発酵乳製品中で10℃、14日間保存後の生菌数が 1
07/g以上である。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07014995A JP3384907B2 (ja) | 1995-03-28 | 1995-03-28 | 新規ビフィズス菌及びその利用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07014995A JP3384907B2 (ja) | 1995-03-28 | 1995-03-28 | 新規ビフィズス菌及びその利用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08256762A true JPH08256762A (ja) | 1996-10-08 |
| JP3384907B2 JP3384907B2 (ja) | 2003-03-10 |
Family
ID=13423239
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP07014995A Expired - Fee Related JP3384907B2 (ja) | 1995-03-28 | 1995-03-28 | 新規ビフィズス菌及びその利用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3384907B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008195635A (ja) * | 2007-02-09 | 2008-08-28 | Crossfield Bio Inc | 馬用乳酸菌製剤 |
| JP2009501016A (ja) * | 2005-07-13 | 2009-01-15 | コンパニー ジェルヴェ ダノン | プロバイオティック菌株を含む発酵食品及びその製造方法 |
| US7993903B2 (en) | 2005-09-08 | 2011-08-09 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Cholesterol absorption inhibitor |
| JP2013209396A (ja) * | 2003-09-30 | 2013-10-10 | Kibow Biotech Inc | 腎臓機能を増大させるための組成物および方法 |
-
1995
- 1995-03-28 JP JP07014995A patent/JP3384907B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013209396A (ja) * | 2003-09-30 | 2013-10-10 | Kibow Biotech Inc | 腎臓機能を増大させるための組成物および方法 |
| JP2009501016A (ja) * | 2005-07-13 | 2009-01-15 | コンパニー ジェルヴェ ダノン | プロバイオティック菌株を含む発酵食品及びその製造方法 |
| US7993903B2 (en) | 2005-09-08 | 2011-08-09 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Cholesterol absorption inhibitor |
| JP2008195635A (ja) * | 2007-02-09 | 2008-08-28 | Crossfield Bio Inc | 馬用乳酸菌製剤 |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3384907B2 (ja) | 2003-03-10 |
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