JPH07112982B2 - 犬パルボウイルスワクチン - Google Patents
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- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明は新規な犬パルボウイルスワクチン、その製造方
法、新規な犬パルボウイルス株、および犬パルボウイル
ス伝染に対する犬の防御法に関するものである。
法、新規な犬パルボウイルス株、および犬パルボウイル
ス伝染に対する犬の防御法に関するものである。
犬パルボウイルス（canine parvovirus;CPV）による
犬、特に子犬の伝染は、しばしば急性下痢、発熱および
白血球減少症（相対的なリンパ球減少症）を特徴とする
腸疾患をもたらす。
犬、特に子犬の伝染は、しばしば急性下痢、発熱および
白血球減少症（相対的なリンパ球減少症）を特徴とする
腸疾患をもたらす。
CPVによる犬の伝染を防止するためワクチンが開発され
てきている。しかしながら、これらのワクチンはしばし
ば、母体に由来する抗体（maternally derived antibod
y:MDA）の存在下で投与すると有効でない。或る種の子
犬の場合、この受動免疫は予防接種を阻げるのに充分な
量で相当期間（４ケ月以上）にわたつて持続する。その
後、MDAレベルが減少するにつれて、子犬は伝染および
病気に対する防御が不充分になり、しかも予防接種に対
しては依然抵抗性がある。したがつて、これらの子犬は
その若い世代に相当期間にわたつて防御されない状態と
なる。特に、母体に由来する免疫が消失した後、同腹子
（litters）の伝染の危険により重大な結果がもたらさ
れる。
てきている。しかしながら、これらのワクチンはしばし
ば、母体に由来する抗体（maternally derived antibod
y:MDA）の存在下で投与すると有効でない。或る種の子
犬の場合、この受動免疫は予防接種を阻げるのに充分な
量で相当期間（４ケ月以上）にわたつて持続する。その
後、MDAレベルが減少するにつれて、子犬は伝染および
病気に対する防御が不充分になり、しかも予防接種に対
しては依然抵抗性がある。したがつて、これらの子犬は
その若い世代に相当期間にわたつて防御されない状態と
なる。特に、母体に由来する免疫が消失した後、同腹子
（litters）の伝染の危険により重大な結果がもたらさ
れる。
この理由で、若い世代の早期に子犬を免疫し得るCPVワ
クチンが要望されている。
クチンが要望されている。
本発明の目的は、この種のワクチンを提供するにある。
本発明によるワクチンは、国内名称154のCPV株に由来す
るウイルスからなることを特徴とする。このウイルス株
の試料は、フランス国、パリー在、パスツール研究所の
コレクシヨン・ナシヨナレ・デ・カルチユーレ・デ・ミ
クロオルガニスム（Collection Nationale de Cultures
de Microorganismes）にNo.I−404として寄託されてい
る。
るウイルスからなることを特徴とする。このウイルス株
の試料は、フランス国、パリー在、パスツール研究所の
コレクシヨン・ナシヨナレ・デ・カルチユーレ・デ・ミ
クロオルガニスム（Collection Nationale de Cultures
de Microorganismes）にNo.I−404として寄託されてい
る。
好ましくは、本発明によるワクチンは弱毒生型のCPV株
を含有している。
を含有している。
弱毒化は、犬または猫に由来する細胞の培養物でウイル
スを約37℃の温度で何回か継代培養することにより達成
される。各工程につき、事前の培養工程から回収したウ
イルスを新しい細胞培養物を含有する培地へ接種する。
細胞を培養するには、当業界で知られた方法を使用す
る。
スを約37℃の温度で何回か継代培養することにより達成
される。各工程につき、事前の培養工程から回収したウ
イルスを新しい細胞培養物を含有する培地へ接種する。
細胞を培養するには、当業界で知られた方法を使用す
る。
ワクチンを製造するには、このように弱毒化された種ウ
イルス（Seed virus）を、たとえば猫胚繊維芽（feline
embryo fibroblast:FEF）培養物のような細胞培養物に
て増殖させることができる。好ましくは、これは犬の正
常温度で行なわれる。このように増殖させたウイルス
は、組織細胞培養液および／または細胞を集めて回収す
ることができる。必要に応じ、回収に際し増殖基質から
の感染粒子の放出を促進させる技術（たとえば音波処
理）によつてウイルスの収率を高めることができる。ワ
クチンは懸濁物として作成することができ、或いは凍結
乾燥することもできる。凍結乾燥したCPVワクチンの場
合、１種もしくはそれ以上の安定化剤を添加するのが好
ましい。適する安定化剤はたとえばSPGA〔ボバルニツク
（Bovarnick）によりジヤーナル・バクテリオロジー、
第59巻、第509頁（1950）に記載されている〕、炭水化
物（たとえばソルビトール、マニトール、澱粉、蔗糖、
デキストラン、グルコースなど）、蛋白質（たとえばア
ルブミンまたはカゼイン）或いはその分解生成物、蛋白
質含有剤（たとえば牛血清またはスキムミルク）、およ
び緩衝剤（たとえばアルカリ金属燐酸塩）である。必要
に応じ、アジユバント活性を有する１種もしくはそれ以
上の化合物も添加することができる。適するアジユバン
トはたとえばアルミニウムの水酸化物、燐酸塩または酸
化物、鉱油〔たとえばバイオールＦ（Bayol F;登録商
標）、マルコール52（Marcol52;登録商標）〕およびサ
ポニンである。
イルス（Seed virus）を、たとえば猫胚繊維芽（feline
embryo fibroblast:FEF）培養物のような細胞培養物に
て増殖させることができる。好ましくは、これは犬の正
常温度で行なわれる。このように増殖させたウイルス
は、組織細胞培養液および／または細胞を集めて回収す
ることができる。必要に応じ、回収に際し増殖基質から
の感染粒子の放出を促進させる技術（たとえば音波処
理）によつてウイルスの収率を高めることができる。ワ
クチンは懸濁物として作成することができ、或いは凍結
乾燥することもできる。凍結乾燥したCPVワクチンの場
合、１種もしくはそれ以上の安定化剤を添加するのが好
ましい。適する安定化剤はたとえばSPGA〔ボバルニツク
（Bovarnick）によりジヤーナル・バクテリオロジー、
第59巻、第509頁（1950）に記載されている〕、炭水化
物（たとえばソルビトール、マニトール、澱粉、蔗糖、
デキストラン、グルコースなど）、蛋白質（たとえばア
ルブミンまたはカゼイン）或いはその分解生成物、蛋白
質含有剤（たとえば牛血清またはスキムミルク）、およ
び緩衝剤（たとえばアルカリ金属燐酸塩）である。必要
に応じ、アジユバント活性を有する１種もしくはそれ以
上の化合物も添加することができる。適するアジユバン
トはたとえばアルミニウムの水酸化物、燐酸塩または酸
化物、鉱油〔たとえばバイオールＦ（Bayol F;登録商
標）、マルコール52（Marcol52;登録商標）〕およびサ
ポニンである。
或いは又、本発明によるワクチンは不活性型としてCPV
株を含有することもできる。
株を含有することもできる。
本発明による不活性型CPVワクチンは、複製と毒性との
両者が消失したウイルスから作成される。一般に、これ
は化学的手段または物理的手段により達成することがで
きる。化学的不活性化は、ウイルスをたとえば酵素、ホ
ルムアルデヒド、β−プロピオラクトンもしくはエチレ
ンイミンまたはその誘導体、有機溶剤（たとえばハロゲ
ン化炭化水素）および／または洗剤〔たとえばトウイー
ン（Tween;登録商標）、トライトンＸ（TritonX:登録商
標）〕、デオキシコール酸ナトリウム、スルホベタイン
またはセチルトリメチルアンモニウム塩）で処理して行
なうことができる。有利には、ウイルスを高エネルギ放
射線、たとえばUV光、γ線またはＸ線にかけて物理的不
活性化を行なうことができる。必要に応じ、不活性化剤
を中和する。たとえば、ホルムアルデヒドで不活性化し
た製剤はチオ硫酸塩で中和することができる。必要に応
じ、その後にpHを約７の値まで復帰させる。一般に、ア
ジユバントをも不活性化ウイルスに添加し、さらに必要
に応じて１種もしくはそれ以上の乳化剤、たとえばトウ
イーン（登録商標）およびスパン（Span;登録商標）を
も添加する。
両者が消失したウイルスから作成される。一般に、これ
は化学的手段または物理的手段により達成することがで
きる。化学的不活性化は、ウイルスをたとえば酵素、ホ
ルムアルデヒド、β−プロピオラクトンもしくはエチレ
ンイミンまたはその誘導体、有機溶剤（たとえばハロゲ
ン化炭化水素）および／または洗剤〔たとえばトウイー
ン（Tween;登録商標）、トライトンＸ（TritonX:登録商
標）〕、デオキシコール酸ナトリウム、スルホベタイン
またはセチルトリメチルアンモニウム塩）で処理して行
なうことができる。有利には、ウイルスを高エネルギ放
射線、たとえばUV光、γ線またはＸ線にかけて物理的不
活性化を行なうことができる。必要に応じ、不活性化剤
を中和する。たとえば、ホルムアルデヒドで不活性化し
た製剤はチオ硫酸塩で中和することができる。必要に応
じ、その後にpHを約７の値まで復帰させる。一般に、ア
ジユバントをも不活性化ウイルスに添加し、さらに必要
に応じて１種もしくはそれ以上の乳化剤、たとえばトウ
イーン（登録商標）およびスパン（Span;登録商標）を
も添加する。
ウイルス株154は次の特性により犬パルボウイルスとし
て同定された： （ｉ） 猫および犬の細胞において増殖しうる能力。
て同定された： （ｉ） 猫および犬の細胞において増殖しうる能力。
（ii） 分裂しなかつた猫および犬の両細胞において増
殖しない性質。
殖しない性質。
（iii） pH7.2で豚赤血球を凝集するが、ヒトまたはゲ
ツシ動物の赤血球を凝集しないような赤血球凝集素（ha
emagglutinins）の細胞培養物中に於ける生成。
ツシ動物の赤血球を凝集しないような赤血球凝集素（ha
emagglutinins）の細胞培養物中に於ける生成。
（iv） 細胞培養物内の典型的な核封入物（nuclear in
clusions）の生成。
clusions）の生成。
（ｖ） 猫の汎白血球減少症ウイルスおよび公知の犬パ
ルボウイルスに対し調製された猫および兎の抗血清によ
る中和。
ルボウイルスに対し調製された猫および兎の抗血清によ
る中和。
（vi） 猫の汎白血球減少症ウイルスおよび公知の犬パ
ルボウイルスに対し調製された抗血清による赤血球凝集
反応の阻止。
ルボウイルスに対し調製された抗血清による赤血球凝集
反応の阻止。
さらに、新規なCPV株は、次の一連の性質により従来公
知のCPV株から区別される： a.猫および犬の両者に由来する繊維芽型の細胞において
37℃の温度にて良好に増殖して、特徴的な細胞変性効果
（cytopathic effect）を示す能力。公知のCPV株と比較
して、本発明によるウイルス株は下記第Ｉ表に要約する
ような増殖特性を示す： （ｂ） 上記細胞系における寒天下の大きい明確なプラ
ークの生成。
知のCPV株から区別される： a.猫および犬の両者に由来する繊維芽型の細胞において
37℃の温度にて良好に増殖して、特徴的な細胞変性効果
（cytopathic effect）を示す能力。公知のCPV株と比較
して、本発明によるウイルス株は下記第Ｉ表に要約する
ような増殖特性を示す： （ｂ） 上記細胞系における寒天下の大きい明確なプラ
ークの生成。
これらのデータから、CPV株154は新規なウイルス株であ
ると結論することができる。
ると結論することができる。
ウイルス株154は、CPV伝染の徴候を示す子犬の糞から得
られた。しかしながら、これはこのウイルスに伝染した
子犬または犬からの腸管試料、胸腺もしくはその他のリ
ンパ腺組織、骨髄、血液または肝臓から分離することも
できる。試料材料を精製しかつ緩衝生理的食塩水もしく
は細胞培養培地で希釈した後、犬もしくは猫由来の活発
に分裂している細胞へ接種することができる。
られた。しかしながら、これはこのウイルスに伝染した
子犬または犬からの腸管試料、胸腺もしくはその他のリ
ンパ腺組織、骨髄、血液または肝臓から分離することも
できる。試料材料を精製しかつ緩衝生理的食塩水もしく
は細胞培養培地で希釈した後、犬もしくは猫由来の活発
に分裂している細胞へ接種することができる。
公知のウイルス株からなるワクチンとは異なり、本発明
によるワクチンは６週令における殆んどの子犬および９
〜12週令におけるほぼ100％の子犬に有効である。この
ことは、その時点まで持続していた母体に由来する抗体
を新規なCPVウイルスが打破し得る。（break through）
が、予防接種した子犬にCPV伝染の徴候を引き起こさな
いことを意味する。
によるワクチンは６週令における殆んどの子犬および９
〜12週令におけるほぼ100％の子犬に有効である。この
ことは、その時点まで持続していた母体に由来する抗体
を新規なCPVウイルスが打破し得る。（break through）
が、予防接種した子犬にCPV伝染の徴候を引き起こさな
いことを意味する。
12週令における母体による抗体の力価は一般に1:32以下
に低下しており、かつ1:32を越えるレベルは12週令にお
いて極めて稀れである。1:32の力価を有する動物の100
％近くが本発明のワクチンによる予防接種に反応し、1:
64のレベルでさえ殆んど子犬が反応する。
に低下しており、かつ1:32を越えるレベルは12週令にお
いて極めて稀れである。1:32の力価を有する動物の100
％近くが本発明のワクチンによる予防接種に反応し、1:
64のレベルでさえ殆んど子犬が反応する。
CPVに対し母体の抗体を有することが知られまたは疑が
わしい子犬に適した予防接種系は、たとえば12週令にお
ける１回の予防接種或いは６週令から開始する反復予防
接種（たとえば６週令、９週令および12週令）或いは４
週令から開始する毎週の予防接種のいずれかである。
わしい子犬に適した予防接種系は、たとえば12週令にお
ける１回の予防接種或いは６週令から開始する反復予防
接種（たとえば６週令、９週令および12週令）或いは４
週令から開始する毎週の予防接種のいずれかである。
母体による抗体の存在に関する情報が得られない場合
は、一般に12週令で予防接種することが推奨される。
は、一般に12週令で予防接種することが推奨される。
弱毒生ワクチンの推奨される投与量は103TCID50以上で
あるが、MDAを有する子犬の場合には少なくとも子犬１
匹当り106TCID50であることが好ましい。
あるが、MDAを有する子犬の場合には少なくとも子犬１
匹当り106TCID50であることが好ましい。
これらワクチンの投与は非経口的（たとえば注射）また
は経腸的（たとえば経口投与による）に行なうことがで
きる。
は経腸的（たとえば経口投与による）に行なうことがで
きる。
さらに、本発明はまたその一部として、混合ワクチンで
あり、これらワクチンは上記CPVワクチンウイルスの他
に少なくとも１種の次の犬ワクチンウイルスを含む：犬
ジステンバー、伝染性犬肝炎（CAV−１およびCAV−
２）、狂犬病、パラインフルエンザ、犬コロナウイルス
（canine coronavirus）、麻疹および／または伝染性細
菌レプトスピラ病およびボルデテラ病。
あり、これらワクチンは上記CPVワクチンウイルスの他
に少なくとも１種の次の犬ワクチンウイルスを含む：犬
ジステンバー、伝染性犬肝炎（CAV−１およびCAV−
２）、狂犬病、パラインフルエンザ、犬コロナウイルス
（canine coronavirus）、麻疹および／または伝染性細
菌レプトスピラ病およびボルデテラ病。
伝播（transmission）する間の病原性、免疫原性および
毒性増大を試験するため、CPVを７匹の犬に順次に伝播
させた。この試験において18匹の子犬を使用し、これら
は全て接種の時点で抗体を含まなかつた。全ての子犬は
観察期間中ずつと良好な状態を維持し、抗体反応を示し
た。白血球数は正常の範囲内に留まつた。
毒性増大を試験するため、CPVを７匹の犬に順次に伝播
させた。この試験において18匹の子犬を使用し、これら
は全て接種の時点で抗体を含まなかつた。全ての子犬は
観察期間中ずつと良好な状態を維持し、抗体反応を示し
た。白血球数は正常の範囲内に留まつた。
本発明のワクチンの接種による防御効果は、６週令の予
防接種に対し抗体反応を示した４匹の子犬、並びに２匹
の予防接種しない比較の子犬を毒性のCPV株に感染させ
て示された。予防接種されていない犬はCPV伝染に特徴
的な臨床的徴候を示したのに対し、予防接種した子犬は
その徴候を示さなかつた。
防接種に対し抗体反応を示した４匹の子犬、並びに２匹
の予防接種しない比較の子犬を毒性のCPV株に感染させ
て示された。予防接種されていない犬はCPV伝染に特徴
的な臨床的徴候を示したのに対し、予防接種した子犬は
その徴候を示さなかつた。
実施例 １ ウイルスの分離および継代 犬小屋にて８週令のビーグル種の子犬で生じたパルボウ
イルス伝染の臨床例から採取した直腸スワブ（swab）か
らウイルスを単離した。
イルス伝染の臨床例から採取した直腸スワブ（swab）か
らウイルスを単離した。
このウイルスをFEFの培養物に接種し、これら細胞で再
度継代させた後、犬のA72細胞系の培養物へ移した。
〔ビン（Binn），マルチビツキ（Marchwicki）およびス
テフエンソン（Stephenson）A.M.J.V.R.第41巻、第855
−860頁（1981）〕。細胞培養物におけるウイルスの全
継代は37℃で行なつた。
度継代させた後、犬のA72細胞系の培養物へ移した。
〔ビン（Binn），マルチビツキ（Marchwicki）およびス
テフエンソン（Stephenson）A.M.J.V.R.第41巻、第855
−860頁（1981）〕。細胞培養物におけるウイルスの全
継代は37℃で行なつた。
次いで、ウイルスをこの細胞系で41回継代させて弱毒化
し、その過程で４回のクローン化工程を４回目、７回
目、10回目および40回目の継代時点で行なつた。それぞ
れの場合、大きい明瞭な分離プラークを取り出した。
し、その過程で４回のクローン化工程を４回目、７回
目、10回目および40回目の継代時点で行なつた。それぞ
れの場合、大きい明瞭な分離プラークを取り出した。
次いで、A72細胞における41回目の継代ウイルス（プー
ル182）をFEF培養物に再び接種し、プール182後のFEFに
おける第２回継代の回収物を「マスターシード（MASTER
SEED）」ロツトとして保存しかつこれをプール190と名
付けた。
ル182）をFEF培養物に再び接種し、プール182後のFEFに
おける第２回継代の回収物を「マスターシード（MASTER
SEED）」ロツトとして保存しかつこれをプール190と名
付けた。
実施例 ２ 生ワクチンの製造 A.実施例１にしたがつて得られたマスターシードロツト
から、１次および２次の処理用シードロツトを作成し
た。これらは、A72細胞系から移した後に４回および５
回FEA細胞培養物で継代させたものである。FEF細胞培養
物に、処理用シードウイルスを播種し感染させた。次い
で、培養物をウイルスの細胞変性効果が適当な段階に達
するまで培養した。この時点で、細胞培養培地を回収し
かつ−70℃にて保存した。
から、１次および２次の処理用シードロツトを作成し
た。これらは、A72細胞系から移した後に４回および５
回FEA細胞培養物で継代させたものである。FEF細胞培養
物に、処理用シードウイルスを播種し感染させた。次い
で、培養物をウイルスの細胞変性効果が適当な段階に達
するまで培養した。この時点で、細胞培養培地を回収し
かつ−70℃にて保存した。
B.回収物の試料をウイルス力価について分析しかつ不稔
（sterility）につき試験した。ウイルス力価が既知で
ある場合には、ウイルスに安定化剤を配合して最終配合
物中で5.5％のソルビトールと5.5％のNZアミン（カゼイ
ンの膵臓消化物）にさせた。次いで、この配合物を中性
ガラス壜中へ1.0mlの容量で満たし、次いで凍結乾燥さ
せかつ減圧下で密封した。
（sterility）につき試験した。ウイルス力価が既知で
ある場合には、ウイルスに安定化剤を配合して最終配合
物中で5.5％のソルビトールと5.5％のNZアミン（カゼイ
ンの膵臓消化物）にさせた。次いで、この配合物を中性
ガラス壜中へ1.0mlの容量で満たし、次いで凍結乾燥さ
せかつ減圧下で密封した。
実施例 ３ 各母体由来の抗体を考慮した子犬の予防接種 107.4TCID50のCPV量を含有するワクチンを、赤血球凝集
阻止により確認された種々のレベルの、母体に由来する
抗体（MDA）力価を含有する135匹の子犬に投与した。こ
れら子犬の124匹には６週令にて予防接種し、残りの11
匹には９週令にて予防接種した。第６週にて少数の子犬
は予防接種に対し血清学的に反応しなかつたが、これら
には８〜９週令にて再び予防接種し、全ての場合にこれ
らは急速な血清変化を伴つて反応した。
阻止により確認された種々のレベルの、母体に由来する
抗体（MDA）力価を含有する135匹の子犬に投与した。こ
れら子犬の124匹には６週令にて予防接種し、残りの11
匹には９週令にて予防接種した。第６週にて少数の子犬
は予防接種に対し血清学的に反応しなかつたが、これら
には８〜９週令にて再び予防接種し、全ての場合にこれ
らは急速な血清変化を伴つて反応した。
これら結果の要約を下記第２表および第３表に示す： 実施例 ４ 検出可能な母体に由来する抗体の存在下における本ワク
チンと他種ワクチンとの効果の比較 ３種の異なるワクチンの効果を、２つの別々の試験で比
較した。
チンと他種ワクチンとの効果の比較 ３種の異なるワクチンの効果を、２つの別々の試験で比
較した。
第１の試験においてビーグル犬コロニーで生まれた子犬
に、弱毒化したスミス−クラインの生CPVワクチン（SK
−CPV）またはインテルベツト（Intervet）猫パルボウ
イルスワクチン（FPV）のいずれかを予防接種した。
に、弱毒化したスミス−クラインの生CPVワクチン（SK
−CPV）またはインテルベツト（Intervet）猫パルボウ
イルスワクチン（FPV）のいずれかを予防接種した。
第２の試験においてビーグル犬コロニーで生まれた子犬
に、本発明による生CPVワクチン（Int−CPV）またはイ
ンテルベツト猫パルボウイルスワクチン（FPV）のいず
れかを予防接種した。
に、本発明による生CPVワクチン（Int−CPV）またはイ
ンテルベツト猫パルボウイルスワクチン（FPV）のいず
れかを予防接種した。
これら子犬には４〜８週令から毎週予防接種した。全て
の子犬は母親から母体の抗体を受けていた。
の子犬は母親から母体の抗体を受けていた。
結果を第４表に示す。
本発明のワクチンによる子犬の免疫は、致命的なCPV疾
患に対し公知のワクチンにより得られる防御よりもずつ
と優れた防御をもたらすという結論が引き出される。
患に対し公知のワクチンにより得られる防御よりもずつ
と優れた防御をもたらすという結論が引き出される。
実施例 ５ 不活性化ワクチンの作成 実施例２にしたがつて得られた細胞培養培地（1ml当り1
08TCID50の力価を有する）を、37℃で２時間培養する際
に0.1％濃度のβ−プロピオラクトンにて処理した。
08TCID50の力価を有する）を、37℃で２時間培養する際
に0.1％濃度のβ−プロピオラクトンにて処理した。
1N NaOHの滴加により、所定時間間隔で液体を中和し
た。フエノールレツド（培地中に存在）が、pH調整を必
要とする時点を示す。
た。フエノールレツド（培地中に存在）が、pH調整を必
要とする時点を示す。
最後に、燐酸アルミニウムを、アジユバントとして混合
物に0.3％の最終濃度まで配合した。
物に0.3％の最終濃度まで配合した。
実施例 ６ 12週令における予防接種に対する母体由来免疫子犬の反
応 母体由来の抗体の相当な力価を示す２群の子犬を、実施
例２にしたがつて作成した生ワクチンまたは異型の猫パ
ルボウイルス系ワクチンのいずれかで免疫した。
応 母体由来の抗体の相当な力価を示す２群の子犬を、実施
例２にしたがつて作成した生ワクチンまたは異型の猫パ
ルボウイルス系ワクチンのいずれかで免疫した。
母体由来の抗体は、赤血球凝集阻止滴定により決定し
た。
た。
各群には３種の異なる投与量を施こし、各群を９匹の子
犬で構成した。
犬で構成した。
結果を第５表に示す。
Claims (7)
- 【請求項１】犬パルボウィルス株154のウィルスを含む
犬パルボウィルス伝染に対する免疫ワクチンであって、
前記犬パルボウィルス株154はフランス、パリのパスツ
ール研究所のコレクション・ナショナレ・デ・カルチュ
ーレ・デ・ミクロオルガニズムにNo.I−404として寄託
されており且つ６週における母体に由来する抗体（MD
A）の力価が160以下の子犬に６週および８週目に２回予
防接種することにより子犬を防御する特性を少なくとも
持っていることを特徴とする前記ワクチン。 - 【請求項２】前記ウィルスが弱毒生型であることを特徴
とする特許請求の範囲第１項に記載のワクチン。 - 【請求項３】犬パルボウィルス株154を、１回投与当た
り少なくとも103TCID50を含むことを特徴とする特許請
求の範囲第２項に記載のワクチン。 - 【請求項４】犬パルボウィルス株154を、１回投与当た
り少なくとも106TCID50を含むことを特徴とする特許請
求の範囲第３項に記載のワクチン。 - 【請求項５】犬パルボウィルス株154のワクチンウィル
スを含み、さらに少なくとも犬ジステンパーウィルス、
伝染性犬肝炎ウィルス（CAV−１およびCAV−２）、狂犬
病、パラインフルエンザ、犬コロナ、麻疹および／また
は伝染性細菌：レプトスピラ病およびボルデテラ病のう
ちの一種のワクチンウィルスを含有する混合ワクチンで
あって、前記犬パルボウィルス株154はフランス、パリ
のパスツール研究所のコレクション・ナショナレ・デ・
カルチューレ・デ・ミクロオルガニズムにNo.I−404と
して寄託されており且つ６週における母体に由来する抗
体（MDA）の力価が160以下の子犬に６週および８週目に
２回予防接種することにより子犬を防御する特性を少な
くとも持っていることを特徴とする前記混合ワクチン。 - 【請求項６】犬パルボウィルス株154のウィルスの細胞
組織培養物から回収した物質を、犬パルボウィルス伝染
に対しワクチン活性を有する医薬製剤に形成することか
らなる犬パルボウィルスワクチンの製造方法であって、
前記犬パルボウィルス株154はフランス、パリのパスツ
ール研究所のコレクション・ナショナレ・デ・カルチュ
ーレ・デ・ミクロオルガニズムにNo.I−404として寄託
されており且つ６週における母体に由来する抗体（MD
A）の力価が160以下の子犬に６週および８週目に２回予
防接種することにより子犬を防御する特性を少なくとも
持っていることを特徴とする前記方法。 - 【請求項７】犬パルボウィルス株154のウィルスを含む
犬パルボウィルス伝染に対する免疫ワクチンを子犬に投
与することからなる犬パルボウィルス伝染に対する犬の
防御法であって、前記犬パルボウィルス株154はフラン
ス、パリのパスツール研究所のコレクション・ナショナ
レ・デ・カルチューレ・デ・ミクロオルガニズムにNo.I
−404として寄託されており且つ６週における母体に由
来する抗体（MDA）の力価が160以下の子犬に６週および
８週目に２回予防接種することにより子犬を防御する特
性を少なくとも持っていることを特徴とする前記防御
法。
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