JPH0730291B2 - コラーゲン組成物及び該コラーゲン組成物の製造方法 - Google Patents
コラーゲン組成物及び該コラーゲン組成物の製造方法Info
- Publication number
- JPH0730291B2 JPH0730291B2 JP2245999A JP24599990A JPH0730291B2 JP H0730291 B2 JPH0730291 B2 JP H0730291B2 JP 2245999 A JP2245999 A JP 2245999A JP 24599990 A JP24599990 A JP 24599990A JP H0730291 B2 JPH0730291 B2 JP H0730291B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- collagen
- tendon
- acid
- extracted
- common
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 title claims abstract description 93
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 title claims abstract description 93
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 title claims abstract description 93
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 10
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 claims abstract description 64
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 31
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 23
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 23
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 19
- 244000309466 calf Species 0.000 claims description 16
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 claims description 10
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 10
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 6
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 4
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 4
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 claims description 3
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 claims 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 claims 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 20
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 12
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 10
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 8
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 3
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 3
- 210000001361 achilles tendon Anatomy 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 230000009172 bursting Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 210000000003 hoof Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- RDEIXVOBVLKYNT-VQBXQJRRSA-N (2r,3r,4r,5r)-2-[(1s,2s,3r,4s,6r)-4,6-diamino-3-[(2r,3r,6s)-3-amino-6-(1-aminoethyl)oxan-2-yl]oxy-2-hydroxycyclohexyl]oxy-5-methyl-4-(methylamino)oxane-3,5-diol;(2r,3r,4r,5r)-2-[(1s,2s,3r,4s,6r)-4,6-diamino-3-[(2r,3r,6s)-3-amino-6-(aminomethyl)oxan-2-yl]o Chemical compound OS(O)(=O)=O.O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC[C@@H](CN)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N.O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC[C@H](O2)C(C)N)N)[C@@H](N)C[C@H]1N.O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N RDEIXVOBVLKYNT-VQBXQJRRSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 229960004106 citric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 210000000630 fibrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940013688 formic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012475 sodium chloride buffer Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 210000000515 tooth Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
- A61L27/24—Collagen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
- A61F2310/00—Prostheses classified in A61F2/28 or A61F2/30 - A61F2/44 being constructed from or coated with a particular material
- A61F2310/00005—The prosthesis being constructed from a particular material
- A61F2310/00365—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 発明の背景 本発明はコラーゲン組成物及びこのような組成物の製造
方法に関する。
方法に関する。
コラーゲンは通常、細胞外基質の主要タンパク質成分と
して検出されている。哺乳動物の場合、コラーゲンは時
折、体内総タンパク質の60％も占めている。コラーゲン
は、皮膚、腱、骨及び歯のような有機物質の大半に含ま
れ、また他の大半の体内構造部分では線維質細胞含有物
として存在している。コラーゲンは、一部には螺旋構造
によって潜在的な抗原決定基がマスキングされているた
めに比較的弱い免疫原である。この螺旋構造によりコラ
ーゲンは耐タンパク分解性も有する。コラーゲンは細胞
癒着のための天然物質であり、また大きな引張荷重に耐
える筋肉−骨格系の成分である。前述した特性のため
に、コラーゲンは移植可能な人工器官の製造及び生きた
組織の等価物の製造に利用されている。
して検出されている。哺乳動物の場合、コラーゲンは時
折、体内総タンパク質の60％も占めている。コラーゲン
は、皮膚、腱、骨及び歯のような有機物質の大半に含ま
れ、また他の大半の体内構造部分では線維質細胞含有物
として存在している。コラーゲンは、一部には螺旋構造
によって潜在的な抗原決定基がマスキングされているた
めに比較的弱い免疫原である。この螺旋構造によりコラ
ーゲンは耐タンパク分解性も有する。コラーゲンは細胞
癒着のための天然物質であり、また大きな引張荷重に耐
える筋肉−骨格系の成分である。前述した特性のため
に、コラーゲンは移植可能な人工器官の製造及び生きた
組織の等価物の製造に利用されている。
コラーゲンは、線維芽細胞、平滑筋細胞又は血小板のよ
うな収縮集結剤（物質）により収縮集結した水和コラー
ゲン格子から製造される生組織の等価物の主要成分であ
る。このような組織等価物は米国特許第4,485,096号、
第4,485,097号、第4,539,716号、第4,546,500号、第4,6
04,346号、第4,835,102号及び第4,837,379号に開示され
ている。これらの特許総ては、参照によって本明細書の
一部を構成するものとする（以後まとめて“特許”と称
する）。これらの組織等価物は、以下の物に限定される
わけではないが、皮膚、軟骨、骨、血管のような上皮組
織及び結合組織の等価物が代表例であり、生細胞及び細
胞外基質分子、主にコラーゲンを含んでおり、場合によ
っては通常正規の組織では検出されない成分を備え得
る。このような組織等価物の適用範囲は広く、研究開
発、組織・器官の移植及び検査等に適用されている。
うな収縮集結剤（物質）により収縮集結した水和コラー
ゲン格子から製造される生組織の等価物の主要成分であ
る。このような組織等価物は米国特許第4,485,096号、
第4,485,097号、第4,539,716号、第4,546,500号、第4,6
04,346号、第4,835,102号及び第4,837,379号に開示され
ている。これらの特許総ては、参照によって本明細書の
一部を構成するものとする（以後まとめて“特許”と称
する）。これらの組織等価物は、以下の物に限定される
わけではないが、皮膚、軟骨、骨、血管のような上皮組
織及び結合組織の等価物が代表例であり、生細胞及び細
胞外基質分子、主にコラーゲンを含んでおり、場合によ
っては通常正規の組織では検出されない成分を備え得
る。このような組織等価物の適用範囲は広く、研究開
発、組織・器官の移植及び検査等に適用されている。
コラーゲン組成物は通常、酸又は酵素による抽出過程を
包含する方法で皮膚及び腱から製造される。多くの例で
は酵素による抽出が好ましい。何故ならば、この方法に
より高い収率で、高純度のコラーゲンが得られるからで
ある。しかしながら、酵素による抽出には、部分的に品
質の低下したコラーゲンが製造されるという欠点があ
る。即ち抽出用酵素は、コラーゲン間架橋を含んでいる
末端非螺旋区域でコラーゲン分子を開裂させる。
包含する方法で皮膚及び腱から製造される。多くの例で
は酵素による抽出が好ましい。何故ならば、この方法に
より高い収率で、高純度のコラーゲンが得られるからで
ある。しかしながら、酵素による抽出には、部分的に品
質の低下したコラーゲンが製造されるという欠点があ
る。即ち抽出用酵素は、コラーゲン間架橋を含んでいる
末端非螺旋区域でコラーゲン分子を開裂させる。
酵素抽出によるコラーゲンの製造のために頻繁に使用さ
れる酵素ペプシンを使用して抽出されたコラーゲンは生
細胞の等価物を生成するが、この等価物は用途によって
は、例えば組織等価物の実質的な機械的処理を含む用途
に対しては所望し得ないほど劣っていることが判明し
た。従って、コラーゲン組成物の改良及びこのような組
成物の製造方法を探求する。
れる酵素ペプシンを使用して抽出されたコラーゲンは生
細胞の等価物を生成するが、この等価物は用途によって
は、例えば組織等価物の実質的な機械的処理を含む用途
に対しては所望し得ないほど劣っていることが判明し
た。従って、コラーゲン組成物の改良及びこのような組
成物の製造方法を探求する。
発明の要約 本発明は腱からのコラーゲン組成物の製造方法を提供す
る。酸抽出による多くのコラーゲン製造方法が従来技術
で知られている。しかしながら、本発明の方法は、酸に
より抽出され得るコラーゲンの収率及びこのようなコラ
ーゲンを使用して製造される生組織の等価物の品質に関
して公知の方法を越える利点を提供する。
る。酸抽出による多くのコラーゲン製造方法が従来技術
で知られている。しかしながら、本発明の方法は、酸に
より抽出され得るコラーゲンの収率及びこのようなコラ
ーゲンを使用して製造される生組織の等価物の品質に関
して公知の方法を越える利点を提供する。
本発明に従ってコラーゲンを腱から製造するための好ま
しい方法は以下の段階、即ち、 （ａ）鞘を除去して、細分化した腱を、pHが約6.5〜8.5
のリン酸緩衝溶液中で洗浄する段階、 （ｂ）弱酸及び弱い機械作用により、段階（ａ）で得ら
れた腱からコラーゲンを抽出する段階、 （ｃ）段階（ｂ）の酸による抽出で得られたコラーゲン
を沈澱させる段階、及び （ｄ）沈澱したコラーゲンを回収する段階からなる。
しい方法は以下の段階、即ち、 （ａ）鞘を除去して、細分化した腱を、pHが約6.5〜8.5
のリン酸緩衝溶液中で洗浄する段階、 （ｂ）弱酸及び弱い機械作用により、段階（ａ）で得ら
れた腱からコラーゲンを抽出する段階、 （ｃ）段階（ｂ）の酸による抽出で得られたコラーゲン
を沈澱させる段階、及び （ｄ）沈澱したコラーゲンを回収する段階からなる。
抽出したコラーゲンの好ましい沈澱剤は濃度が約0.6〜
1.8Mの塩化ナトリウムである。本発明のある実施例で
は、沈澱と通気とを同時に行い、その後沈澱したコラー
ゲンを圧力過することにより段階（ｃ）及び（ｄ）を
実施する。
1.8Mの塩化ナトリウムである。本発明のある実施例で
は、沈澱と通気とを同時に行い、その後沈澱したコラー
ゲンを圧力過することにより段階（ｃ）及び（ｄ）を
実施する。
本発明方法により通常、細分化した腱の含水重量の約４
％を越えるコラーゲンが得られる。0.05Mの塩化ナトリ
ウムと2.2mMのリン酸ナトリウム緩衝液とを約1:3〜1:1
の割合で含んでいるリン酸緩衝食塩水が本発明で使用す
るのに好ましい生理的食塩水である。好ましい酸は酢
酸、クエン酸及び蟻酸等である。
％を越えるコラーゲンが得られる。0.05Mの塩化ナトリ
ウムと2.2mMのリン酸ナトリウム緩衝液とを約1:3〜1:1
の割合で含んでいるリン酸緩衝食塩水が本発明で使用す
るのに好ましい生理的食塩水である。好ましい酸は酢
酸、クエン酸及び蟻酸等である。
本発明は更に、新規抽出源、即ち仔牛の共通（総）指伸
筋腱（common digital extensor tendon）から単離され
るコラーゲンを提供する。仔牛はこのような腱を有する
好ましいコラーゲン抽出源である。
筋腱（common digital extensor tendon）から単離され
るコラーゲンを提供する。仔牛はこのような腱を有する
好ましいコラーゲン抽出源である。
実施態様 本発明は、新規抽出源、即ち仔牛の共通指伸筋腱から単
離されるコラーゲンを提供する。この腱は酸により抽出
され得るコラーゲンを予想外に多量に含んでいる。
離されるコラーゲンを提供する。この腱は酸により抽出
され得るコラーゲンを予想外に多量に含んでいる。
コラーゲンは種々の組織から抽出することができるが、
最も一般的な２つの抽出源は皮膚及び腱である。本発明
を実施する際に使用し得る腱は例えばウシの腱及びラッ
トの尾腱である。ウシの腱には、雌牛の尾腱、雌牛のア
キレス腱、仔牛のアキレス腱、雌牛の伸筋腱及び仔牛の
伸筋腱が含まれる。予想外なことに、仔牛の共通指伸筋
腱から酸により抽出され得るコラーゲンの収率が仔牛の
アキレス腱の約４倍であり、また雌牛の伸筋腱の約２倍
であることが判明した。共通指伸筋腱では酸により抽出
されるコラーゲンの収率がこのように増加すること、並
びに腱の入手及び解剖が簡単であり、また腱が比較的低
コストであることにより、この腱は好ましいコラーゲン
産生源となる。また、思いもかけず、仔牛の共通指伸筋
腱から抽出したコラーゲンから製造した組織等価物が、
酸により抽出され得るコラーゲンを有する他の市販物か
ら製造した組織等価物より遥かに大きい引張強さを有す
ることも判明した（以下の実施例４を参照のこと）。後
述する酸抽出法を使用して、種々の抽出源から酸により
抽出され得るコラーゲンの収率の比較を以下の表Ｉに示
す。
最も一般的な２つの抽出源は皮膚及び腱である。本発明
を実施する際に使用し得る腱は例えばウシの腱及びラッ
トの尾腱である。ウシの腱には、雌牛の尾腱、雌牛のア
キレス腱、仔牛のアキレス腱、雌牛の伸筋腱及び仔牛の
伸筋腱が含まれる。予想外なことに、仔牛の共通指伸筋
腱から酸により抽出され得るコラーゲンの収率が仔牛の
アキレス腱の約４倍であり、また雌牛の伸筋腱の約２倍
であることが判明した。共通指伸筋腱では酸により抽出
されるコラーゲンの収率がこのように増加すること、並
びに腱の入手及び解剖が簡単であり、また腱が比較的低
コストであることにより、この腱は好ましいコラーゲン
産生源となる。また、思いもかけず、仔牛の共通指伸筋
腱から抽出したコラーゲンから製造した組織等価物が、
酸により抽出され得るコラーゲンを有する他の市販物か
ら製造した組織等価物より遥かに大きい引張強さを有す
ることも判明した（以下の実施例４を参照のこと）。後
述する酸抽出法を使用して、種々の抽出源から酸により
抽出され得るコラーゲンの収率の比較を以下の表Ｉに示
す。
一般に本発明のコラーゲン製造方法は、以下の段階、即
ち、 （ａ）細分化した腱を塩化ナトリウム／リン酸ナトリウ
ム緩衝液中で洗浄する段階、 （ｂ）酢酸及び弱い機械作用により、洗浄した腱からコ
ラーゲンを抽出する段階、 （ｃ）段階（ｂ）の酸による抽出で得られたコラーゲン
を塩化ナトリウムで沈澱させる段階、及び （ｄ）沈澱したコラーゲンを回収する段階からなる。
ち、 （ａ）細分化した腱を塩化ナトリウム／リン酸ナトリウ
ム緩衝液中で洗浄する段階、 （ｂ）酢酸及び弱い機械作用により、洗浄した腱からコ
ラーゲンを抽出する段階、 （ｃ）段階（ｂ）の酸による抽出で得られたコラーゲン
を塩化ナトリウムで沈澱させる段階、及び （ｄ）沈澱したコラーゲンを回収する段階からなる。
本発明の好ましい実施例においては、沈澱したコラーゲ
ンの回収は過により実施する。本発明の他の好ましい
実施例においては、酸により抽出したコラーゲンの沈降
及び沈澱したコラーゲンの過による回収は通気しなが
ら実施する。更には他の好ましい方法では、通気した沈
澱物は表面に浮流し、大半の液体は吸い出され、残りの
液体と沈澱物とが遠心分離される。
ンの回収は過により実施する。本発明の他の好ましい
実施例においては、酸により抽出したコラーゲンの沈降
及び沈澱したコラーゲンの過による回収は通気しなが
ら実施する。更には他の好ましい方法では、通気した沈
澱物は表面に浮流し、大半の液体は吸い出され、残りの
液体と沈澱物とが遠心分離される。
コラーゲンを組織等価物の製造のような用途に付すると
きには、本発明の方法は無菌状態で実施する。
きには、本発明の方法は無菌状態で実施する。
ウシの腱からの抽出による本発明方法を実施するに際
し、腱鞘を除去するのが好ましい。以下の表IIに示す如
く、腱鞘を除去すると、コラーゲン凝集物が低減し、ま
た非コラーゲン汚染物の量が減少することが判明した。
この汚染物は、収縮集結した生組織の等価物を製造し、
次いで格子を固定・染色した後に観察されるものであ
る。非コラーゲン汚染物の減少した量をヒドロキシプロ
ピリン/280nm吸光度の割合で示した。
し、腱鞘を除去するのが好ましい。以下の表IIに示す如
く、腱鞘を除去すると、コラーゲン凝集物が低減し、ま
た非コラーゲン汚染物の量が減少することが判明した。
この汚染物は、収縮集結した生組織の等価物を製造し、
次いで格子を固定・染色した後に観察されるものであ
る。非コラーゲン汚染物の減少した量をヒドロキシプロ
ピリン/280nm吸光度の割合で示した。
表II:鞘除去の作用 ヒドロキシプロピリン/280nm 鞘付き 4.69 鞘なし 7.70 腱鞘を除去した後に、例えば粉砕するか又は細く切って
腱を細分化する。通常非コラーゲン汚染物を除去するた
めに、細分化した腱を洗浄する。しばしばこのような洗
浄段階によりコラーゲンの収率が低減する。しかし、予
期に反し、pHが約6.5〜8.5のリン酸緩衝食塩水（PBS）
中で細分化した腱を洗浄すると、除去される非コラーゲ
ン汚染物の量が増大し、またコラーゲンの収率が低減し
ないことが判明した。洗浄段階では、0.05M NaClとpH7.
4の2.2mMリン酸緩衝液とを1:3の割合で含んでいるPBS溶
液が好ましいが、本発明を実施するには約1:3〜約1:1の
範囲のPBS溶液が有効である。種々の洗浄組成物の収率
への作用を以下の表IIIに示す。
腱を細分化する。通常非コラーゲン汚染物を除去するた
めに、細分化した腱を洗浄する。しばしばこのような洗
浄段階によりコラーゲンの収率が低減する。しかし、予
期に反し、pHが約6.5〜8.5のリン酸緩衝食塩水（PBS）
中で細分化した腱を洗浄すると、除去される非コラーゲ
ン汚染物の量が増大し、またコラーゲンの収率が低減し
ないことが判明した。洗浄段階では、0.05M NaClとpH7.
4の2.2mMリン酸緩衝液とを1:3の割合で含んでいるPBS溶
液が好ましいが、本発明を実施するには約1:3〜約1:1の
範囲のPBS溶液が有効である。種々の洗浄組成物の収率
への作用を以下の表IIIに示す。
溶液中のコラーゲン凝集物の量を低減させるために、酸
によるコラーゲンの抽出は弱い機械作用を付与しつつ行
う。本発明のコラーゲンを抽出するのに使用され得る酸
は酢酸、クエン酸及び蟻酸のような弱酸を含んでおり、
酢酸が好ましい抽出剤である。抽出に使用する酸の濃度
は、コラーゲンの抽出源及び選択する酸のような幾つか
の因子によって変化するが、通常約0.25〜2.0Mである。
によるコラーゲンの抽出は弱い機械作用を付与しつつ行
う。本発明のコラーゲンを抽出するのに使用され得る酸
は酢酸、クエン酸及び蟻酸のような弱酸を含んでおり、
酢酸が好ましい抽出剤である。抽出に使用する酸の濃度
は、コラーゲンの抽出源及び選択する酸のような幾つか
の因子によって変化するが、通常約0.25〜2.0Mである。
本発明を実施するに当たり、抽出したコラーゲンは沈澱
により回収する。抽出したコラーゲンの種々の沈澱方法
は当業者に知られている。本発明の好ましい実施例で
は、酸により抽出したコラーゲンは、通常濃度が約0.6M
〜約1.8Mの塩化ナトリウムで沈澱させる。
により回収する。抽出したコラーゲンの種々の沈澱方法
は当業者に知られている。本発明の好ましい実施例で
は、酸により抽出したコラーゲンは、通常濃度が約0.6M
〜約1.8Mの塩化ナトリウムで沈澱させる。
次に、沈澱したコラーゲンを、本発明方法に従って通常
遠心分離で回収する。しかしながら、本発明の好ましい
実施例では、無菌ガスで通気しつつコラーゲンを沈澱・
過させる。好ましいガスは窒素である。沈澱物を浮遊
させ、このようにして過を実施するために十分長時間
フィルターを詰まらせない状態にしておけば、通気によ
り過が可能となる。過は遠心分離より速く、また得
られる沈澱物が再溶解し易いので、有利である。
遠心分離で回収する。しかしながら、本発明の好ましい
実施例では、無菌ガスで通気しつつコラーゲンを沈澱・
過させる。好ましいガスは窒素である。沈澱物を浮遊
させ、このようにして過を実施するために十分長時間
フィルターを詰まらせない状態にしておけば、通気によ
り過が可能となる。過は遠心分離より速く、また得
られる沈澱物が再溶解し易いので、有利である。
本発明に基づいてウシの共通指伸筋腱から製造される典
型的なコラーゲン組成物の特徴を以下の表IVに示す。
型的なコラーゲン組成物の特徴を以下の表IVに示す。
仔牛の共通指伸筋腱から抽出したコラーゲン組成物から
製造した組織等価物が、通常約200mm/Hgと予想外に高い
破裂強さを有することが判明した。種々のコラーゲン組
成物から製造した組織等価物の破裂強さの比較を以下の
実施例４で説明する。
製造した組織等価物が、通常約200mm/Hgと予想外に高い
破裂強さを有することが判明した。種々のコラーゲン組
成物から製造した組織等価物の破裂強さの比較を以下の
実施例４で説明する。
このように、我々は収率が予想外に高い抽出可能コラー
ゲンを提供するコラーゲン組成物の新規抽出源、コラー
ゲン組成物の新規製造方法及び強さの改良された組織等
価物について説明した。
ゲンを提供するコラーゲン組成物の新規抽出源、コラー
ゲン組成物の新規製造方法及び強さの改良された組織等
価物について説明した。
以下の実施例を参照すれば、本発明が更に理解されよ
う。以下の実施例は単に例示的なものであり、本発明の
要旨の範囲を制限するために使用するものではない。
う。以下の実施例は単に例示的なものであり、本発明の
要旨の範囲を制限するために使用するものではない。
明記しない限り以下の実施例では無菌方法を使用した。
また、明記しない限り使用した1:3v/vリン酸緩衝食塩水
（PBS）は、0.05M塩化ナトリウムとpH7.4の2.2mMリン酸
ナトリウムとを含んでいた。
また、明記しない限り使用した1:3v/vリン酸緩衝食塩水
（PBS）は、0.05M塩化ナトリウムとpH7.4の2.2mMリン酸
ナトリウムとを含んでいた。
実施例1:冷凍したウシの腱の製造 1. ひづめを解凍して、洗浄した。
2. 共通指伸筋腱を２段階で解剖した。
（ａ） 側面２カ所を切開し、共通指伸筋腱（前方の
腱）を露出させるために背面皮膚弁を後方に剥がした。
腱）を露出させるために背面皮膚弁を後方に剥がした。
（ｂ） 腱を周辺組織及び鞘から切り離した。
3. 腱を水中に短時間浸漬し、次いで使用するまで−70
℃の冷凍庫で貯蔵した。
℃の冷凍庫で貯蔵した。
実施例2:冷凍・粉砕したウシの腱の製造 1. 実施例１に基づいて製造された冷凍したウシの腱
を、少なくとも一部分が又は完全に解凍するまで２〜８
℃に放置した。
を、少なくとも一部分が又は完全に解凍するまで２〜８
℃に放置した。
2. 腱をほぼ同重量の無菌氷で同時に粉砕した。
3. 粉砕した腱を15分間20000Gで遠心分離にかけた。
4. 粉砕した腱を使用するまで−80℃の冷凍庫で貯蔵し
た。
た。
実施例3:無菌のウシのコラーゲンの製造 1. 実施例２に基づいて冷凍、粉砕したウシの腱150gを
解凍し、BELCO上部攪拌反応器内の15.0の冷たい（２
〜８℃）無菌PBS:水（1:2v/v）に加えた。
解凍し、BELCO上部攪拌反応器内の15.0の冷たい（２
〜８℃）無菌PBS:水（1:2v/v）に加えた。
2. BELCO（MODEL 7764−00110）を設定10で２時間２〜
８℃で作動させた。
８℃で作動させた。
3. 緩衝液を吸い出し、洗浄段階を５回以上繰り返し
た。
た。
4. 15の2.8％無菌酢酸（２〜８℃）を容器に加え
て、モーターを設定５で72時間２〜８℃作動させた。
て、モーターを設定５で72時間２〜８℃作動させた。
5. 懸濁液をデカンテーションし、Beckman Model No.J
221内で30分間４℃で25,000Gの遠心分離にかけた。
221内で30分間４℃で25,000Gの遠心分離にかけた。
6. 最上層を取り出して、他の15BELCO上部攪拌容器
内に置いた。
内に置いた。
7. 次いで、3.6M無菌塩化ナトリウム冷溶液３をBelc
oフラスコに加え、混合した。同時に無菌窒素で１時間
２〜８℃で通気した。
oフラスコに加え、混合した。同時に無菌窒素で１時間
２〜８℃で通気した。
8. 段階７で得られた沈澱物を、Amicon 2000フィルタ
ーユニットおよびその支持ディスクで過して捕集し
た。
ーユニットおよびその支持ディスクで過して捕集し
た。
9. 2.8％無菌冷酢酸２をすぐにフィルターユニット
に加えて、最大の設定で30分間２〜８℃で攪拌した。溶
液を15のBELCO容器に移した。
に加えて、最大の設定で30分間２〜８℃で攪拌した。溶
液を15のBELCO容器に移した。
10. 沈澱物が残れば、総ての沈澱物が溶解するまで段
階９を繰り返した。
階９を繰り返した。
11. 段階７〜10を繰り返した。
12. 2.8％酢酸を加えて、Belco容器内の溶液を５に
した。1Mの最終濃度が得られるまで氷酢酸を加えて、速
度５で72時間２〜８℃で混合した。
した。1Mの最終濃度が得られるまで氷酢酸を加えて、速
度５で72時間２〜８℃で混合した。
13. BELCOフラスコ内の溶液を透析管に移し、100の
0.05％冷酢酸（２〜８℃）に対して24時間透析を行っ
た。
0.05％冷酢酸（２〜８℃）に対して24時間透析を行っ
た。
14. 20〜24時間後に、酢酸を交換した。
15. 段階14を繰り返した。
16. 透析管内の溶液を無菌のねじ込みキャップの付い
た壜に移し、使用するまで２〜８℃で貯蔵した。
た壜に移し、使用するまで２〜８℃で貯蔵した。
実施例4:生きた皮膚組織の等価物の破裂強さ 後述するような種々のコラーゲン調製物を使用して形成
した皮膚等価物を、前述した特許に開示された方法に従
って60mmのペトリ皿内に置いた。一般にこのような組織
等価物は以下の方法により製造する。
した皮膚等価物を、前述した特許に開示された方法に従
って60mmのペトリ皿内に置いた。一般にこのような組織
等価物は以下の方法により製造する。
（ａ） 収縮集結剤の分散するゲル混合物を生成する条
件下で、コラーゲン溶液と収縮集結剤とを混合する。
件下で、コラーゲン溶液と収縮集結剤とを混合する。
（ｂ） 段階（ａ）で製造したゲル混合物を、組織等価
物を形成するためにゲル混合物の収縮集結を可能とする
条件下で維持する。
物を形成するためにゲル混合物の収縮集結を可能とする
条件下で維持する。
導入した混合物は、0.49mlの10xDMEMと、0.54mlのウシ
胎児血清と、0.05mlの200mMグルタミンと、6ulの50mg/m
lゲンタマイシン（Gentamicin）スルフェートと、0.15m
lの71.2mg/ml重炭酸ナトリウムと、4mlの1mg/mlコラー
ゲンと、2.5x105個のヒトの皮膚線維芽細胞を含み、10
％血清を加えた0.6mlのDMEM懸濁液とを含んでいた。
胎児血清と、0.05mlの200mMグルタミンと、6ulの50mg/m
lゲンタマイシン（Gentamicin）スルフェートと、0.15m
lの71.2mg/ml重炭酸ナトリウムと、4mlの1mg/mlコラー
ゲンと、2.5x105個のヒトの皮膚線維芽細胞を含み、10
％血清を加えた0.6mlのDMEM懸濁液とを含んでいた。
前述した皮膚等価物を10％CO2中で７日間36℃でインキ
ュベートし、直径7mmの試料上で液体力学的破裂強さを
測定した。結果を以下に示す。コラーゲンの抽出源 破裂強さmm/Hg 前記の実施例１〜３に従って 酸抽出により製造した腱コラーゲン 約150〜250 ペプシンにより抽出した共通指伸筋腱 ６〜10 Bioeticaにより製造した、酸抽出に よる仔牛皮膚コラーゲン 18〜30 Pentapharmにより製造した、 ペプシン抽出によるブタ皮膚コラーゲン ５〜10 前記実施例１〜３の方法に従って 酸抽出により製造したラット尾腱 コラーゲン 60〜90 本明細書に記載した実施態様及び実施例は単に例示する
ためのものであって、当業者に示唆される種々の変形又
は変更は、本出願及び実証した特許請求の範囲内に含ま
れるものと考えるべきである。
ュベートし、直径7mmの試料上で液体力学的破裂強さを
測定した。結果を以下に示す。コラーゲンの抽出源 破裂強さmm/Hg 前記の実施例１〜３に従って 酸抽出により製造した腱コラーゲン 約150〜250 ペプシンにより抽出した共通指伸筋腱 ６〜10 Bioeticaにより製造した、酸抽出に よる仔牛皮膚コラーゲン 18〜30 Pentapharmにより製造した、 ペプシン抽出によるブタ皮膚コラーゲン ５〜10 前記実施例１〜３の方法に従って 酸抽出により製造したラット尾腱 コラーゲン 60〜90 本明細書に記載した実施態様及び実施例は単に例示する
ためのものであって、当業者に示唆される種々の変形又
は変更は、本出願及び実証した特許請求の範囲内に含ま
れるものと考えるべきである。
第１図は共通指伸筋腱の位置を示す仔水のひづめの図で
ある。
ある。
フロントページの続き (72)発明者 キヤスリーン・リーガン アメリカ合衆国、マサチユーセツツ・ 02115、ボストン、ゲインズバラ・ストリ ート・ナンバー・207・79 (72)発明者 ユージーン・ベル アメリカ合衆国、マサチユーセツツ・ 02115、ボストン、コモンウエルス・アベ ニユー・305 (56)参考文献 特開 昭64−6300（ＪＰ，Ａ)
Claims (18)
- 【請求項１】（ａ）鞘を除去して、細分化した共通指伸
筋腱を、pHが約6.5〜8.5のリン酸緩衝食塩水中で洗浄す
る段階、 （ｂ）弱酸及び弱い機械作用により、段階（ａ）で得ら
れた腱からコラーゲンを抽出する段階、 （ｃ）段階（ｂ）酸による抽出で得られたコラーゲンを
沈澱させる段階、及び （ｄ）沈澱したコラーゲンを回収する段階からなる腱か
らのコラーゲンの製造方法。 - 【請求項２】腱が仔牛の共通指伸筋腱であることを特徴
とする請求項１に記載の方法。 - 【請求項３】リン酸緩衝食塩水が、0.05M塩化ナトリウ
ムと2.2mMリン酸ナトリウム緩衝液とを約1:3〜1:1の割
合で含んでいることを特徴とする請求項１に記載の方
法。 - 【請求項４】前記割合が約1:3であることを特徴とする
請求項３に記載の方法。 - 【請求項５】酸が酢酸、クエン酸又は蟻酸であることを
特徴とする請求項１に記載の方法。 - 【請求項６】酸が酢酸であることを特徴とする請求項５
に記載の方法。 - 【請求項７】酸により抽出したコラーゲンを塩化ナトリ
ウムで沈澱させることを特徴とする請求項１に記載の方
法。 - 【請求項８】塩化ナトリウムが約0.6〜1.8Mであること
を特徴とする請求項７に記載の方法。 - 【請求項９】沈澱と通気とを同時に行い、その後沈澱し
たコラーゲンを圧力濾過することにより、段階（ｃ）及
び（ｄ）を実施することを特徴とする請求項１に記載の
方法。 - 【請求項１０】沈澱したコラーゲンを通気を伴う濾過に
より回収することを特徴とする請求項１に記載の方法。 - 【請求項１１】コラーゲンの収率が、細分化した腱の含
水重量の約４％より大きいことを特徴とする請求項１に
記載の方法。 - 【請求項１２】請求項１記載の方法により共通指伸筋腱
から抽出したコラーゲンを含んでいるタイプＩのコラー
ゲン組織等価物。 - 【請求項１３】腱が仔牛の共通指伸筋腱であることを特
徴とする請求項12に記載のコラーゲン組成物。 - 【請求項１４】抽出したコラーゲンが腱の含水重量の少
なくとも約３％〜６％であることを特徴とする請求項12
に記載のコラーゲン組成物 - 【請求項１５】請求項１記載の方法により共通指伸筋腱
から抽出したタイプＩのコラーゲンを含んでいる組織等
価物。 - 【請求項１６】腱が仔牛の共通指伸筋腱であることを特
徴とする請求項15に記載の組織等価物。 - 【請求項１７】破裂強さが少なくとも200mmHgであるこ
とを特徴とする請求項15に記載の組織等価物。 - 【請求項１８】破裂強さが約110〜150mmHgであることを
特徴とする請求項15に記載の組織等価物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US407,465 | 1989-09-15 | ||
| US07/407,465 US5106949A (en) | 1989-09-15 | 1989-09-15 | Collagen compositions and methods for preparation thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03170571A JPH03170571A (ja) | 1991-07-24 |
| JPH0730291B2 true JPH0730291B2 (ja) | 1995-04-05 |
Family
ID=23612220
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2245999A Expired - Fee Related JPH0730291B2 (ja) | 1989-09-15 | 1990-09-14 | コラーゲン組成物及び該コラーゲン組成物の製造方法 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5106949A (ja) |
| EP (1) | EP0419111B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0730291B2 (ja) |
| KR (1) | KR940001378B1 (ja) |
| AT (1) | ATE124418T1 (ja) |
| AU (1) | AU628638B2 (ja) |
| CA (1) | CA2023970C (ja) |
| DE (1) | DE69020466T2 (ja) |
| DK (1) | DK0419111T3 (ja) |
| ES (1) | ES2076323T3 (ja) |
| GR (1) | GR3017169T3 (ja) |
| IE (1) | IE70311B1 (ja) |
| IL (1) | IL95456A (ja) |
Families Citing this family (70)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2678624A1 (fr) * | 1991-07-04 | 1993-01-08 | Coletica | Utilisation de la peau non pigmentee de poisson, en particulier de poisson plat comme nouvelle source industrielle de collagene, procede d'extraction, collagene et biomateriau ainsi obtenus. |
| CA2119064A1 (en) * | 1993-03-17 | 1994-09-18 | Richard A. Berg | Dermal-epidermal in vitro test system |
| FR2714063B1 (fr) * | 1993-12-20 | 1996-03-08 | Javenech | Procédé de préparation de collagène à partir de cnidaires, et compositions obtenues utilisables en cosmétique. |
| DE69535595T2 (de) * | 1994-02-18 | 2008-06-05 | Organogenesis, Inc., Canton | Verfahren zur Herstellung einer Bio-umbaubaren Transplantatprothese aus Kollagen |
| US6334872B1 (en) * | 1994-02-18 | 2002-01-01 | Organogenesis Inc. | Method for treating diseased or damaged organs |
| CA2188563C (en) * | 1994-04-29 | 2005-08-02 | Andrew W. Buirge | Stent with collagen |
| US5681345A (en) * | 1995-03-01 | 1997-10-28 | Scimed Life Systems, Inc. | Sleeve carrying stent |
| US20020095218A1 (en) * | 1996-03-12 | 2002-07-18 | Carr Robert M. | Tissue repair fabric |
| US5733337A (en) | 1995-04-07 | 1998-03-31 | Organogenesis, Inc. | Tissue repair fabric |
| DE69633444T2 (de) * | 1995-06-07 | 2006-02-16 | Organogenesis, Inc., Canton | Zusammensetzungen aus rekonstituierten kollagenfasersegmenten und verfahren zu ihrer herstellung |
| US5965125A (en) | 1995-10-25 | 1999-10-12 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Hybrid matrix implants and explants |
| US6419920B1 (en) | 1995-10-25 | 2002-07-16 | Trans Karyotic Therapies, Inc. | Hybrid matrix implants and explants |
| ES2320939T3 (es) * | 1996-01-05 | 2009-05-29 | Autoimmune, Inc. | Metodo para la preparacion de colageno de tipo ii. |
| US5718012A (en) * | 1996-05-28 | 1998-02-17 | Organogenesis, Inc. | Method of strength enhancement of collagen constructs |
| AU742457B2 (en) | 1996-08-23 | 2002-01-03 | Cook Biotech, Incorporated | Graft prosthesis, materials and methods |
| US6666892B2 (en) * | 1996-08-23 | 2003-12-23 | Cook Biotech Incorporated | Multi-formed collagenous biomaterial medical device |
| US8716227B2 (en) | 1996-08-23 | 2014-05-06 | Cook Biotech Incorporated | Graft prosthesis, materials and methods |
| US5814328A (en) | 1997-01-13 | 1998-09-29 | Gunasekaran; Subramanian | Preparation of collagen using papain and a reducing agent |
| AUPO599897A0 (en) * | 1997-04-03 | 1997-05-01 | Vidal, Linus | Clear collagen for facial implants |
| AU729068B2 (en) * | 1997-04-03 | 2001-01-25 | Clearcoll Pty Ltd | Improved process for the manufacture of collagen |
| US20020086423A1 (en) * | 1997-09-09 | 2002-07-04 | Toshiaki Takezawa | Hydrogel thin film containing extracellular matrix components |
| US6432710B1 (en) | 1998-05-22 | 2002-08-13 | Isolagen Technologies, Inc. | Compositions for regenerating tissue that has deteriorated, and methods for using such compositions |
| ES2323662T3 (es) * | 1998-06-05 | 2009-07-22 | Organogenesis Inc. | Protesis de injerto vascular producidas por bioingenieria. |
| AU754838B2 (en) * | 1998-06-05 | 2002-11-28 | Organogenesis Inc. | Bioengineered flat sheet graft prostheses |
| AU763724B2 (en) * | 1998-06-05 | 2003-07-31 | Duke University School Of Medicine | Bioengineered vascular graft support prostheses |
| JP4341049B2 (ja) * | 1998-06-05 | 2009-10-07 | オルガノジェネシス インク． | 生物工学により作成したチューブ状移植片補綴 |
| US8882850B2 (en) * | 1998-12-01 | 2014-11-11 | Cook Biotech Incorporated | Multi-formed collagenous biomaterial medical device |
| WO2000032112A1 (en) * | 1998-12-01 | 2000-06-08 | Washington University | Embolization device |
| IL147207A0 (en) | 1999-06-21 | 2002-08-14 | Gen Hospital Corp | Methods and devices for culturing cells |
| AU7067200A (en) * | 1999-08-23 | 2001-03-19 | Organogenesis Inc. | Skin care compositions and treatments |
| US6592794B1 (en) * | 1999-09-28 | 2003-07-15 | Organogenesis Inc. | Process of making bioengineered collagen fibrils |
| CA2777791A1 (en) * | 2000-09-18 | 2002-03-21 | Organogenesis Inc. | Methods for treating a patient using a bioengineered flat sheet graft prostheses |
| US7993365B2 (en) * | 2001-06-08 | 2011-08-09 | Morris Innovative, Inc. | Method and apparatus for sealing access |
| US20060004408A1 (en) * | 2001-06-08 | 2006-01-05 | Morris Edward J | Method and apparatus for sealing access |
| US20070038244A1 (en) * | 2001-06-08 | 2007-02-15 | Morris Edward J | Method and apparatus for sealing access |
| BR0214212A (pt) | 2001-11-16 | 2004-10-26 | Childrens Medical Center | Criação de órgãos reprodutores femininos construìdos por tecido |
| US20030181371A1 (en) * | 2001-12-28 | 2003-09-25 | Angiotech Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods of using collajolie |
| AUPS242702A0 (en) * | 2002-05-21 | 2002-06-13 | Colltech Australia Limited | Improved method for the extraction and purification of collagen |
| US20040054414A1 (en) * | 2002-09-18 | 2004-03-18 | Trieu Hai H. | Collagen-based materials and methods for augmenting intervertebral discs |
| US7744651B2 (en) * | 2002-09-18 | 2010-06-29 | Warsaw Orthopedic, Inc | Compositions and methods for treating intervertebral discs with collagen-based materials |
| CN100394989C (zh) * | 2002-11-15 | 2008-06-18 | 华沙整形外科股份有限公司 | 包含微粒状基于胶原材料的组合物的制药应用和包含所述组合物的滑膜关节 |
| US20040186471A1 (en) * | 2002-12-07 | 2004-09-23 | Sdgi Holdings, Inc. | Method and apparatus for intervertebral disc expansion |
| BR0317715A (pt) * | 2002-12-27 | 2005-11-22 | Angiotech Int Ag | Composições e processos de uso de collajolie |
| EP1616019B1 (en) * | 2003-04-11 | 2008-12-10 | Ecodynamic BioLab Inc. | Method for extracting collagen comprising microbial fermentation |
| WO2004103333A1 (de) * | 2003-05-24 | 2004-12-02 | Juvena (International) Ag | Gewebekulturmedien als bestandteil von kosmetika |
| WO2005043122A2 (en) * | 2003-10-29 | 2005-05-12 | Warwick Mills, Inc. | Carrier fiber assembly for tissue structures |
| US20060246033A1 (en) * | 2005-03-02 | 2006-11-02 | Cook Biotech Incorporated | Injectable bulking agent compositions |
| US7899533B2 (en) * | 2005-10-25 | 2011-03-01 | Medtronic, Inc. | System and method of AV interval selection in an implantable medical device |
| US20070117176A1 (en) * | 2005-11-18 | 2007-05-24 | Srinivasan Aishwarya | Process for the extraction of atelopeptide collagen from a collagenous source by microbial treatment |
| US8399619B2 (en) * | 2006-06-30 | 2013-03-19 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Injectable collagen material |
| US8118779B2 (en) * | 2006-06-30 | 2012-02-21 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Collagen delivery device |
| WO2008085493A2 (en) * | 2006-12-27 | 2008-07-17 | Shriners Hospitals For Children | Tendon or ligament bioprostheses and methods of making same |
| US20080214795A1 (en) * | 2007-02-14 | 2008-09-04 | Amgen Inc. | Method of isolating antibodies by precipitation |
| AU2008219006B2 (en) | 2007-02-20 | 2013-04-18 | Shriners Hospitals For Children | In vivo hydraulic fixation including bio-rivets using biocompatible expandable fibers |
| US20090024106A1 (en) * | 2007-07-17 | 2009-01-22 | Morris Edward J | Method and apparatus for maintaining access |
| US20090022870A1 (en) | 2007-07-20 | 2009-01-22 | In Bong Cho | Method of manufacturing a transparent gelatin shape collagen food made with tendon and pettitoe of cow |
| EP2244639B8 (en) | 2008-02-22 | 2016-10-26 | MiMedx Group, Inc. | Biostaples suitable for wrist, hand and other ligament replacements or repairs |
| WO2009139871A2 (en) | 2008-05-16 | 2009-11-19 | Mimedx, Inc. | Medical constructs of twisted lengths of collagen fibers and methods of making same |
| WO2009155236A1 (en) | 2008-06-16 | 2009-12-23 | Morris Innovative Research, Inc. | Method and apparatus for sealing access |
| CN102159256B (zh) * | 2008-07-24 | 2014-11-12 | 西澳大利亚大学 | 一种用于细胞生长的胶原支架及其制备方法 |
| JP2010068867A (ja) * | 2008-09-16 | 2010-04-02 | Sunmax Biotechnology Co Ltd | 長時間作用型コラーゲンおよびその製造方法 |
| US8367148B2 (en) | 2008-10-09 | 2013-02-05 | Mimedx Group, Inc. | Methods of making biocomposite medical constructs and related constructs including artificial tissues, vessels and patches |
| US9636209B2 (en) | 2011-03-08 | 2017-05-02 | Mimedx Group, Inc. | Collagen fiber ribbons with integrated fixation sutures and methods of making the same |
| US20130011451A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Diversified Glogal Technologies, Llc | Footbed with non-denatured collagen |
| US9694106B2 (en) | 2011-07-11 | 2017-07-04 | Mimedx Group, Inc. | Synthetic collagen threads for cosmetic uses including skin wrinkle treatments and associated methods |
| EP2773388A4 (en) | 2011-11-02 | 2015-07-15 | Mimedx Group Inc | IMPLANTABLE COLLAGEN DEVICES AND METHODS AND SYSTEMS FOR MAKING SAME |
| PL226837B1 (pl) | 2012-08-24 | 2017-09-29 | Celther Polska Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością | Aktywna warstwa polimerowa utworzona zpochodnych chityny zwłaszcza doopatrunku oraz jejzastosowanie |
| WO2016071876A1 (es) * | 2014-11-06 | 2016-05-12 | Universidad Nacional De Colombia | Procedimiento para la preparación de colágeno tipo 1 y de soportes unidireccionales y multidireccionales que lo contienen |
| CN116966345A (zh) * | 2016-05-26 | 2023-10-31 | 汀布特Ip有限公司 | 3d可打印生物凝胶及其使用方法 |
| JP7012950B2 (ja) * | 2016-11-17 | 2022-01-31 | 地方独立行政法人東京都立産業技術研究センター | 生体組織孔閉鎖用、潰瘍保護用及び血管塞栓療術用ゾル |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2598608A (en) * | 1946-06-11 | 1952-05-27 | Research Corp | Preparation of collagenous materials |
| US2631942A (en) * | 1951-05-01 | 1953-03-17 | United Shoe Machinery Corp | Methods of forming fibers from collagen |
| US2920000A (en) * | 1955-11-07 | 1960-01-05 | Ethicon Inc Ethicon Inc | Removable valve Collagen article and the manufacture thereof |
| GB942226A (en) * | 1960-10-25 | 1963-11-20 | Ethicon Inc | Article and the preparation thereof |
| DE2405002B2 (de) * | 1974-02-02 | 1979-07-19 | Fa. H. Trommsdorff, 5110 Alsdorf | Lösliches natives Kollagen aus menschlicher Plancenta sowie dieses als therapeutischen Wirkstoff enthaltendes Mittel |
| JPS5643070A (en) * | 1979-08-10 | 1981-04-21 | Honda Motor Co Ltd | Stand locking device for twoowheel barrow |
| DE3020611C2 (de) * | 1980-05-30 | 1983-01-05 | Chemokol Gesellschaft zur Entwicklung von Kollagenprodukten, 5190 Stolberg | Verfahren zur Herstellung von Kollagenmaterial für chirurgische Zwecke |
| US4539716A (en) * | 1981-03-19 | 1985-09-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Fabrication of living blood vessels and glandular tissues |
| US4546500A (en) * | 1981-05-08 | 1985-10-15 | Massachusetts Institute Of Technology | Fabrication of living blood vessels and glandular tissues |
| US4485096A (en) * | 1982-02-26 | 1984-11-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Tissue-equivalent and method for preparation thereof |
| US4485097A (en) * | 1982-05-26 | 1984-11-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Bone-equivalent and method for preparation thereof |
| US4604346A (en) * | 1984-10-09 | 1986-08-05 | Massachusetts Institute Of Technology | Skin-equivalent prepared by the use of punch biopsy |
| DE3701036A1 (de) * | 1987-01-15 | 1988-10-13 | Heyl Chem Pharm | Kosmetische mittel |
| IT1214505B (it) * | 1987-03-12 | 1990-01-18 | Gentili Ist Spa | Procedimento per la preparazione di collageno e prodotti cosi'ottenuto. |
| FR2612938B1 (fr) * | 1987-03-26 | 1989-06-23 | Cird | Procede d'obtention d'un equivalent de peau et equivalent de peau correspondant |
| FR2612939B1 (fr) * | 1987-03-26 | 1989-06-23 | Cird | Equivalent de peau |
| US4835102A (en) * | 1987-03-31 | 1989-05-30 | Eugene Bell | Tissue equivalent test systems |
| FR2617488B1 (fr) * | 1987-07-01 | 1990-03-09 | Tab | Procede de fabrication de structures organisees de collagene, notamment d'origine humaine, et structures organisees de collagene correspondantes |
| US4975526A (en) * | 1989-02-23 | 1990-12-04 | Creative Biomolecules, Inc. | Bone collagen matrix for zenogenic implants |
| US4837379A (en) * | 1988-06-02 | 1989-06-06 | Organogenesis Inc. | Fibrin-collagen tissue equivalents and methods for preparation thereof |
-
1989
- 1989-09-15 US US07/407,465 patent/US5106949A/en not_active Expired - Lifetime
-
1990
- 1990-08-22 IL IL9545690A patent/IL95456A/en active IP Right Grant
- 1990-08-24 CA CA002023970A patent/CA2023970C/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-09-05 AU AU62158/90A patent/AU628638B2/en not_active Ceased
- 1990-09-11 EP EP90309943A patent/EP0419111B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-09-11 DK DK90309943.0T patent/DK0419111T3/da active
- 1990-09-11 ES ES90309943T patent/ES2076323T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-09-11 DE DE69020466T patent/DE69020466T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-09-11 AT AT90309943T patent/ATE124418T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-09-14 JP JP2245999A patent/JPH0730291B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1990-09-14 KR KR1019900014546A patent/KR940001378B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1990-09-14 IE IE334190A patent/IE70311B1/en not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-08-23 GR GR950402279T patent/GR3017169T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69020466T2 (de) | 1995-11-09 |
| ES2076323T3 (es) | 1995-11-01 |
| IE70311B1 (en) | 1996-11-27 |
| JPH03170571A (ja) | 1991-07-24 |
| KR940001378B1 (ko) | 1994-02-21 |
| DE69020466D1 (de) | 1995-08-03 |
| IE903341A1 (en) | 1991-04-10 |
| EP0419111A1 (en) | 1991-03-27 |
| EP0419111B1 (en) | 1995-06-28 |
| ATE124418T1 (de) | 1995-07-15 |
| GR3017169T3 (en) | 1995-11-30 |
| DK0419111T3 (da) | 1995-11-20 |
| AU628638B2 (en) | 1992-09-17 |
| KR910005892A (ko) | 1991-04-27 |
| US5106949A (en) | 1992-04-21 |
| CA2023970C (en) | 2002-01-01 |
| IL95456A0 (en) | 1991-06-30 |
| CA2023970A1 (en) | 1991-03-16 |
| IL95456A (en) | 1998-12-27 |
| AU6215890A (en) | 1991-03-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0730291B2 (ja) | コラーゲン組成物及び該コラーゲン組成物の製造方法 | |
| US5436135A (en) | New preparation of placenta collagen, their extraction method and their applications | |
| US4511653A (en) | Process for the industrial preparation of collagenous materials from human placental tissues, human collagenous materials obtained and their application as biomaterials | |
| Epstein et al. | Isolation and characterization of CNBr peptides of human (alpha 1 (III)) 3 collagen and tissue distribution of (alpha 1 (I)) 2 alpha 2 and (alpha 1 (III)) 3 collagens. | |
| AU2003229362B9 (en) | Collagen and method for producing same | |
| US5840848A (en) | Method for preparation of type II collagen | |
| JP5870398B2 (ja) | 高強度コラーゲン線維膜及びその製造方法 | |
| CA2140834A1 (en) | Method for removing the prions in collagens and collagens thereby obtained | |
| EP0297972A2 (fr) | Procédé de fabrication de structures organisées de collagène, notamment d'origine humaine, et structures organisées de collagène correspondantes | |
| Miyahara et al. | Age-related differences in human skin collagen: solubility in solvent, susceptibility to pepsin digestion, and the spectrum of the solubilized polymeric collagen molecules | |
| Maekawa et al. | Changes in collagen with age—I: The extraction of acid soluble collagens from the skin of mice | |
| CA1340222C (en) | Preparations of placenta collagen, their extraction method and their applications | |
| US4983721A (en) | Solvents for collagen | |
| US5064941A (en) | Collagen extracted from collagen-containing tissue | |
| JP2007124901A (ja) | コラーゲン抽出方法 | |
| CN113603768B (zh) | 一种鱼源胶原蛋白的制备方法 | |
| EP4265635A1 (en) | Method for producing human collagen structures with controlled characteristics | |
| Davison | Diamines and aminoalcohols: neutral solvents for native collagen | |
| JP2007261966A (ja) | Ｉｖ型コラーゲンの製造方法 | |
| FI109766B (fi) | Menetelmä eskaraasia sisältävän proteolyyttisen seoksen valmistamiseksi | |
| Zibrak et al. | Isolation and characterization of a rat lung fraction enriched in alveolar wall basement membranes | |
| CN117343160A (zh) | 一种低温酸法提取海蜇中胶原蛋白的方法 | |
| CN117402234A (zh) | 一种去除胃蛋白酶残留的胶原蛋白提取工艺 | |
| JPS5884801A (ja) | ヒアルロン酸の製造法 | |
| Lazarev | Collagen-polysaccharide gel as a model of the ground substance of connective tissue |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080405 Year of fee payment: 13 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |