JPH0713079B2 - ミラクリンの製造方法 - Google Patents
ミラクリンの製造方法Info
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- JPH0713079B2 JPH0713079B2 JP61084304A JP8430486A JPH0713079B2 JP H0713079 B2 JPH0713079 B2 JP H0713079B2 JP 61084304 A JP61084304 A JP 61084304A JP 8430486 A JP8430486 A JP 8430486A JP H0713079 B2 JPH0713079 B2 JP H0713079B2
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- miraculin
- extraction
- miracle fruit
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Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、味覚変革蛋白質であるミラクリンを効率的に
かつ安定に製造する方法に関する。
かつ安定に製造する方法に関する。
従来の技術 アメリカ原産植物であるシンセパラム・ダルシヒカム
（Synsepalum dulcificum）、通称ミラクルフルーツ（M
iracle fruit）の果実中に含まれる酸味を甘味に変える
物質は、通称ミラクリンと呼ばれる味覚変革蛋白質であ
ることが知られている。
（Synsepalum dulcificum）、通称ミラクルフルーツ（M
iracle fruit）の果実中に含まれる酸味を甘味に変える
物質は、通称ミラクリンと呼ばれる味覚変革蛋白質であ
ることが知られている。
従来、このミラクルフルーツからミラクリンを抽出する
方法としては、pH10.5の0.1M炭酸バッファーを用いて抽
出する方法（K.Kurihara,L.M.Beidler;Science,161,124
1（1968））及びpH≧７の唾液を用いて抽出する方法
（J.N.Brouwer,H.Van der Wel,A.Franke,G.J.Henning;N
ature,220,373（1968））が提案されている。
方法としては、pH10.5の0.1M炭酸バッファーを用いて抽
出する方法（K.Kurihara,L.M.Beidler;Science,161,124
1（1968））及びpH≧７の唾液を用いて抽出する方法
（J.N.Brouwer,H.Van der Wel,A.Franke,G.J.Henning;N
ature,220,373（1968））が提案されている。
発明が解決しようとする問題点 しかしながら、前者の炭酸バッファー法は、抽出液の
pHが高いため、抽出されたミラクリンが変性或いは失活
し易い、同時に抽出される不純物の除去が難しい、
抽出後における中和、脱塩等の処理が難しい、といった
欠点を有し、従ってこの方法によってはミラクリンを効
率的にかつ安定に得ることが困難である。
pHが高いため、抽出されたミラクリンが変性或いは失活
し易い、同時に抽出される不純物の除去が難しい、
抽出後における中和、脱塩等の処理が難しい、といった
欠点を有し、従ってこの方法によってはミラクリンを効
率的にかつ安定に得ることが困難である。
また、後者の唾液を用いる方法は実験室的には可能であ
るが、実用的ではない。
るが、実用的ではない。
このため、従来よりミラクリンを工業的に生産性良く製
造する方法が要望されているが、未だ満足すべき方法は
提案されていない。
造する方法が要望されているが、未だ満足すべき方法は
提案されていない。
本発明は、上記事情に鑑みなされたもので、ミラクルフ
ルーツから高活性なミラクリンを効率的にかつ安定に製
造し得、工業的に有利なミラクリンの製造方法を提供す
ることを目的とする。
ルーツから高活性なミラクリンを効率的にかつ安定に製
造し得、工業的に有利なミラクリンの製造方法を提供す
ることを目的とする。
問題点を解決するための手段及び作用 本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討を行っ
た結果、ミラクルフルーツのミラクリン含有部を抽出溶
媒で抽出し、この抽出液からミラクリンを得る方法にお
いて、抽出溶媒としてpHが10以下、より好ましくは６〜
９で、濃度が0.1mM〜飽和、より好ましくは5mM〜1Mの塩
水溶液、例えばNaCl,NH4HCO3等の水溶液を使用すると、
変性や失活が少なく、高活性で安定なミラクリンが得ら
れると共に、不純物の抽出が減少し、このためミラクリ
ンを非常に高い収率で抽出し得ることを知見し、本発明
をなすに至ったものである。
た結果、ミラクルフルーツのミラクリン含有部を抽出溶
媒で抽出し、この抽出液からミラクリンを得る方法にお
いて、抽出溶媒としてpHが10以下、より好ましくは６〜
９で、濃度が0.1mM〜飽和、より好ましくは5mM〜1Mの塩
水溶液、例えばNaCl,NH4HCO3等の水溶液を使用すると、
変性や失活が少なく、高活性で安定なミラクリンが得ら
れると共に、不純物の抽出が減少し、このためミラクリ
ンを非常に高い収率で抽出し得ることを知見し、本発明
をなすに至ったものである。
以下、本発明につき更に詳しく説明する。
本発明のミラクリンの製造方法は、ミラクルフルーツの
ミラクリン含有部をpHが10以下で濃度が0.1mM〜飽和の
塩水溶液で抽出し、その抽出液を採取するものである。
ミラクリン含有部をpHが10以下で濃度が0.1mM〜飽和の
塩水溶液で抽出し、その抽出液を採取するものである。
この場合、ミラクルフルーツのミラクリン含有部として
はミラクルフルーツの果実が好適に使用し得、また組織
培養体も使用することができる。
はミラクルフルーツの果実が好適に使用し得、また組織
培養体も使用することができる。
また、抽出溶媒として用いる塩水溶液の種類に特に制限
はなく、例えばNaCl,KCl,（NH4）2SO4,（NH4）2CO3,NH4
HCO3,MgCl2,MgCO3,KH2PO4,NaH2PO4等から選ばれる１種
又は２種以上の塩の水溶液等を好適に使用し得るが、特
に安全性、食味の点などからNaClの水溶液を用いること
が望ましい。
はなく、例えばNaCl,KCl,（NH4）2SO4,（NH4）2CO3,NH4
HCO3,MgCl2,MgCO3,KH2PO4,NaH2PO4等から選ばれる１種
又は２種以上の塩の水溶液等を好適に使用し得るが、特
に安全性、食味の点などからNaClの水溶液を用いること
が望ましい。
なお、塩水溶液の塩濃度は0.1mM〜飽和であることが必
要であるが、好ましくは0.1mM〜6M、より好ましくは5mM
〜1Mである。
要であるが、好ましくは0.1mM〜6M、より好ましくは5mM
〜1Mである。
また、塩水溶液のpHは10以下であることが必要である
が、好ましくは６〜９であり、pHを６〜９とすることに
よりミラクリンの変性、失活をより確実に防止すること
ができる。ここで、塩水溶液のpHを調整する場合、pH調
整剤としては、HCl,CH3COOH等の酸類、NaOH,KOH等の塩
基類、CH3COONa,K2HPO4等の塩類などを適宜用いること
ができる。
が、好ましくは６〜９であり、pHを６〜９とすることに
よりミラクリンの変性、失活をより確実に防止すること
ができる。ここで、塩水溶液のpHを調整する場合、pH調
整剤としては、HCl,CH3COOH等の酸類、NaOH,KOH等の塩
基類、CH3COONa,K2HPO4等の塩類などを適宜用いること
ができる。
本発明において、抽出方法、抽出条件に特に制限はない
が、例えば、ミラクルフルーツのミラクリン含有部を抽
出溶媒に混合し、ミキサー等を用いてホモジナイズした
後、固液分離する方法を好適に採用し得る。
が、例えば、ミラクルフルーツのミラクリン含有部を抽
出溶媒に混合し、ミキサー等を用いてホモジナイズした
後、固液分離する方法を好適に採用し得る。
また、ミラクルフルーツのミラクリン含有部を塩と撹
拌、混合、ホモジナイズし、しかる後に相当量の水又は
適宜濃度の塩水溶液を加え、抽出、固液分離するという
ような方法も良い。
拌、混合、ホモジナイズし、しかる後に相当量の水又は
適宜濃度の塩水溶液を加え、抽出、固液分離するという
ような方法も良い。
なお、このようにミラクルフルーツのミラクリン含有部
を塩と撹拌、混合することにより、ミラクリン含有部が
安定化され、良好に粉砕されて、抽出が良好に行なわれ
る。
を塩と撹拌、混合することにより、ミラクリン含有部が
安定化され、良好に粉砕されて、抽出が良好に行なわれ
る。
この場合、抽出は室温以下、特に10℃以下で行なうこと
が好ましい。また、抽出に要する時間は抽出溶媒のpH、
塩濃度やミキサーの種類に左右され一定しないが、通常
１分間以上である。
が好ましい。また、抽出に要する時間は抽出溶媒のpH、
塩濃度やミキサーの種類に左右され一定しないが、通常
１分間以上である。
上記のようにして抽出処理した後は、遠心分離等の適宜
な方法で固形分を分離し、抽出液を採取する。この抽出
液はそのまま種々の用途に使用してもよいが、一般的な
タンパク質精製法、例えば（NH4）2SO4を使用して有効
成分ミラクリンを固形物として得ることもできる。ま
た、抽出法を一般的な脱塩法、例えばイオン交換、透
析、限外過などの方法を用いて脱塩した抽出液は食味
も良く、食品などに使用するのに好適である。このよう
にして脱塩された抽出液を種々の乾燥法、例えばスプレ
ー乾燥、凍結乾燥などにより乾燥することでも、ミラク
リンの固形物を得ることができ、種々の用途に使用する
ことができる。
な方法で固形分を分離し、抽出液を採取する。この抽出
液はそのまま種々の用途に使用してもよいが、一般的な
タンパク質精製法、例えば（NH4）2SO4を使用して有効
成分ミラクリンを固形物として得ることもできる。ま
た、抽出法を一般的な脱塩法、例えばイオン交換、透
析、限外過などの方法を用いて脱塩した抽出液は食味
も良く、食品などに使用するのに好適である。このよう
にして脱塩された抽出液を種々の乾燥法、例えばスプレ
ー乾燥、凍結乾燥などにより乾燥することでも、ミラク
リンの固形物を得ることができ、種々の用途に使用する
ことができる。
本発明方法により得られたミラクリンは、歯磨等にジュ
ース効果防止のために配合されるほか、甘味剤として食
品、薬品等に配合されるなど、種々の用途に有効に使用
されるものである。
ース効果防止のために配合されるほか、甘味剤として食
品、薬品等に配合されるなど、種々の用途に有効に使用
されるものである。
発明の効果 本発明に係るミラクリンの製造方法は、ミラクルフルー
ツから安定かつ高活性のミラクリンを効率良く得ること
ができ、ミラクリンを変性或いは失活させ難く、しかも
不純物の抽出を減少させるものであり、工業的なミラク
リンの製造方法として好適なものである。
ツから安定かつ高活性のミラクリンを効率良く得ること
ができ、ミラクリンを変性或いは失活させ難く、しかも
不純物の抽出を減少させるものであり、工業的なミラク
リンの製造方法として好適なものである。
次に実施例を示し、本発明を具体的に説明する。
〔実施例１〕 第２表に示す濃度でpHがNaCl水溶液を抽出溶媒として用
い、下記方法によりミラクルフルーツの果実からミラク
リンの抽出を行なうと共に、ミラクリン活性及び不純物
による着色度を調べた。また、比較のため、抽出溶媒と
してpH10.5の0.1M炭酸バッファーを用い、同様の実験を
行なった。結果を第２表に示す。
い、下記方法によりミラクルフルーツの果実からミラク
リンの抽出を行なうと共に、ミラクリン活性及び不純物
による着色度を調べた。また、比較のため、抽出溶媒と
してpH10.5の0.1M炭酸バッファーを用い、同様の実験を
行なった。結果を第２表に示す。
ミラクリン抽出法 ミラクルフルーツの果実約1gを抽出溶媒30mlに混ぜ、氷
冷下で２分間ホモジナイズした後、塩酸又は水酸化ナト
リウムを用いて中和し、次いで10000rpmで遠心分離を行
なって固形分を分離し、脱塩により精製した抽出液を得
た。
冷下で２分間ホモジナイズした後、塩酸又は水酸化ナト
リウムを用いて中和し、次いで10000rpmで遠心分離を行
なって固形分を分離し、脱塩により精製した抽出液を得
た。
ミラクリン活性評価法 上記方法で得られた抽出液1mlを口中に２分間含み、は
き出した後、0.02Mクエン酸溶媒を口中に入れ、この時
の甘味度をτ標準測定尺度法（日科技連「官能検査ハン
ドブック」）で調べることによりミラクリン活性を評価
した。なお、甘味度の評価基準は第１表の通りである
が、甘味度が高いほどミラクリン活性が高いものであ
る。
き出した後、0.02Mクエン酸溶媒を口中に入れ、この時
の甘味度をτ標準測定尺度法（日科技連「官能検査ハン
ドブック」）で調べることによりミラクリン活性を評価
した。なお、甘味度の評価基準は第１表の通りである
が、甘味度が高いほどミラクリン活性が高いものであ
る。
甘味度評価基準 着色度評価法 抽出液の着色度を下記基準により肉眼で評価した。
着色度評価基準 着色度 −：着色は認められない ±：わずかに着色が認められる ＋：着色が認められる ＋＋：著しく着色している 〔実施例２〕 第３表に示すpH値を有し、濃度が0.5MのNaCl水溶液、及
び比較のためpH10.5の0.1M炭酸バッファーを抽出溶媒と
して用い、上記と同様の方法でミラクルフルーツの果実
からミラクリンの抽出、活性評価、着色度評価を行なっ
た。結果を第３表に示す。
び比較のためpH10.5の0.1M炭酸バッファーを抽出溶媒と
して用い、上記と同様の方法でミラクルフルーツの果実
からミラクリンの抽出、活性評価、着色度評価を行なっ
た。結果を第３表に示す。
〔実施例３〕 第４表に示す塩の水溶液（濃度0.5M,pH8）及び比較のた
めpH10.5の0.1M炭酸バッファーを抽出溶媒として用い、
上記と同様の方法でミラクルフルーツの果実からミラク
リンの抽出、活性評価、着色度評価を行なった。結果を
第４表に示す。
めpH10.5の0.1M炭酸バッファーを抽出溶媒として用い、
上記と同様の方法でミラクルフルーツの果実からミラク
リンの抽出、活性評価、着色度評価を行なった。結果を
第４表に示す。
第２〜４表の結果より、濃度が0.1mM〜飽和で、pHが10
以下の塩水溶液を抽出溶媒として用いることにより、ミ
ラクルフルーツからミラクリンが変性、失活や不純物に
よる着色を生じさることなく良好に抽出されることが認
められた。
以下の塩水溶液を抽出溶媒として用いることにより、ミ
ラクルフルーツからミラクリンが変性、失活や不純物に
よる着色を生じさることなく良好に抽出されることが認
められた。
Claims (4)
- 【請求項１】ミラクルフルーツのミラクリン含有部をpH
が10以下，濃度が0.1mMから飽和の範囲の塩水溶液を抽
出溶媒として抽出するようにしたことを特徴とするミラ
クリンの製造方法。 - 【請求項２】、ミラクルフルーツのミラクリン含有部が
ミラクルフルーツの果実である特許請求の範囲第１項記
載の製造方法。 - 【請求項３】抽出溶媒として用いる塩水溶液のpHが６〜
9,濃度が5mM〜1Mである特許請求の範囲第１項又は第２
項記載の製造方法。 - 【請求項４】ミラクルフルーツのミラクリン含有部を塩
と撹拌、混合した後、水又は塩水溶液に投入して抽出す
るようにした特許請求の範囲第１項，第２項又は第３項
記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61084304A JPH0713079B2 (ja) | 1986-04-14 | 1986-04-14 | ミラクリンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61084304A JPH0713079B2 (ja) | 1986-04-14 | 1986-04-14 | ミラクリンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62242700A JPS62242700A (ja) | 1987-10-23 |
| JPH0713079B2 true JPH0713079B2 (ja) | 1995-02-15 |
Family
ID=13826744
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61084304A Expired - Fee Related JPH0713079B2 (ja) | 1986-04-14 | 1986-04-14 | ミラクリンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0713079B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02227044A (ja) * | 1988-11-07 | 1990-09-10 | Mitajiri Kagaku Kogyo Kk | 高純度ミラクリンを内包する矯味・調味料及びこれを含有する飲食品 |
| JPH0654659A (ja) * | 1991-12-04 | 1994-03-01 | Mitsubishi Oil Co Ltd | 甘味誘導物質ミラクリンの製造方法 |
| JPH06172388A (ja) * | 1992-12-03 | 1994-06-21 | Mitsubishi Oil Co Ltd | 甘味誘導物質ミラクリンの製造方法 |
| CN109430511A (zh) * | 2018-09-06 | 2019-03-08 | 南充好土优土农业开发有限公司 | 一种神秘果的甜味蛋白萃取方法及甜味蛋白饮品 |
-
1986
- 1986-04-14 JP JP61084304A patent/JPH0713079B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS62242700A (ja) | 1987-10-23 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |