JPH06339386A - ジオールおよびフランの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】本発明の目的は芳香性化学製品であるドデカハ
イドロ−３ａ，６，６，９ａ−テトラメチルナフト
〔２，１−ｂ〕フランを営利効果のある方法によって製
造することを目的とする。 【作用】寄託番号ＡＴＣＣ２０６２４の微生物ハイホジ
ーマ・ロセオニガー（Hyphozyma roseoniger）を利用し
てラブダン化合物を微生物学的方法を経由してドデカハ
イドロ−３ａ，６，６，９ａ−テトラメチルナフト
〔２，１−ｂ〕フランへ変換する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【従来の技術】ドデカハイドロ−３ａ，６，６，９ａ−
テトラメチルナフト〔２，１−ｂ〕フラン(1) は重要な
芳香性化学製品である（米国特許第3,029,255 号参
照）。それは例えば化粧品、家庭用品のような高級香料
組成物や官能性製品において持続的な龍涎香効果が望ま
れる場合に用いられて来た。化合物(1) はまた龍涎香チ
ンキの成分であり（ビー．デー．ムークハージーとアー
ル．アール．パーテル，第７回精油国際会議，日本，京
都，論文番号１３６参照）、そして化合物(1) は人工龍
涎香処方において用いられて来た。化合物(1) はサルビ
アセージ（サルビア・スクラレア(Salvia Sclarea)）か
ら得られるスクラレオールとして一般に言われている２
−エテニルデカハイドロ−２−ハイドロキシ−α−２，
５，５，８ａ−ペンタメチル−１−ナフタレンプロパノ
ール(4) から製造されるであろう。米国特許第3,050,53
2 号は二段階酸化過程を用いて化合物(4) をドデカハイ
ドロ−３ａ，６，６，９ａ−テトラメチルナフト〔２，
１−ｂ〕フラン−２（１Ｈ）−オン(2) に変換する方法
を開示している。第１段階ではスクラレオールの水性分
散物がアルカリ条件下において過マンガン酸アルカリ金
属塩酸化試薬と密接に接触せられて該スクラレオールが
部分的に酸化せられる。第２段階において、第１段階で
得られた水性反応混合物は酸性にされそして酸性条件下
で過マンガン酸塩またはクロム酸酸化試薬と密接に接触
せられることにより酸化を完全に行なう。化合物(2) は
既知の方法によって化合物(1) に容易に変換されるであ
ろう。例えば水素化物試薬による化合物(2) の還元は環
化によって化合物(1) に容易に変換されるデカハイドロ
−２−ハイドロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチル
ナフタレンエタノール(3) を与える（例えばヘルベチ
カ．ヒミア．アクタ１９５０年，第３３巻, 第１３０８
頁参照）。米国特許第3,029,255 号は２００〜２２５℃
においてＡl₂Ｏ₃ で化合物(3) を脱水し、次いでβ−ナ
フタレンスルホン酸の存在で真空下に加熱することによ
り（１３０℃から１６０℃まで）化合物(1) に環化せし
める化合物(1) の製造方法を開示している。それに代え
て、キャンビー等によって開示されるように（オースト
ラリア，ジャーナル オブ ケミカル，１９７１年，第
２４巻，第５９１頁参照）、化合物(1) はピリジン中で
トルエン−パラ−スルホニルクロライドを用いて化合物
(3)を環化することによって得られるであろう。

【０００２】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら上記従来
の方法では目的とする化合物(1) を営利効果をともなっ
て製造することが困難であった。

【０００３】

【課題を解決するための手段】

〔概説〕本発明はＣＢＳ２１４．８３とＡＴＣＣ２０６
２４の識別特性を有する微生物ハイホジーマ・ロセオニ
ガー（Hyphozyma roseoniger）の生物学的純粋培養物に
関するものである。他の実施の態様においては、本発明
はＣＢＳ２１４．８３とＡＴＣＣ２０６２４の識別特性
を有する微生物ハイホジーマ・ロセオニガー（Hyphozym
a roseoniger）を含む培養物に関するものであり、該培
養物は下記の構造

【化１９】 を有するジオールを

【化２０】 ここにＲは

【化２１】 である。からなるグループからの化合物を水性栄養媒体
における好気的条件下において変化させることにより回
収可能な量で製造することが可能である。

【０００４】更に他の実施の態様においては、本発明は
ＣＢＳ２１４．８３とＡＴＣＣ２０６２４の識別特性を
有する微生物ハイホジーマ・ロセオニガー（Hyphozyma
roseoniger）を水性栄養培地中で好気的条件下で培養す
ることによって調整される混合物に関するものである。

【０００５】更に他の実施の態様においては、本発明は
ＣＢＳ２１４．８３とＡＴＣＣ２０６２４の識別特性を
有する微生物ハイホジーマ・ロセオニガー（Hyphozyma
roseoniger）を好気性条件下で

【化２２】 ここにＲは

【化２３】 である。からなるグループからの１種またはそれ以上の
化合物を含む水性栄養培地中で培養することからなる下
記の構造

【化２４】 を有するジオールを調整する方法に関するものである。

【０００６】更に他の実施の態様においては、本発明は
ＣＢＳ２１４．８３とＡＴＣＣ２０６２４の識別特性を
有する微生物ハイホジーマ・ロセオニガー（Hyphozyma
roseoniger）を好気性条件下において

【化２５】 ここにＲは

【化２６】 である。からなるグループからの１種またはそれ以上の
化合物を含む水性栄養培地中で培養して下記の構造

【化２７】 を有するジオールを生成すること、該ジオールを水性栄
養培地中で環化して該フラン化合物を生成すること、お
よび該フラン化合物を回収することからなる下記の構造

【化２８】 を有するフラン化合物を調整する方法に関するものであ
る。

【０００７】〔詳細な説明〕図１には本発明にかかる化
合物のいくつかのものの構造が示される。化合物(4) か
ら(14)は本発明にかかる化合物の変態方法において所望
の製造物を製造するための基質として用いられるであろ
う。化合物(6),(11)および(13)は本発明の方法において
スクラレオールの変態過程での中間物質として観察され
ている。該変態方法は化合物(4) から(14)の存在下にお
いて水性栄養培地中で微生物ハイホジーマ・ロセオニガ
ー（Hyphozyma roseoniger）、ＣＢＳ２１４．８３およ
びＡＴＣＣ２０６２４の培養を含むものである。これら
の化合物は単一でもしくは該化合物の任意の数を含む混
合物として用いられるであろう。微生物が用いられる形
態は限定的なものではない。それらは例えば細胞と相応
する栄養溶液とを含む培養物（懸濁液）としてあるいは
バッファー溶液中に懸濁されている細胞の形状で用いら
れることが出来る。該細胞もしくはその酵素抽出物は変
態を行なうために用いられるであろう適当な固形支持体
上に固定されるであろう。

【０００８】懸濁された培養混合物は微生物の存在する
適当な水性栄養培地の接種によって調製される。適当な
栄養培地は窒素源、無機塩、成長因子、所望の基質、お
よび所望なれば他の炭素源を含むものである。本発明の
方法に用いるに適したいくらかの炭素源は、例えばグル
コース、ガラクトース、Ｌ−ソルボース、マルトース、
蔗糖、セロビオース、トレハロース、Ｌ−アラビノー
ス、Ｌ−ラムノース、エタノール、グリセロール、Ｌ−
エリスリトール、Ｄ−マンニトール、ラクトース、メリ
ビオース、ラフィノース、メレチトース、澱粉、Ｄ−キ
シロース、Ｄ−ソルビトール、α−メチル−Ｄ−グルコ
シド、乳酸、クエン酸、およびコハク酸を含む。適当な
窒素源は例えばペプトン、肉抽出物、イースト抽出物、
コーン浸漬液、カゼイン、尿素、アミノ酸のような窒素
含有有機物質、または硝酸塩、亜硝酸塩、および無機ア
ンモニウム塩のような窒素含有無機化合物を含む。適当
な無機塩は例えばマグネシウム、カリウム、カルシウ
ム、またはナトリウムの燐酸塩を含む。上記培養基栄養
素は例えば所望なればＢグループのビタミン類の１種も
しくはそれ以上、および（または）Ｆｅ，Ｍｏ，Ｃｕ，
Ｍｎ、およびＢのような痕跡ミネラルの１種もしくはそ
れ以上によって補強されるであろう。クロロアンフイニ
カルまたはクロロテトラサイクリンのような抗生物質の
添加はバクテリア汚染が問題である時には望ましいもの
である。

【０００９】微生物の培養は好気性条件下において固定
培養もしくは水中培養（例えば振盪培養、動揺培養）と
して行われる。約２．５から約９．０のｐＨ範囲、望ま
しくは約３．０から約７．５の範囲、更に望ましくは約
３．０から約６．５の範囲において培養は好適に行われ
るであろう。該ｐＨは例えば塩酸、酢酸、修酸のような
無機もしくは有機酸の添加、または例えば苛性ソーダ、
水酸化アンモニウムのような塩基の添加、または例えば
燐酸塩、フタラートのようなバッファーの添加によって
調節されるであろう。孵置温度は約１２℃から約３３℃
の間、更に望ましくは約１５℃から約３０℃の間、最も
望ましくは約１８℃から約２８℃の間に維持されるのが
適当であろう。

【００１０】本発明による方法は単一の炭素源として培
養の初めに栄養培地に化合物(4) から(14)までの一種ま
たはそれ以上を添加することによって都合良く行われる
であろう。それに代わって、基質は例えばデキストロー
ズのような他の炭素源と組み合わせて培養の間もしくは
炭素源がなくなってしまった時のいづれかに添加される
であろう。培地中の基質の濃度に関する唯一の限定は効
果的に曝気することが出来ることである。しかしながら
基質濃度は望ましくは約０．１ｇ／ｌから約１００ｇ／
ｌの間の範囲、更に望ましくは約０．５ｇ／ｌから約５
０ｇ／ｌの間の範囲、最も望ましくは約１．５ｇ／ｌか
ら約３０ｇ／ｌの範囲である。変態は上記のいかなる濃
度下においても好適に行われる。全変態時間（最初の培
養期の後）は栄養培地の組成と基質濃度とに大幅に依存
するであろう。一般に振盪フラスコ培養は約１２時間か
ら約２４時間を要する。しかしながら、動揺器が用いら
れた場合には培養時間は約４８時間かそれ以下に減小せ
しめられるであろう。変態は培養溶液から単離された微
生物の細胞を用いるか周知の方法で該細胞から単離され
た酵素によって行われるであろう。この場合、変態は例
えばバッファー溶液、生理学的食塩溶液、新鮮な栄養溶
液、または水のような種々の水性栄養培地中で好都合に
行われることが出来る。単離された細胞または酵素抽出
物は固形支持体に固定されそして所望の変態が行われ
る。また基質の変態はこの生物の変種によってももたら
せられるであろう。このような変種は例えば細胞をＵＶ
またはＸ線に曝露することのような周知の方法、または
例えばアクリジンオレンジのような公知の突然変異を起
こす物質によって容易に得ることが出来る。

【００１１】基質は粉末、またはツイーン８０（ポリオ
キシエチレンソルビタンモノステアレート）のような乳
化剤中でのスラリーとして、または乳化剤中での溶液と
して、または例えばアセトン、メタノール、エタノー
ル、エチレングリコール、あるいはジオキサンのような
親水性溶媒中の溶液として培地に添加され得る。界面活
性剤または分散剤はまた基質の水性懸濁液に添加される
ことが出来、あるいは基質は超音波を用いて乳化せられ
ることも出来る。例えばシリコンオイル（例えばＵＣＯ
Ｎ）、ポリアルキレングリコール誘導体、トウモロコシ
油、または大豆油のような一般的な消泡剤は泡の調整に
用いられ得る。基質の変態は例えばＧＬＣ，ＴＬＣ，Ｈ
ＰＬＣ，ＩＲ，そしてＮＭＲのような標準分析手法を用
いて監視されることが出来る。もし基質の急速な消失が
観測されたならば微生物の変態能力を最大にするために
更に基質が添加され得る。該過程は通常基質の殆どが培
地から消失した時に終了する。化合物(3) は水性栄養培
地から回収されるかまたは水性栄養培地中か回収後かい
ずれかにおいてフラン化合物(2) に環化されるであろ
う。動揺肉汁から化合物(1) または(3) を単離し精製す
ることは濾過または遠心分離、溶媒抽出、蒸溜、結晶化
等の通常の手法によって達成されるであろう。化合物
(3) は周知の一般的環化方法によってフラン化合物(1)
に変換されるであろう。例えば、キャンビー等によって
記載されている方法（オーストラリア ジャーナル オ
ブ ケミカル，１９７１年，第２４巻，第５９１頁参
照）によるピリジン中０℃でジオール(3) とトルエン−
ｐ−スルホニルクロライドとの反応はここに参照として
取り入れられる。この方法は変態混合物または回収され
たジオール化合物(3) のいづれかにおいて任意に用いら
れるであろう。他の環化方法の例は「有機合成化学」ジ
ョン ウィリー，１９６５年，第８３８〜８３９頁にお
いてアール．ビー．ワグナーとエッチ．デー．ツックに
よって記載されており、それらはここに参照によって取
り入れられる。

【００１２】本発明において用いられる微生物はセント
ラルニュージャージィ，米国から得られた土壌サンプル
から単離された。この種族は加入番号ＣＢＳ２１４．８
３およびＡＴＣＣ２０６２４としてセントラルビューロ
ー ブア シンメルカルチャーとアメリカン タイプ
カルチャー コレクションに寄託されている。該生物は
セントラルビューロー ブア シンメルカルチャーによ
って研究され特徴づけられた。その集団のピンク色と形
態学上そして物理化学的に特有な性質を有するために、
ＣＢＳは本発明の微生物をハイホジーマ・ロセオニガー
（Hyphozyma roseoniger）と命名した。この生物は明瞭
なイースト形状と糸状形状とを有する。両方の形状とも
同様な生物学的性質を示しそしてここに記載される変態
を行なう。該微生物のイースト相の性質は下記に記述さ
れる。

【００１３】１ 形と寸法 ＹＭアガー上の成長物： ピンク，光輝を有し滑らかな
集団。現在の糸状成長細胞は発芽しかけておりおよそ２
×７μｍまたは時にはそれより大きい円形または円筒
状。 麦芽抽出アガー上の成長物： ２ないし３週間後真菌糸
の形成をともないからまりあった固まりのない光輝ある
ピンク、時々茶色がかかる。 コーンミールアガー上の成長物： 明るいオレンジ−ピ
ンク，光輝を有する、菌糸体で縁取られた滑らかな集
団。 ポテトデキストロースアガーとディフコ麦芽アガー上の
成長物： 室温で２〜３週間後ピンク、滑らかな光輝あ
るそして時々黒色に変化する。 ＹＰＣＡアガー上の成長物： １０日以内で８ｍｍ径に
達し、平坦なぬるぬるした淡いオレンジ色（６Ａ３；コ
ーネラップス ワンシャー，１９７８年）、シャープな
いくらか分裂した縁を有する。 ＣｈＡアガー上の成長物： １０日以内に４ｍｍ径にな
る。３週間後中央部が明るい茶色（６Ｄ６）から濃い茶
色までのオリーブ色になり、最後に粘液集団から延び、
濃いオリーブブラウン（４Ｆ４）集団，局部的に薄いく
すんだ白色の中央斑点を有する、もっと先へ行って淡い
菌糸体の密集した束になる。該生物はポテトおよび米ス
ライド上で観察される吻合を有する真菌糸を生産する。
そのライフサイクルにおいて明瞭なイースト相を有する
ヒホミセット菌であると思われる。 ２ 糖での発酵（表１参照）

【表１】発酵 化合物 気体 酸 グルコース − − ガラクトース − − マルトース − − 蔗糖 − − ラクトース − − ラフィノース − − メリビオース − − イヌリン − − ３ 炭素化合物の消化吸収（表２参照）

【表２】 炭素化合物の消化吸収 グルコース ＋ ラクトース Ｖ ガラクトース ＋ メリビオース ＋ Ｌ−ソルボース ＋ ラフィノース ＋ マルトース ＋ メレジトース ＋ 蔗糖 ＋ イヌリン − セロビオース ＋ 可溶澱粉 ＋ トレハロース ＋ Ｄ−キシロース ＋ Ｌ−アラビノース ＋ Ｄ−ソルビトール ＋ Ｄ−アラビノース − α−メチル−Ｄ−グルコシド ＋ Ｄ−リボース ＋ サリシン − Ｌ−ラムノース ＋ イノシトール − Ｄ−グルコサミン − 乳酸 ＋ エタノール ＋ クエン酸 ＋ グリセロール ＋ コハク酸 ＋ Ｌ−エリスリトール ＋ グルコノ−γ−ラクトン ＋ アドニトール − ダシトール − Ｄ−マンニトール ＋ ４ 分裂アルブチン： 正 ５ ＮＨ₄ ＮＯ₃ の消化吸収： 正 ６ ＫＮＯ₃ の消化吸収： 正 ７ ＫＮＯ₂ の消化吸収： 正 ８ エチルアミン上の成長物： 正 ９ ビタミン^- フリー培地上の成長物： 正 １０ １２℃における成長物： 正 １１ ２６℃における成長物： 正 １２ ３０℃における成長物： 正 １３ ３７℃における成長物： 負 １４ ４５℃における成長物： 負 該生物の糸状形状の性質は下記の例外を除いてはイース
ト相と同一である。 ＹＭアガー上の成長物： ピンクの粗な集団真菌糸を有
する糸状成長を示す。 麦芽アガーまたはポテトデキストロースアガー上の成長
物： ピンクの粗な集団、室温で２週間後糸状成長を示
し集団は黒色に変化する。 ポテトおよび米スライド上の成長物： 吻合を有する真
菌糸を生産する。 ＹＭ肉汁のような液状培地中の成長物：ピンクでイース
ト様成長および時々菌糸体を示す。 ポテト蔗糖アガー上の成長物： イースト相の証拠であ
る糸状 下記の実施例は本発明を実施するためにここに選択され
た本発明の実施の態様を説明するために役立つものであ
るが、本発明の範囲を限定するためのものではない。特
に記述のない場合は重量はグラム、温度は摂氏、圧力は
ｍｍＨｇで表される。

【００１４】

【作用】本発明ではラブダン化合物を含む水性栄養培地
中で寄託番号ＡＴＣＣ２０６２４微生物ハイホジーマ・
ロセオニガー（Hyphozyma roseoniger）を培養すること
によって、該ラブダン化合物をデカハイドロ−２−ハイ
ドロキシ−α，２，５，５，８ａ−テトラメチルナフタ
レンエタノールまたはドデカハイドロ−３ａ，６，６，
９ａ−テトラメチルナフト〔２，１−ｂ〕フランへ変換
する。

【００１５】

【実施例】

〔実施例１〕この実施例は基質として２−エテニルデカ
ハイドロ−２−ハイドロキシ−α，２，５，５，８ａ−
ペンタメチル−１−ナフタレンプロパノール(4) を用い
た動揺方法を説明するものである。各々に０．１％ＮＨ
₄ ＮＯ₃ ，０．１％Ｈ₂ ＫＰＯ₄ ，０．０５％ＭｇＳＯ
₄・７Ｈ₂ Ｏ、痕跡ミネラルおよびビタミンＢ複合体の
水性溶液（１００ｍｌ）が入っている４個のフラスコは
１２０℃，２０分間殺菌された。デキストロースの５０
％水性溶液（５ｍｌ）とスクラレオール(4) （１０ｍ
ｇ）を含むツィーン−８０（０．１ｍｌ）が各々のフラ
スコに添加された。各々のフラスコは３日間成長細胞Ｃ
ＢＳ２１４．８３（ＡＴＣＣ２０６２４）の５容量％に
より接種された。培養物はそれから３〜４日間回転振盪
器（２００ｒｐｍ）上で２５±１℃で孵置された。初期
孵置期間の後、ツィーン８０（８．０ｇ）中に溶解され
ているスクラレオールの混合物が次の５日間にわたって
少しずつ添加され、その後更に４日間孵置が継続され
た。孵置期間の終わりに４個のフラスコの内容物は一緒
にされ酢酸エチル（３×１００ｍｌ）によって抽出され
そしてＮａ₂ ＳＯ₄ により乾燥される。溶媒を蒸発して
粗抽出物（４．０ｇ）を得、該粗抽出物はヘキサン／ク
ロロホルムから結晶化せられて下記のデカハイドロ−２
−ハイドロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチルナフ
タレンエタノール(3) （２．４ｇ）を得る。融点１３
０．５−１３１．５℃（文献値１３２−１３３℃）、Ｇ
ＬＣ純度１００％、Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）δ０．７９
（６Ｈ，２Ｓ），０．８７（３Ｈ，２），（３Ｈ，
２），０．９−２０（１６Ｈ，ｍ），３．４１−３．４
９（１Ｈ，ｍ），３．７２−３．７９（１Ｈ，ｍ）、Ｉ
Ｒ（ＣＨＣl₃）ν_max ３５８０，３３６０，２９５０，
１４６０，１３８ ０ｃｍ^-1、ＭＳ，ｍ／ｅ２３６，２
２１，１１７，１３７，１０９、〔α〕²² _D ＝−１６．
８°（ＣＨＣl₃）、〔文献値１３２−１３３℃，〔α〕
^22.5 _D ＝−１７．３°（ＣＨＣl₃）〕〔Ｍ．Ｓｔｏｌｌ
とＭ．Ｈｉｎｄｅｒ、ヘルベチカ，ヒミア，アクタ，１
９５３年，第３６巻，第１９５５頁〜２００８頁参
照）。

【００１６】〔実施例２〕この実施例は基質として異な
った水準のスクラレオール(4) を用いた動揺方法の効果
を説明するものである。イースト抽出物（０．１ｇ）が
痕跡ミネラルとビタミンに対して置き換えられたこと、
およびスクラレオール(4) がヘキサンから抽出され、粉
末にされ、５０−メッシュの篩を通され、その後ツィー
ン−８０の等量と混合されたこと以外は実施例１に記載
されたと同様な方法が用いられた。４日間の初期孵置期
間の後、スクラレオール(4) とツィーン−８０の混合物
は５日間の期間にわたって次第に量を増やしつつ各々の
フラスコに添加され、その後更に４日間孵置された。下
記の表３は各々のフラスコに添加されたスクラレオール
(4) の量と単離されたジオール(3) の収率とを示す。各
々の生成物は実施例１において報告されたと同一のスペ
クトルデーターを示した。

【００１７】

【表３】 フラスコ スクラレオール(4) の全重量 単離されたジオール(3) の収率 （ｇ） （％） １ ２ ８１ ２ ３ ７４ ３ ５ ７１

【００１８】〔実施例３〕この実施例は休止細胞（洗浄
された）を用いた動揺方法の効果を説明するものであ
る。３日間の初期孵置期間の後、培地肉汁の１００ｍｌ
からの細胞が収穫されそして０．３×１０^-4Ｍ燐酸バッ
ファー（ｐＨ＝７．２）（３×２５ｍｌ）で洗浄されそ
して遠心分離されたこと以外は実施例１において記述さ
れたと同様な方法が用いられた。洗浄された細胞は上記
バッファー（１００ｍｌ）中に分散されそして７日間回
転振盪器（２００ｒｐｍ）上で２５±１℃で孵置され
た。ツィーン−８０（５ｇ）中に溶解されたスクラレオ
ール（０．５ｇ）が孵置の最初の４日間において細胞の
懸濁液に次第に量を増やしつつ添加された。孵置期間の
終わりにおいてＴＬＣ監視は該スクラレオール(4) のす
べてがジオール(3) に変わったことを示した。通常の方
法において、浮上物は９８％収率でそして９９％ＧＬＣ
純度でジオールを提供した。この生成物のスぺクトルデ
ーターは実施例１で報告されたものと同一である。

【００１９】〔実施例４〕この実施例は基質として化合
物(4) から(14)までの各々を用いてデカハイドロ−２−
ハイドロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチルナフタ
レン−エタノール(3) を生成する動揺方法を説明するも
のである。実施例２において記述された培地の水性溶液
（１００ｍｌ）が各々に入っている１１個のフラスコは
１２０℃，２０分間殺菌された。各基質の１０ｍｇを含
むデキストロース（４ｍｌ）とツィーン−８０（０．１
ｍｌ）の５０％水性溶液が各々のフラスコに添加され
た。各々のフラスコはその後ＣＢＳ２１４．８３（ＡＴ
ＣＣ２０６２４）の３日間成長細胞の５容量％によって
接種され、その後培養物は３日間、回転振盪器（２００
ｒｐｍ）上で２４±１℃で孵置された。初期孵置期間の
後ツィーン−８０中に溶解された基質の混合物（１：７
重量比）が孵置が数日間継続されたあと各々フラスコに
添加された。変態の進行はＴＬＣによって監視された。
孵置期間の終わりにおいて、各々のフラスコの内容物は
酢酸エチル（３×７５ｍｌ）で抽出され、該抽出物はＮ
a₂ＳＯ₄ で乾燥され、そして溶媒は蒸発された。残渣は
溶媒としてヘキサン／イソプロパン（９５／５）を用い
てシリカゲル上カラムクロマトグラフィーによって別々
に精製されそしてジオール(3) の収率が測定された。該
１１個の実験のデーターは表４に要約される。

【００２０】

【表４】ＣＢＳ２１４．８３による化合物(3) の生成 （ＡＴＣＣ２０６２４）異なる基質を使用 基 質 （ｇ／１００ｍｌ） 全孵置時間 ジオールの(3) の収率 （日） （％） 化合物(4) ０．３ ７ ９６ 化合物(5) ０．３ １１ ８９ 化合物(6) ０．３ ７ ９１ 化合物(7) ０．２ １０ ５１ 化合物(8) ０．２ １０ １３ 化合物(9) ０．２ １０ ７ 化合物(10) ０．３ ７ ９８ 化合物(11) ０．３ ６ １００ 化合物(12) ０．３ １１ ９１ 化合物(13) ０．２４ ８ ９８ 化合物(14) ０．５ ４ １００

【００２１】〔実施例５〕この実施例は化合物(7),(8)
および(9）を調製するための方法を説明するもので、こ
れら化合物は本発明の方法において基質として用いられ
るであろう。メチレンクロライド（４０ｍｌ) 中のスク
ラレオール（９．２４ｇ，０．０３モル）の溶液はピリ
ジニウムクロロクロメート（１２．９３ｇ ０．０６モ
ル）、酢酸ソーダ（２．４６ｇ．０．０３モル）、およ
びメチレンクロライド（１００ｍｌ）の混合物に少しず
つ添加された。該混合物は４時間２５℃攪拌された。エ
ーテル（２００ｍｌ）が添加されそして上澄はゴム状沈
澱物から分離された。該沈澱物はエーテル（３×５０ｍ
ｌ）で洗浄された。該エーテル溶液はシリカゲル６０
（４０ｇ）に通されそして溶媒は蒸発された。該残渣は
エタノール（２ｍｌ）およびエーテル（４ｍｌ）中に溶
解されそして水（６０ｍｌ）中重亜硫酸ソーダ（１５
ｇ）の溶液とともに２５℃、３時間攪拌された。該混合
物はエーテル（２×３０ｍｌ）によって抽出された。水
層は１０％カセイソーダで塩基性にせられそしてエーテ
ル（４×５０ｍｌ）で抽出された。該エーテル抽出物は
Ｎa₂ＳＯ₄ で乾燥されそして溶媒は蒸発せられて残渣の
２．７２g を得た。シリカゲル６０上のクロマトグラフ
ィー（７０g 流出液、ヘキサン：酢酸エチル；４：１）
は下記の０．７４g のトランス−アルデヒド(7) 、０．
６９ｇのシス−アルデヒド(8) 、および０．６４ｇの環
状アルデヒ ド(9) を与えた。〔(E) −１Ｒ−（１
α，２β，４ａβ，−８ａα）〕−５−（デカハイドロ
−２−ヒドロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチル−
１−ナフタレニル）−３−メチル−２−ペンテナール
(7) 融点８３−８５℃、〔α〕_D ＋１４．２°（ｃ，
５．７６，ＣＨＣl₃）； ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）δ
０．７８（６Ｈ，ｓ），０．８６（３Ｈ，ｓ），１．１
７（３Ｈ，ｓ），２．１５（３Ｈ，ブロードｓ），０．
８−２．５（１７Ｈ，ｍ），５．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８Ｈz ），９．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈz)；ＩＲ（Ｃ
ＨＣl₃）ν_max ３５７０，３４４０，２９４０，２８５
０，１６７０，１６３０，１４６０，１４４０，１３９
０ｃｍ^-1；ＭＳ，ｍ／ｅ３０６，２９１，２７３，１０
９，９５，８４；ＵＶν_max （９５％エタノール）２４
１ｎｍ（計算値２３１ｎｍ）（ε, １７，３００）。元
素分析、Ｃ₂₀Ｈ₃₄Ｏ₂ ：計算値Ｃ，７８．３７；Ｈ，１
１．１８。実測値Ｃ，７７．９２，Ｈ，１１．０２。
〔(Z) −１Ｒ−（１α，２β，４ａβ，８ａα）〕−５
−（デカハイドロ−２−ヒドロキシ−２，５，５，８ａ
−テトラメチル−１−ナフタレニル）−３−メチル−２
−ペンタナール(8) 、融点９１−９３．５℃、〔α〕_D
＋８．９（ｃ，３．１３，ＣＨＣl₃）； ¹Ｈ−ＮＭＲ
（ＣＤＣl₃）δ０．７８（６Ｈ，ｓ），０．８７（３
Ｈ，Ｓ），１．１４（３Ｈ，Ｓ）１．９８（３Ｈ，ブロ
ードｓ），０．９−２．８（１７Ｈ，ｍ），５．７５
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈz ）；１０，０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
８Ｈz ），ＩＲ（ＣＨＣl₃） ３５７０，３４５０，２
９４０，２８４０，１６７０，１６３０，１４６０，１
４４０，１３９０ｃｍ^-1；ＭＳ，ｍ／ｅ３０６，２７
３，１０９，９５，８４；ＵＶλ_max （９５％エタノー
ル） ２４２ｎｍ（計算値２３１ｎｍ）（ε，１３，０
００）。元素分析，Ｃ₂₀Ｈ₃₄Ｏ₂ ：計算値Ｃ，７８．３
７；Ｈ，１１．１８。実測値Ｃ，７８．３４；Ｈ，１
１．０２。〔４ａＲ−（４ａα，６ａβ，１０ｂβ）〕
−ドデカハイドロ−３，４ａ，７，７，７，１０ａ−ペ
ンタチメチル−１Ｈ−ナフト〔２，１−ｂ〕ピラン−１
−アセトアルデヒド(9) 、 ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）δ
０．７８（６Ｈ，ｓ），０．８５（３Ｈ，ｓ），１．２
５（３Ｈ，ｓ），１．２７（３Ｈ，ｓ）。０．９−２．
６（１８Ｈ，ｍ），９．８−１０．０（１Ｈ，ｍ）；Ｉ
Ｒ（フィルム）ν_max ２９４０，２８５０，１７２０，
１４６０，１４４０，１３８０，１３７０ｃｍ^-1；Ｍ
Ｓ，ｍ／ｅ（類似質量の２本のピーク）２９１，２７
３，２６２，２４５，１０９，４３。

【００２２】〔実施例６〕この実施例は化合物(10)を調
製するための方法を説明するものであり、該化合物(10)
は本発明の方法において基質として用いられる。水素化
ソーダの懸濁液（５０％懸濁液の０．７２ｇ，０．０１
５モル，ヘキサンによって洗浄してミネラルオイルを除
去された）に対して、１０分間にわたってエチルジイソ
プロピルホスホノノアセテート（３．７８ｇ，０．０１
５モル）のジメトキシエタン（３０ｍｌ）中溶液が添加
された。水素の発生が終わった後〔１ Ｒ−（１α，２
β，４ａβ，８ａα）〕−４−（２−アセチロキシ−デ
カヒドロ−２，５，５，８ａ−テトラメチル−１−ナフ
タレニル）−２−ブタノン（３．２２ｇ，０．０１モ
ル，ジェー．エー．バートロップ等によりジャーナルオ
ブ ケミカルソサエティー，１９６０年，４６１３中に
記述されるようにして調製される）が一度に全部添加さ
れた。該混合物は２１時間加熱還流されその後冷却され
そして氷水（１００ｍｌ）上に満たされた。該混合物は
６Ｎ塩酸で酸性化され、ヘキサン／酢酸エチル（４：
１，４×１０ｍｌ）で抽出された。該有機抽出物は水
（２×１０ｍｌ）、重炭酸ソーダ飽和溶液（２×１５ｍ
ｌ）で洗浄され、そしてＮa₂ＳＯ₄ で乾燥された。溶媒
は蒸発せられそして残渣はクロマトグラフィー（シリカ
ゲル６０；流出液，ヘキサン：酢酸エチル，９：１）に
かけられて無色粘濶油として３．０２ｇのエチル
〔（Ｅ，Ｚ）−１Ｒ−（１α，２β，４ａβ，８ａ
α）〕−５−（２−アセチロキシ−デカヒドロ−２，
５，５，８ａ−テトラメチル−１−ナフテレニル）−３
−メチル−２−ペンテノエートが得られた。

【００２３】エチル〔（Ｅ，Ｚ）−１Ｒ−（１α，２
β，４ａβ，８ａα）〕−５−（２−アセチロキシ−デ
カヒドロ−２，５，５，８ａ−テトラメチル−１−ナフ
タレニル）−３−メチル−２−ペンタノエート（２．１
９ｇ，０，００５５７モル），イソプロパノール（６５
ｍｌ），水（１０ｍｌ）およびカセイカリ（１．４７
ｇ，０．０２２３モル）の混合物は２４時間加熱還流さ
れた。該混合物は２０ｍｌに濃縮され、水（５０ｍｌ）
が添加され、そして該混合物はエーテルで抽出された。
水相は６ＮＨＣｌで酸性化されそしてエーテル（５×２
０ｍｌ）で抽出された。該エーテル抽出物はブラインで
洗浄されＮａ₂ ＳＯ₄ で乾燥せられ、そして溶媒が蒸発
せられて１．７８１ｇの粗生成物が得られた。シリカゲ
ル６０上のクロマトグラフィー（展開溶媒、ヘキサン：
イソプロパノール，９：１）はシス−イソマーの０．４
５５ｇとトランスイソマー(10)の１．２２３ｇを与え
た。ヘキサン／酢酸エチルからの再結晶は〔(Z) −１Ｒ
−（１α，２β，４ａβ，８ａα）〕−５−（デカヒド
ロ−２−ハイドロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチ
ル−１−ナフタレニル）−３−メチル−２−ペンテノイ
ックアシドの下記の分析化学的試料を与えた。融点１４
７−１４９℃；〔α〕_D ＋６２．９６°（ｃ，４．６
６，ＣＨＣl₃）； ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＨＣl₃）δ０．８１
（６Ｈ，ｓ），０．８８（３Ｈ，Ｓ），１．２１（３
Ｈ，Ｓ），１．９２（３Ｈ，ブロードＳ），０．９−
２．４（１７Ｈ，ｍ），５．７２（１Ｈ，ブロード
Ｓ），６．８−７．３（１Ｈ，Ｖ．ブロードｓ）；ＩＲ
（ＣＨＣl₃）ν_max ３５００，３４００，２９４０，２
５５０，１６９０，１６４０，１４６０，１４４０ｃｍ
^-1；ＭＳ，ｍ／ｅ３２２，３０４，２８９，２７６，１
０９；ＵＶλ_max （９５％Ｅt ＯＨ）２２８ｎｍ（計算
値２１７ｎｍ）（ε，７３００）；元素分析、 Ｃ₂₀Ｈ
₃₄Ｏ₃ ：計算値 Ｃ，７４．４９，Ｈ，１０．６３，実
測値Ｃ．７４．２０，Ｈ，１０．４０。〔(E)-１Ｒ−
（１α，２β，４ａβ，８ａα）〕−５−（デカハイド
ロ−２−ヒドロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチル
−１−ナフタレニル）−３−メチル−２−ペンテノイッ
クアシド、融点１５１−１５３℃、〔α〕_D ９．４４°
（ｃ，４．８３，ＣＨＣl₃) ； ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ
l₃）δ０．７９（６Ｈ，ｓ），０．８７（３Ｈ，ｓ），
１．１５（３Ｈ，ｓ），２．１７ （３Ｈ，ブロード
ｓ），０．９−２．４（１７Ｈ，ｍ），５．７０（１
Ｈ，ブロードＳ），５．８−６．１（１Ｈ，ブロード
Ｓ）；ＩＲ（ＣＨＣl₃）ν_max ３６５０，３４００，２
９４０，２５５０，１６９０，１６４０，１４６０，１
４４０ｃｍ^-1；ＭＳ，ｍ／ｅ３２２，３０４，２８９，
２７６，１０９；ＵＶλ_max （９５％ ＥtＯＨ）２３
０ｎｍ（計算値２１７ｎｍ）（ε，５７００）；元素分
析、Ｃ₂₀Ｈ₃₄Ｏ₃ ：計算値Ｃ，７４．４９，Ｈ，１０．
６３、実測値Ｃ，７４．１２，Ｈ，１０．５２

【００２４】〔実施例７〕この実施例は化合物(11)を調
製するための方法を説明するものであり、該化合物は本
発明の方法において基質として用いられる。テトラヒド
ロフラン（９０ｍｌ）中ジイソプロピルアミン（８．４
８４ｇ，０．０８４モル）の溶液に０℃のにおいてｎ−
ブチルリチウム（２．２Ｍヘキサン溶液の３８. ２ｍ
ｌ，０．０８４モル）が２０分間にわたって滴下され
た。テトラヒドロフラン（２０ｍｌ）中の酢酸（２．５
２ｇ，０．０４２モル）溶液が１５分間にわたって添加
された。該混合物はその後５０℃，４５分間加熱され
た。該混合物は２５℃に冷却されそしてテトラヒドロフ
ラン（３５ｍｌ）中の〔１Ｒ−（１α，２β，４αβ，
８ａα）−４−（２−アセチロキシ−デカヒドロ−２，
５，５，８ａ−テトラメチル−１−ナフタレニル）−２
−ブタノン（４．５０８ｇ，０．０１４モル，ジェー．
エー．バールトロップ等によりジャーナル オブ ケミ
カル ソサエティー，１９６０年，４６１３中に記述さ
れるようにして調製される）が１０分間にわたって添加
された。該混合物は２５℃，１７時間攪拌されそしてそ
の後３０分間加熱還流された。該混合物は２５℃に冷却
されその後水（４０ｍｌ）とカセイカリ（５ｇ）が添加
された。該混合物は４時間加熱還流されその後冷却され
水（１００ｍｌ）に添加され、そしてヘキサン・酢酸エ
チル（４：１）（３×３０ｍｌ）によって抽出された。
水層は０℃に冷却され、６ＮＨＣl により酸性化され、
そしてヘキサン／酢酸エチル（４：１）（４×５０ｍ
ｌ）によって抽出された。合一された抽出物はブライン
によって洗浄され、Ｎa₂ＳＯ₄ により乾燥され、その後
溶媒は蒸発されて粗生成物の２．０７１ｇを得た。シリ
カゲル６０上のクロマトグラフ（展開溶媒，ヘキサン：
酢酸エチル：酢酸，１０：１０：０．１）は酸(11)の
１．４３４ｇを与えた。ヘキサン／酢酸エチルからの結
晶化は下記の分析化学的試料を与えた。融点１３６−１
３７．５℃， ¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）δ０．７６（６
Ｈ，Ｓ），０．８５（３Ｈ，Ｓ），１．１６と１．１９
（３Ｈ，２Ｓ），１．２８（３Ｈ，Ｓ），０．８−１．
９（１６Ｈ，ｍ），２．４−２．８（２Ｈ，ｍ），６．
１−６．６（２Ｈ，ブロードＳ）；ＩＲ（ＣＨＣl₃）ν
_max ３５５０，２９３０，２７００，１７１０，１４５
５，１３８５cm^-1；ＭＳ, ｍ／ｅ３４０，３０４，２８
９，１０９，９５，４３、元素分析、Ｃ₂₀Ｈ₃₆Ｏ₄ ：計
算値Ｃ，７０．５４，Ｈ，１０．６６，実測値Ｃ，７
０．９９，Ｈ，１０．６３。

【００２５】〔実施例８〕この実施例はα−エテニル−
デカヒドロ−２−ハイドロキシ−α，２，５，５，８ａ
−ペンタメチル−１−ナフタレンプロパノール(4) のド
デカヒドロ−３ａ，６，６，９ａ−テトラメチルナフト
〔２，１−ｂ〕フラン(1) への２段階工程を用いた変換
を説明するものである。７個のフラスコが用いられたこ
と、各フラスコにはスクラレオール(4) の総計が添加さ
れそして孵置期間が変えられたこと（表５をみよ）を除
いては実施例２において記述されたと同様な方法が用い
られた。孵置が完了した時、フラスコは別々に浮遊せら
れて粗ジオール(3) の７個のサンプルが得られた。各サ
ンプルは別々にキャンビー等の方法（オーストラリア
ジャーナル オブ ケミカル，１９７１年，第２４巻，
第５９１頁をみよ）によってピリジン中でトルエン−ｐ
−スルホニルクロライドと反応せられ、そして各反応生
成物はクゲルロール蒸留されてフラン(1) を与えた。 ¹
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣl₃）δ０．８３（６Ｈ，２Ｓ），
０．８８（３Ｈ，s ），０．９−１．８（１３Ｈ，
ｍ），１．９−２．０（１Ｈ，ｍ），３．７７−３．９
２（２Ｈ，ｍ）；ＩＲ（メルト）ν_max ２９４０，１４
６０，１３８５，１３６５ｃｍ^-1；ＭＳ，ｍ／ｅ２３
６，２２１，２０４，１７７，１３７，９７。該７個の
実験のデータは表５に要約される。

【００２６】

【表５】 フラスコ スクラレオール重量 全孵置時間 収量 ＧＬＣ純度 （ｍｇ） （日） （ｍｇ） （％） １ １６０ ７ １１５ ９５ ２ ２４０ ８ １６９ ９７ ３ ３２０ ９ ２２０ ９７ ４ ４００ １０ ２７０ ９３ ５ ４００ １４ ２５８ ９６ ６ ５６０ １４ ３６１ ９７ ７ ７２０ １４ ４６８ ９７ ＊収量は監視中に除去されたサンプルを考慮しない。

【００２７】〔実施例９〕この実施例は水性栄養培地か
ら分離することなく変態生成物デカヒドロ−２−ハイド
ロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチルナフタレンエ
タノール(3) をドデカヒドロ−３ａ，６，６，９ａ−テ
トラメチルナフト〔２，１−ｂ〕フラン(1) へ直接環化
することを説明するものである。発酵肉汁の１００ｍｌ
中の基質としてスクラレオール（２．０ｇ）を用いて実
施例２に記述されたと同様な方法が用いられた。１４日
の全孵置時間の後、フラスコの内容物は反応容器に移さ
れそして攪拌、加熱還流せられた。トルエン−ｐ−スル
ホニルクロライド（２．４８ｇ）、カセイソーダペレッ
ト（２５ｇ）およびテトラヒドロフラン（２００ｍｌ）
が添加されそして混合物は２０℃で攪拌された。５時間
後トルエン−ｐ−スルホニルクロライド（１．５０ｇ）
が更に添加せられそして該反応混合物は一晩攪拌され
た。次の日、該混合物は３０分間加熱還流され、冷却さ
れ、そして酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で抽出され
た。合一された抽出物はＮa₂ＳＯ₄ により乾燥された。
該溶媒は蒸発されそして残渣はクーゲルロール蒸溜され
て固形分の１．３８ｇを与え、該固形分は機器分析によ
れば８５％のドデカヒドロ−３ａ，６，６，９ａ−テト
ラメチルナフト〔２，１−ｂ〕フラン(1) を含んでい
た。

【００２８】〔実施例１０〕この実施例は水性栄養培地
から分離することなくして変態生成物デカヒドロ−２−
ハイドロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチルナフタ
レンエタノール(3)をドデカヒドロ−３ａ，６，６，９
ａ−テトラメチルナフト〔２，１−ｂ〕フラン(1) に直
接環化するための改変された方法を説明するものであ
る。発酵肉汁の１００ｍｌ中の基質としてスクラレオー
ル（２．０ｇ）を用いて実施例２に記述されたと同様な
方法が用いられた。１４日間の全孵置時間の後、フラス
コの内容物は反応容器に移され攪拌および加熱還流せら
れた。発酵肉汁は６Ｎ塩酸で酸性化され（約ｐＨ１）、
酢酸エチル（１００ｍｌ）が添加され、そして該混合物
は６時間攪拌、加熱還流された。冷却後、酢酸エチル層
は分離され、中性になるまで洗浄され、そして乾燥され
た。該溶媒は蒸発されそして残渣はクーゲルローレル蒸
留されて１．４ｇの固形分を与え、該固形分は機器分析
によれば３８％のドデカヒドロ−３ａ，６，６，９ａ−
テトラメチルナフト〔２，１−ｂ〕フラン(1) を含んで
いた。

【００２９】〔実施例１１〕この実施例は水性栄養培地
から分離することなくして変態生成物デカヒドロ−２−
ハイドロキシ−２，５，５，８ａ−テトラメチルナフタ
レンエタノール(3)をドデカヒドロ−３ａ，６，６，９
ａ−テトラメチルナフト〔２，１−ｂ〕フラン(1) に直
接環化するための改変された方法を説明するものであ
る。イオン交換樹脂ドウェックス５０×２４００（１０
ｇ）が６Ｎ塩酸の代わりに発酵肉汁へ添加されたことを
除いては実施例８において記述されたと同様な方法が用
いられた。浮遊、そしてクーゲルロール蒸留は１．３２
ｇの固形分を与え、該固形分は化合物(1) の３７％を含
んでいた。

【００３０】

【発明の効果】したがって本発明では芳香性化学製品で
あるドデカハイドロ−３ａ，６，６，９ａ−テトラメチ
ルナフト〔２，１−ｂ〕フランを微生物学的方法によっ
て製造するから、該製品を営利的に提供することができ
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明における重要な化合物のいくつかのもの
の構造を示すものである。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 17/04 Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者 ブライアン ジェイ．ウィリス 英国 イングランド，ケント，ノニントン ニア ドーバー，バーゲンフィールド ミル レイン （番地なし) (72)発明者 フィリップ エイ．クリステンソン アメリカ合衆国 07432 ニュージャージ ー，ミドランド パーク，バスティード ドライブ 118

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】下記の構造 【化１】 を有するジオールを 【化２】 ここにＲは 【化３】 である。からなるグループから選択された化合物を含む
   水性栄養培地中で好気性下に転換させることによって回
   収可能な量で製造するための寄託番号ＡＴＣＣ２０６７
   ４の微生物ハイホジーマ・ロセオニガー（Hyphozyma ro
   seoniger）を培養することからなる上記ジオールの製造
   方法
2. 【請求項２】下記の構造 【化４】 を有するジオールを 【化５】 ここにＲは 【化６】 である。からなるグループから選択された化合物を含む
   水性栄養培地中で、（ｉ）ｐＨは約２．５から９．０の
   間で、（ｉｉ）温度は約１２℃から３０℃の間の条件で
   好気性下に転換させることによって回収可能な量で製造
   するための寄託番号ＡＴＣＣ２０６２４の微生物ハイホ
   ジーマ・ロセオニガー（Hyphozyma roseoniger）を培養
   することからなる上記ジオールの請求項１に記載の製造
   方法
3. 【請求項３】寄託番号ＡＴＣＣ２０６２４の微生物ハイ
   ホジーマ・ロセオニガー（Hyphozyma roseoniger）を好
   気性条件下において、下記の構造 【化７】 ここにＲは 【化８】 である。からなるグループから選択された１種またはそ
   れ以上の化合物を含む水性栄養培地中で培養して下記の
   構造 【化９】 を有するジオールを生成すること、 該ジオールを水性栄養培地中で環化して該フラン化合物
   を生成すること、および該フラン化合物を回収すること
   からなる下記の構造 【化１０】 を有するフラン化合物を製造する方法
4. 【請求項４】寄託番号ＡＴＣＣ２０６２４の微生物ハイ
   ホジーマ・ロセオニガー（Hyphozyma roseoniger）を好
   気性条件下において、下記の構造 【化１１】 ここにＲは 【化１２】 である。からなるグループから選択された１種１種また
   はそれ以上の化合物を含む水性栄養培地中で培養して上
   記化合物を転換せしめることによって下記の構造 【化１３】 を有するジオールを回収可能な量で製造すること、 水性栄養培地のｐＨを約１から３に調整することによっ
   て該フラン化合物を生成すること、および該フラン化合
   物を回収することからなる下記の構造 【化１４】 を有するフラン化合物を製造する請求項３に記載の製造
   方法
5. 【請求項５】寄託番号ＡＴＣＣ２０６２４の微生物ハイ
   ホジーマ・ロセオニガー（Hyphozyma roseoniger）を好
   気性条件下において、下記の構造 【化１５】 ここにＲは 【化１６】 である。からなるグループから選択された１種１種また
   はそれ以上の化合物を含む水性栄養培地中で培養して上
   記化合物を転換せしめることによって下記の構造 【化１７】 を有するジオールを生成すること、 該ジオールを分離すること、該ジオールを環化して該フ
   ラン化合物を生成することおよび該フラン化合物を回収
   することからなる下記の構造 【化１８】 を有するフラン化合物を製造する請求項３に記載の製造
   方法