JPH06502087A

JPH06502087A - 非トロンボゲン形成表面

Info

Publication number: JPH06502087A
Application number: JP3516920A
Authority: JP
Inventors: イアンニ，　イアナキス・ペトロウ
Original assignee: バイオコンパテイブルズ・リミテツド
Priority date: 1990-10-22
Filing date: 1991-10-22
Publication date: 1994-03-10
Also published as: EP0554302A1; EP0554302B1; ATE157265T1; US6521283B1; DK0554302T3; GB9022938D0; DE69127450D1; DE69127450T2; ES2107472T3; WO1992006719A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】非トロンボゲン形成表面本発明は、血液に接触する材料の表面処理、およびこれらの材料が示すトロンボゲン形成を低（した装置に関する。

数多くの現代外科および他の医学操作、サンプリング技術および試験操作は、血液接触装置、例えばカテーテル、ドレインおよび体外循環などの使用を伴っている。このような装置は１回のみ用いられた後、衛生的な理由で廃棄されており、従って利用できる最も経済的な材料、通常ポリマープラスチックまたはガラスなどから作られている必要がある。

しかしながら、ガラスおよび大部分の合成および天然ポリマー類は、血小板凝固を誘発してフィブリン溶解凝固カスケードを開始させ、管の遮断、および他の装置、例えば濾過および透析膜などの詰まりをもたらす傾向を示すと共に、試験操作を妨害し、そしである場合には、患者にひどい結果をもたらす可能性がある。

現存技術を用いた場合、血液透析のための体外循環、ひどい呼吸器官損傷段階における長期の気体交換、および例えば心臓手術後の心臓支持体などは全て、全身的ヘパリン投与を必要としている。全身的抗凝固処理を行った後の多くの患者は、過剰な出血が生じる危険性のため、可能な治療学的手段を受けることができなくなっている。同様に、例えば危篤的病気にかかっている患者の動脈酸素、二酸化炭素圧力、およびｐＨを連続測定するための商業的カテーテルセンサーは、センサー膜の上の投与を必要としている。

特にヘパリンフラグメントの末端点付着を伴う、装置のヘパリン化を行うことで、表面に抗トロンボゲンコーティングを生じさせ、それによって全身的ヘパリン投与を行うことの必要性に打ち勝つ、ことが提案された。このように、末端点付看によってヘパリンを連成させる方法が開発された［Ｈｏｆｆｍａｎ、　Ｊ、他、Ｃａｒｂｏｈｙｄ、　Ｒｅｓ、、１１７：３２ｇ　（１９８３）、Ｌａｒｍ、　Ｏ。

他、Ｂｉｏｍａｔ、　Ｗｅｄ、Ｄｅｖ、　Ａｒｔ、　Ｏｒｇ、、１１：１６１　（１９８３）　］　、この得られる表面は、アンチトロンビンと多量のトロンビンを吸着し、このトロンビンがアンチトロンビンの存在下で急速に阻害される［Ｐａ５ｃｈｅ、　Ｂ、他、Ｔｈｒｏｍｂ、　Ｒｅｓ、、４４７３９　（１９８６）　］　、末末端点着したヘパリンおよび内皮は、定量的および定性的の両方で、血漿の存在下、トロンビンの阻害に関して同様な挙動を示し［Ａｒｎａｎｄｅｒ　Ｃ，他、Ｊ、　Ｂｉｏｉ＋ｅｄ、　Ｍａｔ、　Ｒｅｓ、、２０：２３５　（１９８６）　］　、そして末末端付付着パリンで仕上げしたポリエチレン表面は、第Ｘａ因子の阻害に対してかなりの能力を示した［Ｋｏｄａｍａ。

Ｋ、他、Ｔｈｒｏｍｂ、Ｈａｅｍｏｓｔａｓ、　（１９８７）　］。

末末端付付着パリンが備わっている硬質ポリエチレン管状部分は、ブタの胸大動脈内で、４力月に及んで保持された［Ａｒｎａｎｄｅｒ　Ｃ，、他、Ｂｉｏｍａｔ、　Ｒｅｓ、、（１９８７）］　、発泡ポリテトラフルオ（＋エチレン（ＰＴＦＥ）の血管移植片およびポリウレタン類に取り付けた後、ヒツジの動脈内に移植したとき［Ｅｓｑｕｉｖｅｌ、　Ｃ，０，他、Ｓｕｒｇｅｒｙ、　９５：１０２　（１９８４）　］　、この末末端付付着パリン表面は、本質的に、血小板およびフィブリンの堆積を低くした。

凝固システムとを区別することが可能になった。これらの実験において、他の硫酸化ポリマー類を用いたコーテイング物は、ヘパリンコーテイング物と同等な血小板適合性を示すが、まだトロンボゲン形成を示す、ことが示された。フィブリノペプチドＡに関するラジオイムノアッセイ［Ｎｏ５ｓｅ１．　Ｈ，Ｌ他、Ｊ、　Ｃ１１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、、５４：４３　（１９７４）　］を用いて、血液と接触したときヘパリン分子が血漿構成要素と相互作用できるコーテイング物のみが、フィブリノーゲンからフィブリンへの変換を防止することができる、ことが示された［Ｌａｒｓｓｏｎ　ＲおよびＬｉｎｄａｈｌ　Ｕ、Ａｒｔｉｆ。

Ｏｒｇ、、３巻、５ｕｐｐ１．　Ｐｒｏｃ、ｏｆ　ｔｈｅ　５ｅｃｏｎｄ　ｍｅｅｔｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｉｎｔｅｒｎ、　Ｓａｃ。

Ａｒｔｉｆ、　Ｏｒｇ、、（１９７９）：　Ｌａｒｓｓｏｎ　Ｒ，他、Ｔｈｒｏｍｂ、　Ｒｅｓ、、１９：４３　（１９８０）：Ｌａｒｍ、　Ｏ，他、Ｂｉｏｍａｔ、　Ｍｅｄ、　Ｄｅｖ、　Ａｒｔ、　Ｏｒｇｏ、１１：１６１　（１９８３）　］。

従って、凝血耐性を達成するには、その固定化したヘパリンの上の官能基が無傷のまま存在していることが必須であると考えられ、そして血液に接触する医学用装置に対するヘパリンコーテイング物は、有害な全身的抗凝固治療をなくさせることを可能にした。

イヌを用い、全身的ヘパリン投与無しで、末端点付看ヘパリン表面が備わっている酢酸セルロース中空繊維フィルターを用いた実験的血液透析が行われた。透析した動物におけるフィブリノペプチドＡのレベルは、外科手術を行わないで麻酔をかけた対照動物中よりも高くないことから、この全体的体外システムに対する該コーテイング物の効力が示された［Ａｒｎａｎｄｅｒ　Ｃ，他、Ｐｒｏｃ、　Ｅｕｒ、　Ｓａｃ、Ａｒｔ、　Ｏｒｇ、、９：３１２　（１９８２）　、Ｌｉｎ５゜Ｌ、−Ｅ他、Ｐｒｏｃ、　ＥＤＴＡ−ＥＲＡ、　２１：２７０　（１９８４）　］　。末末端付付着パリン表た。ヘパリンが若干放出された後、循環している血液内のフィブリノペプチドＡのレベルを測定して、この凝固システムは影響を受けていないようであった［Ｌａｒｍ、　０他著［表面改質による抗血栓に対するアプローチ。人工器官における進展Ｊ　（Ａｎ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｔｏ　ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｉ　ｂｙｓｕｒｆａｃｅ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｏＰｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ　ｏｒｇａｎｓ）　、ｌ５ＡＩＯＰｒｅｓｓ、　Ｃ１ｅｖｅｌａｎｄ　１９８６．３１３頁。Ｉｎａｃｉｏ、　Ｊ池著「表面ヘパリン化した静脈から静脈へのバイパス系を用いた、二酸化炭素の体外除去。体外気体交換の設計および技術に対するＥＵＩ？ＯＸＹワークショップＪ　（Ｅｘｔｒａｃｏｒｐ。

ｒｅａｌ　ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｒｏｂｎ　ｄｉｏｘｉｄｅ　ｕｓｉｎｇ　ａ　５ｕｒｆａｃｅ　ｈｅｐａｒｉｎｉｚｅｄｖｅｉｎ−ｔｏ−ｖｅｉｎ　ｂｙｐａｓｓ　５ｙｓｔｅＩＩＩｏＥＵＲＯＸＹ　ｆｏｒｋｓｈｏｐ　ｏｎ　ｄｅｓｉｇｎ　ａｎｄ　ｔｅｃｈ獅■ ｑｕｅｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｏｒｐｏｒｅａｌ　ｇａｓ　ｅｘｃｈａｎｇｅ）　、Ｐａｒｉｓ、１９８５年６月２０日、Ｂｉｎｄｓｌｅｙ　Ｌ、他、Ｔｒａｎｓ、　Ａａ＋、　Ｓｏｃ、　Ａｒｔ、　Ｉｎｔ、　Ｏｒｇ、　３２：５３０　（１９８６）　］。

ヘパリン化でフィブリン溶解による詰まりを低下させるか或は防止することは可能であるが、これは、血液の生化学、例えばアンチトロンビンの錯体形成および他の捕え難い変化を伴う干渉を犠牲にしている。ヘパリン化した表面は、抗凝固薬として投与された時、ヘパリンが示す数多くの影響を及ぼし、従って、血液に接触する装置の血液適合性を改良する目的でこの技術を用いる場合、ヘパリンが示す副作用を考慮する必要がある。

特に、血液に接触する表面の生適合性を改良する血液適合性有機基を共有結合的に結合させることによる表面処理方法を開発すること、そして血液に接触する装置、例えば外科用移植片、人工器官および人工心臓０１５７４９６参照）。しかしながら、長期の生適合性を得ることを意図した場合、これらは比較的高価であり、従って低コストで単一使用の使い捨て装置で用いるには適していない。

本発明は、容偽に入手可能な材料を用い、血液に接触する装置のトロンボゲン形成を低くするための簡潔でコスト効果を示す手段を提供するものである。

本発明のコーテイング物は、如何なる様式でも血液生化学を害することなく、従って抗トロンボゲン形成よりもむしろ非トロンポゲン形成と見なされる。本処置法は、ヘパリン投与に関する副作用を回避することに加えて、そのコートした表面の湿潤性および潤滑性が改良されている点で、数多くの用途で更に一層の利点を与える。これは、例えば管状物中で気泡が生じないようにすると共に、外科切開によるカテーテル挿入を容易にする。

本発明に従い、有機溶媒中のホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルの溶液を表面に塗布した後、この溶媒を除去することを含む、血液接触表面のコーティング方法を提供する。

図１は、本発明の方法を用いて処理した医学用管状物性と未処理の医学用管状物の同様な管との開の比較を示している。

コーティングを行う目的で、表面の汚染物質を除去してこのコーテイング物の接着を改良するための洗浄を行うか、この表面をシリル化するか、或はこの表面の疎水性を上昇させることによって、この処理すべき表面を任意に調製してもよい。

状物などには、一般に、静的用途、例えばサンプル小びんまたはホルダーなどの表面に比べて、より厚いコーテイング物を取り付ける。このコーテイング物の厚さはまた、より厚いコーテイング物はより高い耐久性を示すため、このコートされた装置の意図した使用期間に従って選択される。本発明に従うコーテイング物に適していると考えられる典型的な厚さは、１から１０００ナノメートルの位、好適には１０から５００ナノメートル、最も好適には約１００ナノメートルの位である。

この血液接触表面は、仕上げされた血液接触装置の表面であるか、或は血液接触装置を製造する目的で用いられる材料の表面であってもよい。

後者の場合、次の製造段階は、この装置の血液接触部分内の、本発明の方法で生じさせたコーテイング物を崩壊させないようにすると共に、例えばこのホスファチジルコリンエステルに高温をかけることによる化学的損傷が生じるのを避けるように選択される。この処理すべき表面を、以後「基質」と呼ぶ。

本発明に従ってコートされ得る基質には、ガラス類（例えばソーダガラスおよびシリカガラス）、銀の如き金属、天然ポリマー類、例えばセルロースなど、および半合成セルロース誘導体、並びに人工ポリマー類、例えばポリウレタン類（例えばＰｅ１ｌｅｔｈａｎｅ）　、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）の如きビニルポリマー類、ポリエチレンテレフタレート（例えばＤａｃｒｏｎ）の如きポリエステル類、ポリエチレンおよびポリプロピレンの如きポリアルカン類、ポリカーボネート類、並びにフルオロポリマー類、例えばポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）　、およびテトラフルオロエチレンとへキサフルオロプロピレンのコポリマーであるフッ素化エチレン本発明の方法で用いられ得るホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステル類には、飽和および不飽和脂肪酸のエステル類が含まれ、そしてこれらは純粋な単一化合物、例えばジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）およびシミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、上記化合物の混合物、並びに精製した天然産物、例えば卵黄または大豆のレクチンから得られるホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルなどであってもよい。ホスファチジルコリンの混合ジエステル類も使用できる。好適には、この脂肪酸の側鎖は、分枝ではなく直鎖であり、１２から２０個の炭素原子を有している。精製した天然の産物は、ホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステル以外の成分を少量含んでいてもよいが、これらは、このコーテイング物が有する、トロンボゲン形成を低下させる効果を悪化させる程の量で存在しているべきではない。特に、ホスファチジルセリン、および詰まりを生じさせる他のアニオン系燐脂質は避けるべきである。

この溶媒は、ホスファチジルコリンの飽和脂肪酸ジエステルが溶解する如何なる通常の有機溶媒であってもよい。好適には、この溶媒は、毒性がなくそして環境を害さず、除去が簡単であり、処理すべき材料に適合性を示し、そして薬学的許容性を示すように選択される。この溶媒は、ポリマー基質を膨潤させるものであってもよく、これは、この基質の表面に該ホスファチノルコリンジエステルが浸透するのを可能にすることにより、この処理工程の助けとなる。二者択一的に、特に微細な寸法耐性を維持すべきか、或はこのポリマーの池の有効な特性がそれによって好適な溶媒には、低級アルカノール類、例えばメタノール、エタノールおよびイソ−もしくはｎ−プロパツールなど、ハロゲン化アルカン類、例えばクロロホルムなど、およびそれらの混合物が含まれる。特に好適な溶媒は、エタノールとクロロホルムの混合物、例えば２０：１から８０：Ｌ好適には４０：１（体積）のエタノール：クロロホルムである。他の好適な溶媒は、フレオン（Ｆｒｅｏｎ）とエタノールの混合物、例えば５０　：　５０から９９：１、好適には９０：１０（体積）のフレオン：エタノールである。

この溶媒中のホスファチジルコリンジエステル濃度は、不必要に多量の溶媒を用いること（そしてその後のそれを除去することに伴う技術的困難さおよび経済的不利益）を避けると共に、この基質の有効なコーティングを可能にするように選択される。好適な濃度は、０．５から２０ｍｇ／ｍＬの範囲、好適には２．５または１０ｍｇ／ｍＬである。

このホスファチジルコリンエステル溶液は、通常のコーティング技術、例えばコーティング浴への浸漬、噴霧、塗装などによるか、或は平らな基質に関しては、スピンコーティングによって塗布されてもよく、これらのコーティング条件は、コーティングの所望厚および基質の疎水性に従って変化する、と言うのは、このホスファチジルコリンジエステル類は、疎水性が高い基質に、より強力に接着するからである。好適には、適当な濃度と温度を有する適切な溶媒中のホスファチノルコリン脂肪酸ジエステル溶液が入っている浴の中に、コートすべき表面を覆うに充分な時間、この基質を浸漬することによってコーティングを達成する。

媒を注意深く選択し、そしてこの溶液の濃度とコーティングおよび溶媒除去技術を注意深く選択することにより、このホスファチジルコリンジエステルコーテイング物の厚さを所望範囲内に制御することが可能である。

特に好適な溶媒、濃度、並びにコーティングおよび溶媒除去技術を以下に記述し、そして実施例を用いて説明する。

適切な溶媒、例えば上ｌこ記述した溶媒（これは、このコーテイング物を塗布する目的で用いた溶媒もしくは溶媒系と同じか或は異なっていてもよい）を用いて、この表面の前洗浄を行ってもよい。好適には、ハロシランの如き反応性を示すアルキルシラン、例えばヘキサンまたはクロロホルムなどの如き適切な溶媒中のトリクロロオクタデシルシランまたはクロロツメチルオクタデシル７ランなどを用いて、シリル化による表面の前処理を行う。更に一層の洗浄段階で過剰の試薬を除去してもよい。

ある種の表面、例えばガラスなどでは、このホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルが接着する表面を得る目的で、例えばシリル化による表面の航処理を行う必要がある、ことは理解されるであろう。

本発明は更に、表面の上にホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルのコーテイング物を生じさせることを含む、血液接触表面のトロンボケン形成を低下させる方法も提供する。

本発明はまた、その表面の少なくとも一部にホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルの非トロンポゲン形成コーティング物が備わっている管状物、例えば中心静脈カテーテル、胸のドレインカテーテル、および血管形成バルーンカテーテルなど、体外盾環で用いる管状物、例えば心臓および／または肺のバイパスで用いる管状物、並びに体外回路全体、例えば全血オキ／ジェネーター（ｏｘｙｇｅｎａｔｏｒ）　、カニユーレ、血管移植片、縫合糸、そして血液分離、語頭音消失およびドノルフエレシス（ｄｏｎｏｒｐｈｅｒｅｓｊｓｉ）装置で用いる如き膜、全血オキシジエネーターで用いる如き気体交換膜、ポリカーボネート膜および血液透析膜、並びに診断およびバイオセンサー装置で用いる膜、診断で用いるバイオセンサーおよび他の装置、例えば血液凝固時間を測定する時に用いるキュベツトなどが含まれる。本発明に従って処理され得る血液接触装置の特別な例は、ＰＶＣ製胸ドレインカテーテルである。

図１は、本発明の方法で処理した医学用管状物性と処理していない同様な管状物性との間の比較を示すものである。この管状物は、各場合共、血液の流れに暴露したものである。この未処理の管の場合、この管の遮断をもたらす管中の血塊形成が見られ、−力木発明に従って処理した管には血塊が見られない。従って、本発明に従って処理した管の内側に非トロンボゲン形成表面が存在していることを明らかに示している。

以下に示す実施例は本発明を説明するためのものであり、如何なる方法でも本発明を制限することを意図したものではない。

体外回路で用いられている種類の硬質および軟質Ｐ■Ｃ管状物のサンプルを、温エタノールまたは濾過した脱イオン水で洗浄した後、コーティングに先立って完全に乾燥した。

汚染を回避する目的で埃の無い所で、コーティング溶液（エタノール（Ａｎａｌａｒ）中５ｍｇ／ｍＬまたは１０ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣ）を中空管の中にピペットで入れた後、この管状物の内側全体が均一にコートされるまで、この溶液を前後方向（長さが１２０ｃｍに及ぶ部分）に穏やかに動かすことによって、上記両方の種類の管状物のコーティングを行った。

次に、過剰のコーティング溶液を採取用浴の中に排出させた後、この管状物を室温で乾燥させた。

実施例２胸のドレインカテーテルの処理この実施例で用いる種類の胸ドレインカテーテルには、曇った部分と透明な部分とが備わっており、そしてこれはＰＶＣで作られていた。この透明な部分は、８膜の中に通常挿入されそして体組織に接触する該カテーテルの一部であるっ下記の如き個々の工程を用いて、２つの領域のコーティングを行った。

（ａ）曇った部分のコーティングエタノール中のＤＰＰＣもしくはＤＰＭＣどちらかの１０ｍｇ／ｍＬ溶液を調製した後、これの３ｍＬをピペットでカテーテルの内部表面の中に入れた。二のコートすべき全ての領域が該溶液に接触するように、このカテーテルを手で回転させた。過剰の溶液を排出させた後、これらのカテーテルを更に以下の工程（ｂ）で処理した。

（ｂ）透明な部分のコーティングクロロホルム中のＤＰＰＣもしくはＤＰ〜ＩＣどちらかの１０ｍｇ／次に、このカテーテルを垂直に２４時間吊すことによって、空気乾燥した。

実施例３ポリエステル糸縫合材料のコーティング編んだポリエステル糸縫合材料の染色したサンプルと染色していないサンプルを、温エタノールの中で洗浄した後、コーティングに先立って空気乾燥した。この洗浄し乾燥したサンプルの全体を、エタノール中１０ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣ溶液の中に浸漬した後、このコーティング溶液を除去し、そして室温で空気乾燥することにより、これらのコーティベトリ皿（無菌で製造した５ｔｅｒｉｌｉｎポリスチレン微生物学用プレート）を１５００ｒ、ｐ、ｔで回転させた後、この回転させた皿に、Ｇ１１ｓｏｎの１ｍＬピペットで、エタノール中ＩＱｍｇ／ｍＬ！度のＤＰＰＣもしくはＤＭＰＣ溶液１溶液１塗Ｌした。サンプルを３０秒間回転させ続けた後、空気中室温で乾燥させた。

上記方法を用いたコーテイング物は、表面分析技術で判定して均一でポリエチレン製リボンのコーティングポリエチレン（ＰＥ）リボンを最初にエタノールで洗浄した後、乾燥した。次に、ＤＰＰＣまたはＤＭＰＣのエタノール溶液（１０ｍｇ／実施例６ポリエチレン製リボンのコーティングＤＰＰＣまたはＤＭＰＣで処理するに先立って、ＰＥをシリル化することでその表面を非常に高い疎水性を示すようにすることにより、非常に安定なコーテイング物を与えるシラン層を生じさせた。オクタデ／ルトリクロロシランの溶液（ヘキサン中ｏ、ｏｉ％Ｗ／Ｖ）の中にＰＥリボンを１０秒間浸漬した後、空気乾燥することによって、シリル化を行う。次に、実施例５に従って、ＤＰＰＣもしくはＤＭＰＣのコーチインポリプロピレン製中空繊維膜の処理オキシジエネーターで用いられている種類のポリプロピレン製中空繊維膜を最初にフレオンで洗浄した炭、コーティングに先立って乾燥した。

２および１０ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣ溶液を用いて、上記材料にコーティングを施した。この場合、このＤＰＰＣをフレオン／エタノール混合物（９０：１０体体積体積）の中に溶解させた。

このＤＰＰＣ溶液を充填したし型ガラス管を通してこれらの繊維をゆっ（つと引き抜くことによって、これらのコーティングを行った後、空気乾燥した。

浸漬技術を用いて、ＦＥＰ　（フッ素化エチレンポリマー）製のＩＶカ潰した。

カテーテルを空気乾燥した。

実施例９中心静脈カテーテルの処理ポリウレタン（Ｐｅｌｌｅｔｈａｎｅ）中心静脈カテーテルを処理する目的で、実施例８と同じ方法を用いた。

実施例１０処理した材料に関するインビトロ血液適合性試験新しくクエン酸塩を添加したヒト全血の中にサンプルを室温で３０分間浸漬することによって、血小板接着に関する定量試験を行った。長さが３ｃｍの管状物サンプルの両末端を密封（皮下用針を用いてこのサンプルの中に血液を導入）することで管状サンプルを調製し、そして渦巻きミキサーを用いて一定に混合した（試験を３回実施した）。このアッセイで用いた血液は、ダブルンリンジ方法を用いて得たものである。

培養後、これらのサンプルを、等浸透圧性燐酸塩Ｍ断食塩水（ＰＢＳ）の中で洗浄した後、２ｍＭのエチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）中１％のトリクロロアセテート（ＴＣＡ）（ｗ／ｖ）の中に抽出させることで、この管状物の壁に接着した全ての血小板からＡＴＰを遊離させた。

この抽出物の中に存在しているＡＴＰの量を、ＬＫＢ　ＰｈａｒｍａｃｉａＡ　Ｔ　Ｐアッセイキットおよびルミノメータ−で見積もった。

これらのサンプルに接着する血小板の数を、公知数の血小板に関連させたＡＴＰレベルを用いた標準曲線から見積もった。

実施例１に従ってコートした管状物に関する結果を表１に記録する。

表１（ａ）硬質ＰＶＣ未コート対照　５．６２　１９．５４　１，３２　８．８３　−５ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣでコート　０．７２　０，１３　０．１９　０．３５　９４１０ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣでコート　０．５１　０．１４　０，１０　０．２５　９７（ｂ）軟質ＰＶＣ未コート対＠１５．０１　２６．５１　０．５８　１４．１３　−５ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣでコート　０．７６　０．７２　０，３０　０．５９　９６１０ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣでコート　０．９７　１，８９　１．２５　１．３７　９０結果を、長さが３ｃｍの管状物に対する血小板の数（ｘｌＯ’）として表す。

コートしたＰＶＣに対する血小板の接着が本質的に低下することが観察され、このことは、ＤＰＰＣでコートした後のＰＶＣ管状物が示すトロンボゲン形成が大きく低下したことを示している。

実施例２に従ってコートしたカテーテルに関する結果を表２に記録する。

表２結果を、長さが３ｃｍのカテーテルに対する接着した血小板（ｘｌｏ’）として表す。

実施例４に従ってコートしたペトリ皿に関する結果を表３に記録する。

（ｘｌＯ’）として表す。

実施例５に従ってコートしたＰＥリボンに関する結果を表４に与える。

未コートＰＥ　３２．８９　２５．０４　５５．８７　３７．９３　−結果を、材料面積２２ｍｍ２当たりの血小板数（ｘｌＯ’）として表す。

実施例７に従って処理した膜に関する結果を表５に示す。

未処理　４．０８　４．０７　１６．９５　８．３６．　−ＤＰＰＣＯ，９１０，８９０，５３０，７８９１＠２ｍｇ／ｍＬＤＰＰＣＯ，４１１０，０８車　０．５２　３．６７　５６＠１０ｍｇ／ｍＬ＊結果は概略であり、完結する目的で含めたものであると考えるべきである。結果を、長さが２０ｃｍの繊維当たりの血小板数（ｘｌＯ’）として表す。

実施例８に従って処理したカテーテルに関する結果を表６に示す。

表６未処理カテーテル　４，１０　９．３６　１１．９８　８．４８　−ＤＰＰＣ処理した　１，８９　１．２４　５．８４　２．９９　６５１０ｍｇ／ｍＬ）結果を、長さが５ｃｍのカテーテル当たりの血小板（ｘｌＯ’）として表す。

実施例９に従って処理した中心静脈カテーテルは、血小板接着で９０％の減数を示したつ実施例１１使用に関するシミュレ−７ヨンエソペンドルフ管を用いてシールした末端が備わっている、実施例２に従ってコートしたカテーテル（曇った部分）の１５ｃｍセグメントを３ＭＴＡ製した。ダブルシリンジ技術を用いて、女性の成人志願者から４０ｍＬの血液を採取してクエン酸三ナトリウム（３２ｇ／Ｌ）の中に入れた（最初の５ｍＬは廃棄した）。

クエン酸塩を加えた血液１０ｍＬに、０．１５Ｍ塩化ナトリウム中の０．０２５Ｍ塩化カルシウムを２ｍＬ加えた。次に、再石灰化した血液４ｍＬを、その３つのカテーテルセグメントの各々に加えた。これらの管を、３７℃の培養装置中に１５０分間置装た。これらのサンプルを３０分毎に裏返した。この培養後、各々のカテーテノυ髪ら血液を排出させた。次に、これらをＰＢＳで濯ぐことにより、弱く粘合している如何なる材料も除去した。これらの結果を以下に示す。

未処理の曇った部分排出させた時、少量の血漿が得られた。このカテーテルの長さに沿って強力に接着している血塊が存在していた。

ＤＰＰＣ処理カテーテルの曇った部分血液全体が容易に排出した。小さい１つの血塊が表面に付着したままであった。

Ｄ　Ｍ　Ｐ　Ｃ処理カテーテルの曇った部分血液全体が容易に排出した。小さい１つの血塊が表面に付着したまま実施例３に従って処理した編んだ材料のサンプルを、上記実施例１０に記述したのと同様に、新しくクエン酸塩を添加した全血の中で保温した。これらの材料を、この血液から取り出した後、ＰＢＳで洗浄し、そして下記の溶液の一定分量の中で固定化することによって、走査電子顕微鏡測定を行う準備をした。

２ｍＬの２５％グルタルアルデヒド８３ｍＬの０．１５〜Ｉ　ＰＢＳ　（ｐＨ７，４）１５ｍＬの飽和ピクリン酸。

これらのサンプルをＰＢＳで洗浄した後、７０％のエタノールそして無水エタノールを用いて脱水した。最後に、サンプルに金をスパッターコーティング（３０ｍ、Ａで３分間）した後、電子顕微鏡で観察した。

処理材料よりも少なく、そしてこれらの処理した材料によって血小板細飽が活性化されることはない、ことを示している。従って、これらのＤＰＰＣをコートした材料は、未処理の編んだ糸よりも明らかに低いトａンボゲン形成を示す。

実施例１３処理した表面上での水拡散試験ピペットを用いて、脱イオン水の数滴を、そのコートした表面に付けた。実施例４に従ってコートしたベトリ皿を用いた場合、この付けた水滴がその表面の上を完全に広がり、このことは、このコーティングによって、通常は非常に高い疎水性を示すポリスチレンが極めて高い湿潤性を示すようになった、ことを示している。

実施例１４処理した材料の湿潤性蒸留水の水滴を５分間表面に接触させることによって静的接触角を測定することにより、先に示した実施例に従ってＤＰＰＣをコートした材料が示す湿潤性を評価した。これらの結果は表７に示す如くであった。

試験材料　接触角（０）（平均）　結　論軟質ｐｖｃ管状物　７７．７１　ｇ４、（７７）　非湿潤性表面（対照）軟質ｐｖｃ管状物　９、く５．１０、（８）　湿潤性表面（実施例１でコート）ＰＶＣ製胸ドレイン　２６．２６．１９、（２４）　湿潤性のカテーテル（実施例２で　際だった上昇１０ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣをコート）ポリエチレン　６７．８０．７８．７６、（７５）　非ａ潤性表面（対照）ポリエチレン（実施例５で　１２．１２．２１、（１５）　湿潤性表面１０ｍｇ／ｍＬのＤＰＰＣをコート）補正書の写しく翻訳文）提出書　（特許法第１８４条の８）平成５年４月２１日

Claims

【特許請求の範囲】

１．有機溶媒中のホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルの溶液を表面に塗布した後、この溶媒を除去することを含む、血液に接触する表面をコーティングする方法。
２．該脂肪酸ジエステルをコートするに先立って、該表面を洗浄して表面汚染物質を除去する、請求の範囲１記載の方法。
３．該脂肪酸ジエステルをコートするに先立って、該表面をシリル化する、請求の範囲１または請求の範囲２記載の方法。
４．低級アルカノールまたはハロゲン化アルカンまたはそれらの混合物中の該脂肪酸ジエステルの溶液で該表面をコートする、請求の範囲１から３いずれか１項記載の方法。
５．該溶媒がメタノール、エタノール、イソ−プロパノールまたはｎ−プロパノールを含んでいる請求の範囲４記載の方法。
６．該溶媒がクロロホルムまたはフレオンを含んでいる請求の範囲４または請求の範囲５記載の方法。
７．該溶媒が２０：１から８０：１体積の比率でエタノールとクロロホルムを含んでいる請求の範囲６記載の方法。
８．該溶媒が４０：１体積の比率のエタノールとクロロホルムの混合物である請求の範囲７記載の方法。
９．該溶媒が５０：５０から９９：１体積の比率でフレオンとエタノールを含んでいる請求の範囲５記載の方法。
１０．該溶媒が９０：１０体積の比率のフレオンとエタノールの混合物である請求の範囲９記載の方法。
１１．該溶液が該脂肪酸ジエステルを０．５から２０ｍｇ／ｍＬ含んでいる請求の範囲１から１０いずれか１項記載の方法。
１２．該溶液が該脂肪酸ジエステルを２から１０ｍｇ／ｍＬ含んでいる請求の範囲１１記載の方法。
１３．該溶液が該脂肪酸ジエステルを２ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬまたは１０ｍｇ／ｍＬ含んでいる請求の範囲１１記載の方法。
１４．該脂肪酸ジエステルが、飽和および不飽和脂肪酸の純粋なエステル類、それらの混合物、およびホスファチジルコリンの精製天然脂肪酸ジエステルから選択される、請求の範囲１から１３いずれか１項記載の方法。
１５．該脂肪酸ジエステルが、ジバルミトイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルコリン、および卵黄または大豆レクチンから精製したホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステル類から選択される、請求の範囲１４記載の方法。
１６．コーティング浴への浸漬、噴霧、塗装またはスピンコーティングによって該溶液を塗布する、請求の範囲１から１５いずれか１項記載の方法。
１７．減圧下または周囲圧力下、ガス流中または上昇させた温度で蒸発させることによって該溶媒を除去する、請求の範囲１から１６いずれか１項記載の方法。
１８．該コーティング物が１から１０００ｎｍの厚さを有する請求の範囲１から１７いずれか１項記載の方法。
１９．該コーティング物が１０から５００ｎｍの厚さを有する請求の範囲１８記載の方法。
２０．該コーティング物が１００ｎｍの厚さを有する請求の範囲１９記載の方法。
２１．該装置またはそれの一部のガラス、金属、或は天然、半合成または人工のポリマー表面をコートすることを含む、血液に接触する装置またはそれの一部の表面をコートするための請求の範囲１から２０いずれか１項記載の方法。
２２．該装置またはそれの一部のソーダガラス、シリカガラス、銀、セルロース、半合成セルロース誘導体、ポリウレタン、ビニルポリマー、ポリエステル、ポリアルケン、ポリカーボネートまたはフルオロポリマー表面をコートすることを含む、請求の範囲２１記載の方法。
２３．該装置またはそれの一部のポリウレタン、ポリ塩化ビニル、ポリエチレンテレフタレート、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリテトラフルオロエチレンまたはフッ素化エチレンポリマー表面をコートすることを含む、請求の範囲２２記載の方法。
２４．該表面の上にホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルのコーティング物を生じさせることを含む、血液に接触する表面のトロンボゲン形成を低下させる方法。
２５．この表面の少なくとも一部の上にホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルの非トロンボゲン形成コーティング物が備わっている、血液に接触する装置で用いる材料。
２６．この表面の少なくとも血液に接触する部分の上にホスファチジルコリンの脂肪酸ジエステルの非トロンボゲン形成コーティング物が備わっている、血液に接触する装置。
２７．管状物；カテーテル；中心静脈カテーテル；胸ドレインカテーテル；血管形成バルーンカテーテル；体外循環、心臓および／または肺バイパスのための管状物；体外回路全体；全血オキシジェネーター；カニューレ；血管移植片；縫合糸；血液分離、語頭音消失またはドノルフェレシスのための膜；気体交換膜；ポリカーボネート膜；血液透析膜；診断およびバイオセンサー装置で用いる膜；バイオセンサー；診断装置；および血液凝固時間を測定するためのキュベット；から選択される請求の範囲２６記載の装置。
２８．ポリ塩化ビニル製の胸ドレインカテーテルである請求の範囲２７記載の装置。