JPH074264B2 - 発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法Info
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- JPH074264B2 JPH074264B2 JP60268035A JP26803585A JPH074264B2 JP H074264 B2 JPH074264 B2 JP H074264B2 JP 60268035 A JP60268035 A JP 60268035A JP 26803585 A JP26803585 A JP 26803585A JP H074264 B2 JPH074264 B2 JP H074264B2
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は調味料、飼料添加剤、医薬等に広く利用されて
いるL-グルタミン酸、L-リジン、L-グルタミン、L-アル
ギニン、L-フェニルアラニン、L-スレオニン、L-イソロ
イシン、L-ヒスチジン、L-プロリン、L-バリン、L-セリ
ン、L-オルニチン、L-シトルリン、L-チロシン、L-トリ
プトファンおよびL-ロイシンなどのL-アミノ酸の製造法
に関するものである。
いるL-グルタミン酸、L-リジン、L-グルタミン、L-アル
ギニン、L-フェニルアラニン、L-スレオニン、L-イソロ
イシン、L-ヒスチジン、L-プロリン、L-バリン、L-セリ
ン、L-オルニチン、L-シトルリン、L-チロシン、L-トリ
プトファンおよびL-ロイシンなどのL-アミノ酸の製造法
に関するものである。
（従来の技術） 従来よりブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム
属、バチルス属又はエセリヒア属等に属する微生物によ
り、L-グルタミン酸、L-リジン、L-グルタミン、L-アル
ギニン、L-フェニルアラニン、L-スレオニン、L-イソロ
イシン、L-ヒスチジン、L-プロリン、L-バリン、L-セリ
ン、L-オルニチン、L-シトルリン、L-チロシン、L-トリ
プトファンおよびL-ロイシンなどのL-アミノ酸は発酵法
により工業的に生産されている。
属、バチルス属又はエセリヒア属等に属する微生物によ
り、L-グルタミン酸、L-リジン、L-グルタミン、L-アル
ギニン、L-フェニルアラニン、L-スレオニン、L-イソロ
イシン、L-ヒスチジン、L-プロリン、L-バリン、L-セリ
ン、L-オルニチン、L-シトルリン、L-チロシン、L-トリ
プトファンおよびL-ロイシンなどのL-アミノ酸は発酵法
により工業的に生産されている。
L-グルタミン酸発酵に於いてはハイテストモラセスとケ
インモラセスを混合利用する事により相乗効果がある事
が知られている。
インモラセスを混合利用する事により相乗効果がある事
が知られている。
（本発明が解決しようとする問題点） L-アミノ酸を発酵法により工業的に従来以上に安価なL-
アミノ酸を生産する方法を開発することにある。
アミノ酸を生産する方法を開発することにある。
（問題を解決しようとするための手段） 本発明者らはL-アミノ酸の発酵蓄積，収率，生育速度を
さらに向上させ、工業的に有利な発酵法によるL-アミノ
酸の製造法を開発すべく鋭意研究した結果、ハイテスト
モラセスとグルコースを、ハイテストモラセス中の糖分
をグルコース換算した値で0.1:9.9から7:3迄の範囲のい
ずれかの割合になるようにハイテストモラセスとグルコ
ースを炭素源として利用することにより、ハイテストモ
ラセス又はグルコースを単独で用いる場合より、高い蓄
積，収率及び従来より短時間でL-アミノ酸を生産される
ことを知った。この発明はこの知見に基いて更に研究の
結果完成されるに到ったものである。
さらに向上させ、工業的に有利な発酵法によるL-アミノ
酸の製造法を開発すべく鋭意研究した結果、ハイテスト
モラセスとグルコースを、ハイテストモラセス中の糖分
をグルコース換算した値で0.1:9.9から7:3迄の範囲のい
ずれかの割合になるようにハイテストモラセスとグルコ
ースを炭素源として利用することにより、ハイテストモ
ラセス又はグルコースを単独で用いる場合より、高い蓄
積，収率及び従来より短時間でL-アミノ酸を生産される
ことを知った。この発明はこの知見に基いて更に研究の
結果完成されるに到ったものである。
即ち、この発明は、ハイテストモラセスとグルコースを
ハイテストモラセス中の糖分をグルコース換算した値で
0.1:9.9から7:3迄の範囲のいずれかの割合になるように
ハイテストモラセスとグルコースを炭素源として併用し
てL-アミノ酸生産菌を培養することを特徴とする発酵法
によるL-アミノ酸の製造法である。
ハイテストモラセス中の糖分をグルコース換算した値で
0.1:9.9から7:3迄の範囲のいずれかの割合になるように
ハイテストモラセスとグルコースを炭素源として併用し
てL-アミノ酸生産菌を培養することを特徴とする発酵法
によるL-アミノ酸の製造法である。
ハイテストモラセスは転化糖蜜（INVERT MOLASSES）、
転化シロップ（INVERT SIRUP）ともいわれ、サトウキビ
の圧搾汁の清浄汁をインベルターゼで転化処理し濃縮し
たもので、通常グルコース、フラクトースへの転化率は
75％以上で、糖分として70％以上を含むものである。本
明細書では以下すべてこの糖分をグルコースに換算した
値をベースに、グルコースとの割合を示している。
転化シロップ（INVERT SIRUP）ともいわれ、サトウキビ
の圧搾汁の清浄汁をインベルターゼで転化処理し濃縮し
たもので、通常グルコース、フラクトースへの転化率は
75％以上で、糖分として70％以上を含むものである。本
明細書では以下すべてこの糖分をグルコースに換算した
値をベースに、グルコースとの割合を示している。
本発明でいうL-アミノ酸とはL-グルタミン酸、L-リジ
ン、L-グルタミン、L-アルギニン、L-フェニルアラニ
ン、L-スレオニン、L-イソロイシン、L-ヒスチジン、L-
プロリン、L-バリン、L-セリン、L-オルニチン、L-シト
ルリン、L-チロシン、L-トリプトファンおよびL-ロイシ
ンなどのL-アミノ酸であり、ここに例示したL-アミノ酸
以外でも発酵法により生産されるL-アミノ酸であれば本
発明の方法は使用可能である。
ン、L-グルタミン、L-アルギニン、L-フェニルアラニ
ン、L-スレオニン、L-イソロイシン、L-ヒスチジン、L-
プロリン、L-バリン、L-セリン、L-オルニチン、L-シト
ルリン、L-チロシン、L-トリプトファンおよびL-ロイシ
ンなどのL-アミノ酸であり、ここに例示したL-アミノ酸
以外でも発酵法により生産されるL-アミノ酸であれば本
発明の方法は使用可能である。
本発明で用いるL-アミノ酸生産菌は上記のL-アミノ酸を
生産する微生物であればどのような微生物を用いてもよ
い。
生産する微生物であればどのような微生物を用いてもよ
い。
又本発明でいうグルコースとは結晶グルコース液状グル
コース，デンプン加水分解物，セルロース加水分解物等
である。
コース，デンプン加水分解物，セルロース加水分解物等
である。
具体的に使用するL-アミノ酸生産菌株としては、 １ L-グルタミン酸生産菌 ブレビバクテリウム・デイバリカタム ATCC14020
ブレビバクテリウム・フラバム ATCC14067 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム ATCC13869
ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P5012
（AJ11360） コリネバクテリウム・アセトアシドフイラム ATCC13870
コリネバクテリウム・グルタミクム ATCC13032
２ L-リジン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P1708（AJ3419） コリネバクテリウム・グルタミクム FERM-P1709（AJ342
0） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1712
（AJ3425） ブレビバクテリウム．ラクトフェルメンタムFERM-P1711
（AJ3424） ３ L-グルタミン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P5502（AJ11576） ４ L-アルギニン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P7642（AJ12144） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P7274（AJ1209
3） ５ L-フェニルアラニン生産菌 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1844
（AJ3432） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P1916（AJ3439） コリネバクテリウム・グルタミクムATCC21670
６ L-スレオニン生産菌 エセルヒア・コリ FERM-P4900（AJ11334） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P5835（AJ1165
4） ブレビバクテリウム・フラバムFERM-P4164（AJ11172） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P4180
（AJ11178） ７ L-イソロイシン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P805（AJ3271） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P4192
（AJ11190） ８ L-ヒスチジン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P2316（AJ3620） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1565
（AJ3386） コリネバクテリウム・グルタミクム ATCC14297
９ L-プロリン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P5332（AJ11512） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P4370
（AJ11225） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P4372（AJ1122
7） 10 L-バリン生産菌 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1945
（AJ3446） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P512（AJ3276） コリネバクテリウム・ラクトフェルメンタム FERM-P1968（AJ3455） 11 L-セリン生産菌 コリネバクテリウム・グリシノフイラムFERM-P1688（AJ
3414） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1371
（AJ3360） シユウドモナス・メガルブエッセンスFERM-P4532（AJ11
262） 12 L-オルニチン生産菌 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P5936
（AJ11678） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P5644（AJ1158
9） 13 L-シトルリン生産菌 コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P5643（AJ1158
8） ブレビバクテリウム・フラバムFERM-P1645（AJ3408） 14 L-チロシン生産菌 コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P5836（AJ1165
5） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P7914（AJ12180） バチルス・ズブチリス FERM-P6758（AJ11968） 15 L-トリプトファン生産菌 バチルス・ズブチリス FERM-P5286（AJ11483） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P7127
（AJ12044） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P7034（AJ12022） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P7128（AJ1205
2） 16 L-ロイシン生産菌 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1769
（AJ3427） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P420（AJ3226） コリネバクテリウム・グルタミクム FERM-P1966（AJ345
3） などが使用される。
ブレビバクテリウム・フラバム ATCC14067 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム ATCC13869
ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P5012
（AJ11360） コリネバクテリウム・アセトアシドフイラム ATCC13870
コリネバクテリウム・グルタミクム ATCC13032
２ L-リジン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P1708（AJ3419） コリネバクテリウム・グルタミクム FERM-P1709（AJ342
0） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1712
（AJ3425） ブレビバクテリウム．ラクトフェルメンタムFERM-P1711
（AJ3424） ３ L-グルタミン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P5502（AJ11576） ４ L-アルギニン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P7642（AJ12144） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P7274（AJ1209
3） ５ L-フェニルアラニン生産菌 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1844
（AJ3432） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P1916（AJ3439） コリネバクテリウム・グルタミクムATCC21670
６ L-スレオニン生産菌 エセルヒア・コリ FERM-P4900（AJ11334） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P5835（AJ1165
4） ブレビバクテリウム・フラバムFERM-P4164（AJ11172） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P4180
（AJ11178） ７ L-イソロイシン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P805（AJ3271） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P4192
（AJ11190） ８ L-ヒスチジン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P2316（AJ3620） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1565
（AJ3386） コリネバクテリウム・グルタミクム ATCC14297
９ L-プロリン生産菌 ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P5332（AJ11512） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P4370
（AJ11225） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P4372（AJ1122
7） 10 L-バリン生産菌 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1945
（AJ3446） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P512（AJ3276） コリネバクテリウム・ラクトフェルメンタム FERM-P1968（AJ3455） 11 L-セリン生産菌 コリネバクテリウム・グリシノフイラムFERM-P1688（AJ
3414） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1371
（AJ3360） シユウドモナス・メガルブエッセンスFERM-P4532（AJ11
262） 12 L-オルニチン生産菌 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P5936
（AJ11678） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P5644（AJ1158
9） 13 L-シトルリン生産菌 コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P5643（AJ1158
8） ブレビバクテリウム・フラバムFERM-P1645（AJ3408） 14 L-チロシン生産菌 コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P5836（AJ1165
5） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P7914（AJ12180） バチルス・ズブチリス FERM-P6758（AJ11968） 15 L-トリプトファン生産菌 バチルス・ズブチリス FERM-P5286（AJ11483） ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P7127
（AJ12044） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P7034（AJ12022） コリネバクテリウム・グルタミクムFERM-P7128（AJ1205
2） 16 L-ロイシン生産菌 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムFERM-P1769
（AJ3427） ブレビバクテリウム・フラバム FERM-P420（AJ3226） コリネバクテリウム・グルタミクム FERM-P1966（AJ345
3） などが使用される。
本発明で使用するL-アミノ酸生産培地としては、従来よ
り知られているL-アミノ酸生産菌に適したL-アミノ酸生
産培地が使用可能である。
り知られているL-アミノ酸生産菌に適したL-アミノ酸生
産培地が使用可能である。
本発明においてハイテストモラセスとグルコースは予め
0.1:9.9ないし7:3の割合で混合したのち他の培地成分と
混合してもよいが、別々に他の培地成分と混合してもよ
い。
0.1:9.9ないし7:3の割合で混合したのち他の培地成分と
混合してもよいが、別々に他の培地成分と混合してもよ
い。
本発明において用いられる培地は、上記特定の炭素源を
含有する以外は、L-アミノ酸発酵においてよく使用され
ている培地成分を含有する通常の培地を用いることがで
きる。L-アミノ酸生産菌の培養方法においても従来の方
法と格別異る方法を採用する必要はない。
含有する以外は、L-アミノ酸発酵においてよく使用され
ている培地成分を含有する通常の培地を用いることがで
きる。L-アミノ酸生産菌の培養方法においても従来の方
法と格別異る方法を採用する必要はない。
培養の間、ハイテストモラセスとグルコースが0.1:9.9
ないし7:3の割合になるように培地に追補添加してもよ
い。
ないし7:3の割合になるように培地に追補添加してもよ
い。
なお各アミノ酸発酵液からの各々のアミノ酸の単離方法
は常法に従って行なえば良く、特別な方法を必要としな
い。
は常法に従って行なえば良く、特別な方法を必要としな
い。
ハイテストモラセス（HTM）とグルコース（Glc）を表‐
１に示すような割合で混合し糖液８種（Ａ〜Ｈ）を調製
した。
１に示すような割合で混合し糖液８種（Ａ〜Ｈ）を調製
した。
実施例１ グルコース3g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、MgSO4・7H2O 0.05g
/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O 1mg/dl、尿素
0.5g/dl、ビオチン300μg/、サイアミン塩酸塩3000μ
g/、大豆蛋白酸化水分解液を全窒素として100mg/dlを
含む種母培地をpH7.5に調節し、その50mlを500ml容肩付
フラスコに入れ加熱殺菌した。ブレビバクテリウム・ラ
クトフエルメンタムFERM-P5012（AJ11360）を接種し、3
1.5℃に保ちつつ、16時間振盪培養した。
/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O 1mg/dl、尿素
0.5g/dl、ビオチン300μg/、サイアミン塩酸塩3000μ
g/、大豆蛋白酸化水分解液を全窒素として100mg/dlを
含む種母培地をpH7.5に調節し、その50mlを500ml容肩付
フラスコに入れ加熱殺菌した。ブレビバクテリウム・ラ
クトフエルメンタムFERM-P5012（AJ11360）を接種し、3
1.5℃に保ちつつ、16時間振盪培養した。
一方、表‐１で調製した糖液8g/dl、KH2PO4 0.2g/dl、M
gSO4・7H2O 0.05g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H
2O 1mg/dl、ビオチン100μg/、サイアミンHCl 500μg
/、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として50mg/dlを含
むpH7.5に調節した培地の285mlを１容ファーメンター
に入れ殺菌した。これに上記種母培地を夫々15mlずつ接
種した。培養は35℃、回転数1,000rpmでアンモニアガス
にてpH7.5〜7.8に保持しつつ行った。
gSO4・7H2O 0.05g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H
2O 1mg/dl、ビオチン100μg/、サイアミンHCl 500μg
/、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として50mg/dlを含
むpH7.5に調節した培地の285mlを１容ファーメンター
に入れ殺菌した。これに上記種母培地を夫々15mlずつ接
種した。培養は35℃、回転数1,000rpmでアンモニアガス
にてpH7.5〜7.8に保持しつつ行った。
培養12時間目からは培養液中のグルコース濃度が１〜3g
/dlの範囲にコントロールされるように50g/dlの表−１
で調製した糖液を連続的にフィードしながら48時間まで
培養を続けた。尚、各区分の培養は総糖量が一定の条件
で行った。以後の実施例についても同様である。
/dlの範囲にコントロールされるように50g/dlの表−１
で調製した糖液を連続的にフィードしながら48時間まで
培養を続けた。尚、各区分の培養は総糖量が一定の条件
で行った。以後の実施例についても同様である。
その結果生成したL-グルタミン酸の量は、表‐２に示す
通りであった。
通りであった。
実施例２ 表‐３の組成の種母培地を500ml容の振盪フラスコに50m
l宛分注し、110℃にて５分間加熱滅菌した後ブレビバク
テリウム・フラバムFERM-P1708（AJ3419）を接種し31.5
℃、20時間振盪培養を行い、種培養液を得た。一方、28
5mlのL-リジン生産用培地と表−１で調製した糖液13g/d
lを1.0容のジャーファーメンター２基に張り込み120
℃で15分間滅菌し、これに上記種培養液を夫々15ml宛接
種し、アンモニアにてpHを6.5から7.0にコントロールし
つつ、31.5℃、回転数1,000rpmで培養した。
l宛分注し、110℃にて５分間加熱滅菌した後ブレビバク
テリウム・フラバムFERM-P1708（AJ3419）を接種し31.5
℃、20時間振盪培養を行い、種培養液を得た。一方、28
5mlのL-リジン生産用培地と表−１で調製した糖液13g/d
lを1.0容のジャーファーメンター２基に張り込み120
℃で15分間滅菌し、これに上記種培養液を夫々15ml宛接
種し、アンモニアにてpHを6.5から7.0にコントロールし
つつ、31.5℃、回転数1,000rpmで培養した。
培養36時間目からは、培養液中のグルコース濃度が１〜
3g/dlの範囲にコントロールされるように、50g/dlの表
−１で調製した糖液と3g/dlの硫酸アンモニウムの混合
溶液を連続的にフィードしながら96時間まで培養を続け
た。生成したL-リジン量は表‐４に示す通りであった。
3g/dlの範囲にコントロールされるように、50g/dlの表
−１で調製した糖液と3g/dlの硫酸アンモニウムの混合
溶液を連続的にフィードしながら96時間まで培養を続け
た。生成したL-リジン量は表‐４に示す通りであった。
実施例３ グルコース5g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g
/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O 1mg/dl、尿素
0.3g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として100mg/d
l、サイアミンHCl 30g/dl、ビオチン20g/dlを含む種母
培地をpH7.0に調節し、その50mlを500ml容肩付フラスコ
に入れ加熱殺菌した。ブレビバクテリウム・フラバムFE
RM-P7642（AJ12144）を接種し、31.5℃に保ちつつ16時
間振盪培養した。
/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O 1mg/dl、尿素
0.3g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として100mg/d
l、サイアミンHCl 30g/dl、ビオチン20g/dlを含む種母
培地をpH7.0に調節し、その50mlを500ml容肩付フラスコ
に入れ加熱殺菌した。ブレビバクテリウム・フラバムFE
RM-P7642（AJ12144）を接種し、31.5℃に保ちつつ16時
間振盪培養した。
一方、表−１で混合調製した糖液14g/dl、KH2PO4 0.1/d
l、MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4
・4H2O 1mg/dl、硫安3.0g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を
全窒素として65mg/dl、サイアミン塩酸塩５μg/dl、ビ
オチン５μg/dlを含むpH7.0に調節した培地の285mlを１
容ファーメンターに入れ殺菌した。これに上記種母培
地を夫々15mlずつ接種した。培養は31.5℃、回転数1,00
0rpmでアンモニアガスにてpH6.5ないし7.0に保持しつつ
行った。
l、MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4
・4H2O 1mg/dl、硫安3.0g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を
全窒素として65mg/dl、サイアミン塩酸塩５μg/dl、ビ
オチン５μg/dlを含むpH7.0に調節した培地の285mlを１
容ファーメンターに入れ殺菌した。これに上記種母培
地を夫々15mlずつ接種した。培養は31.5℃、回転数1,00
0rpmでアンモニアガスにてpH6.5ないし7.0に保持しつつ
行った。
培養36時間目からは培養液中のグルコース濃度が１〜3g
/dlの範囲にコントロールされるように50g/dlの表−１
で調製した糖液を連続的にフィードしながら96時間まで
培養を続けた。
/dlの範囲にコントロールされるように50g/dlの表−１
で調製した糖液を連続的にフィードしながら96時間まで
培養を続けた。
その結果生成したL-アルギニン量は表−５に示す通りで
あった。
あった。
実施例４ 表‐６の組成の種母培地を500ml容の振盪フラスコに50m
l宛分注し、120℃にて５分間加熱殺菌した後ブレビバク
テリウム・ラクトフエルメンタムFERM-P1844（AJ3432）
を接種し、31.5℃で20時間振盪培養を行い種培養液を得
た。一方、285mlのL-フェニルアラニン生産用培地と表
−１で調製した糖液15g/dlを1.0容のジャーファーメ
ンターに張り込み120℃で10分間滅菌し、これに上記種
培養液を夫々15ml宛接種し、アンモニアにてpHを6.5〜
7.5にコントロールしつつ31.5℃で、回転数1,000rpmで
通気は空気（0.3VVM）で120時間培養した。
l宛分注し、120℃にて５分間加熱殺菌した後ブレビバク
テリウム・ラクトフエルメンタムFERM-P1844（AJ3432）
を接種し、31.5℃で20時間振盪培養を行い種培養液を得
た。一方、285mlのL-フェニルアラニン生産用培地と表
−１で調製した糖液15g/dlを1.0容のジャーファーメ
ンターに張り込み120℃で10分間滅菌し、これに上記種
培養液を夫々15ml宛接種し、アンモニアにてpHを6.5〜
7.5にコントロールしつつ31.5℃で、回転数1,000rpmで
通気は空気（0.3VVM）で120時間培養した。
培養液中のL-フェニルアラニン生成量は表‐７に示す通
りであった。
りであった。
実施例５ グルコース5g/dl、（NH4）2SO4 0.2g/dl、尿素0.2g/d
l、KH2PO4 0.15g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7
H2O 1mg/dl、サイアミン・HCl 100μg/、ビオチン300
μg/、大豆蛋白酸加水分解液全窒素として140mg/dlを
含む種母培地をpH7.0に調節し、その50mlを500ml容肩付
フラスコに入れ加熱殺菌した。コリネバクテリウム・グ
ルタミウムFERM-P5835（AJ11654）を接種し、31.5℃に
保ちつつ、12時間振盪培養し種母培養液を得た。
l、KH2PO4 0.15g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7
H2O 1mg/dl、サイアミン・HCl 100μg/、ビオチン300
μg/、大豆蛋白酸加水分解液全窒素として140mg/dlを
含む種母培地をpH7.0に調節し、その50mlを500ml容肩付
フラスコに入れ加熱殺菌した。コリネバクテリウム・グ
ルタミウムFERM-P5835（AJ11654）を接種し、31.5℃に
保ちつつ、12時間振盪培養し種母培養液を得た。
一方、表−１で調製した糖液11g/dl、KH2PO4 0.25g/d
l、MgSO4・7H2O 40mg/dl、（NH4）2SO4 1.0g/dl、MnSO4
・4H2O 1mg/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、L-イソロイシン4
0mg/dl、ビオチン50μg/dl、サイアミン・HCl 5000μg/
dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として32mg/dlを含
むpH6.5に調製した培地の285mlを１容ファーメンター
に入れ殺菌した。これに上記種母培養液をそれぞれ15ml
ずつ接種した。培養は31.5℃にてアンモニアガスにてpH
6.5ないし7.0に保持しつつ、回転数1000rpmで培養を開
始した。
l、MgSO4・7H2O 40mg/dl、（NH4）2SO4 1.0g/dl、MnSO4
・4H2O 1mg/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、L-イソロイシン4
0mg/dl、ビオチン50μg/dl、サイアミン・HCl 5000μg/
dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として32mg/dlを含
むpH6.5に調製した培地の285mlを１容ファーメンター
に入れ殺菌した。これに上記種母培養液をそれぞれ15ml
ずつ接種した。培養は31.5℃にてアンモニアガスにてpH
6.5ないし7.0に保持しつつ、回転数1000rpmで培養を開
始した。
培養12時間目からは培養液中のグルコース濃度が２〜4g
/dlの範囲にコントロールされるように、別に殺菌した
表−１で調製した糖液50g/dl、KH2PO4 0.25g/dl、MgSO4
・7H2O 40mg/dl、（NH4）2SO4 1.0g/dl、MnSO4・4H2O 1
mg/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、ビオチン50μg/dl、サイ
アミンHCl 5,000μg/dl、L-イソロイシン40mg/dlを含む
溶液を連続的にフィードしながら72時間培養を行った。
培養後に得られたL-スレオニこの生成は表８に示す通り
であった。
/dlの範囲にコントロールされるように、別に殺菌した
表−１で調製した糖液50g/dl、KH2PO4 0.25g/dl、MgSO4
・7H2O 40mg/dl、（NH4）2SO4 1.0g/dl、MnSO4・4H2O 1
mg/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、ビオチン50μg/dl、サイ
アミンHCl 5,000μg/dl、L-イソロイシン40mg/dlを含む
溶液を連続的にフィードしながら72時間培養を行った。
培養後に得られたL-スレオニこの生成は表８に示す通り
であった。
実施例６ グルコース2.0g/dl、KH2PO4 0.15g/dl、MgSO4・7H2O 0.
04g/dl、FeSO4・7H2O 0.001g/dl、MnSO4・4H2O 0.001g/
dl、尿素0.2g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素とし
て200mg/dl、サイアミン30μg/dl、ビオチン20μg/dl、
フマール酸0.5g/dlを含む種母培地をpH8.0に調節し、そ
の50mlを500ml容肩付フラスコに入れ、加熱殺菌した。
これに菌株ブレビバクテリウム・フラバムFERM-P805（A
J3271）をそれぞれ接種し、31.5℃に保ちつつ、18時間
振盪培養した。
04g/dl、FeSO4・7H2O 0.001g/dl、MnSO4・4H2O 0.001g/
dl、尿素0.2g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素とし
て200mg/dl、サイアミン30μg/dl、ビオチン20μg/dl、
フマール酸0.5g/dlを含む種母培地をpH8.0に調節し、そ
の50mlを500ml容肩付フラスコに入れ、加熱殺菌した。
これに菌株ブレビバクテリウム・フラバムFERM-P805（A
J3271）をそれぞれ接種し、31.5℃に保ちつつ、18時間
振盪培養した。
一方、表−１で調製した糖液8g/dl、KH2PO4 0.15g/dl、
MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 0.001g/dl、MnSO4
・4H2O 0.001g/dl、硫安1.0g/dl、大豆蛋白酸加水分解
液を全窒素として25mg/dl、サイアミン・HCl 300μg/d
l、ビオチン5.0μg/dlを含み、pH7.2に調節した培養の2
85mlを１容ファーメンターに入れ、殺菌した。これに
上記種母培地をそれぞれ15mlずつ接種した。培養は31.5
℃、回転数1000rpmでアンモニアガスにてpH7.3〜7.5に
保持しつつ行った。
MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 0.001g/dl、MnSO4
・4H2O 0.001g/dl、硫安1.0g/dl、大豆蛋白酸加水分解
液を全窒素として25mg/dl、サイアミン・HCl 300μg/d
l、ビオチン5.0μg/dlを含み、pH7.2に調節した培養の2
85mlを１容ファーメンターに入れ、殺菌した。これに
上記種母培地をそれぞれ15mlずつ接種した。培養は31.5
℃、回転数1000rpmでアンモニアガスにてpH7.3〜7.5に
保持しつつ行った。
培養36時間目からは培養液中のグルコース濃度が１〜3g
/dlの範囲にコントロールされるように50g/dlの表−１
で調製した糖液を連続的にフィードしながら72時間まで
培養を続けた。生成したL-イソロイシン量は表‐９に示
す通りであった。
/dlの範囲にコントロールされるように50g/dlの表−１
で調製した糖液を連続的にフィードしながら72時間まで
培養を続けた。生成したL-イソロイシン量は表‐９に示
す通りであった。
実施例７ 表‐10の組成の種母培地を500ml容の振盪フラスコに50m
l宛分注し120℃、20分間加熱殺菌した後、菌株ブレビバ
クテリウム・フラバムFERM-P2316（AJ3620）を接種し、
31.5℃で、16時間振盪培養を行い、種培養液を得た。一
方、285mlのL-ヒスチジン生産用培地に表−１で調製し
た糖液18g/dlを1.0容のジャーファーメンターに張り
込み120℃で30分間滅菌し、これに上記種培養液を各々1
5mlずつ接種し、アンモニアにてpH7.0〜7.5にコントロ
ールしつつ31.5℃で回転数1,000rpmで培養した。
l宛分注し120℃、20分間加熱殺菌した後、菌株ブレビバ
クテリウム・フラバムFERM-P2316（AJ3620）を接種し、
31.5℃で、16時間振盪培養を行い、種培養液を得た。一
方、285mlのL-ヒスチジン生産用培地に表−１で調製し
た糖液18g/dlを1.0容のジャーファーメンターに張り
込み120℃で30分間滅菌し、これに上記種培養液を各々1
5mlずつ接種し、アンモニアにてpH7.0〜7.5にコントロ
ールしつつ31.5℃で回転数1,000rpmで培養した。
72時間培養後生成したL-ヒスチジンは表−11に示す通り
であった。
であった。
実施例８ 表‐12の組成の種母培地を500ml容の振盪フラスコに50m
l宛分注し、115℃,15分加熱滅菌した後、ブレビバクテ
リウム・フラバムFERM-P5332（AJ11512）を接種し、31.
5℃で12時間振盪培養を行い、種培養液を得た。一方285
mlのL-プロリン生産培地と表−１で調製した糖液14.0g/
dlを1.0用のジャーファーメンターに張り込み115℃、
15分間滅菌し、これに上記種培養液を各々15mlずつ接種
し、アンモニアにてpHを6.5から7.0にコントロールしつ
つ31.5℃で回転数1.000rpmで夫々72時間培養した。
l宛分注し、115℃,15分加熱滅菌した後、ブレビバクテ
リウム・フラバムFERM-P5332（AJ11512）を接種し、31.
5℃で12時間振盪培養を行い、種培養液を得た。一方285
mlのL-プロリン生産培地と表−１で調製した糖液14.0g/
dlを1.0用のジャーファーメンターに張り込み115℃、
15分間滅菌し、これに上記種培養液を各々15mlずつ接種
し、アンモニアにてpHを6.5から7.0にコントロールしつ
つ31.5℃で回転数1.000rpmで夫々72時間培養した。
培養液中のL-プロリン生成量は表‐13に示す通りであっ
た。
た。
実施例９ グルコース3g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g
/dl、FeSO4・7H2O 1.0mg/dl、MnSO4・4H2O 1.0mg/dl、
尿素0.3g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として60m
g/dl、サイアミン・塩酸塩20γ/dl、ビオチン１γ/dl、
L-メチオニン10mg/dlを含む種母培地をpH6.5に調節し、
その50mlを500ml容肩付フラスコに入れ加熱殺菌した。
ブレビバクテリウム・ラクトフエルメンタムFERM-P1945
（AJ3446）を接種し、31.5℃に保ちつつ、12時間振盪培
養した。
/dl、FeSO4・7H2O 1.0mg/dl、MnSO4・4H2O 1.0mg/dl、
尿素0.3g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として60m
g/dl、サイアミン・塩酸塩20γ/dl、ビオチン１γ/dl、
L-メチオニン10mg/dlを含む種母培地をpH6.5に調節し、
その50mlを500ml容肩付フラスコに入れ加熱殺菌した。
ブレビバクテリウム・ラクトフエルメンタムFERM-P1945
（AJ3446）を接種し、31.5℃に保ちつつ、12時間振盪培
養した。
一方、表−１で調製した糖液14g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、
MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4
H2O 1mg/dl、硫安2g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒
素として65mg/dl、サイアミン・HCl 30γ/dl、ビオチン
５γ/dl、L-メチオニン60mg/dlを含むpH7.0に調節した
培地の285mlを１容ファーメンターに入れ殺菌した。
これに上記種母培地を夫々15mlずつ接種した。培養は3
1.5℃、回転数1000rpmでアンモニアガスにてpH6.5ない
し7.0に保持しつつ行った。70g/dlの表−１で調製した
糖液又は50g/dlの表−１で調製した糖液＋20mg/dl L-メ
チオニンの混合液を連続的にフィードしながら、72時間
まで培養を続けた。その結果、生成したL-バリン量は表
‐14に示す通りであった。
MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4
H2O 1mg/dl、硫安2g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒
素として65mg/dl、サイアミン・HCl 30γ/dl、ビオチン
５γ/dl、L-メチオニン60mg/dlを含むpH7.0に調節した
培地の285mlを１容ファーメンターに入れ殺菌した。
これに上記種母培地を夫々15mlずつ接種した。培養は3
1.5℃、回転数1000rpmでアンモニアガスにてpH6.5ない
し7.0に保持しつつ行った。70g/dlの表−１で調製した
糖液又は50g/dlの表−１で調製した糖液＋20mg/dl L-メ
チオニンの混合液を連続的にフィードしながら、72時間
まで培養を続けた。その結果、生成したL-バリン量は表
‐14に示す通りであった。
実施例10 表‐15の組成の種母培地を500ml容の振盪フラスコに50m
l宛分注し、110℃にて５分間加熱、滅菌した後コリネバ
クテリウム・グリシノフィラムFERM-P1688（AJ3414）を
接種し、31.5℃で20時間振盪培養を行い、種培養液を得
た。一方、285mlのL-セリン生産用培地と表−１で調製
した糖液15g/dlを1.0容のジャーファーメンター２基
に張り込み、110℃で10分間滅菌し、これに上記種培養
液を夫々15ml宛接種しアンモニアにてpHを6.5〜7.0にコ
ントロールしつつ31.5℃で回転数1,000rpmで夫々４日間
培養した。生成したL-セリンは表−16に示す通りであっ
た。
l宛分注し、110℃にて５分間加熱、滅菌した後コリネバ
クテリウム・グリシノフィラムFERM-P1688（AJ3414）を
接種し、31.5℃で20時間振盪培養を行い、種培養液を得
た。一方、285mlのL-セリン生産用培地と表−１で調製
した糖液15g/dlを1.0容のジャーファーメンター２基
に張り込み、110℃で10分間滅菌し、これに上記種培養
液を夫々15ml宛接種しアンモニアにてpHを6.5〜7.0にコ
ントロールしつつ31.5℃で回転数1,000rpmで夫々４日間
培養した。生成したL-セリンは表−16に示す通りであっ
た。
実施例11 グルコース3g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g
/dl、FeSO4・7H2O 0.001g/dl、MnSO4・4H2O 0.001g/d
l、尿素0.3g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として
60mg/dl、サイアミン・HCl 30μg/dl、ビオチン20μg/d
lを含む種母培地をpH6.0に調節し、その50mlを500ml容
肩付フラスコに入れ、加熱殺菌した。
/dl、FeSO4・7H2O 0.001g/dl、MnSO4・4H2O 0.001g/d
l、尿素0.3g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として
60mg/dl、サイアミン・HCl 30μg/dl、ビオチン20μg/d
lを含む種母培地をpH6.0に調節し、その50mlを500ml容
肩付フラスコに入れ、加熱殺菌した。
これに菌株ブレビバクテリウム・ラクトフエルメンタム
FERM-P5936（AJ11678）を接種し、31.5℃に保ちつつ、1
3時間振盪培養した。
FERM-P5936（AJ11678）を接種し、31.5℃に保ちつつ、1
3時間振盪培養した。
一方、表−１で調製した糖液18g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、
MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 0.001g/dl、MnSO4
・4H2O 0.001g/dl、硫安3.0g/dl、大豆蛋白酸加水分解
液を全窒素として65mg/dl、サイアミン・HCl 20μg/d
l、ビオチン10μg/dl、L-アルギニン70mg/dlを含むpH7.
0に調節した培地の285mlを１容ファーメンターに入れ
殺菌した。これに上記種母培地をそれぞれ15mlずつを接
種した。培養は31.5℃にてアンモニアガスにてpH6.5な
いし7.0に保持しつつ撹拌数1,000rpmにて残グルコース
が0.5g/dl以下になる迄行った。培養後生成したL-オル
ニチンは表‐17に示す通りであった。
MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 0.001g/dl、MnSO4
・4H2O 0.001g/dl、硫安3.0g/dl、大豆蛋白酸加水分解
液を全窒素として65mg/dl、サイアミン・HCl 20μg/d
l、ビオチン10μg/dl、L-アルギニン70mg/dlを含むpH7.
0に調節した培地の285mlを１容ファーメンターに入れ
殺菌した。これに上記種母培地をそれぞれ15mlずつを接
種した。培養は31.5℃にてアンモニアガスにてpH6.5な
いし7.0に保持しつつ撹拌数1,000rpmにて残グルコース
が0.5g/dl以下になる迄行った。培養後生成したL-オル
ニチンは表‐17に示す通りであった。
実施例12 グルコース3g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g
/dl、FeSO4・7H2O 1.0mg/dl、MnSO4・4H2O 1.0mg/dl、
尿素0.3g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として60m
g/dl、サイアミン・HCl 30γ/dl、ビオチン20γ/dlを含
む種母培地をpH6.0に調節し、その50mlを500ml容肩付フ
ラスコに入れ、加熱殺菌した。コリネバクテリウム・グ
ルタミウムFERM-P5643（AJ11588）を接種し、31.5℃に
保ちつつ、13時間振盪培養した。
/dl、FeSO4・7H2O 1.0mg/dl、MnSO4・4H2O 1.0mg/dl、
尿素0.3g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として60m
g/dl、サイアミン・HCl 30γ/dl、ビオチン20γ/dlを含
む種母培地をpH6.0に調節し、その50mlを500ml容肩付フ
ラスコに入れ、加熱殺菌した。コリネバクテリウム・グ
ルタミウムFERM-P5643（AJ11588）を接種し、31.5℃に
保ちつつ、13時間振盪培養した。
一方、表−１で調製した糖液13g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、
MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 1.0mg/dl、MnSO4
・4H2O 1.0mg/dl、硫安3.0g/dl、大豆蛋白酸加水分解液
を全窒素として65mg/dl、サイアミン・HCl 20γ/dl、ビ
オチン10γ/dl、L-アルギニン70mg/dlを含むpH7.0に調
節した培地の285mlを１容ファーメンターに入れ殺菌
した。これに上記種母培地をそれぞれ15mlずつ接種し
た。培養は31.5℃、回転数1000rpmでアンモニアガスに
てpH6.5ないし7.0に保持しつつ行った。培養24時間目か
らは培養液中のグルコース濃度が1g/dl〜3g/dlの範囲に
コントロールされるように50g/dlの表−１で調製した糖
液を連続的にフィードしながら72時間まで培養を続け
た。生成したL-シトルリン量は表‐18に示す通りであっ
た。
MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 1.0mg/dl、MnSO4
・4H2O 1.0mg/dl、硫安3.0g/dl、大豆蛋白酸加水分解液
を全窒素として65mg/dl、サイアミン・HCl 20γ/dl、ビ
オチン10γ/dl、L-アルギニン70mg/dlを含むpH7.0に調
節した培地の285mlを１容ファーメンターに入れ殺菌
した。これに上記種母培地をそれぞれ15mlずつ接種し
た。培養は31.5℃、回転数1000rpmでアンモニアガスに
てpH6.5ないし7.0に保持しつつ行った。培養24時間目か
らは培養液中のグルコース濃度が1g/dl〜3g/dlの範囲に
コントロールされるように50g/dlの表−１で調製した糖
液を連続的にフィードしながら72時間まで培養を続け
た。生成したL-シトルリン量は表‐18に示す通りであっ
た。
実施例13 表‐19の組成の種母培地を500ml容の振盪フラスコに50m
l宛分注し、110℃にて５分間加熱・滅菌した後、菌株コ
リネバクテリウムグルタミクムFERM-P5836（AJ11655）
（Phe-,2-TAr,SMr）を接種し31.5℃で12時間振盪培養を
行い種培養液を得た。
l宛分注し、110℃にて５分間加熱・滅菌した後、菌株コ
リネバクテリウムグルタミクムFERM-P5836（AJ11655）
（Phe-,2-TAr,SMr）を接種し31.5℃で12時間振盪培養を
行い種培養液を得た。
一方、285mlのL-チロシン生産用培地と表−１で調製し
た糖液18g/dlを1.0容のジャーファーメンター２基に
張り込み、110℃で10分間滅菌し、これに上記種培養液
を夫々15ml宛接種し、アンモニアにてpHを7.0〜7.5にコ
ントロールしつつ31.5℃で回転数1.000rpmにて96時間培
養した。
た糖液18g/dlを1.0容のジャーファーメンター２基に
張り込み、110℃で10分間滅菌し、これに上記種培養液
を夫々15ml宛接種し、アンモニアにてpHを7.0〜7.5にコ
ントロールしつつ31.5℃で回転数1.000rpmにて96時間培
養した。
培養液中のL-チロシン蓄積量は‐表20に示す通りであっ
た。
た。
実施例14 グルコース3g/dl、KH2PO4 0.05g/dl、MgSO4・7H2O 0.04
g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O 1mg/dl、NH4C
l 0.3g/dl、RNA 0.25g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全
窒素として70mg/dlを含む種母培地をpH7.0に調節し、そ
の50mlを500ml容肩付フラスコに入れ120℃、10分間加熱
殺菌した。これにバチルム・ズブチリスFERM-P5286（AJ
11483）を接種し、31.5℃にて16時間振盪培養した。
g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O 1mg/dl、NH4C
l 0.3g/dl、RNA 0.25g/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全
窒素として70mg/dlを含む種母培地をpH7.0に調節し、そ
の50mlを500ml容肩付フラスコに入れ120℃、10分間加熱
殺菌した。これにバチルム・ズブチリスFERM-P5286（AJ
11483）を接種し、31.5℃にて16時間振盪培養した。
一方、表−１で調製した糖液25g/dl、KH2PO4 0.2g/dl、
MgSO4・7H2O 0.3g/dl、DL-メチオニン150mg/dl、脱脂大
豆蛋白酸分解液を全窒素として100mg/dlを含むpH6.5に
調節した培地の285mlを１容ファーメンターに入れ120
℃、10分間殺菌した。これに上記種母培養液を夫々15ml
ずつ接種した。培地は35℃にてpH6.5〜7.0にアンモニア
ガスにて保持しつつ、撹拌数1,000rpmにて96時間培養し
た。
MgSO4・7H2O 0.3g/dl、DL-メチオニン150mg/dl、脱脂大
豆蛋白酸分解液を全窒素として100mg/dlを含むpH6.5に
調節した培地の285mlを１容ファーメンターに入れ120
℃、10分間殺菌した。これに上記種母培養液を夫々15ml
ずつ接種した。培地は35℃にてpH6.5〜7.0にアンモニア
ガスにて保持しつつ、撹拌数1,000rpmにて96時間培養し
た。
培養後生成したL-トリプトファンは表‐21に示す通りで
あった。
あった。
実施例15 グルコース3g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、尿素0.3g/dl、MgSO
4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O
1mg/dl、DL-メチオニン40mg/dl、ビオチン10μg/、サ
イアミン・塩酸塩200μg/、大豆蛋白酸加水分解液を
全窒素として50mg/dlを含む種母培地をpH6に調節し、そ
の50mlを500ml容肩付フラスコに入れ、120℃、10分間加
熱殺菌した。これにブレビバクテリウム・ラクトフェル
メンタムFERM-P1769（AJ3427）を接種し、31.5℃にて20
時間振盪培養した。
4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O
1mg/dl、DL-メチオニン40mg/dl、ビオチン10μg/、サ
イアミン・塩酸塩200μg/、大豆蛋白酸加水分解液を
全窒素として50mg/dlを含む種母培地をpH6に調節し、そ
の50mlを500ml容肩付フラスコに入れ、120℃、10分間加
熱殺菌した。これにブレビバクテリウム・ラクトフェル
メンタムFERM-P1769（AJ3427）を接種し、31.5℃にて20
時間振盪培養した。
一方、表−１で調製した糖液25g/dl、KH2PO4 0.1g/dl、
（NH4）2SO4 1.0g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・
7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O 1mg/dl、DL-メチオニン100m
g/dl、ビオチン50μg/、サイアミン塩酸塩300μg/
、脱脂大豆酸分解液50mg/dlを含むpH7.0に調節した培
地の285mlを１容ファーメンターに入れ120℃、10分間
殺菌した。これに上記種母培養を夫々15mlずつ接種し
た。培地は31.5℃にてpH7.0〜7.5にアンモニアガスにて
保持しつつ、撹拌数1,000rpmにて72時間培養した。
（NH4）2SO4 1.0g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・
7H2O 1mg/dl、MnSO4・4H2O 1mg/dl、DL-メチオニン100m
g/dl、ビオチン50μg/、サイアミン塩酸塩300μg/
、脱脂大豆酸分解液50mg/dlを含むpH7.0に調節した培
地の285mlを１容ファーメンターに入れ120℃、10分間
殺菌した。これに上記種母培養を夫々15mlずつ接種し
た。培地は31.5℃にてpH7.0〜7.5にアンモニアガスにて
保持しつつ、撹拌数1,000rpmにて72時間培養した。
培養後生成したL-ロイシンは表‐22に示す通りであっ
た。
た。
実施例16 グルコース5g/dl、（NH4）2SO4 0.2g/dl、尿素0.2g/d
l、KH2PO4 0.15g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7
H2O 1mg/dl、サイアミン・HCl 10.0μg/dl、ビオチン0.
3μg/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として30mg/dl
を含む種母培地をpH7.0に調節し、その50mlを500ml容肩
付フラスコに入れ加熱殺菌した。
l、KH2PO4 0.15g/dl、MgSO4・7H2O 0.04g/dl、FeSO4・7
H2O 1mg/dl、サイアミン・HCl 10.0μg/dl、ビオチン0.
3μg/dl、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として30mg/dl
を含む種母培地をpH7.0に調節し、その50mlを500ml容肩
付フラスコに入れ加熱殺菌した。
ブレビバクテリウム・フラバムFERM-P5502（AJ11576）
を接種し、31.5℃に保ちつつ、12時間振盪培養した。
を接種し、31.5℃に保ちつつ、12時間振盪培養した。
一方、表−１で調製した糖液11g/dl、KH2PO4 0.25g/d
l、MgSO4・7H2O 40mg/dl、（NH4）2SO4 1.5g/dl、Na2SO
4 1.5g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、サイアミン・HCl 350
μg/、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として20mg/dl
を含むpH6.5に調整した培地を基本培地とし、これにビ
オチンを0.35μg/dl、又は3.5μg/dl添加した。これら
の285mlを１容ファーメンターに入れ殺菌した。これ
に上記種母培養液をそれぞれ15mlずつ接種した。
l、MgSO4・7H2O 40mg/dl、（NH4）2SO4 1.5g/dl、Na2SO
4 1.5g/dl、FeSO4・7H2O 1mg/dl、サイアミン・HCl 350
μg/、大豆蛋白酸加水分解液を全窒素として20mg/dl
を含むpH6.5に調整した培地を基本培地とし、これにビ
オチンを0.35μg/dl、又は3.5μg/dl添加した。これら
の285mlを１容ファーメンターに入れ殺菌した。これ
に上記種母培養液をそれぞれ15mlずつ接種した。
培養は31.5℃、回転数1000rpmでアンモニアガスにてpH
6.5ないし6.0に保持しつつ、主培養を開始した。
6.5ないし6.0に保持しつつ、主培養を開始した。
培養24時間目からは培養液中のグルコース濃度が1g/dl
〜3g/dlの範囲にコントロールされるように別に殺菌し
た50g/dlの表‐１で調製した糖液を連続的にフィードし
ながら72時間培養を行った。得られたL-グルタミンの生
成は第23表に示す通りであった。
〜3g/dlの範囲にコントロールされるように別に殺菌し
た50g/dlの表‐１で調製した糖液を連続的にフィードし
ながら72時間培養を行った。得られたL-グルタミンの生
成は第23表に示す通りであった。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き 審判の合議体 審判長 鐘尾 宏紀 審判官 広田 雅紀 審判官 大高 とし子 (56)参考文献 特開 昭52−79077（ＪＰ，Ａ) 特開 昭56−68396（ＪＰ，Ａ)
Claims (1)
- 【請求項１】ハイテストモラセス中の糖分をグルコース
換算した値で、ハイテストモラセスとグルコースとが0.
1:9.9から7:3迄の範囲の割合になるように、ハイテスト
モラセスとグルコースを炭素源として併用して、Ｌ−ア
ミノ酸生産菌を培養することを特徴とする発酵法による
Ｌ−アミノ酸の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60268035A JPH074264B2 (ja) | 1985-11-28 | 1985-11-28 | 発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60268035A JPH074264B2 (ja) | 1985-11-28 | 1985-11-28 | 発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62126987A JPS62126987A (ja) | 1987-06-09 |
| JPH074264B2 true JPH074264B2 (ja) | 1995-01-25 |
Family
ID=17452968
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60268035A Expired - Fee Related JPH074264B2 (ja) | 1985-11-28 | 1985-11-28 | 発酵法によるｌ‐アミノ酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH074264B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5247120B2 (ja) * | 2007-11-02 | 2013-07-24 | 雪印メグミルク株式会社 | Ｌ−オルニチン含有物の製造方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5279077A (en) * | 1975-12-23 | 1977-07-02 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of fermentation raw materials |
| JPS5668396A (en) * | 1979-11-06 | 1981-06-09 | Ajinomoto Co Inc | Production of l-glutmaic acid through fermentation process |
-
1985
- 1985-11-28 JP JP60268035A patent/JPH074264B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS62126987A (ja) | 1987-06-09 |
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| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |