JP3179785B2 - 生物試料の捕集試験装置及び捕集試験方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 本発明は、医療用、及び実験室用の生物試料を捕集
し、試験する装置に関するものである。診断のための細
胞学は、臨床病理学の分野であり、診断は、身体の多く
の部分から採取した細胞、及びその他の生物試料の顕微
鏡試験に基づいてなされる。診断の正確さは、最適に判
断できる試料となるよう、患者から十分な試料を採取す
ることと、それを培養しスライド標本にする手順とによ
って定まる。

腹膜透析の患者の場合、慢性の歩行できる患者からの
流体を培養するとともに、流体内に存在する炎症性の細
胞があるかどうかを確かめることが重要である。反動と
しての優しさ、警戒心、熱、及び白血球増多症を伴う明
瞭な腹膜炎を持つ患者は診断が困難でない。腎臓病学者
は、若干の症状はあるが、性質が穏やかで、熱が高くな
く、腹部が固くなっていない患者が早期に診断を受ける
ことを求めている。

腎臓病学者は、早期の腹膜炎を発見する完全な方法が
ないことを示している多くの方法の内の一つの方法で透
析物を培養することが多い。大部分の腎臓病学者は、腹
部の空所から若干の流体を抽出し、血球計で細胞計数、
即ちセルカウントを行っている。この細胞計数は、培養
の結果立証するものであるが、それ自身、真の腹膜炎
と、単に細菌の存在によるものかを区別するものでな
い。

腹膜炎に最も通常にある微生物は、腸内細菌、特に
「E.coli」及びコアグラーゼ・ネガテブ・ブドウ球菌で
ある。後者は、汚染物として発見されることが多い共存
生物であるから、特に問題である。従って、流体の最少
50mlを試験し、白い細胞と細菌とを発見した時、早期の
炎症性の病気が存在している証拠が高くなり、安価に良
好な医療結果が得られるよう治療を開始することができ
るのである。

通常の条件下では、尿は、少数の細胞と、全尿道から
脱落したその他の粒状物質とを含んでいる。これ等の物
質は、通常、尿沈殿物として知られている。代表的な尿
沈殿物は、赤血球細胞、白血球細胞、上皮細胞、ゼラチ
ン状塊、粘液、結晶から成る。更に、細菌、イースト、
寄生虫、静止のような散発的な尿沈殿物が、種々の不調
を訴える患者、及び特殊な行動を行う患者に生ずる。病
気になると、これ等の細胞と、その他の形成された物質
が増大することが多く、そのため、これにより病変の場
所と、病変の形式とを見定めるのを助けることもある。
例えば、赤血球細胞が増えると、腫瘍、結石、炎症を示
している。また、白血球細胞が増えると、感染症、又は
その他の炎症があることを示している。通常の尿の本来
の性質と異なり、（例えば、古くからの鱗状細胞、及び
円柱状の細胞のような）新生細胞は、ブラダ上皮の悪い
状態で一層多くはげ落ちる。

最近まで、可能最高の試料を調製する技術は、その価
値にも係わらず注目されなかった。不均一な細胞分布
や、一様でない染色結果のように一部だけ好適であるに
過ぎないスライドを生ずることになる試料の調製技術の
欠点は、我慢せざるを得ないものであった。これは、観
察者はこのようなスライドでも評価せざるを得なかった
ためである。しかし、最近では、一層良好なスライドに
対する関心が高まってきた。診断の目的で、微細な針の
アスピレ−トの使用が増大したこと、イメージ細胞測定
法の多用、細胞学の品質管理技術についての関心の増大
は、スライドの調製技術を改良する動きに遅れた幾つか
の理由がある。免疫細胞化学や、イメージ分析のような
新しい技術による付加的な試験は評価されている。これ
等の試験は、その能力を完全に発揮するためには高い質
の試料を必要としている。試料の調製と、固定とは、各
試料の形式毎に同一で、再現性があることが必要である
ことは明らかである。

隔膜フィルタ技術は細胞学実験室で実施され一層よく
制御することができるので、隔膜フィルタ技術は１つの
改善である。細胞サスペンションを使用する利点は、試
料を分散させ、大きな塊を最少にし、できあがったスラ
イドに一層均一に細胞を分散させることができることで
ある。細胞のサスペンションは渦流、又は注入器によっ
て分散させるのが普通である。

隔膜フィルタ技術においては、セルローズ、又はポリ
カーボネートから成る隔膜フィルタ上に細胞サスペンシ
ョンを集中させ、捕集する。この技術は、脳脊髄液にお
けるように、細胞の集中が少ない多くの場合に使用され
る。人体の流体、又は保管された流体の細胞を漏斗内に
入れ、捕集し、洗浄し、フィルタに固着し、次にこの固
着した細胞とともにフィルタをスライド上に置く。フィ
ルタの背景が細胞の検査に干渉するから、この技術はフ
ィルタを溶解するように改良された。しかし、フィルタ
を溶解させると、細胞の形態に影響を及ぼすから、この
技術は若干の危険がある。

尿や透析流体は、診断のために論じられてきた試料で
あるが、精液、骨液、胸膜液、囲心腔液、腹膜液、羊
水、汗のようなその他の流体は、特定の条件と病気とに
関係する。生物流体試料の捕集取扱中、潜在的な試料の
劣化、汚染、試料からの感染の広がりを最少にすること
が重要である。

代表的な試料捕集装置が、米国特許第4741346号に開
示されている。この装置は、ベーススタンドによって直
立位置に試料びんを支持している。このびんの開口端に
漏斗を挿入して、びんの上部を包囲し、包み込む。ベー
ススタンドに上方に延びる管状壁を設け、キャップに関
連して、この管状壁によって少なくとも部分的にびんを
包囲し、試料の表面に触れることなく、即ち試料に接触
することなく使用者がびんを取り外すことができるよう
にしている。尿を捕集し、移送するための種々の液体容
器は、米国特許第3777739号、第3881465号、第4042337
号、第4084937号、第4244920号、第4492258号、第47007
14号に開示されている。

米国特許第4040791号に開示されているその他の試料
捕集装置は、捕集容器のニップル上に試料容器を取り付
け、この試料容器に、シールされた状態で所定量の試料
を収容する。この試料容器に一体にキャップを形成し、
ニップルを挿入した開口上にこのキャップを置く。米国
特許第4557274号に開示された漏斗を有する中流尿捕集
器は、隔膜カバーによって覆われたカップ部材内に、漏
斗によって尿を移送する。

ストリップ試験装置兼捕集装置は、米国特許第447353
0号に開示されており、尿の短時間試験ができる比重読
取り装置とともに管内に収容した化学試薬試験ストリッ
プを設けることにより、試験と捕集とを組み合わせてい
る。米国特許第4573983号の液体捕集システムは、排出
物に防譜剤部材を設け、空気細菌不透過材料のフィルタ
を使用して尿を濾過している。

頸部の汚れを自動的に測定することに努力していた多
くの研究者は、細胞捕集技術を組み合わせた機器を開発
した。ある研究グループは粘液、又はその他の非細胞粘
着物質によって凝集している細胞を分散させるロータ装
置を含む機器を開発した。このロータ装置を使用して、
細胞を高度に分散させ、細胞の塊を減少させ、しかも診
断に必要な異常な細胞群を維持できるようにしている。
次に、希望する数の細胞をポリカーボネートフィルタ隔
膜上に捕集し、同時に圧力に加えて固定することによ
り、スライド上に細胞を堆積する。濾過することによっ
て、診断に関係がない背景の多くの崩壊物と、大部分の
赤血球細胞とを除去し、重要な診断上の手掛かりを失う
ことなく、一層綺麗なスライドを得る。

サイテック（Cytic）・コーポレイションは、ThinPre
pプロセッサを設計するに当たり、この以前に開発した
装置を更に改良した。緩やかな分散によって大きな塊を
ほぐし、しかも診断に必要な細胞群は完全に維持できる
ようにしている。赤血球細胞の大部分と、僅かな崩壊物
を除去する。次に、制御された密度で、細胞物質をスラ
イドに移す。このプロセスは、非噴霧質であり、汚染さ
れることがなく、低コストであり、完全に自動化されて
いる。

従って、段階的なフィルタを通して流体試料を移送
し、試験のため、凝縮された量の細胞粒状物質と、細菌
とをこの流体から捕捉することができ、取扱容易で、使
い捨ての装置と、方法とを提供することが望ましい。

発明の簡単な要約 本発明は、取り外し可能で、容易に分離できるシャッ
トルシステムに関するもので、これにより、流体試料の
細胞成分と、沈殿物と、細菌成分とを除去する比較的簡
単な方法を提供する。この装置では、困難な試験に使用
するため、流体試料内の異なる粒状物質を除去するの
に、段階的な濾過作用は必須である。本発明装置は、積
み重ねることができる２個の部片から成る複数個の容器
の形状であり、異なる多孔率の、即ち異なる孔寸法のフ
ィルタ隔膜を各容器に設ける。２個の部片から成る容器
のおす部材をめす部材に螺着し、流体を流す貫通孔を両
部材に設ける。積み重ねた容器に通る注入器によって、
尿、又は透析物流体を試料容器から引出す。流体は５ミ
クロンのフィルタ粒子寸法を有する第１フィルタ隔膜に
掛合して通り、この第１フィルタ隔膜上に細胞と細胞崩
壊物とをスクリーニングし、濾過された流体を第２容器
に通し、この容器が有する4.5ミクロンのフィルタ粒子
寸法を有するフィルタ隔膜上に細菌をスクリーニング
し、この細菌をこの隔膜の表面上に濃縮させる。

本発明の目的は、特定の細菌を流体から捕集し、濃縮
し、次に培養媒体内に堆積し、スライド上に設置するた
め、細胞と、その他の粒状物質とを別個の隔室内に捕集
する。従来は、多数の異なる容器と、感度が低い高価な
実験室装置とを必要とする一連の異なる試験によって行
っていた。

添付図面により、本発明の図示の実施例を説明し、本
発明の目的、新規な要旨、及び利点を明らかにする。

図面の簡単な説明 第１図は、流体試料をシャットル容器に通して移動さ
せる前の本発明装置の線図的断面図、 第２図は、矢印Ａの方向にフィルタ容器を通じて、試
験すべき流体が通っている状態の第１図の装置の線図的
断面図、 第３図は、第１図の装置のシャットル容器の分解拡大
断面図、 第４図は、おす隔膜部材と、めすコネクタ部材とを示
す第３図のシャットル容器の分解断面図、 第５図は、おす隔膜部材と、めすコネクタ部材とを示
す他方のシャットル容器の異なる寸法の分解断面図、 第６図は、積み重ねたシャットル容器を除去し、細菌
試料を微生物培養トレーに溶離している状態を示す第１
図のシャットル容器の拡大断面図、 第７図は、細胞学の捕集と試料とのためスライド上に
設置する除去されたシャットル容器のめすコネクタ部材
から取り外したおす部材の断面図である。

発明の詳細な記載 本発明の好適な実施例と、発明実施の最良の形態とを
第１図から第４図までに示す。第１図および第２図に仮
想線で示すように、100mlの目盛付き容器10内に、最初
に捕集した試料流体を通常収容する。このような容器
は、８−168指定4013試料容器の名で、ベクトン・デキ
ンソン・ラブウェア社によって現在製造されている。こ
の捕集容器は約133ml（4.5オンス）の流体を保持するこ
とができ、ポリエチレンのスナップ蓋によって目盛りさ
れている。

第１図および第２図に一層詳細に示すように、積み重
ねたシャットル容器組立体12は、複数個の積み重ねたシ
ャットル容器を有する。各容器は容易に開くことがで
き、おすフィルタ隔膜支持部材14と、この部材14に螺着
しためすコネクタ部材26とを具える単一２片構造で構成
されている。次に一層詳細に説明するように、注入器44
のルーエルロック手段42に、シャットル容器組立体12を
取り付ける。おすフィルタ隔膜支持部材14には、ねじ面
21を有する外側円筒壁15と、この円筒壁15を越えて突出
し唇部17を形成するベース16と、円筒壁15の反対方向に
ベース16から外方に突出するおすニップル18とを設け
る。ニップル18に端部フランジを設け、注入器44のルー
エルロック42に、この端部フランジを螺着できるように
するとともに、おす部材14の内側傾斜壁22によって画成
した室20に達する貫通孔19をニップル18内に画成する。
この内側傾斜壁22は、円筒外面を有し、外側円筒壁15か
ら離間し、通路27を画成する。環状段、即ち隔膜座23
を、壁22の内面に形成し、隔膜24を保持する。内側傾斜
壁22の段付き端部28の面に環状溝25を形成し、めすコネ
クタ部材26から突出するロック突起34に、この環状溝25
を嵌着できるようにし、このようにして、おす部材14
と、めす部材26とをシールされた状態に保持するととも
に、隔膜24のための安全止めになるようにする。

第４図および第５図に示すめすコネクタ部材26は、ベ
ース31を有する外側円筒ハウジング30を具える。このハ
ウジング30の内面32にねじを形成し、おす部材14の壁15
のおねじ21に螺着できるようにする。おす部材14とめす
部材26とを互いに螺着した時、ハウジング30の平坦壁33
は外側に突出するフランジ、即ち唇部17に衝合する。ハ
ウジング30の内壁面と組み合わせて、めす部材26の内部
形状を画成しているベース内面は、同心的に段付きであ
り、外側段36は壁15、22の端部に衝合し、内側段38は隔
膜24と段付き端部28の末端段部29とに衝合する。ベース
31の外面にねじルーエルロック40を設け、截頭円錐端を
有する貫通孔39を画成して隔膜24と室20とに達せしめ
る。上述したように、シャットル容器のニップル18を、
相手シャットル容器12のルーエルロック40上のねじ突起
に嵌着できるようにする。しかも、ベクトン・デキンソ
ン・ラブウェア社によって製造されている30ccc注入器4
4のルーエルロック42にも、シャットル容器のニップル1
8を嵌着できるようにする。例えばジェネックス・コー
ポレーションによって製造されているオートバイアルス
パングラスフィルタのようなポンプ型装置を、注入器44
の代わりに使用することができることに注意すべきであ
る。注入器44は、ルーエルロック42に関連する胴部50
と、ピストン52と、ピストンヘッド54とを有する。本発
明はいかなる流体をも使用することができるが、基本的
に濃縮透析流体、及び尿に使用することができ、更に種
々の病気の試験に使用するための関連する沈殿物、又は
細菌を捕集するよう設計されている。

第１図から第７図までに示すように、シャットル容器
組立体をポリスチレンで構成する。第４図に示すように
シャットル容器組立体12には、直径13mm、多孔率0.45ミ
クロンのニトロセルローズ製の隔膜フィルタ24aを設け
る。

ルーエルロック40上のねじニップル18によって、第２
の同一のシャットル容器112をシャットル容器12に取り
外し可能に取り付ける。シャットル112の孔39に針139を
取り付け、この針の拡大端を孔39の拡大した截頭円錐端
部内に着座させる。この第２シャットルには、直径13m
m、多孔率５ミクロンのポリカーボネイト製の隔膜フィ
ルタ24を設ける。

代案としてのシャットル容器を第５図に示し、この容
器はシャットル容器112の代わりとなるものである。既
に説明したシャットル容器と異なり、このシャットル容
器は、直径25mm,多孔率0.45ミクロンのポリカーボネイ
ト製の隔膜124を保持するように設計されており、隔膜
の直径が大きいため、おす部材14の内壁の内部形状22を
除去し、単一壁ハウジング115を形成する。この部分に
は、おす部材14と同様のおねじを形成する。

作動に当たり、本発明は別個の容器にそれぞれ保持さ
れた２個の隔膜をシリーズに使用する。第１のフィルタ
は流体の流れに掛合、即ち接触することから、ポリカー
ボネイト製のフィルタであって、孔の寸法が7.5ミクロ
ンである多形核白血球、又はリンパ球すらも捕捉するた
め、このフィルタの孔は５ミクロンである。この流体は
多核フィルタを乗り越えるから、次にこの流体は、バク
テリアを捕捉する0.45ミクロンの孔を有するニトロセル
ローズ製のフィルタ24aに接触する。

種々の組成のフィルタを使用し、交換することができ
ることに注意すべきである。最初の流体のスクリーニン
グのため使用できる隔膜フィルタは、ポール・コーポレ
ーション社のポール・バイオサポート部門で製造される
白血球保持媒体としての「ルウコソー（LEUCOSORE）」
である。ポール・コーポレ−ション社により製造され市
販されているその他の隔膜は「バイオダインＡ（BIODYN
E Ａ）」があり、これは表面の化学的性質が50％アミ
ン、50％カルボキシル系で、等電点のpH値が6.5の未改
質のナイロンである。また「バイオダインＢ（BIODYNE
Ｂ）」があり、これは表面の化学的性質が高密度のカ
チオン四元素系（ジ−タポテンシャルがpH＞10まで正）
であることに特徴がある表面改質ナイロンである。また
「バイオダインＣ（BIODYNE Ｃ）」があり、これは表
面の化学的性質が高密度のアニオンカルボキシル系（ジ
ータポテンシャルがpH＞３まで負）であることに特徴が
ある表面改質ナイロンである。更に、「ロプロダイン
（LOPRODYNE）」があり、これは細胞分離、及び細菌細
胞免疫分析用に設計されており、液体を迅速有効に通過
させ、微細粒子を絶対的に保持するため、高い多孔率の
緊密に制御された微細多孔質構造の低蛋白質結合ナイロ
ン66隔膜である。両方のフィルタ隔膜24、24aを通じて
容器10から注入器に50mlの透析物を引き出す。必要な量
の透析物をフィルタ隔膜に通した後、下流の容器112と
フィルタ隔膜24とを除去する。第７図に示すように、ポ
リカーボネート隔膜24をガラススライド80上に設置し、
細胞学的決定のための改質ライト染料によって染色す
る。

従って、スライドに細胞を移送する方法は、隔膜濾過
の方法（隔膜フィルタを通じて流体試料を濾過し、細胞
回収を増大する）である。この特定の技術により、細胞
をスライドに最小のオーバラップで均一に堆積し、これ
により明瞭な観察と、最適な診断精度とを達成できるの
である。

細胞をスライド、又は隔膜上に移送し、又は捕集する
方法は、人体の流体、分泌物、又は汚れ内の細胞学的試
料を保存し、固定することによって、大きく影響を受け
る。

現在、特定の容器を使用する細胞学的検査のため、人
体の流体試料を集めている。捕集位置から細胞学研究室
まで輸送中、細胞試料を保存するため、通常これ等の容
器は、保存剤溶液を収容している。更に、脱脂綿、塗
布、洗浄、又はブラシ等を使用して人体の空所から集め
た細胞試料は、染色又は試験のためスライド又は隔膜上
に細胞を移送する以前に、定着剤と供に特定の容器に保
存する。

同一の試料を保存した時、通常の細胞学的調製に比較
し、人体の新鮮な流体からの細胞学的調製は、回収量
（歩留り）、及び質が優れていることを、本発明の発明
者は発見した。このことは、恐らくアルコール、又はそ
の他の保存剤に保管したものよりも新鮮な細胞はガラ
ス、又は隔膜に一層よく付着するためと考えられる。

シャットル法も新鮮な細胞、又は微生物を人体の流体
から分離し、捕集し、適当な緩衝剤によって一旦、細胞
を溶血すれば、DNA試験、及び染色分析を遂行すること
ができる。

細胞学において、細胞変化を可視化するため最も広く
用いられている染色剤は、パニコロー染色剤である。こ
の染色剤は、婦人科学、及び非婦人科学の両方に使用さ
れているが、基本的には、青の核対比染色剤と、橙、
赤、及び緑の細胞質対比染色剤とから成る。核染色剤
は、正常な細胞と異常な細胞とに関連して有彩色パター
ンを表示し、細胞質染色剤は、細胞原点を示す。この方
法が成功するのは、核デテール、及び細胞区分の定義を
含む多数の因子を観察できる能力に起因する。この染色
方法も、多色の試料調製となるが、これは目にとって非
常に快く、恐らくは目の疲労を和らげるものと考えられ
る。

核デテールは固定によって定まるので、細胞をスライ
ドに堆積した直後に、細胞を固定することは非常に大切
である。調製と固定との間の遅延が余りに長いと、細胞
を空気の乾燥に曝すことになり、細胞の組織に悪影響を
及ぼす。更に、空気に乾燥されると、次の染色結果に悪
影響がある。（ライト・ギームサ染色剤によって細胞を
染色した時には、固定手段として空気の乾燥を使用して
いるので例外である。） 免疫細胞化学、及びイメージ分析のような新しい方法
論では、再現性があり、迅速に調製でき、生物災害が無
く、安価である標本を必要としている。本発明の種々の
細胞調製技術は、不均一な細胞密度、不均一な細胞分
布、及び空気乾燥を解消することを目指している。本発
明によるこれ等の調製は、優れた形態学を有するよう細
胞の分布を均一にし、それにより光学顕微鏡による可視
を改善し、イメージ細胞学機器の使用を可能にしてい
る。

デファレンシャル細胞損失が無いので、細胞をフィル
タから摺動体に移送する有効性は非常に高い。（顕微鏡
試験の結果、細胞の分布は、フィルタ上におけるのと、
スライド上におけるのと同一であることがわかった。） このことは、通常の細胞学にとって多くの利点があ
る。細胞が所定の区域にあるので、スライドをスクリー
ニングする時、非常に時間の節約になる。カバースリッ
プの外に細胞がある場合、又は霜がついた端部に細胞が
ある場合に生ずる問題を無くすることができる。細胞が
単一層にあるから、10倍の対物レンズを使用する時、こ
れ等細胞の殆どは１個の焦点面内にある。スライドの低
出力のスクリーニングにはこのような対物レンズが多く
用いられる。40倍の対物レンズでも大部分の細胞は焦点
面内にある。このようにして、数回の再焦点合わせを省
略し、時間を節約することができる。

この方法において重複する細胞の数を最小にできるか
ら、すべての細胞、及び細胞群を容易に試験することが
でき、重複する細胞、又は崩壊屑の堆積によって、診断
用の細胞が不鮮明になることがない。更に、このプロセ
スが細胞学研究室で行われるので、スライドの調製と固
定とが実験室の人員によって制御され、試験の質が十分
なものとなる。

単一の患者の試料から多数の試料を作ることができ
る。他の染料を加えるための付加的なスライドは容易に
準備することができる。例えば免疫細胞化学、又はイン
サイチュー雑種形成のような一層新しい方法による人間
の乳頭腫ウイルス試験を、この付加的なスライド上で行
うことができる。腫瘍誘発遺伝子生成物、又はその他の
免疫細胞化学試験が発達しているから、一層スライドが
必要である。これ等の試験に必要とする種々の固定方法
をこの方法に組み合わせることができ、これは調製には
一方法のみで固定されるスライドを必要としないからで
ある。

この同一のスライド調製方法は、実際上、すべての細
胞学の形態のために使用することができる。更に、完全
に含有される可処分構成物の使用は、気づかわれる生物
災害を警告するものである。結局、細胞が強調されて表
現されることは、細胞学的判断を一層改善するものであ
り、患者に対する一層調和した、一層信頼性のある診断
の提供によって、細胞学の役割を拡大するものである。

ペトリ皿90内での培養のため、第６図に示す容器12の
上部フィルタ24aは、「クオルチャ（Qualture）装置」
を使用する培養に使用するのが好適である。クオルチャ
装置は図示しないが、この装置は特定の細菌集団の存在
を決定するのに容易に入手できるものである。このクオ
ルチャ装置は、フィルタ隔膜と、脱水された選択媒体の
４個の栄養パッドとを含むプラスチックカプセルであ
る。クオルチャ技術は、微生物を捕捉する濾過を使用
し、抑制剤を使用せず、フィルタを支持するパッド上に
脱水させた選択媒体を使用している。流体試料を3mlの
ような少量だけ、ピペットによってクオルチャカプセル
内に入れ、培養する。培養すべき尿、透析流体、又はそ
の他の流体をカプセル内のフィルタ隔膜に通し、４個の
脱水媒体（栄養パッド、旧西ドイツ製「Sartorius」）
の水和を行う。「Tergitol TTC」が大腸菌の選択に有効
である。MFC媒体は、青の光輪を有し青い集団に見える
大腸菌によるグラム陽性体の成長を抑える。「Chapma
n」媒体はグラム陰性生体を抑制するブドウ球菌属に対
して選択的である。第４コードランドである「Cetrimid
e」は緑大腸菌を発生するPs Sppのための示差媒体であ
る。これは、大腸菌、又はグラム陰性細菌の成長を抑制
しない。

クオルチャカプセルは35℃〜37℃で培養され、大腸菌
の形態学は成長を示す各コードランドから記録された。
クオルチャ技術は100個と言う少ない大腸菌を記録し、
４時間と言う早い検出によって種々の生体を分離でき
た。ピーク値の大腸菌の計数の発色は1,000〜100,000CF
U/mlの希釈液を使用して８〜12時間であった。「Uropat
hogens」は選択媒体、及び示差媒体について仮定的に診
断することができ、脱水した媒体は、対象とする生体の
成長を支持している間、集団の形態を変化させることな
く、好結果であった。従って、読み取るべきペトリ皿の
待ち時間を損失とすることなく、医師ステーション、又
は看護婦ステーションを、同一の日に変更することがで
きる。「E.Coli」、「ブドウ球菌属」、「S.aureus」及
び「イースト」は４個の媒体上の成長パターンによって
容易に認められる。上述の仮定的診断に対する裏付け
は、E.coliについては、インドールテストにより、S.au
reusについては、スライドラテックス凝集テストによ
り、イーストについては、単一湿潤取付けスライドテス
トにより入手できる。その生来の性質の故に知られてい
るプロセウドモナスは、Pa aeruginosa及びPs stutze
riによって良く成長し、これ等Pa aeruginosa及びPs
stutzeriは互いに区別され、大腸菌と明瞭に区別され
る。単一のオキシダーゼテストは、大部分のPseudomona
s sp.E.faecalisの最も容易に区別できるものの一つで
あることの裏付けをなす。これは、背景が黄色でその色
がレンガ系の赤橙色であることと、MFC上の成長がない
ためとである。クオルチャ技術は寒天板法より一層感度
が良く、仮定的な診断を決定するに際し、一層迅速であ
る。クオルチャ装置は、多くの場合、４〜６時間の１工
程で、バクテリア分離体をスクリーニングし、分離し、
仮定的に診断する。試験結果は、流体50mlからの回収が
優れており、感度が良いことを示した。

上述の説明では、本発明を特定の好適な実施例につい
て説明したが、これは単なる例示であり、本発明は、そ
の範囲を逸脱することなく、種々の状態で実施し得るこ
とは明らかである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ｇ０１Ｎ 1/04 Ｇ０１Ｎ 1/04 Ｈ 1/28 33/53 Ｔ 33/53 1/28 Ｊ (56)参考文献 特開 平１−63011（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−228695（ＪＰ，Ａ) 実開 平４−60098（ＪＰ，Ｕ) 実開 平２−125727（ＪＰ，Ｕ) 特公 平３−36171（ＪＰ，Ｂ２) 欧州特許出願公開471570（ＥＰ，Ａ １) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) G01N 1/10 G01N 1/04 G01N 1/28 C12M 1/00 - 3/04 C12Q 1/00 - 3/00

Claims (16)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】細胞学及び病原体の試験のため、保存した
   ものでない新鮮な生物体の流体から細胞成分及び生物試
   料を捕集する装置において、注入器と、この注入器に流
   体連通する試料捕集容器とを具え、前記試料捕集容器は
   互いに取外し可能に取り付けられるおす部材と、めす部
   材とから成る２個の部片で構成したハウジングを具え、
   更に前記おす部材によって画成したハウジング室に隣接
   して前記おす部材内に取り付けた隔膜フィルタ装置を設
   け、前記隔膜フィルタ装置に生物流体を通過させるとと
   もに、この隔膜フィルタ装置上に生物成分を凝縮させ、
   前記隔膜フィルタ装置上に捕集した生物成分の除去のた
   めこの隔膜フィルタ装置に容易に接近できるよう構成し
   たことを特徴とする細胞成分捕集装置。
2. 【請求項２】前記おす部材は、ベースと、このベースか
   ら外方に伸びる円筒壁と、この円筒壁の内側に位置し前
   記ベースから外方に延びて隔膜フィルタ座とこの座に隣
   接する室とを画成する内壁手段と、前記内壁手段の前記
   室に連通する貫通孔を有し前記円筒壁及び前記内壁手段
   の反対方向に前記ベースから外方に延びるニップル手段
   とを具える請求の範囲１に記載の細胞成分捕集装置。
3. 【請求項３】前記めす部材は、ベース手段と、このベー
   ス手段から外方に伸びる円筒壁とを具え、前記ベース手
   段は隔膜フィルタ座を画成するとともに、前記円筒壁と
   協働して前記隔膜フィルタ座に隣接して室を画成し、更
   に前記めす部材は、前記室に連通する貫通孔を有し前記
   円筒壁の反対方向に前記ベース手段から外方に延びるル
   ーエルロック手段を具える請求の範囲１に記載の細胞成
   分捕集装置。
4. 【請求項４】ポンプ手段と、相互に及び前記ポンプ手段
   から選択的に取り外せるよう前記ポンプ手段に連続的に
   取り付けた複数個の試料捕集ユニットとを具え、各前記
   試料捕集ユニットは導入口手段と送出口手段とを有する
   分離できる部分から成るハウジングを具え、前記導入口
   手段と送出口手段とを他の試料捕集ユニットとの連結手
   段として付加的に作用させ、他に前記ハウジングの前記
   分離できる各部分内に取り付けたフィルタ隔膜手段を具
   え、前記フィルタ隔膜手段は前記生物流体を貫通流体さ
   せるがこの隔膜手段の孔の寸法に応じて細胞試料又は細
   菌のいずれかを保持し、各前記試料捕集ユニットの各前
   記フィルタ隔膜手段は次の下流の試料捕集ユニットのフ
   ィルタ隔膜手段の多孔率より大きい多孔率を有すること
   を特徴とする生物流体の細胞試料と細菌との試験装置。
5. 【請求項５】前記ハウジングの一方の部分に設けたルー
   エルロック手段と、このルーエルロック手段に取り付け
   られるよう前記ハウジングの多方の部分に設けた取付け
   手段とを具える請求の範囲４に記載の装置。
6. 【請求項６】一層小さい孔寸法のフィルタ隔膜から上流
   に位置するフィルタ隔膜が多形核白血球を捕捉するよう
   ５ミクロンの孔寸法を有する請求の範囲４に記載の装
   置。
7. 【請求項７】前記フィルタ隔膜手段がポリカーボネート
   で構成されている請求の範囲４に記載の装置。
8. 【請求項８】一層大きい孔寸法のフィルタ隔膜から下流
   に位置するフィルタ隔膜が細菌を捕捉するよう0.45ミク
   ロンの孔寸法を有する請求の範囲４に記載の装置。
9. 【請求項９】前記ハウジングの一方の部分は、ベース
   と、このベースから外方に伸びる円筒壁と、この円筒壁
   の内側に位置し前記ベースから外方に延びて隔膜フィル
   タ座とこの座に隣接する室とを画成する内壁手段と、前
   記内壁手段の前記室に連通する貫通孔を有し前記円筒壁
   及び前記内壁手段の反対方向に前記ベースから外方に延
   びるニップル手段とを具える請求の範囲４に記載の装
   置。
10. 【請求項１０】生物流体から細胞学標本を得るにあた
    り、 a.試験すべき生物流体を容器内に捕集し、 b.ハウジングとこのハウジングに取り付けた隔膜フィル
    タ段とを具える細胞学装置を前記生物流体の前記容器内
    に浸漬して前記生物流体を前記隔膜フィルタ手段に通過
    させ、この生物流体内の予め選択した細胞成分を前記隔
    膜フィルタ手段の一側に堆積させ、 c.前記生物流体の前記容器から前記細胞学装置を除去
    し、前記隔膜フィルタ手段とその上に含まれる捕捉した
    細胞成分とに接近できるようにし、 d.前記隔膜フィルタ手段の隔膜表面をスライドに加え、 e.前記隔膜フィルタ手段から前記スライドに細胞成分を
    堆積させる ことを特徴とする生物流体から細胞学標本を得る方法。
11. 【請求項１１】前記工程ｃの後に、前記細胞成分を保存
    する付加的工程を行う請求の範囲10に記載の方法。
12. 【請求項１２】前記スライド上に堆積した細胞を顕微鏡
    検査する付加的工程ｆを有する請求の範囲10に記載の方
    法。
13. 【請求項１３】保管されていない新鮮な細胞を前記スラ
    イドに加えた後、前記スライド上の細胞成分を２時間内
    に顕微鏡検査する付加的工程ｆを行う請求の範囲10に記
    載の方法。
14. 【請求項１４】生物流体内の所定の生物試料を試験する
    にあたり、 a.生物流体を容器内に捕集し、 b.連結された部分から成るフィルタ容器に前記生物流体
    を通し、前記連結された部分から成るフィルタ容器内に
    保持された隔膜フィルタ手段上に、前記生物流体内の予
    め選択された種々の生物成分を堆積させ、前記連結され
    た部分から成るフィルタ容器によって前記生物流体から
    細菌を捕捉し、 c.この捕捉した細菌とともに前記容器を除去し、前記部
    分から成る濾過された前記容器を開放して前記隔膜フィ
    ルタ手段とその中に含まれる捕捉された細菌とに接近で
    きるようにし、 d.前記捕捉された細菌を前記隔膜フィルタ手段から微生
    物培養板に移し、 e.前記細菌を、確認可能な細菌群になるよう培養するこ
    とを特徴とする生物試料の試験方法。
15. 【請求項１５】前記細菌群を顕微鏡検査する付加的工程
    ｆを有する請求の範囲15に記載の方法。
16. 【請求項１６】保管された生物流体内の所定の生物試料
    を試験するにあたり、 a.保管された生物流体を容器内に捕集し、 b.取り外し得るよう連結された別個の部分から成る一連
    のフィルタ容器に前記保管された生物流体を通し、各前
    記連結された部分から成るフィルタ容器内に保持された
    隔膜フィルタ手段上に、前記保管された生物流体内の予
    め選択された種々の生物成分を堆積させ、前記連結され
    た部分から成るフィルタ容器の１個によって前記保管さ
    れた生物流体から細菌を捕捉し、 c.取り外し得るよう連結された別個の部分から成る一連
    のフィルタ容器から、細菌を捕捉する容器を除去し、前
    記部分から成る濾過された前記容器を開放して前記隔膜
    フィルタ手段とその中に含まれる捕捉された細菌とに接
    近できるようにし、 d.前記捕捉された細菌を前記隔膜フィルタ手段からスラ
    イド上に移し、 e.前記スライドに堆積した細菌を顕微鏡試験すること を特徴とする生物試料の試験方法。