JPH07228536A - 乳酸菌を用いた免疫賦活剤 - Google Patents
乳酸菌を用いた免疫賦活剤Info
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- JPH07228536A JPH07228536A JP6040585A JP4058594A JPH07228536A JP H07228536 A JPH07228536 A JP H07228536A JP 6040585 A JP6040585 A JP 6040585A JP 4058594 A JP4058594 A JP 4058594A JP H07228536 A JPH07228536 A JP H07228536A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 ラクトバチルス デルブリッキ サブスピー
シズ ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄ
ｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃ
ｕｓ）を主成分とする免疫賦活剤。 【効果】 抗原性物質、感染性微生物によって引き起こ
される疾病の予防、治療に有用な、しかも安全性がきわ
めて高い食品や医薬品を供給することができる。
シズ ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄ
ｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃ
ｕｓ）を主成分とする免疫賦活剤。 【効果】 抗原性物質、感染性微生物によって引き起こ
される疾病の予防、治療に有用な、しかも安全性がきわ
めて高い食品や医薬品を供給することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、免疫賦活剤に関するも
のであって、更に詳細には、免疫賦活作用の高い特定の
乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅ
ｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）の菌体
及び／又はその処理物を有効成分とする免疫賦活剤に関
するものである。
のであって、更に詳細には、免疫賦活作用の高い特定の
乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅ
ｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）の菌体
及び／又はその処理物を有効成分とする免疫賦活剤に関
するものである。
【０００２】
【従来の技術】最近、乳酸菌の持つ生理効果に関して、
様々な研究が進められている。この生理効果の中には、
腸管のＩｇＡ産生能の上昇、抗ガン作用やアジュバント
活性等の免疫賦活作用がある。例えば、保井らは、Ｂｉ
ｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｂｒｅｖｅの菌体はパイエ
ル板細胞のＩｇＡ産生能を増強すると報告している（保
井ら；特開平２−２８００５９）。また、Ｐｅｒｄｉｇ
ｏｎらは、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉを
経口投与すると、皮下投与した繊維肉腫の成長を阻害し
たと報告している（Ｐｅｒｄｉｇｏｎ Ｇ．，ｅｔ ａ
ｌ．，；Ｉｎｔ． Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ
ＩＸ（１） ２９−５２ （１９９３））。
様々な研究が進められている。この生理効果の中には、
腸管のＩｇＡ産生能の上昇、抗ガン作用やアジュバント
活性等の免疫賦活作用がある。例えば、保井らは、Ｂｉ
ｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｂｒｅｖｅの菌体はパイエ
ル板細胞のＩｇＡ産生能を増強すると報告している（保
井ら；特開平２−２８００５９）。また、Ｐｅｒｄｉｇ
ｏｎらは、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉを
経口投与すると、皮下投与した繊維肉腫の成長を阻害し
たと報告している（Ｐｅｒｄｉｇｏｎ Ｇ．，ｅｔ ａ
ｌ．，；Ｉｎｔ． Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ
ＩＸ（１） ２９−５２ （１９９３））。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】ところで、このような
乳酸菌の免疫賦活能は、ＬｅｅらがＴ細胞増殖活性試験
やｉｎ ｖｉｔｒｏ抗体産生試験で調べたように、全般
にＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属で高く、Ｌａｃｔ
ｏｂａｃｉｌｌｕｓ属やＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属
などでは低いとされている（Ｌｅｅ，ｅｔ ａｌ．，；
Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．，
５７（１２），２１２７−２１３２，１９９３）。しか
し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属やＳｔｒｅｐｔｏｃ
ｏｃｃｕｓ属などに属する全ての乳酸菌の免疫賦活能が
低いわけではなく、乳酸菌の持つ免疫賦活能は、菌株に
よって大きく異なっている。
乳酸菌の免疫賦活能は、ＬｅｅらがＴ細胞増殖活性試験
やｉｎ ｖｉｔｒｏ抗体産生試験で調べたように、全般
にＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属で高く、Ｌａｃｔ
ｏｂａｃｉｌｌｕｓ属やＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属
などでは低いとされている（Ｌｅｅ，ｅｔ ａｌ．，；
Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．，
５７（１２），２１２７−２１３２，１９９３）。しか
し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属やＳｔｒｅｐｔｏｃ
ｏｃｃｕｓ属などに属する全ての乳酸菌の免疫賦活能が
低いわけではなく、乳酸菌の持つ免疫賦活能は、菌株に
よって大きく異なっている。
【０００４】そこで、本発明では、Ｌａｃｔｏｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉｓｕｂｓｐ．ｂｕｌ
ｇａｒｉｃｕｓ９１菌株の免疫賦活能のスクリーニング
を行うことによって、より活性の高いＬ．ｄｅｌｂｒｕ
ｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌株
を見つけることを目的とした。その結果、Ｂｉｆｉｄｏ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ属の菌株と比較して、同等かそれ以
上の免疫賦活能を示す菌株を見出し、腸管感染やアレル
ギーの防御に同種の他菌株より効果が期待できることを
発見した。
ｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉｓｕｂｓｐ．ｂｕｌ
ｇａｒｉｃｕｓ９１菌株の免疫賦活能のスクリーニング
を行うことによって、より活性の高いＬ．ｄｅｌｂｒｕ
ｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌株
を見つけることを目的とした。その結果、Ｂｉｆｉｄｏ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ属の菌株と比較して、同等かそれ以
上の免疫賦活能を示す菌株を見出し、腸管感染やアレル
ギーの防御に同種の他菌株より効果が期待できることを
発見した。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上述した本発明の課題を
解決すべく、本発明者らは、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉ
ｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌株間の免疫
賦活作用の程度を比較するため、菌体とは無関係のタン
パク質であるβ−ラクトグロブリン（β−ＬＧ）を免疫
したマウスを用いたＴ細胞増殖試験、および免疫してい
ないマウス脾臓細胞を用いたマイトジェン活性試験、マ
ウスパイエル板細胞に対する増殖試験を行った。ここで
用いたアッセイ系は、ｉｎ ｖｉｔｒｏの系であるが、
これは、数多くの試料のリンパ球に対する分裂促進能力
を調べるためのもので、この活性を指標に免疫賦活剤の
開発が一般に行われている。
解決すべく、本発明者らは、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉ
ｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌株間の免疫
賦活作用の程度を比較するため、菌体とは無関係のタン
パク質であるβ−ラクトグロブリン（β−ＬＧ）を免疫
したマウスを用いたＴ細胞増殖試験、および免疫してい
ないマウス脾臓細胞を用いたマイトジェン活性試験、マ
ウスパイエル板細胞に対する増殖試験を行った。ここで
用いたアッセイ系は、ｉｎ ｖｉｔｒｏの系であるが、
これは、数多くの試料のリンパ球に対する分裂促進能力
を調べるためのもので、この活性を指標に免疫賦活剤の
開発が一般に行われている。
【０００６】更に、上述の系で活性の高かった菌株につ
いては、その菌株のマウスへの経口投与が、腸管ＩｇＡ
産生にどのような影響を与えるかについても調べた。
いては、その菌株のマウスへの経口投与が、腸管ＩｇＡ
産生にどのような影響を与えるかについても調べた。
【０００７】上述の試験法を用いて、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕ
ｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの免疫
賦活作用を調べた結果、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ
ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの中にもＢｉｆｉｄ
ｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属と同等以上にリンパ節細胞の免
疫応答を高める菌株ＯＬＬ １０２３，ＯＬＬ １０２
９，ＯＬＬ １０３０，ＯＬＬ １０４３，ＯＬＬ １０
５７，ＯＬＬ １０８３，ＯＬＬ １０９７，ＯＬＬ １
１０４を見出し、これらが、免疫賦活剤として同種の他
菌株より有用であることが明らかとなった。
ｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの免疫
賦活作用を調べた結果、Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ
ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの中にもＢｉｆｉｄ
ｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属と同等以上にリンパ節細胞の免
疫応答を高める菌株ＯＬＬ １０２３，ＯＬＬ １０２
９，ＯＬＬ １０３０，ＯＬＬ １０４３，ＯＬＬ １０
５７，ＯＬＬ １０８３，ＯＬＬ １０９７，ＯＬＬ １
１０４を見出し、これらが、免疫賦活剤として同種の他
菌株より有用であることが明らかとなった。
【０００８】本発明は、このようにして得られた新知見
を基礎とし、更に研究の結果完成されたものであって、
免疫賦活作用の高い特定のＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒ
ｉｃｕｓ菌株を有効成分として含有することを特徴とす
る免疫賦活剤に関するものである。
を基礎とし、更に研究の結果完成されたものであって、
免疫賦活作用の高い特定のＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒ
ｉｃｕｓ菌株を有効成分として含有することを特徴とす
る免疫賦活剤に関するものである。
【０００９】本発明に係る免疫賦活剤に用いる Ｌａｃ
ｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕ
ｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌体は、生菌および
死菌のいずれであってもよく、原料菌体の取得のための
培養法および菌体分離法にも制限はない。菌体として
は、純粋に分離した菌体（乾燥菌体、湿潤菌体を問わな
い）のほか、菌体含有物（培養物、懸濁物、ヨーグル
ト、チーズ等菌体含有飲食品その他菌体を含有するも
の）、菌体を超音波や酵素等を用いて処理してなる処理
物（菌体破砕物、細胞質／細胞壁画分等）、またこ（れ
ら）の濃縮物、乾燥物、ペースト化物、希釈物等を広く
包含するものである。
ｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕ
ｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌体は、生菌および
死菌のいずれであってもよく、原料菌体の取得のための
培養法および菌体分離法にも制限はない。菌体として
は、純粋に分離した菌体（乾燥菌体、湿潤菌体を問わな
い）のほか、菌体含有物（培養物、懸濁物、ヨーグル
ト、チーズ等菌体含有飲食品その他菌体を含有するも
の）、菌体を超音波や酵素等を用いて処理してなる処理
物（菌体破砕物、細胞質／細胞壁画分等）、またこ（れ
ら）の濃縮物、乾燥物、ペースト化物、希釈物等を広く
包含するものである。
【００１０】本発明の有効成分は、種々の形態で投与さ
れる。その投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル
剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与または
注射剤（静脈内、筋肉内、皮下）、点滴剤、座剤等によ
る非経口投与をあげることができる。これらの各種製剤
は、常法に従って主薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢
剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤
などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知
の補助剤を用いて製剤化することができる。その使用量
は症状、年令、体重、投与方法および剤形等によって異
なるが、通常は成人に対して１回約０．００１ｍｇ乃至
２，０００ｍｇを投与することができる。また、本有効
成分は、ヨーグルト等発酵食品のスターターとしても利
用できるものであるゆえ、安全性については問題はな
く、現にマウスに対して１０００ｍｇ／体重１ｋｇを経
口投与しても急性毒性は認められなかった。
れる。その投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル
剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与または
注射剤（静脈内、筋肉内、皮下）、点滴剤、座剤等によ
る非経口投与をあげることができる。これらの各種製剤
は、常法に従って主薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢
剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤
などの医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知
の補助剤を用いて製剤化することができる。その使用量
は症状、年令、体重、投与方法および剤形等によって異
なるが、通常は成人に対して１回約０．００１ｍｇ乃至
２，０００ｍｇを投与することができる。また、本有効
成分は、ヨーグルト等発酵食品のスターターとしても利
用できるものであるゆえ、安全性については問題はな
く、現にマウスに対して１０００ｍｇ／体重１ｋｇを経
口投与しても急性毒性は認められなかった。
【００１１】本発明の有効成分は、経口投与によって所
期の目的を達成しうるので、本発明に係る免疫賦活剤
は、飲食品タイプとして使用することができる。そのた
めには、本菌株、その含有物及び／又はその処理物を各
種補助剤や他の飲食品を用いて、ドリンク、錠剤、その
他各種の飲食品タイプにしたり、飲食品に直接添加した
り、あるいは、これをスターターにしてヨーグルトとす
る等これを利用して発酵食品にする等、各種の方法を利
用することができる。このように飲食品タイプとした本
発明組成物は、長期間に亘って摂取することが可能であ
るので、腫瘍の予防、再発防止等の目的で、通常の飲食
品のほか、特定保健用食品、栄養剤、健康食品等として
市販に供することができる。
期の目的を達成しうるので、本発明に係る免疫賦活剤
は、飲食品タイプとして使用することができる。そのた
めには、本菌株、その含有物及び／又はその処理物を各
種補助剤や他の飲食品を用いて、ドリンク、錠剤、その
他各種の飲食品タイプにしたり、飲食品に直接添加した
り、あるいは、これをスターターにしてヨーグルトとす
る等これを利用して発酵食品にする等、各種の方法を利
用することができる。このように飲食品タイプとした本
発明組成物は、長期間に亘って摂取することが可能であ
るので、腫瘍の予防、再発防止等の目的で、通常の飲食
品のほか、特定保健用食品、栄養剤、健康食品等として
市販に供することができる。
【００１２】本発明において使用する菌株であるラクト
バチルス デルブリッキ サブスピーシズ ブルガリカ
ス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋ
ｉｉｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）の各菌株は、
工業技術院生命工学工業技術研究所にそれぞれ次のよう
に寄託されており、有効に使用される。
バチルス デルブリッキ サブスピーシズ ブルガリカ
ス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋ
ｉｉｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）の各菌株は、
工業技術院生命工学工業技術研究所にそれぞれ次のよう
に寄託されており、有効に使用される。
【００１３】 ＯＬＬ １０２３株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１４） ＯＬＬ １０２９株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１３） ＯＬＬ １０３０株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１２） ＯＬＬ １０４３株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１１） ＯＬＬ １０５７株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１０） ＯＬＬ １０８３株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１０９） ＯＬＬ １０９７株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１０８） ＯＬＬ １１０４株（ＦＥＲＭ Ｐ−１３８４１）
【００１４】Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒ
ｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ
ＯＬＬ １０２３株，ＯＬＬ １０２９株，ＯＬＬ １０
３０株，ＯＬＬ １０４３株，ＯＬＬ １０５７株，ＯＬ
Ｌ １０８３株，ＯＬＬ １０９７株，ＯＬＬ １１０４
株の菌学的性質は、次のとおりである。 形態 ＢＬ寒天培地でよく生育し、ときに長桿状を呈す
る桿菌。メチレンブルー染色で顆粒を呈する。 グラム染色性 ＋ 生理学的性質 嫌気性あるいは通性嫌気性 カタラーゼ − 糖の資化性：（ガスの発生はいずれもなし） アミグダリン − セロビオース − フラクトース ＋ ガラクトース − グルコース ＋ ラクトース ＋ マルトース − マンノース − サリシン − サッカロース − トレハロース − エスクリン − 乳酸の異性体 Ｄ体
ｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ
ＯＬＬ １０２３株，ＯＬＬ １０２９株，ＯＬＬ １０
３０株，ＯＬＬ １０４３株，ＯＬＬ １０５７株，ＯＬ
Ｌ １０８３株，ＯＬＬ １０９７株，ＯＬＬ １１０４
株の菌学的性質は、次のとおりである。 形態 ＢＬ寒天培地でよく生育し、ときに長桿状を呈す
る桿菌。メチレンブルー染色で顆粒を呈する。 グラム染色性 ＋ 生理学的性質 嫌気性あるいは通性嫌気性 カタラーゼ − 糖の資化性：（ガスの発生はいずれもなし） アミグダリン − セロビオース − フラクトース ＋ ガラクトース − グルコース ＋ ラクトース ＋ マルトース − マンノース − サリシン − サッカロース − トレハロース − エスクリン − 乳酸の異性体 Ｄ体
【００１５】上記した菌学的性質は、まさに Ｌ．ｄｅ
ｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕ
ｓの菌学的性質にほかならず、また、ＯＬＬ １０２３
株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１４）をはじめとして他の菌
株もその菌学的性質は同様であった。
ｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕ
ｓの菌学的性質にほかならず、また、ＯＬＬ １０２３
株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１４）をはじめとして他の菌
株もその菌学的性質は同様であった。
【００１６】以下に、本発明の実施例を示す。
【００１７】
【実施例１】ＢＬＢ液体培地(光岡知足著「腸内菌の世
界」、叢文社（１９８０））を用いて、３７℃、１６時
間嫌気条件下で乳酸菌 Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ
ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ ９１菌株を静置培
養した。培養後、遠心分離（６５００ｒｐｍ，１５分
間）で菌体を回収し、蒸留水で３回洗浄した。菌体を凍
結乾燥した後、菌体２０ｍｇを蒸留水２５ｍｌに分散さ
せた。これを２０分間１００Ｗ超音波破壊機で破砕し、
この菌体破砕液を２５００ｒｐｍで３０分間遠心し、沈
澱（未破砕菌体）を除去した。得られた上清を凍結乾燥
（超音波破砕物）し、この菌体破砕物を測定試料とし
た。
界」、叢文社（１９８０））を用いて、３７℃、１６時
間嫌気条件下で乳酸菌 Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ
ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ ９１菌株を静置培
養した。培養後、遠心分離（６５００ｒｐｍ，１５分
間）で菌体を回収し、蒸留水で３回洗浄した。菌体を凍
結乾燥した後、菌体２０ｍｇを蒸留水２５ｍｌに分散さ
せた。これを２０分間１００Ｗ超音波破壊機で破砕し、
この菌体破砕液を２５００ｒｐｍで３０分間遠心し、沈
澱（未破砕菌体）を除去した。得られた上清を凍結乾燥
（超音波破砕物）し、この菌体破砕物を測定試料とし
た。
【００１８】マイトジェン活性試験には、ＢＡＬＢ／ｃ
マウス（７−１０ｗ，メス）脾臓を用いた。培地には、
１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのスト
レプトマイシン、１％同系マウス血清、５×１０-5Ｍの
２−メルカプトエタノールを含むＲＰＭＩ１６４０を用
いた。細胞懸濁液を調製した後、９６穴の細胞培養プレ
ートに各菌体試料（１００μｇ／ｍｌ）とともに１穴当
たり５×１０5個になるように分注した。３７℃、５％
ＣＯ2 Ａｉｒ条件下、培養７２時間後に、各ｗｅｌｌ
に１μＣｉのチミジン［メチル-3Ｈ］を添加し、２０時
間後にセルハーベスターで細胞をフィルター上に濾過し
た。細胞中に取り込まれた3Ｈ量は、液体シンチレーシ
ョンカウンターで測定した。
マウス（７−１０ｗ，メス）脾臓を用いた。培地には、
１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのスト
レプトマイシン、１％同系マウス血清、５×１０-5Ｍの
２−メルカプトエタノールを含むＲＰＭＩ１６４０を用
いた。細胞懸濁液を調製した後、９６穴の細胞培養プレ
ートに各菌体試料（１００μｇ／ｍｌ）とともに１穴当
たり５×１０5個になるように分注した。３７℃、５％
ＣＯ2 Ａｉｒ条件下、培養７２時間後に、各ｗｅｌｌ
に１μＣｉのチミジン［メチル-3Ｈ］を添加し、２０時
間後にセルハーベスターで細胞をフィルター上に濾過し
た。細胞中に取り込まれた3Ｈ量は、液体シンチレーシ
ョンカウンターで測定した。
【００１９】活性は、Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ Ｉｎｄ
ｅｘ（ＳＩ）， ＳＩ＝（各菌体試料を加えたときのｃｐｍ）／（培養液
のみのときのｃｐｍ） を用いて表した。
ｅｘ（ＳＩ）， ＳＩ＝（各菌体試料を加えたときのｃｐｍ）／（培養液
のみのときのｃｐｍ） を用いて表した。
【００２０】横軸にＳＩ値、縦軸にそのＳＩ値を示す菌
株の数（度数）をとって９１菌株の分布を調べると、図
１に示す分布が得られた。図１において、高い活性を示
した菌株（ＳＩ値が１３以上）は、ＯＬＬ １０２３，
ＯＬＬ １０２９，ＯＬＬ １０３０，ＯＬＬ １０４
３，ＯＬＬ １０８３であり、そのマイトジェン活性の
ＳＩ値は図２に示した。図２に示すように、これらの菌
株の活性は、比較のために同一条件で培養した Ｂｉｆ
ｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ ６００１菌
体よりも高く、その中でも、ＯＬＬ １０２３とＯＬＬ
１０８３が特に高い活性を示した。なお、β−ＬＧはネ
ガティブコントロールである。
株の数（度数）をとって９１菌株の分布を調べると、図
１に示す分布が得られた。図１において、高い活性を示
した菌株（ＳＩ値が１３以上）は、ＯＬＬ １０２３，
ＯＬＬ １０２９，ＯＬＬ １０３０，ＯＬＬ １０４
３，ＯＬＬ １０８３であり、そのマイトジェン活性の
ＳＩ値は図２に示した。図２に示すように、これらの菌
株の活性は、比較のために同一条件で培養した Ｂｉｆ
ｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ ６００１菌
体よりも高く、その中でも、ＯＬＬ １０２３とＯＬＬ
１０８３が特に高い活性を示した。なお、β−ＬＧはネ
ガティブコントロールである。
【００２１】
【実施例２】Ｔ細胞増殖試験は次のように行った。β−
ラクトグロブリン（β−ＬＧ）溶液（０．５ｍｇ／ｍ
ｌ）と完全アジュバントを１：１の比でエマルジョン化
し、β−ＬＧが１匹当たり５０μｇになるように、ＢＡ
ＬＢ／ｃマウスの足の裏および尾基底部に皮下免疫し
た。免疫してから１０日後に鼠蹊部および膝下部のリン
パ節を摘出し、リンパ球懸濁液を調製した。培地はマイ
トジェン活性試験に用いたものと同一組成の培地を用い
た。細胞は９６穴の細胞培養プレートに各菌体試料とと
もに１穴当たり４×１０5個になるように分注した。以
下、マイトジェン活性試験と全く同様に Ｌ．ｄｅｌｂ
ｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ９
１菌株の活性の測定を行った。
ラクトグロブリン（β−ＬＧ）溶液（０．５ｍｇ／ｍ
ｌ）と完全アジュバントを１：１の比でエマルジョン化
し、β−ＬＧが１匹当たり５０μｇになるように、ＢＡ
ＬＢ／ｃマウスの足の裏および尾基底部に皮下免疫し
た。免疫してから１０日後に鼠蹊部および膝下部のリン
パ節を摘出し、リンパ球懸濁液を調製した。培地はマイ
トジェン活性試験に用いたものと同一組成の培地を用い
た。細胞は９６穴の細胞培養プレートに各菌体試料とと
もに１穴当たり４×１０5個になるように分注した。以
下、マイトジェン活性試験と全く同様に Ｌ．ｄｅｌｂ
ｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ９
１菌株の活性の測定を行った。
【００２２】その結果、横軸にＳＩ値、縦軸にそのＳＩ
値を示す菌株の数（度数）をとって９１菌株の分布を調
べると、図３に示す分布が得られた。図３において、Ｔ
細胞増殖活性が高い菌株（ＳＩ値が９以上）は、ＯＬＬ
１０２３，ＯＬＬ １０５７，ＯＬＬ １０８３，ＯＬ
Ｌ １０９７，ＯＬＬ １１０４で、そのＴ細胞増殖活性
のＳＩ値を図４に示した。図４に示すように、これらの
高い免疫賦活能を有する菌株の中でも、マイトジェン活
性の結果と同様にＯＬＬ １０２３とＯＬＬ １０８３が
特に高い活性を示し、その活性は Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ
６００１（ＳＩ値は約１０．０）と比較して同等以上の
活性であった。
値を示す菌株の数（度数）をとって９１菌株の分布を調
べると、図３に示す分布が得られた。図３において、Ｔ
細胞増殖活性が高い菌株（ＳＩ値が９以上）は、ＯＬＬ
１０２３，ＯＬＬ １０５７，ＯＬＬ １０８３，ＯＬ
Ｌ １０９７，ＯＬＬ １１０４で、そのＴ細胞増殖活性
のＳＩ値を図４に示した。図４に示すように、これらの
高い免疫賦活能を有する菌株の中でも、マイトジェン活
性の結果と同様にＯＬＬ １０２３とＯＬＬ １０８３が
特に高い活性を示し、その活性は Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ
６００１（ＳＩ値は約１０．０）と比較して同等以上の
活性であった。
【００２３】
【実施例３】更に、実施例１、２の免疫賦活能の高い菌
株については、パイエル板細胞に対する免疫賦活能を調
べた。
株については、パイエル板細胞に対する免疫賦活能を調
べた。
【００２４】パイエル板をＢＡＬＢ／ｃマウスの小腸か
ら摘出し、洗浄した後、細胞懸濁液を調製した。これら
の細胞を９６穴平底プレートを用いて、実施例１で調製
したＬ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌ
ｇａｒｉｃｕｓの菌体破砕物の存在下（１００μｇ／ｍ
ｌ）、３７℃４８時間培養した（５×１０5／ｗｅｌ
ｌ）。以下、実施例１と全く同様に行い、各菌株のパイ
エル板細胞に対する免疫賦活能を調べた。
ら摘出し、洗浄した後、細胞懸濁液を調製した。これら
の細胞を９６穴平底プレートを用いて、実施例１で調製
したＬ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌ
ｇａｒｉｃｕｓの菌体破砕物の存在下（１００μｇ／ｍ
ｌ）、３７℃４８時間培養した（５×１０5／ｗｅｌ
ｌ）。以下、実施例１と全く同様に行い、各菌株のパイ
エル板細胞に対する免疫賦活能を調べた。
【００２５】その結果を図５に示した。図５に示すよう
に、対照（実施例１、２において高い免疫賦活能が認め
られなかった菌株ＯＬＬ １０２２）と比べて、ＯＬＬ
１０２３，ＯＬＬ １０３０，ＯＬＬ １０４３，ＯＬＬ
１０５７，ＯＬＬ １０８３，ＯＬＬ １０９７および
ＯＬＬ １１０４で、パイエル板リンパ細胞に対して高
い細胞増殖活性が認められた。そして、その活性は
Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ ６００１と比較してそれ以上であっ
た。
に、対照（実施例１、２において高い免疫賦活能が認め
られなかった菌株ＯＬＬ １０２２）と比べて、ＯＬＬ
１０２３，ＯＬＬ １０３０，ＯＬＬ １０４３，ＯＬＬ
１０５７，ＯＬＬ １０８３，ＯＬＬ １０９７および
ＯＬＬ １１０４で、パイエル板リンパ細胞に対して高
い細胞増殖活性が認められた。そして、その活性は
Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ ６００１と比較してそれ以上であっ
た。
【００２６】
【実施例４】免疫賦活能の高い菌株が腸管ＩｇＡ産生に
与える影響をｉｎ ｖｉｖｏについて調べた。実施例
１、２で高い免疫賦活能が認められた菌株（Ｌ．ｄｅｌ
ｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ
ＯＬＬ １０２３およびＯＬＬ １０８３）をそれぞれ
３％含有する乳清タンパク質（ＷＰＩ）固型飼料を作製
した。飼料の組成は、ＡＩＮ−７６に準拠した。また、
対照として、高い免疫賦活能が認められなかった菌株
（ＯＬＬ １０２２）を含むＷＰＩ固型飼料、および菌
体を含まないＷＰＩ固型飼料もそれぞれ作製した。マウ
ス（ＢＡＬＢ／ｃ，４ｗ，メス）にそれぞれの飼料を経
口投与し、４週間後にマウスから小腸部分を取り出し、
露木らの方法（光岡知足編「腸内フローラの研究方法
論」Ｐ．１５７、学会出版センター（１９８９））に従
って小腸内容物および小腸壁抽出液を得た。これらの試
料中のＩｇＡ抗体価を抗マウスＩｇＡモノクローナル抗
体を用いてＥＬＩＳＡ法で測定した。
与える影響をｉｎ ｖｉｖｏについて調べた。実施例
１、２で高い免疫賦活能が認められた菌株（Ｌ．ｄｅｌ
ｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ
ＯＬＬ １０２３およびＯＬＬ １０８３）をそれぞれ
３％含有する乳清タンパク質（ＷＰＩ）固型飼料を作製
した。飼料の組成は、ＡＩＮ−７６に準拠した。また、
対照として、高い免疫賦活能が認められなかった菌株
（ＯＬＬ １０２２）を含むＷＰＩ固型飼料、および菌
体を含まないＷＰＩ固型飼料もそれぞれ作製した。マウ
ス（ＢＡＬＢ／ｃ，４ｗ，メス）にそれぞれの飼料を経
口投与し、４週間後にマウスから小腸部分を取り出し、
露木らの方法（光岡知足編「腸内フローラの研究方法
論」Ｐ．１５７、学会出版センター（１９８９））に従
って小腸内容物および小腸壁抽出液を得た。これらの試
料中のＩｇＡ抗体価を抗マウスＩｇＡモノクローナル抗
体を用いてＥＬＩＳＡ法で測定した。
【００２７】その結果が図６である。本発明により
Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａ
ｒｉｃｕｓ ＯＬＬ １０２３，ＯＬＬ １０８３を用い
ることで、腸管でのＩｇＡ抗体価が対照に比べて高まっ
ていることが分かった。
Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａ
ｒｉｃｕｓ ＯＬＬ １０２３，ＯＬＬ １０８３を用い
ることで、腸管でのＩｇＡ抗体価が対照に比べて高まっ
ていることが分かった。
【００２８】
【実施例５】マウス（ＢＡＬＢ／ｃ，４ｗ，メス）に実
施例４で用いた Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂ
ｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ菌体の入ったＷＰＩ固型飼
料および菌体を含まないＷＰＩ固型飼料をそれぞれ与え
て飼育した。２カ月後、各菌体飼料を与えたマウスから
小腸部分をそれぞれ取り出し、実施例４と同様の方法で
小腸壁抽出液を得た。これらの飼料中の抗β−ラクトグ
ロブリンＩｇＡ抗体価および抗ＬＰＳ ＩｇＡ抗体価を
ＥＬＩＳＡ法で測定した。
施例４で用いた Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂ
ｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ菌体の入ったＷＰＩ固型飼
料および菌体を含まないＷＰＩ固型飼料をそれぞれ与え
て飼育した。２カ月後、各菌体飼料を与えたマウスから
小腸部分をそれぞれ取り出し、実施例４と同様の方法で
小腸壁抽出液を得た。これらの飼料中の抗β−ラクトグ
ロブリンＩｇＡ抗体価および抗ＬＰＳ ＩｇＡ抗体価を
ＥＬＩＳＡ法で測定した。
【００２９】その結果が図７である。本発明の通り、
Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａ
ｒｉｃｕｓ ＯＬＬ １０２３およびＯＬＬ １０８３に
よるパイエル板リンパ細胞活性化の結果、ＷＰＩ中の食
物アレルゲンと言われるβ−ラクトグロブリン、および
グラム陰性菌のＬＰＳに対する腸管でのＩｇＡ抗体価が
対照（高い免疫賦活が認められなかった菌株 ＯＬＬ
１０２２および菌体を含まない飼料）に比べて高まって
いることが明らかになった。
Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａ
ｒｉｃｕｓ ＯＬＬ １０２３およびＯＬＬ １０８３に
よるパイエル板リンパ細胞活性化の結果、ＷＰＩ中の食
物アレルゲンと言われるβ−ラクトグロブリン、および
グラム陰性菌のＬＰＳに対する腸管でのＩｇＡ抗体価が
対照（高い免疫賦活が認められなかった菌株 ＯＬＬ
１０２２および菌体を含まない飼料）に比べて高まって
いることが明らかになった。
【００３０】
【実施例６】高濃度培養法により Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅ
ｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ ＯＬＬ
１０２３，ＯＬＬ １０２９，ＯＬＬ １０３０，ＯＬ
Ｌ １０４３，ＯＬＬ １０５７，ＯＬＬ １０８３，Ｏ
ＬＬ １０９７およびＯＬＬ １１０４を２．０×１０8
個／ｍｌ以上に増殖させた培養液を４０００Ｇで遠心濃
縮し、得られた沈澱画分に遠心前と同量の脱イオン水を
加え、均一に沈澱を分散させた後、ＨＴＳＴ殺菌を行っ
た。その後、再び遠心分離を行い、沈澱画分を回収し、
凍結乾燥菌体粉末を得た。粉末中の Ｌ．ｄｅｌｂｒｕ
ｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌体
数は約６．０×１０11個／ｇに相当していた。この粉末
を市販の育児用調製粉乳（明治乳業（株）製）に０．１
％配合した。
ｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ ＯＬＬ
１０２３，ＯＬＬ １０２９，ＯＬＬ １０３０，ＯＬ
Ｌ １０４３，ＯＬＬ １０５７，ＯＬＬ １０８３，Ｏ
ＬＬ １０９７およびＯＬＬ １１０４を２．０×１０8
個／ｍｌ以上に増殖させた培養液を４０００Ｇで遠心濃
縮し、得られた沈澱画分に遠心前と同量の脱イオン水を
加え、均一に沈澱を分散させた後、ＨＴＳＴ殺菌を行っ
た。その後、再び遠心分離を行い、沈澱画分を回収し、
凍結乾燥菌体粉末を得た。粉末中の Ｌ．ｄｅｌｂｒｕ
ｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌体
数は約６．０×１０11個／ｇに相当していた。この粉末
を市販の育児用調製粉乳（明治乳業（株）製）に０．１
％配合した。
【００３１】なお、本発明による免疫賦活育児用粉乳を
製造するにあたり、乳酸菌菌体は、上記した使用量を１
例として使用することができるが、本発明においては、
粉乳１ｇあたり、１．０×１０3個以上、好ましくは
１．０×１０6〜１．０×１０12個の乳酸酸菌体を使用
すればよい。しかしながら、一般に乳酸菌菌体は発酵乳
などに用いられているので、安全である。したがって、
上記範囲を越えて使用しても何ら差し支えはないし、予
防ないし保健を目的とする場合は、上記範囲よりも少量
使用してもよい。また、育児用粉乳以外の飲食品を調製
する場合も、上記範囲を参考にして乳酸菌の使用量を定
めればよい。
製造するにあたり、乳酸菌菌体は、上記した使用量を１
例として使用することができるが、本発明においては、
粉乳１ｇあたり、１．０×１０3個以上、好ましくは
１．０×１０6〜１．０×１０12個の乳酸酸菌体を使用
すればよい。しかしながら、一般に乳酸菌菌体は発酵乳
などに用いられているので、安全である。したがって、
上記範囲を越えて使用しても何ら差し支えはないし、予
防ないし保健を目的とする場合は、上記範囲よりも少量
使用してもよい。また、育児用粉乳以外の飲食品を調製
する場合も、上記範囲を参考にして乳酸菌の使用量を定
めればよい。
【００３２】なお、菌体の代わりに、菌体のフレンチプ
レスあるいは超音波処理などで得られる菌体破砕物およ
び細胞質または細胞壁画分を使用してもよい。
レスあるいは超音波処理などで得られる菌体破砕物およ
び細胞質または細胞壁画分を使用してもよい。
【００３３】
【実施例７】ビタミンＣ２０ｇまたはビタミンＣとクエ
ン酸の等量混合物２０ｇ、グラニュー糖５０ｇ、コーン
スターチと乳糖の等量混合物３０ｇに、実施例１、２で
活性の高かった Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂ
ｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓＯＬＬ １０８３の凍結乾
燥物を５０ｇ加えて十分に混合した。混合物を１００等
分して袋に詰め、１袋１．５ｇのスティック状免疫賦活
用栄養健康食品を１００袋製造した。
ン酸の等量混合物２０ｇ、グラニュー糖５０ｇ、コーン
スターチと乳糖の等量混合物３０ｇに、実施例１、２で
活性の高かった Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂ
ｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓＯＬＬ １０８３の凍結乾
燥物を５０ｇ加えて十分に混合した。混合物を１００等
分して袋に詰め、１袋１．５ｇのスティック状免疫賦活
用栄養健康食品を１００袋製造した。
【００３４】
【実施例８】次の配合により免疫賦活剤を製造した。
（１）実施例１、２において活性の高かった菌株（Ｌ．
ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉ
ｃｕｓＯＬＬ １０８３）の超音波破砕物５０ｇ、
（２）ラクトース９０ｇ、（３）コーンスターチ２９
ｇ、（４）ステアリン酸マグネシウム１ｇ。
（１）実施例１、２において活性の高かった菌株（Ｌ．
ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉ
ｃｕｓＯＬＬ １０８３）の超音波破砕物５０ｇ、
（２）ラクトース９０ｇ、（３）コーンスターチ２９
ｇ、（４）ステアリン酸マグネシウム１ｇ。
【００３５】先ず、（１）、（２）、（３）（但し１７
ｇ）を混合し、（３）（但し７ｇ）から調製したペース
トとともに顆粒化した。得られた顆粒に（３）（但し５
ｇ）と（４）を加えてよく混合し、この混合物を圧縮錠
剤機により圧縮し、１錠あたり菌体破砕物を１０ｍｇ含
有する錠剤１０００個を製造した。
ｇ）を混合し、（３）（但し７ｇ）から調製したペース
トとともに顆粒化した。得られた顆粒に（３）（但し５
ｇ）と（４）を加えてよく混合し、この混合物を圧縮錠
剤機により圧縮し、１錠あたり菌体破砕物を１０ｍｇ含
有する錠剤１０００個を製造した。
【００３６】投与量は、患者の症状、年齢によっても異
なるが、０．１〜１５００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで１日１
〜４回投与する。本発明において用いる菌体は、本来食
品由来のものであり、既述のように安全性にはほとんど
問題はなく、したがって、上記容量を越えて、投与して
も差し支えはない。また、健康の維持増進、保健栄養剤
等としてこれを利用する場合は、上記容量より少ない量
を長期間にわたって服用すればよい。また、既述のよう
に本発明による錠剤は、経口投与以外の方法でも投与す
ることができるが、静脈投与および筋肉投与の場合は
０．０１〜１２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである。
なるが、０．１〜１５００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで１日１
〜４回投与する。本発明において用いる菌体は、本来食
品由来のものであり、既述のように安全性にはほとんど
問題はなく、したがって、上記容量を越えて、投与して
も差し支えはない。また、健康の維持増進、保健栄養剤
等としてこれを利用する場合は、上記容量より少ない量
を長期間にわたって服用すればよい。また、既述のよう
に本発明による錠剤は、経口投与以外の方法でも投与す
ることができるが、静脈投与および筋肉投与の場合は
０．０１〜１２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである。
【００３７】
【実施例９】次の配合を用意した。（１）実施例１、２
で活性の高かった菌株（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ
ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ ＯＬＬ １０８
３）の超音波破砕物１０ｇ、（２）塩化ナトリウム８
ｇ、（３）クロロブタノール４ｇ、（４）炭酸水素ナト
リウム１ｇ。
で活性の高かった菌株（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ
ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ ＯＬＬ １０８
３）の超音波破砕物１０ｇ、（２）塩化ナトリウム８
ｇ、（３）クロロブタノール４ｇ、（４）炭酸水素ナト
リウム１ｇ。
【００３８】全成分を蒸留水１０００ｍｌに溶解し、こ
れを５００ｍｌの点滴ビン２本に分注し、免疫賦活輸液
を製造した。
れを５００ｍｌの点滴ビン２本に分注し、免疫賦活輸液
を製造した。
【００３９】
【発明の効果】本発明は特定の Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃ
ｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌株が他
の菌株と比較して、高い免疫賦活能を有することを利用
して、免疫賦活剤を提供するものである。Ｌ．ｄｅｌｂ
ｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ
は、ヨーグルトなどの食品にも用いられており、安全性
は確認されている。そのため、本発明によって、抗原性
物質あるいは感染性微生物により引き起こされる疾病の
予防や治療に役立つ食品や医薬品を供給することができ
る。
ｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓの菌株が他
の菌株と比較して、高い免疫賦活能を有することを利用
して、免疫賦活剤を提供するものである。Ｌ．ｄｅｌｂ
ｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ
は、ヨーグルトなどの食品にも用いられており、安全性
は確認されている。そのため、本発明によって、抗原性
物質あるいは感染性微生物により引き起こされる疾病の
予防や治療に役立つ食品や医薬品を供給することができ
る。
【図１】Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂ
ｕｌｇａｒｉｃｕｓの各菌株によるマウス脾臓細胞の細
胞増殖促進を、横軸にＳＩ値、縦軸にそのＳＩ値を示す
菌株の数をとって示した図。
ｕｌｇａｒｉｃｕｓの各菌株によるマウス脾臓細胞の細
胞増殖促進を、横軸にＳＩ値、縦軸にそのＳＩ値を示す
菌株の数をとって示した図。
【図２】マイトジェン活性の高い Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅ
ｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのマイト
ジェン活性のＳＩ値を示した図。
ｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのマイト
ジェン活性のＳＩ値を示した図。
【図３】Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂ
ｕｌｇａｒｉｃｕｓの各菌株によるβ−ＬＧ感作Ｔ細胞
の細胞増殖促進を、横軸にＳＩ値、縦軸にそのＳＩ値を
示す菌株の数をとって示した図。
ｕｌｇａｒｉｃｕｓの各菌株によるβ−ＬＧ感作Ｔ細胞
の細胞増殖促進を、横軸にＳＩ値、縦軸にそのＳＩ値を
示す菌株の数をとって示した図。
【図４】Ｔ細胞増殖活性の高い Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃ
ｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのＴ細胞増
殖活性のＳＩ値を示した図。
ｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのＴ細胞増
殖活性のＳＩ値を示した図。
【図５】免疫賦活能の高い Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉ
ｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのパイエル板細
胞に対する増殖活性を示した図。
ｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓのパイエル板細
胞に対する増殖活性を示した図。
【図６】Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂ
ｕｌｇａｒｉｃｕｓ菌体経口投与による腸管ＩｇＡ産生
の誘導を示した図。
ｕｌｇａｒｉｃｕｓ菌体経口投与による腸管ＩｇＡ産生
の誘導を示した図。
【図７】Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂ
ｕｌｇａｒｉｃｕｓ菌体経口投与による抗原性物質に対
する腸管ＩｇＡ産生の誘導を示した図。
ｕｌｇａｒｉｃｕｓ菌体経口投与による抗原性物質に対
する腸管ＩｇＡ産生の誘導を示した図。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:225） (72)発明者 桑田 有 東京都東村山市栄町１−21−３ 明治乳業 株式会社中央研究所内
Claims (4)
- 【請求項１】 ラクトバチルス デルブリッキ サブス
ピーシズ ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒ
ｉｃｕｓ）を主成分とすることを特徴とする免疫賦活
剤。 - 【請求項２】 用いる菌株が、ラクトバチルス デルブ
リッキ サブスピーシズ ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂ
ａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉｓｕｂｓｐ．
ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）ＯＬＬ １０２３（ＦＥＲＭ
Ｐ−１４１１４）、ＯＬＬ １０２９（ＦＥＲＭ Ｐ−
１４１１３）、ＯＬＬ １０３０（ＦＥＲＭ Ｐ−１４
１１２）、ＯＬＬ １０４３（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１
１）、ＯＬＬ １０５７（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１１
０）、ＯＬＬ １０８３（ＦＥＲＭＰ−１４１０９）、
ＯＬＬ １０９７（ＦＥＲＭ Ｐ−１４１０８）、及び
／又は、ＯＬＬ １１０４（ＦＥＲＭ Ｐ−１３８４
１）であることを特徴とする請求項１に記載の免疫賦活
剤。 - 【請求項３】 ラクトバチルス デルブリッキ サブス
ピーシズ ブルガリカス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ．ｂｕｌｇａｒ
ｉｃｕｓ）の菌体及び／又は菌体処理物を含有してなる
ことを特徴とする請求項１又は請求項２に記載の免疫賦
活剤。 - 【請求項４】 菌体処理物が菌体破砕物であることを特
徴とする請求項３に記載の免疫賦活剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04058594A JP4112021B2 (ja) | 1994-02-16 | 1994-02-16 | 乳酸菌を用いた免疫賦活剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04058594A JP4112021B2 (ja) | 1994-02-16 | 1994-02-16 | 乳酸菌を用いた免疫賦活剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07228536A true JPH07228536A (ja) | 1995-08-29 |
| JP4112021B2 JP4112021B2 (ja) | 2008-07-02 |
Family
ID=12584583
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP04058594A Expired - Lifetime JP4112021B2 (ja) | 1994-02-16 | 1994-02-16 | 乳酸菌を用いた免疫賦活剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4112021B2 (ja) |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH10139674A (ja) * | 1996-11-11 | 1998-05-26 | Yakult Honsha Co Ltd | インターロイキン１２産生促進剤 |
| JP2003534284A (ja) * | 2000-05-25 | 2003-11-18 | カンパーニ ジェルヴェ ダノン | 免疫刺激ペプチドでのラクトバシルスカゼイの使用 |
| KR100406344B1 (ko) * | 1997-08-21 | 2003-11-19 | 뉴질랜드 대어리 보오드 | 면역을 향상시키는 젖산균 |
| JP2006014654A (ja) * | 2004-07-01 | 2006-01-19 | Asama Chemical Co Ltd | 抗体含有食品 |
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