JP3384907B2 - 新規ビフィズス菌及びその利用 - Google Patents
新規ビフィズス菌及びその利用Info
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- JP3384907B2 JP3384907B2 JP07014995A JP7014995A JP3384907B2 JP 3384907 B2 JP3384907 B2 JP 3384907B2 JP 07014995 A JP07014995 A JP 07014995A JP 7014995 A JP7014995 A JP 7014995A JP 3384907 B2 JP3384907 B2 JP 3384907B2
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- Japan
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- longum
- ferm
- bifidobacterium longum
- serum cholesterol
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、血清コレステロール上
昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中での生残性が高
いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium l
ongum) SBT10254 (FERM P-14820)に関する。また、本発
明は、このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobac
terium longum) SBT10254 (FERM P-14820)を含有する発
酵乳用スターターに関する。さらに、本発明は、このビ
フィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longu
m) SBT10254 (FERM P-14820)を含有する発酵乳用スター
ターを用いた発酵乳製品の製造法に関する。
昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中での生残性が高
いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium l
ongum) SBT10254 (FERM P-14820)に関する。また、本発
明は、このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobac
terium longum) SBT10254 (FERM P-14820)を含有する発
酵乳用スターターに関する。さらに、本発明は、このビ
フィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longu
m) SBT10254 (FERM P-14820)を含有する発酵乳用スター
ターを用いた発酵乳製品の製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】ビフィズス菌は、人間の腸内細菌におけ
る主要菌叢であり、人間の健康に有益な効果があるとさ
れている。この有益な効果としては、血清コレステロー
ル上昇抑制作用、免疫賦活作用、抗変異原性、抗腫瘍性
などの生理効果や下痢治癒、便秘改善、腸内有害物質の
低減などの整腸効果などが挙げられる。
る主要菌叢であり、人間の健康に有益な効果があるとさ
れている。この有益な効果としては、血清コレステロー
ル上昇抑制作用、免疫賦活作用、抗変異原性、抗腫瘍性
などの生理効果や下痢治癒、便秘改善、腸内有害物質の
低減などの整腸効果などが挙げられる。
【０００３】このような効果を有するビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)の中、ビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT2933R (FERM P-8743) には、菌体及びその培養物に強
い血清コレステロール上昇抑制作用があることが知られ
ており [青江誠一郎ら, 第６回日本ビフィズス菌センタ
ー学術集会予稿集, p.18, 1987] 、この菌体や培養物を
血清コレステロール上昇抑制剤として利用することが提
案されている [特開昭 62-258323号公報] 。しかしなが
ら、このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743) で代表される血
清コレステロール上昇抑制作用を有するビフィズス菌は
発酵乳製品中における生残性が低く、このビフィズス菌
を含有する発酵乳用スターターで製造した発酵乳製品中
では、賞味期限である製造より14日の保存期間中、ビフ
ィズス菌の生菌数を107/g 以上に維持できない場合が多
かった。
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)の中、ビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT2933R (FERM P-8743) には、菌体及びその培養物に強
い血清コレステロール上昇抑制作用があることが知られ
ており [青江誠一郎ら, 第６回日本ビフィズス菌センタ
ー学術集会予稿集, p.18, 1987] 、この菌体や培養物を
血清コレステロール上昇抑制剤として利用することが提
案されている [特開昭 62-258323号公報] 。しかしなが
ら、このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743) で代表される血
清コレステロール上昇抑制作用を有するビフィズス菌は
発酵乳製品中における生残性が低く、このビフィズス菌
を含有する発酵乳用スターターで製造した発酵乳製品中
では、賞味期限である製造より14日の保存期間中、ビフ
ィズス菌の生菌数を107/g 以上に維持できない場合が多
かった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、上述の
問題に鑑み、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) で代表され
る血清コレステロール上昇抑制作用を有するビフィズス
菌の発酵乳製品中での生残性を向上させるべく、鋭意研
究を進めたところ、育種改良することにより、血清コレ
ステロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中で
の生残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum)を取得することができることを見出
した。そして、このビフィドバクテリウム・ロンガム(B
ifidobacterium longum)を含有する発酵乳用スターター
を調製し、この発酵乳用スターターを用い発酵乳製品を
製造したところ、10℃、14日間の保存後もビフィズス菌
の生菌数が107/g 以上に維持されていることを見出し、
本発明を完成するに至った。したがって、本発明は、血
清コレステロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製
品中での生残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム
(Bifidobacterium longum)を提供することを課題とす
る。また、本発明は、血清コレステロール上昇抑制作用
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacteriumlongum)を含
有する発酵乳用スターターを提供することを課題とす
る。さらに、本発明は、血清コレステロール上昇抑制作
用を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を
含有する発酵乳用スターターを用い発酵乳製品を製造す
る方法を提供することを課題とする。
問題に鑑み、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) で代表され
る血清コレステロール上昇抑制作用を有するビフィズス
菌の発酵乳製品中での生残性を向上させるべく、鋭意研
究を進めたところ、育種改良することにより、血清コレ
ステロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中で
の生残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum)を取得することができることを見出
した。そして、このビフィドバクテリウム・ロンガム(B
ifidobacterium longum)を含有する発酵乳用スターター
を調製し、この発酵乳用スターターを用い発酵乳製品を
製造したところ、10℃、14日間の保存後もビフィズス菌
の生菌数が107/g 以上に維持されていることを見出し、
本発明を完成するに至った。したがって、本発明は、血
清コレステロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製
品中での生残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム
(Bifidobacterium longum)を提供することを課題とす
る。また、本発明は、血清コレステロール上昇抑制作用
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacteriumlongum)を含
有する発酵乳用スターターを提供することを課題とす
る。さらに、本発明は、血清コレステロール上昇抑制作
用を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)を
含有する発酵乳用スターターを用い発酵乳製品を製造す
る方法を提供することを課題とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明では、血清コレス
テロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中で生
残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobac
terium longum)を得るために、血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) の育種
改良を試みた。次に、この育種改良法について説明す
る。
テロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中で生
残性の高いビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobac
terium longum)を得るために、血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) の育種
改良を試みた。次に、この育種改良法について説明す
る。
【０００６】発酵乳を遠心分離して得られる上清に血清
コレステロール上昇抑制作用を有するビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT2933R (F
ERMP-8743) を懸濁し、10℃、７日間保存した後、生残
した菌を回収した。さらに、この菌を同様に懸濁し、保
存した後、回収するという操作を繰り返し、生残性の高
い菌株を得た。そして、この菌株をビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 と命
名した。このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum) SBT10254 の菌学的性質を次に示す。
コレステロール上昇抑制作用を有するビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT2933R (F
ERMP-8743) を懸濁し、10℃、７日間保存した後、生残
した菌を回収した。さらに、この菌を同様に懸濁し、保
存した後、回収するという操作を繰り返し、生残性の高
い菌株を得た。そして、この菌株をビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 と命
名した。このビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidob
acterium longum) SBT10254 の菌学的性質を次に示す。
【０００７】分類学的性状
（１）菌形
ＢＬ寒天平板培地を用い、37℃、72時間スチールウール
法により嫌気培養したとき、 大きさ： 0.3〜0.8 × 4〜10μm 形状：桿菌で多形性 (棍棒型、Ｙ字型など) （２）グラム染色性 （１）と同一条件で培養したとき、陽性を示す。 （３）コロニー形態 （１）と同一条件で培養したときのコロニー形態は次の
通りである。 形状：円形 隆起：半球状に隆起 周縁：波状 大きさ：１〜４mm 色調：黄褐色 表面：円滑 （４）芽胞形成：陰性 （５）ガス産生：なし （６）運動性：なし （７）カタラーゼ活性：陰性 （８）脱脂乳凝固性：凝固 （９）ゼラチン液化性：なし （１０）硝酸塩還元性：なし （１１）インドール産生：なし （１２）硫化水素産生：なし （１３）酢酸／Ｌ (＋) 乳酸のモル比： 1.5以上 （１４）酢酸生成性：あり （１５）糖の発酵性
法により嫌気培養したとき、 大きさ： 0.3〜0.8 × 4〜10μm 形状：桿菌で多形性 (棍棒型、Ｙ字型など) （２）グラム染色性 （１）と同一条件で培養したとき、陽性を示す。 （３）コロニー形態 （１）と同一条件で培養したときのコロニー形態は次の
通りである。 形状：円形 隆起：半球状に隆起 周縁：波状 大きさ：１〜４mm 色調：黄褐色 表面：円滑 （４）芽胞形成：陰性 （５）ガス産生：なし （６）運動性：なし （７）カタラーゼ活性：陰性 （８）脱脂乳凝固性：凝固 （９）ゼラチン液化性：なし （１０）硝酸塩還元性：なし （１１）インドール産生：なし （１２）硫化水素産生：なし （１３）酢酸／Ｌ (＋) 乳酸のモル比： 1.5以上 （１４）酢酸生成性：あり （１５）糖の発酵性
【０００８】光岡の方法 [光岡知足, 臨床検査，vol.1
8, pp.1163-1172, 1974] に従って実施した。 １．アラビノース ＋ ２．キシロース − ３．リボース − ４．グルコース − ５．マンノース ＋ ６．フラクトース − ７．ガラクトース − ８．シュクロース − ９．マルトース − １０．セロビオース − １１．ラクトース ＋ １２．トレハロース − １３．メリビオース − １４．ラフィノース − １５．メレジトース − １６．デンプン − １７．グリコーゲン − １８．イヌリン − １９．マンニット − ２０．ソルビット − ２１．イノシット − ２２．エスクリン − ２３．サリシン − ２４．アミグダリン − （＋は発酵性ありを示し、−は発酵性なしを示す。）
8, pp.1163-1172, 1974] に従って実施した。 １．アラビノース ＋ ２．キシロース − ３．リボース − ４．グルコース − ５．マンノース ＋ ６．フラクトース − ７．ガラクトース − ８．シュクロース − ９．マルトース − １０．セロビオース − １１．ラクトース ＋ １２．トレハロース − １３．メリビオース − １４．ラフィノース − １５．メレジトース − １６．デンプン − １７．グリコーゲン − １８．イヌリン − １９．マンニット − ２０．ソルビット − ２１．イノシット − ２２．エスクリン − ２３．サリシン − ２４．アミグダリン − （＋は発酵性ありを示し、−は発酵性なしを示す。）
【０００９】（１６）ＤＮＡホモロジー試験
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT10254 、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R 、基準株のビフィドバ
クテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) ATCC1
5707及び標準コントロールとして大腸菌(Escherichia c
oli)のＤＮＡを抽出、精製し、ホモロジー試験を行った
結果を図１に示す。基準株のビフィドバクテリウム・ロ
ンガム(Bifidobacterium longum) ATCC15707のホモロジ
ーを 100％とし、大腸菌(Escherichia coli)のホモロジ
ーを０％としたとき、取得したビフィドバクテリウム・
ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 は70％以
上の高いホモロジーを示した。
gum) SBT10254 、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R 、基準株のビフィドバ
クテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) ATCC1
5707及び標準コントロールとして大腸菌(Escherichia c
oli)のＤＮＡを抽出、精製し、ホモロジー試験を行った
結果を図１に示す。基準株のビフィドバクテリウム・ロ
ンガム(Bifidobacterium longum) ATCC15707のホモロジ
ーを 100％とし、大腸菌(Escherichia coli)のホモロジ
ーを０％としたとき、取得したビフィドバクテリウム・
ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 は70％以
上の高いホモロジーを示した。
【００１０】上記した性状の中、糖の発酵性では、典型
的なビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum)としての糖の発酵性を示すビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT2933R に比
べ、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum) SBT10254 は陽性となった項目が少なく、異な
る性質を示したが、その他の菌学的性質は、Bergey's M
anual of SystematicBacteriology, vol.2, 1986 の分
類基準に従うとビフィドバクテリウム(Bifidobacteriu
m) としての性質を示しており、さらに、ＤＮＡホモロ
ジー試験においてビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum)としてのホモロジーを示すことか
ら取得した菌株は、ビフィドバクテリウム・ロンガム(B
ifidobacterium longum)であると同定した。このビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT10254 は、血清コレステロール上昇抑制作用を有する
と共に発酵乳製品中での生残性が高いという点では新規
である。そして、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT10254 は、(FERM P-14820)と
して寄託されている。次に、実施例を挙げて本発明を具
体的に説明する。
的なビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum)としての糖の発酵性を示すビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT2933R に比
べ、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum) SBT10254 は陽性となった項目が少なく、異な
る性質を示したが、その他の菌学的性質は、Bergey's M
anual of SystematicBacteriology, vol.2, 1986 の分
類基準に従うとビフィドバクテリウム(Bifidobacteriu
m) としての性質を示しており、さらに、ＤＮＡホモロ
ジー試験においてビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum)としてのホモロジーを示すことか
ら取得した菌株は、ビフィドバクテリウム・ロンガム(B
ifidobacterium longum)であると同定した。このビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT10254 は、血清コレステロール上昇抑制作用を有する
と共に発酵乳製品中での生残性が高いという点では新規
である。そして、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT10254 は、(FERM P-14820)と
して寄託されている。次に、実施例を挙げて本発明を具
体的に説明する。
【００１１】
【実施例１】血清コレステロール上昇抑制作用を有する
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT2933R (FERM P-8743) を親株とし、血清コレス
テロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中での
生残性の高い育種株であるビフィドバクテリウム・ロン
ガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FERM P-1482
0)を得た。すなわち、発酵乳 (無脂乳固形分 9.5％、脂
肪 3.2％) を遠心分離して得られた上清をpH 4.0に調整
して除菌フィルターで濾過して得た濾液に、ＴＧＡＭ培
地（日水製薬社製）にトマトジュースを添加した培地で
培養したビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743)の菌体を懸濁
し、10℃で７日間保存した後、ＢＬ寒天平板培地（日水
製薬社製）に塗抹し、37℃で72時間嫌気培養して生残菌
を回収した。この生残菌をＴＧＡＭ培地で培養し、同様
の濾液に懸濁し、同様に保存し、回収するという操作を
繰り返すことにより生残性の高いビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacteriumlongum) SBT10254 (FERM P
-14820)を取得した。
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT2933R (FERM P-8743) を親株とし、血清コレス
テロール上昇抑制作用を有すると共に発酵乳製品中での
生残性の高い育種株であるビフィドバクテリウム・ロン
ガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FERM P-1482
0)を得た。すなわち、発酵乳 (無脂乳固形分 9.5％、脂
肪 3.2％) を遠心分離して得られた上清をpH 4.0に調整
して除菌フィルターで濾過して得た濾液に、ＴＧＡＭ培
地（日水製薬社製）にトマトジュースを添加した培地で
培養したビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743)の菌体を懸濁
し、10℃で７日間保存した後、ＢＬ寒天平板培地（日水
製薬社製）に塗抹し、37℃で72時間嫌気培養して生残菌
を回収した。この生残菌をＴＧＡＭ培地で培養し、同様
の濾液に懸濁し、同様に保存し、回収するという操作を
繰り返すことにより生残性の高いビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacteriumlongum) SBT10254 (FERM P
-14820)を取得した。
【００１２】
【試験例１】本発明の血清コレステロール上昇抑制作用
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT
10254 (FERM P-14820)と従来の血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) につい
て、発酵乳製品中での生残性を確認した。
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT
10254 (FERM P-14820)と従来の血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) につい
て、発酵乳製品中での生残性を確認した。
【００１３】脱脂粉乳 11.53％、酵母エキス 0.5％及び
アスコルビン酸0.03％を含有する還元脱脂乳培地に各ビ
フィズス菌を接種し、37℃で16時間培養してバルクスタ
ーターとした。なお、このバルクスターターの乳酸酸度
は約 1.3％であった。一方、脱脂粉乳 11.53％、酵母エ
キス 0.5％を含有する還元脱脂乳培地にラクトバチルス
・アシドフィルス(Lactobacillus acidophilus) SBT206
2 (FERM P-10730)及びストレプトコッカス・サリバリウ
ス・サブスピーシズ・サーモフィルス(Streptococcus s
alivarius subsp. thermophilus) SBT1021A (FERM P-10
658)を接種し、32℃で16時間培養してバルクスターター
とした。なお、このバルクスターターの乳酸酸度は1.20
〜1.40％であった。
アスコルビン酸0.03％を含有する還元脱脂乳培地に各ビ
フィズス菌を接種し、37℃で16時間培養してバルクスタ
ーターとした。なお、このバルクスターターの乳酸酸度
は約 1.3％であった。一方、脱脂粉乳 11.53％、酵母エ
キス 0.5％を含有する還元脱脂乳培地にラクトバチルス
・アシドフィルス(Lactobacillus acidophilus) SBT206
2 (FERM P-10730)及びストレプトコッカス・サリバリウ
ス・サブスピーシズ・サーモフィルス(Streptococcus s
alivarius subsp. thermophilus) SBT1021A (FERM P-10
658)を接種し、32℃で16時間培養してバルクスターター
とした。なお、このバルクスターターの乳酸酸度は1.20
〜1.40％であった。
【００１４】生乳及び脱脂粉乳からなる原料ミックスに
ラクトバチルス・アシドフィルス(Lactobacillus acido
philus) SBT2062 (FERM P-10730)及びストレプトコッカ
ス・サリバリウス・サブスピーシズ・サーモフィルス(S
treptococcus salivarius subsp. thermophilus) SBT10
21A (FERM P-10658)からなるバルクスターターを５％添
加し、さらに、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)又はビフ
ィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacteriumlongum)
SBT2933R (FERM P-8743) からなるバルクスターターを
５％添加した後、それぞれ、38℃で乳酸酸度が0.80％に
なるまで発酵させて発酵乳製品を製造した。これらの発
酵乳製品について、10℃で保存し、経時的に発酵乳製品
中のビフィズス菌数を測定した。その結果を図２に示
す。育種株であるビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)は、10
℃、14日間の保存後も 107/g以上の生菌数を維持してお
り、親株であるビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) に比べて
生残性が改善されていることが判る。
ラクトバチルス・アシドフィルス(Lactobacillus acido
philus) SBT2062 (FERM P-10730)及びストレプトコッカ
ス・サリバリウス・サブスピーシズ・サーモフィルス(S
treptococcus salivarius subsp. thermophilus) SBT10
21A (FERM P-10658)からなるバルクスターターを５％添
加し、さらに、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)又はビフ
ィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacteriumlongum)
SBT2933R (FERM P-8743) からなるバルクスターターを
５％添加した後、それぞれ、38℃で乳酸酸度が0.80％に
なるまで発酵させて発酵乳製品を製造した。これらの発
酵乳製品について、10℃で保存し、経時的に発酵乳製品
中のビフィズス菌数を測定した。その結果を図２に示
す。育種株であるビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)は、10
℃、14日間の保存後も 107/g以上の生菌数を維持してお
り、親株であるビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) に比べて
生残性が改善されていることが判る。
【００１５】
【試験例２】本発明の血清コレステロール上昇抑制作用
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT
10254 (FERM P-14820)と従来の血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) につい
て、血清コレステロール上昇抑制作用を確認した。
を有すると共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィド
バクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT
10254 (FERM P-14820)と従来の血清コレステロール上昇
抑制作用を有するビフィドバクテリウム・ロンガム(Bif
idobacterium longum) SBT2933R (FERM P-8743) につい
て、血清コレステロール上昇抑制作用を確認した。
【００１６】８％濃度の還元チーズホエーのpHを1Nアン
モニア水で 6.8〜7.0 に調整し、不溶解物を遠心分離し
て除去した後、コッホ殺菌器で15分間加熱し、再び遠心
分離して沈澱を除去した。このようにして得られたホエ
ーに、アスコルビン酸ナトリウム0.05％及び酵母エキス
0.2％を添加し、オートクレーブで 121℃、15分間滅菌
したものを培地として用いた。この培地に、予め同培地
中で前培養したビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)又はビフ
ィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)
SBT2933R (FERM P-8743) を２％接種し、37℃で18時間
培養した。なお、培養中は培地のpHが 6.5〜6.8 となる
ようpHスタットを用い1Nアンモニア水で中和した。培養
終了後、遠心分離して菌体を集め、生理食塩水で２回洗
浄した後、得られた菌体をグルタミン酸ナトリウムを１
％添加した10％濃度の還元脱脂乳培に分散して凍結乾燥
した。そして、この凍結乾燥菌体を血清コレステロール
上昇抑制作用を確認するための試料とした。なお、この
試料中の菌数は1010/gであった。
モニア水で 6.8〜7.0 に調整し、不溶解物を遠心分離し
て除去した後、コッホ殺菌器で15分間加熱し、再び遠心
分離して沈澱を除去した。このようにして得られたホエ
ーに、アスコルビン酸ナトリウム0.05％及び酵母エキス
0.2％を添加し、オートクレーブで 121℃、15分間滅菌
したものを培地として用いた。この培地に、予め同培地
中で前培養したビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifid
obacterium longum) SBT10254 (FERM P-14820)又はビフ
ィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)
SBT2933R (FERM P-8743) を２％接種し、37℃で18時間
培養した。なお、培養中は培地のpHが 6.5〜6.8 となる
ようpHスタットを用い1Nアンモニア水で中和した。培養
終了後、遠心分離して菌体を集め、生理食塩水で２回洗
浄した後、得られた菌体をグルタミン酸ナトリウムを１
％添加した10％濃度の還元脱脂乳培に分散して凍結乾燥
した。そして、この凍結乾燥菌体を血清コレステロール
上昇抑制作用を確認するための試料とした。なお、この
試料中の菌数は1010/gであった。
【００１７】表１に示した配合のコレステロール負荷飼
料に上記した試料を添加し、実験動物へ給与して血清コ
レステロール値を測定した。また、対照として上記の試
料に代えて同量の脱脂粉乳を添加したものについても同
様に測定した。
料に上記した試料を添加し、実験動物へ給与して血清コ
レステロール値を測定した。また、対照として上記の試
料に代えて同量の脱脂粉乳を添加したものについても同
様に測定した。
【００１８】
【表１】
────────────────────────────────────
成分 試験群(SBT10254) 試験群(SBT2933R) 対照群
────────────────────────────────────
カゼイン 22 22 22
ラード 9 9 9
コーン油 1 1 1
ミネラル混合物 * 4 4 4
ビタミン混合物 * 0.85 0.85 0.85
コレステロール 1 1 1
コール酸ナトリウム 0.25 0.25 0.25
塩化コリン 0.15 0.15 0.15
ショ糖 60.8 60.8 60.8
試料 (乾燥菌体) 0.95 0.95 −
脱脂粉乳 − − 0.95
────────────────────────────────────
* : ハーパーの混合物 [Harper, A.E., Journal of Nutrition, vol.68, pp.4
05-418, 1959]
【００１９】ＳＤ系雄ラット（４週令) を市販飼料 (CE
-2、日本クレア社製) で７日間予備飼育した後、体重が
ほぼ平均化するように１群８匹に群分けし、各群に上記
各飼料を自由に摂取させた。ラットの１日平均飼料摂取
量及びコレステロール負荷量は、群間で差は認められな
かった。そして、自由摂取開始12日目から24時間絶食さ
せ、13日目に断頭採血し、血清コレステロール値を測定
した。なお、対照群の平均血清コレステロールに対する
試験群の平均血清コレステロールの上昇抑制率（％）は
次式で求めた。｛（対照群の平均血清コレステロール
値）−（試験群の平均血清コレステロール値）｝÷（対
照群の平均血清コレステロール値）× 100その結果、試
験群の血清コレステロールの上昇抑制率は、親株である
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT2933R (FERM P-8743) の凍結乾燥試料摂取群が
25％であるのに対し、育種株であるビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FER
M P-14820)の凍結乾燥試料摂取群は26％であり、同等の
血清コレステロール上昇抑制作用を有していることが判
る。
-2、日本クレア社製) で７日間予備飼育した後、体重が
ほぼ平均化するように１群８匹に群分けし、各群に上記
各飼料を自由に摂取させた。ラットの１日平均飼料摂取
量及びコレステロール負荷量は、群間で差は認められな
かった。そして、自由摂取開始12日目から24時間絶食さ
せ、13日目に断頭採血し、血清コレステロール値を測定
した。なお、対照群の平均血清コレステロールに対する
試験群の平均血清コレステロールの上昇抑制率（％）は
次式で求めた。｛（対照群の平均血清コレステロール
値）−（試験群の平均血清コレステロール値）｝÷（対
照群の平均血清コレステロール値）× 100その結果、試
験群の血清コレステロールの上昇抑制率は、親株である
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT2933R (FERM P-8743) の凍結乾燥試料摂取群が
25％であるのに対し、育種株であるビフィドバクテリウ
ム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FER
M P-14820)の凍結乾燥試料摂取群は26％であり、同等の
血清コレステロール上昇抑制作用を有していることが判
る。
【００２０】
【実施例２】脱脂粉乳 11.53％、酵母エキス 0.5％及び
アスコルビン酸0.03％を含有する還元脱脂乳培地５kg
に、本発明の血清コレステロール上昇抑制作用を有する
と共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (F
ERM P-14820)の前培養物を３％接種し、37℃で16時間培
養して発酵乳用スターターを調製した。なお、この発酵
乳用スターターの乳酸酸度は1.25％であった。
アスコルビン酸0.03％を含有する還元脱脂乳培地５kg
に、本発明の血清コレステロール上昇抑制作用を有する
と共に発酵乳製品中での生残性の高いビフィドバクテリ
ウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (F
ERM P-14820)の前培養物を３％接種し、37℃で16時間培
養して発酵乳用スターターを調製した。なお、この発酵
乳用スターターの乳酸酸度は1.25％であった。
【００２１】
【実施例３】脱脂粉乳 11.53％、酵母エキス 0.5％を含
有する還元脱脂乳培地５kgに、ラクトバチルス・アシド
フィルス(Lactobacillus acidophilus) SBT2062 (FERM
P-10730)及びストレプトコッカス・サリバリウス・サブ
スピーシズ・サーモフィルス(Streptococcus salivariu
s subsp. thermophilus) SBT1021A (FERM P-10658)の前
培養物をそれぞれ 1.5％接種し、32℃で16時間培養して
発酵乳用スターターを調製した。なお、この発酵乳用ス
ターターの乳酸酸度は1.30％であった。
有する還元脱脂乳培地５kgに、ラクトバチルス・アシド
フィルス(Lactobacillus acidophilus) SBT2062 (FERM
P-10730)及びストレプトコッカス・サリバリウス・サブ
スピーシズ・サーモフィルス(Streptococcus salivariu
s subsp. thermophilus) SBT1021A (FERM P-10658)の前
培養物をそれぞれ 1.5％接種し、32℃で16時間培養して
発酵乳用スターターを調製した。なお、この発酵乳用ス
ターターの乳酸酸度は1.30％であった。
【００２２】生乳及び脱脂粉乳からなる原料ミックス 1
00kgに、上述したラクトバチルス・アシドフィルス(Lac
tobacillus acidophilus) SBT2062 (FERM P-10730)及び
ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシズ・
サーモフィルス(Streptococcus salivarius subsp. the
rmophilus) SBT1021A (FERM P-10658)からなる発酵乳用
スターター５kgを添加し、さらに、実施例２で得られた
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT10254 (FERM P-14820)からなる発酵乳用スター
ター５kgを添加した後、38℃で乳酸酸度が0.75％になる
まで発酵させ、酸素透過性容器に充填して発酵乳製品を
製造した。この発酵乳製品中のビフィズス菌数は、製造
直後で 7.0×108cfu/gであり、10℃で14日間保存後で
3.0×107cfu/gであった。また、この発酵乳製品は通常
の製品と何ら変わらないものであった。
00kgに、上述したラクトバチルス・アシドフィルス(Lac
tobacillus acidophilus) SBT2062 (FERM P-10730)及び
ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシズ・
サーモフィルス(Streptococcus salivarius subsp. the
rmophilus) SBT1021A (FERM P-10658)からなる発酵乳用
スターター５kgを添加し、さらに、実施例２で得られた
ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium lon
gum) SBT10254 (FERM P-14820)からなる発酵乳用スター
ター５kgを添加した後、38℃で乳酸酸度が0.75％になる
まで発酵させ、酸素透過性容器に充填して発酵乳製品を
製造した。この発酵乳製品中のビフィズス菌数は、製造
直後で 7.0×108cfu/gであり、10℃で14日間保存後で
3.0×107cfu/gであった。また、この発酵乳製品は通常
の製品と何ら変わらないものであった。
【００２３】
【発明の効果】本発明の血清コレステロール上昇抑制作
用を有すると共に発酵乳製品中での生残性が高いビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT10254 (FERM P-14820)を用いることにより、優れた血
清コレステロール上昇抑制作用を有すると共にビフィズ
ス菌の生残性の高い発酵乳製品を提供することができ
る。
用を有すると共に発酵乳製品中での生残性が高いビフィ
ドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum) S
BT10254 (FERM P-14820)を用いることにより、優れた血
清コレステロール上昇抑制作用を有すると共にビフィズ
ス菌の生残性の高い発酵乳製品を提供することができ
る。
【図１】ＤＮＡホモロジー試験の結果を示す。
【図２】試験例１における保存中の発酵乳製品に生残す
るビフィズス菌数を示す。
るビフィズス菌数を示す。
○はビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium
longum) SBT10254 (FERM P-14820)の生残する菌数を示
す。△はビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743) の生残する菌数
を示す。
longum) SBT10254 (FERM P-14820)の生残する菌数を示
す。△はビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacte
rium longum) SBT2933R (FERM P-8743) の生残する菌数
を示す。
フロントページの続き
(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ
Ｃ１２Ｒ 1:01） Ｃ１２Ｒ 1:01
(72)発明者 青山 顕司
埼玉県狭山市東三ツ木183−４ シャト
レー新狭山201
(72)発明者 小久保 江美子
埼玉県川越市上野田町１−５
(56)参考文献 特開 昭62−258323（ＪＰ，Ａ)
特開 昭61−271223（ＪＰ，Ａ)
特開 昭61−109729（ＪＰ，Ａ)
特開 昭58−224685（ＪＰ，Ａ)
特開 平５−41981（ＪＰ，Ａ)
特開 平５−23107（ＪＰ，Ａ)
特開 平４−112744（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
C12N 1/00 - 1/38
A61K 35/74
A23C 9/00 - 9/127
ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)
ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (3)
- 【請求項１】 次の性質を有するビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FERM
P-14820)。 （１）血清コレステロール上昇抑制作用を有する。 （２）発酵乳製品中で10℃、14日間保存後の生菌数が 1
07/g以上である。 - 【請求項２】 次の性質を有するビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FERM
P-14820)を含有することを特徴とする発酵乳用スタータ
ー。 （１）血清コレステロール上昇抑制作用を有する。 （２）発酵乳製品中で10℃、14日間保存後の生菌数が 1
07/g 以上である。 - 【請求項３】 次の性質を有するビフィドバクテリウム
・ロンガム(Bifidobacterium longum) SBT10254 (FERM
P-14820)を含有する発酵乳用スターターを添加して培養
することを特徴とする発酵乳製品の製造法。 （１）血清コレステロール上昇抑制作用を有する。 （２）発酵乳製品中で10℃、14日間保存後の生菌数が 1
07/g 以上である。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07014995A JP3384907B2 (ja) | 1995-03-28 | 1995-03-28 | 新規ビフィズス菌及びその利用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07014995A JP3384907B2 (ja) | 1995-03-28 | 1995-03-28 | 新規ビフィズス菌及びその利用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08256762A JPH08256762A (ja) | 1996-10-08 |
| JP3384907B2 true JP3384907B2 (ja) | 2003-03-10 |
Family
ID=13423239
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP07014995A Expired - Fee Related JP3384907B2 (ja) | 1995-03-28 | 1995-03-28 | 新規ビフィズス菌及びその利用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3384907B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007029773A1 (ja) | 2005-09-08 | 2007-03-15 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | コレステロール吸収抑制剤 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2540467C (en) * | 2003-09-30 | 2013-11-12 | Kibow Biotech, Inc. | Compositions and methods for augmenting kidney function |
| FR2888468B1 (fr) * | 2005-07-13 | 2010-08-27 | Gervais Danone Sa | Produits alimentaires fermentes contenant des souches probiotiques, et leur procede de preparation |
| JP2008195635A (ja) * | 2007-02-09 | 2008-08-28 | Crossfield Bio Inc | 馬用乳酸菌製剤 |
-
1995
- 1995-03-28 JP JP07014995A patent/JP3384907B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007029773A1 (ja) | 2005-09-08 | 2007-03-15 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | コレステロール吸収抑制剤 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH08256762A (ja) | 1996-10-08 |
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