JPH07163386A - ネオトレハロース構造を有する非還元性オリゴ糖とその製造方法並びに用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 分子内にネオトレハロース構造を有する新規
非還元性オリゴ糖とその製造方法並びに用途を提供す
る。 【構成】 β−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−グルコ
シド、α−Ｄ−オリゴグルコシル β−Ｄ−グルコシド
またはβ−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−オリゴグル
コシドで表わされる非還元性オリゴ糖およびネオトレハ
ロースとα−グルコシル糖化合物とを含有する水溶液に
糖転移酵素を作用させて該非還元性オリゴ糖を製造する
方法、並びに該非還元性オリゴ糖を含有する飲食物、化
粧品、医薬品などの組成物を主な構成とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規糖質とその製造方
法並びに用途、更に詳細には、β−Ｄ−オリゴグルコシ
ル α−Ｄ−グルコシド、α−Ｄ−オリゴグルコシル
β−Ｄ−グルコシドまたはβ−Ｄ−オリゴグルコシル
α−Ｄ−オリゴグルコシドで表わされる非還元性オリゴ
糖とその製造方法並びに用途に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来知られている非還元性オリゴ糖は、
蔗糖、エルロース、ラフィノース、メレチトース、ケス
トースなどのグルコースとフルクトースとがα−１，β
−２結合したタイプ、すなわち分子内に蔗糖構造を含む
オリゴ糖、マルチトール、マルトトリイトール、ラクチ
トールなどの糖アルコール、さらにネオトレハロースな
どのグルコース同志がα−１，β−１結合したオリゴ糖
などが知られている。しかしながら、分子内に蔗糖構造
を含むオリゴ糖は、そのα−１，β−２結合の安定性が
弱く、特に酸性溶液中では容易に分解してしまう。その
ため食品その他の加工には多くの制限を受けることとな
る。また糖アルコールは高圧下で水素添加して製造され
るものであり、安定性に優れているが人の体内で消化・
吸収されにくく、大量摂取した場合、下痢を誘発する欠
点を持っている。一方ネオトレハロース（α，β−トレ
ハロース）はそれ自身安定であり、その取扱いが容易で
あり、良質で深みのある甘味を有している。本出願人
が、特開平４−１７９４９０号公報あるいは特開平５−
２５２９７３号公報で開示したようにネオトレハロース
は、経口的または非経口的に使用され、毒性、副作用の
懸念もなく、良く代謝利用され、生体へのエネルギー補
給に有利に利用でき、さらに、虫歯誘発菌などによっ
て、発酵されにくいことより、虫歯を起こしにくい甘味
料としても利用できる。このようにネオトレハロースは
優れた特性を持っているが、粘度調整、水分活性の調整
のため、ネオトレハロースの性質を有するさらに高分子
のオリゴ糖の開発が望まれている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】分子内にネオトレハロ
ース構造を有する新規非還元性オリゴ糖とその製造方法
並びに用途を提供する。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者等は、非還元性
オリゴ糖とその製造方法を確立するため、ネオトレハロ
ースを構成する片方あるいは両方のグルコシル基へ新た
に糖を結合させることに着目し、鋭意研究してきた。そ
の結果、ネオトレハロースとα−グルコシル糖化合物と
を含有する水溶液に糖転移酵素を作用させることによ
り、目的を達成しうることを見いだし、本発明を完成し
た。即ち、本発明は、ネオトレハロースの片方あるいは
両グルコシル基へ新たにグルコシル基がそれぞれ１乃至
数個結合した新規な非還元性オリゴ糖とその製造方法を
確立するものであり、併せてこの新規非還元性オリゴ糖
が安定性に優れ、無味乃至低甘味であり、経口摂取して
カロリー源として利用されるなどの特性を有し、これら
の特性を利用してその用途を確立するものである。

【０００５】本発明の非還元性オリゴ糖は、化学的に合
成することも可能であるが、工業的には、生化学反応、
とりわけ、ネオトレハロースとα−グルコシル糖化合物
とを含有する水溶液に糖転移酵素を作用させることによ
り生成させるのが有利である。ネオトレハロースとして
は、その含量ができるだけ高いものが適しており、一般
的には、固形物当り１０ｗ／ｗ％以上（以下、本明細書
に於いては特にことわらないかぎり、ｗ／ｗ％を％で示
す。）のシラップまたは粉末、望ましくは、５０％以上
のシラップまたは結晶性粉末、更に好ましくは、９０％
以上の結晶性粉末または結晶が好適である。その製造方
法としては、本出願人が特開平４−１７９７９０号明細
書で開示した、ラクトネオトレハロースにβ−ガラクト
シダーゼを作用させてネオトレハロースを生成せしめ、
これを採取する製造方法が容易に大量生産できるので、
工業的生産方法としてきわめて有利である。

【０００６】α−グルコシル糖化合物としては、例え
ば、糊化澱粉、液化澱粉、可溶性澱粉、澱粉部分分解
物、澱粉糖転移物などの澱粉質が適宜使用される。糖転
移酵素としては、シクロマルトデキストリン・グルカノ
トランスフェラーゼ（ＥＣ２．４．１．１９）の使用が
望ましいが、必要に応じてα−アミラーゼ（ＥＣ３．
２．１．１）なども使用できる。

【０００７】シクロマルトデキストリン・グルカノトラ
ンスフェラーゼを使用する場合には、公知のバチルス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、クレブシーラ（Ｋｌｅｂｓｉ
ｅｌｌａ）属などに属する微生物由来の酵素が適宜使用
できる。α−アミラーゼとしては、例えば、バチルス属
に属する微生物由来の酵素、とりわけ糖化型α−アミラ
ーゼが使用される。

【０００８】糖転移反応は、本発明の非還元性オリゴ糖
が生成する方法であればよく、使用する酵素によって適
宜選ばれる。例えば、シクロマルトデキストリン・グル
カノトランスフェラーゼまたはα−アミラーゼを使用す
る場合には、ネオトレハロースと澱粉部分分解物などの
澱粉質とを含有する水溶液に作用させて、ネオトレハロ
ースのグルコシル基へ澱粉質からα−グリコシル基を転
移し、本発明の非還元性オリゴ糖を生成させればよい。
この際、ネオトレハロースに対する澱粉質の重量比は、
通常、０．１乃至１００倍、望ましくは、０．２乃至２
０倍が好適である。

【０００９】これら酵素反応は、通常、温度２０乃至８
０℃、ｐＨ３乃至９から選ばれる条件で反応させればよ
く、更に酵素またはこれを含む微生物を固定化して繰り
返し利用することも随意である。また、これら糖転移反
応のうち、より安価なα−グルコシル糖化合物を糖供与
体にし得ること、目的糖質であるβ−Ｄ−オリゴグルコ
シル α−Ｄ−グルコシド、α−Ｄ−オリゴグルコシル
β−Ｄ−グルコシドまたはβ−Ｄ−オリゴグルコシル
α−Ｄ−オリゴグルコシドで表わされるネオトレハロ
ース構造を有する非還元性オリゴ糖の生成率が高いこと
などから、一般的には、シクロマルトデキストリン・グ
ルカノトランスフェラーゼの使用が好都合であり、とり
わけ、より高温で作用させることのできるバチルス・ス
テアロサーモフィラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｓｔｅａｒ
ｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来の酵素が、反応液中
の澱粉質の老化を抑制し、微生物の汚染を抑制でき、反
応を容易に進めることができるので工業的に極めて有利
である。この場合には、通常、ネオトレハロースと、例
えば糊化澱粉、液化澱粉、ＤＥ１乃至５０程度の澱粉部
分分解物、アミロデキストリン、シクロデキストリンな
どの澱粉質とを含有する水溶液にシクロマルトデキスト
リン・グルカノトランスフェラーゼを澱粉質グラム当り
０．１単位以上、望ましくは、１乃至１００単位程度を
１乃至１００時間、望ましくは、４乃至７０時間程度作
用させると、ネオトレハロースの片方あるいは両方のグ
ルコシル基へα−グルコシル基がそれぞれ１乃至数個結
合した非還元性オリゴ糖、例えばβ−マルトシル α−
グルコシド、α−マルトシルβ−グルコシド、β−マル
トシル α−マルトシド（α−マルトシル β−マルト
シド）、β−マルトトリオシル α−グルコシド、α−
マルトトリオシル β−グルコシド、β−マルトトリオ
シル α−マルトシド、α−マルトトリオシルβ−マル
トシド、β−マルトトリオシル α−マルトトリオシド
（α−マルトトリオシル β−マルトトリオシド）、β
−マルトテトラオシル α−グルコシド、α−マルトテ
トラオシル β−グルコシド、β−マルトテトラオシル
α−マルトシド、α−マルトテトラオシル β−マル
トシド、β−マルトテトラオシル α−マルトトリオシ
ド、α−マルトテトラオシル β−マルトトリオシド、
β−マルトテトラオシル α−マルトテトラオシド（α
−マルトテトラオシルβ−マルトテトラオシド）、β−
マルトペンタオシル α−グルコシド、α−マルトペン
タオシル β−グルコシド、β−マルトペンタオシル
α−マルトシド、α−マルトペンタオシル β−マルト
シド、β−マルトペンタオシル α−マルトトリオシ
ド、α−マルトペンタオシル β−マルトトリオシド、
β−マルトペンタオシル α−マルトテトラオシド、α
−マルトペンタオシル β−マルトテトラオシド、β−
マルトペンタオシル α−マルトペンタオシド（α−マ
ルトペンタオシル β−マルトペンタオシド）などが生
成し、これを採取すれば良い。必要ならば、更に、これ
にβ−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．２）を作用させる
と、主としてβ−マルトシル α−グルコシド、α−マ
ルトシル β−グルコシド、β−マルトシル α−マル
トシド（α−マルトシル β−マルトシド）、β−マル
トトリオシル α−グルコシド、α−マルトトリオシル
β−グルコシド、β−マルトトリオシル α−マルト
シド、α−マルトトリオシル β−マルトシドおよびβ
−マルトトリオシル α−マルトトリオシド（α−マル
トトリオシル β−マルトトリオシド）の８種の非還元
性オリゴ糖が蓄積されることとなり、これらを採取する
こともできる。

【００１０】以上述べたような、糖転移反応、または糖
転移反応と加水分解反応によって生成される３糖類以上
のネオトレハロース構造を有する非還元性オリゴ糖含有
溶液は、通常、固形物当り、それを５乃至４０％程度含
有しており、これを濾過、精製して液状で利用すること
も、また、濃縮してシラップ状で利用することも、更
に、噴霧乾燥、真空乾燥などで乾燥して固状で利用する
ことも随意である。

【００１１】一般的には、比較的低分子のネオトレハロ
ース構造を有する非還元性オリゴ糖の特徴を生かすた
め、糖転移反応後、加水分解して得られる３糖類、４糖
類および５糖類を含む水溶液を、更に分離、精製して、
３糖類、４糖類および５糖類の高含有物にして利用され
る。その方法としては、例えば、酵母醗酵法、膜濾過
法、分別沈澱法、カラムクロマトグラフィーなどにより
夾雑糖類を分離除去する方法が適宜採用できる。とりわ
け、特開昭５８−２３７９９号公報、特開昭５８−７２
５９８号公報などに開示されている塩型強酸性カチオン
交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーにより、夾
雑糖類を除去して３糖類、４糖類および５糖類の非還元
性オリゴ糖高含有画分を採取する方法が有利に実施でき
る。この際、固定床方式、移動床方式、擬似移動床方式
のいずれの方式を採用することも随意である。また必要
ならば、これら３糖類、４糖類および５糖類をそれぞれ
に分離して採取することも随意である。

【００１２】本発明のネオトレハロース構造を有する非
還元性オリゴ糖は、還元性を示さず極めて安定であり、
また、無味乃至低い甘味を有しており、非結晶性乃至難
結晶性である。また経口摂取により消化酵素の作用を受
け、体内で吸収されるのでカロリー源としても有効であ
る。更に、虫歯誘発菌などによって、醗酵されにくいこ
とより、虫歯を起しにくい低甘味糖質材料としても利用
できる。また、化学的に安定であり、糖類と褐変反応を
起し易いアミノ酸、オリゴペプチド、蛋白質などと共用
できる。更には、活性の失われやすい生理活性物質など
を安定化し得ると共に、浸透圧調節性、賦形性、照り付
与性、保湿性、粘性、他糖の晶出防止性、難醗酵性、澱
粉の老化防止性などの性質を具備している。

【００１３】ネオトレハロース構造を有する非還元性オ
リゴ糖の持つこれら諸性質は、飲料、食品、嗜好物、飼
料、餌料などの飲食物、更には、化粧品、医薬品などの
製造に有利に利用できる。

【００１４】本発明のネオトレハロース構造を有する非
還元性オリゴ糖の比較的低分子のものは、甘味度が低い
ものの、そのままで甘味付けのための調味料として使用
することができる。必要ならば、例えば、粉飴、ブドウ
糖、果糖、マルトース、蔗糖、異性化糖、蜂蜜、メープ
ルシュガー、エリスリトール、ソルビトール、ジヒドロ
カルコン、ステビオシド、α−グリコシルステビオシ
ド、レバウディオシド、グリチルリチン、Ｌ−アスパル
チル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル、サッカリ
ン、グリシン、アラニンなどのような他の甘味料の１種
または２種以上の適量と混合して使用してもよく、また
必要ならば、デキストリン、澱粉、乳糖などのような増
量剤と混合して使用することもできる。

【００１５】また、ネオトレハロース構造を有する非還
元性オリゴ糖粉末品は、そのままで、または必要に応じ
て、増量剤、賦形剤、結合剤などと混合して、顆粒、球
状、短棒状、板状、立方体、錠剤など各種形状に成形し
て使用することも随意である。

【００１６】また、ネオトレハロース構造を有する非還
元性オリゴ糖の無味乃至低甘味は、酸味、塩から味、渋
味、旨味、苦味などの他の呈味を有する各種物質とよく
調和し、耐酸性、耐熱性も大きいので、一般の飲食物の
甘味付け、呈味改良に、また品質改良などに有利に利用
できる。例えば、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、も
ろみ、ひしお、ふりかけ、マヨネーズ、ドレッシング、
食酢、三杯酢、粉末すし酢、中華の素、天つゆ、麺つ
ゆ、ソース、ケチャップ、焼肉のタレ、カレールウ、シ
チューの素、スープの素、ダシの素、核酸系調味料、複
合調味料、みりん、新みりん、テーブルシュガー、コー
ヒーシュガー、など各種調味料として有利に使用でき
る。

【００１７】さらに、例えば、せんべい、あられ、おこ
し、餅類、まんじゅう、ういろう、あん類、羊羮、水羊
羮、錦玉、ゼリー、カステラ、飴玉などの各種和菓子、
パン、ビスケット、クラッカー、クッキー、パイ、プリ
ン、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリ
ーム、ワッフル、スポンジケーキ、ドーナツ、チョコレ
ート、チューインガム、キャラメル、キャンデーなどの
各種洋菓子、アイスクリーム、シャーベットなどの氷
菓、果実のシロップ漬、氷蜜などのシロップ類、フラワ
ーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペースト、
スプレッドなどのペースト類、ジャム、マーマレード、
シロップ漬、糖果などの果実、野菜の加工食品類、福神
漬、べったら漬、千枚漬、らっきょう漬などの漬物類、
たくあん漬の素、白菜漬の素などの漬物の素類、ハム、
ソーセージなどの畜肉製品類、魚肉ハム、魚肉ソーセー
ジ、かまぼこ、ちくわ、天ぷらなどの魚肉製品、ウニ、
イカの塩辛、酢コンブ、さきするめ、ふぐみりん干しな
どの各種珍味類、のり、山菜、するめ、小魚、貝などで
製造されるつくだ煮類、煮豆、ポテトサラダ、こんぶ巻
などのそう菜食品、乳製品、魚肉、畜肉、果実、野菜の
ビン詰、缶詰類、合成酒、洋酒などの酒類、コーヒー、
紅茶、ココア、ジュース、炭酸飲料、乳酸飲料、乳酸菌
飲料などの清涼飲料水、プリンミックス、ホットケーキ
ミックス、即席しるこ、即席スープなどの即席食品、更
には、離乳食、治療食、ドリンク剤などの各種飲食物へ
の甘味付けに、呈味改良に、また、品質改良などに有利
に利用できる。

【００１８】また、家畜、家禽、その他蜂、蚕、魚など
の飼育動物のために飼料、餌料などの嗜好性を向上させ
る目的で使用することもできる。その他、タバコ、練歯
磨、口紅、リップクリーム、内服薬、トローチ、肝油ド
ロップ、口中清涼剤、口中香剤、うがい薬など各種固形
状、ペースト状、液状などで嗜好物、化粧品、医薬品な
どの組成物への甘味剤として、または呈味改良剤、矯味
剤として、更には品質改良剤として有利に利用できる。

【００１９】また、ネオトレハロース構造を有する非還
元性オリゴ糖は、例えば、石鹸、スキンクリーム、ボデ
ィシャンプー、ヘアクリーム、リップクリーム、美肌
剤、育毛剤などへの安定剤、浸透圧調節剤、賦形剤、保
湿調節剤、粘度調節剤、品質改良剤などとして化粧品製
造に有利に利用できる。

【００２０】更に、生理活性物質、例えば、インターフ
ェロン−α、−β、−γ、ツモア・ネクロシス・ファク
ター−α、−β、リンホトキシン、マクロファージ遊走
阻止因子、コロニー刺激因子、トランスファー・ファク
ター、インターロイキン２などのサイトカイン、インシ
ュリン、成長ホルモン、プロラクチン、エリトロポエチ
ン、卵胞刺激ホルモンなどのホルモン、ＢＣＧワクチ
ン、日本脳炎ワクチン、はしかワクチン、ポリオ生ワク
チン、痘苗、破傷風菌トキソイド、ハブ抗毒素、ヒト免
疫グロブリンなどのワクチン、ペニシリン、エリスロマ
イシン、クロラムフェニコール、テトラサイクリン、ス
トレプトマイシン、硫酸カナマイシンなどの抗生物質、
チアミン、リボフラビン、Ｌ−アスコルビン酸、肝油、
カロチノイド、エルゴステロール、トコフェロールなど
のビタミン、リパーゼ、エラスターゼ、ウロキナーゼ、
プロテアーゼ、グルカナーゼなど酵素、薬用人参エキ
ス、スッポンエキス、クロレラエキス、プロポリス、ロ
ーヤルゼリーなどのエキス類、ウイルス、乳酸菌、ビフ
ィズス菌、酵母などの生菌の有効成分、活性の安定剤と
して、更には、浸透圧調節剤、賦形剤、経管栄養剤、糖
衣剤、シロップ剤などとして医薬品製造に有利に利用で
きる。以上述べたような飲食物、化粧品、医薬品など各
種組成物に本発明のネオトレハロース構造を有する非還
元性オリゴ糖を含有せしめる方法は、その組成物が完成
するまでの工程に含有せしめればよく、例えば、混和、
混捏、溶解、融解、浸漬、浸透、散布、塗布、被覆、噴
霧、注入、固化など公知の方法が適宜選ばれる。ネオト
レハロース構造を有する非還元性オリゴ糖を含有せしめ
る量は該非還元性オリゴ糖の特性を発揮できるだけの量
を含有せしめればよく、通常、製品当り０．５％以上、
望ましくは１％以上が好適である。

【００２１】以下、本発明のネオトレハロース構造を有
する非還元性オリゴ糖について実験で詳細に説明する。

【００２２】

【実験 ネオトレハロース構造を有する非還元性オリゴ糖の調製とその理化学的性質】

【００２３】

【実験１ ネオトレハロースの製造例】

【実験１−１ ラクトネオトレハロースの調製】市販の
乳糖５０重量部およびデキストリン（ＤＥ８、松谷化学
工業株式会社販売、商品名パインデックス＃１）５０重
量部を水１５０重量部に加熱溶解し、この溶液を温度６
０℃、ｐＨ６．０にして、バチルス・ステアロサーモフ
ィラス由来のシクロマルトデキストリン・グルカノトラ
ンスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）を
デキストリングラム当り３００単位加えて２０時間反応
させ、次いで１００℃に３０分間加熱して、酵素を失活
させた。この溶液を温度５５℃、ｐＨ５．０にして、グ
ルコアミラーゼ（ナガセ生化学工業株式会社製造、商品
名グルコチーム）を澱粉部分分解物グラム当り１５単位
加えて１６時間反応させ、次いで１００℃に１５分間加
熱して、酵素を失活させた。本溶液には、ラクトネオト
レハロースを固形物当り約２４％含有していた。

【００２４】

【実験１−２ ネオトレハロースの製造】実験１−１の
方法で得たラクトネオトレハロース含有溶液にβ−ガラ
クトシダーゼ（ケイアイ化成工業株式会社販売、商品名
ラクターゼＬＰ）を固形物グラム当り１０単位加えて、
６０℃、２０時間反応させ、次いで、１００℃で１０分
間加熱して酵素を失活させた。本溶液には、ネオトレハ
ロースを固形物当り約１６％含有していた。本溶液を、
常法に従って、活性炭にて脱色し、イオン交換樹脂にて
脱塩し、濃度約６０％に濃縮した。この濃縮液を塩型強
酸性カチオン交換樹脂（オルガノ株式会社販売、商品名
ＣＧ６０００、Ｎａ型）が充填されたジャケット付きス
テンレス製カラムに、６０℃、ＳＶ ０．４でチャージ
し、ネオトレハロース高含有画分を採取した。本高含有
液は、固形物当り約８８％のネオトレハロースを含有し
ていた。本溶液を濃度約７５％に濃縮した後、助晶缶に
とり、種晶としてネオトレハロース含水結晶を約２％加
えてゆっくり攪拌しながら助晶し、得られたマスキット
を分蜜し、結晶に少量の水をスプレーして洗浄して高純
度の結晶を得た。

【００２５】

【実験２ ネオトレハロース構造を有する非還元性オリ
ゴ糖の調製】実験１の方法で調製したネオトレハロース
５０重量部およびα−シクロデキストリン（株式会社林
原生物化学研究所販売）５０重量部を水１５０重量部に
溶解し、この溶液を温度５５℃、ｐＨ５．５にして、バ
チルス・ステアロサーモフィラス由来のシクロマルトデ
キストリン・グルカノトランスフェラーゼ（株式会社林
原生物化学研究所販売）をα−シクロデキストリングラ
ム当り５０単位加えて１７時間反応させ、次いで１００
℃で３０分間加熱して、酵素を失活させた。この溶液を
温度４０℃、ｐＨ５．５にして、β−アミラーゼ（ナガ
セ生化学工業株式会社販売、商品名β−アミラーゼ＃１
５００）を澱粉部分分解物グラム当り２０単位加えて１
８時間反応させ、次いで１００℃で１５分間加熱して酵
素を失活させた。本溶液には、本発明のβ−Ｄ−オリゴ
グルコシル α−Ｄ−グルコシド、α−Ｄ−オリゴグル
コシル β−Ｄ−グルコシドおよびβ−Ｄ−オリゴグル
コシル α−Ｄ−オリゴグルコシドとして、物質１、物
質２、物質３、物質４、物質５、物質６、物質７及び物
質８を、固形物当りそれぞれ約１２％、１３％、１０
％、８％、１１％、６％、７％及び３％含有していた。
本溶液を活性炭で脱色し、イオン交換樹脂（Ｈ型および
ＯＨ型）にて脱塩し、濃度約４５％に濃縮して、カラム
クロマトグラフィーを行ない、物質１、物質２、物質
３、物質４及び物質５の高含有画分を採取した。カラム
クロマトグラフィー用樹脂は、塩型強酸性カチオン交換
樹脂（オルガノ株式会社販売、商品名ＸＴ−１０１６、
Ｎａ型）を使用し、内径５．４ｃｍのジャケット付ステ
ンレス製カラムに水懸濁状で充填した。この際、樹脂層
長５ｍのカラム４本を接続して樹脂層全長を約２０ｍに
なるようにした。カラム内温度を５５℃に維持しつつ、
原料の糖溶液を５ｖ／ｖ％加え、これに５５℃の温水を
ＳＶ ０．３の流速で流して分画し、物質１、物質２、
物質３、物質４及び物質５の高含有画分を採取した。採
取された物質１、物質２、物質３、物質４及び物質５の
高含有液をさらにオクタデシルシリカゲルを担体とした
分取用液体クロマトグラフィー（分取用カラムとしてＹ
ＭＣ−ＰａｃｋＲ−３５５−１５（株式会社ＹＭＣ販
売）を使用し、溶離液は水を用いた。）にかけ、物質
１、物質２、物質３、物質４及び物質５をそれぞれ９６
％以上含有する高含有画分を採取し、真空乾燥、粉末化
して、粉末状の物質１、物質２、物質３、物質４及び物
質５の高純度標品を得た。

【００２６】

【実験３ ネオトレハロース構造を有する非還元性オリ
ゴ糖の理化学的性質】実験２の方法で調製した物質１、
物質２、物質３、物質４及び物質５の高純度標品を試料
として理化学的性質を調べた。この結果を以下に示す。 （１） 分子量 物質１ ５０４．４ 物質２ ５０４．４ 物質３ ６６６．６ 物質４ ６６６．６ 物質５ ６６６．６ （２） 分子式 物質１ Ｃ₁₈Ｈ₃₂Ｏ₁₆ 物質２ Ｃ₁₈Ｈ₃₂Ｏ₁₆ 物質３ Ｃ₂₄Ｈ₄₂Ｏ₂₁ 物質４ Ｃ₂₄Ｈ₄₂Ｏ₂₁ 物質５ Ｃ₂₄Ｈ₄₂Ｏ₂₁ （３） 紫外線吸収 ５試料ともに特徴ある吸収は示さない。 （４） 呈色反応 ５試料ともアントロン−硫酸反応で緑色を呈し、フェー
リング氏液還元反応およびヨウ素反応は陰性。 （５） 構造 （ａ） １Ｎ−硫酸で加水分解すると、物質１及び物質
２は、標品１モルからＤ−グルコース３モルを生成す
る。物質３、物質４及び物質５は標品１モルからＤ−グ
ルコース４モルを生成する。 （ｂ） グルコアミラーゼの作用により物質１及び物質
２はグルコース１モルとネオトレハロース１モルを、物
質３、物質４及び物質５はグルコース２モルとネオトレ
ハロース１モルを生成した。 （ｃ） 重水に溶解し、日本電子製ＧＳＸ−４００型核
磁気共鳴装置により、内部標準物質としてＴＳＰ（（Ｃ
Ｈ₃）₃Ｓｉ（ＣＤ₃）₂ＣＯ₂Ｎａ）を用いて、炭素核磁
気共鳴分析（¹³Ｃ−ＮＭＲ）を行った。物質１及び物質
２は、炭素原子１８個分のシグナルが得られた。物質
３、物質４及び物質５は、炭素原子２４個分のシグナル
が得られた。クラウス・ボック（ＫＬＡＵＳ ＢＯＣ
Ｋ）等がアドバンス・イン・カーボハイドレート・ケミ
ストリー・アンド・バイオケミストリー（ＡＤＶＡＮＣ
Ｅ ＩＮ ＣＡＲＢＯＨＹＤＲＡＴＥ ＣＨＥＭＩＳＴ
ＲＹ ＡＮＤ ＢＩＯＣＨＥＭＩＳＴＲＹ）、第４２
巻、１９２乃至２２５頁（１９８４年）で報告している
標準物質、ネオトレハロース、マルトースおよびマルト
トリオースの化学シフトより、各炭素を表１のように帰
属し、物質１はＯ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→
４）−β−Ｄ−グルコピラノシル α−Ｄ−グルコピラ
ノシド、物質２はＯ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１
→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル β−Ｄ−グルコピ
ラノシド、物質３はＯ−α−Ｄ−グルコピラノシル−
（１→４）−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→
４）−β−Ｄ−グルコピラノシル α−Ｄ−グルコピラ
ノシド、物質４はＯ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１
→４）−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−
α−Ｄ−グルコピラノシル β−Ｄ−グルコピラノシ
ド、物質５はＯ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→
４）−β−Ｄ−グルコピラノシル α−Ｄ−マルトシド
と判断される。

【００２７】

【表１】

【００２８】以上の結果より、物質１、物質２、物質
３、物質４及び物質５の化学構造は、それぞれ化１，化
２，化３，化４及び化５に示す。この構造から物質１を
β−マルトシル α−グルコシド、物質２をα−マルト
シル β−グルコシド、物質３をβ−マルトトリオシル
α−グルコシド、物質４をα−マルトトリオシル β
−グルコシド、物質５をβ−マルトシル α−マルトシ
ドと命名する。

【００２９】

【化１】

【００３０】

【化２】

【００３１】

【化３】

【００３２】

【化４】

【００３３】

【化５】

【００３４】

【実験４ 急性毒性試験】マウスを使用して、実験２の
方法で調製した高純度β−マルトシル α−グルコシ
ド、α−マルトシル β−グルコシド、β−マルトトリ
オシル α−グルコシド、α−マルトトリオシル β−
グルコシドおよびβ−マルトシル α−マルトシドをそ
れぞれ経口投与して急性毒性テストを行なった。その結
果、β−マルトシル α−グルコシド、α−マルトシル
β−グルコシド、β−マルトトリオシル α−グルコ
シド、α−マルトトリオシル β−グルコシド及びβ−
マルトシル α−マルトシドは低毒性の物質で、いずれ
も投与可能な最大投与量においても死亡例は認められな
かった。従って、正確な値はいえないが、そのＬＤ₅₀値
は、それぞれ５０ｇ／Ｋｇ以上であった。

【００３５】以下、本発明のβ−Ｄ−オリゴグルコシル
α−Ｄ−グルコシド、α−Ｄ−オリゴグルコシル β
−Ｄ−グルコシドまたはβ−Ｄ−オリゴグルコシル α
−Ｄ−オリゴグルコシドで表わされるネオトレハロース
構造を有する非還元性オリゴ糖の製造方法を実施例Ａ
で、該非還元性オリゴ糖の用途を実施例Ｂで示す。

【００３６】

【実施例Ａ−１】実験１の方法で調製したネオトレハロ
ース１重量部およびデキストリン（ＤＥ１８、松谷化学
工業株式会社販売、商品名パインデックス＃４）２重量
部を水３．７重量部に加熱溶解し、この溶液を温度６０
℃、ｐＨ５．６にして、バチルス・ステアロサーモフィ
ラス由来のシクロマルトデキストリン・グルカノトラン
スフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）をデ
キストリングラム当り３０単位加えて２０時間反応さ
せ、次いで加熱して酵素を失活させた。本溶液を常法に
従って、活性炭にて脱色、イオン交換樹脂（Ｈ型および
ＯＨ型）にて脱塩して精製し、濃縮して、濃度７５％の
シラップを固形物当り収率約９２％で得た。

【００３７】本品は、β−マルトシル α−グルコシ
ド、α−マルトシル β−グルコシド、β−マルトトリ
オシル α−グルコシド、α−マルトトリオシル β−
グルコシド及びβ−マルトシル α−マルトシドなどの
非還元性オリゴ糖を固形物当り約６５％含有しており、
低い甘味、適度の粘度、保湿性を有し、各種飲食物、化
粧品、医薬品など各種組成物の製造に有利に利用でき
る。

【００３８】

【実施例Ａ−２】実験１の方法で調製したネオトレハロ
ース１重量部およびα−シクロデキストリン（株式会社
林原生物化学研究所販売）１．５重量部を水４重量部に
加熱溶解し、温度６５℃、ｐＨ５．６にして、実施例Ａ
−１の場合と同じシクロマルトデキストリン・グルカノ
トランスフェラーゼをα−シクロデキストリングラム当
り２０単位加えて２４時間反応させ、酵素を加熱失活さ
せた。この溶液を温度５５℃、ｐＨ５．６にして、β−
アミラーゼ（ナガセ生化学工業株式会社販売 商品名β
−アミラーゼ＃１５００）を固形物グラム当り２０単位
加えて１６時間反応させ、次いで、酵素を加熱失活させ
た。本溶液を実施例Ａ−１と同様に精製、濃縮して、濃
度７５％のシラップを固形物当り収率約９３％で得た。

【００３９】本品は、β−マルトシル α−グルコシ
ド、α−マルトシル β−グルコシド、β−マルトトリ
オシル α−グルコシド、α−マルトトリオシル β−
グルコシド及びβ−マルトシル α−マルトシドなどの
非還元性オリゴ糖を固形物当り約５０％含有しており、
実施例Ａ−１の場合と同様に、低い甘味、適度の粘度、
保湿性を有し、各種飲食物、化粧品、医薬品など各種組
成物の製造に有利に利用できる。

【００４０】

【実施例Ａ−３】濃度２０％澱粉乳にα−アミラーゼ
（ノボノルディスクバイオインダストリー株式会社販
売、商品名ターマミール６０Ｌ）を澱粉固形物当り０．
０１５％加え、９５乃至１００℃に加熱して液化し、酵
素を加熱失活させてＤＥ３の液化液を得た。本液に固形
物として澱粉質と等重量の実験１の方法で調製したネオ
トレハロースを溶解し、温度５５℃、ｐＨ５．３にし
て、イソアミラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販
売）を澱粉グラム当り２５０単位および実施例Ａ−１の
場合と同じシクロマルトデキストリン・グルカノトラン
スフェラーゼを澱粉グラム当り３０単位加えて２４時間
反応させ、酵素を加熱失活させた。この溶液に水を加え
て濃度約２５％に希釈した後、温度５５℃、ｐＨ５．３
に維持して、β−アミラーゼを固形物グラム当り２０単
位加えて１６時間反応させ、次いで酵素を加熱失活させ
た。本溶液を実施例Ａ−１と同様に精製、濃縮して濃度
７５％のシラップを固形物当り収率約９０％で得た。

【００４１】本品は、β−マルトシル α−グルコシ
ド、α−マルトシル β−グルコシド、β−マルトトリ
オシル α−グルコシド、α−マルトトリオシル β−
グルコシド及びβ−マルトシル α−マルトシドなどの
非還元性オリゴ糖を固形物当り約４５％含有しており、
実施例Ａ−１の場合と同様に、低い甘味、適度の粘度、
保湿性を有し、各種飲食物、化粧品、医薬品など各種組
成物の製造に有利に利用できる。

【００４２】

【実施例Ａ−４】実施例Ａ−２の方法で調製したβ−マ
ルトシル α−グルコシド、α−マルトシル β−グル
コシド、β−マルトトリオシル α−グルコシド、α−
マルトトリオシル β−グルコシド及びβ−マルトシル
α−マルトシド含有溶液を原料糖液とし、これを濃縮
して濃度約４５％にした。本液のβ−マルトシル α−
グルコシド、α−マルトシル β−グルコシド、β−マ
ルトトリオシル α−グルコシド、α−マルトトリオシ
ル β−グルコシド及びβ−マルトシル α−マルトシ
ドなどの非還元性オリゴ糖含量を高めるため、分画用樹
脂として、塩型強酸性カチオン交換樹脂（ダウケミカル
社販売、商品名ダウエックス５０Ｗ−Ｘ４、Ｃａ型）を
用いた以外は、実験１の方法に従ってカラムクロマトグ
ラフィーを行ない、β−マルトシル α−グルコシド、
α−マルトシル β−グルコシド、β−マルトトリオシ
ル α−グルコシド、α−マルトトリオシル β−グル
コシド及びβ−マルトシル α−マルトシドなどの非還
元性オリゴ糖高含有画分を採取した。

【００４３】本高含有液は、β−マルトシル α−グル
コシド、α−マルトシル β−グルコシド、β−マルト
トリオシル α−グルコシド、α−マルトトリオシル
β−グルコシド及びβ−マルトシル α−マルトシドな
どの非還元性オリゴ糖を固形物当り約８０％含有してい
た。

【００４４】

【実施例Ａ−５】実施例Ａ−４の方法で調製したβ−マ
ルトシル α−グルコシド、α−マルトシル β−グル
コシド、β−マルトトリオシル α−グルコシド、α−
マルトトリオシル β−グルコシド及びβ−マルトシル
α−マルトシド高含有溶液を原料糖液とし、これを濃
縮して濃度約５０％にした。本液を実験２に示したオク
タデシルシリカゲルを担体とした分取用液体クロマトグ
ラフィーを行ない、β−マルトシル α−グルコシド高
含有画分、α−マルトシル β−グルコシド高含有画
分、β−マルトトリオシル α−グルコシド高含有画
分、α−マルトトリオシル β−グルコシド高含有画分
及びβ−マルトシル α−マルトシド高含有画分をそれ
ぞれ採取した。

【００４５】これらの高含有液は、それぞれβ−マルト
シル α−グルコシド、α−マルトシル β−グルコシ
ド、β−マルトトリオシル α−グルコシド、α−マル
トトリオシル β−グルコシドおよびβ−マルトシル
α−マルトシドを固形物当り約９７％含有していた。

【００４６】

【実施例Ａ−６】実施例Ａ−５の方法で調製した高純度
β−マルトシル α−グルコシド水溶液、高純度α−マ
ルトシル β−グルコシド水溶液、高純度β−マルトト
リオシルα−グルコシド水溶液、高純度α−マルトトリ
オシル β−グルコシド水溶液および高純度β−マルト
シル α−マルトシド水溶液をそれぞれ２４時間凍結乾
燥を行った。得られた乾燥物を粉砕機にて粉砕し、水分
約０．９％の粉末をそれぞれ約９５％の収率で得た。

【００４７】

【実施例Ａ−７】実施例Ａ−４の方法で調製したβ−マ
ルトシル α−グルコシド、α−マルトシル β−グル
コシド、β−マルトトリオシル α−グルコシド、α−
マルトトリオシル β−グルコシド及びβ−マルトシル
α−マルトシドなどの非還元性オリゴ糖高含有画分を
２４時間凍結乾燥を行った。得られた乾燥物を粉砕機に
て粉砕し、水分約１．１％の粉末を約９６％の収率で得
た。

【００４８】

【実施例Ｂ−１】 実施例Ａ−６の方法で得た高純度
α−マルトシル β−グルコシド粉末１重量部に、α−
グリコシルステビオシド（東洋精糖株式会社販売、商品
名αＧスイート）０．０５重量部を均一に混合し、顆粒
成形機にかけて、顆粒状甘味料を得た。

【００４９】本品は、甘味の質が優れ、蔗糖の約２倍の
甘味度を有し、甘味度当りのカロリーは、蔗糖の約１／
２に低下している。

【００５０】本甘味料は、低カロリー甘味料として、カ
ロリー摂取を制限している肥満者、糖尿病者などのため
の低カロリー飲食物などに対する甘味付けに好適であ
る。

【００５１】また、本甘味料は、虫歯誘発菌による酸の
生成が少なく、不溶性グルカンの生成も少ないことよ
り、虫歯を抑制する飲食物などに対する甘味付けにも好
適である。

【００５２】

【実施例Ｂ−２ ハードキャンデー】５５％蔗糖溶液１
００重量部に実施例Ａ−１の方法で得た非還元性オリゴ
糖含有シラップ３０重量部を加熱混合し、次いで減圧下
で水分２％未満になるまで加熱濃縮し、これにクエン酸
１重量部および適量のレモン香料と着色料とを混和し、
常法に従って成形し、製品を得た。

【００５３】本品は、歯切れ、呈味良好で、蔗糖の晶出
も起こらない高品質のハードキャンデーである。

【００５４】

【実施例Ｂ−３ いちごジャム】生いちご１５０重量
部、蔗糖６０重量部、マルトース２０重量部、実施例Ａ
−４の方法で得た非還元性オリゴ糖高含有シラップ４０
重量部、ペクチン５重量部およびクエン酸１重量部をな
べで煮詰め、ビン詰して製品を得た。

【００５５】本品は、風味、色調とも良好なジャムであ
る。

【００５６】

【実施例Ｂ−４ 乳酸飲料】脱脂乳１０重量部を８０℃
で２０分間加熱殺菌した後、４０℃に冷却し、これにス
ターター０．３重量部を加えて約３７℃で１０時間醗酵
させた。次いで、これをホモゲナイズした後、実施例Ａ
−６の方法で得たα−マルトシル β−グルコシド粉末
４重量部、蔗糖１重量部および異性化糖シラップ２重量
部を加えて７０℃に保って殺菌した。これを冷却し、適
量の香料を加え、ビン詰して製品を得た。

【００５７】本品は、風味、甘味が酸味とよく調和した
高品質の乳酸飲料である。

【００５８】

【実施例Ｂ−５ 加糖練乳】原乳１００重量部に実施例
Ａ−３の方法で得た非還元性オリゴ糖含有シラップ３重
量部および蔗糖１重量部を溶解し、プレートヒーターで
加熱殺菌し、次いで濃度約７０％に濃縮し、無菌状態で
缶詰して製品を得た。

【００５９】本品は、温和な甘味で、風味もよく、乳幼
児食品、フルーツ、コーヒー、ココア、紅茶などの調味
用に有利に利用できる。

【００６０】

【実施例Ｂ−６ 粉末ジュース】噴霧乾燥により製造し
たオレンジ果汁粉末３３重量部に対し、実施例Ａ−６の
方法で得た高純度β−マルトシル α−マルトシド粉末
５０重量部、蔗糖１０重量部、無水クエン酸０．６５重
量部、リンゴ酸０．１重量部、Ｌ−アスコルビン酸０．
１重量部、クエン酸ソーダ０．１重量部、プルラン０．
５重量部、粉末香料適量をよく混合撹拌し、粉砕し微粉
末にしてこれを流動層造粒機に仕込み、排風温度４０℃
とし、これに、実施例Ａ−４の方法で得た非還元性オリ
ゴ糖高含有溶液をバインダーとしてスプレーし、３０分
間造粒し、計量、包装して製品を得た。

【００６１】本品は、果汁含有率約３０％の粉末ジュー
スである。また、本品は異味、異臭がなく、吸湿固結も
起こさず長期に安定であった。

【００６２】

【実施例Ｂ−７ チョコレート】カカオペースト４０重
量部、カカオバター１０重量部、蔗糖３０重量部、実施
例Ａ−６の方法で得た高純度β−マルトシル α−マル
トシド粉末２０重量部を混合してレファイナーに通して
粒度を下げた後、コンチェに入れて５０℃で２昼夜練り
上げる。この間に、レシチン０．５重量部を加え充分に
混和分散させた。次いで、温度調節機で３１℃に調節
し、バターの固まる直前に型に流し込み、振動機でアワ
抜きを行い、１０℃の冷却トンネルを２０分間くぐらせ
て固化させた。これを型抜きして包装し製品を得た。

【００６３】本品は、吸湿性がなく、色、光沢共に良
く、内部組織も良好で、口中でなめらかに溶け、上品な
甘味とまろやかな風味を有する。

【００６４】

【実施例Ｂ−８ チューインガム】ガムベース３重量部
を柔らかくなる程度に加熱溶融し、これに蔗糖４重量部
および実施例Ａ−６の方法で得た高純度α−マルトトリ
オシル β−グルコシド粉末３重量部とを加え、更に適
量の香料と着色料とを混合し、常法に従って、ロールに
より練り合わせ、成形、包装して製品を得た。

【００６５】本品は、テクスチャー、風味とも良好なチ
ューインガムである。

【００６６】

【実施例Ｂ−９ カスタードクリーム】コーンスターチ
１００重量部、実施例Ａ−３の方法で得た、非還元性オ
リゴ糖含有シラップ１００重量部、マルトース８０重量
部、蔗糖２０重量部および食塩１重量部を充分に混合
し、鶏卵２８０重量部を加えて撹拌し、これに沸騰した
牛乳１，０００重量部を徐々に加え、更に、これを火に
かけて撹拌を続け、コーンスターチが完全に糊化して全
体が半透明になった時に火を止め、これを冷却して適量
のバニラ香料を加え、計量、充填、包装して製品を得
た。

【００６７】本品は、なめらかな光沢を有し、温和な甘
味で美味である。

【００６８】

【実施例Ｂ−１０ ういろうの素】米粉９０重量部に、
コーンスターチ２０重量部、実施例Ａ−７の方法で得た
非還元性オリゴ糖高含有粉末１２０重量部、プルラン４
重量部を均一に混合してういろうの素を製造した。うい
ろうの素と適量の抹茶と水とを混練し、これを容器に入
れて６０分間蒸し上げて抹茶ういろうを製造した。

【００６９】本品は、照り、口当りも良好で、風味も良
い。また、澱粉の老化も抑制され、日持ちもよい。

【００７０】

【実施例Ｂ−１１ 乳液】ポリオキシエチレンベヘニル
エーテル０．５重量部、テトラオレイン酸ポリオキシエ
チレンソルビトール１重量部、親油型モノステアリン酸
グリセリン１重量部、ベヘニールアルコール０．５重量
部、アボガド油１重量部、実施例Ａ−５の方法で得た高
純度β−マルトシル α−グルコシド液及び高純度α−
マルトシルβ−グルコシド液３．５重量部、α−グリコ
シル ルチン１重量部、ビタミンＥおよび防腐剤の適量
を、常法に従って加熱溶解し、これに１，３−ブチレン
グリコール５重量部、カルボキシビニルポリマー０．１
重量部および精製水８５．３重量部を加え、ホモゲナ
イザーにかけ、乳化し、乳液を製造した。

【００７１】本品は、保湿性ある乳液で、日焼け止め、
色白剤などとして有利に利用できる。

【００７２】

【実施例Ｂ−１２ スキンクリーム】モノステアリン酸
ポリオキシエチレングリコール２重量部、自己乳化型モ
ノステアリン酸グリセリン５重量部、α−グリコシル
ルチン２重量部、流動パラフィン１重量部、トリオクタ
ン酸グリセリル１０重量部、実施例Ａ−７の方法で得た
非還元性オリゴ糖高含有粉末４重量部および防腐剤の適
量を、常法に従って加熱溶解し、これに１，３−ブチレ
ングリコール５重量部および精製水６６重量部を加え、
ホモゲナイザーにかけて乳化し、更に、香料の適量を加
えて撹拌混合し、クリームを製造した。

【００７３】本品は、伸びの良いクリームで、日焼け止
め、美肌剤、色白剤などとして有利に使用できる。

【００７４】

【実施例Ｂ−１３ 練歯磨】第二リン酸カルシウム４５
重量部、ラウリル硫酸ナトリウム１．５重量部、グリセ
リン２５重量部、ポリオキシエチレンソルビタンラウレ
ート０．５重量部、実施例Ａ−３の方法で得た非還元性
オリゴ糖含有シラップ１５重量部、サッカリン０．０２
重量部および防腐剤０．０５重量部を水１３重量部と混
合して練歯磨を得た。

【００７５】本品は、光沢、洗浄力も良好で、練歯磨と
して好適である。

【００７６】

【実施例 Ｂ−１４】 経管栄養剤 実施例Ａ−６の方法で得た高純度α−マルトトリオシル
β−グルコシド粉末２０重量部、グリシン１．１重量
部、グルタミン酸ナトリウム１重量部、乳酸カルシウム
０．４重量部、炭酸マグネシウム０．１重量部、チアミ
ン０．０１重量部およびリボフラビン０．０１重量部か
らなる配合物を調製する。この配合物２４ｇずつをラミ
ネートアルミ製小包に充填し、ヒートシールして製品を
得た。

【００７７】本品は、１袋分を約３００乃至５００ｍｌ
の水に溶解して栄養補給液とし、経管方法により、鼻
腔、胃腸などへ投与して使用する。

【００７８】本品は、ヒトのみならず、家畜などへの非
経口的栄養補給液としても有利に利用できる。

【００７９】

【実施例Ｂ−１５ 経管栄養剤】実施例Ａ−６の方法で
得た高純度α−マルトトリオシル β−グルコシド粉末
５８０重量部、乾燥卵黄１９０重量部、脱脂粉乳２０９
重量部、塩化ナトリウム４．４重量部、塩化カリウム
１．８５重量部、硫酸マグネシウム４重量部、チアミン
０．０１重量部、アスコルビン酸ナトリウム０．１重量
部、ビタミンＥアセテート０．６重量部およびニコチン
酸アミド０．０４重量部からなる配合物を調製する。こ
の配合物２５ｇずつを、ラミネートアルミ製小包に充填
し、ヒートシールして製品を得た。

【００８０】本品は、１袋分を約１５０乃至３００ｍｌ
の水に溶解して、栄養補給液とし、経管方法により鼻
腔、食道、胃などへ投与して使用する。

【００８１】

【実施例Ｂ−１６ インターフェロン液剤】ヒト天然型
インターフェロン−γ標品（株式会社林原生物学研究所
製造、コスモ・バイオ株式会社販売）を、常法に従っ
て、固定化抗ヒトインターフェロン−γ抗体カラムにか
け、該標品に含まれるヒト天然型インターフェロン−γ
を吸着させ、安定剤である牛血清アルブミンを素通りさ
せて除去し、次いで、ｐＨを変化させて、ヒト天然型イ
ンターフェロン−γを実施例Ａ−５の方法で得た高純度
β−マルトシル α−マルトシドを７％含有する生理食
塩水を用いて溶出した。本液を精密濾過し、無菌的にバ
イアルビンに充填して、ｍｌ当りヒト天然型インターフ
ェロン−γを１×１０⁵単位含有する液剤を得た。

【００８２】本品は、１日当り、大人１乃至２０ｍｌ程
度が経口的または非経口的に投与され、ウイルス性疾
患、アレルギー性疾患、リューマチ、糖尿病、悪性腫瘍
などの治療に有利に利用できる。

【００８３】本品は、β−マルトシル α−マルトシド
が安定剤として作用し、４℃または２５℃で２０日間放
置しても、その活性をよく維持している。

【００８４】

【実施例Ｂ−１７ ツモア・ネクロシス・ファクター液
剤】ヒト天然型ツモア・ネクロシス・ファクター−α標
品（株式会社林原生物化学研究所製造、コスモ・バイオ
株式会社販売）を、常法に従って、固定化抗ヒトツモア
・ネクロシス・ファクター−α抗体カラムにかけ、該標
品に含まれるヒト天然型ツモア・ネクロシス・ファクタ
ー−αを吸着させ、安定剤である牛血清アルブミンを素
通させて除去し、次いで、ｐＨを変化させて、ヒト天然
型ツモア・ネクロシス・ファクター−αを実施例Ａ−５
の方法で得た高純度β−マルトシルα−グルコシドを１
０％含有する生理食塩水を用いて溶出した。本液を精密
濾過し、無菌的にバイアルビンに充填して、ｍｌ当りヒ
ト天然型ツモア・ネクロシス・ファクター−αを１×１
０⁴単位含有する液剤を得た。

【００８５】本品は、１日当り、大人１乃至２０ｍｌ程
度が経口的または非経口的に投与され、ウイルス性疾
患、アレルギー性疾患、リューマチ、糖尿病、悪性腫瘍
などの治療に有利に利用できる。

【００８６】本品は、β−マルトシル α−グルコシド
が安定剤として作用し、４℃または２５℃で２０日間放
置しても、その活性をよく維持している。

【００８７】

【実施例Ｂ−１８ インターフェロン錠剤】ヒト天然型
インターフェロン−α標品（株式会社林原生物化学研究
所製造、コスモ・バイオ株式会社販売）を、常法に従っ
て、固定化抗ヒトインターフェロン−α抗体カラムにか
け、該標品に含まれるヒト天然型インターフェロン−α
を吸着させ、安定剤である牛血清アルブミンを素通りさ
せて除去し、次いでｐＨを変化させて、ヒト天然型イン
ターフェロン−αを実施例Ａ−５の方法で得た高純度β
−マルトトリオシル α−グルコシドを５％含有する生
理食塩水を用いて溶出した。本液を精密濾過し、約２０
倍量の無水結晶マルトース粉末（株式会社林原商事販
売、商品名ファイントースＴ）に加えて脱水、粉末化
し、これを打錠機にて打錠し、１錠（約２００ｍｇ）当
りヒト天然型インターフェロン−αを約１５０単位含有
する錠剤を得た。

【００８８】本品は、舌下錠などとして、１日当り、大
人１乃至１０錠程度が経口的に投与され、ウイルス性疾
患、アレルギー性疾患、リューマチ、糖尿病、悪性腫瘍
などの治療に有利に利用できる。とりわけ、近年、患者
数の急増しているエイズ、肝炎などの治療剤として有利
に利用できる。

【００８９】本品は、β−マルトトリオシル α−グル
コシドと共に無水結晶マルトースが安定剤として作用
し、室温で放置してもその活性を長期間よく維持する。

【００９０】

【発明の効果】上記から明らかなように、本発明のβ−
Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−グルコシドあるいはα
−Ｄ−オリゴグルコシル β−Ｄ−グルコシドまたはβ
−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−オリゴグルコシドで
表わされるネオトレハロース構造を有する非還元性オリ
ゴ糖で、極めて安定であり、水に溶解し易い物質であ
り、良質で、低甘味を有している。また、非還元性オリ
ゴ糖は、化学的に安定であり、褐変反応を起し易いアミ
ノ酸、オリゴペプチド、更には、有効成分、活性の失わ
れ易い生理活性物質などを安定化し得る性質を有してい
る。加えて、浸透圧調節性、賦活性、照り付与性、保湿
性、粘性、他糖の晶出防止、難醗酵性、澱粉の老化防止
性などの性質を具備している。これら諸性質は、飲食
物、化粧品、医薬品など各種組成物の製造に有利に利用
できる。

【００９１】従って、本発明のβ−Ｄ−オリゴグルコシ
ル α−Ｄ−グルコシド、α−Ｄ−オリゴグルコシル
β−Ｄ−グルコシドまたはβ−Ｄ−オリゴグルコシル
α−Ｄ−オリゴグルコシドで表わされるネオトレハロー
ス構造を有する非還元性オリゴ糖とその製造方法並びに
用途の確立は、飲食物、化粧品、医薬品分野における産
業的意義が極めて大きい。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０８Ｂ 37/00 Ｚ 7433−4Ｃ

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 β−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−グ
   ルコシド、α−Ｄ−オリゴグルコシル β−Ｄ−グルコ
   シドまたはβ−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−オリゴ
   グルコシドで表わされる非還元性オリゴ糖。
2. 【請求項２】 非還元性オリゴ糖が３糖類以上から選ば
   れる１種または２種以上の請求項１記載の非還元性オリ
   ゴ糖。
3. 【請求項３】 非還元性オリゴ糖がβ−Ｄ−マルトシル
   α−Ｄ−グルコシド、α−Ｄ−マルトシル β−Ｄ−
   グルコシド、β−Ｄ−マルトトリオシル α−Ｄ−グル
   コシド、α−Ｄ−マルトトリオシル β−Ｄ−グルコシ
   ドおよびβ−Ｄ−マルトシル α−Ｄ−マルトシドから
   選ばれる１種または２種以上の請求項１または請求項２
   記載の非還元性オリゴ糖。
4. 【請求項４】 ネオトレハロースとα−グルコシル糖化
   合物とを含有する水溶液に糖転移酵素を作用させるか、
   または糖転移酵素を作用させた後、加水分解酵素を作用
   させて、β−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−グルコシ
   ド、α−Ｄ−オリゴグルコシル β−Ｄ−グルコシド、
   β−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−オリゴグルコシド
   で表わされる非還元性オリゴ糖を生成せしめ、これを採
   取することを特徴とする非還元性オリゴ糖の製造方法。
5. 【請求項５】 糖転移酵素がシクロマルトデキストリン
   ・グルカノトランスフェラーゼまたはα−アミラーゼで
   あることを特徴とする請求項４記載の非還元性オリゴ糖
   の製造方法。
6. 【請求項６】 β−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−グ
   ルコシド、α−Ｄ−オリゴグルコシル β−Ｄ−グルコ
   シドまたはβ−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−オリゴ
   グルコシドで表わされる非還元性オリゴ糖と他の糖質と
   を含有する糖混合溶液を強酸性カチオン交換樹脂または
   オクタデシルシリカゲルを用いるカラムクロマトグラフ
   ィーにかけ、該非還元性オリゴ糖高含有画分を採取する
   ことを特徴とする請求項４記載の非還元性オリゴ糖の製
   造方法。
7. 【請求項７】 β−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−グ
   ルコシド、α−Ｄ−オリゴグルコシル β−Ｄ−グルコ
   シドまたはβ−Ｄ−オリゴグルコシル α−Ｄ−オリゴ
   グルコシドで表わされる非還元性オリゴ糖から選ばれる
   １種または２種以上のオリゴ糖を０．５ｗ／ｗ％以上含
   有してなる組成物。
8. 【請求項８】 組成物が飲食物、化粧品および医薬品か
   ら選ばれる態様の組成物であることを特徴とする請求項
   ７記載の組成物。