JPH06508624A - 制御された放出系および低投与アンドロゲン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 制御された放出系および低投与アンドロゲン発明の分野 この発明は、ヒトを含む罹病性の温血動物において、乳癌および子宮内膜癌、骨 欠損を治療または予防するための、かつ子宮内膜症を治療するための、アンドロ ゲン作用を有する化合物の投与を伴う方法に関するものであり、かつその治療に 使用されるべき有効成分を含むキットに関するものである。新規の持続放出性製 剤、ならびにそれらの生産および使用のための方法が開示される。より長い時間 期間の間予め定められた有効成分の循環レベルを与える注射可能な形態の酢酸メ トロキシプロゲステロンおよび酢酸メゲストロールの新規製剤に関するいくつか の好ましい実施例が示される。たとえば酢酸メトロキシプロゲステロンおよび酢 酸メゲストロールを放出する生分解性の微粒子が、受精能制御と共に疾患の予防 および治療のためにヒトを含む温血動物に注入される際、はぼ一定かつ遅い速度 で与えられる。持続放出性粒子から望ましくない残留溶媒を取除くための新規の 方法もまた提供される。

発明の背景 様々な研究者が、乳癌および子宮内膜癌のために、骨欠損の予防および治療のた めに、かつ子宮内膜症の治療のためにホルモン療法を研究してきた。既に進行し た乳癌の治療のための主要なアプローチは、エストロゲン作用および／または形 成の抑制に関するものである。エストロゲン感受性乳癌の増殖促進におけるエス トロゲンの役割はよく認識されている（Ｌｉｐｐｍａｎ、Ｓｅｍ１ｎ、　０ｎｃ ｏ１．１０　（Ｓａｐｐｌ、　４）　：１．１−１９．　１９８３；　Ｓｌｅｄ ｇｅおよびＭｃＧｕｉｒｅ、　Ｃａｎｃｅ＋　Ｒｅｄ、３８　：　６　Ｌ−７５ ，１９８４；ｗｉｔｌｌｉｌＬ　Ｃａｎｃｅｒ５３　：　６３０−６４３．１９ ８４　；　ＰｏａｌｉｎおよびＬａｂ＋ｉｅ、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ、４６　：　 ４９３３−４９３７．　１９８６）。

エストロゲンは正常な子宮内膜の増殖を促進することも知られている。プロゲス テロンによって拮抗されないエストロゲンに対する慢性被曝は、子宮内膜癌の素 因となる子宮内膜の過形成の発生に至り得る（Ｌｕｃａｓ、　Ｏｂｓ＋ｅｔ、　 Ｇ７ｎｅｃａ１．Ｓｕ＋ｖ、２９　：　５０７−５２８　１９７４）、子宮内膜 癌の発生率は閉経後に、特にプロゲスチンによる同時処置を行わずにエストロゲ ン治療を受けた女性において増加する（Ｓｍｉｔｈイ也Ｎ、　Ｅｎｇｌ、　１． 　Ｍｅｄ、　２９３　：　１１６４−１１６７、１９７５；　Ｍｉｃｋ他Ｎ、　 Ｅｎｇｌ、１．　Ｍｅｄ、　２９４　：　１゜２６２−１２６７．　１９７６） 。

様々な研究者がホルモン依存性乳癌および子宮内膜癌を研究してきた。閉経前の 女性における既知の形態の内分泌療法は、手術または照射によって最も一般的に 行なわれる去勢であり、これら２つの処置は不可逆の去勢を与える。

最近、黄体形成ホルモン−放出ホルモン作動薬（ＬＨＲＨ作動薬）を利用するこ とによって、可逆的形態の去勢が達成され、その作動薬は下垂体による生理活性 黄体ホルモン（ＬＨ）の分泌抑制に続いて、血清エストロゲンを去勢レベルまで 低減する（ＮｉｃｈｏｌｓＯｎ他Ｂｏｉｌ、Ｊ、　Ｃａｎｃｅ「３９　：２６８ −２７３．１９７９）。

いくつかの研究は、Ｌ　ＨＲＨ作動薬を用いた閉経前の乳癌患者の治療が他の形 態の去勢によって達成された患者に匹敵する応答を引起こすことを示す（Ｋｌｉ ｊｎ他１．　ＳｔｅｒｏｉｄＢｉｏｃｂｅｍ、２０：１３８１．１９８４；Ｍａ ｎｎｉ他Ｅｎｄｏｃｔ、　Ｒｅｖ、７　：　８９−９４．１９８６）、ＬＨＲＨ 作動薬を用いた治療の恩恵効果は閉経後の女性においても観察されている（Ｎｉ ｃｈｏｌｓｏｎ他１．　５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　２３　＋　８４３ −８４８．１９８５）。

米国特許第４．０７１．６２２号は、ラットにおけるＤＭＢＡ誘発乳房癌に対す るあるＬＨＲＨ作動薬の使用に関する。

米国特許第４．７７５．６６０号は、卵巣のホルモン分泌が化学的または外科的 手段によって阻止された後の、メスに対する抗アンドロゲンおよび抗エストロゲ ンの投与を含む組合わせ治療の使用によるメスの乳癌の治療に関する。

米国特許第４．７７５．６６１号は、卵巣のホルモン分泌が化学的または外科的 手段によって明止された後の、メスへの抗アンドロゲンおよび任意のある性ステ ロイド生合成の阻害剤の投与を含む治療の使用によるメスの乳癌の治療に関する 。

米国特許第４．７６０．０５３は、ＬＨＲＨ作動薬、抗アンドロゲン、抗エスト ロゲンおよびある性ステロイド生合成の阻害剤から選択された化合物の様々な特 定の組合わせを含む選択された性ステロイド依存性癌の治療を説明している。

米国特許第４．４７２．３１１２号は、前立腺の腺癌、良性の前立腺肥大および ホルモン依存性乳房腫瘍の、特定の薬剤または組合わせを用いた治療に関する。

様々なＬＨＲＨ作動薬および抗アンドロゲンが論じられている。

ＷＩＰＯ国際公開ＷＯ９２１，［１５７６３号は、毛髪成長および皮膚疾患のた めのある１６．１６−二置換アンドロステンステロイド化合物を論じている。国 際特許出願ＰＣＴ／ＷＯ３６１０１１０５号は、特定の薬剤および組合わせの投 与を含む、温血動物における性ステロイド依存性癌の治療方法を開示している。

抗アンドロゲン、抗エストロゲン、ある性ステロイド生合成の阻害剤、およびホ ルモン分泌の阻止が論じられている。

１９８９年３月１０日に出願された本発明者の同時係属中の米国特許出願第０７ ／３２１９２６号は、組合わせ治療法の一部として、外科的手段（卵巣摘出）ま たは化学的手段（ＬＨＲＨ作動薬、たとえば［Ｄ−Ｔｒｐ６．ｄｅｓ−Ｇｌｙ− ＮＨ４Ｉ　’　］　ＬＨＲＨエチルアミド、または拮抗薬）による卵巣ホルモン 分泌の抑制を含み得る、罹病性温血動物における乳癌および子宮内膜癌の治療法 に関するものである。抗エストロゲン、アンドロゲン、プロゲスチン、性ステロ イド形成の（特に１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼまたはアロマ ターゼにより触媒された性ステロイドの生成物の）阻害剤、プロラクチン分泌お よび成長ホルモン分泌の阻害剤ならびにＡＣＴＨ分泌が論じられている。

アンドロゲン受容体は、通常の（ＷｉＮｉｌｌ、Ｉｎ：Ｂｏｓｈ、　Ｈ。

（Ｅｄ、）、　Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　ＣａｎｃｅｒＲｅｓ、、Ｖｏｌ、　１１ ．　Ａｃａｄ、　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｌｋ、　１９７５．　ｐｐ、　２ ９８−３０４　；Ａｌｌｅｇｒａ他Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　３９　：１４７７ −１４５４．１９７９）、および腫瘍性の（Ａｌｌｅｇ＋ａ他Ｃａｎｃｅｔ　Ｒ ｅｓ、　３９　：　１１４７−１４５４．１９７９　；　Ｅｎｇｅｌ＋ｍｘｎ他 Ｂ＋ｉｌ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ　３０　：１７７−１８１．１９７５　；　Ｍ ｏ５ｓ他Ｊ、Ｓｔｅｍ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、６　：　７４３−７４９．１９７５ 　；　Ｍｉｌｌｅｒ他Ｅｕ、１、Ｃａｎｃｅ＋　Ｃｌ１ｎ、　０ｎｃｏ１．　２ 　：　５３９−５４２．１９８５　。

Ｌｉｐｐｍａｎ他Ｃａｎｃｅｒ　３８　：　８６８−８７４．１９７６；　Ａｌ ｌｃｇ＋ａ他Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、３９　：１４４７−１４５４．１９７９　 ；　Ｍｉｌｌｅｒ他Ｅｕ＋、　１．　Ｃｌ１ｎ、０ｎｃｏ１．２１　：　５３９ −５４２．１９８５；Ｌｅａ他Ｃａｎｃｅｒ　ＲｅＩ４９　：　７１６２−７１ ６７．１９８９）、ならびにいくつかの確立した乳癌細胞系（Ｌｉｐｐｍａｎ他 Ｃａｎｃｅ「Ｒｅｓ、３６　：　４６１０−４６１８．１９７６　；　Ｈｏｒｖ Ｈ２他Ｃａｎｃｅｔ　Ｒｅｓ、　３８　：　２４３４−２４３９．１９７８　； 　Ｐｏｕｌｉｎ他Ｂ＋ｅａｓｊ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔ＋ｅａｔｍ、１２ ：２１３−２２５．１９８８）に存在することが示されている。アンドロゲン受 容体は、ラットのジメチルベンズ（ザ）アントラセン（ＤＭＢＡ）誘導乳房腫瘍 にも存在する（Ａｓｓｅｌｉｎ他Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ＋、４０　：１６１２−１ ６２２．１９８０）。

アンドロゲン受容体はヒトの子宮内膜においても説明された（Ｍａｃｌａｕｇｈ ｌｉｎおよびＲｉｃｈａ＋ｄｓｏｎ、　Ｊ、　５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ 、１０　：　３７１−３７７．１９７９　；　ＭｕｅｃｈｌｅｒおよびＫｏｈｌ ｅ＋、　Ｇｙｎｅｃｏｌ、　Ｉｎｖｅｓｔ、８　：　１０４．１９８８）、生体 外の子宮内膜癌におけるアンドロゲン、メチルトリエノロン（Ｒ１８８１）の成 長抑制作用が説明されている（Ｃｅｎｔｏｌａ、ＣａｎｃｅＩＲｅｓ、４５　： 　６２６４−６２６７．１９８５）。

最近の報告では、アンドロゲン受容体が、エストロゲン受容体の選択的力を増強 するか、または内分泌療法に対する最高の予測反応としてエストロゲン受容体に 取って代わろうとさえしていることが示されている（　Ｔｅｕｌｉｎｇｓ　ｆＩ ｔ！　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、４０　：２５５７−２５６１．１９８０　；　Ｂ ｔｙａｎ他Ｃａｎｃｃ＋　５４　：　２４３６−２４４０．１９８４）。

進行した乳癌の治療にうま（使用された最初のアンドロゲンは、プロピオン酸テ ストステロンである（Ｎａｌｈａｎｓｏｎ。

Ｒｃｃ　Ｆ「ｏｇ、Ｈａｒｍ、Ｒｅｓ、１　：　２６１−２９１．１９４７）。

多くの研究が、乳癌におけるアンドロゲンの有益な効果をその後確証した（　Ａ ｌａｎおよびＨｅｒｍａｎ、　Ａｎｎ、　Ｓｕｔｇ、１２３　：１０２３−１０ ３５　；Ａｄａｉｒ、Ｓｕｒｇ、Ｇ７ｎｅｃｏ１．０ｂｓｔｅ１８４ニア１９− ７２２．１９４７；Ａｄａｉ＋他ｊＡＭ＾１４０：１１９３−２０００．１９４ ９）。それらの最初の結果は、いずれも他覚的な緩解を生じさせる上で効果的で あるとわかったプロピオン酸テストステロンおよびＤＥＳの効果に関する共同研 究を刺激した（ＮＣＩの癌化学療法国立サービスセンターの協同乳癌グループに よって権威を与えられたＡｍ、Ｍｅｄ、　アソシエーション（Ａｍ、　Ｍｅｄ。

Ａｓ５ｏｃｉａｔｉｏｎ　）の薬学および化学に関する評議会の調査委員会のス テロイドおよび痛手委員会は、プロピオン酸テストステロンが緩解速度および持 続期間、生体および生存の状態を改善したことを発見した（Ｃｏｏｐｅｒａｌｉ ｙｅ　Ｂｔｅｘｓｊ　Ｃｌ１ｌｃｅｒ　Ｇｒｏｕｐ、ＪＡＭＡ　１８８．１０６ ９−１０７２．１９６４））。

長時間作用性アンドロゲンメトノロンエナンタートを受けた閉経後の女性では４ ８％の応答率（患者２７人中１３人）が観察された（Ｋｅｎｎｅｄ７他Ｃａｎｃ ｅｒ　２１　：　１９７−２０１．１９６７）。生存期間のメジアンは非応答者 群と比較すると応答者群では４倍長かった（２７対７．５力月）。

アンドロゲンが転移性乳癌の女性のうち２０ないし４０％において緩解を誘導す ることが数多くの研究によって論証された（　Ｋｅｎｎｅｄ７．　Ｈｏ「ｍｏｎ ｅ　Ｔｈｅ＋ａｐ７　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ、　Ｇｅ＋ｉａｔ＋ｉｃ＋２５：１０ ６　１１２．１９７０　；　Ｇｏｌｄｅｎｂｅ＋ｇ他ＪへＭＡ　２３３：１２６ ７−１２６８．１９７３）。

タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｔｅｎ　）　（Ｍａｎｎｉ他Ｃａｎｃｕ　３８　 ：２５０７−２５０９．１９８１）が以前作用しなかった、またはそれに対して 応答しなかった閉経後の女性３３人のグループでは最近、フルオキシメステロン （ハロスタチン）（１０ｍｇ、ｂ、ｉ、ｃｔ、）を用いた治療によッテ、平均持 続期間が１１力月である３９％の応答率が観察された。

これらの女性のうち、１７人は下垂体切除も受けていた。

以前タモキシフェンに応答していた患者と、していなかった患者との間には、フ ルオキシメステロンに対する応答率に違いはなかった。タモキシフェンおよび下 垂体切除の両方が作用していなかった１７人の患者のうち、７人が平均持続時間 １０力月の間フルオキシメステロンに応答した。

それらの中で、２人はタモキシフェンにも下垂体切除にも応答していなかった。

フルオキシメステロンおよびタモキシフェンの組合わせはタモキシフェン単独よ り優れていることが示されている。

実際に、完全応答（ＣＲ）は組合わせ療法においてのみ見られ、部分応答（ＰＲ ）は単一療法では１５％であったのに対し組合わせ療法では３２％が示した。さ らに、非応答者は、ＴＡＭだけを受けた患者では５０％であったのに対し、組合 わせ療法ではわずか２５％であった（　Ｔｏｒｍｅ７他Ａｎｎ、Ｉｎ＋、Ｍｅｄ 、９８　：１３９−１４４．１９８３）、さらに、治療開始から失敗までのメジ アン時間は、タモキシフェン療法単独（６４日）と比べてフルオキシメステロン ＋タモキシフェン（１８０日）の方が長かった。組合わせ療法には生存期間改善 の傾向があった（３８０対３３０日）。

抗エストロゲンと組合わされたアンドロゲンの独立した有益な効果は、タモキシ フェンに応答しなかった患者がフルオキシメステロンに応答し得、逆もまた同様 であったという報告によって示唆される。さらに、タモキシフェンをフルオキシ メステロンと共に用いて治療を受けた患者は反対の治療を受けた患者よりも長く 生存した（　Ｔｏｒｍｅ７他Ａｎｎ、ｌｎ１．Ｍｅｄ、９８　：１３９−４４４ ．１９８３）。

プロピオン酸テストステロンは閉経前および閉経後の女性のいずれにおいても有 益な効果をもたらしたので（Ａｄａｉｒ他１．　Ａｍ、　Ｍｅｄ　Ａｓｓ、　１ ５　：１１９３−１２００．１９４９）、それはゴナドトロピン分泌を抑制する ことに加えてアンドロゲンが癌増殖に直接抑制作用を加えることを示す。

最近の生体外研究では、エストロゲン感受性ヒト乳房癌細胞系ＺＲ−７５−１の 成長におけるアンドロゲンの相関的抗増殖活性が説明されている（　Ｐｏｕｌｉ ｎ他“Ａｎｄ＋ｏｇｅｎｓｉｎｈｉｂＨｂａｓａｌ　ａｎｄ　ｅｓｊ＋ｏｇｅｎ −ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｃｅ１ｌ　ｐｒｏｌｉｌｅ＋ａｌｉ。

ｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　２Ｒ−７５−１ｈｕｍａｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　 ｃｅｌｌ　１ｉｎｅ　”　、Ｂ「ｅａｃｔ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔｒｅａ ｆｍ、１２　：　２１３−２２５．１９８９）。上述のように、Ｐｏｕｌｉｎ他 （Ｂｒｅａｓｔ　Ｃｘｎｃｅｒ　ＲｅｓＴｒｅａｔｍ、１２　：　２１３−２２ ５．１９８９）は、ＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞の成長がアンドロゲンによって 抑制され、そのアンドロゲンの抑制作用は抗エストロゲンの抑制作用に加酸的な ものであるということを発見した。ヒト乳癌細胞ＺＲ−７５−１の成長における アンドロゲンの抑制作用はヌードマウスの生体内でも観察されている（Ｄａｕｖ ｏｉＳおよびＬａｂ＋ｉｅ、Ｃａｎｃｅ＋　Ｒｅｓ、５１　：　３１３１−３１ ５１．１９９１）。

乳癌におけるアンドロゲン作用の存在し得るメカニズムとして、放射性リガンド 結合および抗ＥＲモノクローナル抗体によって測定されるように、アンドロゲン がＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞中のエストロゲン（ＥＲ）およびプロゲステロン （ＰｇＲ）受容体内容物を強く抑制することが最近水された。類似の抑制作用が 、リボヌクレアーゼ保護アッセイによって測定されたＥＲのｍＲＮＡのレベルで 観察された。アンドロゲン作用は、エストロゲンの存在に関係なく、非芳香族性 のアンドロゲン、５α−ジヒドロテストステロンのサブナノモルの濃度で測定さ れ、抗アンドロゲン、ヒドロキシフルタミドによって競合的に反転される（　Ｐ Ｏｕｌｉｎ他Ｅｎｄｏｃ＋ｉｎｏｌｏｇ７１２５　：　３９２−３９９、Ｌ　９ ８９）。エストロゲン受容体発現に関するこのようなデータによって、乳癌細胞 成長におけるアンドロゲンの抗エストロゲン作用の少なくとも一部を説明するこ とができ、さらにアンドロゲン治療法の特定の抑制作用が抗エストロゲンによる エストロゲンの遮断に限定された標準療法に加酸的なものであり得るということ が示唆される。

ＤａｕｖｏｉＳ他（Ｂ＋ｅａｓｔ　ＣａｎｃｅＩＲｅｓ、Ｔｒｅａｆｍ、　１４ 　：　２９９−３０６．１９８９）は、ＤＭＢＡ誘導乳癌を持つ卵巣摘出された ラットにおけるアンドロゲン、５α−ジヒドロテストステロン（Ｄ　ＨＴ）の一 定の放出によって、１７β−エストラジオール（Ｅ２）により誘導される腫瘍成 長が著しく抑制されたことを示した。ＤＨＴがアンドロゲン受容体との相互作用 によって作用することは、アンドロゲン、フルタミドを用いた同時治療がＤＨＴ 作用を完全に妨げたという発見によって支持される。腫瘍成長におけるアンドロ ゲン、ＤＨＴの強力な抑制作用を特に例証するのは、Ｅ２処置された動物におけ るＤＨＴによる６９．２％から２９．２％への進行中腫瘍の数の減少、および同 じ動物群におけるこのアンドロゲンによる１１．５％から３３．３％への完全応 答（触知可能な腫瘍の消失）数の増加である。

Ｅ２処置された動物において２８日間の観察期間に現われた新たな腫瘍の数は、 アンドロゲン、ＤＨＴを用いた治療中に、ラット１匹当り１．５±０．３から０ ．７±０．　２に減少し、その作用も抗アンドロゲン、フルタミドによって反転 された。このようなデータは、アンドロゲンがゴナドトロピン分泌の抑制から独 立した作用によるＤＭＢＡ誘導乳房癌成長の強力な阻害剤であることを初めて論 証し、作用は直接腫瘍レベルで加えられることを示唆し、したがってヒトＺＲ− ７５−１乳癌細胞によって得られた生体外データをさらに支持する（　Ｐｏｕｌ ｉｎ他Ｂ「ｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅ＋　Ｒｅ５Ｔ＋ｅａｔｍ、１２：２１３−２２ ５．１９８８）。

天然のアンドロゲンであるテストステロン（ＴＥＳＴＯ）およびジヒドロテスト ステロン（ＤＨＴ）は、１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼによる アントロスタンジオンのＴＥＳＴＯへの変換、さらに酵素５α−レダクターゼの 作用によるＴＥＳＴＯのＤＨＴへの変換から形成される。副腎前駆体５−アンド ロスト−５−エン−３β。

１７β−ジオール（５−ａｎｄｒｏｓｊ　−５−ｅｎｅ　−３β、１７β−ｄｉ ｏｌ）もまた、酵素３β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ／Δ５Δ４イ ソメラーゼ（３β−Ｈ３Ｄ）の作用によってＴＥＳＴＯへ変換され得る。

天然アンドロゲン、ＴＥＳＴＯおよびＤＨＴには強い男性化作用があるので、様 々なＴＥＳＴＯ誘導体がプロゲステロンとともに、望ましくない男性化副作用（ 体毛成長、頭髪喪失、座癒、脂漏および大声）がほとんどない有用な化合物を得 るために合成されている。

酢酸メトロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）は、女性の進行した乳癌の内分泌療法 で最も広く使用される化合物の１つである（Ｍａｊｌｓ＋ｏｎ、Ｂ「ｅａｓｔ　 Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔｎａｊｍ、　３　：　２３１−２３５．１９８３　 ；　８１ｕｍｅｎｓｃｈｅｉｎ、Ｓｅｍ１ｎ、　０ｎｃｏｌ。

１０ニア−１０，１９８３；　Ｈｏｒｆｏｂａｇ７ｉ他Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｅ ｅｒＲｅｄ、　Ｔ＋ｅａ１ｍ、５　：　３２１−３２６．１９８５　；　Ｗａｌ ｌｅｔおよびＧ１１ｃｋ、Ｓｅｍ１ｎ、　０ｎｃｏ１．　１３　：　２−８．１ ９８６　；Ｈｏ＋ｖｉｔｚ、Ｉ、５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　２７　： 　４４７−４５７．１９８７）。この合成プロゲスチンの高投与に対する全体的 臨床応答率は、非選択乳癌患者では平均４０％であり（Ｈ。

＋ｖｉｔ３　１．５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、２７　：　４４７−４５７ ．１９８７）、その効力は非ステロイド抗エストロゲン、タモキシ’７エンに匹 敵する（Ｌｉｐｐｍａｎ、Ｓｅｍ１ｎ、０ｎｃｏ１．１０　（Ｓｕｐｐｌ、）・ １１−１９．１９８３）。しかし、そのより一般的な用途は、他の内分泌物理療 法後に再発する乳癌に対してである。生体外のヒト乳癌細胞成長における酢酸メ トロキシプロゲステロンの最大抑制作用は、１ｎＭ程度の低さの濃度で達成され 得るが、はぼ１０００倍高い投与量がグルココルチコイド作用に要求されること が多い（Ｐ＋＋ｕｌｉｎ　他Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔ＋ｅａ ｔｍ、１３　：１６１−１７２．１９８９）。

最近まで、ＭＰＡの抗腫瘍活性にあるメカニズムはほとんど理解されておらず、 プロゲステロン受容体との相互作用に帰するとされていた。しかし、このステロ イドは様々な動物組織において（Ｐｅ＋ｅｔ−ｔ’ａｌｔｃｉｏｓ他１．５ｔｅ ｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、１９　：１７２９−１７３５．１９８３　；　Ｊａ ｎｎｅおよびＢａ＋ｄｉｎ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、　Ｒｅｖ、３６　：　３５ ３−４２Ｓ、　１９８４　；　Ｐ＋１ｄｉｉａｎ他Ｊ、　５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉ ｏｃｈｅｍ、　２６　：　３１３−３１９．１９８７　；　０ｉａｓｓｏ他Ｊ、 　５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　２７　：２５５−２６９．１９８７）、 かつヒトの乳房腫瘍において（Ｙｏｕｎｇ　ａ　Ａｍ、Ｊ、　０ｂｓｌｅ＋、　 Ｇ７ｎｅｃｏ１．１３７　：　２８４−２９２．１９８０）、プロゲステロン（ ＰｇＲ）、アンドロゲン（Ａ　Ｒ）およびグルココルチコイド受容体（Ｇ　Ｒ） に対して高い親和性を示し、これは他の合成プロゲステロン誘導体と共通の特性 である（Ｂｕｌｌｏｃｋ池Ｅｎｄｏｃｒｉｎ＋＋１ｏＨ１０３・１７６８−１７ ８２．１９７８　；　ＪａｎｎｅおよびＢａｒｄｉｎ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｒ ｅｖ、３６　：　３５Ｓ−４２８，１９８４；　０ｉａｓｓｏ他１．５ｊｅｒｏ ｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　２７　：　２５５−２６９．１９８７）。プロゲステ ロン受容体（ＰｇＲ）に加えて、はとんどの合成プロゲステロン因子は高い親和 性によってアンドロゲン（ＡＲ）、およびグルココルチコイド（Ｇ　Ｒ）受容体 と結合し、それら個々の受容体系によって特異的に決定された生物学的作用を誘 発することが知られている（　Ｌａｂｒｉｅ他Ｆｅ＋ｔｉ１．　Ｓｔｅ＋ｉ１． ２８　：　１１０４−１１１２．１９７７　；　Ｅｎｇｅｌ他Ｃａｎｃｅｒ　Ｒ ｅｓ、　３８　：　３３５２−３３６４．１９７８　；　ＲＢｎａｕｄ他Ｉｎ： 　Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｌ　５ｌｅｒｏｉｄ　Ａｃｔｉｏｎ　（Ｇ、ｔ’、 　Ｌｅｖｉｓ、　Ｍ、　Ｇｒｉｓｂｕｒｇ、ｅｄｓ）　、　ＭａｃＭｉｌａｎｄ 　Ｐｒｅ＋＋、Ｌｏｎｄｏｎ、ｐｐ、　１４５−１５８．１９８１；Ｒ。

ｃｈｅｆｏ＋１およびＣｈａｌｂｏ＋、　Ｍｏ１．　Ｃｅ１１．　Ｅｎｄｏｃｒ ｉｎｏｌ、３６　：３−１０．１９８４　；　ｊｘｎｎｅおよびＢａｔｄｉｎ、 　Ｐｈａｒｍｘｃｏｌ。

Ｒｅｖ、３６　：　３５Ｓ−４２Ｓ、　１９８４　；Ｐｏ７ｅ＋およびＬａｂ「 ｉｅ、Ｍｏ１．　Ｃｅ１１．　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、４２　：　２８３−２８ ８．１９８５　：　Ｐｏｕｌｉｎ他１１ｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔ ｒｅａｔｍ、　１３　：１６１−１７２．１９８９）。したがって、プロゲステ ロン性以外のいくつかの副作用がＭＰＡを用いて治療された患者にみとめられて いる。

ゴナトロピン分泌におけるＭＰＡの抑制作用は、ラット（Ｌａｂ＋ｉｅ他Ｆｅ＋ ｔｉ１．　Ｓｌｅ＋ｉ１．２８　：１１０４−１１１２．１９７７　；　Ｐｃ＋ ｅｘ−Ｐａｌａｃｉｏ＋他１．５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、１９：１７２ ９−１７３５．１９８３）およびヒト（Ｐｅｒｅｒ−Ｐａｌａｃｉｕ他１．５ｔ ｕｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　１５　：　１２５−１３０．１９８１）において 下垂体ＡＲとのその直接相互作用を通して明らかに発揮される。さらに、ＭＰＡ はマウスの腎臓において（ＪａｎｎｅおよびＢａｒｄｉｎ、　Ｐｈａｒｍａｃｏ ｌ、　Ｒｅｙ、　３６　：　３５Ｓ−４２Ｓ、１９８０）　、かつラットの腹部 前立腺において（Ｌａｂｒｉｅ、Ｃ，他、１．５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ 、　２８　：　３７９−３８４．１９８７　；　Ｌａｂｒｉｅ　Ｃ，他Ｍｏ１． 　Ｃｅ１１．　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、６８　：１６９−１７９．１９９０）、 アンドロゲン作用を示す。ＡＲに対するその高い親和性にもかかわらず、ＭＰＡ は著しい男性化症状（座癒、多毛症など）を滅多に生じない（Ｈａｌｌｅｒおよ びＧ１１ｃｋ、　Ｓｅｍ１ｎ、　０ｎｃｏ１．１３．２−８．１９８６）。

最も簡単に説明されるＭＰＡの悪い副作用は、クッシング症候群、多幸症および 自覚的鎮痛を伴うそのグルココルチコイド様作用に関連する（ＭａＨｓｓｏｎ、 Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔ＋ｅａｔｍ、３　：２３１−２３５ ．１９８３　：　Ｂｌｏｓａｅ７他Ｃａｎｃｅ＋　５４　：１２０８−１２１５ ．１９８４　；　Ｈｏｒｌｏｂａｇ７ｉ　＠　Ｂｒｅａｒｔ　Ｃａｎｃｅ「Ｒｅ ｓ、Ｔｒａ）ｍ、　５　：　３２１−３２６％　１９　８　５　；　Ｖａｎ　Ｖ ｅｅｌｅｎ　他　Ｃａｎｃｅ「　Ｃｈｅｍｏｌｈｅｒ、Ｐｈｘｒｍａｃｏ１１５ 　：１６７−１７０．１９８５）。ＭＰＡによる副腎機能の抑制は、下垂体レベ ルのＡＣＴＨ分泌における抑制作用、および副腎レベルのステロイド生成の直接 抑制の両方によるものと思われる（Ｂｌｏｓｓｅ７他Ｃａｎｃｅｒ　５４　：１ ２０８−１２１５．１９８４　；　Ｖａｎ　Ｖｅｅｌｅｎ他ＣａｎｃｅｒＣｈｅ ｍｏｔｈｅｒ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、１５　：１６７−１７０．１９８５；Ｖａ ｎＶｅｅｌｅｎ他Ｃａｎｃｅｒ　Ｔｒｅａｔ、　Ｒｅｐ、　６９　：　９７７− ９８３．１９８５）。

ＡＲに対するその高い親和性にもかかわらず、ＭＰＡは著しい男性化症状（座癒 、多毛症など）をめったに生じない（Ｈａｌｌｅ＋および６１山、　Ｓｅｍ１ｎ 、　０ｎｃｏ１．　１３　：　２　８゜１９８６）。さらにゴナトロピン分泌に おけるその抑制作用は、ラット（Ｌａｂｒｉｅ他Ｆｅｒｆｉ１．　Ｓｊｅ＋ｉ１ ．２８　：　１１０４−１１１２．１９７７　；　Ｐｅｒｅｒ−Ｐｇ１ｇｃｉｏ ｇ他Ｊ、　Ｓ＋ｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　１９　：　１７２９−１７３５ ．１９８３）およびヒト（Ｐｅｒｃｘ−Ｐａｌａｃｉｏｇ他Ｊ、　５ｔｅｒｏｉ ｄ　Ｂｉａｃｈｅｍ、１５：１２５−１３０．１９８１）において下垂体ＡＲと のその直接相互作用を通して明らかに発揮される。さらに、ＭＰＡはマウスの腎 臓において（Ｊ’ａ’ｎｎｅおよび１ａｒｄｉｎ、　Ｐｂａｒｍａｃｏｆ、Ｒｅ ｖ、３６　：　３５Ｓ−４２Ｓ、１９８０）　、がっラットの腹部前立腺におい て（Ｌａｂｒｉｅ、　Ｃ，他、Ｊ、５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｔｕｍ、２８　＋ 　３７９−３８４、Ｌ　９８７　；　Ｌａｂｒｉｅ　Ｃ，他Ｍｏｌ、　Ｃｅ１１ ．　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、６８　：１６９−１７９．１９９０）、アンドロゲ ン作用を示す。

Ｐｏｕｌｉｎ他は、ｒＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞における酢酸メトロキシプロ ゲステロンによる細胞増殖のアンドロゲンおよびグルフコルチコイド受容体媒介 抑制Ｊ　（ＢｒｅａｓｔＣａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、Ｔ＋ｅａ１ｍ、　１３　：　１ ６１−１７２．１９８９）で、ヒトのＺＲ−７５−１乳癌細胞の成長における酢 酸メトロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）の抑制効果が主にその化合物のアンドロ ゲン特性によるものであるということを最近発見した。ＭＰＡのアンドロゲン特 性は他の器官系で論証されている（Ｌａｂｒｉｅ　Ｃ，他Ｊ、５ｊｅｔｏｉｄ　 Ｂｉｏｃｈｅｍ、　２８　：３７９−３８４．１９８７　；　Ｌｕｔｈ７他Ｊ、 ５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｃｍ、３１：８４５−８５２．１９８８　；　Ｐｌ ａｎｌｅ他Ｊ、　５ｊｅｒｏｉｄ　８ｉｏｃｈｅｍ、　３１　：　６１−６４． １９８８　；　［、ａｂｒｉｅ　Ｃ，他Ｍｏｌ、Ｃｅ１ｌ、　Ｅｎｄｏｃｒｉｎ ｏｌ、５８　：１６９−１７９．１９９０）。他の合成プロゲスチンもまた、そ れらのプロゲステロン様作用に加えて、様々な度合のアンドロゲン作用も有する ことが示されている（Ｌａｈｒｉｅ、他Ｆｅｒｊｉ１．５ｆｅｒｉｌ、３１：２ ９−３４．１９７９　；　ＰａＨ（およびｌ、ａｂｒｉｅ、Ｔｈｅ　Ｐｒｏｇｊ Ｎｅ　９　；　２３７−２４６．１９８６　；　Ｌｓｂｒｉｅ　Ｃ，他Ｊ、　３ １ｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　２８　：　３７９−３８４．１９８７；Ｌｕ ｊｈ７他Ｊ、　Ｓｔｅ「ｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　３１　：　８４５−８５２ ．１９８８　；Ｐｌａｎ＋ｅ他、Ｊ、５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　３１ 　：　６１−６４．１９８９）。

高投与プロゲスチン、特に酢酸メトロキシプロゲステロンおよび酢酸メゲストロ ールは子宮内膜癌の治療のためにうまく使用されてきた（　Ｔａｊｍａｎ他Ｅａ ｒ、Ｊ、　Ｃｕｃｅｒ　Ｃ１１ｎ、０ｎｃｏ１．２５　：１６１９−１６２１． １９８９　；　Ｐｏｄ＋Ｎｓ他Ｏｂ＋ｔｅ＋、Ｇｙｎｅｃｏｌ、　６６　：１０ ６−１１０．１９８５　；Ｅｈｒｌｉｃｈ他Ａｍ、　Ｉ、　０ｂｓｊｅ＋、　Ｇ ｙｎｅｃｏｌ、　１５８　：　７９７−８０７．１９８８）。アンドロゲン、メ チルテストステロンは子宮内膜症の症状を緩和することが示されている（Ｈａｍ ｂｔｅｎ、５ｏｕｔｈ　！Ｊｅｄ、１．５０　：　７４３．１９８７　；　Ｐｒ ｅｓｌｏｎ　０ｂｓｔｅＬ　Ｇｙｎｅｃｏｌ、２　：　１５２．１９６５　）　 ｏアンドロゲン性の男性化副作用（時として回復不能）は、しかしながら、テス トステロンおよびその誘導体のような強力なアンドロゲン性化合物では重大であ る。

乳癌の最初の処置としての高投与ＭＰＡはタモキシフェンと類似の効果を示した （　Ｖａｎ　Ｖｅｅｌｅｎ他Ｃａｎｃｅｒ　５８　ニア−１３，１９８６）。高 投与プロゲスチン、特に酢酸メトロキシプロゲステロンおよび酢酸メゲストロー ルもまた、子宮内膜癌の治療にうまく使用されている（　Ｔａｔｍａｎ他Ｅｕ＋ 、Ｊ、Ｃａｎｃｅ＋　Ｃｌ１ｎ、　０ｎｃｏ１．２５　：１６１９−１６２１． １９８９　；　Ｐｏｄ＋ａＨ池０ｂｓｌｅ１．　Ｇ７ｎｅｃｏ１．６６　：　１ ０６−１１０．１９８５　；　Ｅｈ「１ｉｃｈ他人ｍ、　Ｉ、　０ｂｓｌｅｊ　 Ｇ７ｎｅｃｏｌ。

１５８・７９７−８０７．１９８８）。高投与ＭＰＡは子宮内膜癌の治療のため に、タモキシフェンの場合と同様成功裡に使用されている（Ｒｅｎｄｉｎａ他Ｅ ｕ＋ｏｐ、１．０ｂｓｌｅＬ　Ｇ１＊ｅｃｏ１．　Ｒｅｐ＋ｏｄ、　Ｂｉｏｌ、 　Ｌ　７　：　２８５−２９１．１９８４）。

無作為の臨床試行において、６力月間投与された高投与Ｍ　Ｐ　Ａは、患者の５ ０％において疾患の消散を誘導し、被験者の１３％において部分消散を誘導した のに対して、プラシーボを受けた患者ではそれぞれ１２％および６％であること が示されている（Ｔｅｌｉｍａａ　＠　Ｇｙｎｅｃａｌ、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ ｌ、１３．１９８７）。

アンドロゲン、メチルテストステロンは子宮内膜症の症状を緩和することが示さ れている（Ｉ（ａｍｂｌｅｎ、５ｏｕｔｈ　Ｍｅｄ。

１．５０ニア４３．１９８７　；　ＰｒｅＳＩｏｎ、Ｏｂｓ＋ｅｊ、　Ｇｙｎｅ ｃｏｌ。

２　：１５２．１９６５）。アンドロゲン性男性化副作用（時として回復不能） はしかしながら、テストステロンのような強力なアンドロゲン化合物では重大で ある。

ヒト乳癌ＺＲ−７５−１細胞のアンドロゲン誘導された、エストロゲン受容体の 減少（Ｐｏｕｌｉｎ他Ｅｎｄｏｃ＋１ｎｏｌｏＢ１２５　：　３９２−３９９． １９８９）と同様、卵胞期の女性へのＭＰＡの経口投与によって、子宮内膜にお いて結合するエストロゲンのレベルが減少した（ＴｓｅｎｇおよびＧｕｒｐｉｄ ｅ、Ｊ、　Ｃ１１ｎ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、　Ｍｅｊａｂ、　４１．４０２− ４０４．１９７５）。

動物研究は、アンドロゲン不全がオステオベニアに至り、一方テストステロン投 与が全体的骨質量を増加させることを示している（　５ｉｌｂｅ＋ｂｅｒｇおよ び５ｉｌｂｅ＋ｂｅ＋ｇ　１９７１　；Ｆｉｎｋｅｌｓ＋ｅｉｎ他Ａｎｎ、　Ｉ ｌ、　Ｍｅｄ、　１０６　：　３５４−３６１．１９８７を参照）。ラットの畢 丸摘除は２力月以内に検出可能な骨粗しよう症を生じ得る（ＷｉｎｋｓおよびＦ ｅ１ｔｓ、　Ｃｌ１ｃｉｆ、Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｒｅｓ、３２　：　７７−８２．１ ９８０　；　ＶｅｔｂｘＳ他Ｃａ１ｉｆ、　Ｔｉ５ｓσｅ　Ｒｅｓ、３９　：　 ７４−７７．１９８６）。

低いＥ２循環レベルを有する多毛の過少月経および無月経の女性は骨質量が減少 していると予想されるが、高いアンドロゲン（しかし低いエストロゲン）レベル にあるこれらの女性は骨粗しよう症の進行の危険性が減少する（Ｄｉｘ。

ｎ他Ｃｌ１ｎｉｃａｌ　Ｅｎｄｏｃ＋ｉｎｏｌｏｇｙ　３０　：　２７１−２７ ７．１９８９）。

副腎のアンドロゲンレベルは骨粗しよう症において減少していることがわかって いる（　１ｌｏｔｄｉｎ他１．　Ｃｌ１ｎ、Ｅｎｄ。

ｃｒ、　Ｍｅｌａｂ、　６０　：　６５１．１９８５）、さらに、閉経後の女性 におけるアンドロゲンの増加が骨欠損の促進を防ぐことが示されている（Ｄｅｕ ｆｓｃｈ他１ｎｊ、Ｊ、Ｇｙｎｅｃｏｌ、　０ｂｕｅｔ、２５：２１７−２２２ ．１９８７　；　Ａｌｏｉａ他１ｕｃｈ、Ｉｎ１、Ｍｅｄ、１４３　：１７００ −１７０４．１９８３）。このようなアンドロゲンの役割に一致して、尿のアン ドロゲン代謝産物のレベルは対抗する対照群よりも閉経後の症候的な閉経におい て低く、複合デヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）の著しい減少が骨粗し よう症患者の血漿に見られた（ＨｏｌｌｏおよびＦｅｂｅｒ、　＾ｃｌａ　Ｍｅ ｄ、Ｈｕｎｇ、２０　：　１３３．１９６４；　Ｔｏｉｓ＋およびＶｉｎｃｅｎ ｌ、Ｊ、Ｃｌ１ｎ、Ｏ＋＋ｂ＋＋ｐ、１８：１９９．１９６１；Ｈｅ１ｌｏ他Ａ ｃｔｘ　Ｍｅｄ、　Ｈｕｎｇ、　２７：１５５．１９７０）。閉経後の骨粗しよ う症は低エストロゲン症および低アンドロゲン症の双方から生じることが示唆さ れてさえいる（Ｈｏｌｌａ他Ｌａｎｃｅｔ　：　１３５７．１９７６）。

骨粗しよう症におけるエストロゲンおよびアンドロゲン両方の、上に示唆された 役割のためのメカニズムとして、骨芽細胞中のエストロゲン（Ｋｏｍｍ他５ｃｉ ｅｎｃｅ　２４１　：８１−８４．１９８８　；Ｅ＋１ｋｓｅｎ　＠　５ｃｉｅ ｎｃｅ　２４１　：　８４−８６．１９８８）、およびアンドロゲン（Ｄｏ　ｌ 　ｖ　ａ　ｒ　ｄ他Ｐｔｏｃ、Ｎａ１１．　Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、８６　：　８５ ４−８５７．１９８９）受容体の存在が、エストロゲンおよびアンドロゲン枯渇 後に観察される骨吸収の増加を説明し得る。

正常な青春期にある少年では、血清テストステロンレベルの増加がアルカリホス フェート活性（骨芽細胞活性のマーカ）の増加に先行し、それはそれ自体が骨密 度の増加に先行する（　Ｋ＋ａｂｂｅ他Ａｒｃｈ、Ｄｉｓ、　Ｃｈｉｌｄ、　５ ４　：　９５０−９５３．１９７９　；　Ｋ＋ａｂｂｅ他＾＋ｃｈ、　Ｐｅｄｉ ａｔ、　５ｃａｎｄ、　７３　：　７５０−７５５．１９８４；Ｒ１１ｓ他Ｃａ １ｉ１．　Ｔｉ５ｓｕｅＲｅｓ、３７：２１３−２１７．１９８５）。

女性では、閉経期に始まる急激な骨欠損があるが、男性の骨欠損は約６５歳で認 識され得る（Ｒｉｇｇｓ他１．　Ｃｌ１ｎ。

ＩｎｖｅＮ　６７　：　３２８−３５５．１９８７）、著しい骨欠損が男性では 約８０歳で見られ、股関節部、を椎および手板骨折の発生を伴う。いくつかの研 究によって、骨粗しよう症は男性ではアンドロゲン不全の臨床上の症状発現であ ることが示される（Ｂａｒａｎ他Ｃａ１ｃｉ１．　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｒｅｇ、２６ ：１０３−１０６．１９７８；０ｄｅｌｌおよび５ｖｅｒｄｌｏｆ＋、　ＷｅＩ Ｌ　］、］Ｍｅｄ、１２４：４４６−４７５１９７６；ＳｍＨｈおよびＷａｌｋ ｅｒ、Ｃａ１ｉ１．　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｒｅｓ、　２２　（Ｓｕｐｐｌ、）　：　 ２２５−２２８．１９７６）。

女性はど頻繁ではないが、骨粗しよう症は男性において著しい罹病率を生じ得る （　Ｓｅｅｍａｎ他＾ｍ、　Ｊ、　Ｍｅｄ、　７５　：９７７−９８３．１９８ ３）。実際、アンドロゲン不全は男性の背髄圧迫に対して危険性が高い（Ｓｅ！ ｍａｎ　ａ　Ａｍ、Ｊ、Ｍｃｄ、７５　：９７７−９８３．１９８３）。放射状 を髄骨密度の減少は過プロラクチン血症（Ｇｒｅｅｒｐａｎ他＾ｎｎ、Ｉｎ１、 Ｍｅｄ、１０４　：　７７７−７８２．１９８６）またはアナオレクシアネルボ サ（ａｎａｏｒｅＩｉａ　ｎｅｔｖｏｓａ　）　（ＲｉｇｏＨｉ他ＩＡＭＡ　２ ５６　：　３８５−２８８．１９８６）に関連した性機能低下を伴う。しかし、 これらの場合、過プロラクチン血症および体重損失の役割ははっきりわからない 。

オスの性機能低下は骨粗しよう性骨折のよく知られた原因である（　Ａｌｂ＋ｉ ｇｈｌおよびＲｅ１ｎｆｅｎｓｔｅｉｎ、　１９８４　；　５ａｙｉｌｌｅ、　 Ｃｌ１ｎ、　Ｅｎｄ、　Ｍｅｌａｂ、　２　：　１７７−１８５．１９７３）。

骨密度は実際、−次および二次性機能低下の両方において減少する（Ｖｃｌｅｎ Ｈａｓおよびにａｔｌａｓ、　Ｎｏｕｖ、Ｐｒｅｓｓｔ　Ｍｅｄｉｃａｌｅ　１ ０　：　２５２０．１９８１）。

皮質および小柱の骨密度の減少によって明らかになるような重症のオステオベニ アが、２３人の下垂体性機能不全により性機能が低下した男性で報告された（Ｆ ｉｎｋｅｌｓｌｅｉｎ他Ａｎｎ、　Ｉｎｔ、　Ｍｅｄ、　１０６　：　３５４− ３６１．１９８７；ＦａｔｅＳ＋ａ　＠　Ｉ（ｏ＋ｍ、　Ｍｅｔａｂ、　Ｒｅｓ 、　１５　：　５６−５７．１９８３）。オステオベニアはまた、クラインフェ ルター症候群の男性でも報告されている（Ｆｏｒｅｓｔａ他Ｒｏａｍ、　Ｍｅｔ ａｂ、　ｂ＋、１５：２０６−２０７．１９８３　；　Ｆｏ＋ｅｓｌａ他Ｈａｒ ｍ、　Ｍ！ｌａｂ、　Ｒｃ＋、　Ｌ　５　：　５６−５７．１９８３；Ｓｍ１ｔ ｈおよびＷａｌｋｅ＋、　Ｃａ１ｉｆ、　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｒｅ’ｓ、２２　：　 ２２５−２２８．１９７７）。

カルシトニンに対する、アンドロゲン可逆性の低下した感受性が去勢後のラット において説明されている（Ｏｇａｊｉ他Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇ７８７　：　 ４２１．１９７０；　Ｈｏ１ｌｏ他Ｌｉｎｅｅｌ　１　：１２０５．１９７１； ＨＯＩＩＯ他Ｌａｎｃｅｔ　１　：　１３５７．１９７６）。さらに、血清カル シトニンは性機能が低下した男性では減少することがわかっており（Ｆｏｒｅｓ ｔ！他Ｈｏｒｍ、　Ｍｅｌａｂ、　Ｒｅｓ、１５　：　２０６−２０７．１９８ ３）、去勢されたラットのテストステロン治療はカルシトニンの低カルシウム血 症作用を高める（ＭｃＤｅ＋ｍａ目およびＫｉｄｄ。

Ｅｎｄ、　Ｒｅｖ、　８　：　３７７−３９０．１９８７）。

Ａｌｂ＋ｉｇｈ＋およびＲｕｆｅｒｓｔｅｉｎ　（１９４８）は、アンドロゲン が骨基質の合成を高めることを初めて示唆した。アンドロゲンはニワトリにおい て類骨の合成および無機質化を高めたことも示されている（ＰｕｃｈｅおよびＲ ｏｓｍａｎｏ、　Ｃｓ１ｉｆ、　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｒｅｓ、　４　：　３９−４７ ．１９６９）。性機能が低下した男性におけるアンドロゲン治療は骨格成長およ び成熟を高める（ＷｅｂｓｔｅｒおよびＨｏｇｋｉｎｓ、　Ｐ＋ｏｃ、　Ｓａｃ 、　ＥｘｐＢｉｏｌ　Ｍｅｄ、４５　：　７２−７５．１９４０）。さらに、男 性におけるテストステロン治療は正の窒素、カルシウムおよびリン酸塩バランス を生じることが示されている（Ａｌｔｕｉ（ｈｔ、Ｆ、、Ｒｅｉ［ｅｉｎｓｔｅ ｉｎ、　Ｅ、Ｃ，ｌｎ：Ｔｈｔ　Ｐａ＋ａｌｈ７ｒｏｉｄ　ｇｌａｎｄｓ　ａｎ ｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｃ　ｂｏｎｅ　ｄｉｓ！Ｒｓｅ、　Ｗｉｌｌｉａｍｔ　ａ ｎｄ　ＷｉｌｌｉａｍｓＣｏ、　：　Ｂａｌ＋ｉｍｏｒｅ、　ｐｐ、　１４５− ２０４．１９４８）、骨組織形態計測によって研究されるように、性機能が低下 したオスにおけるテストステロン治療の結果、相対的類骨体積、類骨総表面、骨 形成および骨無機質化の直線的な伸張が増える（Ｂａ＋ａｕ他Ｃａ１ｃｉｌ、Ｔ ｉ５ｓｕｅ　Ｒｅｓ、　２６　：　１０３−１０６．１９７８）。

テストステロンを用いた治療は、類骨表面および梁幅を不変のまたは低下した反 対の比率で増やし、したがって骨無機質化比率の増加を示すことが示されている （Ｐｅａｃｏｃｋ他Ｂｏｎｅ　７　：２６１−２６８．１９８６）、おそらく尿 細管のリン酸塩再吸収における作用による、プラズマホスフェートの減少もあっ た（Ｓｅｌｂ７他Ｃｌ１ｎ、Ｓｃｉ、６９　：　２６５−２７１．１９８５）。

性機能が低下した過プロラクチン血症の男性では、畢丸の機能が正常化されると 皮質の骨密度が増加する（Ｇ＋ｅｅｎｓｐａｎ　＠　Ａｎｎ、　ｌｎ１．　Ｍｅ ｄ、　１０４　：　７７７−７８２．１９８６　；　Ｇｒｅｅｎ＋ｐａｎ他Ａｎ ｎ、　Ｉｎ１．　Ｍｅｄ、　１−１０　：　５２６−５３１．１９８９）。テス トステロン治療は一次性機能低下の男性における骨形成を高める（Ｂａｃｏｎ他 Ｃａ１ｃｉ１．　Ｔｉ５ｓｕｅＲｅｓ、２６　：１０３−１０６．１９７８　； 　Ｆ＋ａｎｃｉｓ他Ｂｏｎｅ７：２６１−２６８．１９８６）。

他に類のないＧｎＲＨ不全である２１人の性機能が低下した男性において、１２ 力月間より長い血清テストステロンの正常化は骨密度を増加させた（Ｋｉｎｋｅ ｌｓｔｅｉｎ他１．Ｃ１１ｎ、　Ｅｎｄｏｃｔ、　Ｍｅｌａｂ、６９　：　７７ ６−７８３．１９８９）。

しかし、既に置端を融合された男性では、皮質の骨密度が著しく増加するが、小 柱骨密度には著しい変化が観察されず、したがって、このことは以前示唆された ステロイド治療に対する皮質および小柱骨の可変感受性を支持する。

少数の患者におけるアナポリックステロイドを用いた以前の研究は骨における正 の効果を示唆した（　Ｌａ［ｆｅ＋＋７他Ａｎｎ、Ｊ、　Ｍｅｄ、３６　：　５ １４−５２８．１９６４；Ｒｉｇｇｓ他１．　Ｃｌ１ｎ、　１ｎｙｅｓ１．５１ 　：　２６５９−２６６３．１９７２　；　Ｈａｔｔｉｓｏｎ他Ｍｅｔａｂｏｌ ｉｓｍ　２０　：１１０７−１１１８．１９７１）。より最近では、パラメータ として中性子活性化によるトータルボディカルシウム測定法を使用して、アナポ リックステロイド、メタアンドロステノロンは閉経後の骨粗しよう症における二 重盲検研究において正の、比較的長期（２４−２６力月）の効果を示した（　（ １）Ｈｓｎｕｌ他Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　２６　：　２６７−２７７．１９７７ 　；　Ａｌｏｉａ他Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　３０　：１０７６　１０７９．１９ ８１）。

アナポリックステロイド、ナンドロロンデカノエートは骨粗しよう症の女性にお ける骨吸収を減少させ（ＤｅｑｕｅｋｅｒおよびＧｅｕｓｅｎｓ、　Ａｃｊａ　 Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、　２７１　（Ｓｕｐｐｌ、）　：４５−５２．１９８５ ）　、それはエストロゲン治療中に観察された結果と一致する（　Ｄｅｑｕｅｋ ｅｒおよびＦｅｒｉｎ、１９７６、Ｄｅｑｕｅｋｅ＋およびＧｅｕｓｅｎｓを参 照）。このようなデータは、ナンドロロンデカノエートが骨吸収を低下させたラ ビットおよびイヌにおける実験データを確証する（　Ｏｈｅｍ他Ｃｕｒｒ、　Ｍ ｅｄ、　Ｒｅｓ、　０ｐｉｎ、　６　：　６０６−６１３．１９８０）。さらに 、骨粗しよう症の女性において（Ｄｅｑｕｅｋｅ＋およびＧｅｕ＋ｅｎｓ、　Ａ ｃｔａ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ　（Ｓｕｐｐｌ、）　２７１　：　４５−５２． １９８５）、アナポリックステロイドは骨欠損を低下させるのみならず、骨質量 を増加させた。他方、ビタミンＤ治療は骨吸収を低下させただけであった。

ナンドロロンを用いた閉経後の女性の治療は、皮質の骨無機質含有量を増加させ た（ＣＩｉｎ、　０ｒｔｈｏｐ、２５５　：　２７３−２７７）。しかし、アン ドロゲンの副作用が患者の５０％で記録された。このようなデータは興味深い、 それはほとんどの治療法が骨欠損阻止に限定されているのに、アナポリックステ ロイド、ナンドロロンの使用では骨質量の増加が見られたからである。アンドロ ゲンによる類似の骨形成の刺激が性機能が低下したオスにおいて示唆されている （Ｂａ＋ａｎ他Ｃａ１ｃｉ１．　Ｔｉ５ｓｕｅ　Ｒｅｓ、　２６　：　１０３． １９７８）。カルシウム、カルジトリオールまたはホルモンを用いて骨吸収を抑 制する養生法の問題点は、それらがほぼ確実に骨形成の抑制に至ることである（ 　Ｎｅｅｄ他Ｍｉｎｅｒａｌ。

Ｅ！ｅｃ＋＋ｏｌｙｔｅ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　１１　：　３５．１９８５） 。＾１ｂ＋ｉｇｈ＋およびＲｅ１ｔｅ＋ｓ＋ｅｉｎ　（１９４８）　（Ｎｅｅｄ 、　Ｃｌ１ｎ、　Ｏｒ＋ｈｏｐ、２２５　：　２７３．１９８７）は、骨粗しよ う症が骨形成の低下に関連し、テストステロン治療に応答するであろうと示唆し たが、アンドロゲンの男性化作用により、それらは閉経後の女性の治療に不適切 なものとなった。男性化作用がわずかな化合物であるアナポリックステロイドが 続いて開発された。あるものでは最小の作用が報告されていたが（Ｗｉｌｓｏｎ およびＧｒｉｌｌｉｎ、　Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　２８　：　１２７８．１９８ ０）、より正の結果も報告された（　Ｃｈｅｓｓｎｕｔ他Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ 　３２　：　５７１−５８０．１９８３．　Ｃｈｅｓｓｎｕｌ他Ｍｅｔａｂｏｌ ｉｓｍ　２６　：　２６７．１９８８　；　ＤｅｑｕｅｋｅｒおよびＧｅｕｓｅ ｎｓ、　Ａｃｊａ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、　（Ｓｕｐｐｌ、　１１０）２７１ ：４５２．１９８５）。閉経後の女性における無作為の研究では、アナポリック ステロイド、スタナゾロールを用いた治療の間、はとんどの患者において副作用 が記録されたにもかかわらず、総置質量の増加が示された（　Ｃｈｅ＋５ｎｕｌ 他Ｍａｔａｂｏｌｉ＋ｍ　３２　：５７１−５８０．１９８３）。

上に述べたように、乳癌の標準的治療法に使用される「プロゲスチン」　（たと えば酢酸メトロキシプロゲステロン）の投与は望ましくない重大な副作用（たと えばグルココルチコイド受容体とのステロイドの相互作用に関連するもの、特に クッシング症候群、多幸症）が伴われる（Ｍａｎｓｏｎ　Ｂ＋ｅａｓｔ　Ｃａｎ ｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔｒｅａ＋ｍ、３　：　２３１−２３５．１９８３　；Ｂｌ ｏｓｕｙ　ｆｔｔｌ　Ｃａｎｃｅｒ　５４　：１２０８−１２５５．１９８４　 ；　Ｈｏ＋ｔｏｂａｇ７ｉ他Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅ＋　Ｒｅｓ、　Ｔｒｅａ ｌｍ。

５：３２１−３２６．１９８５　；　Ｖａｎ　Ｖｅｅｌｅｎ他ＣａｎｃｅｒＣｈ ｅｍｏｔｈｅ（Ｐｈａ＋ｍａｃｏ１．　１５　：　１６７−１７０．１９８５） 。　語「プロゲスチン」はプロゲステロンおよびテストステロンの誘導体のこと を述べている。このようなプロゲスチンは、プロゲステロン受容体にプロゲステ ロンの類似体として作用する化合物を開発する目的で、特に受精能の制御のため に、時として合成されている。しかし、新たなより正確なテストを行なうことが できるようになると、もっばらプロゲステロン受容体のみと相互に作用するよう に本来作られたこのような化合物がアンドロゲン受容体ともしばしば高い親和性 で相互に作用することが明らかになった（　Ｌａｂ＋ｉｅ他Ｆｅ＋ｔｉｌ　Ｓｔ ｅ＋ｉ１．２８　：１１０４　：Ｌ１１２．１９７７　；　Ｌａｂ＋ｉｅ他Ｆｕ ｌｉ１．　Ｓｌｅ口１．３１：２９−３４．１９７９　；　ｌ、ａｂ＋ｉｅ、　 Ｃ０他１．５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　２８　＋　３７９−３８４．１ ９８７　；　Ｌａｂ＋ｉｅ、　Ｃ，他Ｍａｔ、　Ｃｅ１１．　Ｅｎｄｏｃ＋１ｎ ｏ１．　６８：１６９−１７９．１９９０）、これらの化合物のアンドロゲン活 性は時として、特に低濃度で真のプロゲスチン活性よりも大きくなる。これはた とえば酢酸メトロキシプロゲステロンの場合である（　Ｐｏｕｌｉｎ他Ｂｒｃａ ｌｌ　Ｃａｎｃｅ＋　Ｒｅｓ、　Ｔ＋ｅａ１ｍ、１３　：　１６１−１７２．１ ９８９）。

合成プロゲスチンを用いた乳癌および子宮内膜癌の先行技術の治療の問題点は、 そのような治療によって観察される副作用である。乳癌の別の一般的治療法であ るエストロゲンの阻害は、女性の骨質量に望ましくない有害な作用を及ぼすであ ろう。同様に、子宮内膜症の一般的治療法であるエストロゲンの阻害は、女性の 骨質量に類似の望ましくない有害な作用を及ぼす。

より長い時間期間の避妊が可能な避妊薬の調製物が過去２５年にわたって開発さ れてきた。これは注入後本質的な長い作用を有するステロイドを含む（たとえば 、デポプロペラ、またはより最近では外部からのデリバリ−系の使用を介して、 たとえばインブラント、ミクロ球体、膣リング、ＩＵＤなど）。今日では、ＭＰ Ａおよびノルエチステロン（Ｎ　Ｅ　Ｔ）−エナンタートが家族計画プログラム に使用される。１９８５年には、４００万人の女性がＭＰＡを摂取しており、は ぼ１００万人がＮＥＴ−エナンタートを摂取していると推定された（Ｈａｌｌ、 Ｐ、Ｅ、、Ｌｏｎｇ−ａｃｔｉｎｇ　１ｎｊｅｃｔａｂｌｅ　ｐｒｅｐａｒａ＋ １ｏｎｌ　Ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ　Ｒｅｇｕｌａｉｏｎ、　Ｔｏｄａ７　ａｎｄ　 Ｔｏｍｍａ「「ｏｗ　（ＤｉｃｚｌａｌｕＢ、Ｅ、、Ｂ７ｄｅｍａｎ、　Ｍ、、 ｅｄｓ）　、　Ｒｘｖｅｎ　Ｐｒｅｓｓ：　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、ｐｐ、　１１９ 　１４１．１９８７）、さらに、ラテンアメリカの５０万人の女性および中国の １００万人の女性がプロゲストゲンおよびエストロゲンを含む様々な１力月に一 度注入可能な調製物を摂取していると推定される（Ｈａｌｌ、１９８７、上記と 同じ）。より長い時間期間にわたって防御が可能な避妊調製物が過去２５年間に わたって開発されている。

２つの長時間作用性避妊ステロイドがＣｏｎｔｒｘｃｅｐ＋ｉｏｎ。

１９７７年５月、ｖｏｌ、１５、ｎｏ、５、ｐｐ、５１３−５３３に概観される 。

エストラジオールシピオネート５ｍｇと組合わされたデポプロペラ（２５ｍｇ） が受精能制御のために１力月に一度（注入）与えられていた（ＷＨＯ，５ａｉｄ 他Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ、３７：１−２０．１９８８）。ノルエチステロ ンエナンターｈ５０ｍｇおよび吉草酸エストラジオール５ｍｇの１力月の一度の 注入と比較すると、効能および副作用の違いはわずかじか見られなかった。１力 月に１万Å以上の女性が各群で研究された。ＭＰＡ−Ｅ２シピオネートの組合わ せは、１力月に１０９６９人の女性から妊娠が観察されなかったので、避妊薬と して有効性が高かった。１力月に一度の注入を使用した女性の中断率は１年に３ ５％と比較的高＜　（ＷＨＯ，５ａｉｄ他ＣｏｎＨａｃｅｐｔｉｏｎ、　３７　 ：　１１−２０．１９８８）、不整出血を伴ったのは女性の約６．１％にすぎず 、無月経を伴ったのは女性の約２．１％であった。注入の遅れ、個人的理由およ びフォローアツプの失敗が中断者の１８．６％に上った。このようなデータはよ り簡単に受け入れられる投与スケジュールの必要性を示す。

１力月に２０４９８人の女性に単独で使用された（１５Ｑｒ１ｇＳ　１．Ｍ、３ 力月ごと）デポＭＰＡ　（デポプロペラとも呼ばれる）は、妊娠率０．１±０． １％、不整出血１５．０±１．０％、および無月経の発生率１１．９±１゜０％ を示したＵＨＯ，５ａｉｄ他Ｃｏｎｔ＋ａｃｅｐ＋ｉｏｎ、３７　：　１−２０ ．１９８８）。より小規模な研究（１力月に５４３４人の女性）では、同じ投与 量で、デポＭＰΔは中断率４０゜７±２．０％に至り、不整出血および無月経は 患者の１４゜７±１．５％に生じた。

以前のＳｉ　Ｐ　Ａの使用は、経口投与または筋肉注射（デポプロペラ）による ものであった。経口投与は応答性および血液レベルの変動の問題によって制限さ れたが、デポプロペラ注射からのＭＰＡの放出は最初は急速であり、時間間隔が 後になるほど高い可変態様で下降する。したがって規定された長い時間期間の間 一定量のステロイドを配達して、患者の応答性を保証し、治療が必要なとき組織 へ一定血液レベルの薬剤を配達することよって効能を増加する制御されたＭＰＡ 放出製剤が必要である。同様な議論がＭＧＡにも当てはまる。

マイクロカプセル化されたドラッグデリバリ−システムは、治療薬の放出の制御 のために過去３０年間、特にポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（ε−カプロラ クトン−ＣＯ−ＤＬ−乳酸）、ポリ（ＤＬ−乳酸）、ポリ（ＤＬ−乳酸−ＣＯ− グリコール酸）およびポリ（ε−カプロラクトン−ＣＯ−グリコール酸）のよう な生分解性ポリエステルの中に活性剤を取込むことによって広く開発されてきた 。

たとえば、Ｒ，Ｗ、Ｂａｋｅｒ　（ＲＪ、　Ｂａｋｅｒ、　Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅ ｄ　＋ｅｌｅａｓａ　Ｏｆ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａ’１ｌｙａｃｔｉｖｅ　ａｇｅ ｎｔｓ、Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｃ７　ａｎｄ　Ｓ。

ｎ５Ｅｄ、、Ｎ、　Ｙ、　１９８７）、Ｆ、Ｉ、ｉｍ　（Ｆ、Ｌｉｍ、Ｂｉｏａ ｕｄｉｃａ１４ｐｐｌｉｃａｉｏｎ　Ｏｆ　Ｍｉｃ＋ｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉ ｏｎ、Ｆ＋ａｎｋｌｉｎ　Ｌｉｍ、Ｅｄ。

ＣＲＣＰｒｅｓｓ、ＢｏｃａＲａｔｏｎ、　１９８４）を参照されたい。

米国特許第３．７７３．９１９号において、Ｇ、Ａ、　ＢｏＳｖ！ｌｌおよびＲ ，Ｌ　Ｓｃ＋１ｂｎｅ＋は、薬剤の遅い持続放出性のためのポリラクチド薬剤混 合物、特に酢酸メドロキシプロゲステロンのようなステロイドの使用を開示して いる。

Ｄ　Ｅ　３．５０３．６７９号において、ｃｌｒｌｌは水膨張性水不溶性ポリマ ーとの組合わせによる酢酸メトロキシプロゲステロン製剤を開示している。

Ｗ　ｏ　８．８０７．８１６号において、Ｒ，Ｊ、Ｌｅｏｎｓ＋ｄは、持続放出 性移植として有用な融合再結晶ステロイド薬剤ペレットを開示している。

米国特許４．８１８．５４２号において、Ｄｅｌｕｃｘ他は、ドラッグデリバリ −のための多孔性ミクロ球体の使用および生産を開示している。

Ｄ　Ｅ　２．０１０．１１５号において、Ｆ＠ｒｂｅｎｌａｂ＋１ｋｅｎ　Ｂａ ７ｅ＋　ＡＧは、遅延された薬物の放出のための固体の噴霧可能な微粒子の調製 を開示している。

米国特許第４，１６６．８００号において、Ｆ、　Ｗ、　Ｆａｎｇは、低温で相 分離剤を添加することによるミクロ球体の生産を開示している。

米国特許第４．８９７．２６８号において、Ｔｉｃｅ他は、カプセル化のための ポリ（ＤＬ−ラクチドーコーグリコリド）を含むドラックデリバリ−システムを 開示している。

米国特許第４．１０７．０７１号において、Ｒ，Ｇ、　Ｂａ７１ｅｓｓは、エチ レンおよび酢酸ビニールの部分的に加水分解された共重合体のマイクロカプセル の調製を開示している。

Ｄ　Ｅ　２．０５１．５８０号において、Ｄｏ　Ｐｏｎ１　ａｎｄ　Ｃｏは、放 出制御非経口ペレットの調製を開示している。

米国特許第４．６２２．２４４号において、Ｌａｐｋａ他は、相分離による粒子 または材料のカプセル化、および低温におけるマイクロカプセルの分離を開示し ている。

米国特許第４．９８７．２６８号において、Ｅ、Ｓ、　Ｎｕｖａ７ｓｅｒおよび 戴　＾、Ｎｕｃｅｌｏｌａは複合核微粒子の調製を開示している。

Ｗｉｓｅ他（Ｄ、Ｌ、　Ｗｉｓｅ　Ｌａｃｔｉｃ／　Ｇ１７ｃｏｌｉｃ　Ａｃ１ ｄ　Ｐｏｌｙｍｕｓ、Ｂｉｏｌｏｇｙ　＆　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、　Ｇ、　Ｇ＋ｅ ｇｏ＋１ａｄｉｓ　ｅｄ、、　Ｎｅｗ　Ｙｏｌｋ　Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｏ５ｔ 、　ＰＰ、　２３７−２７０．１９７９）は、薬剤における乳酸／グリコール酸 （共）重合体の適用を説明している。Ｌｅｖｉ　ｓのｒｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　 Ｒｅ１ｅａｓｅ　ｏｆ　Ｂｉｕｃｌｉｖ！Ａｇｅｎｊｓ　ｌｏｏｍ　Ｌａｃ＋ｉ ｄｅ　／　Ｇ１７ｃｏｌｉｄｅ　ＰｏｌｙｍｅｒｓＪ　、Ｄｒｕｇ　ａｎｄ　Ｐ ｈａｒｍｃｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ、マｏｔ、４５、ｐｐ、１−４１ ．１９９０も参照されたい。

な持続放出性調製物は、ラットにおいて２カ月間均一な放出を示した（　Ａｎｄ ｅ＋ｓｏｎ他ＣｏｎＨａｃｅｐｊｉｏｎ　１３　：　３７５−３８４．１９７６ ）。低温で粉砕されたサイズが９０−１．８０μｍの粒子は、Ｌ（＋）乳酸から 分子量２００，０００へ合成された生分解性ポリマーマトリクスに組込まれた２ ０％のノルエチステロンを含んだ。重量が９０部のし一ラクチドおよび１０部の グリコリドから２００，０００の分子量へ合成されたポリマー中に２０％のノル エチステロンを含む調製物（粒子サイズ９０−１８０μｍの粉末）は、ヒヒに約 ２カ月間化合物を放出した（Ｇｒｅｓｓｅ＋他Ｃａｎｕａｃｅｐｔｉｏｎ　１７ ：２５３−２６６．１９７８）。しかし、ラットに見られたゼロの放出率は、霊 長類において行なわれたこの研究では確認されなかった（　ＢｅｃｋおよびＴｉ ｃｅ。

Ｉｎ　Ｌｏｎｇ　ａｃｔｉｎｇ　５ｔｅｒｏｉｄ　ｃｏｎｔｒａｃｅｐｌｉｏｎ 　（Ｄ、Ｒ，Ｍｉｓｈｅｌｌ、ｃｄ）　Ｒａｖｅｎ　Ｐ＋ｅ＋ｓ　：　Ｎｅｗ　 Ｙｏｌｋ、　ｐｐ、１７５−１９９．１９８３）。注射可能なりＬ−ＰＬＡ　Ｎ ＥＴマイクロカプセルシステムは、生体内条件下で詳細に研究された唯一の形で ある（　ＢｅｃｋおよびＴｉｃｅによる検討、Ｉｎ　Ｌｏｎｇ　ａｃｔｉｎｇ　 ｕｅ＋ｏｉｄ　ＣＱｎｌ＋ａＣｅｐｌｉＯｎ　（Ｄ、Ｒ，Ｍｉｓｈｅｌｌ、　ｅ ｄ）　ＲａｖｅｎＰ＋ｅ＋ｓ　：　Ｎｅｗ　Ｙｏｌｋ、ｐｐ、１７５−１９９． １９８３）。

微粒子の調製のために使用されるほとんどの技術は、かなりのパーセンテージで 残留する有機溶媒の使用を必要とし、それは局部的または全身に望ましくない有 毒効果を生じ得る。他の先行技術は、ステロイドおよび／またはポリマーの望ま しくない強力な熱分解を伴う高温の使用を必要とする。

ＭＰＡおよび酢酸メゲストロールを用いた乳癌および子宮内膜癌の先行技術の治 療の問題点は、このような治療で観察される副作用である。ノルゲストレル、ノ ルエチステロンおよびノルエチンドロンのような１９−ノルテストステロン誘導 体の使用の問題点は、このような化合物がニストロケン活性を有することである （Ｖｉｌｃｈｉ＋他１．　Ｓｔｅｍ。

Ｂ：ｏｃｈ＋ｍ、２４　：　５２５−５３１．１９８６　；　Ｌａｒ＋ｅａ他Ｊ ５１！Ｔ　：ｌｕｃｈｅｍ、２７　：　６５７−６６３．１９８７；Ｐｏｕｔｉ ｎ池Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅ＋　Ｒｅ＋、Ｔ＋ｅ＠ｔｍ　１７　：　１９７− ２１０．１９９０）。このようなエストロゲン活性は使用が長期にわたると乳癌 発生率に負の効果を十分有し得る。

したがって、酢酸メトロキシプロゲステロンおよび酢酸メゲストロールの注射可 能な長時間作用性デリバリ−システムのエストロゲン依存性疾患（ならびに骨粗 しよう症および避妊）の治療および予防技術には、長い時間期間（たとえば１力 月以上）低レベルでそれらのステロイドの循環濃度を維持することができ、かつ 有毒な残留有機溶媒、および／または余分の熱に治療製剤をさらすことによって 生じる熱劣化不純物をごく少量しか含まない必要がある。

特に避妊および予防目的で、男性化作用をごくわずかしか有さないＭＰＡ、ＭＧ Ａ、または他のアンドロゲン化合物の長期デリバリ−システムは、健康管理シス テムのコストにプラスの影響を与えるべきである。

発明の概要 この発明の目的は、望ましくない副作用を実質的に回避して、乳癌、子宮内膜癌 、骨粗しよう症および子宮内膜症を予防および治療するための方法を提供するこ とである。

この発明の別の目的は、様々なエストロゲン感受性疾患を治療するためにエスト ロゲン形成および／または作用が阻害される、女性における骨欠損の予防のため の方法を提供することである。エストロゲン感受性疾患は、その発症、維持また は経過がエストロゲンによって誘発される生物学的作用に少なくとも部分的に依 存するいかなる疾患をも含む。たとえば、エストロゲン関連疾患は、乳癌、子宮 内膜癌、骨欠損、子宮内膜症および骨粗しよう症を含むが、それらに限定される ものではない。

この発明の別の目的は、月経の後に低エストロゲンを既に受けた女性における骨 欠損の予防のための方法を提供することである。

この発明の別の目的は、この中に説明される方法において使用するためのキット および製薬組成物を提供することである。

この発明の別の目的は、ヒトを含む温血動物において、より長い時間期間、低レ ベルでアンドロゲンの循環濃度を維持するミクロ球体または微粒子を提供するこ とである。

このような粒子は上述の目的のためと同様避妊のためにも有用である。

この発明の別の目的は、ヒトおよび他の哺乳類において望ましくない副作用を実 質的に回避して、エストロゲン関連疾患の治療または予防のために治療上有効量 の放出制御酢酸メトロキシプロゲステロンまたは酢酸メゲストロールを使用する 方法を提供することである。

この発明の別の目的は、低レベルの残留有機溶媒を含む持続放出性微粒子または ミクロ球体を提供することである。

上述および他の目的は、この中に開示される方法を実践することによって、およ び／またはこの中に開示される製特表千６−５０８６２４　（１３） 薬代合物、組成物およびキットを利用することによって達成される。

一実施例において、ヒトを含む温血動物においてアンドロゲン受容体を活性化す るための方法が与えられ、この方法は、少なくとも１つのアンドロゲンステロイ ドを前記動物に投与することを含み、それは、アンドロゲン受容体に対して２× ｌ０−８Ｍ未満のＫｉ値を有し、かつ１リットル当り３．０ナノモルを下回る濃 度で最大値の２分の１に達する、ヒト乳癌ＺＲ−７５−１細胞の増殖に対する、 アンドロゲン受容体に媒介された抑制作用を有し、かっ５゜ｎＭを下回る血液血 清濃度で目に見える男性化作用を有さず、そのようなあらゆるアンドロゲンステ ロイドは１リットル当り５０ナノモルを下回る累積血清濃度を維持するために十 分に低い投与量で投与される。

この中に説明される方法は、ヒト乳癌もしくは子宮内膜癌、骨粗しよう症または 子宮内膜症の治療のために特に有用である。これらの方法はまた、アンドロゲン を投与するか、そうでなければアンドロゲン受容体を活性化することによって高 められる他の目的にも適当である。この中に論じられる疾患および障害の治療お よび予防は、この発明の範囲内であることを企図される。この発明の目的は、予 防および治療のための用途の両方に適当であると思われる。

別の実施例において、この発明のアンドロゲンステロイドを含む持続放出性粒子 が与えられ、前記アンドロゲンステロイドは、ヒトの組織と生物適合性があり、 かつ体内で生物適合性のある代謝生成物への生物分解を受ける持続放出性バイン ダ内に分散され、前記粒子は標準条件下で、前記バインダの前記生物分解の間そ の結果として、１リットル当り１．０と５０．０ナノモルの間に前記アンドロゲ ンステロイドの循環血清レベルを維持する速度および持続期間で、投与後４８時 間から投与後生なくとも２８日までの時間期間の間、前記アンドロゲンステロイ ドを放出することができる。

比率、放出速度を測定するための「標準条件」は後の「詳細な説明」に説明され る。放出速度は規定された条件下における持続放出性粒子の固有の特性であり、 そのような粒子が使用され得る態様を制限するものではない。たとえば、粒子の 放出速度はある投与量で規定される。しかし、そのように規定された粒子は、後 に詳細に説明され、かつ主治医によって適切と思われるような広く異なる投与量 で使用されてもよい。粒子の投与方法、持続放出期間などのような他のパラメー タも、後に教示されるような広範囲にわたって変化されてもよい。製薬希釈剤ま たは担体が添加されてもよい。

別の実施例において、持続放出性粒子から残留有機溶媒を除去する方法が与えら れ、この方法は、（Ａ）　５μｍと４０μｍとの間の平均サイズを有する持続放 出性粒子を形成するステップを含み、前記粒子は持続放出バインダ内に分散され た活性化合物を含み、かつ望ましくないことには残留有機溶媒を含み、（Ｂ）　 前記ミクロ球体における残留有機溶媒を０．１％未満の濃度（前記粒子の総重量 に対して重量で）まで低減するのに十分な時間期間の間、前記粒子に強い真空処 理を行なうステップをさらに含み、圧力は１．０トル未満であり、温度は前記バ インダのガラス転移温度より７から１５℃低い。

別の実施例において、製薬組成物が与えられ、それは製薬学的に受容可能な希釈 剤または担体を任意に含み、かつ複数の持続放出性ミクロ球体を有し、それらの ミクロ球体は５μｍと４０μｍの間の平均サイズを有し、かつ持続放出バインダ 内に分散された活性剤を含み、そのバインダはヒトの組織と生物適合性があり、 がっ体内で生物適合性のある代謝生成物への生物分解を受け、そこで前記ミクロ 球体は標準条件下で、前記バインダの前記生物分解の間その結果として、少なく とも２８日間にわたり前記活性剤を放出することができ、そこで前記ミクロ球体 中の有機溶媒は０．１％（ミクロ球体の総重量に対して重量で）以下である。

別の実施例において、この発明は、乳癌、子宮内膜癌、骨粗しよう症および子宮 内膜症を含むが、それらに限定されないエストロゲン感受性疾患および障害を、 治療または予防するための方法を提供する。これらの方法は、付加的な製薬担体 または希釈剤を含むか、または含まない、有効量の持続放出性粒子を、そのよう な治療または予防が必要な患者に投与することを含み、前記粒子はこの発明のア ンドロゲンステロイド（たとえば酢酸メトロキシプロゲステロンまたは酢酸メゲ ストロール）を含み、前記アンドロゲンステロイドは、ヒトの組織と生物適合性 がありかつ体内で生物適合性のある代謝生成物への生物分解を受ける持続放出性 バインダ内に分散され、前記粒子は標準条件下で、前記バインダの前記生物分解 の間その結果として、１リットル当り１．０と５０．０ナノモルの間に前記アン ドロゲンステロイドの循環血清レベルを維持する速度および持続期間で、投与後 ４８時間から投与後少なくとも２８日までの時間期間の間、前記アンドロゲンス テロイドを放出することができる。

別の実施例において、避妊方法が与えられ、この方法は付加的な希釈剤または担 体を含む、または含まない有効量の持続放出性粒子を、避妊を希望する女性患者 へ投与することを含み、前記粒子は、ヒトの組織と生物適合性がありかつ体内で 生物適合性のある代謝生成物への生物分解を受ける持続放出バインダ内に分散さ れた酢酸メトロキシプロゲステロンを含み、前記粒子は標準条件下で、前記生物 分解の間その結果として、１リットル当り１，０と５０．０ナノモルの間に前記 酢酸メトロキシプロゲステロンの循環血清レベルを維持する速度および持続期間 で、投与後４８時間から投与後少なくとも２８日までの時間期間の間、前記酢酸 メトロキシプロゲステロンを放出することができ、前記ミクロ球体の有機溶媒は ０．１％（粒子の総重量に対して重量で）以下である。

利用されるアンドロゲンは、低血液濃度（たとえば５゜ｎＭ未満）で強力なアン ドロゲン活性を有するが、それらの濃度でグルココルチコイド受容体活性を極め てわずかしか示さない特有の特性を有する。それらは、使用される濃度範囲でメ スの形態的男性化作用がないことを特徴とする。

これは、低血液濃度でさえ著しい男性化作用を示す、テストステロンおよびジヒ ドロテストステロンのような、性腺または末梢の組織において生成される天然ア ンドロゲンと区別されるべきである。ある種のアナポリックステロイドのように 、合成プロゲスチン、たとえばプロゲステロン誘導体がこの発明に有用である。

概してこの発明のアンドロゲンは、メスにおける顕著な体毛生長、座癒、脂漏、 または毛髪喪失のような男性化作用の形態的に検出可能な増加を生じない。これ らの男性化作用は文献で数量化されている。たとえばＦｅｒ＋ｉｍａｎおよびＧ ａ１ｌｖｅｙ、　１．Ｐ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｅｎｄ＋＋ｃ＋１ｎｏ１．　Ｍｅｔａ ｂ、　２１　：　１４４０−１４４７．１９６１　（体毛生長に関する）　：　 Ｃｔｅｍｏｎｃｉｎｉ他Ａｃ１ａ、　Ｅａｔ、　Ｆｅｒｔｉｌ、７　：２４８− ３１４．１９７６（座癒、脂漏および毛髪喪失）を参照されたい。また、Ｃｕ５ ａｎ他Ｊ、　Ａｍ、＾ｃａｄ、　Ｄｅ＋ｍａｔｏ１．２３　：　４６２−４６９ ．１９９０を参照されたい。下の表１および２は数量化を示す。

表１ 各１１部位における体毛のグレードの定義（すべての部位においてグレード０は 末端毛がないことを１、　上唇　１　外端における数本のひげ２　外端における 小さな口ひげ ３　外端から中途半端に伸びた口ひげ ４　中心線へ伸びた口ひげ ２、　顎　１　数本のまばらなひげ ２　低密度のまばらなひげ ３．４　完全に覆いつくす、薄いところと濃いところ ３、　胸　１　花輪周囲の毛 ２　さらに中心線の毛 ３４分の３が覆われた、それらの領域 の融合 ４　完全に覆いつくす ４、上背　１　数本のまばらな毛 ２　まだまばらではあるが、やや多い ３．４　完全に覆いつくす、薄いところと濃いところ ５、　上背　１　仙骨の肩上 ２　いくらか横方向に伸びる ３　３分の４を覆う ４　完全に覆いつくす ６、　上腹　１　数本の中心線の毛 ２　まだ中心線であるが、やや多い ３．４　半分および全体を覆う ７、　下腹　１　数本の中心線の毛 ２　中心線の１筋の毛 ３　中心線の１束の毛 ４　逆様のＶ型の生長 ８、　腕　１　膜表面の４分の１以下の薄い生長２　まだ完全に覆ってはいない が、より多い ３．４　完全に覆いつくす、薄いところと濃いところ ９、　前腕　１．２．３．４　手指背面を完全に覆う、１および２が薄く、３お よび４が濃 い生長 １０、腿　１．２．３．４　腕と同じ １１、脚　１．２．３．４　腕と同じ 表２ 座癒、脂漏および毛喪失のグレード 座癒 １、　１０個までの分離した膿病 ２、　１０個より多い分離した膿病 ３．１かたまりの膿病 ４、　密集した膿病 脂漏 １、　軽度 ２、　中位度 ３、　重度 毛の喪失 １、　軽度 ２、明らかに薄い ３、　際立って薄い ４、はげ 好ましい実施例の詳細な説明 この発明において使用するための好ましい化合物は、合成プロゲスチン、アナポ リックステロイドおよび他のステロイド化合物を含み、それらはアンドロゲン受 容体に対して２×１０−８Ｍ未満のＫｉ値を有し、かつ１リットル当り３．０ナ ノモルを下回る濃度で、最大値の２分の１に達する、ヒト乳癌ＺＲ−７５−１細 胞の成長に対するアンドロゲン受容体に媒介された抑制作用を有し、かつ前述の 男性化作用がない。この発明の好ましいアンドロゲンは、クレームされている濃 度範囲の一番上（たとえば１リットル当り５０ナノモル）で維持されたアンドロ ゲン血液濃度によって、３力月間、治療した後の女性で観察された、平均的男性 化作用の著しい増加（たとえば、前述の表１または２に示されたグレードの数の いずれかが著しく増える）を生じないであろう。治療前には男性化作用が見られ なかった、または治療前には表１に示された１１部位すべての合計が１０以下で あったほとんどの女性患者では、この発明に従った治療の間、通常同じ点数が維 持されるであろう。

すなわち、３力月間の治療後、目に見える男性化作用はないであろう。治療前に 男性化作用をいくらか示していた女性患者では、それらの作用が治療によって増 加しないことが予期されるであろう。

Ｋｉ値が２Ｘ１０−”Ｍを下回るかどうかを決定するために、Ｋｉ値はアンドロ ゲン受容体に対する様々な化合物の親和性を測定するための以下の方法によって 決定され得る。

前立腺組織の調製　腹部の前立腺は、重量２００−２５０ｇの、供せられる２４ 時間前に去勢されたスプラーグ・ドーリ−（Ｓｐ＋ａｇｕｅ−ＤａｗｌＢ）ラッ ト（Ｃｒｌ：　ＣＤ　（ＳＤ）　Ｂｒ）（Ｃｈｕｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ、　５Ｌ− Ｃｏｎ山ｎｔ、　Ｑｕｅｂｅｃから得られる）からのものである。除去後直ちに 、前立腺は氷上に保たれてアンドロゲン結合アッセイのために使用される。

シトシルの調製　ポリトロン（ＰｏｌｒＨｏｎ）　ＰＴ　−１０ホモジナイザを 使用した、緩衝液Ａ　（Ｔｒｉｓ、　０．　０２５Ｍ　；モノチオグリセロール 、２０ｍＭ；グリセロール１０％（Ｖ／’Ｖ）；　ＥＤＴＡ、１．５ｍＭおよび モリブデン酸ナトリウム、１０ｍＭ、ｐＨ７，５）中での１：５比（ｗ／Ｖ）の 均質化前に、前立腺組織は鋏で細かく切り刻まれる（新鮮な組織）か、またはサ ーモバックシステムで粉砕される（冷凍した組織）。それらの処置およびすべて の後処置は０−４℃で行なわれる。上澄中のシトシル分画を得るために、ホモジ エネートは１時間、１１０５０００Ｘで遠心分離される。

シトシルアンドロゲン受容体アッセイ　１００μｌのアリコートが、０−４℃で 、１８時間、テストされるべき濃度の上がった標識されない化合物の存在下、ま たは非存在下で、１００μｍの３ｎＭ　［３Ｈ］　Ｔまたは［３Ｈ］　Ｒ１８８ １とともにインキュベートされる。インキュベーションの終りに、遊離の、およ び結合されたＴまたはＲ１８８１は、２３００Ｘｇでさらに１５分間、Ｏ−４℃ で遠心分離を行なう前に、２００μｌのデキストラン被覆されたチャコール（１ ％チャコール、０．１％デキストランＴ−７０．０．１％ゼラチン、１．５ｍＭ 　ＥＤＴＡおよび５０ｍＭ　Ｔｒｉｓ　（ｐＨ７，４））を１５分間添加するこ とによって分離される。上澄のアリコート（３５０μｌ）は、ベックマン・Ｌ３ ３３０カウンタ（トリチウムに対して３０％効率）で計数する前に、水性の計数 溶液（Ｆｏｒ印ｌ１ｌａ　９６３　、　Ｎｅｖ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｎｕｃｌｅａ ｒ　）が１０ｍ１入ったシンチレーションバイアルへ移される。

Ｋｉ計算　見かけの阻害定数ｒＫｉＪ値は、等式Ｋｉ＝　Ｉ　Ｃ５ｏ　／　（１ ＋Ｓ／Ｋ）に従って計算される（ＣｈｅｎｇおよびＰ＋ｕ＋ｏｆｆ、　Ｂｉｏｃ ｂｅｍ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、２２　：　３０９９−３１０８．１９７３）。

この等式において、Ｓは［３）（コＴまたは［３Ｈ］Ｒ１８８１の濃度を表わし 、ＫはＴまたはＲ１８８１の解離定数（ＫＯ）であり、工Ｃ５ｏはＴまたはＲ１ ８８１結合の５０％抑制を与える標識されない化合物の濃度である。多数の化合 物に関して、Ｋｉ値が文献で報告されている。たとえば、Ｏｉａ＋ｓｏ他１．Ｓ ｔｅｍ、Ｂｉｏｃｈ：ｍ、２７　：　２５５−２６９．１９８７　；　Ａ＋ｔｅ ｌｉｎ他ＣａｎｃｅｆＲｅｓ、４０　：１６１２−１６２２．１９８０；Ｔｏｔ ｈおよびＺａｋａ＋　１．５ｔｅｒｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、１７　：　６５３ −６６０．１９８２を参照されたい。類似の結果を与える方法がＰｏｕｌｉｎ他 Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔ＋ｅｘ１ｍ、　１２　：　２１３− ２２５．１９８８に説明される。

与えられた化合物がヒト乳癌ＺＲ−７５−１細胞の成長に対して最大の２分の１ のアンドゥゲン受容体媒介抑制作用に到達する濃度を決定するために、ＰＯ℃ｆ ｉｎ他ＢｒｅａｓｔＣａｎｃｅ「Ｒｅｓ、Ｔ＋ｅａｔｍ、１２　：　２１３−２ ２５．１９８８に詳細に説明されるような次の技術が利用される。

ストックカルチャーの維持　ＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞系は、アメリカン・タ イプ・カルチャー・コレクション（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、　ＭＤ　）から得るこ とができる。これらの細胞は、１０ｎＭのＥ２．１５ｍＭのへブス（Ｈｅｐｅｓ 　）　、２ｍＭのし一グルタミン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１ｍｌ当り １００ＩＵのペニシリン、１ｍｌ当り１００μｇの硫酸ストレプトマイシン、お よび１０％（Ｖ／Ｖ）胎仔ウシ血清（Ｆ　Ｂ　Ｓ）を補充された、フェノールレ ッドを含まないＰＲＭ１１６４０培地中で、９５％の水飽和された大気、５％Ｃ ０２において、３７℃で定常的に培養される。

対数増殖期のストックカルチャーは、ハンクス平衡塩類溶液において０．０５％ トリプシン１０．０２％ＥＤＴＡ（Ｗ／Ｖ）によって採収され、５％（Ｖ／Ｖ） のデキストラン被覆されたチャコール（Ｄ　ＣＣ）処置されたＦＢＳおよび１ｍ ｌ当り５００ｎｇの仔ウシインシュリンを含む、Ｅ２およびフェノールレッドを 含まないＰＲＭ１１６４０培地に再び懸垂されるが、そうでなければストックカ ルチャーの維持のために前述のように補充される。細胞は最終密度０．５−４． ０ｘｌＯ’セル／ウエルで２４ウエルリンブＯ（Ｌｉｎｂ＋ｏ）培養プレート（ ＦＩＯＹ　ＬａｂｕＮｏｒｉｅｓ　）において平板培養された。

平板培養から４８時間後、適切な濃度のステロイドを含む新鮮なＳＤ培地が添加 される。検査物質の添加のために使用されるエタノールの最終濃度は０．１２％ （Ｖ　／　Ｖ　）を上回らず、細胞成長および形態上に著しい作用を加えない。

培養培地は１日おきに取換えられ、特に記されない限り、処置から１２日後にト リプシン処理によって採集される。セル番号はコールタカウンタ（Ｃｏｏｌｔｅ ＋　Ｃｏｕｎｌｅｔ　）で決定され得る。

計算および統計分析　見かけのＩＣ５０値は反復最小二乗回帰を使用して計算さ れ（Ｒｏｄｂｕｄ、　Ｅｎｄｏｃ＋ｉｎｏｌｏｇ７９４　：１４２７−４４３７ ．１９７４）、見かけの阻害定数（Ｋｔ値）はＣｂｅｎｇおよびＰ＋ｕｓｏｌｌ に従って計算される（Ｂｉｏｃｈｅｍ、　ＰｈａｒｍａＣｏｌ、２２　：　３０ ９９−３１０８．１９７３）。

図面の簡単な説明 図１は、保護されない対照群に対するこの発明に従った方法、すなわちジメチル ベンズ（ザ）アントラセン（ＤＭＢＡ）の投与によって腫瘍が誘発される前に１ 週間３０ｍｇのデポプロペラを投与することによって保護されたラット群で観察 された腫瘍の数の、時間経過に伴う比較グラフである。

図２は、処置されない対照群（０−−０）に対する、卵巣摘出されたラット（０ −−０）におけるエストラジオールによって刺激された腫瘍成長の時間経過に伴 う比較グラフである。腫瘍はジメチルベンズ（ザ）アントラセンを使用して誘発 された。エストラジオールは処置およびコントロール群ラットの両方で腫瘍の成 長を刺激するために使用された。処置群の各動物は３０ｍｇのデポプロペラの皮 下投与を一度受けた。結果は各群の総腫瘍面積の変化のパーセンテージで表わさ れる。

図３は、ブラッカーＡＣ−Ｆ、３００・ＦＴ−ＮＭＲ分光計で記録されたこの発 明のＣＤＣ１３溶解微粒子の１Ｈ咳磁気共鳴スペクトルである。このボックスに おいて、ＭＰＡに対してδ＝０．６５１）ｐＩＩおよびラクチドに対して６＝５ ．２０ｐｐｍのピーク下の面積が次の公式を使用してコアローディング測定のた めに使用される。

％ＭＰＡ　（コアローディング）＝０．２８３９１＋０゜９８７２０Ｘ　［％面 積（δ＝０．６５ｐｐｍ）］ここで％面積（δ＝０．　６５ｐｐｍ）は、次のと おり規定される。

％面積（δ−０，６５ｐｐｍ　）　＝面積（δ＝０．　６５ｐｐｍ）／［面積（ δ＝５．２０ｐｐｍ）十面積（δ＝０．　６５ｐｐａ＋）］ 図４は、ポリマーおよびＭＰＡの既知の混合物に関する図３に示されたものと類 似のＮＭＲデータから引出されたコアローディングの測定のための標準曲線であ る。

図５は、コアローディング測定のための立体化学的排除クロマトグラフィー（Ｓ 　Ｅ　Ｃ）によって分離された持続放出性ＭＰＡミクロ球体のクロマトグラムで ある。１２分の保持時間でのピークは、ポリマー性持続放出バインダに対応し、 １５．６分の保持時間のピークはＭＰＡである。図５の挿入図は、標準濃度ＰＬ Ｇ／ＭＰＡ混合物から作られた較正曲線である。ＭＰＡピークの面積は、５０： ５０ポリ［ＤＬ−ラクチドーコーグリコリドコを含む既知の混合物におけるＭ　 Ｐ　Ａのパーセンテージの対数に対して表わされる。

図６は、（Ａ）倍率３５０および（Ｂ）倍率２０００におけるＭＰＡミクロ球体 の走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）写真である。

図７は、（Ａ）倍率１５００および（Ｂ）倍率５０００におけるこの発明のＭＰ Ａミクロ球体の横断面の走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）写真である。

図８は、走査型電子顕微鏡によって決定されたＭＰＡミクロ球体のサイズ分布を 示す。各サイズ範囲におけるミク口球体のパーセンテージはサイズ範囲（μｍ） に対して表わされる。

図９は、熱フローを示す示差走査熱量測定（Ｄ　Ｓ　Ｃ）曲線である（規定され た温度におけるサンプルと対照との間のエネルギ差。熱フローはサンプルの熱容 量に直接比例する）。この曲線は、３３％のＭＰＡローディングで、この発明の ６５：３５ポリ　［ＤＬ−ラクチドーコーグリコリド］ミクロ球体にカプセル化 されたバッチＭＰＡのガラス転移温度（Ｔｇ）を示す。

図１０は、（Ａ）において、指示されたレベルのγ線照射（Ｍｒａｄ）後の分子 量５０　：　５０ポリ［ＤＬ−ラクチドーコーグリコリドコの、異なるパラメー タ［Ｍ（ｎ−１）、Ｍｎ、Ｍｗ、Ｍｚ、Ｍ　（ｚ＋１）］特性の変化を示し、（ Ｂ）において、そのレベルのγ線放射（Ｍｒａｄ）に対する重合度（Ｍｗ／Ｍｎ ）の変化を示す。

図１１は、５０：５０ポリ［ＤＬ−ラクチドーコーグリコリド］　ミクロ球体に カプセル化された５０ｍｇのＭＰＡの皮下注射を一度行なった後の、ニューシー ラント・ホワイトラビットにおける、時間経過に伴うＭＰＡの血清レベルを示す 。

図１２は、５０　：　５０ポリ［ＤＬ−ラクチドーコーグリコリド］　ミクロ球 体（１ｎＭ＝０．３８６ｎｇ／ｍ１．）にカプセル化された指示量のＭＰＡの皮 下注射を一度行なった後の、卵巣摘出されたメスのスプラーグ・ドーリ−・ラッ トにおける時間経過に伴うＭＰＡの血清レベルを示す。

図１３は、ラットにおけるＤＭＢＡの投与（１ｎＭ＝０゜３８６ｎｇ／ｍｌ）前 にＭＰＡミクロ球体を一度注射した（３０および１００ｍｇのＭＰＡまたは媒体 （制御））後の、ジメチルベンズ（ザ）アントラセン（ＤＭＢＡ）誘導乳房腫瘍 を有するラットのパーセントを時間の関数として示すグラフである。

合成プロゲスチンの複合的な内分泌活性をよりよく理解することは、乳癌および 子宮内膜癌ならびに子宮内膜症および骨欠損の予防および治療におけるそのより 合理的な使用のためだけではな（、所望される有益な効果には不必要なステロイ ド受容体との相互作用によって生じる副作用を回避するためにも必要とされる。

多くのステロイド受容体に対して親和性を有する合成「プロゲスチン」の生物学 的作用の正確な分析は、すべての主要なりラスのステロイドのための機能する受 容体を有するインビトロモデルの選択を理想的には必要とする。この目的のため に、発明者らは、エストロゲン、アンドロゲン、プロゲステロンおよびグルココ ルチコイド（Ｖｉｇｎｏｎ他、Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　εｎｄｏｃｒｉｎｏ１．　Ｍ ｅｔａｂ、５６．１１２４−１１３０．１９８３）のための機能する受容体を有 するＺＲ−７５−１ヒト乳癌細胞系を、合成プロゲスチンによる細胞増殖の制御 における異なったステロイド受容体系の相対的な貢献を比較するために、選択し た。エストロゲンはＺＲ−７５−１細胞において強いマイトジェンであり（Ｐｏ ｕｌｉｎおよびＬａｂ＋ｉｅ　、　Ｃａｎｃｅｔ　Ｒｅｓ、４６．４９３３−４ ９３７．１９８６）、かつ数個のたんばく質の発現および／または分泌を特異的 に調整する（ＤｉｃｋｓｏｎおよびＬｉｐｐｍａｎ　。

Ｅｎｄｏｃｔ、Ｒｅｖ、８．２９−４３．１９８７）一方で、アンドロゲン（Ｐ ｏｕｌｉｎ他、Ｂｒａａｓｊ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔｔｅａｔｍ、　１２ ．２１３−２２５．１９８８）、グルココルチコイド（ＨｘＨｏｎＳＡ、Ｃ，Ｌ ａｂ＋ｉｅ、Ｆ、未公開結果）、ならびにプロゲスチン（Ｐｏｕｌｉｎ他、Ｂｒ ｅａｒｔ　Ｃａｎｃｅ＋　Ｒｅｓ、　Ｔ＋ｅａｔａｍ、　１３Ｓ１６１−１７２ ．１９８９）は、そのそれぞれの受容体との特異的相互作用によってその増殖を 抑制する。

ＭＰＡ　（ＢＩｏｓ＋ｅ７他、Ｃａｎｃｅｒ　５４．１２０８−１２１５．１９ ８４、ＨｏＮｏｂａｙ？ｉ他、Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅ「Ｒｅｓ、　Ｔｒｅａ ｔｍ、５．３２１−３２６．１９８５）　、ＭＧＡ　（Ｉｏｈｎｓ。

ｎ他、Ｓｅｍ１ｎ、　０ｎｃｏ１．　１３　（Ｓｕｐｐｌ、）　、１５−１９． １９８６、Ｔｃｈｅｋｍｅｄｙａｎ他、Ｓｅｍ１ｎ、　０ｎｃｏ１．　１３　（ Ｓｕｐｐｌ、）、２０−２５．１９８６）およびノルエチンドロン（Ｃ１ａｖｅ １　他、Ｅｕ＋、　１．　Ｃａｎｃｅ　Ｉ　Ｃｌ１ｎ、　０ｎｃｏ１．　１８　 、　８２１−８２６．１９８２、Ｅａｒｌ他、Ｃｌ１ｎ、０ｎｃｏ１．１０．１ ０３−１０９．１９８４）を含ム多くのプロゲスチンは、乳癌の治療に使用され てきた。ヒト乳癌ＺＲ−７５−１細胞の試験管内系を使用して、合成プロゲスチ ンまたはアナポリ・ツクステロイドの、ツルーテストステロン、Ｒ１８８１、ド ロモスタノロン、フルオキシメステロン、エチステロン、メタンドロスタノロン 、オキサンドロロン、ダナゾール、スタノゾロール、カルステロン、オキシメト ロン、酢酸シブロチロン、酢酸クロルマジノンおよびノルゲストレルは、れてい る。細胞成長の抑制に加えて、２つの糖たんばく質の分泌、つまり著しい嚢胞病 液体プロティン−１５（ＧＣＤＦＰ−１５）およびＧＣＤＦＰ−２４は、アンド ロゲンによって著しく刺激される（　Ｓｉｍｘｒｄ他、Ｍｏｌ、Ｅｎｄｏｃｒｉ ｎ。

１．３．６９４−７０２．１９８９、Ｓｉｍａｒｄ他、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏ ｇ７１２６．３２２３−３２３１．１９９０）　。ＧＣＤＦＰ−２５またはＧＣ ＤＦＰ−２４分泌の測定値は、これらの細胞におけるアンドロゲン作用の感受性 のあるパラメータまたはマーカとして使用され得る。実際、ＧＣＤＦＰ−１５お よびＧＣＤＦＰ−２４分泌の変化は、調べられたすべての実験条件下で細胞成長 の変化と反対である。この発明に関連して研究されたすべての合成プロゲスチン またはアナポリックステロイドは、ＺＲ−７５−１乳癌成長、ならびにＧＣＤＦ Ｐ−１５およびＧＣＤＦＰ−２４の分泌に対してアンドロゲン活性を示す。

化合物の作用の原因である受容体（エストロゲン、アンドロゲン、プロゲステロ ンおよびグルココルチコイド）の同定は、そのような化合物の潜在的な作用（副 作用を含む）を評価するために重要である。したがって、低濃度でのアンドロゲ ン受容体との特異的相互作用を評価することは特に重要であり、その理由はその ような低濃度はグルココルチコイド受容体と相互作用せず、したがって二次的な 副作用を回避または最小にするからである。

乳細胞および子宮内膜細胞の成長を抑制するための１つの方法は、効果的な化合 物を使用してアンドロゲン受容体を活性化することであり、この化合物は潜在的 な副作用に関連した他のクラスのステロイド受容体を著しく活性化することはな いが、低濃度でアンドロゲン受容体に結び付くように受容体部位に対して親和性 を有する。アンドロゲン受容体に対して最大限の親和性を有し、女性の男性化作 用が最小であるかまたは男性化作用がない化合物を選択することは重要である。

そのような化合物とグルココルチコイドおよびエストロゲン受容体との相互作用 を最小限にするために、少量の投与量の化合物を使用することが重要である。低 濃度でアンドロゲン活性を有し、インビボ条件下でエストロゲンに代謝されない ステロイドを選択することもまた重要であり、これにより使用される低濃度でア ンドロゲン受容体以外の受容体の著しい活性にはつながらないであろう。

この発明に使用される化合物、特にアナポリックステロイドおよび合成プロゲス チンは、異なったクラスのステロイド受容体を活性化する能力において、様々な 濃度に対し、　て著しく変化する。濃度を注意深く制御することによって、この 発明に従って、その活性が望ましくない受容体の著しい活性を生じることなく、 所望される受容体の活性を選択的に引起こすことが可能である。たとえば、ここ に特定された低濃度で、ＭＰＡは先行技術の治療を悩ませてきたグルココルチコ イド活性に関連する副作用を実質的に回避しながら、アンドロゲン受容体を望ま しく活性化するために使用され得る。

このように、この発明は乳癌および子宮内膜癌、ならびに骨欠損および子宮内膜 症のようなアンドロゲン受容体の活性に応答する他の疾患の予防および治療のた めの新規の方法を提供する。この発明において、投与されるアンドロゲン化合物 の量は、乳癌および子宮内膜癌の治療のために当該技術分野で以前に使用された ものよりもずっと低い。

この発明のアンドロゲンの血液濃度のモニタリング治療の潜在的な効果を決定す るのを助けるために、化合物の血液濃度を測定することが可能である。たとえば 、プラズマの酢酸メトロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）レベルの測定は、以下の ような抽出後のラジオイムノアッセイによって行なわれ得る。

抗体調製 抗体１４４Ａは、１７−ヒドロキシプロゲステロン−３−０−カルボキシメチル オキシム−ＢＳＡに対して、ウサギにおいて生じた。ラジオイムノアッセイ（Ｒ ＩＡ、）で使用された標識されたステロイドは、ＮＥＮから入手したメチル−１ ７α−ヒドロキシプロゲステロンアセテート、６α−［１，２−３Ｈ（Ｎ）コー であり（ＣＡＴ　ＮＯ：ＮＥＴ４８０）、その対照調製物はステラロイズ（Ｓｔ ｅ＋ａｌｏｉｄ＋）から入手した酢酸メトロキシプロゲステロン（Ｍ　Ｐ　Ａ） であった。使用されたアッセイ緩衝液は、０．１Ｍリン酸ナトリウム、０．１５ Ｍ塩化ナトリウム、０．１％アジ化ナトリウム、ｐＨ７，２中０．１％ゼラチン であった。抽出溶媒混合物はエチルエーテル−アセトン（９：ｌ、ｖ：ｖ）［Ｅ ＥＡコであり、一方ＬＨ−２０クロマトグラフィー溶媒混合物はイソ−オクタン ：トルエン：メタノール（９０：５：５、ｖ　：　ｖ　：　ｖ）　［ｌ０ＴＨ］ であった。

抽出方法 １ｍｌのプラズマが５ｍｌのＥＥＡで２回抽出された。

抽出物は窒素で乾燥するまで蒸発され、残りの残渣は１ｍｌのＩ　ＯＴＨ中に溶 解された。抽出物はその後２ｇのＬＨ−２０（Ｐｂａ＋ｍａｃｉａ　）で充填さ れた１０１０Ｘ３０カラム（Ｃｏｉｎｉｎｇ　ＣＡＴＮＯ：　０５７２２Ａ）上 でＬＨ−２０クロマトグラフイーにかけられた。ゲルは１ｍｌのサンプルを加え ｌ０ＴＨで溶離する前に３０ｍ１のｌ０ＴＨで洗浄された。最初の５ｍｌは捨て られた。続く１０．１６．５および２７．５ｍｌの溶離液は、それぞれフラクシ ョンＩ（プロゲステロン）　、Ｔ　Ｉ　（ＭＰＡ）およびＩＩＩ（１７−ＬＨ− プロゲステロン）であった。フラクションＩＩは乾燥するまで蒸発され、１．５ ｍｌのアッセイ緩衝液に戻された。

ラジオイムノアッセイ 各１２Ｘ７５ｍｍホウケイ酸塩試験管に、２５，０００ＤＰＭを含む０．２ｍｌ のトリチウム化されたステロイド、５から５０００　ｐ　ｇ／管の範囲の０．５ ｍｌの対照調製物、または０．５ｍｌの抽出されたサンプルフラクションＩＩ。

１１５０００に希釈された０、２ｍｌの抗血清１４４Ａ。

または０．２ｍｌのアッセイ緩衝液が加えられ、非特異的結合を評価した。管は その後４℃で一晩インキユベートされた。水に希釈された０、２ｍ１２％チャコ ールＮｏｒｉ　ｔ　−Ａ、　０．　２％デキストラン（Ｄｅｘｊｒａｎ　）　Ｔ 　−７０が加えられた。管はそれから緩やかに振とうされ、１０分後２０００Ｘ ｇで１０分間遠心分離された。その上澄液は８ｍｌのＦｏ＋ｍｕｌｘ−９８９（ ＮＥＮ　：　ＮＥＦ−９８９）と混合され、その放射能がβ−カウンタでカウン トされた。

ＭＰＡの検出の下限および上限はそれぞれ１０および１１００００ｐ／ｍｌであ り、一方傾斜（ＬＯＧＩＴ−ＬＯＧ）は−２，２であり、ＥＤ５ｏ値は３１５ｐ ｇ／ｍｌである。非特異的結合およびネット結合はそれぞれ１．５および４５％ である。抗体１４４ＡはＭＰＡに対して非常に特異的であり、その理由はプロゲ ステロン、２０α−ＯＨ−Ｐｒｏｇ、プレグネノロン、１７−０Ｈ−プレグネノ ロン、ＤＨＴ、アンドロステンジオン、テストステロン、３α−ジオール、エス トロン、エストラジオールおよびコルチゾールとの交差反応が０．１％より少な いからである。

計算および統計 ＲＩＡデータはＲｏｘｄｂａ＋ｄ　ドおよびＬｅｖｓｌｄのモデルＩＩに基づく プログラムを使用して分析された（２ｎｄ　Ｋａｒｏｌｉｎ＋ｋｘ　Ｓｙｍｐｏ ｓｉｕｍ、ジュネーブ、１９７０、ｐｐ、７９−１０３）。プラズマＭＰＡレベ ルは、個々のサンプルの２連の測定値の平均±ＳＥＭ（平均の標準誤差）として 通常水される。統計の有意性はダンカン−クレイマー（Ｄｕｎｃａｎ−Ｋｒａｗ ｅｒ）のマルチプルレンジテストに従って測定される（　Ｋｒａｗｅｒ　、Ｃｅ 　Ｙ、ＢｉｏｍｅＨｉｃｓ　１２．３０７−３１０．１９５６）。

様々な受容体に対するテスト化合物の相対的効果様々なステロイド受容体に対す る潜在的化合物の活性を決定するのを助けるために、合成プロゲスチンおよびア ナポリックステロイドのアンドロゲン、グルココルチコイド、プロゲステロンお よびエストロゲン−受容体−媒介された活性は、応答のパラメータとして細胞成 長ならびにＧＣＤＦＰ−１５およびＧＣＤＦＰ−２４放出を使用して、ＺＲ−７ ５−１ヒト乳癌細胞で測定され得る（　ＰｏｏｌｉｎおよびＬａｂｒｉｅ　、　 Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ＋。４６．４９３３−４９３７．１９８６、Ｐｏｏｌｉｎ他 、Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｔ　Ｒｅｓ、Ｔ＋ｅａｔｍ、１２Ｓ２１３−２２５ ．１９８８、Ｐｏｏｌｉｎ他、Ｂｔｅａｓｊ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　Ｔ＋ｅ ａ＋ｍ。１３．１６１−１７２．１９８９、Ｐｏｏｌｉｎ他、Ｂ＋ｃａｓｔ　Ｃ ａｎｃｕ　Ｒｅｓ、Ｔ＋ｅｒ１ｍ、１３．２６５−２７６．１９８９、Ｓｉｍａ ＋ｄ　＠　Ｍｏｌ、　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、　３．６９４−７０２．１９８９ 、Ｓｉｍａｒｄ他、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇ７１２６．３２２３−３２３１． １９９０）　。

以下の特性はプロゲステロン受容体（ＰｇＲ）活性の測定を可能にし、その特性 は１）インスリンを加えるとＺＲ−７５−１細胞中のＰｇＲとのプロゲスチンＲ ５０２０の相互作用のために抑制を完全に逆転させること、および２）Ｒ５０２ ０の増殖防止効果がＥ、−誘導条件下でのみ観察されることである。ＺＲ−７５ −１細胞成長のこれら２つの特性は、テスト化合物を使用したＺＲ−７５−１細 胞の１５日のインキュベーションの終りに測定された成長応答に対するインスリ ンおよび／またはエストロゲン添加の影響を評価することによって、ＺＲ−７５ −１細胞に対するテストされた化合物の影響がどの程度ＰｇＲとの相互作用の原 因となるかについての研究を可能にする。

一方エストロゲン受容体（ＥＲ）の貢献は、培地にエストロゲンがある場合また はない場合に、ＺＲ−７５−１細胞をインキュベートすることによって直接測定 され得る。

合成プロゲスチンまたはアナポリックステロイドのアンドロゲン受容体（Ａ　Ｒ ）およびグルココルチコイド受容体（ＧＲ）との細胞成長に対するその抑制作用 における相互作用を分析するために、この細胞系におけるアンドロゲンおよびグ ルココルチコイドの増殖防止効果の相加性を利用する（　Ｐｏｏｌｉｎ他、Ｂ＋ ｅａＮ　Ｃａｎｃｅｔ　Ｒｅｓ４ｒｅａｔｍ、１２．２１３−２２５．１９８８ 、ＨｕｔｔｏｎおよびＬａｂｒｉｅ　、　Ｆ％未公開データ）。このように、Ａ Ｒを５α−ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）で飽和させ、推定されているグル ココルチコイドの添加から生じる細胞増殖に対する影響を測定することが可能で ある。一方、推定されているアンドロゲンの影響はＧＲのデキサメタシン（Ｄ　 Ｅ　Ｘ）による飽和後間様に測定され得る。テスト化合物を使用してこのように 観察された成長抑制活性の特異性もまた、適切なアンタゴニスト（つまり抗グル ココルチコイドまたは抗アンドロゲン）を使用してその可逆性によってさらに評 価され得る。

このように、Ｅ２およびインスリンの存在下の過剰のアンドロゲン（１μＭ　Ｄ ＨＴ）の存在下では、グルココルチコイド効果は正確に評価され、他の受容体に よる干渉を受けずに評価され得る。Ｅ２およびインスリンの存在下の過剰なグル ココルチコイド（３μＭ　ＤＥＸ）の存在下で細胞がインキュベートされた場合 、同じことがＡＲの役割の研究にもまた当てはまる。詳細な速度論的研究によっ て示されるように、１μＭＤＨＴおよび３μＭ　ＤＥＸは、それぞれＡＲおよび ＤＲに対して最大の抑制効果を与える。

加えて、ＡＲおよびＧＲを介して媒介された「プロゲスチン」の潜在的なアンタ ゴニスト活性は、一度に１つの選択された受容体による逆転を可能にするために 、一方のりガントが他方よりはるかに過剰である状態で、双方の受容体系をＤＨ ＴおよびＤＥＸで飽和させることによって決定される。すべての実験は、「プロ ゲスチン」の細胞成長に対するＰｇＲ媒介された影響を防止するためにインスリ ンを含むＥ２補足培地において増殖されるＺＲ−７５−１細胞を使って実行され た。

前述の技術を使用して、発明者は他の受容体（たとえば　。

グルココルチコイドまたはプロゲステロン受容体）をも活性化する数多くのアン ドロゲン化合物が、濃度の関数で様々な受容体に対するその相対的効果の点で異 なることを発見した。ここに規定された濃度範囲内を保つことによって、この発 明の化合物は他の受容体に対して実質的な望ましくない影響をもたらさずに、ア ンドロゲン受容体に対して有利に影響を及ぼし得る。

ここに記載された方法から利益を受け得る患者の選択乳癌の徴候は普通自分で胸 を調べることによって、および／または乳房撮影法によって検出される。一方、 子宮内膜癌は通常子宮内膜生検によって診断される。どちらの癌も当業者に周知 の標準的な物理的方法、たとえば骨スキャン、胸部Ｘ線、骨格検査、肝臓の超音 波検査および肝臓スキャン（必要に応じて）、ＣＡＴスキャン、Ｍ、ＲＩならび に身体検査によって診断および評価することが可能である。

子宮内膜症は女性の月経に伴う痛みまたは症状に続いて診断され得るが、最も確 実な診断は腹腔鏡検査および時には生検によって得られる。

一方、骨密度は当業者に周知の標準的な方法、たとえばＱＤＲ（定量的デジタル Ｘ線撮影）、デュアルフォトン吸仮測定およびコンピュータ連動断層撮影によっ て測定され得る。プラズマおよび尿カルシウムおよびリン酸塩レベル、プラズマ アルカリホスファターゼ、カルシトニンおよびバラトルモン濃度ならびに尿ヒド ロキシプロリンおよびカルシウム／クレアチニン比。

乳癌または子宮内膜癌、骨粗しよう症または不十分な骨量およびアンドロゲン受 容体を活性化することによって治療可能な他の疾患は、この発明に従って治療さ れ得、またはこの発明、に従って予防的に防止され得る。

避妊薬の有効性および副作用を評価するのに適切な方法は、５ａｉｄ他、Ｃｏｎ ｕａｃｅｐｔｉｏｎ　３７．１１−２０．１９８８において見出され得る。

典型的に適切なアンドロゲン化合物は、たとえばＵｐｊｏｈｎ　ａｎｄ　Ｆａ＋ ｍ１ｔａｌｉａ　Ｃａｒｌｏ　Ｅ＋ｂａ　、　Ｓ、ｐ、　Ａ、から入手可能な、 プロペラ（Ｐ＋ｏｖｅ＋ａ　）　、デポプロペラ（ＤｅｐｏＰｒｏｖｅ＋ａ）ま たはファールタル（Ｆａｒｌｕｌａｌ）の商標名で、頭文字はＭＰＡである、６ −アルファーメチル、１７−アルファーアセトキシプロゲステロンまたは酢酸メ トロキシプロゲステロンを含む。

他の適切なアンドロゲン化合物は、Ｌａｂｒｉｅ他に記載されたもの（Ｆｅ＋ｌ ｉｌ、５ｔｅｒｉ１．３１．２９−３４．１９７９）、アナポリックステロイド またはプロゲスチン（ＲＢｎａｕｄ、　および０ｊａｓｓｏ　、Ｉｎｎｏｖａｔ ｉｖｅ　Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ　ｉｎ　Ｄｒｕｇ　Ｒｅ５ｃａｒｃｈＳＥｌ＋ｅ ｖｉｅ＋　Ｓｃｉ、Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、アムステルダム、ｐｐ。

４７−７２．１９８６．５ａｎｄｂｅ＋ｇおよびＫｉｒｄｏｎｉ　、　Ｐｈｘｔ ｍａｃ、　Ｔｈｅｍ、　３５．２６３−３０７．１９８８、ならびにＶｉｎｅｅ ｎ＋　、　ＳｉｍｕｄおよびＤｅ　Ｌｉｇｎｉｅ＋ｅｓ　５Ｌｅｔ＾ｎｄｒｏｇ ｅｎｃｓ、、Ｐｂａ＋ｍａｃｏｌｏｇｉｅ　Ｃｌ１ｎｉｑｕｅ、　Ｂａ５ｅ　ｄ ｅ　Ｔｈｅ＋ａｐｅｕｔｉｑｕｅ　、　２ｉｅ＋ｅｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ　５ＥＩ ｐａｎｓｉｏｎ　５ｃｉｅｎｔｉｌｉｑｕｅ　（パリ）、ｐｐ、２１３９−２１ ５８．１９８８）、カルステロン（Ｃａｌｕｓｔｅｒｏｎｅ）（７β、１７α− ジメチルテストステロン）、アナポリックステロイド（Ｌａｍ　、　Ａｍ、　Ｊ 、５ｐｏｒｔｓ　Ｍｅｄｉｃｉｎｃ　１２．３１−３８．１９８４、Ｈｉｌｌ、 　Ｒ１、アナポリック−アンドロゲンステロイドおよび実験腫瘍（八ｎａｂｏｌ ｉｃ−ａｎｄ＋Ｂｅｎ１ｃｓｔｅｒｏｉｄｓ　ａｎｄ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａ ｌ　ｆｕｍｏｕｓ　）、（Ｋｏｃｈａｃｈｉａｎ。

Ｃ，Ｄ、、ｅｄｓ、　）　、Ｈａｎｄｂｏｏｋ　ｏｌ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａ ｌ　Ｐｈａ＋ｍａｃｏｌｏｇ７、ｖｏｌ、４３、Ａｎａｂｏｌｉｃ−Ａｎｄ＋ｏ ｇｅｎｉｃ　Ｓｊｅ＋ｏｉｄｓｓ　Ｓｐｒｉｎｇｅ＋−Ｖｅｒｌａｇ　Ｎベルリ ン、７２５ｐｐ、１９７６）、フルオキシメステロン（９α−フルオロ−１１β −ヒドロキシ−１７α−メチルテストステロン）、テストステロン１７β−シピ オネート、１７α−メチルテストステロン、バンチストン（Ｐａｎｔｅｓ＋ｏｎ ｅ）　（テストステロンウンデカノエート）、Ｄｌ−テストロラクトンおよびア ントラクチイム（Ａｎｄ＋ａｃ＋ｉｍ　）を含む。

他の典型的な適切なアンドロゲン化合物は、Ｓｂｅｒｉｎｇ　ＡＧから入手可能 な酢酸シブロチロン（アンドロクル（Ａｎｄ＋ｏｃｕ＋）　）、Ｕｐｉｏｈｎ　 ａｎｄ　Ｆａ＋ｍ１ｔａｌｉａ、　Ｃａ１ｂｏ　ＥＲｂｍからとりわけ入手可能 な６−アルファーメチル、１７−アルファーアセトキシプロゲステロンまたは酢 酸メトロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）　、Ｓｈｅｒｉｎｇから入手可能なゲス トデン（Ｇｅｓ＋ｏｄｅｎｅ　）　、メガース（Ｍｅｇａｃｅ）の商標名でイン ディアナ州、エバンスビル（Ｅｖａｎｓｖｉ　１ｌｅ）のＭｅａｄ　Ｊｏｈｎｓ ｏｎ　＆　Ｃｏ、から入手可能な酢酸メゲストロール（１７α−アセトキシ−６ −メチル−プレグナ−４，６−ジエン−３，２０−ジオン）である。他の合成プ ロゲスチンは、レボノルゲストレル（Ｌｅｖｏｎｏ＋ｇｅｓ＋＋ｅｌ）　、ノル ゲスチメート（Ｎｏｒｇｅｓｔｉｍａｊｅ）、デソゲストレル、３−ケトデソゲ ストレル、ノルエチンドロン、ノルエチステロン、１３α−エチル−１７−ヒド ロキシ−１８，１９−シノール−１７β−プレグナ−４゜９．１１−トリエン− ２０−イン−３−オン（Ｒ２３２３、ゲストリノン）、デメゲストン、ノルゲス トリエノン、ガストリノンおよびＲａ７ｎａｕｄおよび０ｉａｓｓｏ、Ｊ、　Ｓ ｔｅ「ｏｉｄ　Ｂｉ。

ｃｈｅｍ、２５．８１１−８３３．１９８６、Ｒａ７ｎａｕｄ他、Ｊ。

Ｓ＋ｅ＋ｏｉｄ　Ｂｉｏｃｈｅ＋ｎ、１２．１４３−１５７．１９８０、Ｒａｙ ｎａｕｄ　、　０ｊａｓ＋ｏおよびＬａｂ＋ｉｅ　、　５ｔｅｒｏｉｄ　Ｈｏｒ ｍｏｎｅ＠、Ａｇｏｎｉｕｓ　ａｎｄ　ＡｎｔａｇｏｎｉｓｔｓＳＭｅｃｈａｎ ｉｓｍｓ　ａｆＳｔｅ「ｏｉｄ　Ａｃｔｉｏｎ（Ｇ、Ｐ、ＬｅｗｉｓおよびＭ、 Ｇｉｎ＋ｂｕ＋ｇ　５ｅｄｓ　）　、ＭｃＭｉｌｌａｎ　ＰＩｅＳ！、ロンドン 、ｐｐ、１４５−１５８　（１９８１）に記載された他のものを含む。上述の特 性を有する他のいかなるプロゲスチン誘導体もこの発明に有用であり得る。　ア ンドロゲン化合物は、好ましくは局部的、非経口または経口による製薬組成物と して投与される。この化合物は非経口的に、つまり注射または注入によって筋肉 的にまたは皮下に、点鼻薬により、廃剤により、ゲル、パッチまたは他の適切な 手段を使用して膣内にまたは経皮的に適用可能なところに投与され得る。アンド ロゲン化合物は、３０日より長い期間にわたって化合物の連続的なゆっくりした 放出を与えるように、生物学的適合性があり、生物分解性のポリマー、たとえば ポリ（ｄ、１−ラクチドーコーグリコリド）内で微小カプセル化されるかまたは それに付着され、皮下または筋肉内デポと呼ばれる技術によって皮下または筋肉 内に注射されてもよい。経口ルートに加えて、この化合物の投与の好ましいルー トは皮下デポ注射である。デポプロペラは水性分散液の筋肉内投与後はぼ３力月 の間、相対的に一定の速度で放出され得る。

投与される各化合物の量は患者の状態および年齢、各化合物の効力ならびに他の 要因を考慮して主治医によって決定される。乳癌および子宮内膜癌ならびに骨欠 損の予防においては、この発明に従って以下の投与量範囲が適切である。

アンドロゲン組成物は５０ｋｇの体重当り２５ｍｇの活性アンドロゲンステロイ ドより少ない量を配達する１日の投与量で好ましくは投与される。

５０ｋｇの体重当り１−１０ｍｇの投与量、特ニ３−７ｍｇ（たとえば５ｍｇ） が好ましい。選択された投与量は好ましくは血清濃度をリットル当り５０ナノモ ルより低く維持し、好ましくは患者の応答に依存してリットル当り１゜０ナノモ ルおよびリットル当り１０．１５または２５ナノモルの間である。これらのレベ ルを維持するために必要とされる投与量は患者ごとに異なり得る。ここに記載さ れた技術によってレベルをモニタし、それに従って投与量を最適化することは主 治医には望ましい。予防目的のためには、アンドロゲンの投与は、正常な女性の 乳癌および子宮内膜癌ならびに骨欠損を予防するために閉経に近い期間に好まし くは開始される。アンドロゲンは、閉経の他の徴候および症状を防止するために 使用されるエストロゲンの許容される投与量を伴ってもよい。女性の場合、エス トロゲン形成および／または作用が子宮内膜症、平滑筋腫、乳癌、子宮癌、卵巣 癌または他のエストロゲン感受性疾患の治療のために遮断されたときには、アン ドロゲンの投与はいつでも、好ましくはエストロゲンの遮断と同時に開始され得 る。

筋肉内または皮下デポ注射のためのアンドロゲンは、生物学的適合性があり生物 分解性のポリマー、たとえば他の技術の中でもとりわけ相分離プロセスによる、 もしくはペレットまたはロッドに形成されたポリ（ｄ、１−ラクチドーコーグリ コリド）において微小カプセル化されてもよい。

微小球体は担体に懸濁されて注射可能な調製物を与えてもよいし、デボはペレッ トまたはロッドの形状で注射されてもよい。ラクチド−グリコリド共重合体のよ うな生物学的適合性があり生物分解性のポリマーと有効成分とを含む皮下注入も しくは移植のための固体組成物または筋肉内もしくは皮下注射のための液体製剤 については、１９８２年８月２５日に公開された欧州特許出願ＥＰＡ　Ｎｏ、５ ８゜４８１も参照されたい。これらの製剤は化合物の制御された放出を可能にす る。

この発明で有用なアンドロゲンは、経口投与のために錠剤またはカプセルにされ た従来からの製薬賦形剤、たとえばスプレードライラクトースおよびスリアリン 酸マグネシウムを用いて典型的に処方され得る。

活性物質はクエン酸ナトリウム、炭酸カルシウムまたはリン酸二カルシウムのよ うな固体粉状の担体物質、およびポリビニルピロリドン、ゼラチンまたはセルロ ース誘導体のようなバインダと混合されることによって、おそらくはスリアリン 酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、［カルボワックス（Ｃａｒｂｏｗａ ｘ）　Ｊまたはポリエチレングリコールのような潤滑剤をも加えることによって 、錠剤または糖衣錠コアに作られ得る。もちろん、香味改良物質が経口投与形態 の場合には添加され得る。

さらなる形態として、たとえばハードゼラチン、およびたとえばグリセリンなど の軟化剤または可塑剤を含む閉じたソフトゼラチンカプセルのプラグカプセルを 使用することができる。プラスカプセルは、好ましくは粒状の形状の活性物質、 たとえば、ラクトース、サッカロース、マニトール、イモデンプンもしくはアミ ロペクチンなどのデンプン、セルロース誘導体または高分散ケイ酸などの充填剤 との混合物において活性物質を含む。ソフトゼラチンカプセルにおいて、活性物 質は植物油または液体ポリエチレングリコールなどの適切な液体に好ましくは溶 解または懸濁される。

経口投与の代わりに、活性化合物は非経口的に投与されてもよい。そのような場 合、たとえばゴマ油またはオリーブ油中の活性物質の溶液を使用することが可能 である。活性物質は、２週間より長い期間の間その化合物の連続したゆっくりと した放出を与えるために、生物学的適合性があり生物分解性のポリマー、たとえ ばポリ（ｄ、１−ラクチドーコーグリコリド）中で微小カプセル化されてもよい しまたはそれに付着されてもよく、皮下または筋肉内デボと呼ばれる技術によっ て皮下または筋肉内に注射されてもよい。

この発明はまた製薬組成物、有効成分または乳癌および子宮内膜癌ならびに骨欠 損の予防および治療、ならびに上述の子宮内膜症の治療に使用するためにそれを 投与するための手段を含むキットまたは単一パッケージを含む。このキットまた はパッケージは、この発明に従ってその製薬組成物をどのように使用するかにつ いての指示をもまた含み得る。

説明した養生法を使用する上の治療に続いて、乳癌および子宮内膜癌の腫瘍成長 、ならびに骨欠損および子宮内膜症は不利な副作用を最小限にしながら緩和され 得る。記載された養生法の使用はまた同じ疾患の出現を防止し得る。

制御された放出製剤が所望される場合、この発明に従って使用するのに適した制 御された放出バインダはいかなる生物学的適合性のある制御された放出材料をも 含み、この材料は有効成分に対し不活性であり、かつ有効成分を組込むことが可 能である。数多くのそのような材料は当該技術分野で既知である。好ましい制御 された放出バインダは、哺乳類への皮下または筋肉内注射の後、生理学的条件下 （つまりそこに存在する体液の存在下）でゆっくりと代謝される材料である。バ インダはその生分解速度が十分遅いので、約２０ミクロンより大きい平均直径を 有するバインダの純粋な微小球体（つまりステロイドまたは他の有効成分を含ま ない）は、皮下または筋肉内注射後少なくとも１力月の間完全には生分解されな い。適切なバインダは維持された放出製剤において当該技術分野で以前に使用さ れた生物学的適合性のあるポリマーおよび共重合体を含むが、それに限定されな い。このような生物学的適合性のある化合物は毒性がなく、皮下または筋肉内注 射後まわりの組織に不活性であり、免疫反応、炎症などのような重大な副作用を 引起こさない。これらは、やはり生物学的適合性がありかつ容易に体から排除さ れる代謝産物に代謝される。

たとえば、加水分解できるエステル結合を有するコポリマーおよびホモポリマー ポリニスチルから誘導されたポリマーマトリックスが使用されてもよい。これら の多くは生物学的分解性があり、毒性がないまたは毒性の低い分解生産物になる ことは当該技術分野で既知である。典型的に、このような好ましいポリマーはポ リグリコール酸（ＰＧＡ）およびポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ（ＤＬ−乳酸−コー グリコール酸）（ＤＬ　ＰＬ、ＧＡ）、ポリ（Ｄ−乳酸−コーグリコール酸）（ Ｄ　ＰＬＧＡ）およびポリ（Ｌ−乳酸−コーグリコール酸）（Ｐ　ＰＬＧＡ）で ある。ポリ（乳酸−コーグリコ、−ル酸）における乳酸およびグリコール酸ポリ マーの好ましい比率は、１００：０（つまり純粋なポリラクチド）から５０：５ ０の範囲内である。他の有用な生物分解性または生物腐敗性のポリマーは、ポリ （ε−カプロラクトン）、ポリ（ε−カプロラクトン−ｃｏ−乳酸）、ポリ　（ ε−カプロラクトン−ＣＯ−グリコール酸）、ポリ（β−ヒドロキシ酪酸）、ポ リ（アルキル−２−シアノアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレ ート）のようなヒドロゲル、ポリアミド、ポリ（アミノ酸）（つまりＬ−ロイシ ン、グルタミン酸、Ｌ−アスパラギン酸など）、ポリ　（エステル尿素）、ポリ （２−ヒドロキシエチルＤＬ−アスパルタミド）、ポリアセタールポリマー、ポ リオルトエステル、ポリカーボネート、ポリマレアミド、多糖類およびそれらの 共重合体のようなポリマーを含むが、それらに限定されない。数多くの適切な材 料、たとえば、ポリ乳酸−コーグリコールは商業的に入手可能である（Ａｌのバ ーミンガムのＢｉｒｍｉｎｇｈｘＩＩＩＰｏ１７ｍｅ＋　Ｉｎｃ　、またはワシ ントンＤＣのＤｕｐｏｎ＋　Ｃｏｍｐｘｎ７から入手可能）。

この発明の持続される放出の粒子は、実質的に一定の血清濃度を与えるために計 算された有効成分の放出速度を有する。低投与アンドロゲンがこの発明に従って 与えられ、以下に論じられる標準条件下で投与されるとき、アンドロゲンは前記 アンドロゲンの血清レベルをリットル当り１ナノモルと５０ナノモルとの間、典 型的に１と２５との間、好ましくは１と１５の間、最も好ましくはリットル当り １ナノモルと１０ナノモルとの間に維持する速度でバインダによって放出される 。標準条件は、１０ｍｇの粒子（粒子の２％の水性カルボキシメチルセルロース 担体に対する割合（Ｗ／Ｗ）が１＝１である製薬組成物２０ｍｇの形態をとる） の、若い雌のスプラーグーダウリイ　（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｖｌｅｙ）ラット の背中に対する経皮注射として、（ここに論じられる持続放出粒子の固有の放出 速度特性を測定するという限定された目的のためにのみ）規定される。アンドロ ゲンの血清濃度は、ラットから周期的に血清サンプルをとることによって測定さ れ、このサンプリングは投与後４８時間で開始され投与後２８日で終り、血清レ ベルが期間全体にわたって所望された範囲内に維持されていることを確かめる。

持続放出粒子の放出速度は、放出速度を変えるために当該技術分野で知られてい る多数のパラメータ（またはパラメータの組合わせ）のいずれかを変えることに よって変化し得る。これらのパラメータは持続放出バインダの組成、粒子サイズ およびコアローディングを含むが、それらに限定されない。たとえば、ポリラク チドバインダはよりゆっくりと加水分解され、かつゆえに（他の要因が等しいと して）乳酸およびグリコール酸の共重合体よりゆっくりと有効成分を放出するこ とが知られている。このような共重合体に対して、放出速度はモルパーセントグ リコリドが増えるにつれて上昇する。等しい重量の粒子に対して、放出速度は粒 子サイズが減少するにつれて上昇し、その理由は粒子をより小さくすることによ って、総表面積（全粒子の合計）をより大きくすることができるからである。同 様に、コアローディング（粒子中の活性化合物のパーセント）を大きくすると放 出速度が上昇する。これらのパラメータは放出の持続期間を制御するための既知 の方法で変化し得る。

持続放出製薬物の調製の詳細な議論はＦ、Ｌｉｍによって与えられ（Ｆ、Ｌｉｍ 、Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｋｌｉｅ＋ｏｅｎｃ ｉｐ＋ｕｌａ＋１ｏｎＳＦｒａｎｋｌｉｎ　Ｌｉｍ、ｅｄ、、ＣＲＣＰｒｅｓｓ 　５Ｂｏｃａ　Ｒａｊｏｎ。

１９８４）、その全体の開示はここに完全に記載されるかのように引用により援 用される。

上に述べた標準条件および測定値は粒子の固有の放出速度特性にのみ関連腰限定 的なものであるにすぎない。適切な放出速度を有する粒子は、以下に詳細に論じ られるように、様々な方法で処方および投与され得る。それらは様々な用途に当 てられ、広い投与量範囲で投与される（以下参照）。粒子は２８日という短期間 の間、または実質的により長い期間、たとえば２力月、３力月、６力月以上の間 有効成分の持続放出を与え得る。言換えれば、粒子は２８日間適切な血液レベル を維持しなければならないが、それらはかなり長い間これらの血液レベルを維持 するように望ましくは処方される。

投与量は血清レベルを所望されたレベルに維持する、たとえばリットル当り１と ５０ナノモルの間のアンドロゲンに維持するように主治医によって変えられ得る 。標準条件下でラットにおいて達成されたものに類似した循環血清レベルを達成 するのに必要なヒトの投与量は、ラットの投与量の約３０倍になるが、これは個 々の患者の代謝とともに変化する。このように、標準条件下でラットにおける１ ０ｍｇの注射後３０ナノモル血清濃度を維持するたとえば持続放出ＭＰＡ粒子は 、３００ｍｇの注射後のヒトにおける約３０ナノモル濃度、２００ｍｇの注射後 の２０ナノモル濃度、１５０ｍｇの注射後の１５ナノモル濃度などを与えること が予期される。前述の投与量は持続放出粒子の重量によるものであり、担体は含 まない。最終製薬組成物の投与量は担体を考慮するように調整されなければなら ない。

たとえば、１００ｍｇの粒子の投与量が所望される場合には、１・１の粒子対担 体比率を有する組成物は２００ｍｇの投与量で投与されなければならない。同様 に、投与は標準条件下の持続放出粒子の放出速度に基づいて調整されなければな らない。同一の血清濃度レベルを達成するために、たとえば５ナノモル（標準条 件下）の放出速度を有する粒子は、１０ナノモル（標準条件下）の放出速度を有 する粒子の投与量の約２倍で投与される。

典型的に、主治医は１と１０ナノモルとの間の、たとえば３−７ナノモルの有効 成分の血清レベルを維持するために計算された投与量から始める。患者の応答に 依存して、投与量はその後増減することが可能である。短い持続時間の粒子（た とえば約２８日）が最適の投与量が決定されるまで使用されることが好ましい。

その後、より長期間の持続放出粒子が最適の血清レベルを維持するための投与量 で投与される。この投与量はもちろんより短い持続期間粒子とより長い持続期間 粒子との間の標準的な放出速度のいかなる差についても上述のように調整される 。

好ましい活性化合物は、ここに論じられるすべてのアンドゥゲン化合物、たとえ ばプロペラ、デポプロペラまたはファールタルの商標名で、他の供給源の中から とりわけＵｐｉｏｂｎ　ａｎｄ　Ｆａ＋ｍ１Ｈｌｉａ　Ｃａｒｌｏ　Ｅｒｂａ、 Ｓ、　ｐ、　Ａ、から入手可能な、酢酸メトロキシプロゲステロン（６−アルフ ァーメチル、１７−アルファーアセトキシプロゲステロン）、すなわちｒＭＰＡ Ｊ、およびメガースの商標名で、他の供給源の中からとりわけＭｅａｄ　１ｏｈ ｎｓｏｎ　＆　Ｃｏ、から入手可能な、酢酸メゲストロール（１７α−アセトキ シ−６−メチル−プレグナ−４，６−ジエン−３，２０−ジオン）、すなわちｒ ＭＧＡＪを含む。

持続放出粒子は実質的に球状であることが好ましい。これはたとえば有効成分お よび持続放出バインダを有機溶媒に溶解し、その後溶媒を撹拌しながら水に導入 することによって達成され得る。分散された有効成分をその中に有する小さな微 小球体のバインダは、過剰な水に加えることによる水中の微小球体の溶解度の欠 如のために形成される。

微小球体からは有機溶媒が水と混合できる限りかなりの量の有機溶媒が取除かれ る。界面活性剤が、水中の微小球体形成に際し、溶媒からの微小球体の分離を助 けるために加えられ得る。微小球体の平均サイズはあまり激しくない撹拌によっ て大きくなったり、より激しい撹拌によって小さくなったりする。患者に投与さ れる際の注射の容易さのために、また所望されない残留有機溶媒の後の除去を容 易にするために、より小さな微小球体が好ましい。典型的に、微小球体の平均サ イズは５と４０μｍの間であり、好ましくは９と２８μｍの間である。

１つの好ましい実施例において、ＭＰＡのカプセル化は塩化メチレン中のＭＰＡ とポリマーとの混合物を含む微小小滴の水性懸濁液を形成することによって達成 される。ポリマーはたとえば乳酸とグリコール酸との５０：５０の共重合体であ ってもよい。微小球体の形成はポリ（ビニルアルコール）のような界面活性剤に よって制御される。小滴は大量の水によって抽出された塩化メチレンの除去によ って硬化され、この技術により微小球体の通常の真空蒸発プロセスより良い形状 が小滴に与えられる。微小球体のサイズは界面活性剤の量、および懸濁混合物の 撹拌の速度によって制御される。

粒子サイズの全体的な分布は変化してもよいが、狭くより均一な範囲が好ましい 。好ましくは、少なくとも９０％の粒子は１と４０μｍとの間である。最も好ま しくは、少なくとも９０％は９と２８μｍとの間である。ここで使用されるよう に、微小球体のサイズは、望ましくないことにかたまりになって池の微小球体に なった場合でさえ、個々の微小球体の直径をいう。不規則な形の粒子のサイズは 、粒子の任意の２つの部分の間の最も長い直線距離をいう。

サイズは電子顕微鏡下で粒子の代表的なサンプルを見ることによって測定され得 る。

微小球体を調製する際に使用するための代表的な有機溶媒は、塩化メチレン、酢 酸エチル、アセトン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ヘキサフルオロ アセトン、ヘキサフルオロイソプロパツール、アセトニトリルおよびそれらの溶 媒の混合物を含むが、それらに限定されない。

例３に記載されるように、溶媒抽出微小カプセル化プロセスによる微小球体の製 造の第１の部分で使用される代表的な界面活性剤は、ポリ（ビニル）アルコール 、ポリビニルビプロリドン、カルボキシメチルセルロース、ゼラチン、デンプン 、滑石、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウムおよびイオン剤を含むが、それらに 限定されない。界面活性剤は好ましくは水の約１〜１０パーセント（Ｖ　／　Ｖ 　）の間の量で添加される。

水の溶媒（溶解されたバインダを含む）に対する比率は変化し得るが、大量の過 剰な水（たとえば５および２０（ｖ／Ｖ）以上の水対溶媒比）が好ましい。

バインダは溶解度に依存して、約１パーセントと約２０パーセント（Ｖ　／　Ｖ 　）との間の濃度で有機溶媒に好ましくは添加される。好ましくは、溶媒の量は バインダおよび有効成分を完全に溶解するのに必要な最小量に近い。溶解が不完 全である場合、付加的な溶媒が加えられてもよい。有効成分のバインダに対する 割合は所望されるコアローディングによって決定され、これは好ましくは１：４ と７：３（ｗ　／　ｗ　）との間、より好ましくは３ニアと３：２との間で変化 する。コアローディングの程度は、持続放出生産物の放出速度または放出の持続 期間、もしくは当該技術分野で既知の他のパラメータに影響を及ぼすように選択 され得る。

例３に記載されるような溶媒抽出微小カプセル化プロセスを使用する微小球体の 製作において、酢酸メトロキシプロゲステロンおよび重合体または共重合体の溶 解のための好ましい溶媒は塩化メチメンであるが、部分的に水と混合でき、ヒト に対する毒性の程度が低い他の溶媒もまた適切である（たとえば酢酸エチル、ア セトン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ヘキサフルオロアセトン、ヘ キサフルオロイソプロパツール、アセトニトリルおよびこれらの溶媒の混合物） 。さらに、溶媒の毒性は溶媒がここに記載された溶媒除去技術を使用して実質的 に取除かれる場合には重要なファクタではない。好ましい界面活性剤はポリ（ビ ニルアルコール）であるが、他の界面活性剤、重合分散剤（つまりポリ（ビニル ピロリドン）カルボキシメチルセルロース、ゼラチン、デンプン）、滑石、硫酸 マグネシウム、炭酸カルシウムおよびイオン剤もまた適切である。

微小粒子はまた型取りプロセスを使って形成され、適切な溶媒（たとえば上に論 じられた溶媒の１つ）中のＭＰＡおよび重合体または共重合体の溶液が型取りさ れる。溶媒は大気圧で蒸発される。このようにして得られたフィルムは加熱され 、メツシュワイヤを通して押出される。結果として生じるロッドまたはフラグメ ントは微小粒子に粉砕される。微小粒子は適切なモレキュラーシーブを使ってサ イズ範囲に分けられる。平均サイズは典型的に１から２５０μｍであり、好まし くは５−１００μｍであり、より好ましくは９から２８μｍである。溶媒除去お よび注射の容易性はより小さな粒子、好ましくは平均サイズ（および粒子の９０ ％）が４０μｍより小さい粒子を使用することによってどちらも容易になる。

この発明に従って、好ましい製薬組成物は２０から７０％ＭＰＡまたはＭＧＡの 範囲の、より特定的には３０と６０％との間の範囲のコアローディングを有する 。有効成分対バインダの比率は好ましくは１：４から７：３であり、たとえば３ ニア−３：２である。

他の化合物の制御された放出製剤の調製のための一般的な使用方法についての情 報は、Ｋ１１ｃｈｅｌｌおよびＷｉｓｅの、Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍ ｏｌｏｇ７　、　Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、ｖａｔ、１１２、ｐｐ、４３ ６−４４８、ＢｅｃｋおよびＴｉｃｅＳＬｏｎｇ　ＡＮｉｎｇ　Ｓｔｅ＋ｏｉｄ 　ＣｏｎＨａｃｅｐｌｉｏｎ　（Ｄ、　Ｒ，旧５ｔｕｆｆ　Ｊｒ、、　ｅｄ　） 　、Ｒｘｖｅｎ　Ｐｒｅｓ＋　、　ニューヨーク、ｐｐ、１７５−１９９．１９ ８３、およびＷｉｓｅ他、ＢｉｏｌｏｇＹａｎｄ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　（Ｇ、　 Ｇ＋ｅｇｏｌｉａｄｉｓ、ｅｄ）　、Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐ「ｅｓｓ、　ニュー ヨーク、ｐｐ、２３７−２７０．１９７９において見出され、その全体の開示は ここに完全に記載されるかのように引用により援用される。

ステロイドは５０ｋｇの体重当り２５ｍｇの活性ＭＰＡまたはＭＧＡより少ない 量を配達する１日当りの投与量で好ましくは投与され、好ましくは１−１０ｍｇ 、最も好ましくは３−７ｍｇ（たとえば５ｍｇ）で投与される。選択された投与 量は好ましくはリットル当り５０ナノモルより少ない血清濃度、好ましくは患者 の応答に依存して、リットル当り１．０ナノモルとリットル当り１０．１５また は２５ナノモルとの間の血清濃度を維持する。

この発明に従って、１回の非経口注射は好ましくは２゜０グラムより少ない有効 成分（たとえば酢酸メトロキシプロゲステロンまたは酢酸メゲストロール）を含 み、より好ましくは０．１５と１．０グラムとの間を含む。

持続放出粒子からできるだけ多くの残留有機溶媒を除去することは非常に望まし い。実際、いくつかの有機溶媒は非常に毒性が高いので、その効果的な除去手段 が存在しない限り、持続放出粒子の形成には使用できない。粒子の物質構造内に トラップされない、たとえば単に表面と接触している「取込まれない」有機溶媒 は、従来の技術（たとえば水、エアストリームなどを使った複数の洗浄）によっ て容易に除去され得る。物質構造内に取込まれる有機溶媒はより問題であり、溶 媒除去の新規な方法が以下に論じられる。

溶媒除去は小さな粒子サイズの粒子を調製することによって容易にされる。好ま しくは、粒子は４０ミクロンより小さい平均サイズ、たとえば５と４０ミクロン の間、より好ましくは９と２８ミクロンの間の平均サイズを有する。

最も好ましくは、サイズ分布は粒子の９０％が上述のサイズ範囲内にあるような ものである。

好ましい実施例において、粒子の形成後、取込まれない溶媒は複数の水洗浄およ び／または空気乾燥のような従来技術によって除去される。

溶媒の除去は、粒子を穏やかな真空処理することによって好ましくは進められ、 そこでは圧力は少なくとも５０トルであり、温度は、（Ａ）３０℃と（Ｂ）粒子 のガラス転移温度より７℃低い温度とのうちの小さい方より高くない。

粒子のガラス転移温度（Ｔｇ’）より７〜２０℃低い温度で、好ましくはＴｇよ り７〜１５℃低い温度で、より好ましくはＴｇより７〜１２°Ｃ低い温度で、粒 子を強い真空（１，Ｃｌルより低く、好ましくは０．５トルより低い）処理する ことによって、粒子内に物理的に組込まれた溶媒を含む残留溶媒が粒子から実質 的に除去される。強い真空工程は、粒子中の残留有機溶媒を０．１％（前記粒子 の総重量に対する重量）より低い濃度まで下げるのに十分な時間期間の間続けら れる。好ましくは、残留溶媒は０．０５％より少なくされ、より好ましくは０． ０２％より少なくされる。

ガラス転移温度は当該技術分野で既知の多くの方法で測定または計算され、これ らの方法は図９に例示された標準的な技術によって熱フロ一対温度を測定しかつ グラフにすることを含むが、それに限定されない。最大加熱温度は、ガラス転移 温度より下のカーブの直線部分の終りより高くないように好ましくは設定される べきである（図９にやはり例示される）。より高い温度は望ましくないことに粒 子の塊りまたは熱劣化産物の形成を引起こし得る。この発明の範囲内に温度を維 持することによって、粒子は実質的に流れが自由であり、熱劣化産物を含まない 。しかしながら、この発明に従う穏やかな熱の使用は有機溶媒の除去を実質的に 助ける。

好ましい実施例において、残留溶媒を５％より少なく、好ましくは２％より少な く（粒子の総重量に対する重量）低減する穏やかな真空工程または他の方法は、 強い真空工程に進む。より高い溶媒レベルは強い後続の真空工程の間粒子破壊を 望ましくないことに引起こし得る。このような破壊は粒子の放出速度特性に望ま しくない影響を及ぼし得る。

前述の穏やかな真空工程が使用された場合、典型的な時間期間は１日から１０日 であり、好ましくは１日から５日であり、より好ましくは２日から４日である。

強い真空工程の典型的な時間期間は１日から２０日であり、好ましくは２日から １５日であり、より好ましくは３日から１０日である。しかしながら、強い真空 工程の持続期間は、残留有機溶媒が所望されたレベルより低くされるまで継続さ れなければならない。残留溶媒のレベルはたとえば下の例６に示されるような既 知の方法によって決定され得る。この発明の方法は溶媒を０．０２％（Ｗ／Ｗ） より少なく低減するために成功して使用されたが、これは例６におけるようにＧ Ｃ分析を使用する最も低い検出可能な量である。

この発明に従って調製された、持続放出粒子は様々な既知の方法での最終使用の ために調製され得る。好ましくは、それらは既知の技術（たとえば例１０に記載 されるような）によって滅菌される。それらは製薬的に受容可能な希釈剤または 担体と組合わされ得る。既知の防腐剤も添加され得る。好ましくは、持続放出粒 子の濃度（組成物の総重量に対する重量）は約１０と７０パーセントとの間であ る。担体は好ましくは粒子のバインダが実質的に溶解しないもの、たとえば水、 蒸留水または塩水中のカルボキシメチルセルロースである。

この発明に従って、好ましい微小球体は熱分解不純物が存在しないことによって 特徴付けられる。これは微小球体を乾燥させるための低温度および高真空を使用 することによって達成され得る。

この発明に従う微小球体の非経口注入のための好ましい担体は、カルボキシメチ ルセルロースの塩水、希釈水溶液、グリセリンの希釈水溶液、グリコールの希釈 水溶液、水または水希釈エタノールからなるグループから選択される。

より特定的に、好ましい担体はカルボキシメチルセルロースの２から５％の水溶 液である。

この発明の持続放出製剤を投与するための好ましい方法は、皮下または筋肉的注 射および経口投与を含むが、それに限定されない。

この発明に従って使用される低投与量のために、副作用が十分低減されるので、 この発明の方法の予防的用途は高投与法よりずっと実用的でありかつより広く受 入れられやすいように思われる。治療投与量は既に低いので、「予防的治療」の 有効性はより少ない投与量を使用することによってあやうくされる必要はない。

例１ 低投与量酢酸メトロキシプロゲステロン（“ＭＰＡ″′）による、ラットにおけ るジメチルベンズ（ザ）−アントラセン（ＤＭＢＡ）によって誘発される乳房癌 の予防乳房箱の発生率を低減するにあたってのこの発明の有効性を示すために、 図１はジメチルベンズ（ザ）アントラセンで癌を誘発する１週間前のデボ−プロ ペラ（酢酸メトロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）（３０ｍｇ））の１回の皮下注 射の効果を例示する。図１はＤＭＢＡの投与後３０日から８５日の期間を示す。

図１の１つのカーブはデポ−プロペラによって保護されたグループの動物当りの 腫瘍の平均数を示し、他方のカーブは保護されていないグループの動物当りの腫 瘍の平均数を示す。デポ−プロペラの３０ｍｇの注射は６力月の期間にわたって 、１日当り約０．１７ｍｇの活性酢酸メトロキシプロゲステロンを放出すること が予測される。図１の２つのグラフを比較することによってわかるように、デボ −プロペラ処置されたグループは保護されてないグループよりはるかに優れた腫 瘍の増殖に対する抵抗性を示した。８５日後、ラット当り平均１．８９の＠瘍か 保護されていないグループで観察されたが、デボ−プロペラ保護されたグループ ではラット当りわずか０゜３０の腫瘍しか観察されなかった。腫瘍数およびカリ ノくスで測定されたサイズは週ごとに決定された。

例２ 低投与量酢酸メトロキシプロゲステロンによる、ラットにおけるジメチルベンズ （ザ）−アントラセンによって誘発された乳房癌の処置 図２はこの発明の方法に従って達成され得る乳房癌成長の抑制を例示する。腫瘍 はジメチルベンズ（ザ）アントラセンを使用して卵巣摘出されたラットにおいて 誘発された。

エストラジオールはラットの処置および対照グループの双方において成長を刺激 するために使用された。処置グループの各動物は、３０ｍｇのデポ−プロペラの １回の皮下投与を受けた（約６カ月の期間にわたって１日当り約０．１７ｍｇの 活性酢酸メトロキシプロゲステロンを放出することが見積られる）。この図は処 置後の各グループの総腫瘍面積における平均的なエストラジオールにより刺激さ れた変化を例示する。図２に見られるように、デポ−プロペラで処置されたグル ープは処置されていないグループより非常に少ない腫瘍成長を示した。

例３ 溶媒抽出プロセスによる酢酸メトロキシプロゲステロン含有微小球体の調製 ポリマー材料５０１５０ポリ（ＤＬ−ラクチドーコーグコリド）　（Ｂｉｒｍｉ ｎｇｈａｍ　Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｉｎｃ、Ｂｉ＋ｍｉｎｇｈａｍ、Ａ１．によって 供給される）（“ＰＬＧ”）の完全な溶解は、１５０−２００ｒｅｖ／ｍｉｎの 速度に設定されたＫ　Ｓ　−１−０振とう機（ＢＥＡ　Ｅｎｐｒｏ＋ｅｃｈ　Ｃ ｏ「ｐ、　から）を使用し、溶媒を使って一晩振とうすることにより達成される 。使用された溶媒は塩化メチレン（ＣＨ２Ｃ１２）であり、ＢＤＨから入手され 、使用直前に一度蒸留される。ポリマー（１，５０ｇ）が連続的な振とう下で既 にＣＨ２Ｃｌ２　（１５，００ｇ）を含むガラスビンに添加される。酢酸メトロ キシプロゲステロン（０，７５ｇ）が連続振とうしながら加えられ、ＰＬＧ−Ｍ ＰＡ−ＣＨ２Ｃ１２溶液を形成する。

別に、２５０−ｍ１樹脂ケトル（Ｋｏｎｔｅｓから）の中で、９４ｍ１の水と６ ｍｌの界面活性剤［ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）（登録商標＾ｉ＋ｙｏ １２０５、Ａｉｒ　Ｐｒｏｄｕｃ目＆　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓにより供給される） ］が混合され、実験室の強力な撹拌器にセットされたテフロンのタービン状回転 翼を使って連続的に撹拌しながら維持される。次に樹脂ケトルの上部分の４つの ポートのうちの１つを介して挿入された２、Ｏｍｌのガラスピペットを使用して 、１．　１６ｍ１の塩化メチレンが水溶液を飽和させるために界面活性剤溶液に 添加され、この段階での塩化メチレンの抽出を防止する。撹拌が５分間８５０ｒ ｐｍで続けられる。微小球体は１６ゲージ６−インチ長の針を備えた全体がポリ プロピレン製のシリンジを使用して、前に調製されたＰＬＧ−ＭＰＡ−ＣＨ２Ｃ １２溶液を、撹拌しているＣＨ２Ｃｌ２飽、　和されたＰＶＡ溶液に添加するこ とによって調製される。

ＭＰＡ溶液を加えた後、撹拌はさらに５分間継続される。

微小球体の硬化 硬化工程は以下のように実行される。

１）　樹脂ケトルの内容物は素早く硬化浴に注がれ、樹脂ケトルは蒸留水で洗浄 され、内容物は再び硬化浴に注がれる。硬化浴は５ｔの蒸留水を含む大きなステ ンレス鋼ビー力（７Ｌ）からなる。撹拌は２．５インチのＳＳ回転翼を備えた実 験室の強力撹拌器を使って、２０分間高速（８５０ｒｐｍ）で維持される。

２）　微小球体はミリポア１４２ｍｍ濾過システムを使用して洗浄媒質から分離 される。硬化後、浴の内容物は２０１ミリボア調剤加圧容器に移される。このと き、撹拌が中断すると沈下する微小球体を効率的に回収させるために、硬化ＳＳ ビーカーの完全な洗浄を確実にするための注意をしなければらない。微小球体は 圧縮空気（１０ｐｓｉ）で膜ユニットを通して調剤容器の内容物を押すことによ って、１４２ｍｍ膜（８μｍ孔径）上に集められる。

３）　この膜は蒸留水で洗浄され、微小球体は同時に膜から洗い流されて第１の 浴と同一の第２の硬化浴に落される。１４２ｍｍ膜上での微小球体の収集は上述 のようにもう一度行なわれる。

４）　微小球体の最終洗浄および乾燥はミリポア１４２ｍｍ濾過システムで行な われる。第１の乾燥工程は１時間の間ＩＱｐｓｉに維持された空気のストリーム を使って達成される。微小球体は膜から〜１インチのドリエリテ（Ｄｒｉｅｒｉ ｔｅ）を含む乾燥器に移され、２．３日の期間の間中くらいの真空（７０トル） 下に置かれる。最終乾燥は３５−４０℃で０．４トルの圧力で真空オーブンにお いて達成され、溶媒が０．０２％（微小球体の総重量に対する重量）のＣＨ２Ｃ ｌ２の検出限界を有するガスクロマトグラフィーによって検出できなくなるまで 行なわれる。このように、この技術は実質的にすべての残留有機溶媒を除去し、 残った溶媒は０．０２％より少ない。

例４ 型取り法による６０％酢酸メトロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）／４０％登録商 標メディソーブ（Ｍｅｄｉｓｏ＋ｂ）　８５：１５ＤＬポリ（乳酸−グリコール 酸）共重合体（ＰＬＧＡ）微小粒子の調製 酢酸メトロキシプロゲステロン（ＭＰＡ）がステラロイズ（Ｓ＋ｅ＋ａｌｏｉｄ ｓ　）から入手されたままで使用された。使用に先立って、その成分はＵＶ分光 およびその融点によって特性を検査された。登録商標メディソーブ８５：１５Ｄ Ｌポリ（乳酸−グリコール酸）共重合体はＤａＰｏｎｊから入手され、そのまま 使用された。塩化メチレン（入手可能な最高グレード）はＦｉｓｈｅｒ　５ｃｉ ｔｎｔｉｌｉｃから入手された。ポリマー（６，ＯＯ２’２　ｇ）は２５％（０ ，２５ｇＰＬＧＡ／ｍｌ塩化メチレン）溶液となるよう２４ｍ１の塩化メチレン において溶解された。酢酸メトロキシプロゲステロン（９，００２２ｇ）はポリ マー溶液に添加され、撹拌が完全な混合を確実にするために続けられた。この溶 液は均一な厚さに広がるようにＢｏｘｔｏｎ−Ｂ＋ａｄｌｅ７調整可能ブレード を使用してきれいな平坦なガラスプレート上で型取りされた。型取りされたフィ ルムは数時間換気装置で乾燥された。

溶媒のほとんどが蒸発した後、結果として生じるフィルムはガラスプレートから 引き剥がされ、４日間室温で真空乾燥された。

型取り工程で形成されたフィルムは、溶媒除去工程が非常に大きな空隙を残した ので非常に低密度のものであった。

空隙は、熱および油圧を利用する圧縮工程によって、液体の微小粒子への浸透を 少なくするために低減された。フィルムは約１２５℃でＰａ５ａｄｅｎａ　Ｈｙ ｄｒｘｕｌｉｃｓ　Ｉｎｃ、　Ｐｒｅｓｓを使ってロッドに押出された。

押出されたロッドは冷却された粉砕チャンバを有する市販の粉砕機を使って小さ な粒子に粉砕された。粉砕後、粉末は３８から１２５μｍ、　１２５から１８０ μｍおよび１８０から２５０μｍのサイズ範囲の微小粒子を収集するために一連 の合衆国標準ふるいを通された。ふるいにかけられた微小粒子が集められた。

例５ 残留溶媒蒸発 ａ）　アブデルハルデン（人ｂｄｅ＋ｈａｌｄｅｎ　）装置（Ａｌｄ＋ｉｃｈ　 Ｃｈｅｍｉｃａｌ＋　Ｃｏ、から供給される）が乾燥のために使用された。この ガラス製品の最も重要な特徴は、乾燥剤（モレキュラーシーブ３Ａ）の存在下で 乾燥するためサンプルをストアできることとあわせて、高い真空および加熱を同 時に利用することが可能であることである。発明者らの研究では、高真空（〜１ ０−２トル）はＥ　２　Ｍ　５　Ｅｄｖａｒｄｓ真空ポンプで達成される。乾燥 のためのサンプルの加熱は、４５℃の温度を得るため、溶媒混合物：バッチＭＰ Ａ−ＭＢ−■の場合にはＣＨ２Ｃｌ２＋アセトンをリフラックスすることによっ て達成される。

ｂ）　バッチＭＰＡ−ＭＢ−ＶＩ　ＩからＭＰＡ−ＭＢ−Ｘｌ、ＭＰＡ−ＭＦ　 ｌ−７３、ＭＰＡ−ＭＬＶ−３１、ＭＰＡ−ＭＬＶ−３２、ＭＰＡ−ＭＬＶ−３ ４、ＭＰＡ−ＭＬＶ−３５、ＭＰＡ−ＭＬＶ−３９およびＭＰＡ−ＭＬＶ−４０ は以下のように乾燥された。つまりすべてのこれらのバッチにおいて、真空オー ブンが微小球体のさらなる乾燥を達成するために使用された。真空（０，１トル ）はＥ２　Ｍ　５　Ｅｄｗａｒｄ＋真空ポンプを使って達成される。温度は十分 制御され（４４から４６℃）、すべてのこれらのバッチはこの系において同時に 乾燥した。

例６ 残留塩化メチレンの決定 微小球体における残留塩化メチレン濃度は、ＤＢ−ＩキャピラリカラムおよびＦ ＩＤ検出器を備えたパリアン（Ｙａｒ目ｎ）３７００ガスクロマトグラフを使用 してＧＣ分析によって決定される。温度プログラムは、４０℃で７分間の後、２ ００℃（１ｍｉｎ）になるまで１０　℃／ｍ　ｉ　ｎの速度で加熱である。注入 量は１．０μｌである。ＧＣ分析のために、微小球体（〜２５ｍｇ）はＣＨＣｌ ３　（ＨＰＬＣグレード）　、１ｍｌに溶解され、５ｍｌのイソ−オクタンで希 釈される。塩化メチレンの正確な濃度は、５つの標品から確立されたキャリブレ ーションカーブを使用して決定される。これらの標品は０．１から１．　０％（ Ｗ／Ｗ）の範囲の濃度の純粋な塩化メチレン（ＣＨ２Ｃ１２）およびクロロホル ム（ＣＨＣｌ３）から調製される。

以下の表は残留塩化メチレン分析に対して得られた結果例７ ＭＰＡコアローディング決定 ａ）　核磁気共鳴　この決定はδ＝０．６５ｐｐｍにおけるＭＰＡの１９−メチ ルグループのピーク、およびポリマーの水素原子のピーク（δ＝５．２０および δ＝４．８における多重項）下の面積の分析によりＮＭＲ分光によって行なわれ た。ブルー力（Ｂｒｕｋｅｒ）　ＡＣ−Ｆ　３００　Ｆ　ＴＮＭＲスペクトロメ ータが使用された。ＮＭＲスペクトルの例については図３を、ＭＰＡおよびポリ マーの既知の混合物のＮＭＲスペクトルから引出されるこの決定のための標準カ ーブの例については図４を参照されたい。

ｂ）　立体排除クロマトグラフィー　立体排除クロマトグラフィー（Ｓ　Ｅ　Ｃ ）によるＭＰＡコアローディング測定は、ＰＬｇｅ１５０人５μｍカラ人語μｍ カラムとしてＨＰＬＣグレードクロロホルムを使用するＰＬｇｅ　ｌ混合された カラムを使って、ペルキン−エル？　−（Ｐｕｋｉｎ−Ｈｍｕ　）　２５０　Ｉ 　Ｓｏ／ＬＣ−３０ＳＥＣシステムを使用して行なわれた。たとえば、図５にお いて、５０：５０ＰＬＧ微小球体の測定は４０℃で実行され、ＭＰＡおよびＤＬ −ＰＬＧはこれらの条件下でよく分離された。サンプルのコアローディングは、 ＰＬＧ／ＭＰＡ混合物の標準濃度から作られたキャリブレーションカーブ（挿入 図）を参照して、ＭＰＡピーク下の面積の測定によって決定された。

例８ 走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）によって決定される微小球体の物理特性 その表面形態を分析するために、微小球体は電子走査顕微鏡（ＳＥＭ）　、ＪＥ ＯＬ　ＪＳＭ　Ｔ３３０Ａ装置を使用して調べられた。サンプルは５００−６０ ０Ａの厚すヲ有する金の層をスポットする前に両面テープ上に微小球体を堆積さ せることによって調製された。これらの分析もまた微小球体の平均直径（φ）を 決定するために使用されてきた。これらの決定は低倍率（３５０Ｘ）（図６Ａ） で撮られた写真上で見られるすべての微小球体を人がカウントしかつ測定するこ とによって行なわれる。最大２０００Ｘな分析が可能になる（図６Ｂ）。

たとえば、バッチＭＰＡ−ＭＢ−ＶのＭＰＡ微小球体のサイズ分布の正確な決定 は、８８Ｍ写真からの微小球体の直径の直接測定によって行なわれた。図８に見 られるように、このようにカウントされた６８０の微小球体の９５％より多くが ４０μｍより小さいサイズを有し、平均直径は１８．６±９．７　（Ｓ、Ｄ、） ａｍである。そのような小さなサイズの微小球体は物質の注射を容易にし、放出 の期間を短縮する。

図７の微小球体の横断面は、ＭＰＡがポリマーに分散された小島状のものに集中 されることを示す。

例９ 示差走査熱量測定（Ｄ　Ｓ　Ｃ）による微小球体の定性って行なわれた。この装 置はインジウムでキャリプレートされ、１０℃／　ｍ　ｉ　ｎの走査速度で動作 された。

図９において、ＭＰＡ微小球体のＤＳＣカーブは最大乾燥温度が容易に決定され 得ることを示す。

例１０ 微小球体の滅菌 注射前に、微小球体はコバルト−６０源（ガンマセル（Ｇａｍｍｘｃｅｌｌ　） 　２００）で達成される２、２メガラツド（Ｍｅｇａｒａｄ＋）のガンマ放射に さらすことによって滅菌された。ＭＰＡの安定性は立体排除クロマトグラフィー （ＳＥＣ）によってチェックされ、一方ポリマーの安定性はキャリブレーション のためのポリスチレン標品を使用する５ＥＣ１およびウベローデ型（Ｕｂｂｅｌ ｏｈｄｅ　）毛管粘度計を使用する相対粘度の変更によって分析された。

ガンマ放射（２，２メガラツド）への暴露はＭＰＡを損わないが、ＣＨ２Ｃｌ２ 溶液における微小球体の低減された特異粘度は、０．３０１±ｏ、ｏｏｓから０ ．２６２±０．００３ｄＬ／ｇまで下げられ、い（つかのポリマー鎖が破壊され たことを示す。

バッチＭＰＡ−ＭＢ−Ｖのサンプルは異なった量のガンマ放射（０，１，１，２ ，２メガラツド）にさらされ、分子量分布パラメータ［Ｍ　（ｎ　１　）　、Ｍ 　ｎ　ＳＭ　ｗ　ＳＭ　ｚ　ｓＭ（ｚ−＋４）］　（図１０Ａ参照）およびその 多分散の度合（Ｍｗ／Ｍｎ）（図１０Ｂ）が測定された。

これらのデータは、支配的なプロセスがポリマー鎖のランダムな分割であること を示す。このように、照射された微小球体は照射されていない微小球体より素早 く生物分解され、照射の影響は微小球体が調製される場合に、たとえ、　ば最終 生産物に所望されるよりわずかに低い照射前の放出速度を設定することによって 、考慮されるべきである。

例１１ ＭＰＡ含有微小球体を皮下に注射されたウサギにおける血清ＭＰＡレベル ニューシーラントホワイトラビット（約２．７ｋｇ）が１０時間の光および１４ 時間の暗闇（０７：００時にライトオン）の養生法下でケージ当り１匹入れられ 、Ｍａｕｌ（ｅｓＫｉｌｏｐｌｏｓ　（Ｑｕイ１１６５　Ｃａｎａｄａ）から入 手された１６％の「ラビット用タブレット」および任意に水道水が与えられた。

２％カルボキシメチルセルロースおよび１％Ｔｖｅｅｎ８０の溶液中に懸濁した ５０ｍｇのＭＰＡ含有微小球体（バッチＭＰＡ−ＭＢ−Ｖ）が、１グループの１ ０匹ノラビットに皮下注射された。血液サンプルが異なった時間間隔でとられ、 ＭＰＡ濃度がＲＩＡによって測定された。ＭＰＡの血清レベルは図１１に報告さ れる。

例１２ この発明のＭＰＡ含有微小球体を皮下に注射されたラットにおける血清ＭＰＡレ ベル 若い雌の５ｐｒＢｕｅ−Ｄｕｌｅ７ラツト［Ｃｒ　ｌ　：　ＣＤ　（ＳＤ）Ｂｒ ］はＣｈａｒｌａｓ　Ｒｉｖｅ＋　Ｃａｎａｄａ　Ｉｎｃ、　（５ｔ−Ｃｏｎｓ ｌａｎｊＳＱｕｅｂｅｃ）から入手され、１４時間の光および１０時間の暗闇（ ０５：００時にライトオン）の養生法下でケージ当り２匹入れられた。動物には ラット用餌および任意に水道水を与えられた。

２％カルボキシメチルセルロースおよび１％Ｔｖｅｅｎ−８０の溶液中に懸濁し た増加された投与量（５，１０および２０ｍｇ）のＭＰＡ含有微小球体が、１グ ループの１０の雌のラッｈ　（Ｓｐ＋Ｂｕｅ−Ｄａｖｌｅ７）に皮下注射された 。血液サンプルは異なった時間間隔でとられ、ＭＰＡ濃度はＲＩＡによって測定 された。結果は図１２に示される。

例１３ 低投与量ＭＰＡ　（微小球体）によるラットにおけるジメチルベンズ（ザ）−ア ントラセン（ＤＭＢＡ）によって誘発される乳房癌の予防 材料および方法 動物および乳房癌の誘発 乳房癌は、生後５０から５２日の雌のＳｐ＋ａｇｕｅ−Ｄａｖｌｅｙ（Ｃｒ　ｌ 　：ＣＤ　（ＳＤ）Ｂｒ）ラット（Ｃｈｕｌｅｓ旧ｙｅｒ　Ｃａｎａｄａ　Ｉｎ ｃ、５ｔ−Ｃｏｎｓｔａｎｔ、Ｑｕｅｂｅｃから入手される）にお（為で、１ｍ ｌのコーン油中の２０ｍｇのジメチルベンズ（ザ）アントラセン（ＤＭＢＡ）　 （Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｉｓ　Ｃｏ、、　ＳＬ　Ｌａｕｉｓ、　ＭＯ）の １回の胃内投与によって誘発された。

吸厚 ＤＭＢＡの投与１週間前に、動物は３つのグループ（無傷、無傷＋３０ｍｇＭＰ Ａおよび無傷＋１００ｍｇＭＰＡ）に分けられ、それぞれ微小球体を含む３０ｍ ｇまたは１００ｍｇＭＰＡの１回のｓ、ｃ、投与を受けた。

結果 図１３に例示されるように、ＤＭＢＡの投与後８５日で、無傷の動物においては 、６３％の動物が検出可能な乳房腫瘍を有し、３０ｍｇのＭＰＡ　（微小球体） で予め処置された動物においては、わずか７．４％および６．３％の動物がそれ ぞれ検出可能な乳房腫瘍を有した。このデータは、ＭＰＡ微小球体での予めの処 置により、ラットにおけるＤＭＢＡによって誘発される乳房癌の増殖は抑制され ることを明らかに示し、したがって女性のヒト乳癌の予防のためのＭＰＡ微小カ プセルの可能な用途を提案する。

ここに使用された語句および説明は、単に例示のために示された好ましい例であ り、特許請求の範囲によって規定される本発明の実施に際して可能であると当業 者が認める多くの変形に対し限定を意図するものではない。

＋ＩＮＴＡＣＴ　Ａ１ ＦＩＧ、　４ ＦＩＧ、６Ａ ＦＩＧ、６Ｂ ＦＩＧ、７Ａ ＳＩＺＥ　ＲＡＮＧＥ　（４ｍ）　ｑ４７．−（、、、）ＦＩＧ、　８ ＴＥＭＰＥＲＡＴＬＩＲＥ　（’Ｃ）　、＠１（（。。）ＦＩＧ、　９ ＲＡＤＩＡＴＩＯＮ　（ＭＲＡＤＳ）　ＫＮ　（ＭＦ２ＡＤＳ）ＷＥＥＫＳ　Ａ ＦＴＥＲＩＮＪＥｃＴＩＯＮ　＝、＞Ｈ復ｎ週イＥ国際調査報告 フロントページの続き （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＳＥ）、ＡＴ、ＡＵ 、ＢＢ、ＢＧ、ＢＲ，ＣＡ、ＣＨ，Ｃ３，ＤＥ、ＤＫ、ＥＳ、ＦＩ、ＧＢ、ＨＵ 、ＪＰ、　ＫＰ、　ＫＲ，ＬＫ、　ＬＵ、　ＭＧ、　ＭＮ、　ＭＷ、　ＮＬ。

Ｎｏ、ＰＬ、Ｒ○、ＲＵ、ＳＤ、５Ｅ （７２）発明者　リペイジ、マーティンカナダ、シイ・２・ケイ　トピイ・５ ケベツク州、プルバール・ドウ・う・モリーユ、１４２０、ナンバー・００１

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．製薬的に許容可能な担体または希釈剤、および複数個の持続放出粒子を含む 製薬組成物であって、前記粒子は、ヒトの組織と生物学的適合性がありかつ体内 で生物分解を受けて生物学的適合性のある代謝生産物になる持続放出バインダ内 で分散されたアンドロゲンステロイドを含み、前記粒子は、標準的な条件下で、 投与後４８時間から始まり投与後少なくとも２８日で終る時間期間の間、リット ル当り１．０と５０．０ナノモルとの間の前記アンドロゲンステロイドの循環血 清レベルを維持する速度および持続期間で、前記バインダの前記生物分解の間お よびその結果として前記アンドロゲンステロイドを放出することが可能であり、 前記アンドロゲンステロイドは、アンドロゲン受容体に対して約２×１０−８Ｍ より小さいＫｉ値、およびリットル当り３．０ナノモルより低い濃度で最大値の 半分の値に到達するヒト乳癌ＺＲ−７５−１細胞の成長に対するアンドロゲン受 容体媒介された抑制効果を有するが、目に見える男性化作用は有さない、製薬組 成物。 ２．持続放出粒子から残留有機溶媒を除去する方法であって、 （Ａ）５μｍと４０μｍとの間の平均サイズを有する持続放出粒子を形成するス テップを含み、前記粒子は持続放出バインダ内に分散された活性化合物を含み、 かつ残留有機溶媒を望ましくないことに含み、さらに（Ｂ）前記粒子を強い真空 処理するステップを含み、このステップにおいて、圧力は１．０トルより小さく 、温度は前記粒子のガラス転移温度より低い直線状カーブの上部分で設定され、 前記徴小球体の残留有機溶媒を０．１％（前記粒子の総重量に対する重量）より 小さい濃度に低減するのに十分な時間期間の間真空処理する、方法。 ３．治療または予防を必要とする患者に、付加的な製薬担体または希釈剤を伴っ てまたは伴わずに、効果的な量の持続放出粒子を投与することによる乳癌の治療 または予防の方法であって、前記粒子は酢酸メドロキシプロゲステロンおよび酢 酸メゲストロールからなるグループから選択されるアンドロゲンステロイドを含 み、前記アンドロゲンステロイドは、ヒトの組織と生物学的適合性がありかつ体 内で生物分解を受けて生物学的適合性のある代謝生産物になる持続放出バインダ 内に分散され、前記粒子は、標準的な条件下で、投与後４８時間から始まり投与 後少なくとも２８日で終る時間期間の間、リットル当り１．０と５０．０ナノモ ルとの間の前記アンドロゲンステロイドの循環血清レベルを維持する速度および 持続期間で、前記バインダの前記生物分解の間およびその結果として前記アンド ロゲンステロイドを放出することが可能である、方法。 ４．治療または予防を必要としている患者に、付加的な製薬担体または希釈剤を 伴ってまたは伴わずに、効果的な量の持続放出粒子を投与することによる骨粗し ょう症の治療または予防の方法であって、前記粒子は酢酸メドロキシプロゲステ ロンおよび酢酸メゲストロールからなるグループから選択されるアンドロゲンス テロイドを含み、前記アンドロゲンステロイドは、ヒトの組織と生物学的適合性 がありかつ体内で生物分解を受けて生物学的適合性のある代謝生産物になる持続 放出バインダ内に分散され、前記粒子は、標準的な条件下で、投与後４８時間か ら始まり投与後少なくとも２８日で終る時間期間の間、リットル当り１．０と５ ０．０ナノモルとの間の前記アンドロゲンステロイドの循環血清レベルを維持す る速度および持続期間で、前記バインダの前記生物分解の間およびその結果とし て前記アンドロゲンステロイドを放出することが可能である、方法。 ５．治療または予防を必要としている患者に、付加的な製薬担体または希釈剤を 伴ってまたは伴わずに、効果的な量の持続放出粒子を投与することによる子宮内 膜癌の治療または予防の方法であって、前記粒子は酢酸メドロキシプロゲステロ ンおよび酢酸メゲストロールからなるグループから選択されるアンドロゲンステ ロイドを含み、前記アンドロゲンステロイドは、ヒトの組織と生物学的適合性が ありかつ体内で生物分解されて生物学的適合性のある代謝生産物になる持続放出 バインダ内に分散され、前記粒子は、標準的な条件下で、投与後４８時間から始 まり投与後少なくとも２８日で終る時間期間の間、リットル当り１．０と５０． ０ナノモルとの間の前記アンドロゲンステロイドの循環血清レベルを維持する速 度および持続期間で、前記バインダの前記生物分解の間およびその結果として前 記アンドロゲンステロイドを放出することが可能である、方法。 ６．治療または予防を必要としている患者に、付加的な製薬担体または希釈剤を 伴ってまたは伴わずに、効果的な量の持続放出粒子を投与することによる子宮内 膜症の治療または予防の方法であって、前記粒子は酢酸メドロキシプロゲステロ ンおよび酢酸メゲストロールからなるグループから選択されるアンドロゲンステ ロイドを含み、前記アンドロゲンステロイドは、ヒトの組織と生物学的適合性が ありかつ体内で生物分解されて生物学的適合性のある代謝生産物になる持続放出 バインダ内に分散され、前記粒子は、標準的な条件下で、投与後４８時間から始 まり投与後少なくとも２８日で終る時間期間の間、リットル当り１．０と５０． ０ナノモルとの間の前記アンドロゲンステロイドの循環血清レベルを維持する速 度および持続期間で、前記バインダの前記生物分解の間およびその結果として前 記アンドロゲンステロイドを放出することが可能である、方法。 ７．避妊を望む雌の患者に、付加的な希釈剤または担体を伴ってまたは伴わずに 、効果的な量の持続放出粒子を投与することを含む避妊の方法であって、前記粒 子は、ヒトの組織と生物学的適合性がありかつ体内で生物分解されて生物学的適 合性のある代謝生産物になる持続放出バインダ内に分散された酢酸メドロキシプ ロゲステロンを含み、前記粒子は、標準的な条件下で、投与後４８時間から始ま り投与後少なくとも２８日で終る時間期間の間、リットル当り１．０と５０．０ ナノモルとの間の前記酢酸メドロキシプロゲステロンの循環血清レベルを維持す る速度および持続期間で、前記生物分解の間およびその結果として前記酢酸メド ロキシプロゲステロンを放出することが可能である、方法。 ８．アンドロゲンステロイドを含む持続放出粒子であって、前記アンドロゲンス テロイドは、ヒトの組織と生物学的適合性がありかつ体内で生物分解されて生物 学的適合性のある代謝生産物になる持続放出バインダ内に分散され、前記粒子は 、標準的な条件下で、投与後４８時間から始まり投与後少なくとも２８日で終る 時間期間の間、リットル当り１．０と５０．０ナノモルとの間の前記アンドロゲ ンステロイドの循環血清レベルを維持する速度および持続期間で、前記バインダ の前記生物分解の間およびその結果として前記アンドロゲンステロイドを放出す ることが可能であり、前記アンドロゲンステロイドはアンドロゲン受容体に対し て約２×１０−８Ｍより小さいＫｉ値、およびリットル当り３．０ナノモルより 低い濃度で最大値の半分の値に到達する、ヒト乳癌ＺＲ−７５−１細胞の成長に 対するアンドロゲン受容体媒介された抑制効果を有し、目に見える男性化作用は 有さない、持続放出粒子。 ９．製薬的に許容可能な希釈剤または担体、およびヒトの組織と生物学的適合性 があり体内で生物分解されて生物学的適合性のある代謝生産物になる持続放出バ インダ内に分散された活性剤を含む５μｍと４０μｍとの間の平均サイズを有す る複数個の持続放出微小球体を含む製薬組成物であって、前記微小球体は、標準 的な条件下で、少なくとも２８日の期間にわたって前記バインダの前記生物学的 分解の間およびその結果として前記活性剤を放出することが可能であり、前記微 小球体中の有機溶媒は、０．１％（微小球体の総重量に対する重量）以下である 、製薬組成物。 １０．持続放出微小球体から残留有機溶媒を除去する方法であって、 （Ａ）有機溶媒に酢酸メドロキシプロゲステロンおよび酢酸メゲストロールから なるグループから選択された少なくとも１つのアンドロゲン化合物と、加水分解 可能なエステル結合体を有する制御された放出ポリマーとを溶解して混合物を形 成し、かつ前記混合物を十分な撹拌下で水に添加することにより、５と４０μｍ との間の平均サイズを有する持続放出微小球体を形成することによって、５と４ ０μｍとの間の平均サイズを有する前記微小球体の形成を行なうステップと、 （Ｂ）前記微小球体を溶液から分離し、少なくとも２４時間の期間の間３０℃以 下の温度で少なくとも５０トルの真空で処理するステップと、さらに（Ｃ）前記 徴小球体中を第２の真空処理するステップとを含み、このステップにおいて、圧 力は１．０トルより低く、温度は前記微小球体のガラス転移温度より７〜１２℃ 低く、前記微小球体の残留有機溶媒を０．０２％（前記微小球体の総重量に対す る重量）より小さい濃度まで低減するのに十分な時間期間の間真空処理する、方 法。 １１．製薬組成物であって、１０から７０％（前記組成物の総重量に対する重量 ）の制御された放出微小球体を含み、さらに製薬的に許容可能な希釈剤または担 体を含み、前記微小球体は酢酸メドロキシプロゲステロンおよび酢酸メゲストロ ールからなるグループから選択されたアンドロゲンステロイドを含み、前記アン ドロゲンステロイドは加水分解可能なエステル結合体を有するポリマー制御され た放出材料内に分散され、前記アンドロゲンステロイドの前記制御された放出材 料に対する割合は３：２と３：７との間であり、前記制御された放出材料はヒト の組織と生物学的適合性があり、かつ体内で生物分解されて生物学的適合性のあ る代謝生産物になることが可能であり、前記微小球体は、標準的な条件下で、投 与後４８時間から始まり投与後少なくとも２８日で終る時間期間の間、リットル 当り１．０と５０．０ナノモルとの間の前記アンドロゲンステロイドの循環血清 レベルを維持する速度および持続期間で、前記生物分解の間およびその結果とし て前記アンドロゲンステロイドを放出することが可能である、製薬組成物。 １２．前記持続放出粒子は、前記粒子が投与後４８時間から始まり投与後１２週 間で終る時間期間の間、リットル当り１．０と５．０ナノモルとの間の血清レベ ルを維持するのに、標準条件下で、十分低い速度で生物学的に分解可能である、 請求項１に記載の製薬組成物。 １３．ヒトを含む温血動物においてアンドロゲン受容体を活性化するための方法 であって、アンドロゲン受容体に対して約２×１０−８Ｍより小さいＫｉ値と、 リットル当り３．０ナノモルより低い濃度で最大値の半分に達するヒト乳癌ＺＲ −７５−１細胞の成長に対するアンドロゲン受容体媒介抑制効果とを有するが、 目に見える男性化作用は有さない少なくとも１つのアンドロゲンステロイドを前 記動物に投与するステップを含み、すべてのこのようなアンドロゲンステロイド は、リットル当り１と５０ナノモルとの間の累積アンドロゲンステロイド血清濃 度を維持するのに十分低い投与量で投与される、方法。 １４．ヒトを含む温血動物において乳癌または子宮内膜癌、骨粗しょう症または 子宮内膜症を治療または予防する方法であって、そのような治療または予防を必 要としている動物に、約２×１０−８Ｍより小さいアンドロゲン受容体に対する Ｋｉ値と、リットル当り３．０ナノモルより低いＥＤ５０値でヒト乳癌ＺＲ−７ ５−１細胞の成長に対するアンドロゲン受容体媒介抑制効果とを有するが、目に 見える男性化作用は有さない少なくとも１つのアンドロゲンステロイドを投与す るステップを含み、すべてのこのようなアンドロゲンステロイドは、リットル当 り１と５０ナノモルとの間の累積アンドロゲンステロイド血清濃度を維持するの に十分低い投与量で投与される、方法。 １５．乳癌または子宮内膜癌、骨粗しょう症または子宮内膜症を治療または予防 する方法であって、前記治療または予防を必要とする患者に酢酸メドロキシプロ ゲステロンおよび酢酸メゲストロールからなるグループから選択されたアンドロ ゲンステロイドを投与するステップを含み、前記アンドロゲンステロイドはリッ トル当り１と５０ナノモルとの間の前記アンドロゲンステロイドの血清濃度を維 持するのに十分低い投与量で投与される、方法。