JPH07143892A - イソマルトシルフラクトシドの製造法 - Google Patents
イソマルトシルフラクトシドの製造法Info
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- JPH07143892A JPH07143892A JP31576093A JP31576093A JPH07143892A JP H07143892 A JPH07143892 A JP H07143892A JP 31576093 A JP31576093 A JP 31576093A JP 31576093 A JP31576093 A JP 31576093A JP H07143892 A JPH07143892 A JP H07143892A
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- glucosyl group
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 シュクロースの齲蝕誘発性を抑制する代表的
甘味料イソマルトシルフラクトシドを、効率よく製造す
ることができる方法を提供する。 【構成】 シュクロースとグルコシル基供与体を含む基
質溶液に、アスペルギルス・アワモリまたはアスペルギ
ルス・フォエニシスの生産する糖転移酵素を作用させる
イソマルトシルフラクトシドの製造法。
甘味料イソマルトシルフラクトシドを、効率よく製造す
ることができる方法を提供する。 【構成】 シュクロースとグルコシル基供与体を含む基
質溶液に、アスペルギルス・アワモリまたはアスペルギ
ルス・フォエニシスの生産する糖転移酵素を作用させる
イソマルトシルフラクトシドの製造法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、齲蝕誘発性を抑制する
甘味料として知られるイソマルトシルフラクトシドの製
造法に関するものである。
甘味料として知られるイソマルトシルフラクトシドの製
造法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】シュクロースは味質の良い甘味を呈し、
また、極めて水に溶け易いことから、代表的な甘味料と
して広く使用されてきた。しかしながら、近年、シュク
ロースは齲蝕誘発性が高く、虫歯の原因となることが明
らかにされてきた。すなわち、シュクロースは口腔内の
微生物によって不溶性のグルカンに変換され、このグル
カンに覆われた歯の表面で嫌気発酵が行われて乳酸等の
有機酸が生成し、この有機酸が歯のエナメル質を溶解す
ることによって虫歯が発生するということが解明され
た。こうしたことから、シュクロースに代わり得る甘味
料やシュクロースの齲蝕性を抑制する甘味料が望まれて
いる。シュクロースの齲蝕誘発性を抑える甘味料の代表
として、イソマルトシルフラクトシドが知られている
が、このイソマルトシルフラクトシドは、不溶性グルカ
ンの生成を抑える作用を有することから、シュクロース
の代替としてだけではなく、シュクロースと併用できる
利点を有している。
また、極めて水に溶け易いことから、代表的な甘味料と
して広く使用されてきた。しかしながら、近年、シュク
ロースは齲蝕誘発性が高く、虫歯の原因となることが明
らかにされてきた。すなわち、シュクロースは口腔内の
微生物によって不溶性のグルカンに変換され、このグル
カンに覆われた歯の表面で嫌気発酵が行われて乳酸等の
有機酸が生成し、この有機酸が歯のエナメル質を溶解す
ることによって虫歯が発生するということが解明され
た。こうしたことから、シュクロースに代わり得る甘味
料やシュクロースの齲蝕性を抑制する甘味料が望まれて
いる。シュクロースの齲蝕誘発性を抑える甘味料の代表
として、イソマルトシルフラクトシドが知られている
が、このイソマルトシルフラクトシドは、不溶性グルカ
ンの生成を抑える作用を有することから、シュクロース
の代替としてだけではなく、シュクロースと併用できる
利点を有している。
【０００３】現在までに、イソマルトシルフラクトシド
の製造方法としては、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）の糖転移酵素を用いる
方法〔Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０６４（１９５
７）〕と、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属のしょ糖転
移酵素を用いる方法（特開平４−３０７９６号公報）、
およびムコール・ジャバニカス（Ｍｕｃｏｒ ｊａｖａ
ｎｉｃｕｓ）の糖転移酵素を用いる方法〔澱粉科学，第
３５巻，第２号，Ｐ９３−１０２（１９８８）、特開平
２−１２８６５２号公報、特開平４−２８７６９２号公
報〕が知られている。
の製造方法としては、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）の糖転移酵素を用いる
方法〔Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０６４（１９５
７）〕と、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属のしょ糖転
移酵素を用いる方法（特開平４−３０７９６号公報）、
およびムコール・ジャバニカス（Ｍｕｃｏｒ ｊａｖａ
ｎｉｃｕｓ）の糖転移酵素を用いる方法〔澱粉科学，第
３５巻，第２号，Ｐ９３−１０２（１９８８）、特開平
２−１２８６５２号公報、特開平４−２８７６９２号公
報〕が知られている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、アスペ
ルギルス属に属する菌株の中では、アスペルギルス・ニ
ガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）の糖転移
酵素を用いるイソマルトシルフラクトシドの製造法しか
これまでに知られていなかった。さらに、この方法で
は、安価なシュクロースに比べてはるかにコストが高
く、したがって、より生産性の高いイソマルトシルフラ
クトシドの製造法の開発が望まれていた。本発明は、こ
うした状況のもとになされたものであって、その目的
は、イソマルトシルフラクトシドの、効率のよい製造法
を提供することにある。
ルギルス属に属する菌株の中では、アスペルギルス・ニ
ガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）の糖転移
酵素を用いるイソマルトシルフラクトシドの製造法しか
これまでに知られていなかった。さらに、この方法で
は、安価なシュクロースに比べてはるかにコストが高
く、したがって、より生産性の高いイソマルトシルフラ
クトシドの製造法の開発が望まれていた。本発明は、こ
うした状況のもとになされたものであって、その目的
は、イソマルトシルフラクトシドの、効率のよい製造法
を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】前記課題を解決するた
め、本発明者らは、アスペルギルス属に属する菌株のな
かで、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ ｎｉｇｅｒ）より効率よくイソマルトシルフラクト
シドを生成するという観点から、アスペルギルス・ニガ
ー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）以外のアス
ペルギルス属菌株の探索を実施し、それらのイソマルト
シルフラクトシド生成能を調査した。その結果、アスペ
ルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａ
ｍｏｒｉ）またはアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）の生産する
糖転移酵素を、シュクロースとグルコシル基供与体を含
む基質溶液に作用させると、アスペルギルス・ニガーよ
りも効率よくイソマルトシルフラクトシドを生成するこ
とを見いだし、本発明を完成するに至った。
め、本発明者らは、アスペルギルス属に属する菌株のな
かで、アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ ｎｉｇｅｒ）より効率よくイソマルトシルフラクト
シドを生成するという観点から、アスペルギルス・ニガ
ー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）以外のアス
ペルギルス属菌株の探索を実施し、それらのイソマルト
シルフラクトシド生成能を調査した。その結果、アスペ
ルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａ
ｍｏｒｉ）またはアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）の生産する
糖転移酵素を、シュクロースとグルコシル基供与体を含
む基質溶液に作用させると、アスペルギルス・ニガーよ
りも効率よくイソマルトシルフラクトシドを生成するこ
とを見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００６】すなわち、本発明は、シュクロースとグル
コシル基供与体を含む基質溶液にアスペルギルス・アワ
モリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）また
はアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）の生産する糖転移酵素を作
用させることを特徴とするイソマルトシルフラクトシド
の製造法に関する。本発明における基質溶液とは、糖転
移酵素によるグルコシル基の転移反応において、グルコ
シル基の受容体となるシュクロースとグルコシル基供与
体とを含有する溶液である。グルコシル基供与体とは、
グルコシル基がグルコシド結合した二糖以上のオリゴ糖
および多糖類であり、例えば、可溶性澱粉、澱粉部分加
水分解物、アミロース、マルトース、マルトトリオー
ス、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルト
ヘキサオース、またはそれらの混合物等が挙げられる。
基質溶液中におけるシュクロースとグルコシル基供与体
の比率は、１０：１から１：１０程度が望ましい。ま
た、基質濃度は５から７０重量％程度が可能で、２０か
ら６０重量％程度が望ましい。なお、基質溶液のｐＨ
は、２から８の範囲が可能で、３から７が望ましい。基
質溶液の温度は、５から７０℃が可能で、１５から５５
℃が望ましい。
コシル基供与体を含む基質溶液にアスペルギルス・アワ
モリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）また
はアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）の生産する糖転移酵素を作
用させることを特徴とするイソマルトシルフラクトシド
の製造法に関する。本発明における基質溶液とは、糖転
移酵素によるグルコシル基の転移反応において、グルコ
シル基の受容体となるシュクロースとグルコシル基供与
体とを含有する溶液である。グルコシル基供与体とは、
グルコシル基がグルコシド結合した二糖以上のオリゴ糖
および多糖類であり、例えば、可溶性澱粉、澱粉部分加
水分解物、アミロース、マルトース、マルトトリオー
ス、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マルト
ヘキサオース、またはそれらの混合物等が挙げられる。
基質溶液中におけるシュクロースとグルコシル基供与体
の比率は、１０：１から１：１０程度が望ましい。ま
た、基質濃度は５から７０重量％程度が可能で、２０か
ら６０重量％程度が望ましい。なお、基質溶液のｐＨ
は、２から８の範囲が可能で、３から７が望ましい。基
質溶液の温度は、５から７０℃が可能で、１５から５５
℃が望ましい。
【０００７】また、本発明において、上記基質溶液に作
用させる糖転移酵素とは、グルコシル基供与体のグルコ
シド結合が切断されて生じるグルコース残基を、シュク
ロースのグルコース残基の６位の炭素に転移させ、α−
グルコシド結合で結合した三糖類、すなわち、イソマル
トシルフラクトシドを生成する作用を有する菌体または
菌体抽出物を意味し、菌体とは、微生物を培養した培地
中に存在する菌体、および培地から常法に従って一旦分
離された菌体の両方を意味する。また、菌体抽出物と
は、菌体破砕物、常法に従って部分精製された上述のグ
ルコシル基転移活性を有する酵素含有物を意味する。さ
らに、必要に応じて公知の方法で精製された上述のグル
コシル基転移活性を有する酵素をも意味するものであ
る。
用させる糖転移酵素とは、グルコシル基供与体のグルコ
シド結合が切断されて生じるグルコース残基を、シュク
ロースのグルコース残基の６位の炭素に転移させ、α−
グルコシド結合で結合した三糖類、すなわち、イソマル
トシルフラクトシドを生成する作用を有する菌体または
菌体抽出物を意味し、菌体とは、微生物を培養した培地
中に存在する菌体、および培地から常法に従って一旦分
離された菌体の両方を意味する。また、菌体抽出物と
は、菌体破砕物、常法に従って部分精製された上述のグ
ルコシル基転移活性を有する酵素含有物を意味する。さ
らに、必要に応じて公知の方法で精製された上述のグル
コシル基転移活性を有する酵素をも意味するものであ
る。
【０００８】本製造法に用いる糖転移酵素は、アスペル
ギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍ
ｏｒｉ）またはアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）を培養するこ
とにより得ることができる。この代表例としては、例え
ば、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ ａｗａｍｏｒｉ）ＩＦＯ４３３、アスペルギルス・
フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉ
ｃｉｓ）ＩＦＯ６６４９、ＩＦＯ６６５０、ＩＦＯ８８
７３またはＡＴＣＣ１５５５を挙げることができる。こ
れらの菌株は、財団法人発酵研究所（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ
ｅ ｏｆ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，Ｏｓａｋａ）お
よび米国アメリカンタイプカルチャーコレクション（Ａ
ｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌ
ｅｃｔｉｏｎ）から誰でも自由に入手することができ
る。
ギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍ
ｏｒｉ）またはアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐ
ｅｒｇｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）を培養するこ
とにより得ることができる。この代表例としては、例え
ば、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ ａｗａｍｏｒｉ）ＩＦＯ４３３、アスペルギルス・
フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉ
ｃｉｓ）ＩＦＯ６６４９、ＩＦＯ６６５０、ＩＦＯ８８
７３またはＡＴＣＣ１５５５を挙げることができる。こ
れらの菌株は、財団法人発酵研究所（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ
ｅ ｏｆ Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，Ｏｓａｋａ）お
よび米国アメリカンタイプカルチャーコレクション（Ａ
ｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌ
ｅｃｔｉｏｎ）から誰でも自由に入手することができ
る。
【０００９】本発明において、使用することのできる培
地としては、前述した微生物が培養により増殖できるも
のであれば、任意の天然培地または合成培地でよい。例
えば、炭素源としては、グルコース、糖蜜、シュクロー
ス、澱粉、澱粉糖化液、セルロース分解物などが用いら
れる。窒素源としては、アンモニア、硫安、硝安、燐安
等のアンモニウム塩や尿素、硝酸塩類等が適宜用いられ
る。無機塩としては、燐酸、カリウム、マグネシウム等
の塩類、例えば、燐酸アンモニウム、燐酸カリウム、燐
酸ソーダ、燐酸マグネシウム等の通常の工業用薬品でよ
く、他に微量元素を加えてもよい。また、微量有機栄養
素として、ビタミン類、アミノ酸、核酸関連物質等は、
菌の生育上は特別に必要なものではないが、これらを添
加したり、コーンスチープリカー、肉エキス、酵母エキ
ス、ペプトン等の有機物を加えてもよい。これらの培地
は、液体培地、固体培地のいずれの形でも使用すること
ができる。代表的な培地組成としては、例えば、可溶性
澱粉４０ｇ、コーンスチープリカー３０ｇ、硝酸ナトリ
ウム０．５ｇ、燐酸二水素カリウム０．１ｇ、硫酸マグ
ネシウム７水和物０．０５ｇ、塩化カリウム０．０５ｇ
からなる天然培地（各成分を蒸留水に溶解して１Ｌとす
る）が挙げられる。
地としては、前述した微生物が培養により増殖できるも
のであれば、任意の天然培地または合成培地でよい。例
えば、炭素源としては、グルコース、糖蜜、シュクロー
ス、澱粉、澱粉糖化液、セルロース分解物などが用いら
れる。窒素源としては、アンモニア、硫安、硝安、燐安
等のアンモニウム塩や尿素、硝酸塩類等が適宜用いられ
る。無機塩としては、燐酸、カリウム、マグネシウム等
の塩類、例えば、燐酸アンモニウム、燐酸カリウム、燐
酸ソーダ、燐酸マグネシウム等の通常の工業用薬品でよ
く、他に微量元素を加えてもよい。また、微量有機栄養
素として、ビタミン類、アミノ酸、核酸関連物質等は、
菌の生育上は特別に必要なものではないが、これらを添
加したり、コーンスチープリカー、肉エキス、酵母エキ
ス、ペプトン等の有機物を加えてもよい。これらの培地
は、液体培地、固体培地のいずれの形でも使用すること
ができる。代表的な培地組成としては、例えば、可溶性
澱粉４０ｇ、コーンスチープリカー３０ｇ、硝酸ナトリ
ウム０．５ｇ、燐酸二水素カリウム０．１ｇ、硫酸マグ
ネシウム７水和物０．０５ｇ、塩化カリウム０．０５ｇ
からなる天然培地（各成分を蒸留水に溶解して１Ｌとす
る）が挙げられる。
【００１０】培養は、振盪、通気撹拌等による好気条件
で行うのが好ましいが、静置状態で行うこともできる。
培養温度は、１５℃から３５℃の範囲が可能で、２５℃
から３０℃付近が望ましい。培養液中のｐＨは、３から
８とすることが可能で、ｐＨ４から６付近が望ましい。
本発明によれば、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅ
ｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）またはアスペルギル
ス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｐｈｏｅｎ
ｉｃｉｓ）の生産する糖転移酵素を、シュクロースとグ
ルコシル基供与体を含む基質溶液に作用させることによ
り、イソマルトシルフラクトシドを効率よく製造するこ
とができる。
で行うのが好ましいが、静置状態で行うこともできる。
培養温度は、１５℃から３５℃の範囲が可能で、２５℃
から３０℃付近が望ましい。培養液中のｐＨは、３から
８とすることが可能で、ｐＨ４から６付近が望ましい。
本発明によれば、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅ
ｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）またはアスペルギル
ス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｐｈｏｅｎ
ｉｃｉｓ）の生産する糖転移酵素を、シュクロースとグ
ルコシル基供与体を含む基質溶液に作用させることによ
り、イソマルトシルフラクトシドを効率よく製造するこ
とができる。
【００１１】
【実施例】以下、本発明を具体的に説明するために実施
例を挙げて説明するが、本発明は、これらの実施例によ
り限定されるものではない。 （実施例１）財団法人発酵研究所より分譲を受けたアス
ペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗ
ａｍｏｒｉ）ＩＦＯ４３３を、１００ｍｌの天然培地
（可溶性澱粉４０ｇ、コーンスチープリカー３０ｇ、硝
酸ナトリウム０．５ｇ、燐酸二水素カリウム０．１ｇ、
硫酸マグネシウム７水和物０．０５ｇ、塩化カリウム
０．０５ｇを蒸留水に溶解して１Ｌとする）を含む５０
０ｍｌフラスコの中で、２５℃で２日間振盪培養した。
同培養液１００ｍｌを、２Ｌの前記天然培地を入れた５
Ｌフラスコに移植して、２５℃で２日間培養した。培養
終了後、ろ過により集菌し、脱イオン水で洗浄後再び集
菌し、湿菌体重量および乾燥菌体重量を測定した。
例を挙げて説明するが、本発明は、これらの実施例によ
り限定されるものではない。 （実施例１）財団法人発酵研究所より分譲を受けたアス
ペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗ
ａｍｏｒｉ）ＩＦＯ４３３を、１００ｍｌの天然培地
（可溶性澱粉４０ｇ、コーンスチープリカー３０ｇ、硝
酸ナトリウム０．５ｇ、燐酸二水素カリウム０．１ｇ、
硫酸マグネシウム７水和物０．０５ｇ、塩化カリウム
０．０５ｇを蒸留水に溶解して１Ｌとする）を含む５０
０ｍｌフラスコの中で、２５℃で２日間振盪培養した。
同培養液１００ｍｌを、２Ｌの前記天然培地を入れた５
Ｌフラスコに移植して、２５℃で２日間培養した。培養
終了後、ろ過により集菌し、脱イオン水で洗浄後再び集
菌し、湿菌体重量および乾燥菌体重量を測定した。
【００１２】シュクロース２０％、テトラップ−Ｈシロ
ップ（林原商事株式会社より購入）６．７％（固形分５
％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに
乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体を加えて、２０℃で５時間
反応させた。得られた反応液を９５℃以上で１０分間加
熱処理した後、遠心分離によって反応液上清を得た。得
られた反応液上清を、下記の分析条件で高速液体クロマ
トグラフィー装置を使って分析した結果、０．６１ｇイ
ソマルトシルフラクトシドの生成が認められた。 （分析条件） カラム：東ソー株式会社製 アミド８０（４．６×２５
０ｍｍ） 溶離液：アセトニトリル：水＝７５：２５ 流速 ：１．０ｍｌ／ｍｉｎ 温度 ：７０℃ 検出器：示差屈折計
ップ（林原商事株式会社より購入）６．７％（固形分５
％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに
乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体を加えて、２０℃で５時間
反応させた。得られた反応液を９５℃以上で１０分間加
熱処理した後、遠心分離によって反応液上清を得た。得
られた反応液上清を、下記の分析条件で高速液体クロマ
トグラフィー装置を使って分析した結果、０．６１ｇイ
ソマルトシルフラクトシドの生成が認められた。 （分析条件） カラム：東ソー株式会社製 アミド８０（４．６×２５
０ｍｍ） 溶離液：アセトニトリル：水＝７５：２５ 流速 ：１．０ｍｌ／ｍｉｎ 温度 ：７０℃ 検出器：示差屈折計
【００１３】（実施例２）財団法人発酵研究所より分譲
を受けたアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）ＩＦＯ６６４９を、
前記実施例１と同様の方法で菌体培養を実施して、湿菌
体重量および乾燥菌体重量を測定した。シュクロース２
０％、テトラップ−Ｈシロップ（林原商事株式会社より
購入）６．７％（固形分５％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩
衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体
を加えて、２０℃で５時間反応させた。得られた反応液
を９５℃以上で１０分間加熱処理した後、遠心分離によ
って反応液上清を得た。得られた反応液上清を、実施例
１と同様の方法で分析した結果、０．８１ｇイソマルト
シルフラクトシドの生成が認められた。
を受けたアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）ＩＦＯ６６４９を、
前記実施例１と同様の方法で菌体培養を実施して、湿菌
体重量および乾燥菌体重量を測定した。シュクロース２
０％、テトラップ−Ｈシロップ（林原商事株式会社より
購入）６．７％（固形分５％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩
衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体
を加えて、２０℃で５時間反応させた。得られた反応液
を９５℃以上で１０分間加熱処理した後、遠心分離によ
って反応液上清を得た。得られた反応液上清を、実施例
１と同様の方法で分析した結果、０．８１ｇイソマルト
シルフラクトシドの生成が認められた。
【００１４】（実施例３）財団法人発酵研究所より分譲
を受けたアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）ＩＦＯ６６５０を、
前記実施例１と同様の方法で菌体培養を実施して、湿菌
体重量および乾燥菌体重量を測定した。シュクロース２
０％、テトラップ−Ｈシロップ（林原商事株式会社より
購入）６．７％（固形分５％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩
衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体
を加えて、２０℃で５時間反応させた。得られた反応液
を９５℃以上で１０分間加熱処理した後、遠心分離によ
って反応液上清を得た。得られた反応液上清を、実施例
１と同様の方法で分析した結果、０．９０ｇイソマルト
シルフラクトシドの生成が認められた。
を受けたアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）ＩＦＯ６６５０を、
前記実施例１と同様の方法で菌体培養を実施して、湿菌
体重量および乾燥菌体重量を測定した。シュクロース２
０％、テトラップ−Ｈシロップ（林原商事株式会社より
購入）６．７％（固形分５％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩
衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体
を加えて、２０℃で５時間反応させた。得られた反応液
を９５℃以上で１０分間加熱処理した後、遠心分離によ
って反応液上清を得た。得られた反応液上清を、実施例
１と同様の方法で分析した結果、０．９０ｇイソマルト
シルフラクトシドの生成が認められた。
【００１５】（実施例４）財団法人発酵研究所より分譲
を受けたアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）ＩＦＯ８８７３を、
前記実施例１と同様の方法で菌体培養を実施して、湿菌
体重量および乾燥菌体重量を測定した。シュクロース２
０％、テトラップ−Ｈシロップ（林原商事株式会社より
購入）６．７％（固形分５％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩
衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体
を加えて、２０℃で５時間反応させた。得られた反応液
を９５℃以上で１０分間加熱処理した後、遠心分離によ
って反応液上清を得た。得られた反応液上清を、実施例
１と同様の方法で分析した結果、０．４５ｇイソマルト
シルフラクトシドの生成が認められた。
を受けたアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇ
ｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）ＩＦＯ８８７３を、
前記実施例１と同様の方法で菌体培養を実施して、湿菌
体重量および乾燥菌体重量を測定した。シュクロース２
０％、テトラップ−Ｈシロップ（林原商事株式会社より
購入）６．７％（固形分５％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩
衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体
を加えて、２０℃で５時間反応させた。得られた反応液
を９５℃以上で１０分間加熱処理した後、遠心分離によ
って反応液上清を得た。得られた反応液上清を、実施例
１と同様の方法で分析した結果、０．４５ｇイソマルト
シルフラクトシドの生成が認められた。
【００１６】（実施例５）米国アメリカンタイプカルチ
ャーコレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ ＴｙｐｅＣｕｌ
ｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）より分譲を受けたア
スペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）ＡＴＣＣ１５５５を、前記実施
例１と同様の方法で菌体培養を実施して、湿菌体重量お
よび乾燥菌体重量を測定した。シュクロース２０％、テ
トラップ−Ｈシロップ（林原商事株式会社より購入）
６．７％（固形分５％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩衝液
（ｐＨ７）５０ｍｌに乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体を加
えて、２０℃で５時間反応させた。得られた反応液を９
５℃以上で１０分間加熱処理した後、遠心分離によって
反応液上清を得た。得られた反応液上清を、実施例１と
同様の方法で分析した結果、０．７２ｇイソマルトシル
フラクトシドの生成が認められた。
ャーコレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ ＴｙｐｅＣｕｌ
ｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）より分譲を受けたア
スペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）ＡＴＣＣ１５５５を、前記実施
例１と同様の方法で菌体培養を実施して、湿菌体重量お
よび乾燥菌体重量を測定した。シュクロース２０％、テ
トラップ−Ｈシロップ（林原商事株式会社より購入）
６．７％（固形分５％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩衝液
（ｐＨ７）５０ｍｌに乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体を加
えて、２０℃で５時間反応させた。得られた反応液を９
５℃以上で１０分間加熱処理した後、遠心分離によって
反応液上清を得た。得られた反応液上清を、実施例１と
同様の方法で分析した結果、０．７２ｇイソマルトシル
フラクトシドの生成が認められた。
【００１７】（比較例）米国アメリカンタイプカルチャ
ーコレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ ＴｙｐｅＣｕｌｔ
ｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）より分譲を受けたアス
ペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇ
ｅｒ）ＡＴＣＣ９６４２を、前記実施例１と同様の方法
で菌体培養を実施して、湿菌体重量および乾燥菌体重量
を測定した。シュクロース２０％、テトラップ−Ｈシロ
ップ（林原商事株式会社より購入）６．７％（固形分５
％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに
乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体を加えて、２０℃で５時間
反応させた。得られた反応液を９５℃以上で１０分間加
熱処理した後、遠心分離によって反応液上清を得た。得
られた反応液上清を、実施例１と同様の方法で分析した
結果、生成したイソマルトシルフラクトシドの重量は
０．１１ｇであった。この結果から明らかなように、ア
スペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉ
ｇｅｒ）の糖転移酵素を用いるイソマルトシルフラクト
シドの製造法に対し、本発明の製造法は、非常に優れた
生産性を示す。
ーコレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ ＴｙｐｅＣｕｌｔ
ｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）より分譲を受けたアス
ペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇ
ｅｒ）ＡＴＣＣ９６４２を、前記実施例１と同様の方法
で菌体培養を実施して、湿菌体重量および乾燥菌体重量
を測定した。シュクロース２０％、テトラップ−Ｈシロ
ップ（林原商事株式会社より購入）６．７％（固形分５
％）を含む０．０５Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ７）５０ｍｌに
乾燥菌体重量１ｇ分の湿菌体を加えて、２０℃で５時間
反応させた。得られた反応液を９５℃以上で１０分間加
熱処理した後、遠心分離によって反応液上清を得た。得
られた反応液上清を、実施例１と同様の方法で分析した
結果、生成したイソマルトシルフラクトシドの重量は
０．１１ｇであった。この結果から明らかなように、ア
スペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉ
ｇｅｒ）の糖転移酵素を用いるイソマルトシルフラクト
シドの製造法に対し、本発明の製造法は、非常に優れた
生産性を示す。
【００１８】
【発明の効果】本発明によれば、アスペルギルス・アワ
モリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）また
はアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）の生産する糖転移酵素を、シ
ュクロースとグルコシル基供与体を含む基質溶液に作用
させることにより、シュクロースの齲蝕誘発性を抑制す
る代表的甘味料イソマルトシルフラクトシドを効率よ
く、製造することができる。
モリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）また
はアスペルギルス・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）の生産する糖転移酵素を、シ
ュクロースとグルコシル基供与体を含む基質溶液に作用
させることにより、シュクロースの齲蝕誘発性を抑制す
る代表的甘味料イソマルトシルフラクトシドを効率よ
く、製造することができる。
Claims (1)
- 【請求項１】 シュクロースとグルコシル基供与体を含
む基質溶液に、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒ
ｇｉｌｌｕｓ ａｗａｍｏｒｉ）またはアスペルギルス
・フォエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｐｈｏｅｎ
ｉｃｉｓ）の生産する糖転移酵素を作用させることを特
徴とするイソマルトシルフラクトシドの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP31576093A JP3494686B2 (ja) | 1993-11-24 | 1993-11-24 | イソマルトシルフラクトシドの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP31576093A JP3494686B2 (ja) | 1993-11-24 | 1993-11-24 | イソマルトシルフラクトシドの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07143892A true JPH07143892A (ja) | 1995-06-06 |
| JP3494686B2 JP3494686B2 (ja) | 2004-02-09 |
Family
ID=18069219
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP31576093A Expired - Fee Related JP3494686B2 (ja) | 1993-11-24 | 1993-11-24 | イソマルトシルフラクトシドの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3494686B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1047796C (zh) * | 1996-05-10 | 1999-12-29 | 中国食品发酵工业研究所 | 一种将蔗糖转化为寡果糖的方法 |
-
1993
- 1993-11-24 JP JP31576093A patent/JP3494686B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1047796C (zh) * | 1996-05-10 | 1999-12-29 | 中国食品发酵工业研究所 | 一种将蔗糖转化为寡果糖的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3494686B2 (ja) | 2004-02-09 |
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