JPH06500321A

JPH06500321A - 免疫抑制組成物

Info

Publication number: JPH06500321A
Application number: JP3514153A
Authority: JP
Inventors: バッジャー，アリソン・メアリー
Original assignee: スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション
Priority date: 1990-08-10
Filing date: 1991-08-07
Publication date: 1994-01-13
Anticipated expiration: 2012-11-12
Also published as: WO1992002229A1; EP0542860B1; AU658577B2; EP0542860A4; JP2675194B2; CA2088492A1; EP0542860A1; ES2118087T3; HK1011503A1; DK0542860T3; DE69129459D1; AU8412091A; ATE166228T1; GR3027668T3; DE69129459T2; KR100215167B1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】免疫抑制組成物本発明は非特異的（ＮＳ）サプレッサー細胞誘導化合物および非−ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物ならびに医薬的に許容される担体または希釈剤を含有する医薬組成物に関する。本発明は、免疫抑制を必要とする、ヒトを含む哺乳動物にＮＳサプレッサー細胞誘導化合物および非−ＮＳサブレ・け−細胞誘導免疫抑制化合物の有効量を投与することからなる、該哺乳動物において免疫抑制効果を誘導する方法にも関する。

発明の背景サイクロスポリンＡ、コルチコステロイド、アザチオプリン、ポリクローナル抗リンパ球グロブリンおよびモノ知−ナルＴ細胞抗体のような、自己免疫疾患および移植片／移植拒絶反応の治療に使用される慣用薬物は、免疫抑制応答を選択するのに多少有効である。しかし、それらの毒性プロフィールは、それらの臨床的利益を制限する。かくして、低毒性プロフィールを有する薬剤による、自己免疫疾患、移植片／移植拒絶反応および他の免疫抑制を必要とする疾患の治療は、大きい臨床問題を残している。

サイ知スポリンＡと併用するモノ知−ナル抗ＩＬ−２レセプター抗体の使用が報告された。ダイアマンッシュタイン、ティー（Ｄ　ｉａ＋ａａｎｔｓｔｅｉｎ、　Ｔ、　）ら、（１９８６）、イムノバイオロジー（Ｉ　ｍｍｕｎｏｂｉｏｌ、　）、１７２　二３９１−３９９　；クピエクーヴエグリンスキー、ジェイ・ダブリュ（Ｋｕｐｉｅｃ−Ｗｅｇｌｉｎｓｋｉ、　Ｊ　、　Ｗ、　）ら、（１９８８）、トランスプランテーション・プロシーディンゲス（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｃ）、２０　：　２０７−２１６およびハンコック、ダブリュ・ダブリュ（Ｈａｎｃｏｃｋ、　Ｗ、　Ｗ、　）ら、（１９９０）、トランスプランテーション（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）、４９：４１６−４２１を参照。サイクロスポリンＡと併用するブロモクリプチンの使用（キャリヤー、エム（Ｃａｒｒｉｅｒ、　Ｍ、　）ら、（１９９０）、アナルズ・オフ・ソーラシック・サージエリ−（Ａｎｎ、　Ｔｈｏｒａｃ、　Ｓ　ｕｒｇ、）、４９　：１２９−３２）およびサイクロスポリンＡと併用するサリドマイドの使用（タムラ、エフ（Ｔａｍｕｒａ、　Ｆ、）ら、（１９９０）、トランスプランテーション、４９　：　２Ｏ−２５）が報告された。

非特異的サプレッサー細胞誘導化合物は、成熟Ｔ細胞、Ｂ細胞、マロクファージまたは天然キラー細胞の特徴を持たない天然サプレッサー細胞の個体群の生産を誘導する薬物であり、したがって、ヌルまたは非特異的表現型のものである。

天然サプレッサー細胞はｉｎ　ｖｉｖｏで種々の免疫応答を抑制することができる。

全身リンパ組織放射線照射（ＴＬＩ）に関連する免疫抑制活性は、天然サプレッサー細胞の個体群の発生によるものとされた。ストロバー、ニス（Ｓ　ｔｒｏｂｅｒ、　Ｓ　、　）、（１９８４）、Ａｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｔ　ｍｍｕｎ、、２：２１９およびメイヤー、ティ（Ｍａｉｅｒ、　Ｔ、　）ら、（１９８６）、イムノロジー・トウディ（Ｉ　ｍｌｌ１ｕｎｏ１．　Ｔｏｄａｙ）、７　：　３１２を参照。サイクロスポリンおよびシクロホスファミド（ヤマグチ、ワイ（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ。

Ｙ、）ら、（１９９０）、トランスプランテーション、４９：１３−１７を参照）または膵臓摘出（ミャムラ、ケイ（Ｍｉｙａｍｕｒａ、　Ｋ、　）ら、（１９８８）、ポーン・バロウ・トランスプランテーション（Ｂｏｎｅ　Ｂａｒｒｏｗ　Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）　３　：　４５７−４６１を参照）のいずれかの併用治療の一部としてのＴＬＩの使用が報告された。

ＮＳサプレッサー細胞を誘導することが知られている化合物のクラスとしては、Ｎ−アミノアルキルアザスピロゲルマニウムアルカン類（例えば、バラジャー。

エイ（Ｂ　ａｄｇｅｒ、　Ａ、　）ら、（１９８５）、イムノファーマコロジ− （Ｉ　ｍｍｕｎｏｐｈａｒｍ、　）、１ｏ　：　２０１およびジマルチーノ、エム・ジェイ（ＤｉＭａｒｔｉｎｏ、Ｍ、　Ｊ、）ら、（１９８６）、ジャーナル・オフ・ファーマコロジー・アンド・イクスペリメンタル・セラビューティクス（Ｊ　、　Ｐ　ｈａｒｍ、　Ｅ　ｘｐ、　Ｔ　ｈｅｒ、　）、２３６　：１０３を参照）およびＮ−アミノアルキルアザスピロアルカン類（例えば、バッジャー、エイら、（１９８９）、インターナショナル・オフ・イムノファーマコロジ− （Ｉ　ｎｔ、　Ｊ　、　Ｔ　ｍｍｕｎｏ−ｐｈａｒｍａｃ、　）、１１　：　８３９−８４６および欧州特許出願公開番号０３１０３２１Ａ２を参照）が挙げられる。

今、ＮＳサプレッサー細胞誘導化合物と非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物との併用が、ｉｎ　ｖｉｖｏでの免疫抑制活性を、いずれがの化合物が単独で達成するかまたは併用した場合に達成されると予想される範囲以上に増大させることが発見された。

発明の概要本発明は、ＮＳサプレッサー細胞誘導化合物およびサイクロスポリンＡのような非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物を含有する医薬組成物に関する。

本発明は、免疫抑制を必要とする、ヒトを含む哺乳動物にＮＳサプレッサー細胞誘導化合物および非−ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の有効量を投与することからなる、該哺乳動物において免疫抑制効果を誘導する方法にも関する。

発明の詳細な説明本明細書で使用される場合、「サイクロスポリンＡ」なる語は、式で示される環状ポリペプチドを意味する。サイクロスポリンＡは、真菌類種トリポクラジウム・インフレイタム・ガムズ（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ　１ｎｆｌａｔｕａ＋　Ｇａｍ５）による代謝産物として産生される。化学的には、サイクロスポリンＡは、［Ｒ−［Ｒ。

Ｒ−（Ｅ）ココ−サイクリック−（Ｌ−アラニル−Ｄ−アラニル−Ｎ−メチル− し−ロインル−Ｎ−メチルーＬ−ロイシル−Ｎ−メチル−し−バリル−３−ヒドロキシＮ、４−ジメチル−Ｌ−２−アミノ−６−オフテノイル−し一α−アミノーブチリルーＮ−メチルグリシル−Ｎ−メチル−し−ロイシン−Ｌ−バリル−Ｎ −メチル−Ｌ−ロイシルと称される。

サイクロスポリンＡは、商標名サンディミュン（Ｓ　ａｎｄｉｍｍｕｎ”）の下に経口投与形態または静脈内投与形態で商業的に入手可能であり、ニューシャーシー州０７９３６、イースト・ハノーバーのサンド・ファーマシューテイカルズ・コーポレーション（Ｓ　ａｎｄｏｚ　Ｐ　ｈａｒｍａｅｅｕｔｉｃａｌｓ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に関するスイス国ノく−ゼルのサンド・リミテッド（Ｓａｎｄｏｚ　Ｌｔｄ、）によって製造される。サンデイミュンの全合成はウェンガー（Ｗｅｎｇｅｒ）、トランスプランテーション・プロシーディンゲス（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｃ、）、１５（４）、５ｕｐｐ１．１．２２３０（１９８３）によって報告された。

本明細書で使用される場合、ｒＦＫ−５０６Ｊなる語は、式：イセス・ツクベンシス（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｔｓｕｋｕｂａｅｎｓｉｓ）第９９９３号から単離され、欧州特許出願第１８４．１６２号（１９８９フジサワ（Ｆ　ｕｊｉｓａｖａ）に）においてクレームされている。化学的には、ＦＫ−５０６は、［３Ｓ−［３Ｒ”［Ｅ（ＩＳ”、３Ｓ工。

４Ｓ”）］、４Ｓ”、５Ｒ”、８Ｓ”、９Ｅ、１２Ｒ”、１４Ｒ１，１５Ｓ”、１６Ｒ”、１８Ｓ”。

１９Ｓ”、　２６ａＲｒ］］−５，６，８，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，２４，２５，２６，２６ａ−へキサデカヒドロ−５，１９−ジヒドロキシ−３−［２−（４−ヒドロキシ−３−メトキンノクロヘキシル）−１−メチルエチニル］−１４，１６−ジメトキンー４．１０−１２．１８− テトラメチル−８−（２−プロペニル）−１５，１９−エポキシ−３Ｈ−ピリド［２，１−ｃｌ［１，４］オキサアザシクロトリコノン−１，７，２０，２１（４Ｈ１２３Ｈ）−テトロンと称される。

本明細書で使用される場合、「スペルグアリンＪ　（ＳＰＥＲＧＵＡＬＩＮ）なる語は、式％式％で示される化合物を意味する。スペルグアリンは、バシラス・ラテロスポラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　Ｌａｔｅｒｏｓｐｏｒｕｓ）から単離され、公知の免疫抑制剤である。（アメニヤ、エイチ（Ａｍｅｎｉｙａ、　Ｈ，）ら、（１９９０）、トランスプランテーション、４９：３３７　：　３４３を参照）。

本明細書で使用される場合、「ラバマイシンＪ　（ＲＡＰＡＭＹＣＩＮ）なる語は、で示されるマクロライド免疫抑制薬を意味する。ラバマイシンは、ストレプトマイセス・ヒゲロスコピカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　Ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）の発酵産生物であり、１９７５に最初に報告された（Ｊ、Ａｎｔｉｂｉｏｔ、　２８　＋　７２７（１９７５））。

本明細書で使用される場合、ｒＲ３−６１４４３Ｊなる語は、マイコフェノール酸のプロドラッグを意味する。Ｒ３−６１４４３は、シンテックス（Ｓ　ｙｎｔｅｘ）による研究の下の公知の免疫抑制薬である。

本明細書で使用される場合、「非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物」なる語は、天然または非特異的サプレッサー細胞の個体群のｉｎ　ｖｉｖｏ生産を誘導しないいずれの免疫抑制薬をも意味する。

本発明の組成物および方法用の好ましい非−ＮＳサプレッサー細胞誘導化合物としては、ＦＫ−５０６、スペルグアリン、ラバマイシン、Ｒ８−６１４４３およびサイクロスポリンＡが挙げられる。

本明細書で使用される場合、ｒＮＳサプレッサー細胞誘導化合物」は、天然サプレッサー細胞の個体群のｉｎ　ｖｉｖｏ生産を誘導するいずれの化合物をも意味する。

このような天然サブレソザー細胞は、成熟Ｔ細胞、Ｂ細胞、マクロファージまたは天然キラー細胞の特徴を持たず、したがって、ヌルまたは非特異的表現型のものである。天然サプレッサー細胞は、ｉｎ　ｖｉｖｏで種々の免疫応答を抑制することができる。

本発明の組成物および方法用の好ましいＮＳサプレッサー細胞誘導化合物としては、バッンヤ−（Ｂ　ａｄｇｅｒ）ら、イムノファーマコロジー（Ｉ　ｍｍｕｎｏｐｈａｒｍ、　）、１０：２０１（１９８５）およびジマルチーノ（ＤｉＭａｒｔｉｎｏ）ら、ジャーナル・オブ・ファーマコロンー・アンド・イクスペリメンタル・セラビューティクス（ＪＰ　ｈａｒｍ、　Ｅ　ｘｐ、　Ｔ　ｈｅｒ、　）、２３６　：　１０３（１９８６）によって報告されたＮ−アミノアルキルアザスピロゲルマニウムアルカン類が挙げられ、Ｎ−（３−）メチルアミノプロピル）−２−アザ−８，８−ジメチル−８−ゲルマンスピロ［４，５］デカン。

Ｎ−（３−ツメチルアミノプロピル）−２−アザ−８，８−ジエチル−８−ケルマンスピロ［４，５］デカン。

Ｎ−（３−’；ツメチルアミノプロピル−２−アザ−８，８−ジプロピル−８− ゲルマンスピロ［４，５］デカン、およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル） −２−アザ−８，８−ジブチル−８−ケルマンスピロ［４，５］デカンが挙げられる。

本発明の組成物および方法用の別の好ましいＮＳサプレッサー細胞誘導化合物としては、全記載が本明細書に引用記載される１９８８年９月１３日に出願されたＵ、Ｓ特許出願番号第０７／２４４．２２９号に記載されているＮ−アミノアルギルアザスピロアルカン類、例えば、式［式中、ｎは３−７；ｍは１または２；Ｒ１およびＲ２は同一または異なって、水素または直鎖状、分枝鎖状もしくは環状アルキルから選択され、ただし、−緒になった場合にＲ１およびＲ２によって含有される合計炭素原子数は４−１０＋あるいはＲ，およびＲ２は一緒に結合して３−７個の炭素原子を含有する環状アルキル基を形成し：Ｒ３およびＲ４は同一または異なって、水素または１−３個の炭素原子を含有する直鎖状アルキルから選択されるか、あるいはＲ３およびＲ４は一緒に結合して４−７個の炭素原子を含有する環状基を形成する：ただし、Ｒ１およびＲ２がＣＨ３ＣＨ２であり、Ｒ３およびＲ４がＣＨ，である場合、ｍは１または２であり、ｎは３以外であり：また、Ｒ，がＨであり：Ｒ２が（ＣＨ３）５Ｃであり：Ｒ３およびＲ４がＣＨ３である場合、ｍは１または２であり、ｎは３以外であり、また、Ｒ２がＨであり：Ｒ１が（ＣＨｓ）ｓＣであり、Ｒ３およびＲ４がＣＨ，である場合、ｍは２であり、ｎは３以外であるコで示される化合物またはその医薬的に許容される塩、水和物または溶媒化合物が挙げられる。

特に好ましくは、下記Ｎ−アミノアルキルアザスピロアルカン誘導体である。

またはその塩。

最も好ましいＮＳサプレッサー細胞誘導化合物は、Ｎ、Ｎ−ジメチル−８，８− ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］−デカン−２−プロパンアミンである（以下、化合物Ａと記す）。

当業者は、全記載を本明細書に引用記載するバラジャ−（Ｂ　ａｄｇｅｒ）ら、イムノファーｖ＝＋ｏジー（Ｉ　ｍｍｕｎｏｐｈａｒｍ）、１６．３３−４３（１９８８）に記載されたアッセイを利用することによって、本明細書に詳しく挙げた化合物以外の化合物が非特異的サプレッサー細胞活性を誘導するかを容易に決定することができる。かくして、このような化合物全ては、本明細書で使用する場合の「非特異的サプレッサー細胞誘導化合物」なる語の範囲内に含まれる。

本明細書で使用される場合、ｒＮＳサプレッサー細胞誘導化合物および非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の有効量を投与する」なる語は、同時投与またはいずれかの逐次的投与法を意味する、すなわち、非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物または非特異的サプレッサー細胞誘導化合物のいずれかを最初に投与する。好ましくは、投与が同時でない場合、２つの化合物をお互いに非常に接近した時間で投与する。さらにまた、化合物を共に同一投与形態で投与するかは問題ではなく、例えば、非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物を注射によって投与し、非特異的サプレッサー細胞誘導化合物を経口投与してもよい。

本発明の医薬組成物の治療効力は、クビエクーヴエグリンスキー、ジエイ・ダブリュ（Ｋｕｐｉｅｃ−Ｗｅｇｌｉｎｓｋｉ、　Ｊ　、　Ｗ、　）ら、（１９８８）、トランスプランテーション・プロシーディンゲス（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｃ、　）、２０　：　２０７−２１６（以下、「クビエクーヴエグリンスキー」と記す）の方法に従って試験して、急性移植／移植片拒絶反応モジュレータ−としてのそのｉｎ　ｖｉｖｏ効力を決定した。

すなわち、これらの実験を行うために、以下のプロトコルを使用した。雄性同系繁殖成熟ラット（ルイス−ブラウン・ノルウェイ（Ｌｅｗｉｓ−Ｂｒｏｗｎ　Ｎｏｒｗａｙ）Ｆ１ハイブリッド・ラット、インディアナ州インディアナポリスのバーラン・スプラーギュー　ドーレイ・インコーホレイテッド（Ｈａｒｌａｎ　ｓｐｒａｇｕｅ−ＤａｖｌｅｙＩ　ｎｃ、　）から入手した）を使用した。ルイス−ブラウン・ノルウェイＦ１ハイブリッド心臓同種異系移植片をルイス・レシピエンドの腹部の大きい血管に移植した。該動物に、以下の５種類のレジメンに従って化合物を投与した。

プロトコルエ　予備治療プロトコル−移植前に連続７日間（−７〜−１日用）、化合物Ａ２０ｕ／＆９／日を投与した。

プロトコル■　治療プロトコル−移植後連続７日間（Ｏ〜６日目日用次いで、断続的に５日連続９〜１３および１６〜２０日目）、日用物Ａ２０冨９／に９／日を投与した。

プロトコル■　予備治療および治療プロトコル−移植前に連続７日間（−７〜− １日用）、次いで、断続的に５日連続（９〜１３および１６〜２０日目）、日用物Ａ２０１９／ｋｑ１日を投与した。

プロトコル■　併用プロトコル−移植後連続７日間（０〜６日目日用化合物Ａ２０菖９／２１９／日を経口投与し、サイクロスポリンＡ　１．５冨９／に９／日を注射によって投与した。

プロトコル■　未治療。

毎日、レシピエンドの腹側部を介して触診法によって心室収縮を評価した。拒絶反応は、心筋収縮の停止の日として定義され、組織学的に確認された。

単一化合物で治療されたラットでは（すなわち、予備治療プロトコル、治療プロトコルまたは予備治療および治療プロトコル）、移植片生存時間は、未治療モデルにおける平均７日から化合物Ａを使用する平均１６日に増加した。１．５１／Ａ１ｇ／日の投与量のサイクロスポリンＡは、このモデルで単独で使用すると、移植片生存時間を、未治療モデルにおける平均７日から平均１２日に増加させた。

別法として、併用プロトコルで治療したラットでは、移植片は、４０日以上の間、規則的に維持された。移植片生存時間を併用プロトコルの移植片生存時間と同じに増加させるために、サイクロスポリンＡだけ使用は、併用プロトコルで使用した投与量よりも１桁大きい投与量、すなわち１５　ｖｉ／ｂｙ／日を必要とする（クビエクーヴエグリンスキーを参照）。かくして、本発明の医薬組成物の投与は、相乗作用的であった、すなわち、いずれかの化合物によって得ることができるよりも有意に長く移植片生存時間を延長した。サイクロスポリンＡの有効投与量は１桁減少した。サイクロスポリンＡは非常に腎細胞毒性であることが知られており、腎細胞毒性のレベルは投与量の増加に伴って増大するので、所望の免疫抑制効果を得るのに必要とされるサイクロスポリンＡの投与量の減少は非常に望ましい。

かくして、本発明の組成物および方法が相乗作用的であるという発見は、慣用治療法の効力を有するが、毒性問題がより低い、免疫抑制を必要とする疾患の治療を可能にするであろう。上記実験の結果を下記第１表にまとめる。

第１表ルイス−ブラウン・ノルウェイＦ１ハイブリッド心臓同種異系移植片を有するルイス・ラット・レシピエンドについての化合物Ａによる種々の治療プロトコルの効果Ｎは試験したラットの数である。

Ｘ　移植後７日間だけ治療した宿主における移植片生存。

上記第１表のデータは、明らかに、サイクロスポリンＡと非特異的サプレッサー細胞誘導化合物の併用の、成熟雄性ラットの心臓同種異系移植片の拒絶反応への相乗作用効果を示す。

本発明の医薬組成物は、カプセル、錠剤、または注射用調製物のような便利な投与形態に一体化される。固形または液状医薬担体が使用される。固形担体としては、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム・二水和物、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸が挙げられる。液状担体としては、シロップ、落花生油、オリーブ油、生理食塩水、および水が挙げられる。同様に、担体または希釈剤は、単独またはワックスと一緒に、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルのようないずれの持続放出型物質を含み得る。固形担体の量は、広範囲に変化するが、好ましくは、投与単位当たり約２５哩〜約１ｇであろう。液状担体を使用する場合、調製物は、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、ゼラチン軟カプセル、アンプルのような無菌注射用液剤、または水性もしくは非水性液状懸濁剤の形態であろう。

医薬調製物は、混合し、顆粒化し、錠剤形態に関して必要な場合に打錠して；または適当な場合に成分を混合し、充填し、溶解して、所望の経口または非経口製造物を得ることを含む薬化学者の慣用技術に従って調製される。

本発明の医薬組成物の各活性成分の薬物力学的特性は、慣用の投薬レジメンを案出する際に熟考されなければならない。両成分は、いくつかの投薬が薬物の遅延または持続放出について試験される時間放出投与単位形態に一体化され得る。

このような投与単位は、各々、活性成分の有用性がルピド（ｌｕｐｉｄ）または高分子物質で被覆することによって制御される持続放出型顆粒、糖中心球（ｓｕｇａｒｃｅｎｔｅｒｅｄ　５ｐｈｅｒｅ）または多層錠剤からなり得る。

本発明の医薬組成物および方法は、哺乳動物において免疫抑制をもたらすのに有用である。かくして、それらは、免疫抑制応答を誘導することが望まれる疾患および状態を治療する際に治療学的および／または予防学的利用性を有する。このような疾患および状態としては、限定されないが、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、急性移植／移植片拒絶反応、重症筋無力症、進行性全身性硬化症、多発性骨髄腫、アトピー性皮膚炎、過剰免疫グロブリンＥ１Ｂ型肝炎抗原陰性慢性活動性肝炎、積木甲状腺炎、家族性地中海熱、グレーヴズ病、自己免疫溶血性貧血、原発性胆汁性肝硬変、インスリン依存性糖尿病および炎症性腸疾患が挙げられる。

本発明は、免疫抑制を必要とする、ヒトを含む哺乳動物に非特異的サプレッサー細胞誘導化合物および非−ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物を投与することからなる、該哺乳動物において免疫抑制効果を誘導する方法にも関する。

予防学的および治療学的誘導は共に熟考される。当業者は、いずれかの個々の状況で利用されるべき正確な投与量および治療レジメンが、必ず、治療されるべき正確な疾患状態、治療される個々の動物の年齢、体重、性別および健康に左右されるであろうし、このような最適条件は慣用技術によって決定され得ることを認識するでろあう。

その相乗作用効果を最大にするために、本発明の併用の個々の化合物は、単一の医薬組成物として、または個別の医薬組成物で逐次的に投与され得る。慣用技術を使用する当業者は、患者の年齢、性別、体重および健康ならびに治療されるべき疾患状態のような因子によって、２つの化合物を投与するために最も適している方法（逐次か同時か）を決定することができる。また、治療の間の適当な投与計画は当業者に明らかであろう。

本発明の方法で使用されるべきＮＳサプレッサー細胞誘導化合物は、１日につき体重１ｋｇ当たり領０１〜１０００ｍｑ、好ましくは０．０１〜１００ｍｑ／ｈｅの範囲から選択される。本発明の方法で使用されるべき非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物は、１日につき体重１７１ｇ当たり０．０１ｍｇ〜２０叩、好ましくは０、０１ａ９／＆ｇ〜２．０冨９／＆９の範囲から選択される。

選択された投与量は、免疫抑制の必要な哺乳動物に毎日１〜６回投与され、局所的、経口的、直腸的に、注射によって、または輸液によって連続して投与される。最も適している投与経路は、慣用技術を使用して当業者によって容易に決定される。ヒト投与に関する経口投与単位は、各活性化合物０．０１〜５００籾を含有するのが好ましい。より低い投与量を使用する経口投与が好ましい。しがし、患者に対して安全かつ便利である場合は、より高い投与量の非経口投与も使用され得る。

以下の実施例は、本発明の医薬組成物の調製を説明する。該実施例は、前記で定義した、および以下の請求の範囲に記載した本発明の範囲を限定するものではない。

実施例１−ゼラチン硬カプセル本発明の化合物および組成物を投与するための経口投与形態は、下記第２表に示す割合で成分を、スクリーニングし、混合し、ゼラチン硬カプセルに充填することによって製造される。

Ｎ、Ｎ−ジメチル−８，８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２ −プロパンアミン　１０哩サイクロスポリンＡ　１００即ステアリン酸マグネシウム　２■ ラクトース　３０ＩＩｇ下記第３表に示す微結晶性セルロース、ラクトースおよび本発明の化合物を、１０％ゼラチン溶液と一緒に所定の割合でスクリーンし、混合し、顆粒化する。

湿顆粒をスクリーンし、乾燥させ、デンプン、タルクおよびステアリン酸と混合し、スクリーンし、錠剤に打錠する。

Ｎ、Ｎ−ジメチル−８，８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２ −プロパンアミン　１０履９サイクロスポリンＡ　１００籾微結晶性セルロース　３０．９ラクトース　３０菖９デンプン　１０■９ステアリン酸　４１９実施例３−注射用調製物サイクロスポリンＡおよびＮ、Ｎ−ジメチル−８，８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２−プロパンアミンを、下記油ベース系に可溶化または分散させて注射用製剤を調製する。

成　分　使用量Ｎ、Ｎ−ジメチルー８，８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２ −プロパンアミン　１０１９サイクロスポリンＡ　１００ｕポレオキシエチル化ヒマシ油または落花生油　１３翼９アルコール　３３％ｖ／ｖ注射用無菌水　ｌｍＡｌ実施例４以下の成分（塩基重量で示す）をラクトース３０ｗ５ｑ、ステアリン酸マグネシウム２即およびデンプン１０■と一緒に混合し、次いで、ゼラチン硬カプセルに充填する。これらのカプセルを、免疫抑制活性の必要な患者に毎日１〜６回投与する。

Ａ、Ｎ、Ｎ−ジメチル−８，８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５コデカン −２−ブロバンアミニノ１０ｍ＋９；サイクロスポリンＡ１００ｓ＋ｇＢ、Ｎ、Ｎ−ジメチル−８，８−ジエチル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２−プロパンアミン１０１９：サイクロスボリンＡ１００１９Ｃ，Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−２−アザ−８−ジエチル−８−ゲルマンスピロ［４，５］デカン１０叩：サイクロスホリンＡ１００ｍｖ実施例５−ゼラチン軟カプセルポリエチレングリコール、植物油に本発明化合物を分散させ、ゼラチン軟カプセルに充填することによって、本発明の化合物および組成物を投与するための経口投与形態を製造する。

或−分　便里員Ｎ、Ｎ−ジメチルー８．８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２ −プロパンアミン　１０■サイクロスポリンＡ　１００籾ポリエチレングリコール　５０即植物油　５０冨９実施例６−微粒子系下記微結晶性セルロース、デンプンおよび本発明化合物を、１０％ゼラチン溶液と一緒に所定の割合でスクリーンし、混合し、球形化（ｓｐｈｅｒｏｎｉｚｅ）する。混粒子をスクリーンし、乾燥させ、サイズ化する。得られた乾燥粒子は、フィルム被覆され、ゼラチン硬カプセルに充填されるか、ステアリン酸マグネシウムの添加によって錠剤に打錠され得る。

戊−分　使用量Ｎ、Ｎ−ジメチルー８，８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２ −プロパンアミン　１０肩９サイクロスポリンＡ　１０（ｂ９微結晶性セルロース　５０．。

デンプン　１０ｍ９ステアリン酸マグネシウム　２１１９実施例７−経口液剤プロピレングリコールに本発明化合物を溶解し、下記の所定の割合で残りの成分と混合することによって、本発明の化合物および組成物を投与するための経口液剤投与形態を製造する。

成　分　使用量Ｎ、Ｎ−ジメチルー８．８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２ −プロパンアミン　１０１９サイクロスポリンＡ　１００冨９精製水　４ｏ、。

実施例８−経口乳剤植物油に本発明化合物を溶解することによって、本発明化合物および組成物を投与するための経口乳剤投与形態を製造する。ポリオキシエチレンソルビタンエステルおよびソルビトール溶液を水に溶解し、該油状混合物を水混合物に分散させて水中油エマルジョンを形成させる。

炙」　勲遣Ｎ、Ｎ−ジメチルー８，８−ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２ −プロパンアミン　ＩＱｍｇポリオキシエチレンソルビタンエステルソルビトール溶液　１０町精製水　１００冨９本発明の好ましい具体例は以上によって説明されるが、本発明は本明細書に記載された明確な指示に限定されず、以下の請求の範囲の範囲内となる全ての変更に関する権利が保有されると理解されるべきである。

国際調査報告フロントページの続き（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、　ＥＳ、　ＦＲ，ＧＢ、　ＧＲ，ＩＴ、　ＬＵ、　ＮＬ、　ＳＥ）、　ＡＵ、　ＣＡ、ＪＰ、　ＫＲ

Claims

【特許請求の範囲】

１．非特異的（ＮＳ）サプレッサー細胞誘導化合物および非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物ならびに医薬的に許容される担体または希釈剤からなる医薬組成物。
２．ＮＳサプレッサー細胞誘導化合物がＮ−アミノアルキルアザスピロアルカン誘導体であり、非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物がＦＫ−５０６、スペルグアリン、ラパマイシン、ＲＳ−６１４４３またはサイクロスポリンＡである請求項１記載の組成物。
３．ＮＳサプレッサー細胞誘導化合物がＮ−アミノアルキルアザスピロゲルマニウムアルカン誘導体であり、非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物がＦＫ −５０６、スペルグアリン、ラパマイシン、ＲＳ−６１４４３またはサイクロスポリンＡである請求項１記載の組成物。
４．Ｎ−アミノアルキルアザスピロアルカン誘導体の量が０．０１〜２０００ｍｇから選択され、非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の量が０．１〜４０００ｍｇから選択される請求項２記載の組成物。
５．Ｎ−アミノアルキルアザスピロアルカン誘導体の量が０．１〜１０００ｍｇから選択され、非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の量が０．１〜１０００ｍｇから選択される請求項２記載の組成物。
６．Ｎ−アミノアルキルアザスピロアルカン誘導体の量が１〜２００ｍｇから選択され、非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の量が０．１〜２００ｍｇから選択される請求項２記載の組成物。
７．Ｎ−アミノアルキルアザスピロアルカン誘導体がＮ，Ｎ−ジメチル−８，８ −ジプロピル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２−プロパンアミンまたはその塩である請求項２記載の組成物。
８．Ｎ−アミノアルキルアザスピロアルカン誘導体が▲数式、化学式、表等があります▼； ▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼ ；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲ 数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼；▲数式、化学式、表等があります▼もしくは▲数式、化学式、表等があります▼ またはその塩である請求項２記載の組成物。
９．Ｎ−アミノアルキルアザスピロアルカン誘導体がＮ，Ｎ−ジメチル−８，８ −ジエチル−２−アザスピロ［４，５］デカン−２−プロパンアミンまたはその塩である請求項２記載の組成物。
１０．非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物がサイクロスポリンＡである請求項２記載の組成物。
１１．Ｎ−アミノアルキルアザスピロゲルマニウムアルカン誘導体がＮ−（３− ジメチルアミノプロピル）−２−アザ−８，８−ジエチル−８−ゲルマンスピロ［４，５］デカンまたはその塩である請求項３記載の組成物。
１２．非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物がサイクロスポリンＡである請求項３記載の組成物。
１３．経口投与形態である請求項２記載の組成物。
１４．非経口投与形態である請求項２記載の組成物。
１５．免疫抑制を必要とする、ヒトを含む哺乳動物にＮＳサプレッサー細胞誘導化合物および非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の有効量を投与することからなる該哺乳動物における免疫抑制誘導方法。
１６．免疫抑制が急性移植／移植片拒絶反応に罹患している動物において誘導される請求項１５記載の方法。
１７．免疫抑制が慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、進行性全身性硬化症、多発性骨髄腫、アトピー性皮膚炎、過剰免疫グロブリンＥ、Ｂ型肝炎抗原陰性慢性活動性肝炎、橋本甲状腺炎、家族性地中海熱、グレーウス病、自己免疫溶血性貧血、原発性胆汁性肝硬変、インスリン依存性糖尿病または炎症性腸疾患に罹患している動物において誘導される請求項１５記載の方法。
１８．ＮＳサプレッサー細胞誘導化合物および非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物が同時に投与される請求項１５記載の方法。
１９．ＮＳサプレッサー細胞誘導化合物および非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物が逐次的に投与される請求項１５記載の方法。
２０．実質的に実施例に引用記載された請求項１記載の医薬組成物。
２１．非特異的（ＮＳ）サプレッサー細胞誘導化合物、非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物および医薬的に許容される担体または希釈剤の配合物を混合することからなる請求項１記載の医薬組成物の製造方法。
２２．活性治療物用の請求項１記載の医薬組成物。
２３．免疫抑制誘導用の請求項１記載の医薬組成物。
２４．免疫抑制誘導用薬物の製造における医薬組成物の使用。
２５．非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の同時投与を伴う、免疫抑制誘導用薬物の製造における非特異的（ＮＳ）サプレッサー細胞誘導化合物の使用。
２６．非特異的（ＮＳ）サプレッサー細胞誘導化合物の逐次投与を伴う、免疫抑制誘導用薬物の製造における非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の使用。
２７．非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の逐次投与を伴う、免疫抑制誘導用薬物の製造における非特異的（ＮＳ）サプレッサー細胞誘導化合物の使用。
２８．非特異的（ＮＳ）サプレッサー細胞誘導化合物の同時投与を伴う、免疫抑制誘導用薬物の製造における非ＮＳサプレッサー細胞誘導免疫抑制化合物の使用。