JPH0631289B2 - Ｘ−抗原決定基を有するハプテン及びその製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はＸ−抗原決定基を有する新規なハプテン及びそ
の製造法に関する。

〔従来の技術〕

最近細胞表面糖蛋白質及び糖脂質が細胞生理において重
要な機能を担っていることが明らかにされつつある。こ
こで細胞生理とは細胞の分化、発生、形態形成、腫瘍転
換などをいう。

またガン性変化を受けた細胞には通常見られない異常糖
鎖が存在する。そして該異常糖鎖の非還元末端が血液型
物質（ルイスａ、ｂ、Ｘ及びＹ等）を含有することが知
られてきている。中でも結腸及び肝臓の腺ガンから単離
同定した異常糖脂質のいくつかはその非還元末端にＸ−
決定基を繰り返し構造として有すると報告されている
〔Ｓ．ハコモリ（Ｈａｋｏｍｏｒｉ）ら、Ｊ．Ｂｉｏ．
Ｃｈｅｍ．，２４６、１１９２（１９７１）；２５７、
１４８６５（１９８２）；２５９、４６７２（１９８
４）；２５９、１０５１１（１９８４）〕。

これらの事実からＸ−決定基をその抗原決定基とし、か
つ各種のスペーサーを有したハプテンを提供することは
種々の意義がある。即ち、細胞のガン性変化による異常
糖質の生物学的機能の解明に有効な手段を与える。さら
に、ハプテンから作製される単クローン抗体を種々のガ
ンに対する診断、検査及び治療に応用することも可能と
なる。

〔発明の目的〕

本発明はＸ−抗原決定基を有する新規なハプテン及びそ
の製造法を提供することを目的とする。

〔発明の構成〕

すなわち本発明は、一般式〔Ｉ〕で表わされるＸ−抗原
決定基を有するハプテンに関する。

（ただし、Ｒ^１は水素原子又はアセチル基であり、Ｒ^２
は水酸基、アセチルオキシ基又はベンジルオキシ基であ
り、Ｒ^３は −ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｒ^６（Ｒ^６はメ
チル基又はエチル基である。）であり、Ｒ^４は−ＮＨＡ
ｃ基であり、Ｒ^５は水酸基、アセチルオキシ基又はベン
ジルオキシ基である。） 本発明の具体例を以下に示す。

化合物（１） Ｒ^１＝Ｈ、Ｒ^２＝Ｒ^５＝ＯＨ、 Ｒ^４＝ＮＨＡｃ、 Ｒ^３＝−ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ
_２Ｍｅ 化合物（８） Ｒ^１＝Ａｃ、Ｒ^２＝Ｒ^５＝ＢｎＯ、 Ｒ^４＝ＮＨＡｃ、 Ｒ^３＝−ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ
_２Ｅｔ 化合物（９） Ｒ^１＝Ａｃ、Ｒ^２＝Ｒ^５＝ＯＡｃ、 Ｒ^４＝ＮＨＡｃ、 Ｒ^３＝−ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ
_２Ｅｔ 本発明の化合物（１）、（８）、（９）の製造法をスキ
ーム１に基いて以下に示す。

〔化合物（７）の製造法：化合物（２）→（３）→
（４）→（５）→（６）→（７）〕 化合物（７）は化合物（２）〔一般式〔Ｉ〕中、Ｒ^１＝
Ａｃ、Ｒ^２＝Ｒ^５ＢｎＯ、Ｒ^３＝−ＣＨ＝ＣＨ_２、Ｒ^４
＝−ＮＰｈｔｈである〕を原料として一般式〔Ｉ〕のＲ
^１〜Ｒ^５が以下に示すものである化合物（３）、
（４）、（５）、（６）を経て製造される。ただし本明
細書において「−Ｎｐｈｔｈ」はＮ−フタロイル基を示
す。

化合物（３） Ｒ^１＝Ａｃ、Ｒ^２＝Ｒ^５＝ＢｎＯ、 Ｒ^３＝−ＣＨＯ、Ｒ^４＝−ＮＰｈｔｈ 化合物（４） Ｒ^１＝Ａｃ、Ｒ^２＝Ｒ^５＝ＢｎＯ、 Ｒ^３＝−ＣＨ_２ＯＨ、Ｒ^４＝−ＮＰｈｔｈ 化合物（５） Ｒ^１＝Ａｃ、Ｒ^２＝Ｒ^５＝ＢｎＯ、 Ｒ^３＝−ＣＨ_２ＯＥＥ、 Ｒ^４＝−ＮＰｈｔｈ 化合物（６） Ｒ^１＝Ａｃ、Ｒ^２＝Ｒ^５＝ＢｎＯ、 Ｒ^３＝−ＣＨ_２ＯＥＥ、Ｒ^４＝−ＮＨＡｃ ただしＥＥはエトキシエチル基を示す（以下同じ）。

化合物（２）から化合物（３）の合成 三糖である原料化合物（２）は例えば次の方法により得
ることができる。

すなわち、アリル６−ベンジル−２−デオキシ２−フタ
リミド−β−Ｄ−グルコピラノシド（Ａ）と２，３，
４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトシル
トリクロロアセチルイミデート（Ｂ）を、ジクロロメタ
ン、１，２−ジクロロエタン等の溶媒中、Ｈｇ（ＣＮ）
_２、ＨｇＢｒ_２、モレキュラーシーブ、Ａｇ_２ＣＯ_３、
ＡｇＣｌＯ_４、ＡｇＯＳＯ_２ＣＦ_３、（ＣＨ_３）_３ＣＯ
ＳＯ_２ＣＦ_３、ＢＦ_３・Ｅｔ_２Ｏ等のグリコシデーショ
ン触媒存在下に、−３０゜〜１５０℃で１〜１２０時間
程度反応させることによりまず、化合物（Ｃ）が得られ
る。この際、化合物（Ｃ）とともにその異性体（Ｃ′）
（β１→３）および（Ｃ″）（α１→３）も副生する。

得られた二糖（Ｃ）と１−Ｓ−メチル−Ｌ−フコース
（Ｄ）を、エーテル等の溶媒中、モレキュラーシーブ等
の上記グリコシデーション触媒存在下、−３０℃〜１５
０℃で１〜１２０時間程度反応させ、三糖（２）を得
る。

上記工程の一例をスキーム２に示す。

化合物（３）は化合物（２）を酸化してＲ^３を−ＣＨ＝
ＣＨ_２から−ＣＨＯにすることにより得られる。該酸化
反応は例えば酸化剤としてＯ_３、ＯｓＯ_４／ＮａＩＯ_４
等を用いて、メタノール、エタノール、ジオキサン、Ｔ
ＨＦ等と水との混合溶媒の存在下、約−１０〜６０℃で
約５分〜２４時間、好ましくは撹拌下実施される。得ら
れた反応物は通常採られる精製手段例えばカラムクロマ
トグラフィー等によって精製することによって化合物
（３）を純品として得ることができる。

化合物（３）から化合物（４）の合成 化合物（４）は化合物（３）を還元してＲ^３を−ＣＨＯ
から−ＣＨ_２ＯＨにすることによって得られる。該還元
反応はＤＩＢＡＬ〔（ｉ−Ｂｕ）_２ＡｌＨ〕、ＬｉＡｌ
Ｈ_４、ＬｉＢＨ_４、ＮａＢＨ_４、ＮａＢＣＮＨ_３等の還
元剤を用いて、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノ
ール、ＴＨＦ、ジオキサン、トルエン等の溶媒の存在
下、約−１０゜〜６０℃で約５分〜２４時間の条件で実
施できる。

尚該還元反応はほぼ定量的に進行するため、通常反応生
成物を精製することなく純度の良い化合物（４）を得る
ことができる。ただし所望により反応生成物を適当な方
法で精製することもできる。

化合物（４）から化合物（５）の合成 化合物（５）は化合物（４）のＲ^３を−ＣＨ_２ＯＨから
−ＣＨ_２ＯＥＥとすることにより得られる。即ち化合物
（４）とＣＨ_２＝ＣＨ_２ＯＥｔとをＰＰＴＳ、ｐ−Ｔｓ
ＯＨ等の存在下、メチレンクロライド、ジクロロエタ
ン、ＴＨＦ、ジオキサン、トルエン等の溶媒を用いて、
−１０゜〜６０℃で約５分〜２４時間の条件で実施され
る。反応生成物は好ましくは公知の精製手段、例えばカ
ラムクロマトグラフィー等によって精製した後に、次工
程の原料に供される。

化合物（５）から化合物（６）の合成 化合物（５）はまずメタノール、エタノール等の溶媒の
存在下、約０〜１００℃、約１時間〜３日間、ヒドラジ
ンと反応させる。この際好ましくはヒドラジンのエタノ
ール溶液（例えば２％Ｈ_２ＮＮＨ_２−ＥｔＯＨ）を用
い、反応は撹拌還流下で実施することが好ましい。

次いで反応溶媒を留去（減圧下）した後に残った反応生
成物をアセチル化する。アセチル化は上記反応生成物と
Ａｃ_２Ｏ／Ｐｙ／４−ＤＭＡＰとをジクロロメタン、ジ
クロロエタン、クロロホルム、ＴＨＦ、トルエン等の溶
媒下、約−１０〜６０℃、約５分〜２４時間撹拌するこ
とによって実施される。得られた反応生成物は所望によ
りカラムクロマトグラフィー等の公知の精製手段によっ
て化合物（６）の純品とすることができる。

化合物（６）から化合物（７）の合成 化合物（７）は化合物（６）を酸性化することにより得
られる。該酸性化は、例えば５％ＡｃＯＨ、０．５ＮＨ
Ｃｌ、アンバーリスト（Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ）１５等の
イオン交換樹脂等を用いて、水、メタノール、エタノー
ル、ＴＨＦ、ジオキサン等の溶媒下、約−１０〜６０
℃、約５分〜２４時間の条件で実施される。

〔化合物（８）の製造法：化合物（７）→（８）〕 化合物（８）は化合物（７）のＲ^３を−ＣＨ_２ＯＨから
−ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｅｔにすること
によって得られる。即ち該反応は、化合物（７）とＯＣ
Ｎ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｅｔとをベンゼン、トルエン、キ
シレン、ＴＨＦ、ジオキサン等の溶媒下、約０〜１５０
℃で約５分〜２４時間好ましくは撹拌下反応させること
により実施される。

〔化合物（９）の製造法：化合物（８）→（９）〕 化合物（９）は化合物（８）を還元し、次いでアセチル
化することによって得られる。

まず化合物（８）の還元は、Ｐｄ触媒等（例えば１０％
Ｐｄ−Ｃ）、Ｒｈ触媒、Ｐｔ触媒等を用いて水素により
行う。その際溶媒としてはメタノール、エタノール、酢
酸等を用い、圧力：１〜５ａｔｍ、温度：０〜６０℃、
時間：１時間〜３日間の条件で実施される。反応終了
後、反応混合物から触媒及び溶媒を除去する。

次いで触媒等除去後の反応生成物とＡｃ_２Ｏ／Ｐｙ／４
−ＤＭＡＰとを、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ク
ロロホルム、ＴＨＦ、トルエン等の溶媒下、約−１０〜
１００℃の温度で、約５分〜２４時間撹拌下反応させ
る。反応生成物はカラムクロマトグラフィー等の公知の
精製手段により精製することによって化合物（９）の純
品を得ることができる。

〔化合物（１）の製造法：化合物（９）→（１）〕 化合物（１）は化合物（９）のアルカリメトキサイドに
よるエステル交換にによって得られる。

該エステル交換反応は例えばＮａＯＭｅを用いてメタノ
ール、エタノール、ＴＨＦ、ジオキサン等の溶媒下、−
１０℃〜６０℃の温度で約５分〜２４時間撹拌すること
によって実施される。得られた反応生成物はカラムクロ
マトグラフィー等の公知の手段によって精製することに
より純品の化合物（１）とすることができる。

〔有用性〕

本発明の新規なハプテンは、細胞のガン性変化により異
常糖質の生物学的機能の解明に有効な手段を与え、さら
に該ハプテンから作製される単クローン抗体を種々のガ
ンに対する診断、検査及び治療に応用することも可能で
あるという有用性を有する。

以下本発明を参考例及び実施例によりさらに詳細に説明
する。

参考例１ 化合物（Ｃ）およびその異性体（Ｃ′）および（Ｃ″）
の合成 化合物（Ａ）１３１０ｍｇ（３ｍＭ）及び化合物（Ｂ）
１７７０ｍｇ（３．６ｍＭ）を、ジクロロエタン３０ｍ
に溶解し、事前に十分乾燥したＭ．Ｓ．４Ａ３ｇの入
った褐色ビンにアルゴンガス気流下注入し、−２３℃に
冷却する。この反応溶液に ＢＦ_３・Ｅｔ_２Ｏ０．３６ｍを滴下し、４時間撹拌す
る。反応混合物をろ過し、ろ液を、飽和食塩水で洗浄
後、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去す
る。残渣の油状物を、カラムクロマトグラフィー（酢酸
エチル／ヘキサン＝１／１で展開）にて精製し、３つの
異性体を得る。

（Ｃ）：７６０ｍｇ（収率３３％）、Ｒｆ−０．６０
（酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝３／２） 元素分析値（Ｃ_３８Ｈ_４３ＮＯ_１６・１／２Ｈ_２Ｏ＝７
７８．７７１として） 理論値 Ｃ：５８．６０，Ｈ：５．６９，Ｎ：１．８０ 実測値 Ｃ：５８．４０，Ｈ：５．５６，Ｎ：１．８０ 旋光度▲〔α〕²³ _D▼＋１．５１゜（Ｃ＝１．１２ Ｃ
ＨＣｌ_３） ＮＭＲ （δ）ＣＤＣｌ_３：７．８〜７．３（ｍ，９
Ｈ，アロマチックＨ），５．８〜５．７（ｍ，１Ｈ， ５．２５（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ａ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），
５．２２〜５．０５（ｍ，２Ｈ， ２．１３〜１．９１（４×ｓ，４×３Ｈ，４×−ＯＡ
ｃ） （Ｃ′）：５０ｍｇ（収率２．２％）、Ｒｆ＝０．５２ （酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝３／２） ＮＭＲ （δ）ＣＤＣｌ_３：７．９〜７．２５（ｍ，９
Ｈ，アロマチックＨ），５．７〜５．６（ｍ，１Ｈ，−
ＣＨ＝ＣＨ_２），５．１７〜４．９８（ｍ，２Ｈ， ５．０５（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ａ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），
４．４１（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），
２．１３，２．０３，１．８８，１．４５（４×Ｓ，４
×３Ｈ，４×ＯＡｃ） （Ｃ″）：６８０ｍｇ（収率２９％）、Ｒｆ＝０．４０ （酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝３／２） 元素分析値（Ｃ_３８Ｈ_４３ＮＯ_１６・１／２Ｈ_２Ｏ＝７
７８．７７１として） 理論値 Ｃ：５８．６０，Ｈ：５．６９，Ｎ：１．８０ 実測値 Ｃ：５８．５０，Ｈ：５．５９，Ｎ：１．７６ 旋光度▲〔α〕²³ _D▼＋９８．１゜（Ｃ＝０．６７ Ｃ
ＨＣｌ_３） ＮＭＲ （δ）ＣＤＣｌ_３：７．９〜７．２５（ｍ，９
Ｈ，アロマチックＨ），５．７〜５．６（ｍ，１Ｈ， ５．１８（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ａ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），
５．１５〜５．０２（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ＝ＣＨ_２），
５．０３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ｂ，Ｊ＝０．５Ｈｚ），
１．９９，１．９８，１．９７，１．８３（４×Ｓ，４
×３Ｈ，４×ＯＡｃ） 参考例２ 化合物（２）の合成 二糖（Ｃ）１５４ｍｇ（０．２ｍＭ）及び１−Ｓ−メチ
ル−Ｌ−フコース（Ｄ）１３９ｍｇを、無水エーテル６
ｍに溶解し、事前に十分乾燥した、Ｍ．Ｓ．４Ａ５０
０ｍｇの入った褐色三経フラスコにアルゴンガス気流下
注入した。この反応溶液に、氷冷下、メチルトリフレー
ト７０μを滴下し、終夜撹拌した。

反応混合物をろ過し、ろ液を飽和食塩水で洗浄後、硫酸
マグネシウムにて乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣
の油状物を、カラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／
ヘキサン＝１／６で展開）にて精製し、油状物１８２ｍ
ｇ（収率７６．８％）を得た。メタノールにより結晶化
した。

〔化合物（２）の性質〕 ｍ．ｐ． １６４−５℃ Ｒｆ＝０．５６（酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／１） 元素分析値（Ｃ_６５Ｈ_７１ＮＯ_２０＝１１８６．２８５
として） 理論値 Ｃ：６５．８１，Ｈ：６．０３，Ｎ：１．１８ 実測値 Ｃ：６６．２０，Ｈ：６．１６，Ｎ：１．２４ 旋光度▲〔α〕²³ _D▼＋３．３゜（Ｃ＝０．９１ ＣＨ
Ｃｌ_３） ＮＭＲ （δ）ＣＤＣｌ_３：７．８〜７．０（ｍ，９
Ｈ，アロマチックＨ），５．７〜５．６（ｍ，１Ｈ， ５．１０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ａ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），
２．０２，２．００，１．９５ １．８２（４×Ｓ，４
×３Ｈ，４×ＯＡｃ），１．１９（ｄ，３Ｈ，−Ｃ
Ｈ_３，Ｊ＝６．６Ｈｚ） 参考例３ 化合物（３）の合成 三糖（２）１．０ｇ（０．８４３ｍＭ）を、水−ジオキ
サン混合溶液（１０ｍ／２０ｍ）に溶解し、これに
オスミウムテトラオキサイドの０．３９Ｍ−ジオキサン
溶液を３ｍ加えた。室温撹拌下、メタ過ヨウ素酸ナト
リウム粉末４００ｍｇを加え、１時間撹拌した。反応溶
液を酢酸エチルで抽出し、水、飽和食塩水で順次洗浄
後、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。
残渣の油状物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル
／トルエン＝１／１で展開）にて精製し、油状物７４０
ｍｇ（収率７４％）を得た。

元素分析値（Ｃ_６４Ｈ_６９ＮＯ_２１＝１１８８．２５７
として） 理論値 Ｃ：６４．６９，Ｈ：５．８５，Ｎ：１．１８ 実測値 Ｃ：６４．６４，Ｈ：５．７８，Ｎ：１．１８ 旋光度▲〔α〕²³ _D▼−７．０゜（Ｃ＝０．６０ ＣＨ
Ｃｌ_３） Ｒｆ＝０．３７（酢酸エチル／トルエン＝１／１） ＮＭＲ （δ）ＣＤＣｌ_３（ＰＰＭ） ９．５６（ｓ，１Ｈ，−ＣＨＯ），７．８−７．０
（ｍ，２４Ｈ，アロマテックプロトン），５．１１
（ｄ，１Ｈ，５．１１（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ａ，Ｊ＝８．
６７Ｈｚ），２．０１，２．００，１．９４，１．８２
（４×ｓ，４×３Ｈ，４×−ＯＣＯＣＨ_３），１．１９
（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ_３，Ｊ＝６．５８Ｈｚ） 参考例４ 化合物（４）の合成 化合物（３）２１５ｍｇ（０．１８ｍＭ）をｎ−プロピ
ルアルコール５ｍに溶解し、これに酢酸エチルを３滴
々下した。氷冷下、この溶液に、水素化ホウ素ナトリウ
ムの０．１Ｍｎ−プロピルアルコール溶液１ｍを加
え、１時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで抽出し、
水、飽和食塩水で順次、洗浄後、硫酸マグネシウムで乾
燥後、減圧下留去し、油状物２１０ｍｇ（収率９８％）
を得た。Ｒｆ＝０．５２（酢酸エチル／トルエン＝２／
１） このものは精製することなく次の反応へと導いた。

ＮＭＲ（δ）ＣＤＣｌ_３（ＰＰＭ） ７．８−７．０（ｍ，２４Ｈ，アロマテック），５．１
３（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ａ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），１．１
９，２．００，１．９８，１．９４，１．８３（４×
ｓ，４×３Ｈ，４×−ＯＣＯＣＨ_３），１．１９（ｄ，
３Ｈ，−ＣＨ_３，Ｊ＝６．４１Ｈｚ） 参考例５ 化合物（５）の合成 化合物（４）１１９ｍｇ（０．１ｍＭ）をエチルビニル
エーテル７２ｍｇ（１ｍＭ）をジクロロメタン２ｍに
溶解し、触媒量のピリジニウム、ｐ−トルエンスルホン
酸（ＰＰＴＳ）を加え、室温にて、１時間撹拌した。反
応終了後クロロホルムで抽出し、水で洗浄後、硫酸マグ
ネシウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣の油状
物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／トルエン
＝１／２で展開）にて、精製し、油状物９８ｍｇ（収率
７６．１％）を得た。

Ｒｆ＝０．６１（酢酸エチル／トルエン＝１／１） ＮＭＲ（δ）ＣＤＣｌ_３（ＰＰＭ） ７．７−７．０（ｍ，２４Ｈ，アロマテック）， ２．０，１．９９，１．９４，１．８２（４×ｓ，４×
３Ｈ，４×−ＯＣＯＣＨ_３）， １．１９（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ_３，Ｊ＝６．４Ｈｚ） ０．９８，０．９６（ｍ，６Ｈ， 参考例６ 化合物（６）の合成 化合物（５）９１ｍｇ（０．０７２ｍＭ）を２％ヒドラ
ジン水和物−エタノール５ｍに溶解し、終夜還流撹拌
した。反応溶媒を減圧下留去し、残渣の油状物を、無水
酢酸／ピリジン／４−ジメチルアミノピリジン（０．５
ｍ／０．５ｍ／触媒量）を溶解し、３時間撹拌し
た。反応溶液を酢酸エチルで希釈後、１Ｎ塩酸、飽和食
塩水で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を
減圧留去し、残渣の油状物をカラムクロマトグラフィー
（酢酸エチル／トルエン＝２／１で展開）にて精製し、
油状物５６．５ｍｇ（収率６７％）を得た。

Ｒｆ＝０．３４（酢酸エチル／トルエン＝３／１） ＮＭＲ（δ）ＣＤＣｌ_３（ＰＰＭ） ７．５−７．１（ｍ，２０Ｈ，アロマテック），５．８
３（ｄ，１Ｈ，−ＮＨ，Ｊ＝６Ｈｚ），２．０−１．８
（５×ｓ，５×３Ｈ，５×−ＯＣＯＣＨ_３），１．１９
（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ_３，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．３−
１．０（ｍ，６Ｈ， 参考例７ 化合物（７）の合成 化合物（６）５６ｍｇ（０．０４７７ｍＭ）をメタノー
ル２ｍに溶解し、アンバーリスト５０ｍｇを加え、室
温にて、１．５時間撹拌した。反応終了後、不溶物をろ
去し、ろ液を減圧留去した。油状物４６．７ｍｇ（収率
８９％） Ｒｆ＝０．１７（酢酸エチル） 旋光度 ▲〔α〕²⁷ _D▼−４８．６゜（Ｃ＝０．５６
ＣＨＣｌ_３） 元素分析値（Ｃ_５８Ｈ_７１ＮＯ_２０・Ｈ_２Ｏ＝１１２
０．２２２として） 理論値 Ｃ：６２．１９，Ｈ：６．５７，Ｎ：１．２５ 実測値 Ｃ：６２．４３，Ｈ：６．４３，Ｎ：１．２５ ＮＭＲ（δ）ＣＤＣｌ_３（ＰＰＭ） ７．４５−７．２５（ｍ，２０Ｈ，アロマテック），
６．２８（ｄ，１Ｈ，−ＮＨ，Ｊ＝８．５４Ｈｚ），
２．０３，１．９９，１．９７，１．８９（５×ｓ，５
×３Ｈ，５×ＣＯＣＨ_３） １．０７（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ_３，Ｊ＝６．４１Ｈｚ） 実施例１ 化合物（８）の合成 アゼライン酸エチルエステル４０ｍｇ（０．１８ｍ
Ｍ）、ジフェニルホスホリルアジド５０ｍｇ（０．１８
ｍＭ）、及びトリエチルアミン２５ｍｇ（０．２４ｍ
Ｍ）をトルエン２ｍに溶解し、室温で３０分撹拌後、
１時間還流撹拌した。冷却後、この反応溶液に、化合物
（７）５０ｍｇ（０．０４５ｍＭ）を加え、終夜還流撹
拌した。反応溶液を、水洗後、硫酸マグネシウムで乾燥
し、溶媒を減圧留去し、残渣の油状物をカラムクロマト
グラフィー（酢酸エチル／トルエン＝２／１で展開）に
て精製し、油状物１７．５ｍｇ（収率２９．７％）を得
た。

Ｒｆ＝０．３８（酢酸エチル／トルエン＝４／１） 旋光度 ▲〔α〕²⁹ _D▼−２７．０゜（Ｃ＝０．８ Ｃ
ＨＣｌ_３） ＮＭＲ（δ）ＣＤＣｌ_３（ＰＰＭ） ７．５−７．１（ｍ，２０Ｈ，アロマテック），５．９
（ｄ，１Ｈ，−ＮＨ，Ｊ＝８Ｈｚ），３．１（ｍ，２
Ｈ，−ＮＣＨ_２−），２．３（ｔ，２Ｈ，−ＣＨ_２ＣＯ
_２，Ｊ＝７Ｈｚ），２．０５−１．８（５×ｓ，５×３
Ｈ，５×ＣＯＣＨ_３），１．２７（ｔ，３Ｈ，ＣＯ_２Ｃ
Ｈ_２ＣＨ_３，Ｊ＝７Ｈｚ），１．２０（ｄ，３Ｈ，−Ｃ
Ｈ_３，Ｊ＝６Ｈｚ） 実施例２ 化合物（９）の合成 水素ガス気流下、化合物（８）１５．７ｍｇ（０．０１
２ｍＭ）及び１０％Ｐｄ−Ｃ２０ｍｇのエタノール溶液
２ｍを室温にて、終夜撹拌した。反応終了後、触媒を
ろ去し、エタノールを濃縮後、残渣の油状物を無水酢酸
／ピリジン／４−ジメチルアミノピリジン（０．３ｍ
／０．３ｍ／触媒量）に溶解し、室温にて、５時間撹
拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、１Ｎ塩酸、飽和
食塩水で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒
を留去し、残渣の油状物をカラムクロマトグラフィー
（トルエン／アセトン＝３／１で展開）で精製し、１
０．０ｍｇ（収率７４％）の油状物を得た。

Ｒｆ＝０．４８（トルエン／アセトン＝３／２） 旋光度 ▲〔α〕²⁶ _D▼−６４．８゜（Ｃ＝０．５ Ｃ
ＨＣｌ_３） ＮＭＲ（δ）ＣＤＣｌ_３（ＰＰＭ） ５．８８（ｄ，１Ｈ，−ＮＨ，Ｊ＝８．２４Ｈｚ），
３．１４（ｍ，２Ｈ，ＮＣＨ_２−），２−２９（ｔ，２
Ｈ，−ＣＨ_２ＣＯ_２Ｅｔ，Ｊ＝７．６３Ｈｚ），２．２
０−１．９５（９×ｓ，９×３Ｈ，９×−ＣＯＣ
Ｈ_３），１．２５（ｔ，３Ｈ，−ＣＯ_２ＣＨ_２ＣＨ_３，
Ｊ＝７．０１Ｈｚ），１．２０（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ_３，
Ｊ＝６．４１Ｈｚ） 実施例３ 化合物（１）の合成 化合物（９）９．６ｍｇ（０．００８５ｍＭ）のメタノ
ール溶液（２ｍ）に０．１Ｎナトリウムメチラートメ
タノール溶液０．２ｍを加え、終夜撹拌した。反応溶
液にアンバーリスト１５を加え、中性としたのち、濾過
し、濾液を減圧留去した。残渣を、セファデックスＧ−
１０（蒸留水で展開）にて精製後、凍結乾燥し、化合物
（１）を、６．６ｍｇ（１００％）得た。

Ｒｆ＝０．５５（ｎ−ブタノール／エタノール／水＝２
／１／１） 旋光度 ▲〔α〕²⁶ _D▼−５３．４゜（Ｃ＝０．３２
メタノール） ＮＭＲ（δ）Ｄ_２Ｏ（ＰＰＭ）アセトン＝２．２２ＰＰ
Ｍとして ５．１０（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ｃ，Ｊ＝３．９７Ｈｚ），
４．７８（ｑ，１Ｈ，Ｈ−５ｃ，Ｊ＝６．７２Ｈｚ），
４．５７（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ａ，Ｊ＝７．６３Ｈｚ），
４．４４（ｄ，１Ｈ，Ｈ−１ｂ，Ｊ＝７．９４Ｈｚ）
３．１０（ｔ，２Ｈ，ＮＣＨ_２−，Ｊ＝７．０Ｈｚ），
２．３８（ｔ，２Ｈ，−ＣＨ_２ＣＯ_２Ｍｅ，Ｊ＝７．３
２Ｈｚ），２．００（ｓ，３Ｈ，−ＮＣＯＣＨ_３），
１．１７（ｄ，３Ｈ，−ＣＨ_３，Ｊ＝６．４１Ｈｚ） 元素分析値（Ｃ_３２Ｈ_５６Ｎ_２Ｏ_１９＝７９０．８２ 理論値 Ｃ：４８．６０，Ｈ：７．３９，Ｎ：３．５４ 実測値 Ｃ：４８．５０，Ｈ：７．００，Ｎ：３．２０

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 佐藤 進 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社研究所内 (72)発明者 森沢 靖弘 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社研究所内 (56)参考文献 特開 昭58−15993（ＪＰ，Ａ)

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式〔Ｉ〕で表わされるＸ−抗原決定基
   を有するハプテン。 （ただし、Ｒ^１は水素原子又はアセチル基であり、Ｒ^２
   は水酸基、アセチルオキシ基又はベンジルオキシ基であ
   り、Ｒ^３は −ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｒ^６（Ｒ^６はメ
   チル基又はエチル基である。）であり、Ｒ^４は−ＮＨＡ
   ｃ基であり、Ｒ^５は水酸基、アセチルオキシ基又はベン
   ジルオキシ基である。）
2. 【請求項２】一般式〔Ｉ〕で表わされる化合物（６）
   （ただし、式中Ｒ^１はアセチル基であり、Ｒ^２はベンジ
   ルオキシ基であり、Ｒ^３は−ＣＨ_２ＯＥＥ基（ただしＥ
   Ｅはエトキシエチル基を示す）であり、Ｒ^４は−ＮＨＡ
   ｃ基であり、Ｒ^５はベンジルオキシ基である）を酸性物
   質と反応させ、一般式〔Ｉ〕で表わされる化合物（７）
   （ただし、式中Ｒ^１はアセチル基であり、Ｒ^２はベンジ
   ルオキシ基であり、Ｒ^３は−ＣＨ_２ＯＨ基であり、Ｒ^４
   は−ＮＨＡｃ基であり、Ｒ^５はベンジルオキシ基であ
   る）を得、次いで、化合物（７）を ＯＣＮ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｃ_２Ｈ_５と反応させることか
   らなる一般式〔Ｉ〕で表わされる化合物（８）（ただし
   式中Ｒ^１はアセチル基であり、Ｒ^２はベンジルオキシ基
   であり、Ｒ^３は −ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｃ_２Ｈ_５基であ
   り、Ｒ^４は−ＮＨＡｃ基であり、Ｒ^５はベンジルオキシ
   基である）の製造法。
3. 【請求項３】酸性物質がＨ型のイオン交換樹脂である特
   許請求の範囲第（２）項記載の製造法。
4. 【請求項４】酸性物質が無機酸又は有機酸である特許請
   求の範囲第（２）項記載の製造法。
5. 【請求項５】一般式〔Ｉ〕で表わされる化合物（８）
   （ただし、式中Ｒ^１はアセチル基であり、Ｒ^２はベンジ
   ルオキシ基であり、Ｒ^３は −ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｃ_２Ｈ_５基であ
   り、Ｒ^４は−ＮＨＡｃ基であり、Ｒ^５はベンジルオキシ
   基である）を還元し、次いで得られた還元生成物をアセ
   チル化することからなる一般式〔Ｉ〕で表わされる化合
   物（９）（ただし式中Ｒ^１はアセチル基であり、Ｒ^２は
   アセチルオキシ基であり、Ｒ^３は −ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｃ_２Ｈ_５基であ
   り、Ｒ^４は−ＮＨＡｃ基であり、Ｒ^５はアセチルオキシ
   基である）の製造法。
6. 【請求項６】還元を還元触媒の存在下水素によって行う
   特許請求の範囲第（５）項記載の製造法。
7. 【請求項７】還元触媒がＲｈ触媒、Ｐｔ触媒又はＰｄ触
   媒である特許請求の範囲第（６）項記載の製造法。
8. 【請求項８】アセチル化を無水酢酸、ピリジン及び４−
   ジメチルアミノピリジンの系を用いて行う特許請求の範
   囲第（７）項記載の製造法。
9. 【請求項９】一般式〔Ｉ〕の化合物（９）（ただし、式
   中Ｒ^１はアセチル基であり、Ｒ^２はアセチルオキシ基で
   あり、Ｒ^３は −ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２Ｃ_２Ｈ_５基であ
   り、Ｒ^４は−ＮＨＡｃ基であり、Ｒ^５はアセチルオキシ
   基である）をアルカリメトキサイドと反応させることか
   らなる一般式〔Ｉ〕で表わされる化合物（１）（ただし
   式中Ｒ^１は水素原子であり、Ｒ^２は水酸基であり、Ｒ^３
   は −ＣＨ_２ＯＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_７ＣＯ_２ＣＨ_３基であ
   り、Ｒ^４は−ＮＨＡｃ基であり、Ｒ^５は水酸基である）
   の製造法。
10. 【請求項１０】アルカリメトキサイドとしてＮａＯＣＨ
    _３を用いる特許請求の範囲第（９）記載の製造法。