KR100377039B1 - 생물학적샘플중의단백질을측정하기위한검정법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은, 페놀설폰프탈레인 단백질 에러 지시제, 완충액 및 10중량% 이하의 양으로 존재하는 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트를 이용하여 단백질을 검출하기 위한 신규한 조성물 및 방법에 관한 것이다.

Description

생물학적 샘플중의 단백질을 측정하기 위한 검정법{Assay for the determination of protein in a biological sample}
본 발명은 일반적으로 단백질 검출법, 보다 특정하게는, 페놀설폰프탈레인 단백오차 지시제, 완충액 및 10중량% 이하의 양으로 존재하는 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트를 사용하여 생물학적 샘플 중에서 단백질을 측정하기 위한 신규한 조성물 및 방법에 관한 것이다.
생물학적 샘플 중에서 단백질의 존재를 측정하는 것은 신장, 순환계 및 중추신경계에 영향을 미치는 몇몇 병리학적 질환의 진단에 있어 매우 중요하다. 따라서, 뇨중 단백질(알부민)을 정량적으로 및/또는 정성적으로 측정할 필요가 종종 있다. 이것은 당뇨벽 및 신장 질환의 진단에 있어 특히 중요하다. 당뇨병 측정시 우세한 단백질은 알부민으로, 단백뇨 시험에 대한 모델 시스템은 알부민이다.
뇨중 알부민의 존재를 측정하기 위한 방법은 널리 공지되어 있다. 알부민 측정을 위한 가장 저렴하고 편리한 방법은 단백오차 지시제로 함침시킨 종이 시험 스트립을 소량의 뇨로 습윤화시킴을 포함한다. 알부민이 뇨 샘플 중에 존재하는 경우, 시험 스트립은 색상의 단순한 변화에 의해 이를 지시하게 된다. 관측된 색상은일반적으로 샘플중 알부민의 농도에 따라 다양하다. 다양한 색상 변화를 사용하여 샘플중 알부민을 정량화한다.
상기 유형의 시험 스트립이 단백질의 즉석에서의 측정에 있어 편리하고 신속한 비히클이기는 하지만, 발생하는 문제점중 하나는 소위 비중 효과이다. 일반적으로 뇨 단백질에 대한 시험은, 단백질과 복합체화되는 경우 pKa 값이 변하는 pH 지시제 염료를 사용한다(pH 지시제의 "단백오차"). 이러한 방법은 음성 뇨와 미량농도의 단백질(약 15μg/dl)을 함유하는 뇨 간에 충분한 구별을 제공하지 못하며 고 비중의 뇨에서 위 양성 판독(false positive readings)을 제공한다. 특정 폴리카보네이트 화합물의 단백오차 지시제로의 부가는 시약 종이의 초기 반응성을 낮추고 고 비중 뇨 샘플이 단백질에 대한 양성 판독을 일으키는 경향을 감소시키는 것으로 밝혀졌다.
이러한 장치의 구축에서 발생하는 또 다른 문제점은, 흡수재, 통상 여과지가 시스템중 사용되는 시약과 일관된(즉, 균일한) 반응성을 나타내지 않는다는 점이다. 여과지 로트(lot)는 종종 기타 분석물 측정을 위한 시약 조성물과 반응하는 동일 캐리어 매트릭스 보다 큰 정도로 단백질 측정에 필요한 시약과 상호 작용한다.
사용된 시약 조성물과 캐리어 매트릭스 재료간의 균일한 반응성을 수득하기 위하여 제형을 조정하는 문제는 선행 분야의 지속된 문제로서 산업상 매우 중요한 문제중 하나였다. 처음에는 시약 조성물의 pH 조정이 시약 조성물과 캐리어 매트릭스 재료의 반응성에 있어 가변성(vaiability)의 문제를 극복할 수 있다고 간주되었다. 하지만, pH 조정은 캐리어 매트릭스 재료의 모든 로트에 대해 효과적이지 않다. 바람직한 결과는 보다 밝은 음성 색상과 보다 어두운 양성 색상을 일으키는 시약 조성물을 확립하는 것이다. 폴리에틸렌 계면활성제인 트리톤 X-100은 반응성에 영향을 주지만 색상 영역의 음성 및 양성 말단 모두에서 보다 밝은 색상을 나타내는 것으로 밝혀졌다.
반응성을 조정하는 기타 수단이 연구되었다. 예를 들면, 시약 조성물중 모든 성분은 가변적이나, 이러한 가변성은 목적하는 보다 밝은 음성 색상과 보다 어두운 양성 색상을 일으키는데 효과적이지 않은 것으로 밝혀겼다. 폴리비닐 알콜이 또한 시약 조성물 내로 도입되었으나, 상이한 캐리어 매트릭스 로트와의 시약 반응특성을 조절하는 데에는 효과적이지 않은 것으로 밝혀졌다.
따라서, 적절히 특성을 조절하고 효과적인 스크리닝 및 목록 제한을 실행하려해도 상이한 캐리어 매트릭스 재료간의 반응성 문제를 효과적으로 조절할 수 없었다.
단백질 측정을 위해 상기 언급한 반응성 문제를 극복하기 위하여 단일 시약 조성물을, 시약 조성물과 캐리어 매트릭스간의 반응성에 있어 가변성이 실질적으로 제거되도록 제조하고 제형화하였다. 더구나, 검정 결과에 있어 뇨 pH 가변성의 감소는 시약 조성물의 관측된 또 다른 이점이다.
본 발명은, 페놀설폰프탈레인 단백오차 지시제, 완충액 및 10 중량% 이하의 양으로 존재하는 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트로 함침된 흡수 캐리어 매트릭스를 포함하는, 생물학적 샘플중의 단백질 검출을 위한 분석용 시험 스트립을 제공한다.
본 발명에 따라, 완충액 및 임의로 FD&C 황색 ＃5 및 FD&C ＃3과 같은 배경 염료가 수용액으로부터 먼저 흡수 캐리어내로 함침되고, 폴리할로겐화 페놀설폰프탈레인 단백오차 지시제 및 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트 화합물이 알콜 용액과 같은 비수성 용매를 사용하는 제2 침지시 함침되는, 시약 조성물을 사용한 흡수 캐리어의 2단계-침치 함침 방법을 사용한다.
본 발명의 또 다른 양태는 분석용 시험 스트립이 생물학적 샘플로 습윤되는, 생물학적 샘플중의 단백질을 검출하는 방법에 관한 것이다. 습윤화된 시험 스트립은 상기한 시약 조성물로 함침된 흡수 캐리어를 포함한다. 시험 스트립은 생물학적 샘플내 단백질의 존재 및 양 모두를 지시하는 어떠한 색상 변화도 검출하는 것으로 관측된다.
본 발명에 따라, 생물학적 체액내 단백질의 측정을 위한 시험 스트립은 캐리어 매트릭스의 로트를 다양화시키는데 있어서 캐리어 매트릭스와 시약 조성물간의 어떠한 현저한 반응성 문제를 일으키지 않고 제조될 수 있는 것으로 밝혀졌다. 또한, 검출 한계, 즉 시각적 검출 및 장치적 검출 모두에 대한 뇨 가변성의 영향이 본 발명의 시약 조성물에 의해 감소되는 것으로 밝혀졌다.
본 발명은 흡수 캐리어 매트릭스를 시약 조성물로 함침시킴으로씨 달성된다. 흡수 캐리어 매트릭스는 바람직하게는 여과지이다. 바람직한 여과지는 알스트롬 필트레이션 인코포레이티드(Ahlstrom Filtration Inc.)에서 수득되는 등급 204호의 것으로 목재 및 셀룰로스 펄프의 혼합물을 함유한다. 이러한 여과지는 로트마다 다르다. 과거에는 스크리닝 및 목록 제한이 최적 시약 수행능을 보장하는데 있어 비효과적이었다.
흡수 캐리어로서 유용한 기타 물질은 펠트, 다공성 세라믹 스트립 및 직조매트 유리 섬유를 포함한다[미국 특허 제3,846,247호]. 또한 시험 스트립의 적합한 흡수 캐리어로서 목재, 천, 스폰지 재료 및 점토성 물질과 같은 재료가 제시되었다[미국 특허 제3,552,928호]. 하지만, 로트마다 존재하는 가변성에도 불구하고 여과지가 특히 적합하다.
흡수 캐리어 매트릭스를 상기 방식으로 시약 조성물로 함침시킨다. 수성 제1 침지액 및 비수성 용매 용액 제2 침지액을 사용하는 2단계 침지 함침 방법이 최적의 결과를 제공함이 밝혀졌다. 흡수 스트립은 바람직하게는 약 1.5 내지 4.5의 pH로 조정하는 완충액을 함유한다. 바람직하게, 시스템의 pH를 약 3.5 및 가장 바람직하게는 약 3.7로 조정한다. 하지만, 완충 시스템의 특성은 중요하지 않다. 모든 숙지된 완충 재료를 사용할 수 있다. 바람직한 완충액은 시트르산 및 시트르산나트륨을 포함한다.
완충액이 9.3g/dl 이상으로 존재하는 경우 시약 런오우버 (runover)가 문제시될 수 있고 완충액이 7.1g/dl 이하인 경우 완충작용이 충분하지 않을 수 있다. 약 8.7g/dl에 상응하는 완충액 양이 최적이다.
완충물질 이외에, 적색 염료 및 황색 염료를 제1 침지 동안에 임의로 가한다. 시약 조성물에 적합한 모든 적색 염료를 사용할 수 있다. 하지만, FD&C 적색 염료 ＃3이 바람직한 재료이다. 바람직한 황색 염료는 FD&C 황색 ＃5이다. 염료는 음성 색상 수준에서 뇨 발색을 차폐시킨다. 기타 염료, 계면활성제 등을 또한 부가의 임의 성분으로서 제1 침지액에 가할 수 있다.
일반적으로, 약 40g/100ℓ 이상 60g/100ℓ 이하의 염료를 사용할 수 있다. 테트라브로모페놀 블루(TBPB)의 경우 50g/100ℓ 가 최적이다.
제2 침지액에는, 비수성 용매, 바람직하게는 에탄올 용액을 사용하여 증발을 감소시킨다. 통상의 폴리할로겐화 페놀설폰프탈레인 단백오차 지시제를 지시제 화합물로서 사용할 수 있다. 적합한 재료는 하기를 포함한다.
3,4,5,6-테트라브로모페놀설폰프탈레인(TBPSP);
3',3"-디니트로-3,4,5,6-테트라브로모페놀설폰프탈레인(DNTB);
3',3"-디브로모-3,4,5,6-테트라브로모페놀설폰프탈레인(DBTB);
3',3"-디요오도-3,4,5,6-테트라브로모페놀설폰프탈레인(DITB);
3',3",5',5"-테트라니트로-3,4,5,6-테트라브로모페놀설폰프탈레인(TNTB);
3',3"-디니트로소-5',5"-디브로모페놀-3,4,5,6-테트라브로모설폰프탈레인(DNoHB);
3',3"-디요오도-5',5'-디니트로소페놀-3,4,5,6-테트라브로모설폰프탈레인(DIDNo);
3',3"-디니트로-5',5",3,4,5,6-헥사브로모페놀설폰프탈레인(DNHB);
3'-니트로-5,5',5"-디요오도-3",3,4,5,6-펜타브로모페놀설폰프탈레인(NDIPB);
3',3"-디요오도-5',5"-디니트로페놀-3,4,5,6-테트라브로모설폰프탈레인(DDNTB);
3',3"-디니트로-5',5"-디브로모-3,4,5,6-테트라요오도페놀설폰프탈레인(DNDBTI);
3',3",5',5"-테트라클로로-3,4,5,6-테트라브로모페놀설폰프탈레인(TCTB);
3',3",5',5"-테트라브로모-3,4,5,6-테트라요오도페놀설폰프탈레인(TBTI);
3',3",5',5"-테트라요오도페놀-3,4,5,6-테트라브로모설폰프탈레인(TITB);
3',3"-디설포-5',5"-디클로로-3,4,5,6-테트라브로모페놀설폰프탈레인(DSDC);
3',3"-디설포-5',5"-디브로모페놀-3,4,5,6-테트라브로모설폰프탈레인(DSHB).
테트라브로모페놀설폰프탈레인이 바람직한 재료이다.
제2 침치 시약 조성물의 기타 필수 성분은 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트 재료이다. 바람직한 재료는 디페닐카보네이트 및 이작용성 하이드록시(알콜)화합물, 또는 이작용성 하이드록시 화합물의 혼합물을 사용하여 제조한다. 폴리카보네이트의 등록번호, 이의 분자량 및 이의 제조시 사용되는 알콜이 하기 표에 열거되어 있다:
표 1
표 1의 최종 재료가 특히 바람직하다. 이러한 폴리프로필렌옥사이드 카보네이트 공중합체는, 폴리에테르 L950?재료 (Bayer AG)와 디페닐 카보네이트의 티탄(IV) 부톡사이드 촉매화 축합에 의해 제조되며, 하기 구조식을 갖는다.
출발 물질 폴리에테르 L 950은, 1,2-프로판디올의 존재하에 프로필렌 옥사이드를 중합시켜 제조되는, 수 평균 분자량이 약 420인 이작용성 폴리프로필렌 글리콜이다. 중합체 쇄는 각각의 디올 잔기에서 중단되어, 각각의 말단이 2급 하이드록실 그룹(즉, 2개의 하이드록실 그룹 작용기)으로 종결하는 선형 폴리에테르를 생성시킨다. 폴리에테르-폴리카보네이트 재료는 하기 비율로 폴리에테르 잔기와 카보네이트 결합과의 연결로부터 수득된다.
비중 효과를 감소시키기 위하여 지방족 폴리에테르 폴리카보네이트 재료의 양을 10중량% 이하로 제한하는 것이 중요한 것으로 밝혀졌다. 여과지 효과를 감소시키는 것과 관련하여, 지방족 폴리에테르 폴리카보네이트 재료의 양을 2중량% 이하로 제한하는 것이 바람직한 것으로 밝혀졌다.
하기 실시예는 본 발명의 바람직한 양태 및 유용성을 기술하고자 제시되엇으며, 첨부된 특허청구범위에서 달리 명시하지 않는 한 본 발명을 제한하지 않는다.
실시예 1
A. 폴리카보네이트를 함유하는 단백질 시약 종이 및 중합체가 없는 대조 시약의 제조
이들 비완충된 단백질 시약을 유용한 중합체를 확인하기 위해 완충된 시험용액과 함께 사용한다.
침지 용액: THF중 0.3mM 테트라브로모페놀 블루(TBPB) 및 0.1% 또는 1.0%(w/v) 폴리카보네이트(대조 시약은 중합체를 함유하지 않는 동일한 침지 용액으로 제조한다).
침지액을 4ft/분의 웨브 속도(web speed) 및 60˚C의 건조 온도로 와트만(Whatman) CCP-500 종이내로 함침시킨다. 시약 종이를 0.2 x 0.2인치 패드를 함유하는 시약 스트립내로 가공한다.
B. 시약 반응성 측정
1. 샘플. 시약을, pH 3.5 또는 4.0의, 20mg/dL 사람 혈청 알부민(HSA)을 함유하거나 함유하지 않는 0.20M 시트르산칼륨 완충액 내로 침지시킨다.
2. 기구 판독. 630nm(610nm도 사용할 수 있다)에서 반사율을 클리니텍(CLINITEK?) 200 기구상에서 샘플내에 스트립을 침지시킨지 20초 후에 측정한다. K/S = (1-R)2/2R의 방정식에 따라 K/S를 계산한다. 각각의 값은 10회 반복한 측정치의 평균이다.
C. 결과 및 토의
1. 데이터
표 2: pH 3.5 결과
20초, 630nm에서 K/S(표준 편차)
(1) 블랭크 종이의 K/S는 약 0.052로 나타났다; 즉 블랭크 감소율% = [{(중합체 없는 블랭크의 K/S - 0.052)- (중합체 있는 블랭크의 K/S - 0.052)}/(중합체 없는 블랭크의 K/S - 0.052)] x 100
(2) 기울기 감소율% = [중합체 없는 기울기-중합체 있는 기울기)/(중합체 없는 기울기)] x 100
유사한 결과가 pH 4.0에서 수득되었다.
2. 토의. pH 3.5 및 4.0 모두의 완충 용액에서, 몇몇 폴리카보네이트는 이들이 기울기를 감소시키는 것보다 더 블랭크를 감소시킨다. 이러한 실험으로부터 완전한 단백질 시약(완충액 및 TBPB를 둘다 함유)에 폴리카보네이트를 부가하는 것은 초기 색상(블랭크)을 낮추고, 가능하게는 위 양성(false-positive)의 영향을 감소시키게됨을 예측할 수 있다.
실시예 2
A. TBPB-10% KOK 10,071 단백질 시약 제형
1. 완충 스톡 용액. 시트르산 14.75g, 시트르산나트륨 10.93g 및 FD&C 황색 ＃5 7.2mg을 증류수 154ml 중에 용해시킨다; pH = 3.46.
2. 제1 침지액. (a) 완충 스톡 용액 17.94g; (b) 에탄올 5.0g 및 (c) 증류수 2.47g.
3. 제2 침지액. (a) TPBP 7.5mg; (b) KOK 10,071 2.5g 및 (C) THF 적당량을 가해 25ml로 만든다.
B. 대조 제형을 동일한 제1 침지액 및 중합체를 함유하지 않는 제2 침지액으로 제조한다.
침지액을, 4ft/분의 웨브 속도 및 제1 침지액은 80˚C, 제2 침지액은 60˚C의 건조 온도를 사용하여 E&D 237C 종이내로 함침시킨다.
C. 시약 반응성의 측정
1. 샘플 시험에 사용된 샘플은, (1) 음성 중간(medium) SG 뇨 풀(pool) 및 151mg/dL의 농도를 수득하기 위해 HSA가 스파이크된 중간 SG 뇨 풀 및 (2) 3개의 임상적으로 음성[임상적으로 음성이란 설포살(Sulfosal) 시험에 의해 음성이고, HSA ≤ 2mg/dL 및 단백질 < 100mg/dL를 함유하는 것으로 정의된다. 목적은, 15mg/dL HSA에 의해 주어진 반응의 소 비율인 임상적으로 음성인 뇨를 위한 반응을 수득하는 것이다]인 고 SG 뇨 샘플(SG = A, 1.028; B, 1.027; 및 C, 1.027)이다.이들 샘플의 반응성은 클리리텍?200 기구상에서 측정한다(샘플당 3회 반복).
2. 데이터는 하기에 각각의 샘플에 대한 K/S로서 나타낸다. 또한 각각의 고 SG 뇨 샘플에 의한 기여(contribution)는 [(K/S고SG - K(/S블랭크)/(K(/S15mg/dL - K(S블랭크)] x 100으로서 나타낸다. 이러한 기여는 고 SG 뇨에 의해 야기되는 15mg/dL HSA 반응성의 %이다.
표 3
단백질 시약의 성능에 대한 10% KOK 10,071의 효과
초기 색상 및 HSA에 대한 반응성 모두가 10% KOK(10,071에 의해 감소된다. 하지만, 음성 고 SG 뇨에 의한 기여도 또한 상당히 감소된다. 따라서, 10% KOK 10,071 중합체의 존재는 고 SG 뇨 샘플이 위 양성 결과(false pasitive result)를 야기할 가능성을 감소시키는 것으로 보인다.
또 다른 실시예에서 4% KOK 10,071을 함유하는 것과 함유하지 않는 TBPB 함유 단백질 시약을 비교한다.
실시예 3
A. TBPB-KOK 단백질 시약 제형(100ml 침지액을 제조하는 양)
1. 제1 침지액(0.45M 시트르산나트륨-pH 3.70, 0.03mM FD&C 황색; 수용액). (a) 0.9M 시트르산나트륨 50ml, pH - 3.70; (b) 1mM FD&C 황색 ＃5 3.0ml; 및 (c) 증류수 47ml.
2. 제2 침지액: (0.30mM TBPB, 4% (w/v) KOK 10,071; THF 중). (a) THF중 1mM TBPB 30ml; (b) THF중 10% KOK 10,071 40ml: 및 (c) THF 30ml.
대조 제형은 동일한 제1 침지액과, 중합체를 함유하지 않는 제2 침지액으로 제조한다. 침지액을 실시예 2에서와 같이 E&D 237C 종이내로 함침시킨다.
B. 시약 반응성의 측정
1. 샘플 중간 SG뇨 중의 샘플을 상기와 같이 HSA로 스파이크시킨다. 하나의 임상적으로 음성인 고 SG 뇨(A; SG = 1.030; pH = 5.5) 및 하나의 고안된 알칼리성 고 SG 뇨 풀(B; SG = 1.024; pH = 8.7)을 사용하여 가능한 일 양성 판독에 대해 시험한다. 고 SG 뇨 "B"를 "최악의 경우" 실시예로 사용하여 KOK 중합체 효과의 한계를 시험한다. 각각의 샘플의 6회 반복 측정을 클리니텍?200 + 기구 상에서 수행하고 데이타를 하기에 나타낸다.
표 4
단백질 시안의 성능에 대한 4% KOK 10,071의 효과
2번째 실시예에서와 같이, 초기 색상 및 HSA에 대한 반응성은 폴리카보네이트 KOK 10,071에 의해 감소된다. 또한 유사하게, 음성 고 SG 샘플의 기여는 폴리카보네이트가 함유되지 않은 시약에 비해 감소된다. 이것은 폴리카보네이트가, 고 SG 뇨 샘플이 위 양성 결과를 야기할 가능성을 감소시킨다는 점을 확인시켜 준다.
실시예 4
시트르산나트륨 417g, 시트르산 455g, FD&C 황색 ＃5 0.29g 및 FD&C 적색 ＃3 0.5g, 및 PVA 24g을 함유하여, 최종 pH 3.7로 조정된 수용액(10ℓ)을 사용하여 여과지 등급 204C를 함침시킨다.
제1 침지물이 건조된 후(80 내지 100˚C의 온도에서), 여과지를 제2 용액으로 함침시킨다. 제2 용액(10ℓ)은 테트라브로모페놀설폰프탈레인 5g, 시트르산 50g 및 프로필렌 옥사이드 카보네이트 공중합체[폴리에테르 L 950?(Bayer AG)과 디페닐 카보네이트의 티탄 IV 부톡사이드 촉매화 축합에 의해 제조] 150g의 에탄올 용액이다. 그런 다음, 수득된 물질을 35 내지 105˚C에서 건조시킨다.
실시예 5
펄프 로트 만이 상이한 종이 로트는 KOK가 함유되지 않은 단백질 시약과 함께 사용하는 경우 커다란 반응성 차이를 야기한다(표 5). 종이 섬유로의 염료 및 단백질의 결합 차이가 로트 차이간의 원인으로서 제시되었다. 또한, 종이에 의한 염료의 증가된 결합이 상기 검정의 배경을 증가시키게 되고, 종이에 의한 단백질의 증가된 결합이 상기 검정의 단백질 반응을 감소시킴이 제시되었다. 표 5는 KOK가 없는 실시예 4의 것과 유사한 주요 제형의 사용을 기본으로 한다.
표 5
시약 반응성은 2가지 개개의 마일즈사 기구인 클리니텍- 10 및 클리니텍-200에 대한 해독 수치로 표현된다. 해독(decode) 수치는 610 내지 660nm의 염료 최대 흡광치에서의 반사율(%)을 기본으로 한다. 보다 낮은 해독 수치는 보다 큰 반응성 및 강한 배경 색상을 나타낸다. 시약 pH는 이들 측정에 있어서 3.46이다. 237 및 204 여과지 등급은 펜실바니아 마운틴 홀리 스프링 소재 알스트롬 필트레이션(Alhstrom Filtration) 제품이다.
실시예 4에 따라 제조된 분석용 시험 스트립을 뇨로 습윤화시키고, 나타난 색상 변화를 관측하여 뇨 생물학적 샘플 중의 단백질 지표로서 기록한다.
여과지 로트 효과에 있어 큰 감소가 표 6에 나타낸 바와 같이 단백질 4 시약 "Pro 4"(실시예 4를 기초)로 성취된다. 이러한 감소는 제조 가능성을 증가시키고 시약 결과를 보다 일관성있게 만든다. 중합체는 염료의 셀룰로스 섬유로의 결합을 방해함으로써 종이 가변성을 감소시키는 것으로 간주된다. 그 결과, 단백질 시약 반응성이 표적에서 일관적으로 유지될 수 있다.
표 6
상이한 여과지 로트를 사용하는 경우 조차, 시약 조성물과 여과지 사이의 반응성이 단백질 측정 인자가 아님이 관측되었다. 또한, 시험 스트립은 시각적 및 기구적 검출 한계 둘다에 있어 상이한 뇨 샘플에 대한 가변성의 감소를 나타낸다. 이것은 중간 및 고 비중 뇨에 대한 검출 한계가 시각적 및 기구적 판독 둘다에 있어 종종 다양한 단백질 측정시 사용되는 다른 제형과는 상반된다.
본 발명은 다양한 변형 및 변화적 양태가 이루어질 수 있으며, 이의 특정 양태를 실시예에 나타내고 상세히 기술하였다. 하지만, 실시예는 본 발명을 기술된 특정한 형태로 제한할 의도는 없고, 반대로 본 발명은 첨부된 특허청구 범위에 정의된 바와 같이 본 발명의 정신 및 범위에 부합되는 모든 변형, 등가물 및 대안을 포괄하는 것으로 이해되어져야 할 것이다.

Claims (4)

  1. 폴리할로겐화 페놀설폰프탈레인 단백오차(protein error) 지시제, 완충액 및 10중량% 이하의 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트로 함침된 캐리어 매트릭스를 포함하는, 생물학적 샘플중의 단백질을 측정하기 위한 시험 장치.
  2. 제1항에 있어서, 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트가 2중량% 이하의 양으로 존재하고 하기 일반식을 갖는 시험 장치.
  3. (a) 제1 수성 침지액중에서 완충액으로 함침시킨 후, 폴리할로겐화 페놀설폰프탈레인 단백오차 지시제 및 10중량% 이하의 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트의 비수성 용매 용액으로 함침시킨 흡수 캐리어를 포함하는 분석용 시험 스트립을 생물학적 샘플로 습윤화시키는 단계 및
    (b) 생물학적 샘플중에서의 단백질의 지표가 되는 시험 스트립의 모든 색상변화를 관찰하고 이를 기록하는 단계들을 포함하여, 생물학적 샘플중의 단백질을 검출하는 방법.
  4. 제3항에 있어서, 지방족 폴리에테르-폴리카보네이트가 2중량% 이하의 양으로 존재하고 하기 일반식을 갖는 방법.
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