JPH0630568B2 - 氷核形成活性をもつ微生物の回収方法 - Google Patents
氷核形成活性をもつ微生物の回収方法Info
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- JPH0630568B2 JPH0630568B2 JP1053066A JP5306689A JPH0630568B2 JP H0630568 B2 JPH0630568 B2 JP H0630568B2 JP 1053066 A JP1053066 A JP 1053066A JP 5306689 A JP5306689 A JP 5306689A JP H0630568 B2 JPH0630568 B2 JP H0630568B2
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- temperature
- microorganisms
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- product
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、氷核形成活性(ice nucleating activity:IN
A)をもつ微生物を、その微生物を含有する培地から、乾
燥形態で回収する方法に関する。
A)をもつ微生物を、その微生物を含有する培地から、乾
燥形態で回収する方法に関する。
米国特許第4,200,228号明細書には雪を製造するる方法
が開示されており、この方法によれば空気中に噴霧され
る小滴中に微生物が含まれている。使用されている微生
物は氷核形成を促進することが知られている種類のもの
である。その結果、通常の温度より可成り高い温度で雪
を製造することができる。このプロセスに有用な代表的
な微生物はシュードモナス(Pseudomonas)、更に詳しく
はシュードモナス・シリンゲ(Pseudomonas syringae)で
ある。
が開示されており、この方法によれば空気中に噴霧され
る小滴中に微生物が含まれている。使用されている微生
物は氷核形成を促進することが知られている種類のもの
である。その結果、通常の温度より可成り高い温度で雪
を製造することができる。このプロセスに有用な代表的
な微生物はシュードモナス(Pseudomonas)、更に詳しく
はシュードモナス・シリンゲ(Pseudomonas syringae)で
ある。
このプロセスをいかなる規模でも使用しようとすると、
多量の微生物を必要とすることは明白である。更に、微
生物は、その貯蔵、取扱及び運搬輸送を容易にするため
に、乾燥形態で得るのが望ましい。
多量の微生物を必要とすることは明白である。更に、微
生物は、その貯蔵、取扱及び運搬輸送を容易にするため
に、乾燥形態で得るのが望ましい。
氷核形成活性をもつ微生物の生長条件は当業界で知られ
ている。例えばMaki及びWilloughbyのBacteria as Biog
enic Sources of Freezing Nuclei,j.Applied Meteorgy
17,1049〜1053頁には、シュードモナス・シリンゲのよ
うな微生物を20℃より低い温度、即ち５℃でKoserクエ
ン酸液体培地(citrate broth)で生長させることが記載
されている。更に、２０℃より高い温度で培養すると、
生成される氷核は非常に少なくなる。
ている。例えばMaki及びWilloughbyのBacteria as Biog
enic Sources of Freezing Nuclei,j.Applied Meteorgy
17,1049〜1053頁には、シュードモナス・シリンゲのよ
うな微生物を20℃より低い温度、即ち５℃でKoserクエ
ン酸液体培地(citrate broth)で生長させることが記載
されている。更に、２０℃より高い温度で培養すると、
生成される氷核は非常に少なくなる。
前記の文献は、回収方法に関する限り、ホルマリンで処
理された濃厚培養体を凍結乾燥することが記載されてい
るが、詳細は記載されていない。
理された濃厚培養体を凍結乾燥することが記載されてい
るが、詳細は記載されていない。
別の文献、即ちKoxloff,Schofield及びLuteのIce Nucle
ating Activity of Pseudomonas syringae and Erwinia
herbicola,J.Bacter.153,222〜231頁(1983)には、pHが
約7.0のトリプトン−酵母エキス−グリセロール培地上
で微生物を生長させている。この文献では、微生物は乾
燥状態では回収されておらず、懸濁液の状態で直接、活
性のテストをしている。この氷核形成活性は懸濁液中で
は安定でなく、一夜で活性が低下することが認められて
いる。
ating Activity of Pseudomonas syringae and Erwinia
herbicola,J.Bacter.153,222〜231頁(1983)には、pHが
約7.0のトリプトン−酵母エキス−グリセロール培地上
で微生物を生長させている。この文献では、微生物は乾
燥状態では回収されておらず、懸濁液の状態で直接、活
性のテストをしている。この氷核形成活性は懸濁液中で
は安定でなく、一夜で活性が低下することが認められて
いる。
前記微生物の大量生産に前記した公知の方法を用いた場
合には所望の氷核形成活性のものは得られない。発酵に
よって発酵懸濁液中に高活性を生成しても、大量の材料
を乾燥する間に活性の大半が失われてしまう。この結果
は、前記方法が商業的な量の微生物を妥当なコストで製
造することのできないプロセスであることを示してい
る。
合には所望の氷核形成活性のものは得られない。発酵に
よって発酵懸濁液中に高活性を生成しても、大量の材料
を乾燥する間に活性の大半が失われてしまう。この結果
は、前記方法が商業的な量の微生物を妥当なコストで製
造することのできないプロセスであることを示してい
る。
前記の需要に応えるために、氷核形成活性(INA)の大部
分を保存する、氷核形成微生物の回収方法が提供され
た。この方法は米国特許第4,706,463号明細書(1987年11
月17日発行）に記載されている。前記の方法では、最初
に培地を冷却し、そして濃縮する。濃縮した後、濃縮体
を寒剤液体中へ運ぶことによって培地を凍結させる。次
に、こうして得られるペレットを凍結乾燥する。
分を保存する、氷核形成微生物の回収方法が提供され
た。この方法は米国特許第4,706,463号明細書(1987年11
月17日発行）に記載されている。前記の方法では、最初
に培地を冷却し、そして濃縮する。濃縮した後、濃縮体
を寒剤液体中へ運ぶことによって培地を凍結させる。次
に、こうして得られるペレットを凍結乾燥する。
前記の米国特許明細書に記載の方法は、その運転が非常
に高価である。大量の高価な寒剤液体を必要とする。更
に、凍結乾燥工程は、望ましい水準よりも高価になる。
従って、本発明の目的は、従来公知の寒剤液体−凍結乾
燥方法に代わる方法として、より安価な物を提供するこ
とにある。
に高価である。大量の高価な寒剤液体を必要とする。更
に、凍結乾燥工程は、望ましい水準よりも高価になる。
従って、本発明の目的は、従来公知の寒剤液体−凍結乾
燥方法に代わる方法として、より安価な物を提供するこ
とにある。
本発明は、氷核形成活性をもつ微生物を発酵培地から回
収する方法を提供する。本発明方法は、従来法と同じ冷
却工程と濃縮工程とを含んでいるが、続いて濃厚体を或
る条件下で噴霧乾燥する。すなわち、本発明によれば、
本発明方法は (a)前記の培地を１５℃以下の温度にする工程、 (b)温度を１５℃以下に維持しながら前記微生物の濃厚
体（好ましくは水分含有量15〜27%)を形成する工程、及
び (c)生成物の温度を５０℃未満に維持しながら前記の濃
厚体を噴霧乾燥する工程 からなる。
収する方法を提供する。本発明方法は、従来法と同じ冷
却工程と濃縮工程とを含んでいるが、続いて濃厚体を或
る条件下で噴霧乾燥する。すなわち、本発明によれば、
本発明方法は (a)前記の培地を１５℃以下の温度にする工程、 (b)温度を１５℃以下に維持しながら前記微生物の濃厚
体（好ましくは水分含有量15〜27%)を形成する工程、及
び (c)生成物の温度を５０℃未満に維持しながら前記の濃
厚体を噴霧乾燥する工程 からなる。
本発明方法は、微生物を含有する任意の懸濁液を乾燥し
た後で、氷核形成活性（ＩＮＡ）を保持することができ
る。前記のとおり、これらの微生物の発酵方法は当業界
において周知である。
た後で、氷核形成活性（ＩＮＡ）を保持することができ
る。前記のとおり、これらの微生物の発酵方法は当業界
において周知である。
特に好ましい方法は、特開昭63-102672号公報に記載さ
れている。更に、この型の微生物の発酵方法の改良は特
願昭62-323063号及び欧州特許出願第63-49913号に記載
されている。
れている。更に、この型の微生物の発酵方法の改良は特
願昭62-323063号及び欧州特許出願第63-49913号に記載
されている。
本発明によって、氷核形成活性を有する任意の微生物を
回収することができる。適当な微生物としては、シュー
ドモナス例えばシュードモナス・シリンゲ・シュードモ
ナス・フルオルセンス(P.fluorscens)、シュードモナス
・コロナファシエンス(P.coronafaciens)、及びシュー
ドモナス・ピシ(P.pisi)を挙げることができる。本発明
で有用な他の微生物としては、エルウィニア・ヘルビコ
ラ(Erwinia herbicola)を挙げることができる。現在の
ところ好ましい微生物はシュードモナス・シリンゲATCC
53,543（米国メリーランドのAmerican Type Culture C
ollectionにブタペスト条約に従って1986年９月23日か
ら寄託されている）である。
回収することができる。適当な微生物としては、シュー
ドモナス例えばシュードモナス・シリンゲ・シュードモ
ナス・フルオルセンス(P.fluorscens)、シュードモナス
・コロナファシエンス(P.coronafaciens)、及びシュー
ドモナス・ピシ(P.pisi)を挙げることができる。本発明
で有用な他の微生物としては、エルウィニア・ヘルビコ
ラ(Erwinia herbicola)を挙げることができる。現在の
ところ好ましい微生物はシュードモナス・シリンゲATCC
53,543（米国メリーランドのAmerican Type Culture C
ollectionにブタペスト条約に従って1986年９月23日か
ら寄託されている）である。
本発明による微生物の回収方法によれば、高価でなく、
操作の容易な方法が提供されると同時に、乾燥によるＩ
ＮＡの欠損は許容できる程度である。本発明方法によれ
ば、微生物の温度は、工程の間に実用的である範囲に低
く維持することが重要である。現在のところ好ましい方
法は、発酵培地温度をまず１５℃未満に降下させること
である。次に、温度を１５℃未満に維持しながら、重量
濃度好ましくは15〜27％、より好ましくは２２％の乾燥
固体に濃縮する。
操作の容易な方法が提供されると同時に、乾燥によるＩ
ＮＡの欠損は許容できる程度である。本発明方法によれ
ば、微生物の温度は、工程の間に実用的である範囲に低
く維持することが重要である。現在のところ好ましい方
法は、発酵培地温度をまず１５℃未満に降下させること
である。次に、温度を１５℃未満に維持しながら、重量
濃度好ましくは15〜27％、より好ましくは２２％の乾燥
固体に濃縮する。
噴霧乾燥の前の培地の濃縮は任意の通常の方法例えば濾
過又は遠心で行うことができる。固体ボウル遠心又は円
板ボウル連続遠心を用いることができる。
過又は遠心で行うことができる。固体ボウル遠心又は円
板ボウル連続遠心を用いることができる。
本発明によれば、生成物の温度が５０℃を越えないよう
に、濃縮培地を噴霧乾燥する。生成物の温度をそれより
も高く維持すると、後述する比較例４に示すように、ほ
とんどの発酵ＩＮＡが失われる。生成物を維持する温度
を下げると、生成物の乾燥がより遅くなり、従って、噴
霧乾燥装置の処理量が低下する。従って、好ましい温度
範囲は30〜50℃である。
に、濃縮培地を噴霧乾燥する。生成物の温度をそれより
も高く維持すると、後述する比較例４に示すように、ほ
とんどの発酵ＩＮＡが失われる。生成物を維持する温度
を下げると、生成物の乾燥がより遅くなり、従って、噴
霧乾燥装置の処理量が低下する。従って、好ましい温度
範囲は30〜50℃である。
この温度に感受性の生成物を噴霧乾燥するのに成功した
ことは驚くべきことである。従来法の凍結乾燥実験で
は、生成物の温度を２５℃未満、より好ましくは１５℃
未満に維持すべきことが分かっていた。噴霧乾燥装置で
生成物の温度をこのように低温に維持すると、乾燥の生
産性が低すぎて魅力がなくなる。この生成物を30℃〜50
℃の乾燥温度にさらしてもＩＮＡを維持することは特に
驚くべきことである。
ことは驚くべきことである。従来法の凍結乾燥実験で
は、生成物の温度を２５℃未満、より好ましくは１５℃
未満に維持すべきことが分かっていた。噴霧乾燥装置で
生成物の温度をこのように低温に維持すると、乾燥の生
産性が低すぎて魅力がなくなる。この生成物を30℃〜50
℃の乾燥温度にさらしてもＩＮＡを維持することは特に
驚くべきことである。
任意の通常の噴霧乾燥装置を用いて本発明を実施するこ
とができる。代表的な噴霧乾燥装置では、大量のガスを
含む部屋の中で、乾燥すべき生成物を小滴の形で噴霧す
る。ガスの入口温度及び乾燥すべき生成物の流速をコン
トロールして、すでに確立した方法を用いて望まし生成
物温度を提供する。
とができる。代表的な噴霧乾燥装置では、大量のガスを
含む部屋の中で、乾燥すべき生成物を小滴の形で噴霧す
る。ガスの入口温度及び乾燥すべき生成物の流速をコン
トロールして、すでに確立した方法を用いて望まし生成
物温度を提供する。
濃縮した培地は、通常の方法を用いて、噴霧乾燥器中に
噴霧（アトマイズ）する。例えば、圧力ノズル、２つの
流体ノズル及び遠心円板を用いることができる。部屋内
のガスは便利には空気であることできるが、その他の別
のガス例えば窒素であることができる。生成物は、公知
の方法例えばサイクロンコレクターを用いて集めること
ができる。噴霧乾燥の詳細については、Perry及びChilt
on編、Chemical Engineers'Handbook,第５版、28〜50頁
以降(McGraw Hill Book社、1973年）を参照されたい。
噴霧（アトマイズ）する。例えば、圧力ノズル、２つの
流体ノズル及び遠心円板を用いることができる。部屋内
のガスは便利には空気であることできるが、その他の別
のガス例えば窒素であることができる。生成物は、公知
の方法例えばサイクロンコレクターを用いて集めること
ができる。噴霧乾燥の詳細については、Perry及びChilt
on編、Chemical Engineers'Handbook,第５版、28〜50頁
以降(McGraw Hill Book社、1973年）を参照されたい。
以下の実施例において、ＩＮＡは通常の技術で計算し
た。ＩＮＡの測定は、パラフィン被覆アルミニウムホイ
ル上に複数の微生物含有水液滴（10μ）を置き、この
ホイルを定温浴中に置いて−５℃に維持して行った。こ
の操作の詳細は、例えばVali,Quantitative Evaluation
of Experimental Results on the Heterogenous Freez
ing of Sypercooled Liquids,j.Atoms Sci.,28,402〜40
9(1971)に記載されている。以下の実施例で報告したＩ
ＮＡは、乾燥微生物１ｇ当りの氷核形成部位の数であ
る。本発明の目的に対して、乾燥することなく発酵器か
ら直接サンプリングしたサンプルを用いてＩＮＡを測定
した。従って、これを「発酵器ＩＮＡ」と称する。回収
された乾燥生成物のＩＮＡは「回収ＩＮＡ」と称する。
た。ＩＮＡの測定は、パラフィン被覆アルミニウムホイ
ル上に複数の微生物含有水液滴（10μ）を置き、この
ホイルを定温浴中に置いて−５℃に維持して行った。こ
の操作の詳細は、例えばVali,Quantitative Evaluation
of Experimental Results on the Heterogenous Freez
ing of Sypercooled Liquids,j.Atoms Sci.,28,402〜40
9(1971)に記載されている。以下の実施例で報告したＩ
ＮＡは、乾燥微生物１ｇ当りの氷核形成部位の数であ
る。本発明の目的に対して、乾燥することなく発酵器か
ら直接サンプリングしたサンプルを用いてＩＮＡを測定
した。従って、これを「発酵器ＩＮＡ」と称する。回収
された乾燥生成物のＩＮＡは「回収ＩＮＡ」と称する。
以下、実施例によって本発明を具体的に説明する。
例１ マンニトールと酵母エキスと硫酸マグネシウムとを含む
栄養培地と含有する寒天板上にシュードモナス・シリン
ゲ(P.syringae)ATCC No.53543を筋状に塗布した。２６
℃で４８時間後、５つの板を用い、同じ培地を含む１０
発酵器に播種した。
栄養培地と含有する寒天板上にシュードモナス・シリン
ゲ(P.syringae)ATCC No.53543を筋状に塗布した。２６
℃で４８時間後、５つの板を用い、同じ培地を含む１０
発酵器に播種した。
２６℃で１２時間後、この液体種を用い、下記の第１表
に記載のように、100発酵培地を播種した。
に記載のように、100発酵培地を播種した。
発酵温度を２１℃にコントロールした。発酵の際に、４
Ｎ硫酸及び２Ｎ水酸化ナトリウムでpHをコントロールし
た。pHが6.6に近づいた場合には酸を添加し、pHが5.6に
近づいた場合には塩基を加えた。溶解酸素は、３０％飽
和よりも高く維持した。発泡の制御に必要なので、発泡
防止剤を加えた。
Ｎ硫酸及び２Ｎ水酸化ナトリウムでpHをコントロールし
た。pHが6.6に近づいた場合には酸を添加し、pHが5.6に
近づいた場合には塩基を加えた。溶解酸素は、３０％飽
和よりも高く維持した。発泡の制御に必要なので、発泡
防止剤を加えた。
２４時間後に、細胞重量は１８ｇ乾燥細胞／に達し
た。発酵器ＩＮＡは1.51×10″であった。
た。発酵器ＩＮＡは1.51×10″であった。
発酵液を５℃に冷却し、その温度を５℃に維持しながら
遠心分離した。固体を集め、リン酸バッファー(pH7.0)
中で固体含量２０％に懸濁した。
遠心分離した。固体を集め、リン酸バッファー(pH7.0)
中で固体含量２０％に懸濁した。
窒素を用い、118℃で、実験室規模の噴霧乾燥器（米国
メリーランド州コロンビア、Niro製）の中へスラリーを
ポンプで送った。ポンプ速度は３０m/mimであり、出
口温度及び従って生成物温度は５０℃であった。回収Ｉ
ＮＡは0.57×10″であった。
メリーランド州コロンビア、Niro製）の中へスラリーを
ポンプで送った。ポンプ速度は３０m/mimであり、出
口温度及び従って生成物温度は５０℃であった。回収Ｉ
ＮＡは0.57×10″であった。
例２ 噴霧乾燥の際の最大生成物温度を約４１℃とすること以
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を３
０℃とし、ポンプ速度を２０m/minとすることによっ
て達成した。回収ＩＮＡは1.29×10″であった。
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を３
０℃とし、ポンプ速度を２０m/minとすることによっ
て達成した。回収ＩＮＡは1.29×10″であった。
例３ 噴霧乾燥の際の最大生成物温度を約３６℃とすること以
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を８
０℃とし、ポンプ速度を２５m/minとすることによっ
て達成した。回収ＩＮＡは1.51×10″であった。発酵器
ＩＮＡも同じであった。
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を８
０℃とし、ポンプ速度を２５m/minとすることによっ
て達成した。回収ＩＮＡは1.51×10″であった。発酵器
ＩＮＡも同じであった。
例４ 本例は比較例である。
噴霧乾燥の際の最大生成物温度を約６８℃とすること以
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を１
１８℃とし、ポンプ速度を７m/minとすることによっ
て達成した。回収ＩＮＡは0.13×10″であった。これは
発酵器ＩＮＡの１０％に足りない。
外は前記例１の操作を繰返した。これは、ガス温度を１
１８℃とし、ポンプ速度を７m/minとすることによっ
て達成した。回収ＩＮＡは0.13×10″であった。これは
発酵器ＩＮＡの１０％に足りない。
Claims (1)
- 【請求項１】氷核形成活性をもつ微生物を発酵培地から
回収する方法であって、 （ａ）前記の培地を15℃以下の温度にする工程、 （ｂ）温度を15℃以下に維持しながら前記微生物の濃厚
体を形成する工程、及び （ｃ）生成物の温度を50℃未満に維持しながら前記の濃
厚体を噴霧乾燥することにより氷核形成活性を有する乾
燥生成物を得る工程 を含んでなる、前記の回収方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US16459188A | 1988-03-07 | 1988-03-07 | |
| US164591 | 1988-03-07 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01285186A JPH01285186A (ja) | 1989-11-16 |
| JPH0630568B2 true JPH0630568B2 (ja) | 1994-04-27 |
Family
ID=22595179
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1053066A Expired - Lifetime JPH0630568B2 (ja) | 1988-03-07 | 1989-03-07 | 氷核形成活性をもつ微生物の回収方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0332023B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0630568B2 (ja) |
| KR (1) | KR890014726A (ja) |
| AT (1) | ATE92520T1 (ja) |
| AU (1) | AU608419B2 (ja) |
| CA (1) | CA1297824C (ja) |
| DE (1) | DE68907954T2 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5153134A (en) * | 1987-03-05 | 1992-10-06 | Genencor International, Inc. | Fermentation of microorganisms having ice nucleation activity using a temperature change |
| US5223412A (en) * | 1991-02-21 | 1993-06-29 | Genencor International, Inc. | Cell-free and whole cell ice nucleators and process for their production |
| AU659645B2 (en) * | 1991-06-26 | 1995-05-25 | Inhale Therapeutic Systems | Storage of materials |
| KR960014623B1 (ko) * | 1993-07-27 | 1996-10-19 | 주식회사 태평양 | 신규의 빙핵형성 미생물 변이주 및 이를 이용한 눈 또는 얼음의 제조방법 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4706463A (en) | 1986-09-23 | 1987-11-17 | Eastman Kodak Company | Recovery of microorganism having ice nucleating activity |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0063438A1 (en) * | 1981-04-11 | 1982-10-27 | The Scottish Milk Marketing Board | Production of powder containing bacteria and product thereof |
-
1988
- 1988-08-18 CA CA000575118A patent/CA1297824C/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-02-28 EP EP89103483A patent/EP0332023B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-02-28 DE DE89103483T patent/DE68907954T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-02-28 AT AT89103483T patent/ATE92520T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-03-07 JP JP1053066A patent/JPH0630568B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1989-03-07 KR KR1019890002767A patent/KR890014726A/ko not_active Application Discontinuation
- 1989-03-07 AU AU31061/89A patent/AU608419B2/en not_active Ceased
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4706463A (en) | 1986-09-23 | 1987-11-17 | Eastman Kodak Company | Recovery of microorganism having ice nucleating activity |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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