JPH06500403A - 生物試料の捕集試験装置及び捕集試験方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 生物試料の捕集試験装置及び捕集試験方法発明の背景 本発明は、医療用、及び実験室用の生物試料を捕集し、試験する装置に関するも のである。診断のための細胞学は、臨床病理学の分野であり、診断は、身体の多 くの部分から採取した細胞、及びその他の生物試料の顕微鏡試験に基づいてなさ れる。

診断の正確さは、最適に判断できる試料となるよう、患者から十分な試料を採取 することと、それを培養しスライド標本にする手順とによって定まる。

腹膜透析の患者の場合、慢性の歩行できる患者からの流体を培養するとともに、 流体内に存在する炎症性の細胞があるかどうかを確かめることが重要である。反 動としての優しさ、警戒心、熱、及び白血球増多症を伴う明瞭な腹膜炎を持つ患 者は診断が困難でない。腎臓病学者は、若干の症状はあるが、性質が穏やかで、 熱が高くなく、腹部が固くなっていない患者が早期に診断を受けることをめてい る。

腎臓病学者は、早期の腹膜炎を発見する完全な方法かないことを示している多く の方法の内の一つの方法で透析物を培養することか多い。大部分の腎臓病学者は 、腹部の空所から若干の流体を抽出し、血球計で細胞計数、即ちセルカウントを 行っている。この細胞計数は、培養の結果立証するものであるが、それ自身、真 の腹膜炎と、単に細菌の存在によるものかを区別するものでない。

腹膜炎に最も通常にある微生物は、腸内細菌、特に「Ｅ。

ｃｏｌｉＪ及びコアグラーゼ・ネガテブ・ブドウ球菌である。

後者は、汚染物として発見されることが多い共存生物であるから、特に問題であ る。従って、流体の最少５０ｍ１を試験し、白い細胞と細菌とを発見した時、早 期の炎症性の病気が存在している証拠が高くなり、安価に良好な医療結果が得ら れるよう治療を開始することかできるのである。

通常の条件下では、尿は、少数の細胞と、全尿道から脱落したその他の粒状物質 とを含んでいる。これ等の物質は、通常、尿沈殿物として知られている。代表的 な尿沈殿物は、赤血球細胞、白血球細胞、上皮細胞、ゼラチン状塊、粘液、結晶 から成る。更に、細菌、イースト、寄生虫、精子のような散発的な尿沈殿物が、 種々の不調を訴える患者、及び特殊な行動を行う患者に生ずる。病気になると、 これ等の細胞と、その他の形成された物質か増大することか多く、そのため、こ れにより病変の場所と、病変の形式とを見定めるのを助けることもある。例えば 、赤血球細胞か増えると、腫瘍、結石、炎症を示している。

また、白血球細胞か増えると、感染症、又はその他の炎症があることを示してい る。通常の尿の本来の性質と異なり、（例えば、古くからの鱗状細胞、及び円柱 状の細胞のような）新生細胞は、ブラダ上皮の悪い状態で一層多くはげ落ちる。

最近まで、可能最高の試料を調製する技術は、その価値にも係わらず注目されな かった。不均一な細胞分布や、一様でない染色結果のように一部だけ好適である に過ぎないスライドを生ずることになる試料の調製技術の欠点は、我慢せざるを 得ないものであった。これは、観察者はこのようなスライドでも評価せざるを得 なかったためである。しかし、最近では、一層良好なスライドに対する関心が高 まってきた。診断の目的で、微細な針のアスピレートの使用が増大したこと、イ メージ細胞測定法の多用、細胞学の品質管理技術についての関心の増大は、スラ イドの調製技術を改良する動きに遅れた幾つかの理由がある。６免疫細胞化学や 、イメージ分析のような新しい技術による付加的な試験は評価されている。これ 等の試験は、その能力を完全に発揮するためには高い質の試料を必要としている 。試料の調製と、固定とは、各試料の形式毎に同一で、再現性があることが必要 であることは明らかである。

隔膜フィルタ技術は細胞学実験室で実施され一層よく制御することかできるので 、隔膜フィルタ技術は１つの改善である。

細胞サスペンションを使用する利点は、試料を分散させ、大きな塊を最少にし、 できあがったスライドに一層均一に細胞を分散させることかてきることである。

細胞のサスペンションは渦流、又は注入器によって分散させるのか普通である。

隔膜フィルタ技術においては、セルローズ、又はポリカーボネートから成る隔膜 フィルタ上に細胞サスペンションを集中させ、捕集する。この技術は、脳を髄液 におけるように、細胞の集中か少ない多くの場合に使用される。人体の流体、又 は保管された流体の細胞を漏斗内に入れ、捕集し、洗浄し、フィルタに固着し、 次にこの固着した細胞とともにフィルタをスライド上に置く。フィルタの背景が 細胞の検査に干渉するから、この技術はフィルタを溶解するように改良された。

しかし、フィルタを溶解させると、細胞の形態に影響を及ぼすから、この技術は 若干の危険かある。

尿や透析流体は、診断のために論じられてきた試料であるが、精液、骨液、胸膜 液、囲心腔液、腹膜液、羊水、汗のようなその他の流体は、特定の条件と病気と に関係する。生物流体試料を捕集取扱中、潜在的な試料の劣化、汚染、試料から の感染の広がりを最少にすることか重要である。

代表的な試料捕集装置が、米国特許第４７４１３４６号に開示されている。この 装置は、ベーススタンドによって直立位置に試料びんを支持している。このびん の開口端に漏斗を挿入して、びんの上部を包囲し、包み込む。ベーススタンドに 上方に延びる管状壁を設け、キャップに関連して、この管状壁によって少なくと も部分的にびんを包囲し、試料の表面に触れることなく、即ち試料に接触するこ となく使用者がびんを取り外すことができるようにしている。尿を捕集し、移送 するための種々の液体容器は、米国特許第３７７７７３９号、第３８８１４６５ 号、第４０４２３３７号、第４０８４９３７号、第４２４４９２０号、第４４９ ２２５８号、第４７００７１４号に開示されている。

米国特許第４０４０７９１号に開示されているその他の試料捕集装置は、捕集容 器のニップル上に試料容器を取り付け、この試料容器に、シールされた状態で所 定量の試料を収容する。

この試料容器に一体にキャップを形成し、ニップルを挿入した開口上にこのキャ ップを置く。米国特許第４５５７２７４号に開示された漏斗を有する中流尿捕集 器は、隔膜カバーによって覆われたカップ部材内に、漏斗によって尿を移送する 。

ストリップ試験装置兼捕集装置は、米国特許第４４７３５３０号に開示されてお り、尿の短時間試験ができる比重読取り装置とともに管内に収容した化学試薬試 験ストリップを設けることにより、試験と捕集とを組み合わせている。米国特許 第４５７３９８３号の液体捕集システムは、排出部に防腐剤部材を設け、空気細 菌不透過材料のフィルタを使用して尿を濾過している。

頚部の汚れを自動的に測定することに努力していた多くの研究者は、細胞捕集技 術を組み合わせた機器を開発した。ある研究グループは粘液、又はその他の非細 胞粘着物質によって凝集している細胞を分散させるロータ装置を含む機器を開発 した。

このロータ装置を使用して、細胞を高度に分散させ、細胞の塊を減少させ、しか も診断に必要な異常な細胞群を維持できるようにしている。次に、希望する数の 細胞をポリカーボネートフィルタ隔膜上に捕集し、同時に圧力を加えて固定する ことにより、スライド上に細胞を堆積する。濾過することによって、診断に関係 がない背景の多くの崩壊物と、大部分の赤血球細胞とを除去し、重要な診断上の 手掛かりを失うことなく、一層綺麗なスライドを得る。

サイチック（Ｃｙｔｉｃ）　・コーポレイションは、Ｔｈ　ｉ　ｎＰｒｅｐプロ セッサを設計するに当たり、この以前に開発した装置を更に改良した。緩やかな 分散によって大きな塊をほぐし、しかも診断に必要な細胞群は完全に維持できる ようにしている。

赤血球細胞の大部分と、僅かな崩壊物を除去する。次に、制画された密度で、細 胞物質をスライドに移す。このプロセスは、非噴霧質であり、汚染されることが なく、低コストであり、完全に自動化されている。

従って、段階的なフィルタを通して流体試料を移送し、試験のため、凝縮された 量の細胞粒状物質と、細菌とをこの流体から捕捉することができ、取扱容易で、 使い捨ての装置と、方法とを提供することが望ましい。

発明の簡単な要約 本発明は、取り外し可能で、容易に分離できるシャツトルシステムに関するもの で、これにより、流体試料の細胞成分と、沈殿物と、細菌成分とを除去する比較 的簡単な方法を提供する。

この装置では、困難な試験に使用するため、流体試料内の異なる粒状物質を除去 するのに、段階的な濾過作用は必須である。

本発明装置は、積み重ねることができる２個の部片から成る複数個の容器の形状 であり、異なる・多孔率の、即ち異なる孔寸法のフィルタ隔膜を各容器に設ける 。２個の部片から成る容器のおす部材をめす部材に螺着し、流体を流す貫通孔を 両部材に設ける。積み重ねた容器に通る注入器によって、尿、又は透析物流体を 試料容器から引出す。流体は５ミクロンのフィルタ粒子寸法を有する第１フイル タ隔膜に掛合して通り、この第１フイルタ隔膜上に細胞と細胞崩壊物とをスクリ ーニングし、濾過された流体を第２容器に通し、この容器が有する４、５ミクロ ンのフィルタ粒子寸法を有するフィルタ隔膜上に細菌をスクリーニングし、この 細菌をこの隔膜の表面上に濃縮させる。

本発明の目的は、特定の細菌を流体から捕集し、濃縮し、次に培養媒体内に堆積 し、スライド上に設置するため、細胞と、その他の粒状物質とを別個の隔室内に 捕集する。従来は、多数の異なる容器と、感度か低い高価な実験室装置とを必要 とする一連の異なる試験によって行っていた。

添（−１図面により、本発明の図示の実施例を説明し、本発明の目的、新規な要 旨、及び利点を明らかにする。

図面の簡単な説明 第１図は、流体試料をシャツトル容器に通して移動させる前の本発明装置の線図 的断面図、 第２図は、矢印への方向にフィルタ容器を通じて、試験すべき流体か通っている 状態の第１図の装置の線図的断面図、第３図は、第１図の装置のシャツトル容器 の分解拡大断面図、第４図は、おす隔膜部材と、めすコネクタ部材とを示す第３ 図のシャツトル容器の分解断面図、 第５図は、おす隔膜部材と、めすコネクタ部材とを示す他方のシャツトル容器の 異なる寸法の分解断面図、第６図は、積み重ねたシャツトル容器を除去し、細菌 試料を微生物培養トレーに溶離している状態を示す第１図のシャツトル容器の拡 大断面図、 第７図は、紬胞学の捕集と試験とのためスライド上に設置する除去されたシャツ トル容器のめずコネクタ部材から取り外したおす部材の断面図である。

発明の詳細な記載 本発明の好適な実施例と、発明実施の最良の形態とを第１図から第４図までに示 す。第１図および第２図に仮想線で示すように、１００ｍ１の目盛付き容器１０ 内に、最初に捕集した試料流体を通常収容する。このような容器は、８−１６８ 指定４０１３試料容器の名で、ベクトン・デキンソン・ラブウェア社によって現 在製造されている。この捕集容器は約１３３ｍ１（４，５オンス）の流体を保持 することができ、ポリエチレンのスナップ蓋によって目盛りされている。

第１図および第２図に一層詳細に示すように、積み重ねたシャツトル容器組立体 １２は、複数個の積み重ねたシャツトル容器を有する。各容器は容易に開くこと ができ、おすフィルタ隔膜支持部材１４と、この部材１４に螺着しためすコネク タ部材２６とを具える単一２片構造で構成されている。次に一層詳細に説明する ように、注入器４４のルーエルロック４２に、シャツトル容器組立体１２を取り 付ける。おすフィルタ隔膜支持部材１４には、ねじ面２１を有する外側円筒壁１ ５と、この円筒壁１５を越えて突出し要部１７を形成するベース１６と、円筒壁 １５の反対方向にベース１６から外方に突出するおすニップル１８とを設ける。

ニップル１８に端部フランジを設け、注入器４４のルーエルロック４２に、この 端部フランジを螺着できるようにするとともに、おす部材１４の内側傾斜壁２２ によって画成した室２０に達する貫通孔１９をニップル１８内に画成する。この 内側傾斜壁２２は、円筒外面を有し、外側円筒壁１５から離間し、通路２７を画 成する。環状段、即ち隔膜座２３を、壁２２の内面に形成し、隔膜２４を保持す る。内側傾斜壁２２の段付き端部２８の面に環状溝２５を形成し、めすコネクタ 部材２６から突出するロック突起３４に、この環状溝２５を底着できるようにし 、このようにして、おす部材Ｉ４と、めす部材２６とをシールされた状態に保持 するとともに、隔膜２４のための安全止めになるようにする。

第４図および第５図に示すめすコネクタ部材２６は、ベース３１を有する外側円 筒ハウジング３ｏを具える。このハウジング３０の内面３２にねじを形成し、お ず部材１４の壁１５のおねじ２１に螺着てきるようにする。おす部材１４とめす 部材２６とを互いに螺着した時、ハウジング３ｏの平坦壁３３は外側に突出する フランジ、即ち要部１７に衝合する。ハウジング３０の内壁面と組み合わせて、 めす部材２６の内部形状を画成しているベース内面は、同心的に段付きであり、 外側段３６は壁１５．２２の端部に衝合し、内側段３８は隔膜２４と段付き端部 ２８の末端段部２９とに衝合する。ベース３１の外面にねしルーエルロック４０ を設け、截頭円錐端を有する貫通孔３９を画成して隔膜２４と室２０とに達せし める。上述したように、シャツトル容器のニップル１８を、相手シャツトル容器 １２のルーエルロック４０上のねじ突起に嵌着できるようにする。しかも、ベク トン・デキンソン・ラブウェア社によって製造されている３０ｃｃｃ注入器４４ のルーエルロック４２にも、シャツトル容器のニップル１８を嵌着できるように する。例えばジェネックス・コーポレーションによって製造されているオートバ イアルスパングラスフィルタのようなポンプ型装置を、注入器４４の代わりに使 用することができることに注意すべきである。注入器４４は、ルーエルロック４ ２に関連する胴部５ｏと、ピストン５２と、ピストンヘッド５４とを有する。本 発明はいかなる流体をも使用することができるが、基本的に濃縮透析流体、及び 尿に使用することができ、更に種々の病気の試験に使用するための関連する沈殿 物、又は細菌を捕集するよう設計されている。

第１図から第７図までに示すように、シャツトル容器組立体をポリスチレンで構 成する。第４図に示すようにシャツトル容器組立体１２には、直径１３ｍｍ、多 孔率０．４５ミクロンのニトロセルローズ製の隔膜フィルタ２４ａを設ける。

ルーエルロック４０上のねじニップル１８によって、第２の同一のシャツトル容 器１１２をシャツトル容器１２に取り外し可能に取り付ける。シャツトル１１２ の孔３９に針１３９を取り付け、この針の拡大端を孔３９の拡大した截頭円錐端 部内に着座させる。この第２シヤツトルには、直径１３ｍｍ、多孔率５ミクロン のポリカーボネイト製の隔膜フィルタ２４を設ける。

代案としてのシャツトル容器を第５図に示し、この容器はシャツトル容器１１２ の代わりとなるものである。既に説明したシャツトル容器と異なり、このシャツ トル容器は、直径２５ｍｍ、多孔率０．４５ミクロンのポリカーボネイト製の隔 膜１２４を保持するように設計されており、隔膜の直径が大きいため、おす部材 １４の内壁の内部形状２２を除去し、単一壁ハウジング１１５を形成する。この 部分には、おす部材１４と同様のおねじを形成する。

作動に当たり、本発明は別個の容器にそれぞれ保持された２個の隔膜をシリーズ に使用する。第１のフィルタは流体の流れに掛合、即ち接触することから、ポリ カーボネイト製のフィルタであって、孔の寸法が７．５ミクロンである多形核白 血球、又はリンパ球すらも捕捉するため、このフィルタの孔は５ミクロンである 。この流体は多核フィルタを乗り越えるから、次にこの流体は、バクテリアを捕 捉する０、４５ミクロンの孔を有するニトロセルローズ製のフィルタ２４ａに接 触する。

種々の組成のフィルタを使用し、交換することができることに注意すべきである 。最初の流体のスクリーニングのため使用できる隔膜フィルタは、ボール・コー ポレーション社のボール・バイオサポート部門で製造される白血球保持媒体とし ての「ルウコツ−（ＬＥＵＣＯ３ＯＲＥ）Ｊである。ボール・コーポレーション 社により製造され市販されているその他の隔膜は「バイオダインＡ　（Ｂ　ｌ０ ＤＹＮＥ　Ａ）Ｊかあり、これは表面の化学的性質が５０％アミン、５０％カル ボキシル系で、等電点のｐＨ値が６．５の未改質のナイロンである。また［バイ オダインＢ　（Ｂ　ｌ０ＤＹＮＥ　Ｂ）Ｊがあり、これは表面の化学的性質が高 密度のカチオン四元素系（シータポテンシャルがｐＨ＞１０まで正）であること に特徴がある表面改質ナイロンである。また［バイオダインＣ（Ｂ　ｌ０ＤＹＮ Ｅ　Ｃ）Ｊがあり、これは表面の化学的性質が高密度のアニオンカルボキシル系 （シータポテンシャルがｐ）（＞３まで負）であることに特徴かある表面改質ナ イロンである。更に、「ロプロダイン（ＬＯＰＲＯＤＹＮＥ）Ｊがあり、これは 細胞分離、及び細菌細胞免疫分析用に設計されており、液体を迅速有効に通過さ せ、微細粒子を絶対的に保持するため、高い多孔率の緊密に制御された微細多孔 質構造の低蛋白質結合ナイロン６６隔膜である。両方のフィルタ隔膜２４．２４ ａを通じて容器ＩＯから注入器に５０ｍ１の透析物を引き出す。必要な量の透析 物をフィルタ隔膜に通した後、下流の容器１１２とフィルタ隔膜２４とを除去す る。第７図に示すように、ポリカーボネート隔膜２４をガラススライド８０上に 設置し、細胞学的決定のための改質ライト染料によって染色する。

従って、スライドに細胞を移送する方法は、隔膜濾過の方法（隔膜フィルタを通 じて流体試料を濾過し、細胞回収を増大する）である。この特定の技術により、 細胞をスライドに最小のオーバラップで均一に堆積し、これにより明瞭な観察と 、最適な診断精度とを達成できるのである。

細胞をスライド、又は隔膜上に移送し、又は捕集する方法は、人体の流体、分泌 物、又は汚れ内の細胞学的試料を保存し、固定することによって、大きく影響を 受ける。

現在、特定の容器を使用する細胞学的検査のため、人体の流木試料を集めている 。捕集位置から細胞学研究室まで輸送中、細胞試料を保存するため、通常これ等 の容器は、保存剤溶液を収容している。更に、脱脂綿、塗布、洗浄、又はブラシ 等を使用して人体の空所から集めた細胞試料は、染色又は試験のためスライド又 は隔膜上に細胞を移送する以前に、定着剤と供に特定の容器に保存する。

同一の試料を保存した時、通常の細胞学的調製に比較し、人体の新鮮な流体から の細胞学的調製は、回収量（歩留り）、及び質が優れていることを、本発明の発 明者は発見した。このことは、恐らくアルコール、又はその他の保存剤に保管し たものよりも新鮮な細胞はガラス、又は隔膜に一層よく付着するためと考えられ る。

シャツトル法も新鮮な細胞、又は微生物を人体の流体から分離し、捕集し、適当 な緩衝剤によって一旦、細胞を溶血すれば、ＤＮＡ試験、及び染色分析を遂行す ることができる。

細胞学において、細胞変化を可視化するため最も広く用いられている染色剤は、 パニコロー染色剤である。この染色剤は、婦人科学、及び非婦人科学の両方に使 用されているが、基本的には、青の核対比染色剤と、橙、赤、及び緑の細胞質対 比染色剤とから成る。抜染色剤は、正常な細胞と異常な細胞とに関連して有彩色 パターンを表示し、細胞質染色剤は、細胞原点を示す。この方法が成功するのは 、核デテール、及び細胞区分の定義を含む多数の因子を観察できる能力に起因す る。この染色方法も、多色の試料調製となるが、これは目にとって非常に快く、 。

恐らくは目の疲労を和らげるものと考えられる。

核デテールは固定によって定まるので、細胞をスライドに堆積した直後に、細胞 を固定することは非常に大切である。調製と固定との間の遅延が余りに長いと、 細胞を空気の乾燥に曝すことになり、細胞の組織に悪影響を及ぼす。更に、空気 に乾燥されると、次の染色結果に悪影響がある。（ライト・ギームサ染色剤によ って細胞を染色した時には、固定手段として空気の乾燥を使用しているので例外 である。）免疫細胞化学、及びイメージ分析のような新しい方法論では、再現性 かあり、迅速に調製でき、生物災害が無く、安価である標本を必要としている。

本発明の種々の細胞調製技術は、不均一な細胞密度、不均一な細胞分布、及び空 気乾燥を解消することを目指している。本発明によるこれ等の調製は、優れた形 態学を有するよう細胞の分布を均一にし、それにより光学顕微鏡による可視を改 善し、イメージ細胞学機器の使用を可能にしている。

デファレンシャル細胞損失が無いので、細胞をフィルタから摺動体に移送する有 効性は非常に高い。（顕微鏡試験の結果、細胞の分布は、フィルタ上におけるの と、スライド上におけるのと同一であることかわかった。） この方法は、通常の細胞学にとって多くの利点かある。細胞非常に時間の節約に なる。カバースリップの外に細胞がある場合、又は霜がついた端部に細胞かある 場合に生ずる問題を無くすることかできる。細胞が単一層にあるから、１０倍の 対物Ｌ・ンズを使用する時、これ等細胞の殆どは１個の焦点面内にある。

スライドの低出力のスクリーニングにはこのような対物レンズが多く用いられる 。４０倍の対物レンズでも大部分の細胞は焦点面内にある。このようにして、数 回の再焦点合わせを省略し、時間を節約することができる。

この方法において重複する細胞の数を最小にできるから、すべての細胞、及び細 胞群を容易に試験することができ、重複する細胞、又は崩壊層の堆積によって、 診断用の細胞が不鮮明になることがない。更に、このプロセスが細胞学研究室で 行われるので、スライドの調製と固定とが実験室の人員によって制御され、試験 の質が十分なものとなる。

単一の患者の試料から多数の試料を作ることができる。他の染料を加えるための 付加的なスライドは容易に準備することができる。例えば免疫細胞化学、又はイ ンサイチュ−雑種形成のような一層新しい方法による人間の乳頭腫ウィルス試験 を、この付加的なスライド上で行うことができる。腫瘍誘発遺伝子生成物、又は その他の免疫細胞化学試験が発達しているから、一層スライドが必要である。こ れ等の試験に必要とする種々の固定方性をこの方法に組み合わせることができ、 これは調製には一方法のみて固定されるスライドを必要としないからである。

この同一のスライド調製方法は、実際上、すべての細胞学の形態のために使用す ることができる。更に、完全に含有される可処分構成物の使用は、気づかわれる 生物災害を警告するものである。結局、細胞が強調されて表現されることは、細 胞学的判断を一層改善するものであり、患者に対する一層調和した、一層信頼性 のある診断の提供によって、細胞学の役割を拡大するものである。

ベトリ皿９０内での培養のため、第６図に示す容器１２の上部フィルタ２４ａは 、「クオルチ−ｔ−（Ｑｕａｌ　ｔｕｒｅ）装置」を使用する培養に使用するの が好適である。フォルチャ装置は図示しないが、この装置は特定の細菌集団の存 在を決定するのに容易に入手できるものである。このフォルチャ装置は、フィル タ隔膜と、脱水された選択媒体の４個の栄養パッドとを含むプラスチックカプセ ルである。フォルチャ技術は、微生物を捕捉する濾過を使用し、抑制剤を使用せ ず、フィルタを支持するパッド上に脱水させた選択媒体を使用している。流体試 料を３ｍｌのような少量だけ、ピペットによってフォルチャカプセル内に入れ、 培養する。培養すべき尿、透析流体、又はその他の流体をカプセル内のフィルタ 隔膜に通し、４個の脱水媒体（栄養パッド、旧西ドイツ製ｒＳａｒｔｏｒｉｕｓ Ｊ）の水和を行う。ｒＴｅｒｇｉｔｏｌ　ＴＴＣＪか大腸菌の選択に有効である 。ＭＦＣ媒体は、青の光輪を有し青い集団に見える大腸菌によるダラム陽性体の 成長を抑える。ｒＣｈａｐｍａｎＪ媒体はグラム陰性生体を抑制するブドウ球菌 属に対して選択的である。

第４コードランドであるｒＣｅ　ｔ　ｒ　ｉｍｉ　ｄｅＪは緑大腸菌を発生する Ｐｓ　Ｓｐｐのための示差媒体である。これは、大腸菌、又はグラム陰性細菌の 成長を抑制しない。

フォルチャカプセルは３５°Ｃ〜３７°Ｃで培養され、大腸菌の形態学は成長を 示す各コードランドから記録された。フォルチャ技術は１００個と言う少ない大 腸菌を記録し、４時間と言う早い検出によって種々の生体を分離できた。ピーク 値の大腸菌の計数の発色は１．　０００〜１００．　０００ＣＦＵ／ｍｌの希釈 液を使用して８〜１２時間であった。ｒＵｒｏｐａｔｈｏｇｅｎｓＪは選択媒体 、及び示差媒体について仮定的に診断することができ、脱水した媒体は、対象と する生体の成長を支持している間、集団の形態を変化させることなく、好結果で あった。

従って、読み取るべきベトリ皿の待ち時間を損失とすることなく、医師ステーシ ョン、又は看護婦ステーションを、同一の日に変更することができる。ｒＥ、Ｃ ｏｌ　ｉＪ、ｒブドウ球菌属」、ｒＳ、ａｕｒｅｕｓＪ及び「イースト」は４個 の媒体上の成長パターンによって容易に認められる。上述の仮定的診断に対する 裏付けは、Ｅ、ｃｏｌｉについては、インドールテストにより、Ｓ、ａｕｒｅｕ ｓについては、スライドラテックス凝集テストにより、イーストについては、単 一湿潤取付はスライドテストにより入手できる。その生来の性質の故に知られて いるプセウドモナスは、Ｐａ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ及びＰｓ　５ｔｕｔｚｅｒ ｉによって良く成長し、これ等Ｐａ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ及びＰｓ　５ｔｕｔ Ｚｅｒｉは互いに区別され、大腸菌と明瞭に区別される。単一のオキシダーゼテ ストは、大部分のＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｓｐ、Ｅ、ｆａｅｃａｌｉｓの最も 容易に区別できるものの一つであることの裏付けをなす。これは、背景が黄色で その色かレンガ系の赤橙色であることと、ＭＦＣ上の成長がないためとである。

フォルチャ技術は寒天仮性より一層感度が良く、仮定的な診断を決定するに際し 、一層迅速である。フォルチャ装置は、多くの場合、４〜６時間の１工程で、バ クテリア分離体をスクリーニングし、分離し、仮定的に診断する。試験結果は、 流体５０ｍ１からの回収が優れており、感度が良いことを示した。

上述の説明では、本発明を特定の好適な実施例について説明したが、これは単な る例示であり、本発明は、その範囲を逸脱することなく、種々の状態で実施し得 ることは明らかである。

第１図 第２図 第３図 ｒ−一ゝ−） 第６図 第７図 フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号ＧＯＩＮ　１１０４　Ｈ ７５１９−２Ｊ１／２８　Ｊ　８１０５−２Ｊ ３３１５３　Ｔ　８３１０−２Ｊ Ｉ

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. １．細胞学及び病原体の試験のため、保存したものでない新鮮な生物体の流体か ら細胞成分及び生物試料を捕集する装置において、注入器と、この注入器に流体 連通する試料捕集容器とを具え、前記試料捕集容器は互いに取外し可能に取り付 けられるおす部材と、めす部材とから成る２個の部片で構成したハウジングを具 え、更に前記おす部材によって画成したハウジング室に隣接して前記おす部材内 に取り付けた隔膜フィルタ装置を設け、前記隔膜フィルタ装置に生物流体を通過 させるとともに、この隔膜フィルタ装置上に生物成分を凝縮させ、前記隔膜フィ ルタ装置上に捕集した生物成分の除去のためこの隔膜フィルタ装置に容易に接近 できるよう構成したことを特徴とする細胞成分捕集装置。
2. ２．前記おす部材は、ベースと、このベースから外方に伸びる円筒壁と、この円 筒壁の内側に位置し前記ベースから外方に延びて隔膜フィルタ座とこの座に隣接 する室とを画成する内壁手段と、前記内壁手段の前記室に連通する貫通孔を有し 前記円筒壁及び前記内壁手段の反対方向に前記ベースから外方に延びるニップル 手段とを具える請求の範囲１に記載の細胞成分捕集装置。
3. ３．前記めす部材は、ベース手段と、このベース手段から外方に延びる円筒壁と を具え、前記ベース手段は隔膜フィルタ座を画成するとともに、前記円筒壁と協 働して前記隔膜フィルタ座に隣接して室を画成し、更に前記めす部材は、前記室 に連通する貫通孔を有し前記円筒壁の反対方向に前記ベース手段から外方に延び るルーエルロック手段を具える請求の範囲１に記載の細胞成分捕集装置。
4. ４．ポンプ手段と、相互に及び前記ポンプ手段から選択的に取り外せるよう前記 ポンプ手段に連続的に取り付けた複数個の試料捕集ユニットとを具え、各前記試 料捕集ユニットは導入口手段と送出口手段とを有する分離できる部分から成るハ ウジングを具え、前記導入口手段と送出口手段とを他の試料捕集ユニットとの連 結手段として付加的に作用させ、他に前記ハウジングの一方の部分内に取り付け たフィルタ隔膜手段を具え、前記フィルタ隔膜手段は前記生物流体を貫通流動さ せるがこの隔膜手段の孔の寸法に応じて細胞試料又は細菌のいずれかを保持し、 各前記試料捕集ユニットの各前記フィルタ隔膜手段は次の下流の試料捕集ユニッ トのフィルタ隔膜手段の多孔率より大きい多孔率を有することを特徴とする生物 流体の細胞試料と細菌との試験装置。
5. ５．前記ハウジングの一方の部分に設けたルーエルロック手段と、このルーエル ロック手段に取り付けられるよう前記ハウジングの多方の部分に設けた取付け手 段とを具える請求の範囲４に記載の装置。
6. ６．一層小さい孔寸法のフィルタ隔膜から上流に位置するフィルタ隔膜が多形核 白血球を捕捉するよう５ミクロンの孔寸法を有する請求の範囲４に記載の装置。
7. ７．前記フィルタ隔膜手段がポリカーボネートで構成されている請求の範囲４に 記載の装置。
8. ８．一層大きい孔寸法のフィルタ隔膜から下流に位置するフィルタ隔膜が細菌を 捕捉するよう４．５ミクロンの孔寸法を有する請求の範囲４に記載の装置。
9. ９．前記ハウジングの一方の部分は、ベースと、このベースから外方に伸びる円 筒壁と、この円筒壁の内側に位置し前記ベースから外方に延びて隔膜フィルタ座 とこの座に隣接する室とを画成する内壁手段と、前記内壁手段の前記室に連通す る貫通孔を有し前記円筒壁及び前記内壁手段の反対方向に前記ベースから外方に 延びるニップル手段とを具える請求の範囲４に記載の装置。
10. １０．生物流体から細胞学標本を得るにあたり、ａ．試験すべき生物流体を容器 内に捕集し、ｂ．ハウジングとこのハウジングに取り付けた隔膜フィルタ段とを 具える細胞学装置を前記生物流体の前記容器内に浸漬して前記生物流体を前記隔 膜フィルタ手段に通過させ、この生物流体内の予め選択した細胞成分を前記隔膜 フィルタ手段の一側に堆積させ、 Ｃ．前記生物流体の前記容器から前記細胞学装置を除去し、前記隔膜フィルタ手 段とその上に含まれる捕捉した細胞成分とに接近できるようにし、 ｄ．前記隔膜フィルタ手段の隔膜表面をスライドに加え、ｅ．前記隔膜フィルタ 手段から前記スライドに細胞成分を堆積させる ことを特徴とする生物流体から細胞学標本を得る方法。
11. １１．前記工程ｃの後に、前記細胞成分を保存する付加的工程を行う請求の範囲 １０に記載の方法。
12. １２．前記スライド上に堆積した細胞を顕微鏡検査する付加的工程ｆを有する請 求の範囲１０に記載の方法。
13. １３．保管されていない新鮮な細胞を前記スライドに加えた後、前記スライド上 の細胞成分を２時間内に顕微鏡検査する付加的工程ｆを行う請求の範囲１０に記 載の方法。
14. １４．生物流体内の所定の生物試料を試験するにあたり、ａ．生物流体を容器内 に捕集し、 ｂ．連結された部分から成るフィルタ容器に前記生物流体を通し、前記連結され た部分から成るフィルタ容器内に保持された隔膜フィルタ手段上に、前記生物流 体内の予め選択された種々の生物成分を堆積させ、前記連結された部分から成る フィルタ容器によって前記生物流体から細菌を捕捉し、 Ｃ．この捕捉した細菌とともに前記容器を除去し、前記部分から成る濾過された 前記容器を開放して前記隔膜フィルタ手段とその中に含まれる捕捉された細菌と に接近できるようにし、 ｄ．前記捕捉された細菌を前記隔膜フィルタ手段から微生物培養板に移し、 ｅ．前記細菌を、確認可能な細菌群になるよう培養することを特徴とする生物試 料の試験方法。
15. １５．前記細菌群を顕微鏡検査する付加的工程ｆを有する請求の範囲１５に記載 の方法。
16. １６．保管された生物流体内の所定の生物試料を試験するにあたり、 ａ．保管された生物流体を容器内に捕集し、ｂ．取り外し得るよう連結された別 個の部分から成る一連のフィルタ容器に前記保管された生物流体を通し、各前記 連結された部分から成るフィルタ容器内に保持された隔膜フィルタ手段上に、前 記保管された生物流体内の予め選択された種々の生物成分を堆積させ、前記連結 された部分から成るフィルタ容器の１個によって前記保管された生物流体から細 菌を捕捉し、 Ｃ．取り外し得るよう連結された別個の部分から成る一連のフィルタ容器から、 細菌を捕捉する容器を除去し、前記部分から成る濾過された前記容器を開放して 前記隔膜フィルタ手段とその中に含まれる捕捉された細菌とに接近できるように し、 ｄ．前記捕捉された細菌を前記隔膜フィルタ手段からスライド上に移し、 ｅ．前記スライドに堆積した細菌を顕微鏡試験することを特徴とする生物試料の 試験方法。