JPH0558639B2

JPH0558639B2 -

Info

Publication number: JPH0558639B2
Application number: JP27767985A
Authority: JP
Inventors: Tomoya Ogawa; Yukinari Ito
Original assignee: RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Current assignee: RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Priority date: 1985-12-10
Filing date: 1985-12-10
Publication date: 1993-08-27
Also published as: JPS62138497A

Description

【発明の詳細な説明】

〔発明の分野〕本発明は、ラクト−ガングリオ系列のスフイン
ゴ糖脂質およびその糖鎖部分を構成する４糖化合
物ならびにそれらの製造法に関する。〔発明の背景〕スフインゴ糖脂質には、ラクト系統とガングリ
オ系統があることは知られていたが、両者の混合
型の構造をもつものは単離されていなかつた。し
かし、最近、ネズミの未分化培養白血病細胞から
ラクトシルセラミドのガラクトース残基上で分枝
構造を有する特異な構造をもつ糖脂質が単離さ
れ、次の構造式（）が提出された（R.カンナ
ギら、ジヤーナル・オブ・バイオロジカル・ケミ
ストリー（J.Biol.Chem.）、（1984）259、8444）。
しかしながらセラミド部分のアルキル基（R¹、
R²）については明らかにされていない。本発明者は、上記提出された構造の確認とその
生物機能の検討を目的として合成経路の開択研究
を行い本発明を完成するに至つた。〔発明の目的〕本発明の目的は、ラクトーガングリオ系列のス
フインゴ糖脂質（）、この糖脂質（）の糖鎖
部分を構成する４糖化合物、その製造方法、該４
糖化合物からスフインゴ糖脂質（）を合成する
方法を提供することである。〔発明の構成〕本発明の目的化合物は次の一般式で表される。〔式中、R¹は水酸基、ベンジルオキシ基、アセ
チルオキシ基、ハロゲン原子または

〔有用性〕

本発明の化合物は、ラクト−ガングリオ系列ス
フインゴ等脂質合成の有用な中間体であり、また
該糖脂質の生物機能を解明するための有用な試薬
となりうるものである。本発明の化合物はまた、
他の動物の未分化培養白血病細胞から単離される
ことが予想され、従つてこれに関連する抗体およ
び免疫吸着体を作成することにより、これら悪性
腫瘍の診断、治療への応用が期待できる。更にま
た、生体膜に挿入することにより、人工的に機能
性を変化させた生体膜の創製が可能となる。実施例１モレキユラー・シーブMS4A10ｇとｓ−コリジ
ン0.60ml（4.54ミリモル）のCH₃NO₂50ml懸濁液
をアルゴン気流中で攪拌した。これに、化合物(1)
1.80ｇ（3.61ミリモル）と化合物(2)2.00ｇ（2.26
ミリモル）のCH₃NO₂（10ml）溶液を滴下した。 −23℃、２分間攪拌後、Agトリフレート1.17
ｇ（4.55ミリモル）のCH₃NO₂（10ml）溶液を加
え、−23℃で３時間、次いで室温で２時間攪拌し
た。得られた混合物を、セライトを通して過
し、液を50mlの水で洗浄した。水層を50mlエー
テルで抽出し、有機層を集めて、0.2NHCl50ml、
飽和NaHCO₃水溶液50ml及び食塩水50mlで順次
洗浄した。MgSO₄で乾燥、濃縮後、フラツシ
ユ・クロマトグラフイー（ヘキサン／酢酸エチル
＝３／２）で精製を行つて、化合物(3)2.11ｇ（収
率72％）及び化合物(4)0.682ｇ（収率23％）を得
た。〔化合物(3)の物理的性質〕 Rf値：0.60（ヘキサン／酢酸エチル＝１）元素分析：計算値（C₇₄H₇₇O₂₀N）Ｃ：68.35、Ｈ：5.97、Ｎ：1.08 実測値Ｃ：68.22、Ｈ：6.00、Ｎ：0.87 比旋光度：〔α〕²⁰ _D＋20.6°（Ｃ 0.79、CHCl₃）¹ H−NMR：（400MHz、CDCl₃：δ、ppm） 5.783（dd、9.2and10.6Hz、Ｈ−3c） 5.595（ｄ、8.3Hz、Ｈ−1c） 5.144（ｔ、9.2Hz、Ｈ−4c） 3.01（ｍ、1H） 2.05（ｓ、3H、CH₃ CO） 2.04（ｓ、3H、CH₃ CO） 1.83（ｓ、3H、CH₃ CO）¹³ C−NMR：（22.5MHz、CDCl₃：δ、ppm） 102.56、101.97、98.77、84.31 82.95、81.92、62.20、54.83 〔化合物(4)の物理的性質〕 Rf値：0.38（ヘキサン／酢酸エチル＝１）元素分析：計算値（C₇₄H₇₇O₂₀N）Ｃ：68.35、Ｈ：5.97、Ｎ：1.08 実測値Ｃ：68.12、Ｈ：5.99、Ｎ：1.08 比旋光度：〔α〕²⁰ _D＋3.3°（Ｃ 0.75、CHCl₃）¹ H−NMR：（400MHz、CDCl₃：δ、ppm） 6.024（dd、9.0and10.7Hz、Ｈ−3c） 5.524（ｄ、8.3Hz、Ｈ−1c） 5.217（ｔ、9.6Hz、Ｈ−4c） 2.98（ｍ、1H） 2.091（ｓ、CH₃ CO） 2.037（ｓ、CH₃ CO） 1.864（ｓ、CH₃ CO）¹³ C−NMR：（22.5MHz、CDCl₃：δ、ppm） 102.62、101.97、99.48、82.73 81.81、81.11、61.98、55.05 実施例２ AgシリケートとMS4Aを、１，２−ジクロル
エタン30mlに懸濁させ、アルゴン気流中、−15℃
で攪拌した。化合物(3)1.141ｇ（0.879ミリグラ
ム）の１，２−ジクロルエタン（10ml）溶液と化
合物(5)0.952ｇ（1.91ミリモル）の１，２−ジク
ロルエタン（10ml）溶液を順次滴下した。−15℃
で30分、０℃で1.5時間それから室温で一夜攪拌
し、得られた混合物をジクロルメタン50mlで希釈
し、セライトを通して過した。液を飽和
NaHCO₃水溶液50ml及び食塩水50mlで順次洗浄
し、MgSO₄で乾燥、濃縮後、フラツシユ・クロ
マトグラフイー（ヘキサン／酢酸エチル＝５／
４）で精製して、化合物(6)1.143ｇ（収率76％）
を得た。〔化合物(6)の物理的性質〕 Rf値：0.52（ヘキサン／酢酸エチル＝５／６）元素分析：計算値（C₉₄H₉₆O₂₉N₂）Ｃ：65.04、Ｈ：5.69、Ｎ：1.61 実測値Ｃ：65.12、Ｈ：5.61、Ｎ：1.61 比旋光度：〔α〕²⁰ _D＋32.3°（Ｃ 0.63、CHCl₃）¹ H−NMR：（400MHz、CDCl₃：δ、ppm） 6.110（dd、3.4and11.6 Hz、Ｈ−3c） 5.957（ｄ、8.51Hz、Ｈ−1c） 5.617（ｄ、7.9Hz、Ｈ−1d） 5.585（ｔ、9.6Hz、Ｈ−3d） 5.555（ｄ、3.4Hz、Ｈ−4c） 5.297（ｔ、9.6Hz、Ｈ−4d） 4.619（dd、8.4and11.7Hz、Ｈ−2c） 3.92（ｍ、1H） 2.826（dd、7.3and9.8Hz、Ｈ−2b）¹³ C−NMR：（22.5MHz、CDCl₃；δ、ppm） 102.40、101.48、100.83、98.12、 85.55、83.01、81.81、62.15、 61.44、54.99、51.58 実施例３化合物(6)319mg（0.186ミリモル）を２−プロパ
ノール−水（５：１）（12ml）懸濁した。
NaBH₄240mg（6.34ミリモル）を一度に加え、混
合物を、20〜25℃で24時間攪拌した。その間、白
いガム状沈澱が遊離した。酢酸５mlを注意深く加
え、その溶液を100〜110℃で4.5時間加熱した。
室温に冷却後、混合物を減圧下溶媒留去し、メタ
ノール（20mlで３回）トルエン（20mlで３回）を
用いて、順次、減圧下溶媒留去を行つた。残渣を
真空中で充分乾燥し、１，２−ジクロルエタン20
mlに懸濁した。ピリジン0.5ml（34ミリモル）、無
水酢酸0.5ml（28ミリモル）及び４−ジメチルア
ミノピリジン20mg（0.16ミリモル）を加えて、室
温で一夜攪拌した。得られた混合物を酢酸エチル
50mgで希釈し、氷水を加えた。室温で10分間攪拌
した後、層を分離し、水層を酢酸エチル30mgで抽
出し、有機層を合わせて食塩水で洗浄した。 MgSO₄で乾燥、濃縮後、フラツシユ・クロマ
トグラフイーで精製し、化合物(7)273mg（収率95
％）を得た。〔化合物(7)の物理的性質〕 Rf値：0.25（エーテル／酢酸エチル＝５／２）元素分析：計算値（C₈₂H₉₆O₂₇N₂）Ｃ：63.89、Ｈ：6.28、Ｎ：1.82 実測値Ｃ：63.64、Ｈ：6.36、Ｎ：1.75 比旋光度：〔α〕²⁰ _D−18.2°（Ｃ 0.73、CHCl₃）¹ H−NMR：（400MHz、CDCl₃；δ、ppm） 5.41（br、1H、NH） 5.351（ｄ、9.2Hz、NH） 2.232、2.070、2.042、1.990、1.987 and1.956（６ｓ、8CH₃ CO）¹³ C−NMR：：（22.5MHz、CDCl₃；δ、ppm） 103.27、102.62、102.23、101.80 82.46、81.87、80.19 実施例４化合物(7)540mg（0.332ミリモル）、ギ酸３ml
（80ミリモル）及び10％Pd−c450mgを30mlのメタ
ノールに懸濁した混合物を、窒素気流中、35−40
℃で２時間攪拌した。２時間後Pd−ｃを別し、
液を溶媒留去し、次いでエタノール（30mlで２
回）を用いて、再度、減圧下溶媒留去を行つた。
残渣をメタノール20mlに溶解し、K₂CO₃150mg
（1.08ミリモル）を加えた。室温で３時間攪拌後、
酢酸２mlを加えて、濃縮を行つた。残渣を充分真
空乾燥した後、ピリジン10mlと無水酢酸５mlの溶
液に懸濁した。これに、４−ジメチルアミノピリ
ジン10ml（0.08ミリモル）を加え、その混合物を
室温で２時間攪拌した。氷水30ml及び酢酸エチル
50mlを加え、室温で10分間攪拌した後、層を分離
した。水層を酢酸エチル50mlで抽出し、有機層を
合わせ、次いで食塩水で洗浄した。MgSO₄で乾
燥後、濃縮し、残渣に、トルエン50mlを加え、減
圧下溶媒留去し、次いでフラツシユ・クロマトグ
ラフイー（CH₂Cl₂／アセトン＝３／２）で精製
して化合物(8)412mg（収率94％）を得た。〔化合物(8)の物理的性質〕 Rf値：0.44（CH₂Cl₂／アセトン＝３／２）元素分析：計算値（C₅₂H₇₂O₃₃N₂）Ｃ：49.84、Ｈ：5.79、Ｎ：2.24 実測値Ｃ：49.94、Ｈ：5.79、Ｎ：2.22¹ H−NMR：（400MHz、CDCl₃；δ、ppm） 6.90（br、1H、NH） 6.260（ｄ、3.7Hz、Ｈ−1a、α−isomer） 6.18（br、1H、NH） 5.647（ｄ、8.2Hz、Ｈ−1a、β−isomer） 5.207（ｄ、8.6Hz、Ｈ−1d） 5.060（ｄ、9.5Hz、Ｈ−1c） 4.75（ｍ、1H） 1.9−2.2（42H、14CH₃ CO）実施例５酢酸ヒドラジン35mg（0.38ミリモル）のジメチ
ルホルムアミド（２ml）溶液を窒素気流中、50℃
で攪拌した。これに化合物(8)400mg（0.319ミリモ
ル）のジメチルホルムアミド（３ml）溶液を一度
に加え、更に同温で10分間攪拌した。得られた混
合物を酢酸エチル50mlで希釈し、次いで水30mlで
洗浄した。水層を酢酸エチル50mlで抽出し、有機
層を合わせて、食塩水で洗浄した。MgSO₄で乾
燥、濃縮後、フラツシユクロマトグラフイー
（CH₂Cl₂／アセトン＝３／２）で精製して化合物
(9)257mg（収率67％）を得た。〔化合物(9)の物理的性質〕 Rf値：0.26（CH₂Cl₂／アセトン＝１）元素分析：計算値（C₅₀H₇₀O₃₃N₂）Ｃ：49.59、Ｈ：5.83、Ｎ：2.32 実測値Ｃ：49.44、Ｈ：5.85、Ｎ：2.32¹ H−NMR：（90MHz、CDCl₃；δ、ppm） 6.92（bd、７Hz、NH） 6.40（bd、７Hz、NH） 2.63（bs、OH） 1.9−2.2（39H、13CH₃CO）実施例６化合物(9)45.2mg（0.0373ミリモル）の１，２−
ジメトキシエタン（２ml）懸濁液を、アルゴン気
流中、−20℃で攪拌した。これに、ジメチルアミ
ノサルフアートソフルオライド20μ（0.16ミリ
モル）を加えた。その後、1.5時間室温で攪拌した後、得られた
淡黄色の溶液を、酢酸エチル（20ml）と氷水（20
ml）の混合液中に、攪拌しながら注ぎ込んだ。層
を分離し、水層を酢酸エチル20mlで抽出した。有
機層を合わせ、食塩水（20ml）で洗浄し、
MgSO₄で乾燥した。濃縮後、残渣をフラツシ
ユ・クロマトグラフイー（CH₂Cl₂／アセトン＝
２）で精製し、化合物(10)34.6mg（収率76％）を得
た。〔化合物(10)の物理的性質〕 Rf値：0.41及び0.36 （CH₂Cl₂／アセトン＝３／２）元素分析：計算値（C₅₀H₆₉O₃₁N₂F）Ｃ：49.51、Ｈ：5.73、Ｎ：2.31 実測値Ｃ：49.74、Ｈ：5.85、Ｎ：2.20¹ H−NMR：（400MHz、CDCl₃；δ、ppm） 6.777（ｄ、8.6Hz、NH） 6.159（ｄ、8.1Hz、NH） 5.64（dd、2and53Hz、Ｈ−1a、α−isomer） 5.28（dd、5.4and ca50Hz、Ｈ−1a、β−
isomer） 5.181（ｄ、8.6Hz、Ｈ−1d） 5.030（ｄ、9.5Hz、Ｈ−1c） 4.725（ｄ、8.3Hz、Ｈ−1b） 4.48（dd、3and9.7Hz、Ｈ−3b） 1.9−2.2（39H、13CH₃CO）実施例７ AgClO₄7.5mg（0.036ミリモル）、SnCl₂7.5mg
（0.04ミリモル）及びMS4A200mgを１，２−ジメ
トキシエタン１mlに懸濁し、アルゴン気流中−20
℃で攪拌する。これに、化合物(10)15.6mg（0.0129
ミリモル）及び化合物(12)10.8mg（0.0143ミリモ
ル）のCHCl₃（１ml）溶液を加えた。混合物を、
２時間かけて徐々に温度を上げ、室温にし、１時
間攪拌した。再度−20℃に冷却し、トリメチルシ
リルトリフレート5μ（0.026ミリモル）を加え、
室温で3.5時間攪拌後、反応混合物をセライトを
通して過した。不溶物を酢酸エチル20mlで充分
洗浄した。液を合わせ、飽和NaHCO₃水溶液
10ml及び食塩水10mlで順次洗浄した。MgSO₄で
乾燥、濃縮後、フラツシユ・クロマトグラフイー
（CH₂Cl₂／アセトン＝２及びトルエン／アセトン
＝３／２）で精製して、化合物(14)5.5mg（収率22
％）を得た。実施例８化合物(14)2.9mg（0.0015ミリモル）をメタノー
ルテトラヒドロフラン（１：１）0.5mlに溶解し
た。更に、ナトリウムメチラート（メタノール
中、1M）100μ（0.01ミリモル）を加え、窒素
気流中、室温で攪拌した。５時間攪拌後、反応混
合物をアンバーリスト（Amberlist）15で中和
し、過した。液を濃縮して化合物(15)1.8mg
（収率78％）を得た。〔化合物(15)の物理的性質〕¹ H−NMR：（400MHz、DMSO.d₆／D₂O；δ、
ppm） 4.65（ｄ、９Hz、Ｈ−1d） 4.45（ｄ、８Hz、Ｈ−1c） 4.23（ｄ、８Hz、Ｈ−1b） 4.16（ｄ、７Hz、Ｈ−1a）〔化合物(14)の物理的性質〕 Rf値：0.49（CH₂Cl₂／アセトン＝２）元素分析：計算値（C₉₉H₁₅₅O₃₅N₃）Ｃ：61.06、Ｈ：8.02、Ｎ：2.16 実測値Ｃ：60.65、Ｈ：7.56、Ｎ：1.98 比旋光度：〔α〕²² _D−7.2°（Ｃ 0.36、CHCl₃）¹ H−NMR：（400MHz、CDCl₃；δ、ppm） 6.84（bs、NH） 6.16（bs、NH） 5.868（dt、6and 16Hz、Ｈ−5′） 5.752（ｄ、9.3Hz、NH） 5.401（ｄ、３Hz、Ｈ−4c） 5.203（ｄ、8.5Hz、Ｈ−1d） 4.49（ｍ、1H、Ｈ−2′） 4.415（ｄ、７Hz、Ｈ−1a） 2.179、2.123、2.085、2.064、2.052、2.028、
2.013、1.997、1.922and1.896（10s、13
CH₃CO） 1.253（ｓ、67H） 0.879（ｔ、3H、6.8Hz、CH₃）

Claims

【特許請求の範囲】１次の一般式で表される化合物。〔式中、R¹は水酸基、ベンジルオキシ基、アセ
チルオキシ基、ハロゲン原子または【式】（R⁶は水素原子またはベンゾイル基、R⁷はアル
キル基、R⁸はアルキル基を示す）を示し、R²は
水素原子、ベンジル基またはアセチル基を示し、
R³は水素原子またはアセチル基を示し、R⁴は水
素原子、R⁵はアセチル基を示すか、あるいはR⁴
とR⁵が共同してフタロイル基を示す。〕２式(3)：（式中Acはアセチル基、Bnはベンジル基、Phth
はフタロイル基を示す）で表される化合物(3)と、
式(5)：（Ｘはハロゲン原子を示す）で表される化合物(5)
を、グリコシル化触媒存在下に反応させ、必要に
より脱フタロイル化およびアセチル化することを
特徴とする次式で表される化合物の製造法。（式中R¹は水素原子、R²はアセチル基、または
R¹とR²が共同してフタロイル基を示し、Acはア
セチル基、Bnはベンジル基を示す。）３式(7) （式中Acはアセチル基、Bnはベンジル基を示
す）で表される化合物(7)を脱ベンジル化した後、アセ
チル化して化合物(8)を得、化合物(8)をヒドラジ
ン／酢酸で処理して化合物(9)を得、化合物(9)をハ
ロゲン化剤で処理して化合物(10)を得、 (8) R¹＝OAc (9) R¹＝OH (10) R¹＝ハロゲン化合物(10)を、式(12)：（R²はベンゾイル基、R⁵およびR⁶は同一でも異
なつていてもよいアルキル基を示す）で表される
化合物(12)と反応させ、必要により保護基を脱離す
ることを特徴とする次式で表される化合物の製造
法。（式中R³は水素原子またはベンゾイル基を示し、
R⁴は水素原子またはアセチル基を示す。）