JPH07229901A - 生物学的試料中の蛋白質の測定方法 - Google Patents
生物学的試料中の蛋白質の測定方法Info
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- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
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- G—PHYSICS
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- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
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- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 生物学的試料中の蛋白質測定のための試験具
であって、ポリハロゲン化フェノールスルホンフタレイ
ン蛋白質エラー指示薬、緩衝剤及び１０重量％又はそれ
未満の量の脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネートを含
浸させた担体マトリックスからなることを特徴とする試
験具。 【効果】 生物学的液体中の蛋白質測定のための上記試
験片は、様々なロットの担体マトリックスを使用して
も、担体マトリックス及び試薬組成物との間で有意な反
応性の相違を伴うことなく調製することができ、また、
視覚的検出及び装置による検出の両方に関し、検出限界
に対する尿のバラつきの影響が、本発明の試薬組成物に
より小さくなる。
であって、ポリハロゲン化フェノールスルホンフタレイ
ン蛋白質エラー指示薬、緩衝剤及び１０重量％又はそれ
未満の量の脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネートを含
浸させた担体マトリックスからなることを特徴とする試
験具。 【効果】 生物学的液体中の蛋白質測定のための上記試
験片は、様々なロットの担体マトリックスを使用して
も、担体マトリックス及び試薬組成物との間で有意な反
応性の相違を伴うことなく調製することができ、また、
視覚的検出及び装置による検出の両方に関し、検出限界
に対する尿のバラつきの影響が、本発明の試薬組成物に
より小さくなる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、全般的には蛋白質の検
出に関し、より詳細には、フェノールスルホンフタレイ
ン蛋白質エラー指示薬、緩衝剤及び１０重量％又はそれ
未満の量で存在する脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネ
ートを利用して生物学的試料中の蛋白質を測定する、新
規組成物及び方法に関する。
出に関し、より詳細には、フェノールスルホンフタレイ
ン蛋白質エラー指示薬、緩衝剤及び１０重量％又はそれ
未満の量で存在する脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネ
ートを利用して生物学的試料中の蛋白質を測定する、新
規組成物及び方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】腎臓、循環器系及び中枢神経系に影響を
及ぼす様々な病理学的状態の診断においては、生物学的
試料中に蛋白質が存在するかどうかの測定は、非常に重
要である。したがって、尿中の蛋白質（アルブミン）を
定性的及び／又は定量的に測定する必要のある場合は多
い。糖尿病及び腎臓疾患の診断においては、これは特に
重要である。糖尿病において主に測定される蛋白質はア
ルブミンであり、このため蛋白尿の試験に用いるモデル
システムはアルブミンである。
及ぼす様々な病理学的状態の診断においては、生物学的
試料中に蛋白質が存在するかどうかの測定は、非常に重
要である。したがって、尿中の蛋白質（アルブミン）を
定性的及び／又は定量的に測定する必要のある場合は多
い。糖尿病及び腎臓疾患の診断においては、これは特に
重要である。糖尿病において主に測定される蛋白質はア
ルブミンであり、このため蛋白尿の試験に用いるモデル
システムはアルブミンである。
【０００３】尿中にアルブミンが存在するかどうかを測
定するための方法は、良く知られている。アルブミン測
定のための最も安価で便利な方法は、蛋白質エラー指示
薬を含浸させた紙製の試験片を、少量の尿で湿らせるも
のである。アルブミンが尿試料中に存在すれば、その色
が変わることによって試験片がその存在を表示する。通
常、観察される色は、試料中のアルブミン濃度に応じて
変化する。このような色の変化が、試料中のアルブミン
の定量に利用される。
定するための方法は、良く知られている。アルブミン測
定のための最も安価で便利な方法は、蛋白質エラー指示
薬を含浸させた紙製の試験片を、少量の尿で湿らせるも
のである。アルブミンが尿試料中に存在すれば、その色
が変わることによって試験片がその存在を表示する。通
常、観察される色は、試料中のアルブミン濃度に応じて
変化する。このような色の変化が、試料中のアルブミン
の定量に利用される。
【０００４】上述した種類の試験片は、現場での蛋白質
の測定には便利で速やかに使用できる手段であるが、こ
れまでに生じている問題の一つが、いわゆる比重効果で
ある。尿中蛋白質の試験においては、代表的には蛋白質
と複合体を形成すると（pH指示薬の「蛋白質エラー」）
pKa の変化を示すpH指示薬である染料が、用いられてい
る。この方法によっては、陰性の尿と、痕跡程度の量の
蛋白質（１dl当たり約１５μg ）を含む尿とが十分に分
離されず、高比重の尿においては偽の陽性の結果が得ら
れてしまう。蛋白質エラー指示薬にある種のポリカーボ
ネート化合物を加えると、試薬紙の初期反応性が低下
し、高比重尿試料が蛋白質について陽性の結果を示す傾
向が小さくなる。
の測定には便利で速やかに使用できる手段であるが、こ
れまでに生じている問題の一つが、いわゆる比重効果で
ある。尿中蛋白質の試験においては、代表的には蛋白質
と複合体を形成すると（pH指示薬の「蛋白質エラー」）
pKa の変化を示すpH指示薬である染料が、用いられてい
る。この方法によっては、陰性の尿と、痕跡程度の量の
蛋白質（１dl当たり約１５μg ）を含む尿とが十分に分
離されず、高比重の尿においては偽の陽性の結果が得ら
れてしまう。蛋白質エラー指示薬にある種のポリカーボ
ネート化合物を加えると、試薬紙の初期反応性が低下
し、高比重尿試料が蛋白質について陽性の結果を示す傾
向が小さくなる。
【０００５】このような装置の作成に当たって生じるも
う一つの問題は、通常はろ紙である吸収材が、このシス
テム中で使用している試薬と一定（つまり均一な）の反
応性を示さないという点である。ろ紙は、ロットによっ
ては、同じ担体マトッリクス材が他の被分析物の測定に
用いる試薬組成物と反応する以上に、蛋白質測定に必要
な試薬と反応してしまうことが多い。
う一つの問題は、通常はろ紙である吸収材が、このシス
テム中で使用している試薬と一定（つまり均一な）の反
応性を示さないという点である。ろ紙は、ロットによっ
ては、同じ担体マトッリクス材が他の被分析物の測定に
用いる試薬組成物と反応する以上に、蛋白質測定に必要
な試薬と反応してしまうことが多い。
【０００６】試薬組成物と、使用する担体マトリックス
材との間で均一な反応性が得られるよう処方物を調製す
るという課題が、この分野においては長く解決されずに
いた課題であり、業界においては非常に重要な課題の一
つであった。当初は、試薬組成物のpHの調整によって、
試薬組成物と担体マトリックス材の反応性がまちまちで
あるとの問題が解決されると考えられた。しかし、pHの
調節は、すべてのロットの担体マトリックス材には有効
ではなかった。所望の結果は、陰性の場合により薄く、
陽性の場合より濃い色を呈する試薬組成物を得ることで
あった。ポリエチレン界面活性剤であるトリトン（Trit
on）Ｘ−１００は、反応性には影響を及ぼすことが認め
られたが、呈色領域の陰性および陽性末端の両方におい
ては、薄い色を呈した。
材との間で均一な反応性が得られるよう処方物を調製す
るという課題が、この分野においては長く解決されずに
いた課題であり、業界においては非常に重要な課題の一
つであった。当初は、試薬組成物のpHの調整によって、
試薬組成物と担体マトリックス材の反応性がまちまちで
あるとの問題が解決されると考えられた。しかし、pHの
調節は、すべてのロットの担体マトリックス材には有効
ではなかった。所望の結果は、陰性の場合により薄く、
陽性の場合より濃い色を呈する試薬組成物を得ることで
あった。ポリエチレン界面活性剤であるトリトン（Trit
on）Ｘ−１００は、反応性には影響を及ぼすことが認め
られたが、呈色領域の陰性および陽性末端の両方におい
ては、薄い色を呈した。
【０００７】反応性を調節するための別の方法について
も検討された。例えば、試薬組成物のあらゆる成分を変
更したが、変更しても、所望の陰性ではより薄く、陽性
ではより濃い色を示すのに有効ではなかった。ポリビニ
ルアルコールもまた試薬組成物中に導入されたが、異な
るロットの担体マトリックスとの試薬の反応性を調節す
るには有効ではなかった。
も検討された。例えば、試薬組成物のあらゆる成分を変
更したが、変更しても、所望の陰性ではより薄く、陽性
ではより濃い色を示すのに有効ではなかった。ポリビニ
ルアルコールもまた試薬組成物中に導入されたが、異な
るロットの担体マトリックスとの試薬の反応性を調節す
るには有効ではなかった。
【０００８】このように、品質管理を適正に行っても、
有効なスクリーニングを行い、在庫制限を行うよう試み
ても、異なるロットの担体マトリックス材における反応
性の問題は、有効に解決することができなかった。
有効なスクリーニングを行い、在庫制限を行うよう試み
ても、異なるロットの担体マトリックス材における反応
性の問題は、有効に解決することができなかった。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】蛋白質測定に関する上
述したような反応性の問題を克服するために、独特の試
薬組成物が調製され、試薬組成物と担体マトリックスと
の間の反応性の変動を実質的になくするような方法で処
方化された。さらにまた、測定に際して、尿pHのバラつ
きが小さくなることも、本試薬組成物がもたらしたもう
一つの効果である。
述したような反応性の問題を克服するために、独特の試
薬組成物が調製され、試薬組成物と担体マトリックスと
の間の反応性の変動を実質的になくするような方法で処
方化された。さらにまた、測定に際して、尿pHのバラつ
きが小さくなることも、本試薬組成物がもたらしたもう
一つの効果である。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明は、生物学的試料
中の蛋白質検出のための分析用試験片であって、フェノ
ールスルホンフタレイン蛋白質エラー指示薬、緩衝剤及
び１０重量％又はそれ未満の量で存在する脂肪族ポリエ
ーテル−ポリカーボネートを含浸させた吸収性担体マト
リックスからなる試験片を提供するものである。
中の蛋白質検出のための分析用試験片であって、フェノ
ールスルホンフタレイン蛋白質エラー指示薬、緩衝剤及
び１０重量％又はそれ未満の量で存在する脂肪族ポリエ
ーテル−ポリカーボネートを含浸させた吸収性担体マト
リックスからなる試験片を提供するものである。
【００１１】本発明によれば、試薬組成物を吸収性担体
に、２浸液により含浸させる操作を行い、まず緩衝剤並
びに所望であればＦＤ＆Ｃ黄色＃５及びＦＤ＆Ｃ＃３な
どのバックグラウンド染料を、水溶液から吸収性担体に
含浸させ、次にポリハロゲン化フェノールスルホンフタ
レイン蛋白質エラー指示薬及び脂肪族ポリエーテル−ポ
リカーボネート化合物を、アルコール溶液などの非水性
溶媒を用いて第２浸液により含浸させる。
に、２浸液により含浸させる操作を行い、まず緩衝剤並
びに所望であればＦＤ＆Ｃ黄色＃５及びＦＤ＆Ｃ＃３な
どのバックグラウンド染料を、水溶液から吸収性担体に
含浸させ、次にポリハロゲン化フェノールスルホンフタ
レイン蛋白質エラー指示薬及び脂肪族ポリエーテル−ポ
リカーボネート化合物を、アルコール溶液などの非水性
溶媒を用いて第２浸液により含浸させる。
【００１２】本発明のもう一つの特徴は、分析用試験片
を生物学的試料で湿らせる、生物学的試料中の蛋白質を
検出する方法に関する。湿らせる試験片は、上述した試
薬組成物を含浸させた吸収性担体を含む。試験片を観察
して、生物学的試料中の蛋白質の存在及びその量の両方
を指示する色変化を、検出する。
を生物学的試料で湿らせる、生物学的試料中の蛋白質を
検出する方法に関する。湿らせる試験片は、上述した試
薬組成物を含浸させた吸収性担体を含む。試験片を観察
して、生物学的試料中の蛋白質の存在及びその量の両方
を指示する色変化を、検出する。
【００１３】本発明により、生物学的液体中の蛋白質測
定のための試験片は、様々なロットの担体マトリックス
を使用しても、担体マトリックス及び試薬組成物との間
で有意な反応性の相違を伴うことなく調製することがで
きることを見いだした。これに加えて、視覚的検出及び
装置による検出の両方に関し、検出限界に対する尿のバ
ラつきの影響が、本発明の試薬組成物により小さくなる
ことも認められている。
定のための試験片は、様々なロットの担体マトリックス
を使用しても、担体マトリックス及び試薬組成物との間
で有意な反応性の相違を伴うことなく調製することがで
きることを見いだした。これに加えて、視覚的検出及び
装置による検出の両方に関し、検出限界に対する尿のバ
ラつきの影響が、本発明の試薬組成物により小さくなる
ことも認められている。
【００１４】本発明は、吸収性担体マトリックスに試薬
組成物を含浸させることにより達成される。吸収性担体
マトリックスは、好ましくはろ紙である。好ましいろ紙
は、Ahlstrom Filtration Inc.より得られる、木とセル
ロースパルプの混合物を含むグレード２０４のろ紙であ
る。このろ紙は、ロットによって異なる。過去において
は、スクリーニングと在庫制限は、最適な試薬の性能を
保証するには無効であった。
組成物を含浸させることにより達成される。吸収性担体
マトリックスは、好ましくはろ紙である。好ましいろ紙
は、Ahlstrom Filtration Inc.より得られる、木とセル
ロースパルプの混合物を含むグレード２０４のろ紙であ
る。このろ紙は、ロットによって異なる。過去において
は、スクリーニングと在庫制限は、最適な試薬の性能を
保証するには無効であった。
【００１５】吸収性担体として有用なその他の材料とし
ては、フェルト、多孔性セラミック片、及び織り、から
み合わせたガラス繊維（米国特許第３，８４６，２４７
号に記載されている）が挙げられる。また、試験片の適
切な吸収性担体としては、木、布、スポンジ材及び粘土
質物質（米国特許第３，５５２，９２８号に記載されて
いる）が示唆される。しかし、ロット毎に変動があるに
もかかわらず、ろ紙が特に適切である。
ては、フェルト、多孔性セラミック片、及び織り、から
み合わせたガラス繊維（米国特許第３，８４６，２４７
号に記載されている）が挙げられる。また、試験片の適
切な吸収性担体としては、木、布、スポンジ材及び粘土
質物質（米国特許第３，５５２，９２８号に記載されて
いる）が示唆される。しかし、ロット毎に変動があるに
もかかわらず、ろ紙が特に適切である。
【００１６】吸収性担体マトリックスに、上述したよう
な方法で試薬組成物を含浸させる。水性第１浸液及び非
水性溶媒溶液第２浸液を用いた２浸液含浸操作によって
最適な結果が得られることが認められている。吸収性片
には、好ましくは緩衝剤を含有させて、pHを約１．５〜
４．５の間に調整する。このシステムのpHは、好ましく
は約３．５、最も好ましくは約３．７に調節する。しか
し、緩衝剤系のこの特性は必須ではない。良く知られて
いるあらゆる緩衝剤を使用することができる。好ましい
緩衝剤としては、クエン酸及びクエン酸ナトリウムが挙
げられる。
な方法で試薬組成物を含浸させる。水性第１浸液及び非
水性溶媒溶液第２浸液を用いた２浸液含浸操作によって
最適な結果が得られることが認められている。吸収性片
には、好ましくは緩衝剤を含有させて、pHを約１．５〜
４．５の間に調整する。このシステムのpHは、好ましく
は約３．５、最も好ましくは約３．７に調節する。しか
し、緩衝剤系のこの特性は必須ではない。良く知られて
いるあらゆる緩衝剤を使用することができる。好ましい
緩衝剤としては、クエン酸及びクエン酸ナトリウムが挙
げられる。
【００１７】緩衝剤が、９．３g/dl以上含まれる場合
は、試薬の過剰が問題となり、緩衝剤が７．１g/dl未満
で含まれる場合は、緩衝効果は十分ではない。緩衝剤の
量が約８．７g/dlであるのが最適である。
は、試薬の過剰が問題となり、緩衝剤が７．１g/dl未満
で含まれる場合は、緩衝効果は十分ではない。緩衝剤の
量が約８．７g/dlであるのが最適である。
【００１８】緩衝剤の他、所望であれば赤色染料および
黄色染料を第１浸液において加えることができる。試薬
組成物に適切ないかなる赤色染料をも使用することがで
きる。しかし、ＦＤ＆Ｃ赤色染料＃３が好ましい。好ま
しい黄色染料としては、ＦＤ＆Ｃ黄色染料＃５が挙げら
れる。これらの染料は、陰性であるレベルでの尿の着色
をマスクする。この他の染料、界面活性剤なども、ま
た、所望により添加可能な成分として第１浸液に加える
ことができる。
黄色染料を第１浸液において加えることができる。試薬
組成物に適切ないかなる赤色染料をも使用することがで
きる。しかし、ＦＤ＆Ｃ赤色染料＃３が好ましい。好ま
しい黄色染料としては、ＦＤ＆Ｃ黄色染料＃５が挙げら
れる。これらの染料は、陰性であるレベルでの尿の着色
をマスクする。この他の染料、界面活性剤なども、ま
た、所望により添加可能な成分として第１浸液に加える
ことができる。
【００１９】一般的には、約４０ｇ／１００リットル以
上、６０ｇ／１００リットル未満の量の染料を使用する
ことができる。テトラブロモフェノールブルー（ＴＢＰ
Ｂ）については、５０ｇ／１００リットルが最適であ
る。
上、６０ｇ／１００リットル未満の量の染料を使用する
ことができる。テトラブロモフェノールブルー（ＴＢＰ
Ｂ）については、５０ｇ／１００リットルが最適であ
る。
【００２０】第２浸液においては、蒸発を防ぐために、
非水性溶媒、好ましくはエタノール溶液が使用される。
従来のポリハロゲン化フェノールスルホンフタレイン蛋
白質エラー指示薬を、指示薬化合物として使用すること
ができる。適切な指示薬としては、以下の化合物が挙げ
られる。 ３，４，５，６−テトラブロモフェノールスルホンフタ
レイン（ＴＢＰＳＰ）；３′，３″−ジニトロ−３，
４，５，６−テトラブロモフェノールスルホンフタレイ
ン（ＤＮＴＢ）；３′，３″−ジブロモ−３，４，５，
６−テトラブロモフェノールスルホンフタレイン（ＤＢ
ＴＢ）；３′，３″−ジヨード−３，４，５，６−テト
ラブロモフェノールスルホンフタレイン（ＤＩＴＢ）；
３′，３″，５′，５″−テトラニトロ−３，４，５，
６−テトラブロモフェノールスルホンフタレイン（ＴＮ
ＴＢ）；３′，３″−ジニトロソ−５′，５″−ジブロ
モフェノール−３，４，５，６−テトラブロモスルホン
フタレイン（ＤＮｏＨＢ）；３′−３″−ジヨード−
５，５″−ジニトロソフェノール−３，４，５，６−テ
トラブロモスルホンフタレイン（ＤＩＤＮｏ）；３′，
３″−ジニトロ−５′，５″，３，４，５，６−ヘキサ
ブロモフェノールスルホンフタレイン（ＤＮＨＢ）；
３′−ニトロ−５′，５″−ジヨード−３″，３，４，
５，６−ペンタブロモフェノールスルホンフタレイン
（ＮＤＩＰＢ）；３′，３″−ジヨード−５′，５″−
ジニトロフェノール−３，４，５，６−テトラブロモス
ルホンフタレイン（ＤＩＤＮＴＢ）；３′，３″−ジニ
トロ−５′，５″−ジブロモ−３，４，５，６−テトラ
ヨ−ドフェノールスルホンフタレイン（ＤＮＤＢＴ
Ｉ）；３′，３″，５′，５″−テトラクロロ−３，
４，５，６−テトラブロモフェノールスルホンフタレイ
ン（ＴＣＴＢ）；３′，３″，５′，５″−テトラブロ
モ−３，４，５，６−テトラヨ−ドフェノールスルホン
フタレイン（ＴＢＴＩ）；３′，３″，５′，５″−テ
トラヨードフェノール−３，４，５，６−テトラブロモ
スルホンフタレイン（ＴＩＴＢ）；３′，３″−ジスル
ホ−５′，５″−ジクロロ−３，４，５，６−テトラブ
ロモフェノールスルホンフタレイン（ＤＳＤＣ）；及び
３′，３″−ジスルホ−５′，５″−ジブロモフェノー
ル−３，４，５，６−テトラブロモスルホンフタレイン
（ＤＳＨＢ）。テトラブロモフェノールスルホンフタレ
インが、好ましい化合物である。
非水性溶媒、好ましくはエタノール溶液が使用される。
従来のポリハロゲン化フェノールスルホンフタレイン蛋
白質エラー指示薬を、指示薬化合物として使用すること
ができる。適切な指示薬としては、以下の化合物が挙げ
られる。 ３，４，５，６−テトラブロモフェノールスルホンフタ
レイン（ＴＢＰＳＰ）；３′，３″−ジニトロ−３，
４，５，６−テトラブロモフェノールスルホンフタレイ
ン（ＤＮＴＢ）；３′，３″−ジブロモ−３，４，５，
６−テトラブロモフェノールスルホンフタレイン（ＤＢ
ＴＢ）；３′，３″−ジヨード−３，４，５，６−テト
ラブロモフェノールスルホンフタレイン（ＤＩＴＢ）；
３′，３″，５′，５″−テトラニトロ−３，４，５，
６−テトラブロモフェノールスルホンフタレイン（ＴＮ
ＴＢ）；３′，３″−ジニトロソ−５′，５″−ジブロ
モフェノール−３，４，５，６−テトラブロモスルホン
フタレイン（ＤＮｏＨＢ）；３′−３″−ジヨード−
５，５″−ジニトロソフェノール−３，４，５，６−テ
トラブロモスルホンフタレイン（ＤＩＤＮｏ）；３′，
３″−ジニトロ−５′，５″，３，４，５，６−ヘキサ
ブロモフェノールスルホンフタレイン（ＤＮＨＢ）；
３′−ニトロ−５′，５″−ジヨード−３″，３，４，
５，６−ペンタブロモフェノールスルホンフタレイン
（ＮＤＩＰＢ）；３′，３″−ジヨード−５′，５″−
ジニトロフェノール−３，４，５，６−テトラブロモス
ルホンフタレイン（ＤＩＤＮＴＢ）；３′，３″−ジニ
トロ−５′，５″−ジブロモ−３，４，５，６−テトラ
ヨ−ドフェノールスルホンフタレイン（ＤＮＤＢＴ
Ｉ）；３′，３″，５′，５″−テトラクロロ−３，
４，５，６−テトラブロモフェノールスルホンフタレイ
ン（ＴＣＴＢ）；３′，３″，５′，５″−テトラブロ
モ−３，４，５，６−テトラヨ−ドフェノールスルホン
フタレイン（ＴＢＴＩ）；３′，３″，５′，５″−テ
トラヨードフェノール−３，４，５，６−テトラブロモ
スルホンフタレイン（ＴＩＴＢ）；３′，３″−ジスル
ホ−５′，５″−ジクロロ−３，４，５，６−テトラブ
ロモフェノールスルホンフタレイン（ＤＳＤＣ）；及び
３′，３″−ジスルホ−５′，５″−ジブロモフェノー
ル−３，４，５，６−テトラブロモスルホンフタレイン
（ＤＳＨＢ）。テトラブロモフェノールスルホンフタレ
インが、好ましい化合物である。
【００２１】第２浸液試薬組成物のその他の必須成分
は、脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネート化合物であ
る。好ましい化合物は、ジフェニルカーボネート及び二
官能性ヒドロキシ（アルコール）化合物又は二官能性ヒ
ドロキシ化合物の混合物を用いて調製する。その調製に
用いるポリカーボネートの種類、その分子量およびアル
コールは、第１表に記載した。
は、脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネート化合物であ
る。好ましい化合物は、ジフェニルカーボネート及び二
官能性ヒドロキシ（アルコール）化合物又は二官能性ヒ
ドロキシ化合物の混合物を用いて調製する。その調製に
用いるポリカーボネートの種類、その分子量およびアル
コールは、第１表に記載した。
【００２２】
【表１】
【００２３】第１表中の最後の化合物が特に好ましい。
ポリエーテルＬ９５０（登録商標：Bayer AG）とジフェ
ニルカーボネートとを、チタニウム（IV）ブトキシドに
より触媒的に縮合することによって調製されるこのポリ
プロピレンオキシドカーボネートコポリマーは、以下の
構造を有する。
ポリエーテルＬ９５０（登録商標：Bayer AG）とジフェ
ニルカーボネートとを、チタニウム（IV）ブトキシドに
より触媒的に縮合することによって調製されるこのポリ
プロピレンオキシドカーボネートコポリマーは、以下の
構造を有する。
【００２４】
【化３】
【００２５】出発物質であるポリエーテルＬ９５０は、
数平均分子量が約４２０である二官能性ポリプロピレン
グリコールであり、１，２−プロパンジオールの存在下
でプロピレンオキシドを重合させることによって調製さ
れる。ポリマー鎖は、各ジオール残基で成長を停止する
ので、各末端が２級ヒドロキシル基で終了する線状ポリ
エーテルが得られる（つまり、ヒドロキシル基による二
官能性）。ｎは、３〜２５の数であり、好ましくは４〜
１５の数、最も好ましくは４〜１１の数であり、そして
ｍは、１〜１０の数であり、好ましくは１〜７の数、最
も好ましくは１〜５の数である。このポリエーテル−ポ
リカーボネート化合物は、第２表に示した比率によるポ
リエーテル残基とカーボネートの結合により得られる。
数平均分子量が約４２０である二官能性ポリプロピレン
グリコールであり、１，２−プロパンジオールの存在下
でプロピレンオキシドを重合させることによって調製さ
れる。ポリマー鎖は、各ジオール残基で成長を停止する
ので、各末端が２級ヒドロキシル基で終了する線状ポリ
エーテルが得られる（つまり、ヒドロキシル基による二
官能性）。ｎは、３〜２５の数であり、好ましくは４〜
１５の数、最も好ましくは４〜１１の数であり、そして
ｍは、１〜１０の数であり、好ましくは１〜７の数、最
も好ましくは１〜５の数である。このポリエーテル−ポ
リカーボネート化合物は、第２表に示した比率によるポ
リエーテル残基とカーボネートの結合により得られる。
【００２６】
【表２】
【００２７】比重効果を減少させるには、脂肪族ポリエ
ーテル−ポリカーボネート化合物の量を、１０重量％又
はそれ未満に制限することが重要であることが認められ
ている。ろ紙効果を減少させるには、脂肪族ポリエーテ
ル−ポリカーボネート化合物の量を、２重量％又はそれ
未満に制限することが望ましいことが認められている。
ーテル−ポリカーボネート化合物の量を、１０重量％又
はそれ未満に制限することが重要であることが認められ
ている。ろ紙効果を減少させるには、脂肪族ポリエーテ
ル−ポリカーボネート化合物の量を、２重量％又はそれ
未満に制限することが望ましいことが認められている。
【００２８】
【実施例】以下に実施例を示して、本発明の好ましい実
施態様及び有用性を述べるが、請求項に特に記載しない
限り、本発明を限定することを意図するものではない。
施態様及び有用性を述べるが、請求項に特に記載しない
限り、本発明を限定することを意図するものではない。
【００２９】実施例１ Ａ．ポリカーボネート含有蛋白質試薬紙及びポリマー無
含有対照試薬の調製 有用なポリマーを確認する目的で、これらの非緩衝蛋白
質試薬を、緩衝試験溶液と共に使用した。 浸液溶液：０．３mMテトラブロモフェノールブルー、Ｔ
ＢＰＢ及び０．１％又は１．０（Ｗ／Ｖ）％ポリカーボ
ネートのＴＨＦ溶液。（対照試薬は、ポリマーを含有し
ない以外は、浸液溶液と同様に調製した）。
含有対照試薬の調製 有用なポリマーを確認する目的で、これらの非緩衝蛋白
質試薬を、緩衝試験溶液と共に使用した。 浸液溶液：０．３mMテトラブロモフェノールブルー、Ｔ
ＢＰＢ及び０．１％又は１．０（Ｗ／Ｖ）％ポリカーボ
ネートのＴＨＦ溶液。（対照試薬は、ポリマーを含有し
ない以外は、浸液溶液と同様に調製した）。
【００３０】浸液溶液を、巻取り速度４フィート／分で
Whatman ＣＣＰ−５００紙に含浸させ、６０℃で乾燥し
た。試薬紙を、０．２ｘ０．２インチのパッドを含む試
薬片に加工した。
Whatman ＣＣＰ−５００紙に含浸させ、６０℃で乾燥し
た。試薬紙を、０．２ｘ０．２インチのパッドを含む試
薬片に加工した。
【００３１】Ｂ．試薬の反応性の測定 １．試料。試薬紙を、pH３．５又は４．０のいずれかで
あり、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）２０mg/dl を含有
するか又は含有しない０．２０Ｍクエン酸カリウム緩衝
液に浸漬した。
あり、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）２０mg/dl を含有
するか又は含有しない０．２０Ｍクエン酸カリウム緩衝
液に浸漬した。
【００３２】２．機器による測定。試料中に本片を浸漬
してから２０秒後に、CLINITEK２００（登録商標）によ
り６３０nm（６１０nmでも可）における反射パーセント
を測定した。Ｋ／Ｓは、式：Ｋ／Ｓ＝（１−Ｒ）2 ／２
Ｒに従って算出した。それぞれの値は、１０回の測定値
の平均値である。
してから２０秒後に、CLINITEK２００（登録商標）によ
り６３０nm（６１０nmでも可）における反射パーセント
を測定した。Ｋ／Ｓは、式：Ｋ／Ｓ＝（１−Ｒ）2 ／２
Ｒに従って算出した。それぞれの値は、１０回の測定値
の平均値である。
【００３３】Ｃ．結果及び考察 １．データ。
【００３４】
【表３】
【００３５】（１）対照の紙のＫ／Ｓ値は約０．０５２
であることが認められた。したがって、対照の減少％
は、〔｛（ポリマーを含まない対照のＫ／Ｓ−０．０５
２）−（ポリマーを含む対照のＫ／Ｓ−０．０５２）｝
／（ ポリマーを含まない対照のＫ／Ｓ−０．０５
２）〕ｘ１００である。 （２）傾きの減少％は、〔（ポリマーを含まない場合の
傾き−ポリマーを含む場合の傾き）／（ ポリマーを含
まない場合の傾き）〕ｘ１００である。同様の結果が、
pH４．０においても得られた。
であることが認められた。したがって、対照の減少％
は、〔｛（ポリマーを含まない対照のＫ／Ｓ−０．０５
２）−（ポリマーを含む対照のＫ／Ｓ−０．０５２）｝
／（ ポリマーを含まない対照のＫ／Ｓ−０．０５
２）〕ｘ１００である。 （２）傾きの減少％は、〔（ポリマーを含まない場合の
傾き−ポリマーを含む場合の傾き）／（ ポリマーを含
まない場合の傾き）〕ｘ１００である。同様の結果が、
pH４．０においても得られた。
【００３６】２．考察。pH３．５及びpH４．０のいずれ
の緩衝溶液においても、ある種のポリカーボネートは、
傾きを低下させる以上に対照値を低下させた。この実験
結果より、ポリカーボネートを加えて蛋白質試薬（緩衝
剤及びＴＢＰＢの両方を含む）を完成させることによっ
て、初期色（対照）が薄くなり、そのため偽陽性の発生
率が低下したと推定された。
の緩衝溶液においても、ある種のポリカーボネートは、
傾きを低下させる以上に対照値を低下させた。この実験
結果より、ポリカーボネートを加えて蛋白質試薬（緩衝
剤及びＴＢＰＢの両方を含む）を完成させることによっ
て、初期色（対照）が薄くなり、そのため偽陽性の発生
率が低下したと推定された。
【００３７】実施例２ Ａ．ＴＢＰＢ−１０％ＫＯＫ１０，０７１蛋白質試薬処
方 １．保存用緩衝液。クエン酸１４．７５ｇ、クエン酸ナ
トリウム１０．９３ｇ及びＦＤ＆Ｃ黄色＃５の７．２mg
を蒸留水１５４mlに溶解し、pH３．４６の溶液を得た。 ２．第１浸液。（ａ）保存用緩衝液１７．９４ｇ；
（ｂ）エタノール５．０ｇ；及び（ｃ）蒸留水２．４７
ｇ。 ３．第２浸液。（ａ）ＴＰＢＰ７．５mg；（ｂ）ＫＯＫ
１０，０７１２．５ｇ；及び（ｃ）ＴＨＦを加えて２５
mlとする。 Ｂ．同一の第１浸液及びポリマーを含まない第２浸液に
より、対照処方物を調製した。
方 １．保存用緩衝液。クエン酸１４．７５ｇ、クエン酸ナ
トリウム１０．９３ｇ及びＦＤ＆Ｃ黄色＃５の７．２mg
を蒸留水１５４mlに溶解し、pH３．４６の溶液を得た。 ２．第１浸液。（ａ）保存用緩衝液１７．９４ｇ；
（ｂ）エタノール５．０ｇ；及び（ｃ）蒸留水２．４７
ｇ。 ３．第２浸液。（ａ）ＴＰＢＰ７．５mg；（ｂ）ＫＯＫ
１０，０７１２．５ｇ；及び（ｃ）ＴＨＦを加えて２５
mlとする。 Ｂ．同一の第１浸液及びポリマーを含まない第２浸液に
より、対照処方物を調製した。
【００３８】これらの浸液を、巻取り速度４フィート／
分でＥ＆Ｄ２３７Ｃ紙に含浸させ、第１浸液については
８０℃、第２浸液については６０℃の温度で乾燥した。
分でＥ＆Ｄ２３７Ｃ紙に含浸させ、第１浸液については
８０℃、第２浸液については６０℃の温度で乾燥した。
【００３９】Ｃ．試薬の反応性の測定 １．試料。試験に用いた試料は、（１）陰性中比重貯蔵
尿及び中比重貯蔵尿に加えて１５mg/dl の濃度としたＨ
ＳＡ、及び（２）臨床的に陰性* である高比重尿試料３
種（比重は、Ａで１．０２８；Ｂで１．０２７；及びＣ
で１．０２７）。これらの試料の反応性を、CLINITEK２
００を用いて測定した（１試料につき３回測定）。 ＊）臨床的に陰性は、Sulfosal試薬及びＨＳＡ＜２mg／
dl及び総タンパク質＜１０mg／dlを含むことにより陰性
と定義される。この目的は、１５mg／dlＨＳＡにより得
られる小さな応答である臨床的に陰性尿の応答を得るこ
とである。
尿及び中比重貯蔵尿に加えて１５mg/dl の濃度としたＨ
ＳＡ、及び（２）臨床的に陰性* である高比重尿試料３
種（比重は、Ａで１．０２８；Ｂで１．０２７；及びＣ
で１．０２７）。これらの試料の反応性を、CLINITEK２
００を用いて測定した（１試料につき３回測定）。 ＊）臨床的に陰性は、Sulfosal試薬及びＨＳＡ＜２mg／
dl及び総タンパク質＜１０mg／dlを含むことにより陰性
と定義される。この目的は、１５mg／dlＨＳＡにより得
られる小さな応答である臨床的に陰性尿の応答を得るこ
とである。
【００４０】２．各試料に関し、データをＫ／Ｓ値とし
て示した。加えて、高比重尿試料それぞれによる影響
は、〔（Ｋ／Ｓ高比重−Ｋ／Ｓ対照）／（Ｋ／Ｓ１５mg
/dl −Ｋ／Ｓ対照）〕ｘ１００として示した。この寄与
は、高比重尿によるＨＳＡ１５mg/dl の反応性のパーセ
ントである。
て示した。加えて、高比重尿試料それぞれによる影響
は、〔（Ｋ／Ｓ高比重−Ｋ／Ｓ対照）／（Ｋ／Ｓ１５mg
/dl −Ｋ／Ｓ対照）〕ｘ１００として示した。この寄与
は、高比重尿によるＨＳＡ１５mg/dl の反応性のパーセ
ントである。
【００４１】
【表４】
【００４２】初期色及びＨＳＡに対する反応性の両方
が、１０％ＫＯＫ１０，０７１により低下した。しか
し、陰性高比重尿による寄与も、また、かなり低下し
た。したがって、１０％ＫＯＫ１０，０７１ポリマーの
存在により、高比重尿試料が、偽陽性の結果を示す可能
性が小さくなると考えられる。
が、１０％ＫＯＫ１０，０７１により低下した。しか
し、陰性高比重尿による寄与も、また、かなり低下し
た。したがって、１０％ＫＯＫ１０，０７１ポリマーの
存在により、高比重尿試料が、偽陽性の結果を示す可能
性が小さくなると考えられる。
【００４３】別の試料についても、４％ＫＯＫ１０，０
７１を含む蛋白質試薬及び含まない蛋白質試薬を含むＴ
ＢＰＢの比較を行った。
７１を含む蛋白質試薬及び含まない蛋白質試薬を含むＴ
ＢＰＢの比較を行った。
【００４４】実施例３ Ａ．ＴＢＰＢ−ＫＯＫ蛋白質試薬処方物（浸液１００ml
を調製するための量） １．第１浸液（０．４５Ｍクエン酸ナトリウム、pH３．
７０、０．０３mMＦＤ＆Ｃ黄色；水溶液）。（ａ）０．
９Ｍクエン酸ナトリウム５０ml、pH３．７０；（ｂ）１
mMＦＤ＆Ｃ黄色＃５の３．０ml；及び（ｃ）蒸留水４７
ml。
を調製するための量） １．第１浸液（０．４５Ｍクエン酸ナトリウム、pH３．
７０、０．０３mMＦＤ＆Ｃ黄色；水溶液）。（ａ）０．
９Ｍクエン酸ナトリウム５０ml、pH３．７０；（ｂ）１
mMＦＤ＆Ｃ黄色＃５の３．０ml；及び（ｃ）蒸留水４７
ml。
【００４５】２．第２浸液（０．３０mMＴＢＰＢ、４
（Ｗ／Ｖ）％ＫＯＫ１０，０７１；ＴＨＦに溶解）。 （ａ）１mMＴＢＰＢのＴＨＦ溶液３０ml；（ｂ）１０％
ＫＯＫ１０，０７１のＴＨＦ溶液４０ml；及び（ｃ）Ｔ
ＨＦ３０ml。対照処方物を、同じ第１浸液及びポリマー
を含まない第２浸液を用いて調製した。これらの浸液
を、実施例２と同様にＥ＆Ｄ２３７Ｃ紙に含浸させた。
（Ｗ／Ｖ）％ＫＯＫ１０，０７１；ＴＨＦに溶解）。 （ａ）１mMＴＢＰＢのＴＨＦ溶液３０ml；（ｂ）１０％
ＫＯＫ１０，０７１のＴＨＦ溶液４０ml；及び（ｃ）Ｔ
ＨＦ３０ml。対照処方物を、同じ第１浸液及びポリマー
を含まない第２浸液を用いて調製した。これらの浸液
を、実施例２と同様にＥ＆Ｄ２３７Ｃ紙に含浸させた。
【００４６】Ｂ．試薬の反応性の測定 １．試料。中比重尿の試料に、上述したようにＨＳＡを
加えた。臨床的に陰性な高比重尿１種（Ａ；比重＝１．
０３０；pH＝５．６）及び考案したアルカリ性高比重貯
蔵尿１種（Ｂ；比重＝１．０２４；pH＝８．７）を使用
して、偽陽性を読み取る可能性について試験した。高比
重尿「Ｂ」を「最悪症例」の例として用い、ＫＯＫポリ
マー効果の限界について試験を行った。CLINITEK２００
＋を用い、各試料につき６回測定を繰り返し、得られた
データを第５表に示した。
加えた。臨床的に陰性な高比重尿１種（Ａ；比重＝１．
０３０；pH＝５．６）及び考案したアルカリ性高比重貯
蔵尿１種（Ｂ；比重＝１．０２４；pH＝８．７）を使用
して、偽陽性を読み取る可能性について試験した。高比
重尿「Ｂ」を「最悪症例」の例として用い、ＫＯＫポリ
マー効果の限界について試験を行った。CLINITEK２００
＋を用い、各試料につき６回測定を繰り返し、得られた
データを第５表に示した。
【００４７】
【表５】
【００４８】実施例２の試料と同様、初期色及びＨＳＡ
に対する反応性が、ポリカーボネートＫＯＫ１０，０７
１により低下した。同様に、陰性高比重試料の寄与も、
また、ポリカーボネートを含まない試料に関しては、小
さくなる。これによって、ポリカーボネートにより高比
重尿試料が偽陽性の結果を示す可能性が小さくなること
が確認される。
に対する反応性が、ポリカーボネートＫＯＫ１０，０７
１により低下した。同様に、陰性高比重試料の寄与も、
また、ポリカーボネートを含まない試料に関しては、小
さくなる。これによって、ポリカーボネートにより高比
重尿試料が偽陽性の結果を示す可能性が小さくなること
が確認される。
【００４９】実施例４ クエン酸ナトリウム４１７ｇ、クエン酸４５５ｇ、ＦＤ
＆Ｃ黄色＃５の０．２９ｇ及びＦＤ＆Ｃ赤色＃３の０．
５ｇ、並びにＰＶＡ２４ｇを含み、最終的にpH３．７に
調整した水溶液１０リットルを用いて、グレード２０４
Ｃのろ紙に含浸させた。
＆Ｃ黄色＃５の０．２９ｇ及びＦＤ＆Ｃ赤色＃３の０．
５ｇ、並びにＰＶＡ２４ｇを含み、最終的にpH３．７に
調整した水溶液１０リットルを用いて、グレード２０４
Ｃのろ紙に含浸させた。
【００５０】第１浸液の乾燥後（８０〜１００℃の温度
で）、第２浸液をろ紙に含浸させた。第２液（１０リッ
トル）は、テトラブロモフェノーリスルホンフタレイン
５ｇ、クエン酸５０ｇ、並びにポリエーテルＬ９５０及
びジフェニルカーボネートとを、チタン（IV）ブトキシ
ドにより触媒的に縮合することによって調製されるプロ
ピレンオキシドカーボネートコポリマー１５０ｇのエタ
ノール溶液であった。次いで、得られた物質を３５〜１
０５℃の温度で乾燥した。
で）、第２浸液をろ紙に含浸させた。第２液（１０リッ
トル）は、テトラブロモフェノーリスルホンフタレイン
５ｇ、クエン酸５０ｇ、並びにポリエーテルＬ９５０及
びジフェニルカーボネートとを、チタン（IV）ブトキシ
ドにより触媒的に縮合することによって調製されるプロ
ピレンオキシドカーボネートコポリマー１５０ｇのエタ
ノール溶液であった。次いで、得られた物質を３５〜１
０５℃の温度で乾燥した。
【００５１】実施例５ パルプのロットのみが異なるろ紙のロットが、ＫＯＫを
含まない蛋白質試薬と共に用いられた場合に、大きな反
応性の相違を示した（第６表を参照）。ろ紙の繊維に対
する染料及び蛋白質の結合の相違が、ロット間の相違を
もたらす原因であると主張されている。さらにまた、ろ
紙に対する染料の結合が増大すると、測定のバックグラ
ウンドが増大し、ろ紙に対する蛋白質の結合が増大する
と、測定の蛋白質応答が低下するとも主張されている。
第６表は、ＫＯＫを含まない実施例４と類似した中心処
方を有することに基づいている。
含まない蛋白質試薬と共に用いられた場合に、大きな反
応性の相違を示した（第６表を参照）。ろ紙の繊維に対
する染料及び蛋白質の結合の相違が、ロット間の相違を
もたらす原因であると主張されている。さらにまた、ろ
紙に対する染料の結合が増大すると、測定のバックグラ
ウンドが増大し、ろ紙に対する蛋白質の結合が増大する
と、測定の蛋白質応答が低下するとも主張されている。
第６表は、ＫＯＫを含まない実施例４と類似した中心処
方を有することに基づいている。
【００５２】
【表６】
【００５３】異なる２種類のマイルス（Miles ）社の装
置、CLINITEK１０及びCLINITEK２００については、試薬
の反応性を解読数値として表示した。解読数値は、６１
０〜６６０nmにおける染料の最大吸収の反射率パーセン
トに基づく。解読数値が小さければ、反応性が高く、バ
ックグラウンド色も大きいことが示される。試薬のpH
は、これらの測定においては３．４６である。２３７及
び２０４のグレードのろ紙は、Ahlstrom Filtration 社
（Mt. Holly Springs ）の製品である。
置、CLINITEK１０及びCLINITEK２００については、試薬
の反応性を解読数値として表示した。解読数値は、６１
０〜６６０nmにおける染料の最大吸収の反射率パーセン
トに基づく。解読数値が小さければ、反応性が高く、バ
ックグラウンド色も大きいことが示される。試薬のpH
は、これらの測定においては３．４６である。２３７及
び２０４のグレードのろ紙は、Ahlstrom Filtration 社
（Mt. Holly Springs ）の製品である。
【００５４】実施例４に従って調製した分析用試験片を
尿で湿らせ、生じる色変化を観察し、生物学的な尿試料
における蛋白質を示すものとして記録した。
尿で湿らせ、生じる色変化を観察し、生物学的な尿試料
における蛋白質を示すものとして記録した。
【００５５】第７表に示すよう蛋白質４試薬「プロ４
（Pro 4 ）」（実施例４に基づく）によりろ紙のロット
による寄与が大きく低下した。この減少により、生産性
が増大し、試薬を用いて得られる結果がより一定となっ
た。ポリマーは、セルロース繊維への染料の結合を開裂
させることによって、ろ紙によるバラつきを減少させる
と考えられる。その結果、蛋白質試薬の反応性を、目標
に対して一定に保つことができる。
（Pro 4 ）」（実施例４に基づく）によりろ紙のロット
による寄与が大きく低下した。この減少により、生産性
が増大し、試薬を用いて得られる結果がより一定となっ
た。ポリマーは、セルロース繊維への染料の結合を開裂
させることによって、ろ紙によるバラつきを減少させる
と考えられる。その結果、蛋白質試薬の反応性を、目標
に対して一定に保つことができる。
【００５６】
【表７】
【００５７】例え異なるロットのろ紙を用いたとして
も、試薬組成物とろ紙との間の反応性は、蛋白質の測定
において重要な因子とはならないことが観察された。更
に、試験片により、視覚的及び装置による検出限界の両
方について、異なる尿試料によるバラつきが小さくなる
ことが示された。これは、中及び高比重尿に対する検出
限界が、視覚的及び装置による読み取り値の両方でまち
まちであることの多い蛋白質測定に用いられているこの
他の処方物とは反対である。
も、試薬組成物とろ紙との間の反応性は、蛋白質の測定
において重要な因子とはならないことが観察された。更
に、試験片により、視覚的及び装置による検出限界の両
方について、異なる尿試料によるバラつきが小さくなる
ことが示された。これは、中及び高比重尿に対する検出
限界が、視覚的及び装置による読み取り値の両方でまち
まちであることの多い蛋白質測定に用いられているこの
他の処方物とは反対である。
【００５８】本発明は、多様に修正した形、及び別の形
で使用することも可能であるが、その特有な実施態様
は、実施例により示されており、詳細に記載されてい
る。しかし、これらの実施例は、本発明を、開示されて
いる特定の形に限定することを目的とするものではな
く、反対にこの目的は、請求項に定義されているような
本発明の精神及び範囲内であるあらゆる修正物、均等物
及び代替物を含むものであることが理解されなければな
らない。
で使用することも可能であるが、その特有な実施態様
は、実施例により示されており、詳細に記載されてい
る。しかし、これらの実施例は、本発明を、開示されて
いる特定の形に限定することを目的とするものではな
く、反対にこの目的は、請求項に定義されているような
本発明の精神及び範囲内であるあらゆる修正物、均等物
及び代替物を含むものであることが理解されなければな
らない。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 アンジェラ・エー・マイケルズ アメリカ合衆国、インデイアナ州、46514、 エルクハート、ブライアーウッド・ドライ ブ 23789 (72)発明者 マイケル・ジェー・プジア アメリカ合衆国、インデイアナ州、46530、 グレンジャー、フォックス・ホロー・コー ト 51621 (72)発明者 ロナルド・ジー・ソマー アメリカ合衆国、インデイアナ州、46514、 エルクハート、マール・ドライブ 55745
Claims (4)
- 【請求項１】 生物学的試料中の蛋白質測定のための試
験具であって、ポリハロゲン化フェノールスルホンフタ
レイン蛋白質エラー指示薬、緩衝剤及び１０重量％又は
それ未満の量の脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネート
を含浸させた担体マトリックスからなることを特徴とす
る試験具。 - 【請求項２】 脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネート
が、２％又はそれ未満の量で存在し、下記式： 【化１】 （式中、ｎは、４〜１５の数であり、そしてｍは、１〜
１０の数である）で示される構造を有する請求項１記載
の試験具。 - 【請求項３】 生物学的試料中の蛋白質を検出する方法
であって、（ａ）分析用試験片を生物学的試料で湿ら
し、該試験片が、第１水性浸液中で緩衝剤を含浸させた
吸収性担体を含み、次いで該吸収性担体に、ポリハロゲ
ン化フェノールスルホンフタレイン蛋白質エラー指示薬
及び脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネート１０重量％
又はそれ未満を含む非水性溶媒溶液を含浸させる工程；
及び（ｂ）試験片のいかなる色変化をも観察かつ記録す
る工程を含み、色変化が該生物学的試料中の蛋白質を表
示する方法。 - 【請求項４】 脂肪族ポリエーテル−ポリカーボネート
が、２％又はそれ未満の量で存在し、下記式： 【化２】 （式中、ｎ及びｍは、請求項２と同義である）で示され
る構造を有する請求項３記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/192,345 US5424215A (en) | 1994-02-07 | 1994-02-07 | Assay for the determination of protein in a biological sample |
| US08/192345 | 1994-02-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
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