JPH0824567B2 - バチルス属に属する新規微生物 - Google Patents
バチルス属に属する新規微生物Info
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- JPH0824567B2 JPH0824567B2 JP5109741A JP10974193A JPH0824567B2 JP H0824567 B2 JPH0824567 B2 JP H0824567B2 JP 5109741 A JP5109741 A JP 5109741A JP 10974193 A JP10974193 A JP 10974193A JP H0824567 B2 JPH0824567 B2 JP H0824567B2
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- JP
- Japan
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- strain
- bacillus
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- microorganism
- microorganism belonging
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- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
- Production Of Liquid Hydrocarbon Mixture For Refining Petroleum (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は、バチルス(Bacillus)
属に属する新規微生物に関し、更に詳しくは硫黄化合物
酸化性並びに有機溶媒耐性を有するバチルス(Bacillus)
属に属する新規微生物に関する。
属に属する新規微生物に関し、更に詳しくは硫黄化合物
酸化性並びに有機溶媒耐性を有するバチルス(Bacillus)
属に属する新規微生物に関する。
【０００２】近年、我が国では石油を原料とする製品の
加工の際に生ずる硫黄化合物が酸性雨の一つの原因とな
っており、重大な環境問題を引き起こしており、このた
め石油に含まれる有機硫黄化合物の除去（脱硫）が必要
となっている。
加工の際に生ずる硫黄化合物が酸性雨の一つの原因とな
っており、重大な環境問題を引き起こしており、このた
め石油に含まれる有機硫黄化合物の除去（脱硫）が必要
となっている。
【０００３】これまでのところ脱硫の方法としては、大
型機械による物理化学的方法が大勢を占め、微生物的方
法は、石油に含まれる有機溶媒により微生物が死滅して
しまうことから、敬遠されがちである。
型機械による物理化学的方法が大勢を占め、微生物的方
法は、石油に含まれる有機溶媒により微生物が死滅して
しまうことから、敬遠されがちである。
【０００４】したがって、硫黄化合物酸化能を有する有
機溶媒耐性微生物の出現が嘱望されているが、このよう
な機能を十分に備えた微生物は、未だ発見されていな
い。
機溶媒耐性微生物の出現が嘱望されているが、このよう
な機能を十分に備えた微生物は、未だ発見されていな
い。
【０００５】石油の脱硫には、チオフェン、ジベンゾチ
オフェン或はメチルエチルスルフィドなどの有機硫黄化
合物が効率よく分解することが要求されると共に、石油
に含まれる有機溶媒であるベンゼン、トルエン、キシレ
ン或はヘキサンに対する耐性も要求されるが、このよう
な機能を備えた微生物は、なおのこと見出されていな
い。
オフェン或はメチルエチルスルフィドなどの有機硫黄化
合物が効率よく分解することが要求されると共に、石油
に含まれる有機溶媒であるベンゼン、トルエン、キシレ
ン或はヘキサンに対する耐性も要求されるが、このよう
な機能を備えた微生物は、なおのこと見出されていな
い。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】したがって、この発明
の目的は、硫黄化合物酸化性及び有機溶媒耐性に優れた
微生物を提供することにある。
の目的は、硫黄化合物酸化性及び有機溶媒耐性に優れた
微生物を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本願発明者等は、上記条
件を兼ね備えた微生物を見出すべく鋭意検討を重ねた結
果、北海道硫黄山から分離された菌株、即ちバチルス(B
acillus)属に属する菌株が、上記条件を備えていること
を見出し、その発見に基づいてこの発明を完成させたも
のである。
件を兼ね備えた微生物を見出すべく鋭意検討を重ねた結
果、北海道硫黄山から分離された菌株、即ちバチルス(B
acillus)属に属する菌株が、上記条件を備えていること
を見出し、その発見に基づいてこの発明を完成させたも
のである。
【０００８】即ち、この発明は硫黄化合物酸化性及び有
機溶媒耐性を有するバチルス(Bacillus)属に属する新規
微生物を提供するものである。
機溶媒耐性を有するバチルス(Bacillus)属に属する新規
微生物を提供するものである。
【０００９】この新規微生物の一つとして、バチルス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ｓｐ．Ｚ−１株を挙げることがで
き、この菌株の単離は、下記の方法によって行った。
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ｓｐ．Ｚ−１株を挙げることがで
き、この菌株の単離は、下記の方法によって行った。
【００１０】予め、試料である土壌を50% のベンゼンで
処理した後、ベンゼン層に移行した細胞を、酵母エキス
0.5%、トリプトン1.0%、塩化ナトリウム0.5%、塩化カル
シウム0.05% 、塩化マグネシウム0.01% からなる培地
（改変ＬＢ培地と命名し、以下ＬＢ−IIと記す）を基準
にして、更にフェノールレッド0.003%、チオ硫酸ナトリ
ウム10% 及び寒天2%を添加した寒天培地で培養し、コロ
ニーの数株を得る。
処理した後、ベンゼン層に移行した細胞を、酵母エキス
0.5%、トリプトン1.0%、塩化ナトリウム0.5%、塩化カル
シウム0.05% 、塩化マグネシウム0.01% からなる培地
（改変ＬＢ培地と命名し、以下ＬＢ−IIと記す）を基準
にして、更にフェノールレッド0.003%、チオ硫酸ナトリ
ウム10% 及び寒天2%を添加した寒天培地で培養し、コロ
ニーの数株を得る。
【００１１】これらの内、コロニーの周りに透明帯を形
成したものについて、更にチオ硫酸ナトリウム１０％を
含むＬＢ−ＩＩ培地で培養し、培養後培地のｐＨの低下
が最も大きいものを選択した。これが、この発明に係る
新規微生物であるバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ｓｐ．
Ｚ−１株である。
成したものについて、更にチオ硫酸ナトリウム１０％を
含むＬＢ−ＩＩ培地で培養し、培養後培地のｐＨの低下
が最も大きいものを選択した。これが、この発明に係る
新規微生物であるバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ｓｐ．
Ｚ−１株である。
【００１２】この菌株は、生命工学工業技術研究所に平
成５年２月17日付けで寄託され、その微生物寄託番号
は、FERM P-13435（以下、Ｚ−１株と記す）である。
成５年２月17日付けで寄託され、その微生物寄託番号
は、FERM P-13435（以下、Ｚ−１株と記す）である。
【００１３】この発明に係る微生物は、上記Ｚ−１株の
ほか、自然的及び人工的変異株をも含むものである。
ほか、自然的及び人工的変異株をも含むものである。
【００１４】次に、この発明に係る微生物の菌学的性質
について詳細に説明する。Ｚ−１株は、次の菌学的諸性
質を有する。
について詳細に説明する。Ｚ−１株は、次の菌学的諸性
質を有する。
【００１５】（１）形態 大きさ：0.5 ×(1.0〜3.0)μm の短捍菌。胞子：形成す
る。 運動性：有り。グラム染色は陽性で有る。
る。 運動性：有り。グラム染色は陽性で有る。
【００１６】（２）生理的性質 硝酸塩の還元 ：陽性 澱粉の加水分解：陰性 色素の生成 ：なし オキシダーゼ ：陰性 カタラーゼ ：陽性 生育範囲 pH ：5.9 〜10.5( 最適7.0) 温度：14〜52℃( 最適37℃) 酸素要求性 ：好気性 ＯＦテスト ：酸化性
【００１７】（３）その他の性質 塩化ナトリウムの要求性：0.01〜4.5 モルの塩化ナト
リウムで生育 ゼラチンの加水分解 ：陽性 カゼインの加水分解 ：陰性
リウムで生育 ゼラチンの加水分解 ：陽性 カゼインの加水分解 ：陰性
【００１８】以上の菌学的性質からバージー・マニュア
ル第８巻の分類方法に従って、バチルス（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ）属に属する新規の菌株であると判断し、バチルス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ｓｐ．Ｚ−１株と命名した。
ル第８巻の分類方法に従って、バチルス（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ）属に属する新規の菌株であると判断し、バチルス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ｓｐ．Ｚ−１株と命名した。
【００１９】
【実施例】以下、この発明を実施例に基づいて詳細に説
明する。 実施例１ Ｚ−１株の採取方法 土壌10g にベンゼン10mlを添加し、30℃で１週間緩やか
に浸盪培養を行った。培養後、培養物を１時間静置して
ベンゼン層と水層とに分離し、ベンゼン層の50μl をチ
オ硫酸ナトリウム10% 、フェノールレッド0.003%及び寒
天2.0%を含むＬＢ−II寒天培地に塗抹し、37℃で７日間
浸盪培養を行った。
明する。 実施例１ Ｚ−１株の採取方法 土壌10g にベンゼン10mlを添加し、30℃で１週間緩やか
に浸盪培養を行った。培養後、培養物を１時間静置して
ベンゼン層と水層とに分離し、ベンゼン層の50μl をチ
オ硫酸ナトリウム10% 、フェノールレッド0.003%及び寒
天2.0%を含むＬＢ−II寒天培地に塗抹し、37℃で７日間
浸盪培養を行った。
【００２０】培養後、生育したコロニーの中で、コロニ
ーの周りに透明帯を生じたものを釣り菌し、単離後チオ
硫酸ナトリウム10% を含むＬＢ−II培地に各々接種し、
37℃で７日間浸盪培養を行った。これらの操作の後、成
育したコロニーの内、培地pHを最も低下させたＺ−１株
を得た。
ーの周りに透明帯を生じたものを釣り菌し、単離後チオ
硫酸ナトリウム10% を含むＬＢ−II培地に各々接種し、
37℃で７日間浸盪培養を行った。これらの操作の後、成
育したコロニーの内、培地pHを最も低下させたＺ−１株
を得た。
【００２１】実施例２ 有機溶媒耐性試験 菌体の前培養は、大型試験管にＬＢ−II培地10mlを入
れ、シリコン栓を付して滅菌した後、Ｚ−１株を保存ス
ラントから一白金耳採って培地に接種し、37℃で一昼夜
激しく浸盪培養した。
れ、シリコン栓を付して滅菌した後、Ｚ−１株を保存ス
ラントから一白金耳採って培地に接種し、37℃で一昼夜
激しく浸盪培養した。
【００２２】次に大型試験管にＬＢ−II培地10mlを入
れ、滅菌後、上記Ｚ−１前培養液0.05mlを接種した。こ
れを下記表１の濃度となるよう各種有機溶媒を重層し、
30℃で５日間浸盪培養を行った。培養後、静置して有機
溶媒層を分離し、Ｚ−１株の増殖に伴う濁度を分光光度
計を用いて、波長660nm のＯ・Ｄ（吸光度）で測定し、
その結果を下記表１に示す。
れ、滅菌後、上記Ｚ−１前培養液0.05mlを接種した。こ
れを下記表１の濃度となるよう各種有機溶媒を重層し、
30℃で５日間浸盪培養を行った。培養後、静置して有機
溶媒層を分離し、Ｚ−１株の増殖に伴う濁度を分光光度
計を用いて、波長660nm のＯ・Ｄ（吸光度）で測定し、
その結果を下記表１に示す。
【００２３】
【表１】
【００２４】実施例３ 有機硫黄化合物分解試験（１） 前培養は実施例２と同じ方法で行った。次に、大型試験
管にＬＢ−II培地10mlを入れ、シリコン栓を付して加熱
滅菌した後、上記前培養液0.05mlを接種し、更に下記表
２に示した各種有機硫黄化合物をその全硫黄濃度が0.2%
となるよう調整したベンゼン１％含有ジーゼル油10mlを
重層し、30℃で10日間浸盪培養を行った。培養後、１時
間静置して培地層とジーゼル油とに分離した。
管にＬＢ−II培地10mlを入れ、シリコン栓を付して加熱
滅菌した後、上記前培養液0.05mlを接種し、更に下記表
２に示した各種有機硫黄化合物をその全硫黄濃度が0.2%
となるよう調整したベンゼン１％含有ジーゼル油10mlを
重層し、30℃で10日間浸盪培養を行った。培養後、１時
間静置して培地層とジーゼル油とに分離した。
【００２５】放置後、ジーゼル油1ml を採り、パーキン
・エルマー社製の全硫黄測定装置にて残存全硫黄濃度を
測定した。別に対照として
・エルマー社製の全硫黄測定装置にて残存全硫黄濃度を
測定した。別に対照として
【００２６】対照実験：上記操作で菌体無接種の場合
の全硫黄濃度を測定した。 対照実験：各種有機硫黄化合物の20mgをＬＢ−II培地
10mlに懸濁し、Ｚ−１株で上記と同様に培養処理後、ベ
ンゼン１％含有ジーゼル油10mlで硫黄化合物を抽出して
残存全硫黄濃度を測定した。 その結果を下記表２に示す。
の全硫黄濃度を測定した。 対照実験：各種有機硫黄化合物の20mgをＬＢ−II培地
10mlに懸濁し、Ｚ−１株で上記と同様に培養処理後、ベ
ンゼン１％含有ジーゼル油10mlで硫黄化合物を抽出して
残存全硫黄濃度を測定した。 その結果を下記表２に示す。
【００２７】
【表２】
【００２８】実施例４ 有機硫黄化合物分解試験（２） 前培養は実施例２と同じ方法で行った。有機硫黄化合物
分解試験は、ジーゼル油の代わりに灯油を使用する以
外、実施例３と同じ方法で行った。その結果を下記表３
に示す。
分解試験は、ジーゼル油の代わりに灯油を使用する以
外、実施例３と同じ方法で行った。その結果を下記表３
に示す。
【００２９】
【表３】
【００３０】
【発明の効果】この発明に係る微生物は、硫黄化合物酸
化性並びに有機溶媒耐性に優れ、特に石油に含まれる有
機硫黄化合物の除去に利用することができる。
化性並びに有機溶媒耐性に優れ、特に石油に含まれる有
機硫黄化合物の除去に利用することができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１０Ｇ 32/00 Ａ 6958−4Ｈ Ｃ１２Ｓ 1/02 8931−4Ｂ (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:07） (Ｃ１２Ｓ 1/02 Ｃ１２Ｒ 1:07）
Claims (1)
- 【請求項１】 硫黄化合物酸化性、及び有機溶媒耐性を
有するバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）ｓｐ．Ｚ−１株
（ＦＥＲＭ Ｐ−１３４３５）である新規微生物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5109741A JPH0824567B2 (ja) | 1993-04-14 | 1993-04-14 | バチルス属に属する新規微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5109741A JPH0824567B2 (ja) | 1993-04-14 | 1993-04-14 | バチルス属に属する新規微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06296483A JPH06296483A (ja) | 1994-10-25 |
| JPH0824567B2 true JPH0824567B2 (ja) | 1996-03-13 |
Family
ID=14518076
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5109741A Expired - Fee Related JPH0824567B2 (ja) | 1993-04-14 | 1993-04-14 | バチルス属に属する新規微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0824567B2 (ja) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5198341A (en) | 1990-01-05 | 1993-03-30 | Institute Of Gas Technology | Useful for cleavage of organic C-S bonds Bacillus sphaericus microorganism |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0562313A1 (en) * | 1992-03-12 | 1993-09-29 | Institute of Gas Technology | Biochemical cleavage of organic C-S bonds |
| JPH07103379B2 (ja) * | 1992-11-13 | 1995-11-08 | 工業技術院長 | バイオ脱硫法 |
-
1993
- 1993-04-14 JP JP5109741A patent/JPH0824567B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5198341A (en) | 1990-01-05 | 1993-03-30 | Institute Of Gas Technology | Useful for cleavage of organic C-S bonds Bacillus sphaericus microorganism |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH06296483A (ja) | 1994-10-25 |
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Legal Events
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